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Visualisation and Quantification of Intracellular Interactions of <em>Neisseria meningitidis</em> and Human &alpha;-actinin by Confocal Imaging

The Opc protein of Neisseria meningitidis (Nm, meningococcus) is a surface-expressed integral outer membrane protein, which can act as an adhesin and an ...

University of Bristol, UK

&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x76F8;&#x5173; (PR) &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x662F;&#x75C5;&#x539F;&#x653B;&#x51FB;&#x54CD;&#x5E94;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;PR &#x86CB;&#x767D;&#x53EF;&#x5206;&#x4E3A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x6839;&#x636E;&#x5176;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x5C5E;&#x6027;&#x3002;PR 4 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x5305;&#x62EC;&#x7C7B;&#x4E00;&#x548C;&#x4E8C;&#x51E0;&#x4E01;&#x8D28;&#x9176;&#x7C7B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x5206;&#x79BB;&#x57FA;&#x56E0; cDNA &#x5168;&#x957F;&#x51E0;&#x4E01;&#x8D28;&#x9176;&#x4ECE;&#x7389;&#x7C73;&#x4E0E;&#x516C;&#x5173;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684; PR 4 &#x5BB6;&#x5EAD;&#x51E0;&#x4E01;&#x8D28;&#x9176; II &#x7C7B;&#x5171;&#x4EAB;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x7684;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x548C;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x548C;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x771F;&#x83CC;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5B50;&#x6216;&#x4E32;&#x73E0;&#xFF0C;&#x771F;&#x83CC;&#x75C5;&#x83CC;&#x3001; &#x6BD2;&#x7D20;&#x589E;&#x52A0; ZmPR4 mRNA &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4ECE;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x53D1;&#x82BD;&#x80DA;&#x80CE;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x5404;&#x8282;&#x4E2D;&#x7684;&#x539F;&#x4F4D; mRNA &#x6742;&#x4EA4;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A; ZmPR4 mRNA &#x79EF;&#x7D2F;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x9996;&#x5148;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E0E;&#x75C5;&#x539F;&#x63A5;&#x89E6;&#x7684;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7C7B;&#x578B;&#x3002;ZmPR4 mRNA &#x79EF;&#x7D2F;&#x4E5F;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x785D;&#x9178;&#x94F6;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x8D77;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6FC0;&#x7D20;&#x8D64;&#x9709;&#x9178;&#x6216;&#x6C34;&#x6768;&#x9178;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x4F24;&#x4EBA;&#x3001; &#x6216;&#x4E0E;&#x8131;&#x843D;&#x9178;&#x6216;&#x9178;&#x7532;&#x916F;&#xFF0C;&#x6CBB;&#x7597;&#x7ED3;&#x679C; ZmPR4 mRNA &#x5728;&#x7389;&#x7C73;&#x53F6;&#x7247;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;ZmPR4 &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5728;&#x5927;&#x80A0;&#x6746;&#x83CC;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3001; &#x7EAF;&#x5316;&#x548C;&#x7528;&#x4E8E;&#x83B7;&#x53D6;&#x5177;&#x4F53;&#x786E;&#x8BA4; ZmPR4 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x591A;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x611F;&#x67D3;&#x771F;&#x83CC;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x7389;&#x7C73;&#x7EC4;&#x7EC7; ZmPR4 mRNA &#x79EF;&#x7D2F;&#x4F34;&#x968F;&#x76F8;&#x5E94;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5927;&#x91CF;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E86;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5BF9;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x7389;&#x7C73;&#x690D;&#x682A;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x6027;&#x9632;&#x536B;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

&#x771F;&#x83CC;&#x548C;&#x521B;&#x4F24;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; mRNA &#x5305;&#x542B;&#x7C7B;&#x4E8C;&#x51E0;&#x4E01;&#x8D28;&#x9176;&#x7684;&#x75C5;&#x7A0B;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; 4 (PR-4&#xFF09; &#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x7389;&#x7C73;&#x3002;

Pathogenesis-related (PR) proteins are plant proteins that are induced in response to pathogen attack. PR proteins are grouped into independent families based on their sequences and properties. The PR-4 family comprises class I and class II chitinases. We have isolated a full-length cDNA encoding a chitinase from maize which shares a high degree of nucleotide and amino acid sequence homology with the class II chitinases of the PR-4 family of PR proteins. Our results indicate that fungal infection, and treatment either with fungal elicitors or with moniliformin, a mycotoxin produced by the fungus Fusarium moniliforme, increase the level of ZmPR4 mRNA. In situ mRNA hybridization analysis in sections obtained from fungus-infected germinating embryos revealed that ZmPR4 mRNA accumulation occurs in those cell types that first establish contact with the pathogen. ZmPR4 mRNA accumulation is also stimulated by treatment with silver nitrate whereas the application of the hormones gibberellic acid or acetylsalicylic acid has no effect. Wounding, or treatment with abscisic acid or methyl jasmonate, results in accumulation of ZmPR4 mRNA in maize leaves. Furthermore, the ZmPR4 protein was expressed in Escherichia coli, purified and used to obtain polyclonal antibodies that specifically recognized ZmPR4 in protein extracts from fungus-infected embryos. Accumulation of ZmPR4 mRNA in fungus-infected maize tissues was accompanied by a significant accumulation of the corresponding protein. The possible implications of these findings as part of the general defence response of maize plants against pathogens are discussed.

Fungus- and wound-induced accumulation of mRNA containing a class II chitinase of the pathogenesis-related protein 4 (PR-4) family of maize.

Reli&eacute;es &agrave; la pathog&eacute;n&egrave;se des prot&eacute;ines (PR) sont des prot&eacute;ines v&eacute;g&eacute;tales qui sont induits en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;attaque de l&#39;agent pathog&egrave;ne. Les prot&eacute;ines PR sont regroup&eacute;s en familles ind&eacute;pendants bas&eacute;s sur leurs propri&eacute;t&eacute;s et de s&eacute;quences. La famille PR-4 compose de classe I et classe II chitinases. Nous avons isol&eacute; un ADNc pleine longueur codant une chitinase du ma&iuml;s qui partage un haut degr&eacute; d&#39;homologie de s&eacute;quence de nucl&eacute;otides et d&#39;acides amin&eacute;s avec la classe II chitinases de la famille PR-4 de prot&eacute;ines PR. Nos r&eacute;sultats indiquent que l&#39;infection fongique et le traitement, soit avec des &eacute;liciteurs fongiques analyse, une mycotoxine produite par le champignon Fusarium moniliforme, augmentent le niveau d&#39;ARNm de ZmPR4. Analyse par hybridation in situ ARNm dans les sections extraites d&#39;embryons en germination infect&eacute;es par le champignon a r&eacute;v&eacute;l&eacute; que l&#39;accumulation des ARNm de ZmPR4 se produit dans ces types de cellules qui d&#39;abord &eacute;tablissent un contact avec l&#39;agent pathog&egrave;ne. ZmPR4 l&#39;accumulation des ARNm est &eacute;galement stimul&eacute;e par un traitement au nitrate d&#39;argent, alors que l&#39;application de l&#39;acide gibb&eacute;rellique hormones ou acide ac&eacute;tylsalicylique n&#39;a aucun effet. Blessant, ou un traitement avec l&#39;acide abscissique ou jasmonate de m&eacute;thyle, entra&icirc;ne l&#39;accumulation d&#39;ARNm de ZmPR4 en feuilles de ma&iuml;s. En outre, la prot&eacute;ine ZmPR4 &eacute;tait exprim&eacute;e chez Escherichia coli, purifi&eacute;e et utilis&eacute;e pour obtenir des anticorps polyclonaux sp&eacute;cifiquement reconnu ZmPR4 en prot&eacute;ines extraits d&#39;embryons infect&eacute;es par le champignon. L&#39;accumulation des ARNm de ZmPR4 dans les tissus de ma&iuml;s infect&eacute;s par le champignon &eacute;tait accompagn&eacute;e d&#39;une importante accumulation de la prot&eacute;ine correspondante. Les auteurs discutent les implications possibles de ces r&eacute;sultats dans le cadre de la r&eacute;ponse de d&eacute;fense g&eacute;n&eacute;rale des plants de ma&iuml;s contre les agents pathog&egrave;nes.

Champignon-blessure induite et accumulation d&#39;ARNm contenant une chitinase II de classe de la prot&eacute;ine pathogenesis-related 4 (PR-4) famille de ma&iuml;s.

Pilz-und Wund-induzierte Akkumulation von mRNA, die eine Klasse-II-Chitinase der Pathogenese-related protein 4 (PR-4)-Familie von Mais.

Correlati a patogenesi (PR) proteine sono proteine vegetali che sono indotti in risposta all&#39;attacco di agenti patogeni. Le proteine PR sono raggruppate in famiglie indipendente basate sulle loro propriet&agrave; e sequenze. La famiglia PR-4 comprende classe I e classe II chitinases. Abbiamo isolato un full-length cDNA che codifica una chitinasi di granturco che condivide un alto grado di omologia di sequenza di nucleotidi e aminoacidi con la classe II chitinases della famiglia delle proteine PR PR-4. I nostri risultati indicano che l&#39;infezione fungina e trattamento con elicitori fungine o con moniliformin, una micotossina prodotta dal fungo Fusarium moniliforme, aumentare il livello di mRNA ZmPR4. Analisi di ibridazione in situ mRNA nelle sezioni ottenute da embrioni di germinazione fungo infetta ha rivelato che accumulo di mRNA di ZmPR4 si verifica in quei tipi di cella che in primo luogo stabilire un contatto con l&#39;agente patogeno. ZmPR4 accumulo di mRNA &egrave; stimolata anche da un trattamento con nitrato d&#39;argento considerando che l&#39;applicazione dell&#39;acido gibberellico ormoni o l&#39;acido acetilsalicilico non ha alcun effetto. Ferendo, o il trattamento con acido abscissico o Jasmonato di metile, si traduce in accumulo di mRNA ZmPR4 in foglie di mais. Inoltre, la proteina ZmPR4 era espresso in Escherichia coli, purificata e utilizzata per ottenere gli anticorpi policlonali che specificamente riconosciuto ZmPR4 in proteina estratti dal fungo infetta gli embrioni. Accumulo di mRNA di ZmPR4 nei tessuti mais fungo infetta &egrave; stato accompagnato da un significativo accumulo della proteina corrispondente. Vengono discusse le possibili implicazioni di queste scoperte come parte della risposta di difesa generale di piante di mais contro agenti patogeni.

Fungo e ferita indotta accumulo di mRNA contenente una chitinasi II classe della proteina correlati a patogenesi 4 (PR 4) famiglia di mais.

&#x7279;&#x7570;&#x7684; (PR) &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x653B;&#x6483;&#x3078;&#x306E;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x306B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PR &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PR 4 &#x5BB6;&#x65CF;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x3092;&#x69CB;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x30AD;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x3002;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x53CA;&#x3073;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x30AD;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC; PR &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; PR 4 &#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x5171;&#x6709;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x304B;&#x3089;&#x30AD;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577; cDNA &#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x771F;&#x83CC;&#x30A8;&#x30EA;&#x30B7;&#x30BF;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F; moniliformin&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x306E;&#x3072;&#x3053;&#x3070;&#x3048;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B3;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3; ZmPR4 mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;In situ mRNA &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x89E3;&#x6790;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x82BD;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x6700;&#x521D;&#x306B;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; ZmPR4 mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3; &#x30B8;&#x30D9;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B5;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x9178;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x306F;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x306A;&#x3044; ZmPR4 mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x785D;&#x9178;&#x9280;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8CA0;&#x50B7;&#x3082;&#x3057;&#x304F;&#x306F;&#x6CBB;&#x7642;&#x30A2;&#x30D6;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x9178;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B8;&#x30E3;&#x30B9;&#x30E2;&#x30F3;&#x9178;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3067;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x8449;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ZmPR4 mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ZmPR4 &#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x5927;&#x8178;&#x83CC;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3001;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x62BD;&#x51FA;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E; ZmPR4 &#x3092;&#x7279;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58; polyclonal &#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x53D6;&#x5F97;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x771F;&#x83CC;&#x611F;&#x67D3;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ZmPR4 mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x9632;&#x5FA1;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x610F;&#x5473;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9; II &#x30AD;&#x30C1;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x75C5;&#x614B;&#x95A2;&#x9023;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 4 (PR 4) &#x3092;&#x542B;&#x3080; mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x771F;&#x83CC;&#x3084;&#x50B7;&#x8A98;&#x8D77;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x3002;

(&#xD64D;&#xBCF4;) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; pathogenesis &#xAD00;&#xB828;&#xC740; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC758; &#xACF5;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD64D;&#xBCF4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC18D;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xAC00;&#xC871;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF8;&#xB8F9;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD64D;&#xBCF4; 4 &#xAC00;&#xC871; &#xAD6C;&#xC131; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; I &#xBC0F; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II chitinases. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; &#xD64D;&#xBCF4; 4 &#xD64D;&#xBCF4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; chitinases II&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC;&#xC640; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; homology &#xC8FC;&#xC2DD; &#xC625;&#xC218;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; chitinase &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; Cdna&#xB97C; &#xD30C;&#xC545; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBC0F; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; elicitors &#xB610;&#xB294; moniliformin, mycotoxin &#xADE0; Fusarium moniliforme&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC99D;&#xAC00; ZmPR4 Mrna&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; germinating &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xB2E8;&#xC6D0;&#xC758; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; mRNA &#xAD50; &#xC7A1; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; ZmPR4 mRNA &#xCD95;&#xC801; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4;&#xC640;&#xC758; &#xC811;&#xCD09;&#xC744; &#xC124;&#xC815; &#xD574;&#xB2F9; &#xC140; &#xD615;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. ZmPR4 mRNA &#xCD95;&#xC801; &#xB610;&#xD55C; &#xC2E4;&#xBC84; &#xC9C8;&#xC0B0;&#xC5FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xADF9; &#xBC18;&#xBA74; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; gibberellic &#xC0B0; &#xC774;&#xB098; &#xC0B4;&#xB9AC;&#xC2E4;&#xC0B0;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD80;&#xC0C1;, &#xB610;&#xB294; &#xCE58;&#xB8CC; abscisic &#xC0B0; &#xB610;&#xB294; &#xBA54; &#xD2F8; jasmonate, &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC78E;&#xC5D0;&#xC11C; ZmPR4 Mrna&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, ZmPR4 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xC7A5;&#xADE0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xB294;, &#xC815;&#xD654; &#xBC0F; &#xC5BB;&#xC744; polyclonal &#xD56D; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Zmpr4&#xB97C; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; &#xD558;&#xB294; &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;. &#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; ZmPR4 Mrna&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; &#xD574;&#xB2F9; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCD95;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3D9;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xADE0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC5B4; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB85C; &#xC11C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC758;&#xBBF8;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xACF0; &#xD321;&#xC774; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xCC98; &#xC720;&#xBC1C; &#xCD95;&#xC801; pathogenesis &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 4 (&#xD64D;&#xBCF4; 4)&#xC758; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II chitinase &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; Mrna&#xC758; &#xC625;&#xC218;&#xC218;&#xC758; &#xAC00;&#xC871;.

Relacionadas con patog&eacute;nesis (PR) prote&iacute;nas son prote&iacute;nas vegetales que son inducidas en respuesta al ataque de pat&oacute;genos. Prote&iacute;nas PR se agrupan en familias independientes basadas en sus secuencias y propiedades. La familia de PR-4 compone de clase I y clase II quitinasas. Hemos aislado un cDNA full-length codificaci&oacute;n un chitinase a base de ma&iacute;z que comparte un alto grado de homolog&iacute;a de secuencia de nucle&oacute;tidos y amino&aacute;cidos con la clase II quitinasas de la familia de PR-4 de prote&iacute;nas PR. Nuestros resultados indican que la infecci&oacute;n mic&oacute;tica y tratamiento con elicitores f&uacute;ngicos o con moniliformin, una micotoxina producida por el hongo Fusarium moniliforme, aumentan el nivel de mRNA ZmPR4. An&aacute;lisis de hibridaci&oacute;n in situ de mRNA en las secciones obtenidas de embriones de germinaci&oacute;n infectadas por el hongo revel&oacute; que la acumulaci&oacute;n de mRNA de ZmPR4 ocurre en esos tipos de celulares que en primer lugar, establecer contacto con el pat&oacute;geno. Acumulaci&oacute;n de mRNA de ZmPR4 tambi&eacute;n es estimulada por tratamiento con nitrato de plata, mientras que la aplicaci&oacute;n del &aacute;cido giber&eacute;lico de hormonas o &aacute;cido acetilsalic&iacute;lico no tiene ning&uacute;n efecto. Herida, o tratamiento con &aacute;cido absc&iacute;sico o metil jasmonate, da lugar a la acumulaci&oacute;n de mRNA de ZmPR4 en hojas de ma&iacute;z. Adem&aacute;s, la prote&iacute;na ZmPR4 fue expresada en Escherichia coli, purificada y sol&iacute;a obtener anticuerpos policlonales que reconocen espec&iacute;ficamente ZmPR4 en prote&iacute;na extractos de embriones infectados por hongos. Acumulaci&oacute;n de mRNA de ZmPR4 en tejidos de ma&iacute;z infectadas por el hongo fue acompa&ntilde;ada por una acumulaci&oacute;n significativa de la prote&iacute;na correspondiente. Se discuten las posibles implicaciones de estos resultados como parte de la respuesta de la defensa general de plantas de ma&iacute;z frente a pat&oacute;genos.

Acumulaci&oacute;n de hongos y herida-inducida del ARNm que contiene una clase II chitinase de la prote&iacute;na relacionada con la patogenia 4 (PR-4) familia de ma&iacute;z.

&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x76F8;&#x5173; (PR) &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x662F;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x9632;&#x5FA1;&#x53CD;&#x5E94;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x7684;&#x653B;&#x51FB;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x7389;&#x7C73; PRms &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x4F5C;&#x7528;&#x3001; &#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x7269;&#x88AB;&#x8F6C; PRms cDNA CaMV35S &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x3002;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x7269;&#x589E;&#x957F;&#x5F97;&#x66F4;&#x5FEB;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4EA7;&#x751F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x53F6;&#x548C;&#x79CD;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x91CF;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7535;&#x955C;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; PRms &#x662F;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x7269;&#x53F6;&#x7247;&#x4E2D;&#x80DE;&#x95F4;&#x8FDE;&#x4E1D;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8517;&#x7CD6;&#x5C04;&#x6D41;&#x4ECE;&#x5149;&#x5408;&#x6709;&#x6548;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53F6;&#x548C;&#x66F4;&#x9AD8;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x8517;&#x7CD6;&#x53F6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x662F; PRms &#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x682A;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x8FD9;&#x53CD;&#x8FC7;&#x6765;&#x5BFC;&#x81F4;&#x672C;&#x6784;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x70DF;&#x8349; PR &#x57FA;&#x56E0;&#x53CA;&#x79CD;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x539F;&#x83CC;&#x7684;&#x6297;&#x6027;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x5355;&#x4E00;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5B9E;&#x73B0;&#x591A;&#x4E2A;&#x690D;&#x7269;&#x9632;&#x536B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x4E3A;&#x6297;&#x75C5;&#x690D;&#x7269;&#x5DE5;&#x7A0B;&#x540C;&#x65F6;&#x6539;&#x8FDB;&#x690D;&#x7269;&#x4EA7;&#x91CF;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7387;&#x7684;&#x5BCC;&#x58EB;&#x4FEE;&#x6539;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;

&#x5DE5;&#x7A0B;&#x70DF;&#x8349;&#x690D;&#x682A;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x533A;&#x7684;&#x4EA7;&#x7269;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7387;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x62B5;&#x6297;&#x3002;

Expression of pathogenesis-related (PR) genes is part of the plant's natural defense response against pathogen attack. To study the in vivo role and function of the maize PRms protein, tobacco plants were transformed with the PRms cDNA under the control of the CaMV35S promoter. Transgenic tobacco plants grow faster and yield more leaf and seed biomass. By using immunoelectron microscopy, we found that PRms is associated with plasmodesmata in leaves of transgenic tobacco plants. Furthermore, we found that activation of sucrose efflux from photosynthetically active leaves and accumulation of higher levels of sucrose in leaf tissues are characteristic features of PRms tobacco plants. This, in turn, results in the constitutive expression of endogenous tobacco PR genes and resistance to phytopathogens. The expression of multiple plant defense genes can then be achieved by using a single transgene. These data provide a new approach for engineering disease-resistant plants while simultaneously improving plant yield and productivity through the modification of photoassimilate partitioning.

Engineering photoassimilate partitioning in tobacco plants improves growth and productivity and provides pathogen resistance.

Expression des g&egrave;nes (PR) reli&eacute;s &agrave; la pathogen&egrave;se fait partie de la r&eacute;ponse de d&eacute;fense naturelle de la plante contre les attaques de pathog&egrave;nes. Afin d&#39;&eacute;tudier le r&ocirc;le in vivo et la fonction de la prot&eacute;ine de PMR ma&iuml;s, plants de tabac ont &eacute;t&eacute; transform&eacute;es avec l&#39;ADNc de PMR sous le contr&ocirc;le du promoteur CaMV35S. Plants de tabac transg&eacute;niques grandissent plus vite et produisent plus de biomasse foliaire et de graines. &Agrave; l&#39;aide de la microscopie &eacute;lectronique, nous avons constat&eacute; que les PMR est associ&eacute; &agrave; des plasmodesmes dans les feuilles des plants de tabac transg&eacute;niques. En outre, nous avons constat&eacute; que l&#39;activation de l&#39;efflux de saccharose de la photosynth&egrave;se des feuilles et l&#39;accumulation des niveaux plus &eacute;lev&eacute;s de saccharose dans les tissus foliaires sont les caract&eacute;ristiques des plants de tabac PMR. Ceci, &agrave; son tour, conduit &agrave; l&#39;expression constitutive de g&egrave;nes endog&egrave;nes tabac PR et r&eacute;sistance aux phytopathog&egrave;nes. L&#39;expression de plusieurs g&egrave;nes de d&eacute;fense des plantes est possible puis &agrave; l&#39;aide d&#39;un transg&egrave;ne unique. Ces donn&eacute;es fournissent une nouvelle approche pour l&#39;ing&eacute;nierie des plantes r&eacute;sistant &agrave; la maladie tout en am&eacute;liorant la production v&eacute;g&eacute;tale et la productivit&eacute; gr&acirc;ce &agrave; la modification du partitionnement des photoassimilats.

Ing&eacute;nierie des photoassimilats partitionnement dans les plants de tabac am&eacute;liore la croissance et la productivit&eacute; et fournit la r&eacute;sistance aux agents pathog&egrave;nes.

Technische photoassimilate Partitionierung in Tabakpflanzen verbessert Wachstum und Produktivit&#xE4;t und bietet Pathogenresistenz.

Espressione dei geni (PR) correlati a patogenesi &egrave; parte della risposta naturale difesa della pianta contro gli attacchi del patogeno. Per studiare il ruolo in vivo e la funzione della proteina prm mais, piante di tabacco sono stati trasformati con il cDNA prm sotto il controllo del promotore CaMV35S. Piante di tabacco transgenico crescono pi&ugrave; velocemente e producono pi&ugrave; biomassa foglia e seme. Utilizzando immunoelectron microscopy, abbiamo scoperto che il prm &egrave; associato con i Plasmodesmi nelle foglie delle piante di tabacco transgenico. Inoltre, abbiamo trovato che lascia attivazione di efflusso di saccarosio da fotosinteticamente attiva e accumulo di livelli pi&ugrave; elevati di saccarosio nei tessuti della foglia sono tratti caratteristici di piante di tabacco il PRM. Questo, a sua volta, determina l&#39;espressione costitutiva di geni endogeni tabacco PR e resistenza ai confronti. L&#39;espressione di geni di difesa pi&ugrave; pianta quindi ottenibile utilizzando un singolo transgene. Questi dati forniscono un nuovo approccio per la progettazione di piante resistenti alle malattie migliorando contemporaneamente la pianta resa e produttivit&agrave; attraverso la modifica del photoassimilate di partizionamento.

Ingegneria photoassimilate partizionamento in piante di tabacco migliora la crescita e la produttivit&agrave; e fornisce la resistenza del patogeno.

&#x7279;&#x7570;&#x7684; (PR) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x306E;&#x653B;&#x6483;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x306A;&#x9632;&#x885B;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E; PRms &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3068; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;, &#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x690D;&#x7269; PRms cdna CaMV35S &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x4E0B;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x690D;&#x7269;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x901F;&#x304F;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x8449;&#x3084;&#x7A2E;&#x5B50;&#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30DE;&#x30B9;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x96FB;&#x9855;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066; PRms &#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30E2;&#x30C7;&#x30B9;&#x30E0;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x8449;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8449;&#x306E;&#x5149;&#x5408;&#x6210;&#x6709;&#x52B9;&#x304B;&#x3089;&#x30B9;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x8449;&#x7D44;&#x7E54;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B7;&#x30E7;&#x7CD6;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306F; PRms &#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x9806;&#x756A;&#x306B;&#x3001;&#x69CB;&#x6210;&#x5F0F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3; PR &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x690D;&#x7269;&#x3078;&#x306E;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5358;&#x4E00; transgene &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x9632;&#x5FA1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x53CE;&#x91CF;&#x3068;&#x5149;&#x5408;&#x6210;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5206;&#x5272;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x8010;&#x75C5;&#x6027;&#x690D;&#x7269;&#x5DE5;&#x5B66;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5206;&#x5272;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5149;&#x5408;&#x6210;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B8;&#x30CB;&#x30A2; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x7523;&#x6027;&#x304C;&#x5411;&#x4E0A;&#x3057;&#x3001;&#x75C5;&#x539F;&#x4F53;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Pathogenesis &#xAD00;&#xB828; (&#xD64D;&#xBCF4;) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC2DD;&#xC740; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xACF5;&#xACA9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xBC29;&#xC5B4; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5ED;&#xD560; &#xBC0F; &#xC625;&#xC218;&#xC218; PRms &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xB2F4;&#xBC30; &#xACF5;&#xC7A5; CaMV35S &#xBAA8;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4; PRms Cdna&#xB85C; &#xBCC0;&#xBAA8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC78E;&#xACFC; &#xC528;&#xC557; &#xBC14;&#xC774;&#xC624; &#xB9E4;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744;. Immunoelectron &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC; PRms &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC78E;&#xC5D0;&#xB294; plasmodesmata&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; photosynthetically &#xD65C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xB2F9; &#xACBD;&#xACFC;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB098;&#xBB47;&#xC78E;&#xACFC; &#xC0C1;&#xBD80; &#xC78E; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790;&#xB2F9;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC740; PRms &#xB2F4;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740;, &#xCC28;&#xB840;&#xB85C;, &#xC81C;&#xC815; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC0DD; &#xB2F4;&#xBC30; &#xD64D;&#xBCF4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; phytopathogens&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC740; &#xB2E8;&#xC77C; transgene&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB3D9;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC218;&#xC728; &#xBC0F; photoassimilate &#xBD84;&#xD560;&#xC758; &#xC218;&#xC815;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC131;&#xC744; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC800;&#xD56D; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Photoassimilate &#xB2F4;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBD84;&#xD560; &#xC5D4;&#xC9C0;&#xB2C8;&#xC5B4;&#xB9C1; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC131;&#xC744; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xD558; &#xACE0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xCCB4; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD55C;&#xB2E4;.

Expresi&oacute;n de genes relacionados con la patog&eacute;nesis de la (PR) es parte de la respuesta de defensa natural de la planta contra el ataque de pat&oacute;genos. Para estudiar la funci&oacute;n in vivo y la funci&oacute;n de la prote&iacute;na PRms ma&iacute;z, plantas de tabaco se transformaron con el cDNA de PRms bajo el control del promotor CaMV35S. Plantas de tabaco transg&eacute;nicas crecen m&aacute;s r&aacute;pido y producci&oacute;n m&aacute;s biomasa de hojas y semillas. Mediante el uso de la microscopia del immunoelectron, encontramos que el PRms se asocia con plasmodesmos en hojas de plantas de tabaco transg&eacute;nicas. Adem&aacute;s, encontramos que sale de la activaci&oacute;n de la emanaci&oacute;n de radiaci&oacute;n fotosint&eacute;ticamente activa de sacarosa y acumulaci&oacute;n de mayores niveles de sacarosa en los tejidos de la hoja son rasgos caracter&iacute;sticos de las plantas del tabaco PRms. Esto, a su vez, da lugar a la expresi&oacute;n constitutiva de genes end&oacute;genos tabaco PR y resistencia a fitopat&oacute;genos. Entonces, la expresi&oacute;n de varios genes de defensa de la planta puede lograrse mediante el uso de un solo transgen. Estos datos proporcionan un nuevo enfoque para la ingenier&iacute;a de plantas resistentes a enfermedades mejorando simult&aacute;neamente la producci&oacute;n de la planta y la productividad mediante la modificaci&oacute;n de la partici&oacute;n de fotoasimilados.

Ingenier&iacute;a de fotoasimilados particionado en plantas de tabaco mejora el crecimiento y la productividad y proporciona resistencia del pat&oacute;geno.

&#x6211;&#x4EEC;&#x4EE5;&#x524D;&#x66FE;&#x62A5;&#x9053;&#xFF0C;gp91phox&#xFF0C;&#x5728; CHO &#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;&#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;)&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x51FD;&#x6570;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x8D28;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6709;&#x62A5;&#x544A;&#x8BF4; COS 7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; gp91phox &#x672A;&#x80FD;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x5916;&#x5411;&#x8D28;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF0C;gp91phox &#x4E0D;&#x80FD;&#x7528;&#x4F5C;&#x8D28;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8C03;&#x67E5;&#x6B64;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#xFF0C;&#x5728;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-C-91&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D; gp91phox &#x878D;&#x5408;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; C-&#x5DF4;&#x58EB;&#x603B;&#x7AD9;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-C-91 &#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x53CA;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x819C;&#x7684;&#x8F6C;&#x67D3; COS 7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; 30%&#x3002;&#x5728;&#x5269;&#x4F59;&#x7684; COS 7 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x819C;&#x53EA;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-C-91&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-C-91 &#x5E74; CHO &#x7EC6;&#x80DE;&#x5B58;&#x5728;&#x4E8E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6240;&#x6709;&#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x3002;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x914D;&#x7F6E;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4ECE; COS 7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE; gp91phox &#x5F55;&#x5F97;&#x5916;&#x5411;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x89C4;&#x6A21;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x5931;&#x53BB;&#x4E86;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4E0B;&#x5782;&#x5438;&#x7BA1;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x63A8;&#x79FB;&#x5E73;&#x8861;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; (50 &#x5206;&#x949F;)&#x3002;&#x7535;&#x6D41;&#x9608;&#x503C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7535;&#x538B;&#x8F6C;&#x7531;&#x5927;&#x7EA6; 60 mV &#x6D74; ph &#x503C; 1 &#x80A1;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;Zn2 + &#x6291;&#x5236;&#x8868;&#x8FBE; gp91phox &#x7684; COS 7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5916;&#x5411;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x5C3E;&#x5DF4;&#x5F53;&#x524D;&#x9006;&#x8F6C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;-64 &#x5728; 8.0&#xFF0C;pH(o) &#xFF08;&#x5916;&#x90E8; pH&#xFF09; mV-40 &#x5728; 7.4 &#x548C;-8 pH(o) pH(o) 7.0&#xFF0C;&#x8BE5;&#x503C;&#x6307;&#x793A;&#x5F53;&#x524D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8D28;&#x5B50;&#x8FD0;&#x52A8;&#x5728; mV mV&#x3002;&#x5916;&#x5411;&#x7535;&#x6D41;&#x5C55;&#x51FA;&#x7531; COS 7 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A; gp91phox &#x7684; 37.5%&#x3002;&#x8D28;&#x5B50;&#x6D41;&#x5F55;&#x4ECE; gp91phox &#x8F6C;&#x67D3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540E;&#x5207;&#x9664;&#x672F;&#x5185;&#x7FFB;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x3002;&#x8868;&#x793A; gp91phox COS 7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x5411;&#x8D28;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x4F5C;&#x4E3A; NADPH &#x6C27;&#x5316;&#x9176;&#x76F8;&#x5173;&#x8D28;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x4E3A; gp91phox &#x63D0;&#x4F9B;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x652F;&#x6301;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Gp91phox/Nox2 &#x5728; cos-7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF1A; &#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x5916;&#x5411;&#x8D28;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x3002;

We have reported previously that gp91phox, expressed in CHO (Chinese hamster ovary) cells, functions as a voltage-dependent proton channel. However, others have reported that COS-7 cells expressing gp91phox failed to exhibit outward proton currents, and concluded that gp91phox does not function as a proton channel. To investigate this clear difference in findings, we have examined the expression and cellular localization of the fusion protein EGFP-C-91, in which gp91phox is fused to the C-terminus of enhanced green fluorescent protein. EGFP-C-91 was observed in the plasma membrane and intracellular membranes of 30% of the transfected COS-7 cells. In the remaining COS-7 cells, EGFP-C-91 was detected in the intracellular membranes only. In CHO cells EGFP-C-91 was present in both the plasma membrane and the intracellular membranes of all transfected cells. Under the whole-cell configuration, outward currents were recorded from COS-7 cells expressing gp91phox. These increased in magnitude and lost their 'droop' over time as the pipette solution equilibrated with the cell cytoplasm (50 min). The threshold activation voltage for the currents was shifted by approximately 60 mV for a 1 unit difference in bath pH. Zn2+ inhibited the outward currents observed in COS-7 cells expressing gp91phox. The tail current reversal potential was -64 mV at a pH(o) (external pH) of 8.0, -40 mV at pH(o) 7.4 and -8 mV at pH(o) 7.0, indicating that the current arises from the movement of protons. Outward currents were exhibited by 37.5% of the COS-7 cells expressing gp91phox. Proton currents were recorded following the excision of inside-out patches from cells transfected with gp91phox. The presence of outward proton currents in COS-7 cells expressing gp91phox provides further support for our proposed role for gp91phox as the NADPH oxidase-associated proton channel.

Expression of gp91phox/Nox2 in COS-7 cells: cellular localization of the protein and the detection of outward proton currents.

Nous avons rapport&eacute; pr&eacute;c&eacute;demment que gp91phox, exprim&eacute;e dans les cellules CHO (Chinese hamster ovary), fonctionne comme un canal de proton de voltage-d&eacute;pendants. Cependant, d&#39;autres ont rapport&eacute; que COS-7 cellules exprimant gp91phox n&#39;a pas &agrave; exposer des courants de protons vers l&#39;ext&eacute;rieur et a conclu que gp91phox ne fonctionne pas comme un canal de proton. Pour &eacute;tudier cette nette diff&eacute;rence dans les r&eacute;sultats, nous avons examin&eacute; l&#39;expression et la localisation cellulaire de la prot&eacute;ine de fusion EGFP-C-91, o&ugrave; gp91phox est fusionn&eacute;e &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale de la prot&eacute;ine fluorescente verte am&eacute;lior&eacute;e. EGFP-C-91 a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e dans la membrane plasmique et les membranes intracellulaires de 30 % des cellules COS-7 transfect&eacute;es. Dans les cellules restantes de COS-7, EGFP-C-91 a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute;e dans les membranes intracellulaires seulement. Chez les cellules CHO EGFP-C-91 &eacute;tait pr&eacute;sente dans la membrane de plasma et les membranes intracellulaires de toutes les cellules transfect&eacute;es. Dans une configuration cellule enti&egrave;re, courants sortants ont &eacute;t&eacute; enregistr&eacute;s de COS-7 cellules exprimant gp91phox. Ceux-ci ont augment&eacute; en grandeur et perdu leur &laquo; statisme &raquo; au fil du temps comme la solution de la pipette &eacute;quilibr&eacute;e avec le cytoplasme de la cellule (50 min). La tension de seuil d&#39;activation pour les courants a &eacute;t&eacute; d&eacute;plac&eacute;e par environ 60 mV pour une diff&eacute;rence de 1 unit&eacute; de pH du bain. Zn2 + inhibent les courants sortants observ&eacute;s dans des cellules COS-7 exprimant gp91phox. Le potentiel d&#39;inversion actuelle de queue a &eacute;t&eacute; -64 mV &agrave; un pH(o) (pH externe) de 8,0, de -40 mV &agrave; mV pH(o) 7.4 et -8 &agrave; pH(o) 7.0, ce qui indique que le courant r&eacute;sulte le mouvement des protons. Courants sortants ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;es par 37,5 % des cellules COS-7 exprimant gp91phox. Courants de proton ont &eacute;t&eacute; enregistr&eacute;es apr&egrave;s l&#39;excision de patches inside-out des cellules transfect&eacute;es avec gp91phox. La pr&eacute;sence de courants de protons vers l&#39;ext&eacute;rieur dans des cellules COS-7 exprimant gp91phox fournit un soutien suppl&eacute;mentaire &agrave; notre r&ocirc;le propos&eacute; pour gp91phox comme le canal de proton associ&eacute;s &agrave; oxydase de NADPH.

Expression de gp91phox/Nox2 dans des cellules COS-7: la localisation cellulaire de la prot&eacute;ine et la d&eacute;tection des courants de protons vers l&#39;ext&eacute;rieur.

Die Expression von gp91phox/Nox2 in COS-7-Zellen: zellul&#xE4;re Lokalisation des Proteins und der Nachweis von au&#xDF;en Protonen Str&#xF6;me.

Abbiamo segnalato in precedenza che gp91phox, espresso nelle cellule CHO (ovaio di criceto cinese), funziona come un canale voltaggio-dipendente dal protone. Tuttavia, altri hanno segnalato che cellule COS-7 esprimendo gp91phox non &egrave; riuscito ad esporre le correnti protone verso l&#39;esterno e ha concluso che gp91phox non funziona come un canale protonico. Per studiare questa netta differenza nei risultati, abbiamo esaminato l&#39;espressione e localizzazione cellulare della proteina di fusione EGFP-C-91, in cui gp91phox &egrave; fuso al C-terminale della proteina fluorescente verde avanzata. 91-EGFP-C &egrave; stata osservata nella membrana plasmatica e le membrane intracellulari del 30% delle cellule COS-7 transfected. Nelle restanti cellule COS-7, 91-EGFP-C &egrave; stato rilevato nelle membrane intracellulari solo. Nelle cellule CHO EGFP-C-91 era presente in entrambi la membrana plasmatica e le membrane intracellulari di tutte le celle transfected. Sotto la configurazione di cellule intere, le correnti verso l&#39;esterno sono state registrate da cellule COS-7 esprimendo gp91phox. Queste aumentate in grandezza e perso il loro &#39;languore&#39; nel tempo come la soluzione di pipetta equilibrato con il citoplasma della cellula (50 min). La soglia di tensione di attivazione per le correnti &egrave; stata spostata di circa 60 mV per una differenza di 1 unit&agrave; di pH del bagno. Zn2 + inibito le correnti verso l&#39;esterno osservate in cellule COS-7 esprimendo gp91phox. Il potenziale di inversione corrente coda fu -64 mV a un pH(o) (pH esterno) 8.0, -40 mV a pH(o) 7.4 e -8 mV a pH(o) 7.0, che indica che la corrente nasce dal movimento dei protoni. Le correnti verso l&#39;esterno sono state esposte da 37,5% delle cellule COS-7 esprimendo gp91phox. Le correnti del protone sono state registrate dopo l&#39;escissione delle patch dentro-fuori dalle celle transfected con gp91phox. La presenza di correnti di protoni verso l&#39;esterno in cellule COS-7 esprimendo gp91phox fornisce ulteriore supporto per il nostro ruolo proposto per gp91phox come il canale di NADPH ossidasi-associate protone.

Espressione della gp91phox/Nox2 in cellule COS-7: localizzazione cellulare della proteina e la rilevazione delle correnti di protoni verso l&#39;esterno.

&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4EE5;&#x524D;&#x753A; (&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0; &#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;) &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x305D;&#x306E; gp91phox &#x96FB;&#x4F4D;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6; gp91phox COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E; gp91phox &#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30F3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x3068; gp91phox &#x5F37;&#x5316;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306B;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; EGFP-C-91 &#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;EGFP C 91 &#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x3068; 30% &#x306E; transfected COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x819C;&#x306B;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E; COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; EGFP C 91 &#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x819C;&#x3067;&#x306E;&#x307F;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CHO &#x7D30;&#x80DE;&#x3067; EGFP C 91 &#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3068;&#x3059;&#x3079;&#x3066; transfected &#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x819C;&#x5185;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x30BB;&#x30EB;&#x69CB;&#x6210;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41; gp91phox &#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x8A18;&#x9332;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089; &#39;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8; &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA; (50 &#x5206;) &#x5E73;&#x8861;&#x30C9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#39; &#x3092;&#x5931;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x95BE;&#x5024;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x7D04; 60 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x3063;&#x305F; mV &#x30D0;&#x30B9; pH &#x306E; 1 &#x5358;&#x4F4D;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Zn 2 + gp91phox &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x5C3E;&#x73FE;&#x5728;&#x53CD;&#x8EE2;-64 &#x3060;&#x3063;&#x305F; pH(o) (&#x5916;&#x90E8; pH) 8.0 &#x306E;&#x3067; mV-40 mV pH(o) 7.4 &#x3068;-8 mV pH(o) 7.0 &#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x304B;&#x3089;&#x8D77;&#x3053;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x306B;&#x306F;&#x3002;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41; gp91phox &#x767A;&#x73FE; COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; 37.5% &#x3067;&#x5C55;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C9; &#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x306E;&#x5207;&#x9664;&#x3068; gp91phox &#x3092;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3092;&#x8A18;&#x9332;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41; gp91phox &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B; COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x63D0;&#x6848;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8; gp91phox &#x306E; NADPH &#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Gp91phox/Nox2 COS 7 &#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;: &#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x53CA;&#x3073;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5C40;&#x5728;&#x3002;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC870; (&#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C;) &#xC140;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; gp91phox &#xAE30;&#xB2A5; &#xC804;&#xC555; &#xC885;&#xC18D; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB2E4;&#xB978; &#xC0AC;&#xB78C; &#xBCF4;&#xACE0; gp91phox&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; COS 7 &#xC140; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xB958; &#xC804;&#xC2DC; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; gp91phox &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xCC44;&#xB110;&#xB85C; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xB0B4;&#xB838;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xBA85; &#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00;&#xC774; &#xC870;&#xC0AC;, &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; gp91phox &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xC735;&#xD569;&#xC740; &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; EGFP-C-91&#xC758; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xC558;&#xB2E4;. EGFP-C-91 &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB9C9;&#xC758; transfected COS 7 &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; 30%&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; COS 7 &#xC140; EGFP-C-91&#xB9CC; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC870; &#xC140; EGFP-C-91 &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; transfected &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; &#xAD6C;&#xC131;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xB958;&#xB294; gp91phox&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; COS 7 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xB85D; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xADDC;&#xBAA8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#39;&#xB2E4;&#39; &#xD53C; &#xD3AB; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; equilibrated &#xC140; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; (50 &#xBD84;)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC783;&#xC5B4;&#xBC84;&#xB9B0;. &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC804;&#xC555; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC57D; 60 &#xC5EC; &#xC774;&#xB3D9; &#xD588;&#xB2E4; &#xBAA9;&#xC695; ph&#xC5D0;&#xC11C; 1 &#xB2E8;&#xC704; &#xCC28;&#xC774; &#xB300; &#xD55C; mV. Zn2 + COS 7 &#xC140; gp91phox &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xC678;&#xC801; &#xD750;&#xB984;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xD604;&#xC7AC; &#xBC18;&#xC804;-64&#xB294; 8.0, pH(o) (&#xC678;&#xBD80; &#xC804;&#xD654;)&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBA4;&#xC9C1; &#xBE44;&#xB514;&#xC624;-40 mV pH(o) 7.4&#xC640;-8 mV pH(o) 7.0, &#xD604;&#xC7AC; &#xC591;&#xC131;&#xC790;&#xC758; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;&#xC5D0;. &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xB958; gp91phox&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; COS 7 &#xC140;&#xC758; 37.5%&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xB958; gp91phox&#xC640; &#xD398; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4;&#xBD80; &#xC544;&#xC6C3; &#xD328;&#xCE58; &#xC808;&#xB2E8;&#xC744; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xB85D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xB958; gp91phox&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; COS 7 &#xC140;&#xC5D0; &#xC788;&#xC73C;&#xBA74; NADPH &#xC0B0;&#xD654; &#xD6A8;&#xC18C; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xCC44;&#xB110; gp91phox &#xC81C;&#xC548;&#xB41C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

COS-7 &#xC140;&#xC5D0; gp91phox/nox2&#xC758; &#xD45C;&#xD604;: &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC591;&#xC131;&#xC790; &#xC804;&#xB958; &#xAC80;&#xCD9C;&#xC758; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;.

Hemos informado anteriormente gp91phox, expresado en las c&eacute;lulas CHO (ovario de h&aacute;mster chino), funciona como un canal de protones dependientes de voltaje. Sin embargo, otras personas han reportado que las c&eacute;lulas COS-7 expresando gp91phox no exhiben corrientes de protones hacia fuera y concluyeron que gp91phox no funciona como un canal de protones. Para investigar esta clara diferencia en los resultados, hemos examinado la expresi&oacute;n y localizaci&oacute;n celular de la prote&iacute;na de fusi&oacute;n EGFP-C-91, en el cual gp91phox est&aacute; fusionada a la c-terminal de la prote&iacute;na fluorescente verde mejorada. EGFP-C-91 se observ&oacute; en la membrana plasm&aacute;tica y las membranas intracelulares del 30% de las c&eacute;lulas transfected COS-7. En las c&eacute;lulas COS-7 restantes, EGFP-C-91 se detect&oacute; en las membranas intracelulares solamente. En c&eacute;lulas CHO EGFP-C-91 estuvo presente en la membrana plasm&aacute;tica y las membranas intracelulares de todas las c&eacute;lulas transfected. Bajo la configuraci&oacute;n de celulares, se registraron corrientes externas de c&eacute;lulas COS-7 expresando gp91phox. &Eacute;stos aumentaron en magnitud y perdieron su &#39;inclinaci&oacute;n&#39; con el tiempo como la soluci&oacute;n de la pipeta y equilibrado con el citoplasma de la c&eacute;lula (50 min). La tensi&oacute;n umbral de activaci&oacute;n de las corrientes fue cambiado de puesto por aproximadamente 60 mV para una diferencia de 1 unidad de pH del ba&ntilde;o. Zn2 + inhibe las corrientes hacia fuera observadas en las c&eacute;lulas COS-7 expresando gp91phox. La revocaci&oacute;n de cola actual potencial fue -64 mV en un pH(o) (pH externo) de 8.0, -40 mV en mV pH(o) 7.4 y -8 en pH(o) 7.0, indicando que la corriente se presenta desde el movimiento de protones. Corrientes exteriores fueron exhibidas por el 37,5% de las c&eacute;lulas COS-7 expresando gp91phox. Corrientes de protones se registraron tras la supresi&oacute;n de parches de adentro hacia fuera de las c&eacute;lulas transfectadas con gp91phox. La presencia de corrientes de protones hacia fuera en las c&eacute;lulas COS-7 expresando gp91phox proporciona ayuda adicional para nuestro papel propuesto para la gp91phox como el canal de prot&oacute;n asociada a oxidasa NADPH.

Expresi&oacute;n de gp91phox/Nox2 en las c&eacute;lulas COS-7: localizaci&oacute;n celular de la prote&iacute;na y la detecci&oacute;n de corrientes de protones hacia fuera.

&#x4E03;&#x5408;&#x5B50;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C34;&#x7A3B; &#xFF08;Ariete (A) &#x548C; Senia (S)&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6B27;&#x6D32;&#x5546;&#x4E1A;&#x54C1;&#x79CD;&#x884C;&#x7A9D;&#x85CF;&#x7684; cry1B &#x6216; cry1Aa &#x7684;&#x82CF;&#x4E91;&#x91D1;&#x82BD;&#x5B62;&#x6746;&#x83CC; (Bt) &#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x3001; &#x88AB;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x5730;&#x533A; de l&#39;Ebre&#xFF0C;&#x897F;&#x73ED;&#x7259;&#x5728; 2001&#x5E74;&#x548C; 2002 &#x5E74;&#x590F;&#x5B63;&#x4F5C;&#x7269;&#x5B63;&#x8282;&#x5E26;&#x533A;&#x7684;&#x5E72;&#x4E8C;&#x5316;&#x879F; (SSB) (&#x6C34;&#x7A3B;&#x4E8C;&#x5316;&#x879F;) &#x635F;&#x4F24;&#x4FDD;&#x62A4;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x5BC6;&#x7801;&#x5B50;&#x4F18;&#x5316;&#x6BD2;&#x7D20;&#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x7F6E;&#x4E8E;&#x672C;&#x6784; ubi1 &#x57FA;&#x56E0;&#x6216;&#x7389;&#x7C73;&#x4ECE;&#x4F24;&#x53E3;&#x8BF1;&#x5BFC; mpi &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x4E4B;&#x4E0B;&#x3002;&#x7A33;&#x5B9A;&#x3001; &#x9AD8;&#x7EA7;&#x522B;&#x3001; &#x6740;&#x866B;&#x86CB;&#x767D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x6574;&#x4E2A;&#x7A9D;&#x85CF; &#xFF08;&#x7EBF;&#x6761;&#x3001; A64.1&#x3001; A33.1&#x3001; A3.4 &#x548C; S98.9) &#x7684; cry1B &#x7684;&#x7530;&#x95F4;&#x79CD;&#x690D;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x6839;&#x3001; &#x53F6;&#x548C;&#x79CD;&#x5B50;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x9075;&#x5B88;&#x6216; cry1Aa &#xFF08;S05.1 &#x548C; A19.14 &#x7684;&#x7EBF;&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0; ubi1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x4E0B;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x6BD2;&#x7D20; A9.1 &#x7EBF;&#x7A9D;&#x85CF;&#x7684; mpi &#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x73AF;&#x5883;&#x538B;&#x529B;&#xFF0C;&#x81EA;&#x7136;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x89E6;&#x53D1;&#x4F24;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x63A7;&#x5236;&#x7684; cry1B &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7ED3;&#x7ED3;&#x5DF4;&#x5DF4;&#x690D;&#x7269;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7D2F;&#x79EF;&#x5728; 0.2%&#x603B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; A9.1 &#x62A4;&#x5957;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x53C2;&#x5C55;&#x68D5;&#x8272; SSB &#x635F;&#x5BB3;&#x6240;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x75C5;&#x53D8;&#x3002;&#x519C;&#x827A;&#x6027;&#x72B6;&#x548C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EBF;&#x7684;&#x6027;&#x80FD;&#x88AB;&#x7236;&#x6BCD;&#x63A7;&#x5236;&#xFF0C;&#x4E00;&#x822C;&#x53EF;&#x6BD4;&#x9664;&#x5916;&#x7684;&#x4E24;&#x884C;&#x4E2D;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684; Cry1Aa&#xFF0C;&#x5C55;&#x51FA;&#x9AD8;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x975E;&#x771F;&#x4EE5;&#x952E;&#x5165;&#x3002;&#x81EA;&#x7136;&#x4FB5;&#x6270;&#x8FB9;&#x5883;&#x63A7;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x7530;&#xFF0C;&#x62C5;&#x4EFB;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x5468;&#x671F; SSB &#x4EBA;&#x53E3;&#x6C34;&#x5E93;&#x534F;&#x52A9;&#x4E0E;&#x624B;&#x52A8;&#x866B;&#x707E;&#x7684; L2/L3 SSB &#x5E7C;&#x866B;&#x3002;&#x635F;&#x5BB3; &#xFF08;&#x68D5;&#x8272;&#x75C5;&#x53D8;&#x548C;&#x4F5C;&#x7269;&#x5B63;&#x8282;&#x6B7B;&#x4E86;&#x5FC3;&#xFF09; &#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x548C;&#x690D;&#x7269;&#x5728;&#x6536;&#x83B7;&#x9636;&#x6BB5;&#x6E05;&#x626B;&#x4FDD;&#x62A4;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x682A;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E00;&#x7CFB;&#x5217;&#x900F;&#x9732;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7B26;&#x5408;&#x6BD2;&#x7D20;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x548C;&#x6E29;&#x5BA4;&#x5316;&#x9A8C;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x3002;A3.4 &#x548C; S05.1 &#x7EBF;&#x53D1;&#x73B0;&#x5C55;&#x54C1;&#x7A33;&#x5B9A;&#x548C;&#x5145;&#x5206;&#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#xFF0C;&#x653B;&#x51FB; SSB&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684; Cry1B &#x548C; Cry1Aa &#x7684;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF0C;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E86;&#x76F8;&#x5F53;&#x4E8E;&#x55B7;&#x6D12;&#x5316;&#x5B66;&#x6740;&#x866B;&#x5242;&#x63A7;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x5BF9;&#x6240;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x3002;&#x521B;&#x4F24;&#x8BF1;&#x5BFC; A9.1 &#x7EBF;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x6EE1;&#x610F;&#x7684;&#x4FDD;&#x969C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x4F4E;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x666E;&#x53CA;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x7684; SSB &#x5E7C;&#x866B;&#x5728;&#x830E;&#xFF0C;&#x4F46;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x5916;&#x90E8;&#x75C7;&#x72B6;&#x6BD4;&#x672C;&#x6784;&#x884C;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x56E0;&#x4E3A;&#x65F6;&#x5DEE;&#xFF0C;&#x53D7;&#x76CA;&#x4E8E; Cry1B &#x7684;&#x4FDD;&#x62A4;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x8F6C; bt &#x57FA;&#x56E0;&#x6C34;&#x7A3B;&#x7A9D;&#x85CF; cry &#x57FA;&#x56E0;&#x7531;&#x672C;&#x6784;&#x6216;&#x4F24;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x578B;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#xFF1A; &#x4FDD;&#x62A4;&#x548C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0B;&#x5730;&#x4E2D;&#x6D77;&#x5B57;&#x6BB5;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Seven homozygous transgenic lines of two European commercial cultivars of rice (Ariete (A) and Senia (S)), harbouring the cry1B or cry1Aa Bacillus thuringiensis (Bt) delta-endotoxin genes, were field evaluated for protection from striped stem borer (SSB) (Chilo suppressalis) damage during the 2001 and 2002 summer crop seasons in the Delta de l'Ebre region, Spain. The plant codon-optimized toxin gene was placed under the control of the promoter of either the constitutive ubi1 gene or the wound-inducible mpi gene from maize. Stable, high-level, insecticidal protein accumulation was observed throughout root, leaf and seed tissues of field-grown plants harbouring the cry1B (lines A64.1, A33.1, A3.4 and S98.9) or cry1Aa (lines S05.1 and A19.14) genes under the control of the ubi1 promoter. Conversely, no toxin was detected in unwounded vegetative tissues of the A9.1 line harbouring the cry1B gene controlled by the mpi promoter, indicating that natural environmental stresses did not trigger the activity of the wound-inducible promoter. However, the toxin accumulated at 0.2% total soluble proteins in A9.1 sheath tissue exhibiting brown lesions resulting from SSB damage. The agronomical traits and performance of the transgenic lines were generally comparable with parental controls, except in the two lines accumulating Cry1Aa, which exhibited a high frequency of plants non-true to type. Natural infestation was assisted with manual infestations of L2/L3 SSB larvae in border control plants surrounding the experimental plots, which served as a reservoir for the second-cycle SSB population. The observation of damage (brown lesions and dead hearts) during the crop season and dissection of plants at harvest stage revealed a range of protection amongst the transgenic lines, which was highly consistent with the level of toxin accumulation and with previous experience in greenhouse assays. Lines A3.4 and S05.1 were found to exhibit stable and full protection against SSB attacks, mediated by the accumulation of Cry1B and Cry1Aa toxin, respectively, which was comparable with that afforded by the spraying of chemical insecticides on control plants. The wound-induced A9.1 line exhibited a satisfactory level of protection, with a notably low level of penetration of SSB larvae in the stems, but higher external symptoms than constitutive lines, probably due to the time lag to benefit from the protective effect of Cry1B.

Bt rice harbouring cry genes controlled by a constitutive or wound-inducible promoter: protection and transgene expression under Mediterranean field conditions.

Sept lign&eacute;es transg&eacute;niques homozygotes de deux cultivars commerciaux europ&eacute;ens de riz (Ariete (A) et Senia (S)), abritant les g&egrave;nes de delta-endotoxine de Bacillus thuringiensis (Bt) cry1B ou cry1Aa, ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute; pour la protection contre les souches ray&eacute; borer (SSB) (Chilo suppressalis) durant les saisons de r&eacute;colte de l&#39;&eacute;t&eacute; 2001 et 2002 dans la r&eacute;gion du Delta de l&#39;Ebre, Espagne de terrain. Le g&egrave;ne de toxine codon optimis&eacute; de plante a &eacute;t&eacute; plac&eacute; sous le contr&ocirc;le du promoteur du g&egrave;ne ubi1 constitutive ou le g&egrave;ne inductible par blessure mpi du ma&iuml;s. Accumulation de la prot&eacute;ine stable, haut niveau, insecticide a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e tout au long de la racine, les feuilles et les graines des tissus des plantes cultiv&eacute;es au champ abritant le cry1B (lignes A3.4, A64, A33.1 et S98.9) ou cry1Aa g&egrave;nes (lignes S05.1 et A19.14) sous le contr&ocirc;le du promoteur ubi1. &Agrave; l&#39;inverse, aucune toxine a &eacute;t&eacute; d&eacute;tect&eacute; dans des tissus v&eacute;g&eacute;tatifs non bless&eacute;s de la ligne A9.1 abritant le g&egrave;ne cry1B, contr&ocirc;l&eacute; par le promoteur de mpi, indiquant que les stress environnementaux naturels n&#39;a pas d&eacute;clench&eacute; l&#39;activit&eacute; du promoteur inductible par blessure. Toutefois, la toxine accumul&eacute; &agrave; 0,2 % total prot&eacute;ines solubles dans les tissus de gaine A9.1 pr&eacute;sentant des l&eacute;sions brunes r&eacute;sultant de l&eacute;sions de la SSB. Les caract&egrave;res agronomiques et les performances des lign&eacute;es transg&eacute;niques &eacute;taient g&eacute;n&eacute;ralement comparables avec le contr&ocirc;le parental, sauf dans les deux lignes, accumulant Cry1Aa, qui pr&eacute;sentaient une fr&eacute;quence &eacute;lev&eacute;e de plantes non-true pour taper. Infestation naturelle &eacute;tait second&eacute;e avec manuelles infestations de larves L2/L3 SSB plantes de contr&ocirc;le fronti&egrave;re entourant les parcelles exp&eacute;rimentales, qui a servi comme un r&eacute;servoir pour la population de SSB de deuxi&egrave;me cycle. L&#39;observation des d&eacute;g&acirc;ts (l&eacute;sions brunes et des c&oelig;urs morts pendant la saison de la r&eacute;colte) et dissection des plantes au stade de la r&eacute;colte a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une gamme de protection parmi les lign&eacute;es transg&eacute;niques, qui &eacute;tait tr&egrave;s coh&eacute;rent avec le niveau d&#39;accumulation de toxines et ayant de l&#39;exp&eacute;rience dans les essais &agrave; effet de serre. Lignes A3.4 et S05.1 se sont av&eacute;r&eacute;es pi&egrave;ce stable et pleine protection contre les attaques SSB, m&eacute;di&eacute;e par l&#39;accumulation de toxines Cry1B et Cry1Aa, respectivement, qui est comparable &agrave; celle offerte par la pulv&eacute;risation d&#39;insecticides chimiques sur les plantes t&eacute;moins. La ligne A9.1 provoqu&eacute;e par les blessures expos&eacute;es &agrave; un niveau satisfaisant de protection, avec un niveau particuli&egrave;rement faible de p&eacute;n&eacute;tration des larves SSB dans les tiges, mais des sympt&ocirc;mes externes plus &eacute;lev&eacute;s que les lignes constitutives, probablement en raison du d&eacute;calage de b&eacute;n&eacute;ficier de l&#39;effet protecteur du Cry1B.

Abriter des g&egrave;nes cry contr&ocirc;l&eacute;es par un promoteur constitutif ou inductible par blessure du riz BT : protection et expression du transg&egrave;ne sous la M&eacute;diterran&eacute;e des conditions sur le terrain.

Sieben homozygote transgene Linien von zwei europ&auml;ischen kommerziellen Sorten Reis (Ariete (A) und Senia (S)), die Gene zu cry1B oder cry1Aa-Bacillus Thuringiensis (Bt)-Delta-Endotoxin Beherbergung, Feld f&uuml;r Schutz vor gestreifte Stengel Borer (SSB) (Chilo Suppressalis) Sch&auml;den in den Jahren 2001 und 2002 Sommer Ernte Jahreszeiten Region Delta de l &#39; Ebre, Spanien ausgewertet wurden. Das Pflanze-Codon-optimierte Toxin-Gen wurde unter der Kontrolle des Veranstalters das konstitutive ubi1 gen oder die Wunde-inducible Mpi-gen von Mais gelegt. Stabil, hochrangige, Insektizide Protein Akkumulation wurde beobachtet, w&auml;hrend Wurzel, Blatt und Samen Gewebe des Feld-Jungpflanzen Beherbergung der cry1B (Linien A64.1, A33.1, gezahlte und S98.9) oder cry1Aa (Linien S05.1 und A19.14)-Gen unter der Kontrolle des Projekttr&auml;gers ubi1. Umgekehrt wurde kein Toxin erkannt, in unverwundeten vegetativen Geweben Trasse A9 Beherbergung im cry1B-gen gesteuert durch den Mpi-Projekttr&auml;ger, darauf hinweist, dass nat&uuml;rliche Umwelteinfl&uuml;sse nicht die Aktivit&auml;t von der Wunde-inducible Projekttr&auml;ger ausgel&ouml;st. Jedoch akkumuliert das Toxin bei 0,2 % Gesamt l&ouml;sliche Proteine im A9 Mantel Gewebe ausstellen braune L&auml;sionen durch SSB-Sch&auml;digung. Die agronomischen Merkmale und Leistung der transgenen Linien waren im allgemeinen vergleichbar mit Kindersicherung, au&szlig;er in den zwei Zeilen Anh&auml;ufung Cry1Aa, die eine hohe Frequenz von ausgestellt nicht-True, um geben Sie Pflanzen. Nat&uuml;rliche Befall assistierte mit manueller Befall von L2/L3 SSB-Larven in Grenze Kontrolle Pflanzen rund um die experimentelle Grundst&uuml;cke, die als Reservoir f&uuml;r den zweiten Zyklus SSB Bev&ouml;lkerung dienten. Die Feststellung des Schadens (braune L&auml;sionen und Toten Herzen w&auml;hrend der Ernte-Saison) und Pr&auml;paration der Pflanzen zum Zeitpunkt der Ernte offenbart eine Palette von Schutz unter die transgenen Linien, die war sehr im Einklang mit der Ebene der Toxin-Akkumulation und Erfahrung bei Gew&auml;chshaus-Assays. Linien gezahlte und S05.1 fanden sich stabil und voller Schutz gegen SSB-Attacken, vermittelt durch die Anh&auml;ufung von Cry1B und Cry1Aa-Toxin, bzw. auszustellen, die war mit dem durch das Verspr&uuml;hen von chemischen Insektizide auf Steuerelement Pflanzen gebotenen vergleichbar. Die Wunde induziert A9-Linie stellte ein zufriedenstellendes Niveau des Schutzes, mit besonders niedrigem Niveau der Durchdringung der SSB-Larven in den Stielen, aber h&ouml;here &auml;u&szlig;eren Symptome als konstitutive Leitungen, wahrscheinlich wegen der zeitlichen Verz&ouml;gerung von der Schutzwirkung des Cry1B profitieren.

BT-Reis harbouring Schrei-Genen gesteuert durch eine konstitutive oder Wunde-inducible Projekttr&auml;ger: Schutz und Transgenexpression unter mediterranen Feld Bedingungen.

Sette linee transgeniche omozigote di due cultivar commerciali europei di riso (Ariete (A) e Senia (S)), che ospita i geni di delta-endotossina di Bacillus thuringiensis (Bt) cry1B o cry1Aa, sono stato valutato per la protezione da danni di staminali a strisce borer (SSB) (suppressalis Chilo) durante le stagioni del raccolto estate 2001 e 2002 nella regione del Delta de l&#39;Ebre, Spagna campo. Il gene della tossina ottimizzato per codone pianta fu posta sotto il controllo del promotore del gene costitutivo ubi1 o il mpi ferita-inducible gene da mais. Accumulo di proteina stabile, ad alto livello, insetticida &egrave; stata osservata in tutto tessuti radice, foglie e semi di piante coltivate in campo che ospita il cry1B (linee, A64.1, A33.1, A3.4 e S98.9) o cry1Aa geni (linee S05.1 e A19.14) sotto il controllo del promotore ubi1. Al contrario, nessuna tossina &egrave; stato rilevato nei tessuti vegetativi illesi della linea A9.1 che ospita il gene cry1B controllato dal promotore mpi, indicando che sollecitazioni ambientali naturali non ha fatto scattare l&#39;attivit&agrave; del promotore della ferita-inducible. Tuttavia, la tossina accumulata a 0,2% totale proteine solubili nel tessuto di guaina A9.1 esibendo marrone lesioni derivanti da danni SSB. Le caratteristiche agronomiche e le prestazioni delle linee transgeniche sono state generalmente comparabili con i controlli parentali, tranne in due linee Cry1Aa accumulando, che ha esibito un&#39;alta frequenza di piante non-vero tipo. Infestazione naturale &egrave; stata assistita con manuale infestazioni di larve L2/L3 SSB negli impianti di controllo di confine che circondano le trame sperimentale, che ha servito come un serbatoio per la popolazione di SSB secondo ciclo. L&#39;osservazione dei danni (lesioni marroni e cuori morti durante la stagione del raccolto) e dissezione delle piante in fase di raccolta ha rivelato una gamma di protezione tra le linee transgeniche, che era estremamente coerente con il livello di accumulo di tossine e con precedente esperienza in dosaggi di serra. Linee A3.4 e S05.1 sono stati trovati ad esporre stabile e completa protezione contro gli attacchi SSB, mediata dall&#39;accumulo di tossine Cry1B e Cry1Aa, rispettivamente, che era paragonabile a quello offerto dall&#39;irrorazione di insetticidi chimici sulle piante di controllo. La linea A9.1 indotta da ferita esposta un livello soddisfacente di protezione, con un particolare basso livello di penetrazione delle larve SSB in fusti, ma i sintomi esterni superiori rispetto alle linee costitutive, probabilmente a causa del ritardo di beneficiare dell&#39;effetto protettivo di Cry1B.

BT riso harbouring geni cry controllati da un promotore costitutivo o ferito-inducible: protezione ed espressione del transgene sotto Mediterraneo condizioni di campo.

7 &#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x63A5;&#x5408;&#x4F53;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x884C; 2 &#x30E8;&#x30FC;&#x30ED;&#x30C3;&#x30D1;&#x5546;&#x696D;&#x54C1;&#x7A2E;&#x7C73; (&#x30A2;&#x30EA;&#x30A8;&#x30C6; (A) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30BB;&#x30CB;&#x30A2; (S)) &#x306E; cry1B &#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x54FA;&#x4E73;&#x30D0;&#x30C1;&#x30EB;&#x30B9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B9; &#xFF08;Bt&#xFF09; &#x306E;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4FDD;&#x6709;&#x3001;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF; &#x30FB; &#x30C7; &#x30FB; l&#39;Ebre &#x5730;&#x57DF;&#x3001;&#x30B9;&#x30DA;&#x30A4;&#x30F3; 2001&#x5E74; &#xFF5E; 2002 &#x5E74;&#x590F;&#x306E;&#x4F5C;&#x7269;&#x306E;&#x5B63;&#x7BC0;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x5E79;&#x4E2D;&#x304F;&#x308A;&#x76E4; (SSB) (&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5E7C;&#x866B;) &#x640D;&#x50B7;&#x304B;&#x3089;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A55;&#x4FA1;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x30B3;&#x30C9;&#x30F3;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x6BD2;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x6210; 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SSB &#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x6D78;&#x900F;&#x306B;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;

Bt &#x30B3;&#x30E1;&#x6F5C;&#x4F0F;&#x53EB;&#x3073;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x69CB;&#x6210;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x50B7;&#x8A98;&#x5C0E;&#x578B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;: &#x4FDD;&#x8B77;&#x3068;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x5730;&#x4E2D;&#x6D77;&#x4E0B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

&#xC300; (Ariete (A)&#xC640; Senia (S))&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC720;&#xB7FD; &#xC0C1;&#xC5C5; cultivars&#xC758; 7 homozygous &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778; cry1B &#xB610;&#xB294; cry1Aa &#xC0C8; &#xADE0;&#xC758; thuringiensis (Bt) &#xB378;&#xD0C0; &#xB0B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC740;&#xB2C9;, &#xD544;&#xB4DC; &#xB378;&#xD0C0; &#xB4DC; l&#39;Ebre &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC758; &#xC2A4;&#xD398;&#xC778; 2001&#xACFC; 2002 &#xC5EC;&#xB984; &#xC791;&#xBB3C; &#xACC4;&#xC808; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC904;&#xAE30; &#xAD6C;&#xBA4D; &#xB6AB;&#xB294; (SSB) (&#xCE74;&#xC77C; suppressalis) &#xC190;&#xC0C1; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBCF4;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xC7A5; codon&#xC5D0; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xC815; ubi1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB610;&#xB294; &#xC625;&#xC218;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xCC98;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; mpi &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC30;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC548;&#xC815; &#xB41C;, &#xACE0;&#xAE09;, insecticidal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xCD95;&#xC801; (A64.1, A33.1, A3.4 &#xBC0F; S98.9 &#xB77C;&#xC778;) cry1B &#xC624; &#xD544;&#xB4DC; &#xC7AC;&#xBC30; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xBFCC;&#xB9AC;, &#xC78E;&#xACFC; &#xC528;&#xC557; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xB610;&#xB294; cry1Aa ubi1 &#xBAA8;&#xD130; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; (&#xC120; S05.1 &#xBC0F; A19.14). &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, &#xC544;&#xB2C8; &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC0C1;&#xCC98;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; mpi &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; cry1B &#xC9C4; &#xC624; A9.1 &#xB77C;&#xC778; unwounded &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB3C5; &#xC18C; A9.1 &#xCE7C; &#xC9D1; &#xC870;&#xC9C1; SSB &#xC190;&#xC0C1; &#xC73C;&#xB85C;&#xBD80;&#xD130; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC08;&#xC0C9; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xC804;&#xC2DC;&#xC5D0; 0.2% &#xCD1D; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801;. &#xC870;&#xAC01; &#xD2B9;&#xC131; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xB450; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xC804;&#xC2DC; &#xCD95;&#xC801; Cry1Aa &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC785;&#xB825; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; true&#xB97C; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBD80;&#xBAA8;&#xC758; &#xD1B5;&#xC81C;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC790;&#xC5F0; &#xAC10;&#xC5FC; 2 &#xC8FC;&#xAE30; SSB &#xC778;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xC218;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD50C;&#xB86F;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; L2/L3 SSB &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xC218;&#xB3D9; &#xCE68;&#xC785; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC190;&#xC0C1; (&#xAC08;&#xC0C9; &#xBCD1; &#xBCC0; &#xBC0F; &#xC790;&#xB974;&#xAE30; &#xC2DC;&#xC98C; &#xB3D9;&#xC548; &#xC8FD;&#xC740; &#xB9C8;&#xC74C;)&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xBC0F; &#xC218;&#xD655; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xD574; &#xBD80; &#xBC1D;&#xD600; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB77C;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; &#xBCF4;&#xD638; &#xBC94;&#xC704; &#xB3C5; &#xC18C; &#xCD95;&#xC801;&#xC758; &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xC628;&#xC2E4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC77C;&#xAD00; &#xD588;&#xB2E4;. A3.4 &#xBC0F; S05.1 &#xB77C;&#xC778; &#xC804;&#xC2DC; SSB &#xACF5;&#xACA9;, &#xAC01;&#xAC01; Cry1B &#xBC0F; Cry1Aa &#xB3C5; &#xC18C;&#xC758; &#xCD95;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC804;&#xCCB4; &#xBCF4;&#xD638; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD654;&#xD559; &#xC0B4;&#xCDA9;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0B4;&#xD3EC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5EC;&#xC720;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xD588;&#xB2E4;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0C1;&#xCC98; &#xC720;&#xBC1C; A9.1 &#xC120; &#xC904;&#xAE30;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB9C8; cry1b&#xC758; &#xBCF4;&#xD638; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB204;&#xB9B4; &#xC218; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC815; &#xB77C;&#xC778; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; &#xC99D;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; SSB &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C;&#xC758; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CC;&#xC871; &#xC2A4;&#xB7EC;&#xC6B4; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xBCF4;&#xD638;, &#xC804;&#xC2DC;.

Bt &#xC300; &#xC81C;&#xC815; &#xB610;&#xB294; &#xC0C1;&#xCC98;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; harbouring &#xC6B8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;: &#xBCF4;&#xD638;&#xC640; &#xC9C0;&#xC911;&#xD574; &#xC544;&#xB798; transgene &#xC2DD; &#xD544;&#xB4DC; &#xC870;&#xAC74;.

Siete l&iacute;neas transg&eacute;nicas homocig&oacute;ticas de dos cultivares comerciales europeos de arroz (Ariete (A) y Senia (S)), dan cobijo a los genes de delta-endotoxina de Bacillus thuringiensis (Bt) cry1B o cry1Aa, eran campo evaluado para protecci&oacute;n de v&aacute;stago rayas barrenadores (SSB) (Chilo suppressalis) durante las temporadas de cosecha de verano 2001 y 2002 en la regi&oacute;n del Delta de l &#39; Ebre, Espa&ntilde;a. El gen de la toxina cod&oacute;n optimizado de planta qued&oacute; bajo el control del promotor del gen ubi1 constitutiva o el gen mpi inducible por la herida de ma&iacute;z. Acumulaci&oacute;n de la prote&iacute;na insecticida, estable y alto nivel se observ&oacute; a lo largo de los tejidos de la ra&iacute;z, hojas y semillas de plantas de producci&oacute;n que dan cobijo a la cry1B (l&iacute;neas A3.4, A64.1, A33.1 y S98.9) o cry1Aa genes (l&iacute;neas S05.1 y A19.14) bajo el control del promotor ubi1. Por el contrario, ninguna toxina fue detectada en tejidos unwounded vegetativos de la l&iacute;nea A9.1 albergar el gen cry1B controlado por el promotor de mpi, indicando que el estr&eacute;s ambiental naturales no desencadenan la actividad del promotor inducible por la herida. Sin embargo, la toxina se acumula 0.2% prote&iacute;nas solubles totales en el tejido de la vaina A9.1 exhibiendo lesiones marr&oacute;n que resultan del da&ntilde;o SSB. Las caracter&iacute;sticas agron&oacute;micas y rendimiento de las l&iacute;neas transg&eacute;nicas eran generalmente comparables con control parental, excepto en las dos l&iacute;neas acumulando Cry1Aa, que exhiben una alta frecuencia de plantas no-verdadero para escribir. Infestaci&oacute;n natural fue asistida con manual infestaciones de larvas L2/L3 SSB en instalaciones de control de la frontera que rodean las parcelas experimentales, que sirven como un reservorio para la poblaci&oacute;n de SSB de segundo ciclo. La observaci&oacute;n de da&ntilde;os (lesiones marrones y corazones muertos durante la temporada de cultivo) y la disecci&oacute;n de las plantas en etapa de cosecha revelaron una gama de protecci&oacute;n entre las l&iacute;neas transg&eacute;nicas, que era altamente compatible con el nivel de acumulaci&oacute;n de toxinas y con experiencia previa en ensayos de invernadero. L&iacute;neas A3.4 y S05.1 fueron encontradas para exhibir estable y completa protecci&oacute;n contra ataques SSB, mediada por la acumulaci&oacute;n de toxinas Cry1B y Cry1Aa, respectivamente, que fue comparable con la ofrecida por la fumigaci&oacute;n de insecticidas qu&iacute;micos en las plantas control. La l&iacute;nea A9.1 inducidas por herida exhibi&oacute; un nivel satisfactorio de protecci&oacute;n, con un nivel bajo en particular de la penetraci&oacute;n de larvas SSB en los tallos, pero mayores s&iacute;ntomas externos que l&iacute;neas constitutivas, probablemente debido a la temporizaci&oacute;n para aprovechar el efecto protector de Cry1B.

