Sammeln von Haarproben für Cortisol Haaranalyse bei Afroamerikanern

Zusammenfassung

Haar-Cortisol-Konzentration-Analyse stellt eine Alternative zur traditionellen Maßnahmen von Cortisol; Wissenschaftler müssen jedoch um Haarproben von Afro-Amerikaner zu erfassen, kulturell informiert und kompetent sein. Dieses Protokoll soll eine kulturell fundierte Technik sammeln Haarproben für Cortisol Analyse von Afro-Amerikaner zu demonstrieren.

Zusammenfassung

Das Hormon Cortisol wird in der Regel im Speichel, Serum oder Urinproben beurteilt. Vor kurzem wurde Cortisol aus Haaren, einschließlich des Menschen erfolgreich extrahiert. Der Vorteil der Haar-Cortisol-Konzentration ist, dass es reflektiert eine Retrospektive Darstellung der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren (HPA) Achse Funktion im Laufe der Zeit, ähnlich wie Hämoglobin A1C glykämische Kontrolle darstellt. Jedoch kann Haarproben zu erhalten, aufgrund der kulturellen Überzeugungen und Haarpflege Praktiken der Minderheit Teilnehmer schwierig sein. Z. B. möglicherweise Afro-Amerikaner ungern Proben zur Verfügung stellen. Darüber hinaus sind einige Forscher ausgebildet, Haarproben von Afro-Amerikaner zu sammeln. Der Zweck dieses Papiers ist ein kulturell fundierte Protokoll, um Forschern Haarproben von Afro-Amerikaner zu erhalten helfen, zu präsentieren. Um repräsentative Ergebnisse dieser Protokoll-Implementierung zu veranschaulichen, sind anonymisierte Daten aus Afro-Amerikaner, die in eine Community-basierte Studie zur chronischen Stress beteiligt waren vorhanden. Haar Praxis Präferenzen werden bewertet. Die Teilnehmer sind bequem gemacht, indem Bilder von Haarproben vor dem Schneiden der Haares. Die Single strain Twist und sanft Pull-Methode wird verwendet, um ca. 30-50 Strähnen aus dem hinteren Scheitel der Kopfhaut zu sammeln. Dieses Protokoll wird die Sammlung von Haarproben von Afroamerikanern deutlich verbessern.

Einleitung

Proben von Speichel, Blut oder Urin Cortisol Analyse hat prozessualen Herausforderungen und Teilnehmer eine größere Belastung, wie das Verfahren mehrere Speichelproben, Venenpunktion Muster oder 24-Stunden-sammelurin benötigt. Es ist eine einfache und akzeptable Alternative zur Verwendung von Speichel, Serum oder Urin Proben^1,2, Cortisol von Haarproben zu erhalten. Haar-Cortisol bietet eine Retrospektive Darstellung der Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren (HPA) Achse Funktion im Laufe der Zeit. Ca. 3 cm der Haare aus der Kopfhaut gesammelt ist gleich Cortisol Release für die Vergangenheit im Durchschnitt 3 Monate¹. Allerdings stoßen Forscher einzigartige Herausforderungen bei dem Versuch, Haarproben über verschiedene Bevölkerungsgruppen zu sammeln. Solche Herausforderungen gehören religiöse oder spirituelle Überzeugungen einschließlich Freilegung Haar (z.B.muslimische Frauen), als Heilige (indianische Gruppen) oder kulturelle Normen, die Haare mit Standards von Schönheit und Selbstbild zu verbinden.

Kopfhaar ist in der afroamerikanischen Kultur, insbesondere bei Frauen einen sehr persönlichen und wichtigen Aspekt ihrer Körper Bild^3,4. Weitere, historische Erfahrungen (z.B. die Tuskegee-Experimente) weiterhin Misstrauen in die Forschung Prozess⁵zu fördern. Einige afrikanische amerikanische Folklore und kulturellen Überzeugungen auch zufolge der Haarprobe in Ritualen verwendet werden könnte, die Schaden^6,7verursachen könnten. Forscher sollten mögliche Herausforderungen berücksichtigen, die sie in Studien gegenüberstellen können, wenn Afrikanische amerikanische Teilnehmer Haarproben aufgefordert werden.

