מודל עכבר של Insected רקמה רכה לחלוטין סרקומה עבור בדיקה (ניאו) שפיטה טיפולים

Francois X. Rwandamuriye; Breana  J. Weston; Terrance  G. Johns; W.  Joost Lesterhuis; Rachael  M. Zemek

doi:10.3791/60882

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Summary

בפרוטוקול זה, אנו מתארים מודל העכבר של כריתת כירורגית לא הושלמה של סרקומה של רקמה רכה עבור בדיקות (ניאו) שדון טיפולים.

Abstract

ניתוח הוא לעתים קרובות הטיפול הראשון עבור גידולים מוצקים רבים. עם זאת, התפרצויות מקומיות מתרחשות לעתים קרובות בעקבות הטיפול העיקרי הגידול, למרות הפסיקה או הניאו-שדון טיפולים. זה מתרחש כאשר שוליים כירורגי ללא מספיק גידול, וכתוצאה מכך תאים סרטניים שיורית. מנקודת מבט ביולוגית וחיסונית, ניתוח אינו אירוע null; סביבת הריפוי של הפצע ידוע כדי לגרום למסלולים הפרו-והאנטי-טוטגניים. כתוצאה מכך, דגמים פרה-קליניים לפיתוח תרופות שמטרתן למנוע התדרדרות מקומית צריך לשלב כריתת כירורגית כאשר בדיקות חדשות (ניאו) שדון טיפולים, כדי לדגמן את ההגדרות הקליניות בחולים שטופלו בניתוח.

כאן, אנו מתארים מודל העכבר של כריתת כירורגית שלא הושלמה של WEHI 164 סרקומה רקמה רכה המאפשר בדיקה של (ניאו) טיפולים והנמלה בקביעת תגובה ריפוי הפצע. במודל זה, 50% או 75% של הגידול מוסר, משאיר מאחורי רקמות סרטן באתרו כדי לדגמן מחלות שיורית גולמי לאחר הניתוח בסביבה הקלינית. מודל זה מאפשר טיפולים בדיקה בהקשר של ניתוח בעוד בהתחשב בתגובה ריפוי הפצע, אשר עשוי להשפיע על היעילות של הטיפול (ניאו) שדון טיפולים. כריתת כירורגית מלאה תוצאות לצמיחה מחודשת של הגידול בכל העכברים בהעדר טיפול שדון. הטיפול שדון עם המצור תוצאות מחסום לצמיחה מחודשת הגידול. מודל זה מתאים אפוא לבדיקת טיפולים בהקשר של ניתוח debulking ואת התגובה הקשורה שלה הפצע ריפוי והוא יכול להיות מורחב לסוגים אחרים של סרטן מוצק.

Introduction

ניתוח נשאר אפשרות הטיפול העיקרי עבור גידולים מוצקים רבים¹, כולל סרקומה של רקמה רכה²^,³. למרות שיפורים בטכניקות ניתוח סרטן, ושילובים עם (ניאו) שדון טיפולים, יש עדיין סיכון גבוה של התדרדרות סרטן גרורות בעקבות כריתת הגידול העיקרי⁴^,⁵. ב סרקומה רקמת רך, הישנות להתרחש במיוחד locoregionally, באתר של ניתוח, וכתוצאה מכך תחלואה מוגברת תמותה. בהגדרה הקלינית, זה יכול להיות קשה להשיג שוליים רחבים מספיק (למשל, עקב אילוצים אנטומיים), וכתוצאה מכך כריתת שלמים והחזרה הגידול הבאים⁶. לחץ כירורגי והתהליך הבא של ריפוי הפצע ידועים ליצור מיקרו מדכאים הגידול מיקרוסביבתי חיוביות להישנות הגידול⁷^,⁸. לכן, גילוי ופיתוח של טיפולים חדשים עבור סרקומה של רקמה רכה, בעיקר חיסוני, צריך לקחת באופן אידיאלי את התגובה הריפוי פצע כירורגי בחשבון.

