JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

Abstract

Genetics

مروج التقاط مرحبا c: عالية الاستبانة، وعلى نطاق الجينوم التنميط التفاعلات المروج

Published: June 28th, 2018

DOI:

10.3791/57320

1Nuclear Dynamics Programme, The Babraham Institute, Babraham Research Campus, 2IJC Building, Campus ICO-Germans Trias i Pujol, Josep Carreras Leukemia Research Institute, 3Departamento de Genética Molecular, Instituto de Fisiología Celular, Universidad Nacional Autónoma de México, 4Bioinformatics Group, The Babraham Institute, Babraham Research Campus, 5Department of Biological Science, Florida State University
* These authors contributed equally

منظمة ثلاثية الأبعاد للجينوم مرتبط بوظيفتها. على سبيل المثال، التحكم العناصر التنظيمية مثل القدرة على النسخي الزمانية التعبير عن الجينات المستهدفة من خلال الاتصال الجسدي، غالباً ما سد مسافات كبيرة (في بعض الحالات مئات من كيلوبس) الجينوم وتجاوز الجينات القريبة. الجينوم البشري المرافئ القدرة على 1 مليون المقدرة، الغالبية العظمى منها يكون معروف الأهداف الجينات. ومن ثم تعيين المناطق التنظيمية البعيدة للجينات المستهدفة أمر حاسم لفهم التحكم التعبير الجيني. قمنا بتطوير المروج التقاط مرحبا-ج (شارتر-ج) لتمكين الكشف عن الجينوم على نطاق المنظومة لمناطق التفاعل المروج البعيدة (المتحقق)، لكل من المروجين في تجربة واحدة. في شارتر-ج، هي على وجه التحديد أثري مكتبات C مرحبا معقدة للغاية لتسلسل منظم من خلال اختيار الهجين في الحل مع آلاف الطعم بيوتينيلاتيد الحمض النووي الريبي مكملة لينتهي من كافة الأجزاء المحتوية على مروج تقييد. ويهدف إلى تسلسلات المروج ثم سحب لأسفل وشركائها التفاعل المتكرر مثل القدرة وغيرها من العناصر التنظيمية المحتملة. بعد الفائق إقران نهاية التسلسل، يتم تطبيق اختبار إحصائية لكل جزء متصلة المروج تقييد تحديد الكبير المتحقق على مستوى جزء التقييد. وقد استخدمنا شارتر-C لتوليد أطلس التفاعلات المروج البعيدة المدى في عشرات من الإنسان وأنواع الخلايا الماوس. أسهمت هذه الخرائط إينتيراكتومي المروج إلى فهم أكبر لمراقبة التعبير الجيني الثدييات بتعيين المناطق التنظيمية المفترضة للجينات المستهدفة والكشف عن شبكات التفاعل المروج المكانية التفضيلية-المروج. هذه المعلومات أيضا له أهمية عالية لفهم الأمراض الوراثية البشرية، وتحديد الجينات الأمراض المحتملة، عن طريق ربط غير الترميز المرتبطة بالمرض تسلسل المتغيرات في أو بالقرب من تسلسلات تحكم للجينات المستهدفة.

Tags

136 3D HiCUP

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved