Используя непрерывную запись ЭЭГ и ЭКГ, цель исследования состоит в том, чтобы одновременно контролировать электрическую активность как в мозге, так и в сердце. Это обеспечивает платформу, позволяющую нам исследовать мультисистемный каскад событий, которые окружают сердечные аритмии, эпилептические припадки и, в конечном итоге, приводят к внезапной смерти. Эта система записи получает ЭЭГ и ЭКГ 24/7 от нескольких непристегнутых кроликов во время различных физиологических состояний и окружающих редких эпизодических событий.
Он обеспечивает непрерывную запись без необходимости непосредственного контроля, доступен по цене, предоставляет немедленные данные непосредственно исследователю и не требует замены батарей, принадлежащих третьей стороне. Разработка специально изготовленной проводной записывающей установки была создана для того, чтобы кролик мог свободно передвигаться в своей естественной среде обитания. Провода заключены в кожух, чтобы защитить их от укусов.
Таким образом, жгут проводов и туннелирование всех электродов под кожей позволяют вести непрерывную запись во время различных физиологических состояний. С помощью нашей системы мы собрали большое количество высококачественных данных, которые позволяют нам исследовать распространенность, субстрат и триггеры аномальной электрической активности в мозге и сердце. Это также позволяет нам оценить соответствие между нарушениями ЭЭГ и ЭКГ, которые могут привести к внезапной смерти.
Для начала приобретите дополнительный штекер для порта alon с вертлюгом, удерживающим девять предварительно подключенных проводов с каждой стороны. С помощью кусачек обрежьте провода до пяти сантиметров с меньшей поворотной стороны и снимите пять миллиметров проволочного покрытия с концов. Наденьте двухсантиметровый кусок маленькой термоусадочной трубки на каждый провод дополнительной вилки.
Тщательно пропаяйте провода. Для каждого провода наденьте термоусадочную трубку на паяные соединения. С помощью термофена сожмите трубку, чтобы надежно закрепить ее на месте.
Затем пропустите длинный кусок большой термоусадочной трубки над вилкой, сдвинув ее так, чтобы она охватывала всю длину пучка проводов. С большей поворотной стороны снимите пять миллиметров проволочного покрытия с конца каждого провода с помощью устройства для зачистки проволоки и наденьте кусок металлической оболочки длиной более 45 сантиметров на пучок проводов. Далее присоедините провода с большей стороны вертлюга к отрезанным электродным проводам.
Прикрепите небольшие термоусадочные трубки к каждому соединению и закрепите трубку на месте с помощью термофена. Теперь наденьте металлическую оболочку на только что подключенные провода и поверните ее. Натянув металлическую обшивку, отметьте расположение на нейлоновой обшивке для справки.
Затем наденьте кусок резиновой трубки диаметром 15 мм на нейлоновую оболочку и пучок проволоки длиной один сантиметр. Поместите трехсантиметровый кусок большой термоусадочной трубки на резиновую трубку и закрепите его. Добавьте два куска термоусадочной трубки длиной один сантиметр поверх нерастянутой металлической обшивки на расстоянии 20 и 24 сантиметра от пробки.
Для начала соберите все необходимые для процедуры жгуты проводов. После позиционирования кролика, находящегося под наркозом, сделайте четыре небольшие отметки с помощью стерильного маркера на кончике в предполагаемых местах размещения электродов на электрокардиограмме или ЭКГ. Сделайте продольный разрез размером от 2,5 до 3,5 сантиметров на правом боку кролика.
Используя гемостатики, выполните вентральную диссекцию для создания подкожного кармана, следя за тем, чтобы карман распространялся на четыре отмеченных места. Используя неигольчатый конец монофиламентного шовного материала 3-0, завяжите три набора хирургических узлов вокруг основания электрода ЭКГ. Пропустите иглу, прикрепленную к электроду ЭКГ, через подкожный карман и выйдите в соответствующем отмеченном месте.
Примените мягкое вытяжение, чтобы расположить электрод ЭКГ в отмеченном месте. Отпустите вытяжение и пальпируйте область, чтобы убедиться, что электрод остается на месте. Чтобы закрепить электрод, проденьте шов и иглу из мононити 3-О через кожу кролика, прилегающую к месту выхода электрода.
Протяните шов частично через кожу и завяжите стандартный хирургический узел. От разреза на боку кролика тупо рассекайте по направлению к нижнему углу лопаток и далее к основанию головы. После поворота кролика в положение лежа с помощью стерильного маркера на кончике поместите пять маленьких точек в предполагаемые места размещения электродов на электроэнцефалограмме или ЭЭГ.
Сделайте небольшой поперечный разрез на голове размером 1,5 сантиметра между передними частями основания ушей. Тупым образом рассекайте каудально и краниально от разреза до образования подкожного кармана. Вставьте большие щипцы в разрез на боку, прежде чем раздвинуть щипцы и приподнять кожу в месте, отмеченном для порта.
Использует шестимиллиметровый инструмент для пуансонной биопсии для создания круглого отверстия на отмеченном участке. Накрыв проволочную пробку пластиком или резиной, протолкните заглушку со стороны порта через отверстие, сделанное пуансонной биопсией. Далее прижмите кожу вниз к основанию порта, чтобы она была натянута.
Наденьте резиновую прокладку на порт и нажмите на нее, пока она не прилегнет к коже. Заправьте излишки проволоки в подкожный карман на спине и боку. Теперь аккуратно сведите кожу вместе и закройте все места разрезов с помощью простых прерывистых швов.
Нанесите акриловую смесь на внешнюю сторону порта, создав небольшой купол, который прилегает к коже. После того как акрил застынет, наложите стерильную марлю на место разреза на бок и неплотно оберните кролика ветеринарной пленкой. Проденьте жгут проводов через отверстие, расположенное в верхней части центральной клетки кролика.
Подключите разъемы DIN к соответствующему контрольному устройству и прикрепите втягивающий трос к верхней части клетки внутри клетки рядом с отверстием для жгута проводов. Удлините провод втягивающего кабеля с пластиковым зажимом на конце и прикрепите зажим к жгуту проводов в месте между двумя частями термоусадочной трубки. Наконец, подключите вилку на жгуте проводов к вилке на спине кролика и запишите сигнал с устройства мониторинга.
Стабильные сигналы ЭЭГ и ЭКГ были зарегистрированы у трехмесячного кролика с помощью хронически имплантированных электродов, которые сохранили свое положение без отторжения или инфицирования. Наблюдалось наблюдение за вариабельностью сердечного ритма и сердечными показателями с высоким разрешением каждые 30 минут. Сигналы ЭЭГ и ЭКГ, полученные во время груминга, продемонстрировали высокую стабильность сигнала, несмотря на движения кролика, сохраняя высокое качество сигнала для анализа.
Введение просудорожного препарата индуцировало отчетливые тета-всплески в затылочных отведениях ЭЭГ, которые регистрировались наряду с сигналами ЭКГ нормального синусового ритма. Более высокие дозы просудорожного препарата вызывали судороги, при этом ЭЭГ показывала преиктальные тета-всплески, хронические артефакты и сигналы иктального тонического периода. ЭКГ продемонстрировала аномалии зубца Т, свидетельствующие о гипоксии в течение иктального тонического периода, возвращаясь к преиктальной норме после судороги.