המחקרים הקדם-קליניים ביותר עבור הטיפולים מתבצעים בתחילה באמצעות מודלים של העכבר בסינגנמית או xenotransplant שתלות, מבלי לשלב את הלחץ כירורגי תגובה ריפוי הפצע⁹^,¹⁰. לכן, פיתחנו את העכבר תת עורית מודל סרקומה של רקמה רכה המשלב ניתוח כירורגי שלם. WEHI 164 תאים פיברוסרקומה מחוסנת תת-עורי, ופעם גידולים מבוססים, אנו מסירים 50-75% הגידול הגורפת (איור 1A-E). גידולים מחדש בעקביות לצמוח מתוך הגידול שנותר. מודל זה מאפשר בדיקת שפיטה טיפולים תוך בהתחשב בהשפעה של לחץ כירורגי וריפוי הפצע. מודלים כירורגיים דומים של כריתה לא שלמה שימשו במספר מחקרים על ידי מספר קבוצות ומצאו להיות בתוקף ואפקטיבי¹¹^,¹²^,¹³. כאן, אנו מספקים תיאור מפורט של פרוטוקול זה.

Protocol

בעלי חיים ששימשו בניסויים אלה התקבלו ממרכז המשאבים בעלי חיים (פרת ', אוסטרליה המערבית). בעלי חיים שמרו בתנאים הסטנדרטיים ללא הפתוגן במכון הארי פרקינס לחקר הרפואה ביוריאסוסס נורת ' מתקן (פרת ', אוסטרליה המערבית). כל הניסויים בוצעו בעקבות הפרוטוקול שאושר על ידי המכון לאתיקה בבעלי חיים של הארי פרקינס. עכברים BALB/c של 8-12 שבועות של גיל שימשו ניסויים אלה. קו התאים של WEHI 164 פיברוסרקומה התקבל מ-CellBank אוסטרליה (ווסטמיד).

