Расстройства суставов и ВНЧС - это группа из около 30 заболеваний человека, которые поражают мышцы суставов и окружающие ткани боль является основной причиной, по которой пациенты с ВНЧС до сих пор обращаются в больницу. Эффективного лечения боли в ВНЧС не существует из-за плохого понимания механизма боли. Чтобы исследовать механизм боли, мы разработали мышиную модель болевого ВНЧС с последующим анализом болевого поведения.
Оценка боли в исследованиях искусственной боли является довольно сложной задачей из-за внутренней изменчивости анализа поведения. Кроме того, различное лабораторное использование, разные протоколы для оценки боли затрудняют перекрестные ссылки между различными исследованиями. В этой статье JOE мы описали визуализированную версию одного анализа пламени, нити накала и задней силы для основной искусственной боли.
Эти протоколы предоставляют подробный метод для непосредственного применения и в сочетании с подходами для всесторонней оценки боли в ВНЧС. Они могут быть применены для оценки болевого поведения при различных состояниях боли оракулов, таких как аутогенная боль, ручка для ВНЧС, мышечная ручка и ручка для нейропатов. Для начала расположите мышь, находящуюся под наркозом, на операционную платформу, подготовьте стерильный инсулиновый шприц или иглу 31 калибра для введения КФА в височный нижнечелюстной сустав.
Накройте иглу оболочкой из полиэтиленовой трубки, оставив выступающим только два миллиметра кончика иглы, чтобы предотвратить глубокое введение. Затем пальпируйте скуловую дугу, чтобы найти височный нижнечелюстной сустав или место инъекции ВНЧС. Затем введите иглу в место инъекции, которое находится под задним концом скуловой дуги.
Медленно введите 10 микролитров КФА в капсулу ВНЧС и подождите не менее пяти секунд, прежде чем постепенно извлекать иглу. Для начала установите мышиную модель боли в ВНЧС с помощью внутрисуставной инъекции CFA. После того, как мышь полностью восстановится, поместите ограничивающую трубку в клетку для мышей не менее чем на один час в поведенческой комнате перед тестированием, чтобы акклиматизировать мышь к тестовой среде.
Затем включите совместимое программное обеспечение для измерения силой и откройте программу N-B-I-T-R-S-D-V 2.6 0.3. Теперь выберите подходящие варианты связи. Выберите сопровождаемый режим UDP, затем выберите правильный локальный IP-адрес и выполните поиск по IP-адресу и порту устройства, нажав на кнопку «Поиск».
Как только появятся целевой IP-адрес и целевой порт, нажмите «Открыть». Установите ось Y, нажав на 10 в диапазоне Y. Затем нажмите на set. Наконец, нажмите на «Приобретение».
Затем выберите только первый канал для синего графика и отключите другие каналы, не подключенные к устройству. Нажмите на воспроизведение, чтобы начать запись силы укуса. Теперь поместите мышь в пластиковую трубку объемом 50 миллилитров, модифицированную для свободного удержания мыши, и переместите пластину для укуса ко рту мыши.
Записывайте произвольное кусание в течение двух минут за сеанс. Затем нажмите на паузу, чтобы остановить запись, и нажмите на сохранение. Теперь ранжируйте данные во втором столбце файла Excel от максимального к минимальному, выберите пять первых значений амплитуды силы укуса для дальнейшего анализа.
Запишите значение первого канала из программы и вычтите или прибавьте его к пяти верхним значениям амплитуды силы укуса. Чтобы получить относительные значения силы укуса из этого анализа, возьмите среднее из этих пяти значений, чтобы определить среднюю относительную силу укуса для одной мыши. Мыши, получавшие CFA, показали значительное снижение относительной силы укуса в первый день после инъекции по сравнению с группой PBS с постепенным восстановлением с течением времени, процент изменения силы укуса значительно снизился у мышей, получавших CFA, в первый день с тенденцией к восстановлению к 12-му дню.
Для начала поместите клетку из проволочной сетки в клетку для мышей и приучайте мышей к поведенческой комнате по крайней мере за час до проведения тестовых процедур. Затем включите электронную испытательную машину фон Фрая. Чтобы измерить порог отрыва напора, нажмите максимум и установите единицу измерения на 500 граммов, что является произвольной единицей, установленной машиной.
Установите значение в ноль, чтобы начать запись прямо сейчас. Поместите мышей в клетку из проволочной сетки. Нанесите филамент фон фрая перпендикулярно области височно-нижнечелюстного сустава.
В качестве первого теста запишите величину силы, приложенной к нити накала, или интенсивность стимула в граммах, который запускает реакцию. Затем установите значение силы на экране равным нулю и подождите 10 секунд, пока мышь останется внутри клетки. Начните применять филамент снова и запишите, что порог вывода головки был значительно ниже у мышей, получавших CFA, в первый день по сравнению с исходным уровнем с последующим частичным восстановлением.
Со временем процентное изменение порога вывода головы заметно снизилось у мышей, получавших CFA, в первый день, а улучшение наблюдалось к 12-му дню.