Neben Fragen rund um Körperbild abweichen die spezifischen Techniken für die Erfassung und Handhabung Haarproben von Afro-Amerikaner, die von europäischen Amerikanern^6,7. Zum Beispiel Afro-Amerikaner möglicherweise gerade, dünn, lockig, kinky, grob, oder eine Kombination dieser Haar-Typen, jeder erfordern unterschiedliche Techniken zu sammeln und sichern ausreichend Haare Proben für die Verarbeitung. Neuere Untersuchungen zu den Proben der afrikanischen amerikanischen Teens⁸sowie multi-ethnischen Proben⁹, zeigte, dass Sammlung von Haar für Cortisol Füllstandmessung annehmbar unter afrikanischen amerikanischen Teilnehmer. Derzeit gibt es keine visuellen Trainingsverfahren entwickelt, um Forscher mit Geschick und kulturwissen Haarproben in Afro-Amerikaner zu sammeln. Der Zweck dieses Papiers ist ein kulturell fundierte Protokoll, um angemessene Haarproben von afroamerikanischen Teilnehmern erhalten Forscher helfen zu präsentieren. Diese Methode entwickelte sich unter sorgfältiger Berücksichtigung der physischen, psychosozialen und kulturellen Besonderheiten Sammlung von Haarproben aus afrikanischen amerikanischen Erwachsenen relevant. Bisher gibt es keine visuelle Methoden, diese Proben zu sammeln, und dieses Protokoll werden die erste begleiten diese Einzelheiten richtige Haare Musterkollektion von afrikanischen amerikanischen Erwachsenen. Um die repräsentativen Ergebnisse der Protokollimplementierung veranschaulichen, präsentieren wir anonymisierte Daten von Afro-Amerikaner, die eine Community-basierte Studie zur chronischen Stress beteiligt, die im Alter von 65 Jahre und älter waren. Sowohl männliche als auch weibliche Forschungsassistenten aus einer Vielzahl von rassischen Hintergründe kontaktiert potenzielle Teilnehmer aus einer Klinik generierte Liste und Flyer. Die primäre Ermittler, eine afroamerikanische Frau, sprach in Gemeindezentren und senior subventionierte Wohnungen Wohnungen für ältere Erwachsene Afro-Amerikaner über die Studie ist einschließlich einer Beschreibung der die Haare Erhebungsmethoden.

Protokoll

Die Studie von der Universität Krankenhäuser Cleveland Center institutionelle überprüfen Ärztekammer genehmigt wird, und das Protokoll folgt den Richtlinien der Teilnehmer Datenschutz und Sicherheit wie durch den Prüfungsausschuss.

1. bereiten Sie Teilnehmer für Haarprobe und Haar Sammlung Beispielfragen

1. Teilnehmer erklären Sie, dass der Haarprobe erhobenen ist weniger Haare als, die normalerweise in Bürsten jeden Tag von der Rückseite des Kopfes (hintere Eckpunkt) verloren geht. Sagen Sie, dass die Website für die Haarprobe durch umliegende Haar versteckt und deshalb nicht sichtbar nach der Entnahme des Teilnehmers ist. Informieren Sie die Teilnehmer, dass die Probe verwendet wird, um ein Hormon namens Cortisol im Haar^10,11messen.
2. Nehmen Sie das Beispielfoto und zeigen Sie die Teilnehmer, dass die Menge der Haare, die werden (30-50 Strähnen) gesammelt.
   Hinweis: Siehe Abbildung 1 Foto von einer Haarprobe.
3. Bitten Sie die Teilnehmer die Haar Pflege¹² Übungsfragen in Tabelle 1aufgeführt.