1. חיסונים של תאים

הכנת תאים ובעלי חיים
1. ודא ששורת התאים נשמרת במדיה המומלצת. לדוגמה, לשמור WEHI 164 תא קו בשנת הזיכרון ברוזוול פארק (RPMI) 1640 בינונית בתוספת עם 2 מ"מ L-גלוטמין, 10% סרום שור העובר, 20 מ"מ HEPES, 0.05 mM 2-mercaptoethanol, 100 U/mL פניצילין, ו 100 μg/mL סטרפטומיצין.
  הערה: בתאי המעבר לפחות 3 ועד 5 פעמים לאחר הסרתו מאחסון קריוגני. כדי להבטיח הכדאיות האופטימלית של התא, יש לפצל תאים כאשר הם בין 70-80% באמצעות החיבור. קווי הגידול תאים צריך להיבדק mycoplasma, כמו זיהום יכול לשנות את צמיחת התאים ולהשפיע על התגובה החיסונית ב vivo.
2. לגלח עכברים באגף הימני התחתון. באמצעות קוצץ המכונות
  הערה: עכברים BALB/c הנשי, הגילאים בין 8-12 שבועות, של משקל רגיל (16 -22 גרם) שימשו בניסוי זה.
3. ביום החיסונים, הקציר של WEHI 164 תאים כאשר 70-80% הקשר על ידי טריסיזציה.
  1. משלחים את מדיום התרבות מצלוחיות התרבות של רקמת הרקמה ולאחר מכן מוסיפים תמיסת פוספט סטרילית באגירה (1x PBS), כדי להסיר את העקבות הנותרים של סרום שור עוברי (FBS).
  2. . מבחנות של תרבות הרקמה הוסיפו 3 מ ל של 0.05% טריפסין (לבקבוקון T75) ולאחר מכן מערבולת הבקבוקון כך שכל המשטח של הבקבוקון עם התאים מכוסה בטריפסין.
  3. מודדקת את הבקבוקון ב 37 ° c, 5%₂ חממה עבור 3 דקות. בדוק את התאים באופן תקופתי, על ידי הקשה על צידי הבקבוקון כדי לראות אם תאים החוצה.
  4. הסר צלוחיות מאינקובטור של תרבות התא והוסף 5 מ ל של מדיה בתוספת FBS כדי לנטרל את טריפסין.
    הערה: אין להשאיר את התאים בטריפסין יותר מהדרוש, שכן הדבר עלול לגרום נזק לתאים ולהוביל ליכולת היכולת להתאים לתאים נמוכים.
  5. Pipet ההשעיה מספר פעמים כדי להשיג השעיה תא יחיד. העבר תא השעיה לצינור צנטריפוגה חרוט.
  6. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.
4. רחץ את התאים שלוש פעמים ב-1x PBS.
  1. השהה תאים מחדש ב-50 mL של PBS 1 x מעוקר ולשטוף את התאים על ידי השעיית תא ליטוף למעלה ולמטה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.
  2. ומשהה את התאים מחדש ב -15 מ ל. של ערוץ 1-אקס סטרילי רוחצים את התאים על ידי השעיית תא ליטוף למעלה ולמטה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.
  3. בדיוק 10 מ ל. של הערוץ החדש הסטרילי לשטוף את התאים כמו בשלב 1.1.4.2 ולהעביר כמות קטנה (כ 100 μL) של התא הבולם לצינור צנטריפוגה לספירה. גלולה בתאים על ידי ספינינג ב 350 x g עבור 3 דקות.
5. קבע את מספר הטלפון באמצעות שיטת ההדרה הכחולה של טריקון על-ידי שימוש בפעולת הומוציטוטומטר או במונה תאים אוטומטיים. השהה את התאים מחדש בערוץ 1 x מעוקר בריכוז של 5 x 10⁶ תאים/mL. . שמור על השעיית תא בקרח
  הערה: הכדאיות של תאים סרטניים צריך להיות שווה או מעל 80% כדי להבטיח גידול הגידול בגידולים.
חיסון תת עורי
1. לערבב את ההשעיה התא ביסודיות למלא מזרק עם המחט של 26 G עם 100 μL של השעיה התא (5 x 10⁵ תאים) סטרילי 1 x PBS. חזור על ערבול של תאים לפני טעינת המזרק הבא.
  הערה: לשמור על התאים בקרח במהלך ההליך כדי לשמור על יכולת הקיום.
2. רסן את העכבר כראוי, ומבטיח גישה לאגף הימני התחתון. . מתת-עורי את העכבר על האגף הימני התחתון
  הערה: ודא שהחיסון אינו נמצא בצפק על-ידי הרמת המחט מעט, שאמורה להיות גלויה מתחת לעור. גוש כמו בועה צריך להיווצר. מתחת לעור בעקבות החיסון
3. נטר עכברים כנדרש על ידי אישור האתיקה הישים ולבצע כריתת כירורגית כאשר הגידולים גדלו לגודל של כ 50 מ"מ².

2. כריתת כירורגית חלקית של הגידול

הערה: פרוטוקול זה דורש שני חוקרים; אחד עבור הליכים כירורגיים (מנתח), ואחר עבור ניטור העכבר (עוזר).

