Abstract
Chemistry
Lignina é um dos biopolímeros mais prevalentes do planeta e um componente importante da biomassa lignocelulósica. Este polímero fenólico desempenha um papel vital de estrutural e proteção no desenvolvimento e na vida das plantas superiores. Embora os intrincados mecanismos regulação fortemente lignificação processos na vivo impactam da valorização industrial dos muitos produtos de origem vegetal, a comunidade científica ainda tem um longo caminho a percorrer para decifrá-las. Em um fluxo de trabalho de três passos simples, o protocolo de rotulagem dual apresentado permite estudos de bioimaging de ativamente lignifying zonas de tecidos vegetais. O primeiro passo consiste na incorporação metabólica de dois repórteres de químicas independentes, substitutos das duas monolignols nativos que dão origem a lignina G e H --unidades. Após incorporação crescente de polímeros de lignina, cada repórter então é especificamente rotulada com sua própria sonda fluorescente através de uma combinação sequencial de opaco SPAAC/CuAAC clique em reações. Combinado com autofluorescência de lignina, esta abordagem conduz à geração de mapas de localização de três cores de lignina na parede celular das plantas por microscopia de fluorescência confocal e fornece informações espaciais precisas sobre a presença ou ausência de ativo máquinas de lignificação na escala da fábrica de tecidos, células e camadas diferentes de parede celular.
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