Utilizzando registrazioni EEG ed ECG continue, l'obiettivo dello studio è monitorare simultaneamente l'attività elettrica sia nel cervello che nel cuore. Questo ci fornisce una piattaforma che ci consente di esaminare la cascata multisistemica di eventi che circondano le aritmie cardiache, le crisi epilettiche e, infine, che portano alla morte improvvisa. Questo sistema di registrazione acquisisce EEG ed ECG 24 ore su 24, 7 giorni su 7 da più conigli non trattenuti durante vari stati fisiologici e intorno a rari eventi episodici.
Facilita le registrazioni continue senza la necessità di supervisione diretta, è conveniente, fornisce dati immediati direttamente al ricercatore e non richiede la sostituzione di batterie di proprietà di terzi. Lo sviluppo di una configurazione di registrazione cablata su misura è stato costruito per facilitare il coniglio a muoversi liberamente nel suo ambiente naturale di stabulazione. I fili sono racchiusi per proteggerli dal morso.
Pertanto, il cablaggio e il tunneling di tutti gli elettrodi sotto la pelle consentono registrazioni continue durante vari stati fisiologici. Con il nostro sistema, abbiamo accumulato una grande quantità di dati di alta qualità che ci consentono di studiare la prevalenza, il substrato e i fattori scatenanti dell'attività elettrica anomala nel cervello e nel cuore. Ci consente inoltre di valutare la concordanza tra anomalie EEG ed ECG, che possono portare alla morte improvvisa.
Per iniziare, procurati la spina complementare per la porta alon con la girella che trattiene nove fili precollegati su ciascun lato. Usando un tronchese, taglia i fili a cinque centimetri sul lato girevole più piccolo e spela cinque millimetri del rivestimento del filo dalle estremità. Far scorrere un pezzo di due centimetri di piccolo tubo termoretraibile su ciascun filo della spina complementare.
Saldare accuratamente i fili. Per ogni filo, far scorrere il tubo termoretraibile sulle connessioni saldate. Utilizzando una pistola termica, restringere il tubo per fissarlo saldamente in posizione.
Quindi passare un lungo pezzo di tubo termoretraibile di grandi dimensioni sulla spina, facendolo scorrere per coprire l'intera lunghezza del fascio di fili. Sul lato girevole più grande, spelare cinque millimetri di rivestimento del filo dall'estremità di ciascun filo utilizzando uno spelafili e far scorrere un pezzo di guaina metallica lungo più di 45 centimetri sul fascio di fili. Quindi, collegare i fili dal lato più grande della girella ai fili dell'elettrodo tagliati.
Fissare un piccolo tubo termoretraibile su ciascuna connessione e utilizzare una pistola termica per fissare il tubo in posizione. Ora fai scorrere la guaina metallica sui fili appena collegati e ruota. Dopo aver allungato la guaina metallica, contrassegnare la posizione sulla guaina di nylon come riferimento.
Quindi far scorrere un pezzo di un centimetro di tubo di gomma di 15 millimetri di diametro esterno sulla guaina di nylon e sul fascio di fili. Posizionare un pezzo di tre centimetri di tubo termoretraibile di grandi dimensioni sopra il tubo di gomma e fissarlo. Aggiungere due pezzi di guaina termorestringente lunga un centimetro sulla guaina metallica non tesa a una distanza di 20 e 24 centimetri dalla spina.
Per iniziare, assemblare tutto il cablaggio necessario per la procedura. Dopo aver posizionato il coniglio anestetizzato, fare quattro piccoli segni utilizzando un pennarello sterile per la punta nei siti di posizionamento degli elettrocardiogrammi o ECG previsti. Fai un'incisione longitudinale di 2,5-3,5 centimetri sul fianco destro del coniglio.
Utilizzando gli emostatici, eseguire la dissezione ventralmente per creare una tasca sottocutanea, assicurandosi che la tasca si estenda fino alle quattro posizioni contrassegnate. Utilizzando l'estremità non dell'ago della sutura monofilamento 3-0, legare tre serie di nodi chirurgici attorno alla base dell'elettrodo ECG. Far passare l'ago collegato all'elettrodo ECG attraverso la tasca sottocutanea ed uscire nella posizione contrassegnata corrispondente.
Applicare una leggera trazione per posizionare l'elettrodo ECG nella posizione contrassegnata. Rilasciare la trazione e palpare l'area per verificare che l'elettrodo rimanga in posizione. Per fissare l'elettrodo, far passare la sutura e l'ago del monofilamento 3-O attraverso la pelle del coniglio adiacente al sito di uscita dell'elettrodo.
Tirare parzialmente la sutura attraverso la pelle e fare un nodo chirurgico standard. Dall'incisione sul fianco del coniglio, sezionare senza mezzi termini verso l'angolo inferiore delle scapole e poi alla base della testa. Dopo aver girato il coniglio in posizione prona, utilizzare un pennarello sterile per posizionare cinque piccoli punti nei siti di posizionamento dell'elettroencefalogramma o dell'elettrodo EEG previsti.
Fai una piccola incisione trasversale sulla testa di 1,5 centimetri tra le parti anteriori della base delle orecchie. Senza mezzi termini, sezionare caudalmente e cranialmente dall'incisione fino a formare una tasca sottocutanea. Inserire una pinza di grandi dimensioni nell'incisione sul fianco prima di aprire la pinza e sollevare la pelle nel sito contrassegnato per la porta.
Utilizza uno strumento per biopsia con punzone da sei millimetri per creare un foro circolare nel sito contrassegnato. Dopo aver coperto la spina del cavo con plastica o gomma, spingere il lato della spina della porta attraverso il foro praticato dalla biopsia del punzone. Quindi, premi la pelle fino alla base della porta in modo che sia tesa.
Posizionare una guarnizione di gomma sopra la porta e spingerla verso il basso finché non si trova a filo con la pelle. Infilare il filo in eccesso nella tasca sottocutanea sul retro e sul fianco. Ora unisci delicatamente la pelle e chiudi tutti i siti di incisione usando semplici punti interrotti.
Applicare una miscela acrilica all'esterno della porta, creando una piccola cupola che sigilla il sito della porta alla pelle. Dopo che l'acrilico si è solidificato, posizionare una garza sterile sul sito dell'incisione sul fianco e avvolgere liberamente il coniglio con un involucro veterinario. Passare il cablaggio attraverso un foro situato in alto al centro della gabbia del coniglio.
Collegare i connettori DIN al dispositivo di monitoraggio appropriato e fissare un cavo di avvolgimento alla parte superiore interna della gabbia vicino al foro per il cablaggio. Estendere il filo del cavo del divaricatore che ha una clip di plastica all'estremità e fissare la clip al cablaggio nella posizione tra i due pezzi di tubo termoretraibile. Infine, collegare la spina del cablaggio alla spina sul dorso del coniglio e registrare il segnale dal dispositivo di monitoraggio.
Segnali EEG ed ECG stabili sono stati registrati da un coniglio di tre mesi utilizzando elettrodi impiantati cronicamente che hanno mantenuto il loro posizionamento senza rigetto o infezione. È stato osservato che i dati ad alta risoluzione della variabilità della frequenza cardiaca e delle metriche cardiache si alternano ogni 30 minuti. I segnali EEG ed ECG acquisiti durante la toelettatura hanno dimostrato una robusta stabilità del segnale nonostante il movimento del coniglio mantenesse un'elevata qualità del segnale per l'analisi.
La somministrazione di farmaci pro-convulsivanti ha indotto distinti picchi theta nelle derivazioni EEG occipitali, che sono stati registrati insieme ai normali segnali ECG del ritmo sinusale. Dosi più elevate del pro-convulsivante hanno innescato convulsioni, con l'EEG che mostrava esplosioni preictali theta, artefatti cronici e segnali del periodo tonico ictale. L'ECG ha dimostrato anomalie dell'onda T indicative di ipossia durante il periodo tonico ictale, tornando alla normalità pre-ictale dopo la crisi.