2. sammeln Sie die Haarprobe

1. Sagen Sie des Teilnehmers, dass die Probe in einem privaten Bereich hinter einer tragbaren Partition, Vorhang oder geschlossene Tür gesammelt werden. Versichern Sie die Teilnehmer, dass wenn sie eine Perücke oder Haarteil tragen, ihre Haare nicht in einem Bereich geschnitten wird wo andere sehen können. Messen Haarlänge von Kopfhaut zum Schluss ziehen das Haar sanft und straff.
2. Wenn das Haar ist kurz (weniger als 3 cm), folgen Sie die kurze Haare-Protokoll in Schritt 3 (Obwohl wenn das Haar weniger als 1 cm lang ist, die Stichprobe kann nicht gesammelt werden, und das Haar sollte im Idealfall mindestens 3 cm lang sein). Folgen Sie für das Haar länger als 6 cm die Langhaar-Protokoll in Schritt 4. Andernfalls mit dem nächsten Schritt weiter.
3. Sicherzustellen Sie, dass Materialien bereit sind, indem man die Haare schneiden Lieferungen (ein Blatt Alufolie, Geschäft Umschlag Salon Grade Schere, große und kleine Zahnkamm Abschied, Alkohol Preps, Maler Klebeband, permanent-Marker, non-Latex Handschuhe [optional] und Haare Clips)¹⁰ auf einer Fläche neben der Teilnehmer. Reinigen Sie die Schere und Kamm mit dem Alkohol-Prep-Pad vor Entnahme der Probe. Schneiden Sie eine 8 x 10" Blatt Alufolie für das Beispiel verwenden.
4. Non-Latex Handschuhe anziehen. Nehmen Sie den Kamm und teilen Sie das Haar horizontal entlang der hinteren Scheitelpunkt der Kopfhaut zwischen den Spitzen der Ohren.
5. Nehmen Sie einen Clip und bewegen Sie das Haar von der Oberseite des Bauteils zu, dann legen Sie einen anderen Clip an der Unterseite, ein 5 x 10 cm Rechteck zwischen den beiden Clips von losen Haare (etwa die Größe eines Kartenspiels Spielkarten) verfügbar zu machen.
6. Bitten Sie die Teilnehmer bevorzugen sie Verwendung eines breiten Zahn oder schmalen Kamm durch das 2-3" Rechteck des Haares. Bitten Sie die Teilnehmer, wie sie oder er die verbleibende Haare im Kamm verworfen haben möchten. Geben Sie die Haare im Kamm an dem Teilnehmer, oder, wenn (und nur) der Teilnehmer erklärt, dass es okay ist, entsorgen Sie die lose Haare, die verbleibende Haare aus der Wabe in einem Mülleimer entsorgen.
7. Fassen Sie etwa 30-50 Strähnen auf der rechten Seite des Rechtecks 2-3" und ziehen Sie und drehen Sie die Haare von der Kopfhaut in einer rollenden Bewegung zwischen den Fingern.
8. Stellen Sie sicher, dass die Probe möglichst nahe an der Kopfhaut wie möglich, aber weißt nicht schneiden die Kopfhaut gesammelt werden. Salon-Grade Schere verwenden und einen sauberen geraden Schnitt zu machen.
9. Fassen Sie die Haarprobe und sicherzustellen Sie, dass die Wurzelspitze vorsichtig entlang des Schnitts ausgerichtet ist.
10. Das Blatt Alufolie beimessen Sie das Haar durch Abkleben mit Klebeband Maler. Decken Sie nicht die Kopfhaut-Ende, und verwenden Sie nicht des Malers Band auf Haar, das ist gleich oder kürzer als 3 cm. Ort der lose Haare in der Mitte der Folie schneiden und Falten in ein Quadrat, um sicherzustellen, dass das Haar nicht aus der Folie fällt.
11. Nehmen Sie die Markierung und beschriften Sie die Kopfhaut Ende auf der Alufolie. Verwenden Sie vorgefertigte Barcode-Etiketten um zu legen auf die Folie und Umschlag.
12. Falte die Alu-Folie ohne Falten die Haare auf der Kopfhaut Ende Kopfteil (zerknittert und beugte sich Haare), zu verhindern legen Sie es im Geschäft Größe Umschlag und verschließen.
13. Beschriften Sie die Außenseite des Umschlags mit der Teilnehmer einzigartige Studie-Identifikations-Nummer, Datum und den Namen des primären Prüfers oder verwenden Sie ein Barcode-Etikett zu, sofern verfügbar.
14. Speichern Sie die Probe an einem trockenen Ort bei Raumtemperatur.

(3) Musterkollektion für kurze Haare (1-3 cm)

1. Führen Sie die Schritte 2.3 und 2.4.
2. Bitten Sie nach Abschied die Teilnehmer die trennten sich Haare in der Nähe der Kopfhaut zu halten. Schneiden Sie das Haar entlang der Teil, halten Sie das Haar straff mit Zeigefinger und Daumen Sie¹⁰.
3. Lose Haare in Folie und Falten Sie es sicher. Kleben Sie das Haar an der Folie nicht.
4. Führen Sie die Schritte 2.11 durch 2.14.