כיוונון כירורגי
1. ביום 12 פוסט החיסון, כאשר הגידולים הגיעו לגודל של כ 50 מ"מ², עכברים מינון עם 100 μl (0.1 מ"ג/ק"ג) של בופרנורפין ספורטינג ראגה בעורף של הצוואר, 30 דקות לפני הניתוח.
2. להגדיר את האזור כירורגי עם משטח חום מכוסה מעיל ספסל להגדיר חרוט האף עבור הרדמה. לעקר כלים כירורגיים לפני השימוש, ובין כל חיה באמצעות מעקר חרוז חום, המאפשר כלים להתקרר לפני השימוש. יש את הציוד הכירורגי הבאים נקי בהישג יד: כלורקסדין, ספוגית, גזה, ג'ל עיניים, שני מלקחיים מעוקל, מספריים, המוליך קליפ, מסיר קליפ, מילוי קליפ (איור 2A, 2b).
3. חמם את תא החימום עד 37 ° c והגדר משטח חום נוסף להתאוששות (איור 2ג). מניחים כלים מעקרים על משטח סטרילי כגון רפידות אוטוקלאויים.
רדמה
1. מניחים את העכבר בתא אינדוקציה ומייבשים את העכבר עם 4% isofלבין (4% ב-100% חמצן בקצב הזרימה של 1 L/min) עד קצב הנשימה מאט כ 60 נשימות לדקה (1 לשנייה) (זה בדרך כלל לוקח < 1 דקות).
  הערה: אל תשאירו את העכבר בחדר יותר מדי זמן שעלול לגרום לחנק ולמוות. יש רק עכבר אחד. מתחת להרדמה בכל פעם
2. להעביר את העכבר על משטח החום על השולחן הניתוח, למקם את העכבר עם אפו בקונוס האף ולשמור על מצב ההרדמה עם 3-4% isofלוריאן ב 100% חמצן בקצב הזרימה של 0.5 L/min. נטר את קצב הנשימה כדי להבטיח שעומק ההרדמה יישמר.
  הערה: המסייע חייב לפקח על הנשימה של העכבר לאורך הניתוח כדי להבטיח את רמת ההרדמה הנכונה נשמרת. הנמך את ריכוז ההרדמה אם הנשימה הופכת איטית מדי או מגדיל את הריכוז אם עומק ההרדמה שטחי מדי. אם העכבר מתחיל לנשום, להסיר את העכבר מחרוט האף, להקטין את הריכוז הרדמה, ולחכות עד הנשימה הנורמלי לפני הצבת על חרוט האף שוב.
3. בצע "צביטה בדיקה" ו "רפלקס המצמוץ בדיקה"¹⁴ כדי להבטיח כי העכבר מורדם לחלוטין לפני תחילת הניתוח.
  הערה: התנועה של חלק כלשהו של העכבר היא אינדיקציה כי העכבר אינו מורדם לחלוטין. על החיה לקבל מיד הרדמה נוספת על ידי הגברת הריכוז ההרדמה.
4. לכסות את עיני העכבר עם כמות קטנה של ג'ל אופטלמולוגי כדי למנוע יובש בעין.
ניתוח כירורגי (מנתח)
1. לנגב את האזור כירורגי 3 פעמים עם כלורהקאיצין אלכוהוליים. באמצעות מלקחיים וזוג מספריים, לעשות חתך 1 ס מ ישר לאורך הצד החלק השני, 3 מ"מ הרחק הגידול (איור 3a, 3b).
  הערה: סטנדרטיזציה החתך ל 1 ס מ בכל עכבר (באמצעות סרגל) מאפשר אפילו הערכה של ריפוי הפצע בין עכברים. איתור החתך 3 מ"מ הרחק מן הגידול מאפשר טיפול בלתי מוסרי בעקבות מוסר ללא דליפה מהפצע.
2. שימוש בפינצטה, למשוך את facia ואת רקמת שומן תת עורית בין הגידול לבין צפק. גידול תת עורית מחובר בדרך כלל לצד העור.
3. פתח את הפצע על ידי החזקת בעדינות את העור על הנושא הגידול בצד באמצעות מלקחיים, ו "להפוך" את הגידול כך שהוא נראה מחוץ (איור 3ג, 3d).
  הערה: החלק של הגידול להיות מעורפל צריך להיות הקרוב ביותר לפתח, יש מספיק עור כדי לסגור את הפצע. להיזהר לא לחתוך את העור בעת הסרת הגידול.
4. באמצעות זוג מספריים, לחתוך את קפסולת הגידול ממחצית להסיר, החל בבסיס הגידול הקרוב ביותר לפתח.
5. עבור 50% ניתוח בצובר, לחתוך באמצע הגידול. באמצעות מלקחיים מעוקל, לאסוף את הקטע של הגידול להיות מוסר (50%); לאסוף את כל שרידי האזור מעורפל.
6. עבור 75% debulk, לבצע 50% הגידול debulk כמו בחלק 2.3.5 לעיל. ואז לחתוך במחצית הנותרים 50% של הגידול וסקופ 25% של הגידול, באמצעות מלקחיים מעוקל כמתואר לעיל.
סגירת האתר הכירורגי
1. מניחים את הגידול הנותר בחזרה מתחת לעור, ושימוש מלקחיים, למשוך את מדפים העור יחד, קו את העור לאורך הפצע.
2. להחזיק את העור יחד 5 מ"מ מקצה הפצע, ולהשתמש בקליפים כירורגיים כדי לסגור את הפצע, החל בצד הקרוב ביותר מלקחיים. החלת פריטים רבים ככל הנדרש כדי להבטיח שרקמת הבסיס אינה חשופה. באופן כללי, שלושה עד ארבעה קליפים מוחלים עם מרווחים של 2 מ"מ בין קליפים.
  הערה: אם פריטים כלשהם אינם מוחלים היטב, הסר אותו באמצעות מסיר קליפ והחלף בקליפים חדשים.
שחזור של עכברים (עוזר)
1. הניחו לעכברים להתאושש על ידי הכנסתו לחדר החימום החם (37 ° c).
2. מניחים את כלוב העכבר על משטח החום. לנטר את העכברים בתא החימום עד שהם התאושש הרדמה (ער והליכה) ולאחר מכן להחזיר את העכברים בחזרה לכלוב. השאירו את הכלוב על משטח החימום למשך 10 דקות נוספות, עד שהעכברים יהפכו לפעילים יותר.
3. תנו לעכברים מזון רך ורטוב. לנטר את העכברים 1 שעה לאחר הניתוח להחלמה ולהבטיח שקליפים יישארו במקומם. ודא כי הכלוב הוא חצי על/מחצית משטח החום כדי לאפשר לבעלי חיים לווסת את הטמפרטורה העצמית בזמן ללא השגחה.
4. מינון עכברים עם 0.1 mg/ק"ג בופרנורפין (100 μl תת-עורי בתוך הצוואר), 6-8 שעות לאחר הניתוח (בסוף היום). הצג עכברים מוקדם בבוקר למחרת, ועכברים מינון שוב עם 0.1 mg/ק"ג בופרנורפין (100 μl תת-עורי בתוך העורף של הצוואר). תנו עוד מזון רטוב כנדרש.
5. נטר עכברים מדי יום. במשך שבעת הימים הבאים ניתן להסיר קליפים לאחר שבעה ימים באמצעות מסיר הקליפים.
שפיטה או טיפול בנאודון
1. לטפל בעכברים פרי-בשיתוף עם (ניאו) טיפול הפסיקה בכל זמן נתון, בהתאם לטיפול בריבית.
2. לדוגמה, להתייחס עכברים עם מנה אחת של 100 μg של anti-CTLA-4 intraperitoneally (כיתה) ביום 15 לאחר החיסון, או עם שלוש מנות של 200 μg anti-PD-1 כז ביום 15, 17 ו 19 לאחר החיסון.
שולטת ניסויית
1. בעת שימוש במודל זה כדי להעריך את ההשפעות של דלקת/הפצע ריפוי, לשקול שימוש בקבוצות הביקורת הבאות: 1) אין בקרת כירורגיה (הטיפולים עדיין ניתן לניהול intrאטומורתי); 2) שליטה בניתוח המנתח: חתך כירורגי נעשה בעור; הגידול הוא מניפולציות חשוף, אבל לא רקמת הגידול מוסר; הפצע סגור עם קליפים.

תוצאות

גידול בגודל של 50 mm² הוא גודל אידיאלי עבור debulk חלקי. הניתוח הכירורגי ללא שלמות של 50 mm² גידולים תוצאות ב 100% (n = 5) לצמיחה מחודשת של גידולים בהעדר הטיפול חיסוני שדון (איור 4א). הפעם הבאה השתמשו במודל כדי לבחון את הטיפול החיסוני שימוש בנוגדנים ...

Discussion

אנו מספקים פרוטוקול עבור מודל העכבר של כריתת כירורגית שלא הושלמה של סרקומה רקמת רך לבדוק טיפולים פרי-פעיל. אנו גם מתוקננת את החתך כירורגי כדי לאפשר הערכה של ריפוי הפצע בין עכברים בעקבות הטיפול.

הצבת הגידול היא חלק חשוב. בפרוטוקול הזה בחרתי מודל גידול תת עורי כדי לאפשר גישה כ?...

Disclosures

אין הגילויים.

Acknowledgements

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים מתוך גרב זה סרקומה! קרן, האוסטרלי, ניו זילנד האגודה סרקומה, לוקמיה לילדים & הקרן לחקר הסרטן ופילנתרופיה נצחית. W. J. L נתמך על ידי מלגת סימון לי ומלגת מחקר מבית החולים הלאומי לחקר הרפואה, ואת המועצה לסרטן WA.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
26 gauge 0.5 mL insulin syringe	Becton Dickinson, Australia	326769	None
2-Mercaptoethanol	Life Technologies Australia Pty Ltd	21985023	None
Anaestetic gas machine	Darvall Vet, Australia	SKU: 2848	None
Anti-CTLA-4	BioXcell, USA	BE0164	None
Anti-PD-1	BioXcell, USA	BP0273	None
Buprenorphine Hydrochloride Injection, 0.3mg/mL	RB healthcare UK Limited, UK	55175	Prescription order
Chlorhexidine Surgical Scrub 4%	Perigo Australia, Australia	CHL01449F(scrub	None
Fetal Bovine serum	CellSera, Australia	AU-FBS-PG	None
Forceps Fine 10.5 cm	Surgical house, Western Australia	CC74110	None
Forceps Fine 12 cm Serrated	Surgical house, Western Australia	CC74212	None
Forceps Halsted 14 cm	Surgical house, Western Australia	CD01114	None
Heating chamber	Datesand Ltd, UK	Mini-Thermacage	None
HEPES (1M)	Life Technologies Australia Pty Ltd	15630080	None
Isoflurane	Henry Schein Animal Health, Australia	SKU: 29405	Prescription order
Lubricating Eye Ointment	Alcon	n/a	None
Penicillin/streptomycin 1000X	Life Technologies Australia Pty Ltd	15140122	None
Phosphate Buffered Solution 10x	Life Technologies Australia Pty Ltd	70013-032	None
Reflex 7mm Clips	Able scientific, Australia	AS59038	None
Reflex 7mm Wound Clip Applicator	Able scientific, Australia	AS59036	None
Reflex Wound Clip Remover	Able scientific, Australia	AS59037	None
Rodent Qube Anesthesia Breathing Circuit	Darvall Vet, Australia	#7885	None
Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 Medium + L-glutamine	Life Technologies Australia Pty Ltd	21870092	None
Scissors Iris STR 11 cm	Surgical house, Western Australia	KF3211	None
Scissors Iris STR 9 cm	Surgical house, Western Australia	JH4209	None
Small Induction Chamber	Darvall Vet, Australia	SKU: 9630	None
TrypLE express 1x	Life Technologies Australia Pty Ltd	12604-021	None

References

Orosco, R. K., et al. Positive Surgical Margins in the 10 Most Common Solid Cancers. Scientific Reports. 8 (1), 5686 (2018).
Haas, R. L., et al. Perioperative Management of Extremity Soft Tissue Sarcomas. Journal of Clinical Oncology. 36 (2), 118-124 (2018).
Brennan, M. F., Antonescu, C. R., Moraco, N., Singer, S. Lessons learned from the study of 10,000 patients with soft tissue sarcoma. Annals of Surgery. 260 (3), 416-421 (2014).
Smith, H. G., et al. Patterns of disease relapse in primary extremity soft-tissue sarcoma. British Journal of Surgery. 103 (11), 1487-1496 (2016).
Uramoto, H., Tanaka, F. Recurrence after surgery in patients with NSCLC. Translational Lung Cancer Research. 3 (4), 242-249 (2014).
Stojadinovic, A., et al. Analysis of the prognostic significance of microscopic margins in 2,084 localized primary adult soft tissue sarcomas. Annals of Surgery. 235 (3), 424-434 (2002).
Krall, J. A., et al. The systemic response to surgery triggers the outgrowth of distant immune-controlled tumors in mouse models of dormancy. Science Translational Medicine. 10 (436), (2018).
Bakos, O., Lawson, C., Rouleau, S., Tai, L. H. Combining surgery and immunotherapy: turning an immunosuppressive effect into a therapeutic opportunity. Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 6 (1), 86 (2018).
Predina, J. D., et al. Characterization of surgical models of postoperative tumor recurrence for preclinical adjuvant therapy assessment. American Journal of Translational Research. 4 (2), 206-218 (2012).
Talmadge, J. E., Singh, R. K., Fidler, I. J., Raz, A. Murine models to evaluate novel and conventional therapeutic strategies for cancer. American Journal of Pathology. 170 (3), 793-804 (2007).
Khong, A., et al. The efficacy of tumor debulking surgery is improved by adjuvant immunotherapy using imiquimod and anti-CD40. BMC Cancer. 14, 969 (2014).
Broomfield, S., et al. Partial, but not complete, tumor-debulking surgery promotes protective antitumor memory when combined with chemotherapy and adjuvant immunotherapy. Cancer Research. 65 (17), 7580-7584 (2005).
Predina, J. D., et al. A positive-margin resection model recreates the postsurgical tumor microenvironment and is a reliable model for adjuvant therapy evaluation. Cancer Biology & Therapy. 13 (9), 745-755 (2012).
Tsukamoto, A., Serizawa, K., Sato, R., Yamazaki, J., Inomata, T. Vital signs monitoring during injectable and inhalant anesthesia in mice. Experimental Animals. 64 (1), 57-64 (2015).
Overwijk, W. W., Restifo, N. P. B16 as a mouse model for human melanoma. Current Protocols in Immunology. , (2001).
Predina, J., et al. Changes in the local tumor microenvironment in recurrent cancers may explain the failure of vaccines after surgery. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 110 (5), E415-E424 (2013).
Endo, M., Lin, P. P. Surgical margins in the management of extremity soft tissue sarcoma. Chinese Clinical Oncology. 7 (4), 37 (2018).
Liu, J., et al. Improved Efficacy of Neoadjuvant Compared to Adjuvant Immunotherapy to Eradicate Metastatic Disease. Cancer Discovery. 6 (12), 1382-1399 (2016).
Park, C. G., et al. Extended release of perioperative immunotherapy prevents tumor recurrence and eliminates metastases. Science Translational Medicine. 10 (433), (2018).
Tai, L. H., et al. A mouse tumor model of surgical stress to explore the mechanisms of postoperative immunosuppression and evaluate novel perioperative immunotherapies. Journal of Visualized Experiments. (85), e51253 (2014).
Gast, C. E., Shaw, A. K., Wong, M. H., Coussens, L. M. Surgical Procedures and Methodology for a Preclinical Murine Model of De Novo Mammary Cancer Metastasis. Journal of Visualized Experiments. (125), (2017).
Qiu, W., Su, G. H. Development of orthotopic pancreatic tumor mouse models. Methods in Molecular Biology. 980, 215-223 (2013).
Erstad, D. J., et al. Orthotopic and heterotopic murine models of pancreatic cancer and their different responses to FOLFIRINOX chemotherapy. Disease Models & Mechanisms. 11 (7), (2018).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

161 peri debulking

This article has been published

Video Coming Soon

Keep me updated:

Method Article