BT arroz que genes de grito controlados por un promotor inducible por la herida o constitutivo: condiciones del campo de la protecci&oacute;n y la expresi&oacute;n del transg&eacute;n en el Mediterr&aacute;neo.

&#x7389;&#x7C73;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (mpi) &#x57FA;&#x56E0;&#x5F15;&#x5165;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x82F1;&#x7CB3;&#x7A3B;&#x54C1;&#x79CD;&#x3002;Mpi &#x57FA;&#x56E0;&#x7389;&#x7C73;&#x6CDB;&#x7D20; 1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x7684;&#x672C;&#x6784;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x4F24;&#x53E3;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; mpi &#x81EA;&#x8EAB;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9A71;&#x52A8;&#x5BFC;&#x81F4; MPI &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;Mpi &#x8868;&#x793A;&#x884C;&#x8BF4;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x690D;&#x7269;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x8FDE;&#x7EED;&#x51E0;&#x4EE3;&#x7684; mpi &#x6C34;&#x7A3B;&#x989D;&#x5EA6; (T(4) &#x4EE3;) &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x529F;&#x80FD; MPI &#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x3002;Mpi &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x6C34;&#x7A3B;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x5F3A;&#x6297;&#x879F; (&#x4E8C;&#x5316;&#x879F;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x6C34;&#x7A3B;&#x5BB3;&#x866B;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; mpi &#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x5BF9; C.&#x879F;&#x5E7C;&#x866B;&#x751F;&#x957F;&#x53CA;&#x6606;&#x866B;&#x6D88;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6548;&#x679C;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x3002;&#x6709;&#x4EBA;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x51CF;&#x5C11; C.&#x879F;&#x5E7C;&#x866B; mpi &#x6C34;&#x7A3B;&#xFF0C;&#x76F8;&#x6BD4;&#x5E7C;&#x866B;&#x53D6;&#x98DF;&#x672A;&#x53D8;&#x5F62;&#x7684;&#x6C34;&#x7A3B;&#x690D;&#x682A;&#xFF0C;&#x7F8E;&#x8054;&#x50A8;&#x7684;&#x5E7C;&#x866B;&#x4F53;&#x91CD;&#x3002;C.&#x879F;&#x7684;&#x80A0;&#x9053;&#x6D88;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5E7C;&#x866B;&#x9002;&#x5E94; mpi &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x6D88;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x8865;&#x5145;&#xFF1A; &#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x548C;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178; endoproteinases &#x4EE5;&#x53CA; exopeptidases &#x4EAE;&#x6C28;&#x9178;&#x6C28;&#x57FA;&#x80BD;&#x9176;&#x548C; carboxypeptidases A &#x548C; B&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x611F;&#x5E94;&#x5E76;&#x4E0D;&#x59A8;&#x788D; MPI &#x5BF9;&#x5E7C;&#x866B;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6709;&#x5BB3;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;Mpi &#x57FA;&#x56E0;&#x5BFC;&#x5165;&#x6C34;&#x7A3B;&#x690D;&#x682A;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x6709;&#x53EF;&#x4E3A;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x5BF9;&#x879F;&#x6C34;&#x7A3B;&#x690D;&#x7269;&#x4FDD;&#x62A4;&#x3002;

&#x7389;&#x7C73;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (mpi) &#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x6C34;&#x7A3B;&#x690D;&#x682A;&#x4E2D;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x6297;&#x879F; (&#x4E8C;&#x5316;&#x879F;&#xFF09;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x5E7C;&#x866B;&#x751F;&#x957F;&#x53CA;&#x6606;&#x866B;&#x80A0;&#x9053;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3002;

The maize proteinase inhibitor (mpi) gene was introduced into two elite japonica rice varieties. Both constitutive expression of the mpi gene driven by the maize ubiquitin 1 promoter and wound-inducible expression of the mpi gene driven by its own promoter resulted in the accumulation of MPI protein in the transgenic plants. No effect on plant phenotype was observed in mpi-expressing lines. The stability of transgene expression through successive generations of mpi rice lines (up to the T(4) generation) and the production of functional MPI protein were confirmed. Expression of the mpi gene in rice enhanced resistance to the striped stem borer (Chilo suppressalis), one of the most important pests of rice. In addition, transgenic mpi plants were evaluated in terms of their effects on the growth of C. suppressalis larvae and the insect digestive proteolytic system. An important dose-dependent reduction of larval weight of C. suppressalis larvae fed on mpi rice, compared with larvae fed on untransformed rice plants, was observed. Analysis of the digestive proteolytic activity from the gut of C. suppressalis demonstrated that larvae adapted to mpi transgene expression by increasing the complement of digestive proteolytic activity: the serine and cysteine endoproteinases as well as the exopeptidases leucine aminopeptidase and carboxypeptidases A and B. However, the induction of such proteolytic activity did not prevent the deleterious effects of MPI on larval growth. The introduction of the mpi gene into rice plants can thus be considered as a promising strategy to protect rice plants against striped stem borer.

Expression of the maize proteinase inhibitor (mpi) gene in rice plants enhances resistance against the striped stem borer (Chilo suppressalis): effects on larval growth and insect gut proteinases.

Le g&egrave;ne inhibiteur (mpi) de prot&eacute;inase de ma&iuml;s a &eacute;t&eacute; introduit dans les deux vari&eacute;t&eacute;s de riz japonica &eacute;lite. L&#39;expression constitutive du g&egrave;ne mpi pilot&eacute;e par le promoteur de l&#39;ubiquitine-ma&iuml;s 1 tant l&#39;expression inductible par blessure du g&egrave;ne mpi entra&icirc;n&eacute;e par son propre promoteur entra&icirc;ne l&#39;accumulation de la prot&eacute;ine MPI dans les plantes transg&eacute;niques. Aucun effet sur le ph&eacute;notype de la plante a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e chez les lign&eacute;es exprimant le mpi. La stabilit&eacute; d&#39;expression du transg&egrave;ne au fil des g&eacute;n&eacute;rations successives de lign&eacute;es de riz mpi (jusqu&#39;&agrave; la g&eacute;n&eacute;ration de T(4)) et la production d&#39;une prot&eacute;ine fonctionnelle MPI ont &eacute;t&eacute; confirm&eacute;s. L&#39;expression du g&egrave;ne mpi riz am&eacute;lior&eacute; la r&eacute;sistance &agrave; la bostryche ray&eacute; (Chilo suppressalis), un des ravageurs plus importants du riz. En outre, les plantes transg&eacute;niques mpi ont &eacute;t&eacute; &eacute;valu&eacute;s en fonction de leurs effets sur la croissance des larves de c. suppressalis et le syst&egrave;me prot&eacute;olytique digestif insecte. Une importante r&eacute;duction dose-d&eacute;pendante du poids des larves de c. suppressalis que riz mpi, par rapport aux larves nourries sur des plants de riz non transform&eacute;, se nourrissent des larves a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e. Analyse de l&#39;activit&eacute; prot&eacute;olytique digestive de l&#39;intestin de c. suppressalis a d&eacute;montr&eacute; que larves adapt&eacute; &agrave; l&#39;expression du transg&egrave;ne mpi en augmentant le compl&eacute;ment d&#39;activit&eacute;s prot&eacute;olytiques digestives : la s&eacute;rine et la cyst&eacute;ine endoprot&eacute;inases ainsi que les exopeptidases leucine aminopeptidase et carboxypeptidases A et B. Toutefois, l&#39;induction d&#39;une telle activit&eacute; prot&eacute;olytique n&#39;a pas emp&ecirc;ch&eacute; les effets d&eacute;l&eacute;t&egrave;res de MPI sur la croissance des larves. L&#39;introduction du g&egrave;ne mpi dans les plants de riz peut donc &ecirc;tre consid&eacute;r&eacute;e comme une strat&eacute;gie prometteuse pour prot&eacute;ger les plants de riz contre le bostryche ray&eacute;.

L&#39;expression du g&egrave;ne inhibiteur (mpi) ma&iuml;s prot&eacute;inase dans les plants de riz am&eacute;liore la r&eacute;sistance contre le bostryche ray&eacute; (Chilo suppressalis): effets sur la croissance des larves et des prot&eacute;ases intestinales insectes.

Das Mais-Proteinase-Inhibitor (Mpi)-Gen wurde in zwei Auslese Japonica-Reis-Sorten eingef&uuml;hrt. Konstitutive Expression des Gens Mpi, angetrieben durch den Projekttr&auml;ger Mais Ubiquitin 1 und Wunde-inducible Ausdruck des Gens Mpi, angetrieben durch eine eigene Projekttr&auml;ger f&uuml;hrte die Anh&auml;ufung von MPI-Protein in den transgenen Pflanzen. Keine Auswirkung auf die Pflanze Ph&auml;notyp wurde in Mpi-Ausdr&uuml;cken Linien beobachtet. Die Stabilit&auml;t der Transgenexpression &uuml;ber aufeinanderfolgende Generationen von Mpi-Reis-Kan&auml;le (bis zu den T(4) Generation) und die Produktion von funktionalen MPI-Protein wurden best&auml;tigt. Ausdruck des Gens Mpi Reis verbesserte Resistenz gegen die gestreiften Vorbau-Bohrmaschine (Chilo Suppressalis), einer der wichtigsten Sch&auml;dlinge von Reis. Dar&uuml;ber hinaus wurden transgene Mpi Pflanzen im Hinblick auf ihre Auswirkungen auf das Wachstum von C. Suppressalis-Larven und Insekten verdauungsf&ouml;rdernde proteolytische System evaluiert. Eine wichtige dosisabh&auml;ngige Senkung der larvalen Gewicht von C. Suppressalis-Larven auf Mpi Reis, verglichen mit Larven gef&uuml;ttert untransformierte Reispflanzen, gef&uuml;ttert wurde beobachtet. Analyse der verdauungsf&ouml;rdernde proteolytische Aktivit&auml;t aus dem Bauch heraus von C. Suppressalis gezeigt, dass Larven an Mpi Transgenexpression angepasst werden, indem das Komplement des Verdauungssystems proteolytische Aktivit&auml;t erh&ouml;hen: die Serin und Cystein-Endoproteinases sowie die Exopeptidases Leucin-Aminopeptidase und Carboxypeptidasen A und B. Die Induktion von solchen proteolytische Aktivit&auml;t verhinderte jedoch nicht die sch&auml;dlichen Auswirkungen des MPI auf larvalen Wachstum. Die Einschleppung des Mpi-Gens Reispflanzen kann somit eine viel versprechende Strategie als Reispflanzen gegen gestreifte Stengel-Bohrmaschine zu sch&uuml;tzen.

Expression des Gens Mais Proteinase Inhibitor (Mpi) in Reispflanzen erh&ouml;ht die Widerstandsf&auml;higkeit gegen die gestreiften Vorbau-Bohrmaschine (Chilo Suppressalis): Auswirkungen auf larvalen Wachstum und Insekt Darm Proteinasen.

Il gene inibitore (mpi) proteinasi mais fu introdotto in due variet&agrave; di riso japonica d&#39;elite. Espressione costitutiva del gene mpi guidato dal promotore di ubiquitin mais 1 sia ferita-inducible espressione del gene mpi guidato dal proprio promotore ha provocato l&#39;accumulo di proteine MPI nelle piante transgeniche. Nessun effetto sul fenotipo della pianta &egrave; stata osservata in linee che esprimono mpi. La stabilit&agrave; dell&#39;espressione del transgene attraverso successive generazioni di linee riso mpi (fino alla generazione di T(4)) e la produzione di proteina funzionale MPI sono stati confermati. Espressione del gene mpi in riso migliorata resistenza alla piralide fusto striato (Chilo suppressalis), uno dei pi&ugrave; importanti parassiti del riso. Inoltre, piante transgeniche mpi sono stati valutati in termini dei loro effetti sulla crescita delle larve di c. suppressalis e il sistema proteolitico digestivo dell&#39;insetto. Un&#39;importante riduzione dose-dipendente del peso larvale di larve di suppressalis c. nutriti con riso mpi, confrontato con le larve nutrite su piante di riso non trasformati, &egrave; stata osservata. L&#39;analisi dell&#39;attivit&agrave; proteolitica digestivo dall&#39;intestino di c. suppressalis ha dimostrato che le larve adattato all&#39;espressione del transgene mpi aumentando il complemento dell&#39;attivit&agrave; proteolitica digestivi: il endoproteinases Serina e cisteina, nonch&eacute; il exopeptidases leucina aminopeptidasi e carbossipeptidasi A e B. Tuttavia, l&#39;induzione di tali attivit&agrave; proteolitica non ha impedito gli effetti deleteri del MPI sulla crescita delle larve. L&#39;introduzione del gene mpi in piante di riso cos&igrave; pu&ograve; essere considerato come una strategia promettente per proteggere le piante di riso contro la piralide stelo rigato.

Espressione del gene inibitore (mpi) mais proteinasi in piante di riso migliora la resistenza contro la piralide fusto striato (suppressalis Chilo): effetti sulla crescita delle larve e proteinases intestino dell&#39;insetto.

&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; (mpi) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30A8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C8;&#x306E; japonica &#x306E;&#x30A4;&#x30CD;&#x54C1;&#x7A2E;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7; &#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3; 1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B; mpi &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x50B7; - &#x306E;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B; mpi &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; MPI &#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;Mpi &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x5F62;&#x8CEA;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;.Mpi &#x30A4;&#x30CD;&#x7CFB;&#x7D71; (T(4) &#x4E16;&#x4EE3;) &#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x9023;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x4E16;&#x4EE3;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x6027;&#x306E; MPI &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x304C;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;.&#x30A4;&#x30CD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; mpi &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x5F37;&#x5316;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x5E79;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A6; &#xFF08;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5E7C;&#x866B;) &#x62B5;&#x6297;&#x6027;&#x30A4;&#x30CD;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5BB3;&#x866B;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF; mpi &#x690D;&#x7269; C. &#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x751F;&#x80B2;&#x3068;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306E;&#x89B3;&#x70B9;&#x304B;&#x3089;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x524A;&#x6E1B; mpi &#x7C73;&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x672A;&#x5909;&#x63DB;&#x6C34;&#x7A32;&#x306E;&#x4F9B;&#x7D66;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x4F9B;&#x7D66; C. &#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x91CD;&#x91CF;&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;C. &#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x7BA1;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x5668;&#x7CFB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x5E7C;&#x866B; mpi &#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x6D88;&#x5316;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x88DC;&#x6570;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9069;&#x5FDC;&#x3053;&#x3068;: &#x30BB;&#x30EA;&#x30FC;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; endoproteinases exopeptidases &#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068; A &#x3068; B &#x306E; carboxypeptidases&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x89E3;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306F; MPI &#x306E;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x751F;&#x80B2;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3092;&#x4E88;&#x9632;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6C34;&#x7A32;&#x3078;&#x306E; mpi &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x5E79;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A6;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30A4;&#x30CD;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x4FDD;&#x8B77;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8003;&#x616E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6C34;&#x7A32;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C8;&#x30A6;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B3;&#x30B7; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; (mpi) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D7;&#x5E79;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30C1;&#x30E5;&#x30A6; &#xFF08;&#x30CB;&#x30AB;&#x30E1;&#x30A4;&#x30AC;&#x5E7C;&#x866B;) &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x6027;: &#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x6606;&#x866B;&#x306E;&#x8178;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x3002;

&#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC131;&#xBD84;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; (mpi) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xB450; &#xC5D8;&#xB9AC;&#xD2B8; japonica &#xC300; &#xD488;&#xC885;&#xC73C;&#xB85C; &#xB3C4;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; 1 &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xB3D9; &#xD558;&#xB294; mpi &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC81C;&#xC815; &#xC2DD; &#xBC0F; mpi &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xD798;&#xC785;&#xC5B4; &#xC0C1;&#xCC98;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; MPI &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xCD95;&#xC801; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC2DD;&#xBB3C; &#xD615;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB77C;&#xC778; mpi &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB204;&#xB300; (T(4) &#xC138;&#xB300;) &#xAE4C;&#xC9C0;&#xC758; mpi &#xC300; &#xC904; &#xD1B5;&#xD574; transgene &#xC2DD;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5; MPI &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC300;&#xC5D0; mpi &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC904;&#xAE30; &#xAD6C;&#xBA4D; &#xB6AB;&#xB294; (&#xCE74;&#xC77C; suppressalis)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D; &#xC300;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD574;&#xCDA9;&#xC758; &#xD558;&#xB098;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; mpi &#xC2DD;&#xBB3C; C. suppressalis &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xACE4;&#xCDA9; &#xC18C;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCE21;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. C. suppressalis &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xD604;&#xC0C1;&#xC740; &#xC300; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xBA39;&#xC774; &#xBE44;&#xD574; mpi &#xC300;&#xC5D0; &#xBA39;&#xC774;&#xC758; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xBB34;&#xAC8C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. C. suppressalis&#xC758; &#xCC3D; &#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18C;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xC18C;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xBCF4;&#xC644;&#xC744; &#xB298;&#xB824; mpi transgene &#xC2DD; &#xC801;&#xC751;: &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0;&#xC640; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD14C;&#xC778; endoproteinases&#xC640; exopeptidases &#xC2E0; aminopeptidase &#xBC0F; carboxypeptidases A&#xC640; B &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; MPI&#xC758; &#xD574;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD6A8;&#xACFC; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC300; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC5D0; mpi &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB3C4;&#xC785; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC904;&#xAE30; &#xBCF4;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xC300; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xBCF4;&#xD638; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC720;&#xB9DD; &#xC804;&#xB7B5;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC300; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC625;&#xC218;&#xC218; &#xC131;&#xBD84; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; (mpi) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB77C;&#xC774;&#xD504; &#xC904;&#xAE30; &#xAD6C;&#xBA4D; &#xB6AB;&#xB294; (&#xCE74;&#xC77C; suppressalis)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;: &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xACE4;&#xCDA9; &#xC6A9;&#xAE30; proteinases&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;.

El gen del inhibidor (mpi) de proteinasa ma&iacute;z fue introducido en dos variedades de arroz jap&oacute;nica &eacute;lite. Expresi&oacute;n constitutiva del gen mpi impulsado por el promotor de la ubiquitina ma&iacute;z 1 tanto expresi&oacute;n inducible por la herida del gen mpi impulsado por su propio promotor dio lugar a la acumulaci&oacute;n de la prote&iacute;na MPI en las plantas transg&eacute;nicas. Se observ&oacute; ning&uacute;n efecto sobre el fenotipo de la planta en l&iacute;neas mpi-expresando. La estabilidad de la expresi&oacute;n del transg&eacute;n a trav&eacute;s de sucesivas generaciones de l&iacute;neas de arroz de mpi (hasta la generaci&oacute;n de T(4)) y la producci&oacute;n de prote&iacute;na funcional de MPI fueron confirmados. Expresi&oacute;n del gen mpi en arroz mayor resistencia a la rayas barrenador (Chilo suppressalis), una de las plagas m&aacute;s importantes del arroz. Adem&aacute;s, las plantas transg&eacute;nicas mpi se evaluaron en t&eacute;rminos de sus efectos sobre el crecimiento de las larvas de C. suppressalis y el sistema proteol&iacute;tico digestivo del insecto. Se observ&oacute; una importante reducci&oacute;n de dosis dependiente del peso larva de C. suppressalis larvas que se alimentan de arroz de mpi, en comparaci&oacute;n con las larvas que se alimentan de las plantas de arroz no transformado. An&aacute;lisis de la actividad proteol&iacute;tica digestiva en el intestino de C. suppressalis demostr&oacute; que las larvas adaptaron a la expresi&oacute;n del transg&eacute;n de mpi incrementando el complemento de la actividad proteol&iacute;tica digestiva: la serina y ciste&iacute;na endoproteinases, as&iacute; como las exopeptidasas leucina aminopeptidasa y Carboxipeptidasas A y B. Sin embargo, la inducci&oacute;n de tal actividad proteol&iacute;tica no previno los efectos delet&eacute;reos de MPI en crecimiento larval. La introducci&oacute;n del gen mpi en plantas de arroz puede considerarse una estrategia prometedora para proteger las plantas de arroz contra el barrenador del tallo de rayas.

Expresi&oacute;n del gen (mpi) inhibidor de la proteinasa de ma&iacute;z en plantas de arroz aumenta la resistencia contra el barrenador de rayas (Chilo suppressalis): efectos sobre el crecimiento larvario y Proteinasas de intestino del insecto.

&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5948;&#x745F;&#x6C0F;&#x83CC; Opc &#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x6709;&#x6548; invasin &#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x65B0;&#x578B;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x53D7;&#x5668; Opc &#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x5E76;&#x6307;&#x51FA; Opc &#x8868;&#x793A;&#x7EC6;&#x83CC;&#x4EA4;&#x4E92; 100 kDa &#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x4EBA;&#x4F53;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5168;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684; alpha actinin&#x3002;Opc &#x8868;&#x8FBE;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684; alpha actinin &#x8BC6;&#x522B;&#x662F;&#x5426;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x53D6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7EAF;&#x5316;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x3002;&#x4E24;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0D;&#x6D89;&#x53CA;&#x4E2D;&#x95F4;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x4E0A;&#x6CA1;&#x6709;&#x660E;&#x663E;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; &alpha;-actinin &#x6B63;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x884C;&#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x5BA1;&#x67E5;&#x540E;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x6210;&#x50CF;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x5171;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4E0E; alpha actinin &#x5948;&#x745F;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5728;&#x957F;&#x65F6;&#x95F4;&#x5185;&#x5316;&#x4E4B;&#x540E;&#x3002;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x6700;&#x521D;&#x53D1;&#x751F;&#x5355;&#x72EC;&#x8F66;&#x53A2;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x83CC;&#x548C; alpha actinin &#x548C; co-compartmentalization &#x9010;&#x6B65;&#x53D1;&#x751F;&#x8D85;&#x8FC7; 8 h &#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x95F4;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x53CA;&#x5948;&#x745F; Opc invasin &#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E; &alpha;-actinin &#x662F;&#x8C03;&#x5236;&#x5668;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x5404;&#x6837;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#xFF0C;&#x5176;&#x9488;&#x5BF9;&#x7684; Opc &#x53EF;&#x4F7F;&#x7EC6;&#x83CC;&#x751F;&#x5B58;/&#x8F6C;&#x79FB;&#x8DE8;&#x5185;&#x76AE;&#x5C4F;&#x969C;&#x3002;

&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5948;&#x745F;&#x6C0F;&#x83CC; Opc invasin &#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x86CB;&#x767D; &alpha;-actinin&#x3002;

Neisseria meningitidis Opc protein is an effective invasin for human endothelial cells. We have investigated novel human endothelial receptors targeted by Opc and observed that Opc-expressing bacteria interacted with a 100 kDa protein in whole-cell lysates of human endothelial and epithelial cells. The identity of the protein was established as alpha-actinin by mass spectrometry. Opc expression was essential for the recognition of alpha-actinin whether provided in a purified form or in cell extracts. The interaction of the two proteins did not involve intermediate molecules. As there was no demonstrable expression of alpha-actinin on the surfaces of any of the eight cell lines studied, the likelihood of the interactions after meningococcal internalization was examined. Confocal imaging demonstrated considerable colocalization of N. meningitidis with alpha-actinin especially after a prolonged period of internalization. This may imply that bacteria and alpha-actinin initially occur in separate compartments and co-compartmentalization occurs progressively over the 8 h infection period used. In conclusion, these studies have identified a novel and an intracellular target for the N. meningitidis Opc invasin. Since alpha-actinin is a modulator of a variety of signalling pathways and of cytoskeletal functions, its targeting by Opc may enable bacteria to survive/translocate across endothelial barriers.

Neisseria meningitidis Opc invasin binds to the cytoskeletal protein alpha-actinin.

Neisseria meningitidis Opc prot&#xE9;ine est une invasine efficace pour les cellules endoth&#xE9;liales humaines. Nous avons &#xE9;tudi&#xE9; de nouveaux r&#xE9;cepteurs humains endoth&#xE9;liales cibl&#xE9;es par l&#x26;#39;OPC et a observ&#xE9; que Opc exprimant bact&#xE9;ries interagissent avec une prot&#xE9;ine de 100 kDa dans des cellules enti&#xE8;res de lysats de cellules endoth&#xE9;liales humaines et des cellules &#xE9;pith&#xE9;liales. L&#x26;#39;identit&#xE9; de la prot&#xE9;ine a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tabli que l&#x26;#39;alpha-actinine par spectrom&#xE9;trie de masse. Expression Opc &#xE9;tait essentiel pour la reconnaissance de l&#x26;#39;alpha-actinine qu&#x26;#39;ils soient fournis sous une forme purifi&#xE9;e ou dans des extraits cellulaires. L&#x26;#39;interaction des deux prot&#xE9;ines ne comportait pas les mol&#xE9;cules interm&#xE9;diaires. Comme il n&#x26;#39;y avait aucune expression tangible de l&#x26;#39;alpha-actinine sur les surfaces de l&#x26;#39;un des huit lign&#xE9;es cellulaires &#xE9;tudi&#xE9;es, la probabilit&#xE9; des interactions apr&#xE8;s internalisation m&#xE9;ningocoque a &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;. Imagerie confocale d&#xE9;montr&#xE9; colocalisation consid&#xE9;rable de N. meningitidis avec l&#x26;#39;alpha-actinine en particulier apr&#xE8;s une longue p&#xE9;riode d&#x26;#39;int&#xE9;riorisation. Cela peut signifier que les bact&#xE9;ries et les alpha-actinine initialement se poser dans des compartiments s&#xE9;par&#xE9;s et co-produit progressivement au cours de la compartimentation de la p&#xE9;riode de 8 h infection utilis&#xE9;e. En conclusion, ces &#xE9;tudes ont identifi&#xE9; un roman et une cible intracellulaire de la invasine N. meningitidis Opc. Depuis l&#x26;#39;alpha-actinine est un modulateur d&#x26;#39;une vari&#xE9;t&#xE9; de voies de signalisation et des fonctions du cytosquelette, son ciblage par Opc peut permettre aux bact&#xE9;ries de survivre / translocation &#xE0; travers les barri&#xE8;res endoth&#xE9;liales.

Neisseria meningitidis Opc invasine lie &#xE0; la prot&#xE9;ine du cytosquelette Alpha-actinine

Neisseria Meningitidis Opc-Protein ist eine wirksame Invasin f&uuml;r menschliche Endothelzellen. Wir haben untersucht, Roman menschliche endotheliale Rezeptoren gezielt durch Opc und beobachtet, dass Opc-Ausdruck Bakterien mit einem 100-kDa-Protein im gesamten Zelllysate menschliche Endothelzellen und epitheliale Zellen interagieren. Die Identit&auml;t des Proteins haben wir durch Massenspektrometrie als Alpha-Actinin gegr&uuml;ndet. OPC-Ausdruck war wesentlich f&uuml;r die Anerkennung von Alpha-Actinin, ob in gereinigter Form oder auszugsweise Zelle bereitgestellt. Das Zusammenspiel der beiden Proteine keine zwischen-Molek&uuml;le umfassen. Da gab es keine nachweisbare Ausdruck des Alpha-Actinin auf studierte die Fl&auml;chen eines der acht Zelllinien, die Wahrscheinlichkeit, dass die Interaktionen nach Meningokokken Internalisierung untersucht wurde. Konfokale Bildgebung zeigte erhebliche Kolokalisation von N. Meningitidis mit Alpha-Actinin vor allem nach einen l&auml;ngeren Zeitraum hinweg Internalisierung. Dies kann bedeuten, dass Bakterien und Alpha-Actinin anf&auml;nglich in getrennte F&auml;cher erfolgen und Co-compartmentalization schrittweise &uuml;ber die 8 h-Infektion Periode verwendet erfolgt. Diese Studien haben abschlie&szlig;end ein Roman und ein intrazellul&auml;rer Ziel f&uuml;r die N. Meningitidis Opc Invasin identifiziert. Da Alpha-Actinin Modulator von einer Vielzahl von Signalwege und Zytoskelett-Funktionen ist, k&ouml;nnen seine Ausrichtung von Opc Bakterien &Uuml;berleben/&uuml;ber endothelialen Barrieren akkumulieren.

Neisseria Meningitidis Opc Invasin bindet an das Zytoskelett Protein Alpha-Actinin.

Neisseria meningitidis proteina Opc &egrave; un invasin efficace per le cellule endoteliali umane. Abbiamo studiato romanzo umani recettori endoteliali mirati di Opc e osservato che batteri Opc-esprimendo interagivano con una proteina di 100 kDa nei lisati di cellule intere di cellule endoteliali ed epiteliali umane. L&#39;identit&agrave; della proteina &egrave; stata fondata come alfa-actinina di spettrometria di massa. OPC espressione era essenziale per il riconoscimento dell&#39;alfa-actinina, se forniti in una forma purificata o in estratti cellulari. L&#39;interazione di due proteine non coinvolgono molecole intermedie. Come non non c&#39;era nessuna espressione di alfa-actinina dimostrabile su superfici di qualsiasi delle linee otto cellulari studiato, la probabilit&agrave; di interazioni dopo interiorizzazione meningococcica &egrave; stata esaminata. Imaging confocale ha dimostrato una notevole presenza di N. meningitidis con alfa-actinina soprattutto dopo un prolungato periodo di interiorizzazione. Ci&ograve; pu&ograve; implicare che batteri e alfa-actinina inizialmente si verificano in compartimenti separati e co-compartmentalization si verifica progressivamente sopra l&#39;infezione h 8 periodo utilizzato. In conclusione, questi studi hanno identificato un romanzo e un bersaglio intracellulare per la N. meningitidis Opc invasin. Poich&eacute; alfa-actinina &egrave; un modulatore di una variet&agrave; di percorsi di segnalazione e delle funzioni del citoscheletro, il targeting di Opc pu&ograve; abilitare batteri di sopravvivere/traslocano nel oltre le barriere endoteliali.

Neisseria meningitidis invasin Opc si lega a proteine citoscheletriche alfa-actinina.

&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;&#x306E;OPC&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;OPC&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x30D2;&#x30C8;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x5185;&#x76AE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5168;&#x7D30;&#x80DE;&#x6EB6;&#x89E3;&#x7269;&#x4E2D;&#x306E;100 kDa&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;OPC&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x83CC;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x4E00;&#x6027;&#x3092;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; OPC&#x306E;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F62;&#x614B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x306B;&#x8A2D;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x3001;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 2&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x9593;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7814;&#x7A76;8&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x660E;&#x767D;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;&#x6027;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x5F8C;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5171;&#x7126;&#x70B9;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5185;&#x5728;&#x5316;&#x306E;&#x5EF6;&#x9577;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;N. meningitidis&#x306E;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x3068;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x5F53;&#x521D;&#x5225;&#x3005;&#x306E;&#x533A;&#x753B;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3001;&#x5171;&#x540C;&#x533A;&#x753B;&#x304C;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;8&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x671F;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x3084;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;OPC&#x30A4;&#x30F3;&#x30D9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x6A19;&#x7684;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;OPC&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x304C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x306E;&#x969C;&#x58C1;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x8EE2;&#x4F4D;&#x3059;&#x308B;/&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6709;&#x52B9;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;OPC&#x30A4;&#x30F3;&#x30D9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

Neisseria meningitidis Opc &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; invasin. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC218;&#xC6A9; Opc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xACFC; Opc &#xD45C;&#xD604; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC140; lysates&#xC5D0; 100 kDa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xAD00;&#xCC30; &#xC870;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131; &#xC54C;&#xD30C; actinin &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xB9BD; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Opc &#xC2DD; &#xC815;&#xC81C; &#xC591;&#xC2DD; &#xB610;&#xB294; &#xC140; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C; &#xC81C;&#xACF5; &#xC5EC;&#xBD80; &#xC54C;&#xD30C; actinin &#xC778;&#xC2DD;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0;&#xB294; &#xC911;&#xAC04; &#xBD84;&#xC790; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC5D0; &#xC54C;&#xD30C;-actinin&#xC758; &#xC544;&#xBB34; &#xB420;&#xC9C0;&#xB3C4; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xBA74;&#xC11C; 8 &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xC5F0;&#xAD6C;, meningococcal &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD55C; &#xD6C4; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;. Confocal &#xC601;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xAD6D;&#xC81C;&#xD654;&#xC758; &#xC7A5;&#xC2DC;&#xAC04;&#xB41C; &#xAE30;&#xAC04; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xD2B9;&#xD788; &#xC54C;&#xD30C;-actinin&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBD81; &#xC544; &#xC77C; meningitidis&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; colocalization. &#xC774; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xAD6C;&#xD68D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC98;&#xC74C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC640; &#xC54C;&#xD30C;-actinin co-compartmentalization &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAE30;&#xAC04; 8 h &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC810;&#xC9C4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC554;&#xC2DC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xB860;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xBC0F; &#xBD81; &#xC544; &#xC77C; meningitidis Opc invasin&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xB300;&#xC0C1; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xD6C4; &#xC54C;&#xD30C; actinin &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; cytoskeletal &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xAE30;, Opc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC758; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;/&#xB0B4; &#xD53C; &#xC7A5;&#xBCBD;&#xC744; &#xAC00;&#xB85C;&#xC9C8;&#xB7EC; &#xC774;&#xB3D9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neisseria meningitidis Opc invasin cytoskeletal &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC54C;&#xD30C;-actinin&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neisseria meningitidis es una prote&#xED;na Opc invasina eficaz para las c&#xE9;lulas endoteliales humanas. Hemos investigado nuevos receptores endoteliales humanas dirigidas por OPC y observ&#xF3; que OPC-expresi&#xF3;n de bacterias interactuado con una prote&#xED;na de 100 kDa en c&#xE9;lulas enteras lisados &#x200B;&#x200B;de c&#xE9;lulas endoteliales humanas y epitelial. La identidad de la prote&#xED;na se estableci&#xF3; como alfa-actinina por espectrometr&#xED;a de masas. Expresi&#xF3;n OPC fue esencial para el reconocimiento de alfa-actinina suministrada ya sea en una forma purificada o en extractos de c&#xE9;lulas. La interacci&#xF3;n de las dos prote&#xED;nas no implican mol&#xE9;culas intermedias. Como no hab&#xED;a expresi&#xF3;n demostrable de alfa-actinina en las superficies de cualquiera de las ocho l&#xED;neas celulares estudiadas, la probabilidad de que las interacciones despu&#xE9;s de la internalizaci&#xF3;n meningoc&#xF3;cica fue examinado. Confocal de im&#xE1;genes demostr&#xF3; colocalizaci&#xF3;n considerable de N. meningitidis con alfa-actinina especialmente despu&#xE9;s de un prolongado per&#xED;odo de internalizaci&#xF3;n. Esto puede implicar que las bacterias y los alfa-actinina inicialmente ocurren en compartimentos separados y co-compartimentaci&#xF3;n se produce progresivamente durante el per&#xED;odo de infecci&#xF3;n 8 h utilizado. En conclusi&#xF3;n, estos estudios han identificado una novela y una diana intracelular para la N. meningitidis Opc invasina. Dado que la alfa-actinina es un modulador de una variedad de v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y de las funciones del citoesqueleto, su orientaci&#xF3;n por OPC puede permitir bacterias para sobrevivir / translocate a trav&#xE9;s de barreras endoteliales.

Neisseria meningitidis Opc invasina se une a la prote&#xED;na del citoesqueleto de alfa-actinina

&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x5948;&#x745F;&#x6C0F;&#x83CC;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x901A;&#x8FC7;&#x5206;&#x5C42;&#x3001; &#x4E00;&#x81F4;&#x548C;&#x534F;&#x8C03;&#x884C;&#x52A8;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; &#xFF1B; &#x4E00;&#x4E9B;&#x4EA4;&#x4E92;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x63A5;&#x53D7;&#x6297;&#x539F;&#x548C;&#x76F8;&#x4F4D;&#x53D8;&#x5316;&#xFF0C;&#x6B64;&#x6218;&#x7565;&#x53EF;&#x5E2E;&#x52A9;&#x514D;&#x75AB;&#x9003;&#x9038;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x9739;&#x96F3;&#xFF0C;Opa &#x548C; Opc &#x4E3B;&#x8981;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7C98;&#x9644;&#x4E8E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x9739;&#x96F3;&#x548C; Opa &#x86CB;&#x767D;&#x8FD8;&#x786E;&#x5B9A;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x867D;&#x7136; Opa &#x548C; Opc &#x4FBF;&#x5229;&#x9AD8;&#x6548;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4E5F;&#x6709;&#x6697;&#x793A;&#x67D0;&#x4E9B;&#x7C98;&#x9644;&#x7D20;&#x53D7;&#x4F53;&#x5BF9;&#x786E;&#x5B9A;&#x611F;&#x67D3;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7AE0;&#x63A2;&#x8BA8;&#x4E86;&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x5165;&#x4FB5;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x4EBA;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x6240;&#x77E5;&#x3002;

&#x8111;&#x819C;&#x708E;&#x7403;&#x83CC;&#x4E0E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Neisseria meningitidis interacts with host tissues through hierarchical, concerted and co-ordinated actions of a number of adhesins; many of which undergo antigenic and phase variation, a strategy that helps immune evasion. Three major structures, pili, Opa and Opc predominantly influence bacterial adhesion to host cells. Pili and Opa proteins also determine host and tissue specificity while Opa and Opc facilitate efficient cellular invasion. Recent studies have also implied a role of certain adhesin-receptor pairs in determining increased host susceptibility to infection. This chapter examines our current knowledge of meningococcal adhesion and invasion mechanisms particularly related to human epithelial and endothelial cells which are of primary importance in the disease process.

Meningococcal interactions with the host.

Neisseria meningitidis interagit avec tissus de l&#x26;#39;h&#xF4;te &#xE0; travers des actions hi&#xE9;rarchiques, concert&#xE9;e et coordonn&#xE9;e d&#x26;#39;un certain nombre d&#x26;#39;adh&#xE9;sines, dont bon nombre subissent antig&#xE9;nique et variation de phase, une strat&#xE9;gie qui aide &#xE9;chapper au syst&#xE8;me immunitaire. Trois grandes structures, les pili, Opa et Opc principalement d&#x26;#39;influencer l&#x26;#39;adh&#xE9;rence des bact&#xE9;ries aux cellules h&#xF4;tes. Pili et prot&#xE9;ines Opa &#xE9;galement d&#xE9;terminer l&#x26;#39;h&#xF4;te et la sp&#xE9;cificit&#xE9; des tissus tout en Opa et Opc faciliter efficace invasion cellulaire. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes ont &#xE9;galement laiss&#xE9; entendre un r&#xF4;le de certains r&#xE9;cepteurs adh&#xE9;sine-paires pour d&#xE9;terminer la susceptibilit&#xE9; accrue aux infections d&#x26;#39;accueil. Ce chapitre examine nos connaissances actuelles de l&#x26;#39;adh&#xE9;sion &#xE0; m&#xE9;ningocoques et les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;invasion en particulier li&#xE9;s &#xE0; l&#x26;#39;homme cellules &#xE9;pith&#xE9;liales et endoth&#xE9;liales qui sont d&#x26;#39;une importance primordiale dans le processus de la maladie.

Interactions avec l&#x26;#39;h&#xF4;te contre le m&#xE9;ningocoque

Neisseria Meningitidis interagiert mit Host-Gewebe durch hierarchische, aufeinander abgestimmte und koordinierte Aktionen verschiedener Adhesins; von denen viele Antigene zu unterziehen und phase Variation, einer Strategie, immun ausweichen. Drei wichtige Strukturen, Pili, Opa und Opc &uuml;berwiegend bakterielle Adh&auml;sion auf Wirtszellen beeinflussen. Pili und Opa-Proteine bestimmen auch Host- und Gewebe Spezifit&auml;t, w&auml;hrend Opa und Opc effizienten zellul&auml;ren Invasion erleichtern. J&uuml;ngste Studien haben ebenfalls eine Rolle von bestimmten Adhesin-Rezeptor-Paaren bei der Bestimmung der Host erh&ouml;hte Infektanf&auml;lligkeit beinhaltet. Dieses Kapitel untersucht die aktuelle Kenntnis der Meningokokken Adh&auml;sion und Invasion Mechanismen, insbesondere mit Bezug zu menschlichen Epithelzellen und endothelial Zellen, die von besonderer Wichtigkeit in den Krankheitsprozess sind.

Meningokokken Interaktionen mit dem Host.

Neisseria meningitidis interagisce con i tessuti dell&#39;ospite attraverso gerarchiche, concertate e coordinate le azioni di un certo numero di adesine; molti che subiscono antigenica e variazione di fase, una strategia che aiuta a evasione immune. Tre strutture principali, pili, Opa e Opc prevalentemente influenza adesione batterica alle cellule ospiti. Pili e proteine Opa anche determinano specificit&agrave; host e tessuto mentre Opa e Opc facilitare l&#39;invasione cellulare efficiente. Studi recenti hanno anche implicito un ruolo di certe coppie adhesin-recettore nel determinare host aumentata suscettibilit&agrave; alle infezioni. Questo capitolo esamina la nostra attuale conoscenza dei meccanismi di adesione e l&#39;invasione meningococci particolarmente legati a cellule epiteliali ed endoteliali umane, che sono di primaria importanza nel processo di malattia.

Vaccino meningococcica interazioni con l&#39;host.

&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6570;&#x3001;&#x968E;&#x5C64;&#x7684;&#x306A;&#x5354;&#x8ABF;&#x3068;&#x5354;&#x8ABF;&#x884C;&#x52D5;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x7D44;&#x7E54;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x3001;&#x6297;&#x539F;&#x3068;&#x306E;&#x4F4D;&#x76F8;&#x5909;&#x52D5;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x56DE;&#x907F;&#x306B;&#x5F79;&#x7ACB;&#x3064;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E09;&#x5927;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;&#x7DDA;&#x6BDB;&#x3001;OPA&#x304A;&#x3088;&#x3073;OPC&#x306F;&#x3001;&#x4E3B;&#x306B;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x83CC;&#x4ED8;&#x7740;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D1;&#x3068;&#x3001;OPC&#x306F;&#x3001;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x6BDB;&#x3068;OPA&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x7D44;&#x7E54;&#x7279;&#x7570;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x969B;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30A2;&#x30C9;&#x30D8;&#x30B7;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30DA;&#x30A2;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x6697;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7AE0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30D2;&#x30C8;&#x4E0A;&#x76AE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;&#x306E;&#x4ED8;&#x7740;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4FB5;&#x5165;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x77E5;&#x8B58;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;&#x9AC4;&#x819C;&#x708E;&#x83CC;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;

Neisseria meningitidis adhesins; &#xC218;&#xC758; &#xACC4;&#xCE35;&#xC801;, &#xD611;&#xC870;&#xC640; &#xACF5;&#xB3D9;-ordinated &#xD589;&#xB3D9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC870;&#xC9C1;&#xC744; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBC1B; &#xB2E4; &#xBC0F; &#xC704;&#xC0C1; &#xBCC0;&#xD654;, &#xBA74;&#xC5ED; &#xD68C;&#xD53C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC804;&#xB7B5;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740;. 3 &#xC8FC;&#xC694; &#xAD6C;&#xC870;, pili, Opa &#xBC0F; Opc &#xC8FC;&#xB85C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC140;&#xC5D0; &#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;. Pili &#xBC0F; Opa &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB610;&#xD55C; Opa &#xBC0F; Opc &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE68;&#xC785;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC0F; &#xC870;&#xC9C1; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; adhesin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC30D; &#xC99D;&#xAC00; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAC10;&#xC5FC; &#xC790;&#xD654; &#xC728;&#xC744; &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC554;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC758; &#xC778; &#xC778;&#xAC04; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828;&#xC774; meningococcal &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; &#xCE68;&#xC785; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; meningococcal &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neisseria meningitidis interact&#xFA;a con los tejidos del hu&#xE9;sped a trav&#xE9;s de acciones jer&#xE1;rquicas, concertada y coordinada de una serie de adhesinas, muchos de los cuales sufren antig&#xE9;nica y la variaci&#xF3;n de fase, una estrategia que ayuda a la evasi&#xF3;n inmune. Tres grandes estructuras, Pili, la OPA y OPC sobre todo influir en la adhesi&#xF3;n bacteriana a las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped. Pili y prote&#xED;nas Opa tambi&#xE9;n determinan de acogida y la especificidad tisular, mientras Opa y OPC facilitar la invasi&#xF3;n celular eficiente. Estudios recientes han implicado tambi&#xE9;n un papel de ciertos adhesina-receptor pares en la determinaci&#xF3;n de la susceptibilidad del hu&#xE9;sped a las infecciones. Este cap&#xED;tulo examina los conocimientos actuales de la adhesi&#xF3;n meningoc&#xF3;cica y los mecanismos de invasi&#xF3;n en particular en relaci&#xF3;n a las c&#xE9;lulas epiteliales y endoteliales, que son de importancia primordial en el proceso de la enfermedad.

Isabel Murillo

Department of Cellular and Molecular Medicine

University of Bristol, UK

Visualisation and Quantification of Intracellular Interactions of Neisseria meningitidis and Human α-actinin by Confocal Imaging