4. Musterkollektion für Langhaar (länger als 6 cm)

1. Teilen Sie das Haar von links nach rechts am hinteren Scheitel.
2. Verwenden Sie die haarclips die zusätzliche Haare zurück zu halten.
3. Erstellen Sie eine Wendung des Haares und halten Sie fest mit dem Zeigefinger und Daumen um nicht die Probe¹⁰Tropfen.
4. Machen Sie einen sauberen geraden Schnitt, so nah an der Kopfhaut wie möglich. Sammeln Sie 30-50 Strähnen.
5. Wenn der Teilnehmer dünnes Haar hat, dann schneiden Sie 2-3 kleine Flächen (im Abstand von 1 cm) über der hinteren Scheitelpunkt, die Website des Schnittes zu verbergen.
6. Führen Sie die Schritte 2.10 durch 2.14.

5. Probe Verarbeitung

1. Speichern Sie die Folie-Pakete mit der Haarprobe bei Raumtemperatur auf unbestimmte Zeit bis zur Analyse.
   Hinweis: Haare Cortisol ist extrem stabil in Haar und kann jahrelang gespeichert werden. In der Tat ist Cortisol in Haarproben von mumifizierten Überreste¹¹gemessen worden.
2. Analysieren Sie Haar Cortisol als zuvor veröffentlichten¹². Proben können über Nacht bei Raumtemperatur versandt werden.

Ergebnisse

In unserer Studie, einundzwanzig Afro-Amerikaner (Mittleres Alter = 75; SD = 6,9; 85 % weiblich) zugestimmt, teilzunehmen. Vier Teilnehmer (19 %) weigerten sich, um eine Haarprobe und zwei (9,5 %) konnte nicht finden Sie Beispiele, weil ihre Haare zu kurz war. Insgesamt 15 Haarproben wurden gewonnen und verarbeitet (Tabelle 2). Die Länge der die Haarproben, die verarbeitet wurden, reichten von 1 cm bis 4,8 cm. technische Probleme enthalten Proben waren schlecht ausgerich...

Diskussion

Wesentliche Schritte in der Haar-Sammlung-Protokoll gehören Bereitstellung anhand eines Beispiels wie viel Haare genommen werden wird, zeigt die Beispiel-Site (posterior Vortex), des einzigen Stamm Twist und ziehen Sie vorsichtig die Methode und die Sicherung der Probe mit des Malers Band Weg von der Ende der Kopfhaut. Von sanft drehen und ziehen die Probe, lockige Haar wird verlängert und die Kopfhaut Ende Ausrichtung beibehalten. Dies reduziert Labor Zeit benötigt, um die Kopfhaut enden, Maß und Schnitt die Probe a...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Salon grade scissors	Cricket	S-3 550	Carded Professional Hair Shear, 5.5 inch
Large tooth comb	Goody	No catalog number__Goody Stylista Rake Comb	Link to Company website  http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780
Small tooth comb	Goody	No catalog number_ Goody Start.Style.Finish. Link to company website http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780
Alcohol preps	Kendall Webcol Alcohol Preps	No catalog number. Kendall Webcol Alcohol Preps	https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps
Painter's tape	3M Scotch	ScotchBlue ORIGINAL Painter’s Tape	https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/
Permanent marker	Sharpie	Black Sharpie Fine Point	http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html
Non-latex gloves	Protégé	93997	Protege®Nitrile Powder-Free Examination Gloves http://aureliagloves.com/product/protege/
Hair clips	Goody	Goody Start.Style.Finish. Curl Clips	http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips
Envelope	Office Depo	330808	Office Depot® Brand Clasp Envelopes, 9" x 12", Brown, Box Of 100
Foil sheets	Choice	1229105	Box of 500 Sheets Food Service Interfolded Pop-up foil sheets
Pre-weighed 2 ml cryovial	Wheaton, Millville, NJ, USA	W985902
100% isopropanol	Spectrum	I1275 | 67-63-0
Liquid nitrogen	Ohio State Unversity Stores	Gas Cylinder Warehouse	http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx
Stainless steel ball bearing	McMasterCarr	9291K42	https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0
Specially milled aluminum cassettes	FisherScientific	Retsch 20.745.0001
HPLC grade methanol	FisherScientific	A452N1-19	https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129
Microcentrifuge tube	Eppendorf North America	22363352	https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212
Cortisol ELISA Kit	Salimetrics LLC, State College, PA, USA	1-3002 (5PK 1-3002-5)	https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit
Centtrifuge for the micorcentrifuge tube	Beckman Coulter	Microfuge 20 series	http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge