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Associated Chromosome Trap for Identifying Long-range DNA Interactions

Genetic information encoded by DNA is organized in a complex and highly regulated chromatin structure.  Each chromosome occupies a specific territory, ...

Stanford University School of Medicine

Ibridazione sottrattiva soppressione &egrave; stato utilizzato per costruire una libreria di cDNA sottrattive da piante non sommersa e sommerso 7-giorno riso (Oryza sativa L., FR13A, una cultivar tollerante sommersione). Un clone della libreria cDNA sottrattive, S23, &egrave; stata espressa abbondantemente durante l&#39;immersione. L&#39;intera lunghezza della S23 &egrave; stata amplificata con 5&#39;-e 3&#39;-amplificazione rapida delle estremit&agrave; del cDNA e trovato a consistere di 1.671 bp con un open reading frame di 1.077 bp (181-1257) codifica 358 aminoacidi. La sequenza aminoacidica dedotta ha mostrato un&#39;elevata omologia con monogalattosildiacilglicerolo sintasi (UDPgalactose: 1,2-diacilglicerolo 3-beta-D-galattosil transferasi; CE 2.4.1.46, MGDG sintasi) da Arabidopsis thaliana; Pertanto, abbiamo chiamato il gene OsMGD. Tempo-corso di studi ha dimostrato che l&#39;espressione di OsMGD nella cultivar di riso FR13A e IR42 (cultivar suscettivo di sommersione) durante la sommersione &egrave; stato gradualmente aumentato e quell&#39;espressione in FR13A era superiore in IR42. L&#39;espressione di OsMGD in FR13A &egrave; stato influenzato da benzyladenine e illuminazione. L&#39;accumulo di mRNA di OsMGD sia FR13A che IR42 &egrave; stato anche aumentato di etefon, gibberellina, siccit&agrave; e salata trattamento, ma stress da freddo ha avuto alcun effetto sull&#39;espressione del gene. Questi risultati suggeriscono che l&#39;espressione del mRNA di OsMGD richiede benzyladenine o illuminazione, e che il processo &egrave; anche mediato da etefon e gibberellina. Lo stress sale e siccit&agrave; hanno un effetto simile a quello di sommersione. Inoltre, la maggiore espressione di OsMGD pu&ograve; si riferiscono alla fotosintesi e gioca un ruolo importante durante l&#39;immersione.

Clonazione di un gene putativo monogalattosildiacilglicerolo sintasi di piante di riso (Oryza sativa L.) e la sua espressione in risposta a sommersione e altre sollecitazioni.

&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x6D88;&#x51CF;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x7528;&#x4E8E;&#x6784;&#x9020;&#x6D88;&#x51CF; cDNA &#x6587;&#x5E93;&#x7684;&#x975E;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x548C; 7 &#x5929;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x6C34;&#x7A3B; &#xFF08;&#x6C34;&#x7A3B;&#xFF0C;FR13A&#xFF0C;&#x8010;&#x6DF9;&#x6D9D;&#x54C1;&#x79CD;&#xFF09; &#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x514B;&#x9686;&#x7684; cDNA &#x6587;&#x5E93;&#xFF0C;S23&#xFF0C;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x671F;&#x95F4;&#x6709;&#x4EBA;&#x6E05;&#x695A;&#x3002;S23 &#x7684;&#x5168;&#x957F;&#x653E;&#x5927;&#x4F7F;&#x7528; 5&#39;-3&#39;-&#x5FEB;&#x901F;&#x6269;&#x589E;&#x7684; cDNA &#x672B;&#x7AEF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7531; 1,671 &#x7EC4;&#x6210; 1,077 bp (181-1257&#xFF09; &#x7F16;&#x7801; 358 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5F00;&#x653E;&#x8BFB;&#x6846;&#x4E0E; bp&#x3002;&#x5176;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x663E;&#x793A; monogalactosyldiacylglycerol &#x5408;&#x9176;&#x4E0E;&#x9AD8;&#x540C;&#x6E90;&#x6027; (UDPgalactose: 1&#xFF0C;2-&#x7518;&#x6CB9;&#x4E8C;&#x916F; 3-&beta;-D-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; &#xFF1B;EC 2.4.1.46&#xFF0C;MGDG &#x5408;&#x9176;) &#x4ECE;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x547D;&#x540D;&#x4E3A; OsMGD &#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; OsMGD FR13A &#x548C; IR42 &#x7684;&#x6C34;&#x7A3B;&#x54C1;&#x79CD; (&#x6DF9;&#x6CA1;&#x6613;&#x611F;&#x54C1;&#x79CD;&#xFF09; &#x671F;&#x95F4;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x9010;&#x6E10;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x9AD8;&#x4E8E; IR42&#xFF0C;&#x5728; FR13A &#x4E2D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x5728; FR13A OsMGD &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D7;&#x5230;&#x82C4;&#x548C;&#x7167;&#x660E;&#x3002;&#x5728; FR13A &#x548C; IR42 OsMGD mRNA &#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E5F;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x4E59;&#x70EF;&#x5229;&#x3001; &#x8D64;&#x9709;&#x7D20;&#x3001; &#x5E72;&#x65F1;&#x548C;&#x76D0;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x4F46;&#x51B7;&#x5E94;&#x6FC0;&#x4E86;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; OsMGD mRNA &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x9700;&#x8981;&#x82C4;&#x6216;&#x7167;&#x660E;&#xFF0C;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x8FD8;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x4E59;&#x70EF;&#x5229;&#x548C;&#x8D64;&#x9709;&#x7D20;&#x3002;&#x5E72;&#x65F1;&#x548C;&#x76D0;&#x80C1;&#x8FEB;&#x6709;&#x6548;&#x679C;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; OsMGD &#x53EF;&#x80FD;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230;&#x5149;&#x5408;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x548C;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x671F;&#x95F4;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x514B;&#x9686; (&#x6C34;&#x7A3B;) &#x6C34;&#x7A3B;&#x690D;&#x682A;&#x5047;&#x5B9A; monogalactosyldiacylglycerol &#x5408;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x53CA;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E94;&#x529B;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;

Suppression subtractive hybridization was used to construct a subtractive cDNA library from plants of non-submerged and 7-day-submerged rice (Oryza sativa L., FR13A, a submergence-tolerant cultivar). One clone of the subtractive cDNA library, S23, was expressed abundantly during submergence. The full length of S23 was amplified using 5'- and 3'-rapid amplification of cDNA ends, and found to consist of 1,671 bp with an open reading frame of 1,077 bp (181-1257) encoding 358 amino acids. Its deduced amino acid sequence showed a high homology with monogalactosyldiacylglycerol synthase (UDPgalactose: 1,2-diacylglycerol 3-beta-D-galactosyl transferase; EC 2.4.1.46, MGDG synthase) from Arabidopsis thaliana; therefore, we named the gene OsMGD. Time-course studies showed that the expression of OsMGD in the rice cultivars FR13A and IR42 (submergence-susceptive cultivar) during submergence was gradually increased and that expression in FR13A was higher than in IR42. The expression of OsMGD in FR13A was influenced by benzyladenine and illumination. The accumulation of OsMGD mRNA in both FR13A and IR42 was also increased by ethephon, gibberellin, drought and salt treatment, but cold stress had no effect on the expression of the gene. These results suggest that the expression of OsMGD mRNA requires benzyladenine or illumination, and that the process is also mediated by ethephon and gibberellin. Salt and drought stress have an effect similar to that of submergence. Furthermore, the enhanced expression of OsMGD may relate to photosynthesis, and play an important role during submergence.

Cloning of a putative monogalactosyldiacylglycerol synthase gene from rice (Oryza sativa L.) plants and its expression in response to submergence and other stresses.

Hybridation soustractive de r&eacute;pression a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour construire une banque d&#39;ADNc soustractives de plantes non immerg&eacute;es et 7-jour-submerg&eacute;e de riz (Oryza sativa L., FR13A, un cultivar tol&eacute;rant &agrave; la submersion). Un clone de l&#39;ADNc soustractives, S23, a &eacute;t&eacute; abondamment exprim&eacute; durant la submersion. La longueur totale de S23 a &eacute;t&eacute; amplifi&eacute;e &agrave; l&#39;aide de 5&#39;-et 3&#39;-rapid amplification des extr&eacute;mit&eacute;s d&#39;ADNc et elles se composent de 1 671 bp avec un cadre de lecture ouvert de 1 077 bp (181-1257) codage 358 aminoacides. Sa s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une forte homologie avec monogalactosyldiacylglyc&eacute;rol synthase (UDPgalactose: 1, 2-diacylglyc&eacute;rol 3-b&ecirc;ta-D-galactosyl transf&eacute;rase ; EC 2.4.1.46, MGDG synthase) d&#39;Arabidopsis thaliana ; par cons&eacute;quent, nous avons nomm&eacute; le g&egrave;ne OsMGD. Des &eacute;tudes ont montr&eacute; que l&#39;expression de la OsMGD chez les cultivars de riz FR13A et IR42 (cultivar submersion-susceptive) pendant la submersion a &eacute;t&eacute; progressivement augment&eacute;e et que l&#39;expression dans FR13A &eacute;tait plus &eacute;lev&eacute;e que dans les IR42. L&#39;expression de OsMGD en FR13A a &eacute;t&eacute; influenc&eacute;e par la benzylad&eacute;nine et d&#39;illumination. L&#39;accumulation des ARNm de OsMGD en FR13A et en IR42 a &eacute;t&eacute; &eacute;galement augment&eacute;e de l&#39;&eacute;th&eacute;phon, gibb&eacute;relline, s&eacute;cheresse et traitement sel, mais le stress d&ucirc; au froid n&#39;avait aucun effet sur l&#39;expression du g&egrave;ne. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que l&#39;expression des ARNm de OsMGD requiert la benzylad&eacute;nine ou illumination, et que le processus est &eacute;galement v&eacute;hicul&eacute; par l&#39;&eacute;th&eacute;phon et gibb&eacute;rellines. Contrainte de sel et de la s&eacute;cheresse ont un effet semblable &agrave; celui de submersion. En outre, l&#39;augmentation de l&#39;expression de OsMGD peut se rapportent &agrave; la photosynth&egrave;se et jouent un r&ocirc;le important durant la submersion.

Clonage d&#39;une synthase monogalactosyldiacylglyc&eacute;rol putatif de plants de riz (Oryza sativa L.) et son expression, en r&eacute;action &agrave; la submersion et autres contraintes.

Das Klonen eines mutma&#xDF;lichen monogalactosyldiacylglycerol Synthase-Gen aus Reis (Oryza sativa L.) Pflanzen und ihren Ausdruck in Reaktion auf Untertauchen und anderen Belastungen.

&#x6291;&#x5236;&#x5DEE;&#x3057;&#x5F15;&#x304D;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30B5;&#x30D6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; cDNA &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x975E;&#x6D78;&#x6C34;&#x3057;&#x3001;7 &#x65E5;&#x6DF1;&#x6C34;&#x30A4;&#x30CD; (&#x3001;FR13A&#x3001;&#x51A0;&#x6C34;&#x8010;&#x6027;&#x54C1;&#x7A2E;) &#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x69CB;&#x7BC9;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;S23&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; cDNA &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x306E; 1 &#x3064;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x6F5C;&#x6C34;&#x4E2D;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;S23 &#x306E;&#x5168;&#x9577; cDNA &#x306E;&#x7AEF;&#x306E; 5&#39;-&#x3068; 3&#39;-&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;1,671 &#x306E;&#x80BA;&#x6C17;&#x816B;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x305F; bp 1,077 bp (181-1257) &#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9; 358 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x306E;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306F; monogalactosyldiacylglycerol &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x3068;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; (UDPgalactose: 1, 2-&#x30B8;&#x30A2;&#x30B7;&#x30EB;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB; &#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; 3 &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF; D &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x8EE2;&#x79FB;&#x9175;&#x7D20;;EC 2.4.1.46&#x3001;MGDG &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;) &#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;; &#x304B;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; OsMGD &#x540D;&#x524D;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x7814;&#x7A76;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x306F; OsMGD &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6C34;&#x7A32;&#x54C1;&#x7A2E; FR13A &#x3068; IR42 &#xFF08;&#x51A0;&#x6C34;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x54C1;&#x7A2E;&#xFF09; &#x4E2D;&#x306B;&#x51A0;&#x6C34;&#x3057;&#x305F;&#x5F90;&#x3005; &#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F0F; FR13A &#x3067; IR42 &#x3067;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;FR13A &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; OsMGD &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x53CA;&#x3073;&#x7167;&#x660E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;FR13A &#x3068; IR42 &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; OsMGD mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3082;&#x30A8;&#x30C6;&#x30DB;&#x30F3;&#x3001;&#x30B8;&#x30D9;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x3001;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x3001;&#x5869;&#x51E6;&#x7406;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5BD2;&#x51B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;OsMGD mRNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7167;&#x660E;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3082;&#x30A8;&#x30C6;&#x30DB;&#x30F3;&#x3068;&#x30B8;&#x30D9;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5869;&#x3001;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306F;&#x51A0;&#x6C34;&#x306B;&#x4F3C;&#x305F;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F0F; OsMGD &#x306E;&#x5149;&#x5408;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3001;&#x51A0;&#x6C34;&#x6642;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x63A8;&#x5B9A; monogalactosyldiacylglycerol &#x5408;&#x6210;&#x9175;&#x7D20;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A4;&#x30CD; (Oryza sativa l.) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x51A0;&#x6C34;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x767A;&#x73FE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;

&#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xBC95; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBE44; &#xCE68;&#xC218; &#xBC0F; 7 &#xC77C; &#xCE68;&#xC218; &#xBCBC; (Oryza sativa L., FR13A, &#xCE68;&#xC218;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xD488;&#xC885;)&#xC758; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE7C;&#xAE30; cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. S23, &#xAC10;&#xBC95; cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xD074;&#xB860; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xCE68;&#xC218; &#xC911; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. S23&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; 5&#39; &#xC99D;&#xD3ED;-&#xBC0F; cDNA &#xB05D;&#xC758; 3&#39;-&#xAE09;&#xC18D; &#xC99D;&#xD3ED; 1671 &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xBC1C;&#xACAC; 1077 bp (181-1257) &#xC778;&#xCF54;&#xB529; 358 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC758; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC73C;&#xB85C; &#xD608;&#xC555;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xCD94;&#xB860;&#xB41C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; monogalactosyldiacylglycerol synthase&#xC640; &#xB192;&#xC740; homology &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4; (UDPgalactose: 1, 2 diacylglycerol 3-&#xBCA0;&#xD0C0;-D-galactosyl&#xACFC;; EC 2.4.1.46, MGDG synthase)&#xC5D0;&#xC11C; Arabidopsis thaliana; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; OsMGD &#xB77C;&#xB294;. &#xC2DC;&#xAC04;-&#xACFC;&#xC815; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC300; cultivars FR13A &#xBC0F; ir42&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; Osmgd&#xC758; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; (&#xCE68;&#xC218; &#xAC10;&#xC218; &#xC131; &#xD488;&#xC885;) &#xB3D9;&#xC548; &#xCE68;&#xC218;&#xB294; &#xC810;&#xCC28; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8; &#xC2DD; fr13a&#xC5D0; ir42&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB192;&#xC558;&#xB2E4;. Fr13a&#xC5D0;&#xC11C; Osmgd&#xC758; &#xC2DD; benzyladenine &#xBC0F; &#xC870;&#xBA85;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. FR13A &#xBC0F; IR42 OsMGD Mrna&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xB610;&#xD55C; ethephon, &#xC9C0; &#xBCA0; &#xB810; &#xB9B0;, &#xAC00;&#xBB44; &#xBC0F; &#xC18C;&#xAE08; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xAC00; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD94;&#xC704; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; OsMGD Mrna&#xC758; &#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; benzyladenine &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xBA85;, &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; ethephon&#xACFC; &#xC9C0; &#xBCA0; &#xB810; &#xB9B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xB3C4; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xAE08;&#xACFC; &#xAC00;&#xBB44; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xCE68;&#xC218;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Osmgd&#xC758; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC2DD; &#xAD11;&#xD569;&#xC131;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC7A0;&#xC218; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC300; (Oryza sativa L.) &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1; monogalactosyldiacylglycerol synthase &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xCE68;&#xC218; &#xBC0F; &#xAE30;&#xD0C0; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC740; &#xC2DD;&#xC758; &#xBCF5;&#xC81C;.

Hibridaci&oacute;n Sustractiva de supresi&oacute;n se utiliz&oacute; para construir una biblioteca de cDNA sustractiva de plantas de arroz no sumergido y 7-d&iacute;a sumergido (Oryza sativa L., FR13A, una variedad tolerante a sumersi&oacute;n). Una copia de la biblioteca de cDNA sustractivo, S23, expres&oacute; abundantemente durante la inmersi&oacute;n. La longitud completa de S23 se amplific&oacute; con 5&#39;-y 3&#39;-r&aacute;pido de cDNA de extremos y consisten en 1.671 bp con un marco de lectura abierto de 1.077 bp (181-1257) codificaci&oacute;n 358 amino&aacute;cidos. Su secuencia de amino&aacute;cidos deducida demostr&oacute; una alta homolog&iacute;a con monogalactosyldiacylglycerol synthase (UDPgalactosa: 1, 2-diacilglicerol 3-beta-D-galactosil transferasa; CE 2.4.1.46, MGDG sintasa) de Arabidopsis thaliana; por lo tanto, nombramos el gen OsMGD. Tiempo-curso estudios demostraron que la expresi&oacute;n de OsMGD en las variedades de arroz FR13A y IR42 (cultivar sumersi&oacute;n-sensibles) durante la sumersi&oacute;n se increment&oacute; gradualmente y que la expresi&oacute;n en FR13A fue superior en IR42. La expresi&oacute;n de OsMGD en FR13A fue influenciada por benciladenina e iluminaci&oacute;n. La acumulaci&oacute;n de mRNA de OsMGD en FR13A y IR42 tambi&eacute;n aument&oacute; con el etef&oacute;n, giberelina, sequ&iacute;a y tratamiento de sal, pero fr&iacute;o estr&eacute;s no tuvo ning&uacute;n efecto sobre la expresi&oacute;n del gen. Estos resultados sugieren que la expresi&oacute;n del ARNm de OsMGD requiere benciladenina o iluminaci&oacute;n, y que el proceso tambi&eacute;n es mediado por el etef&oacute;n y giberelina. Estr&eacute;s de sequ&iacute;a y sal tienen un efecto similar a la de sumersi&oacute;n. Adem&aacute;s, la mayor expresi&oacute;n de OsMGD puede relacionarse con fotos&iacute;ntesis y desempe&ntilde;an un papel importante durante la inmersi&oacute;n.

Clonaci&oacute;n de un gen de la sintasa de supuesta monogalactosyldiacylglycerol de plantas de arroz (Oryza sativa L.) y su expresi&oacute;n en respuesta a la sumersi&oacute;n y otras tensiones.

Un g&egrave;ne induite par submersion, OsGGT, a &eacute;t&eacute; clon&eacute; &agrave; partir 7 jours riz submerg&eacute; (Oryza sativa L. plantes, FR13A (un cultivar tol&eacute;rant &agrave; la submersion, Indica), &agrave; l&#39;aide de suppression subtractive hybridation et fois 5&#39; et 3&#39; amplification rapide des extr&eacute;mit&eacute;s d&#39;ADNc (course). L&#39;ADNc pleine longueur de OsGGT contient 1 273 bp avec un cadre de lecture ouvert de 1 140 bp (17-1 156) qui encode 379 acides amin&eacute;s. Sa s&eacute;quence d&#39;acides amin&eacute;s d&eacute;duite est l&#39;homologue glycog&eacute;nine glucosyltransf&eacute;rase. Nous avons constat&eacute; que le g&egrave;ne est localis&eacute; dans la r&eacute;gion de bp 17 970-20 077 du fragment g&eacute;nomique AAAA01002475.1 du cultivar Indica et dans la r&eacute;gion de bp 53 293-51 186 des fragments du g&eacute;nome AC037426.12 du chromosome 10 du cultivar Japanica de OsGGT. Une &eacute;tude chronos&eacute;quentielle a montr&eacute; que l&#39;expression des g&egrave;nes OsGGT augment&eacute; en FR13A durant la submersion mais a diminu&eacute; en IR42 (cultivar intol&eacute;rant &agrave; la submersion, Indica). L&#39;expression du g&egrave;ne OsGGT dans FR13A est induite par l&#39;acide salicylique et de benzylad&eacute;nine. L&#39;accumulation des ARNm de OsGGT en FR13A a &eacute;galement augment&eacute; en r&eacute;ponse &agrave; l&#39;&eacute;thyl&egrave;ne, gibb&eacute;rellines, acide abscissique, s&eacute;cheresse et traitement sel, mais traitement de jasmonate de m&eacute;thyle et le stress d&ucirc; au froid n&#39;a aucun effet sur l&#39;expression. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que le g&egrave;ne de OsGGT puisse &ecirc;tre li&eacute; au stress de la submersion et associ&eacute; &agrave; une r&eacute;action de d&eacute;fense g&eacute;n&eacute;rale aux divers stress environnementaux.

Identification et le clonage d&#39;un g&egrave;ne induite par la submersion OsGGT (glycog&eacute;nine glucosyltransf&eacute;rase) du riz (Oryza sativa L.) par hybridation soustractive de suppression.

Identifizierung und Klonierung einer Eintauchtiefe-induzierte Gen OsGGT (Glycogenin Glucosyltransferase) aus Reis (Oryza sativa L.) durch Unterdr&#xFC;ckung subtraktiven Hybridisierung.

&#x6DF9;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;OsGGT&#xFF0C;&#x4ECE; 7 &#x5929;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x6C34;&#x7A3B;&#x514B;&#x9686; (&#x7A3B;&#x5C5E;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x4E1D;&#x4E1D;&#x7F15;&#x7F15; L.&#x690D;&#x7269;&#xFF0C;FR13A (&#x8010;&#x6DF9;&#x6D9D;&#x54C1;&#x79CD;&#xFF0C;&#x7C7C;&#x578B;&#xFF09;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x7528;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x6D88;&#x51CF;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x4E24;&#x4E2A; 5&#39;-3&#39;-&#x5FEB;&#x901F;&#x6269;&#x589E; cDNA &#x672B;&#x7AEF; &#xFF08;&#x79CD;&#x65CF;&#xFF09;&#x3002;OsGGT cDNA &#x5305;&#x542B; 1,273 &#x4E0E; 1,140 &#x7684;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6; bp bp (17-1,156&#xFF09; &#x8FDB;&#x884C;&#x7F16;&#x7801; 379 &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x3002;&#x5176;&#x63A8;&#x5BFC;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x662F;&#x540C;&#x6E90;&#x540C; glycogenin &#x8461;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4F4D;&#x4E8E; 17,970 20,077 bp &#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7247;&#x6BB5;&#x7684;&#x7C7C;&#x7A3B;&#x54C1;&#x79CD; AAAA01002475.1 &#x548C; 53,293 51,186 bp &#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7247;&#x6BB5;&#x7684;&#x7CB3;&#x7A3B;&#x54C1;&#x79CD; 10 &#x53F7;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684; AC037426.12 OsGGT&#x3002;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; OsGGT &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x5728; FR13A &#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x5728; IR42 &#xFF08;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x4E0D;&#x5BB9;&#x5FCD;&#x54C1;&#x79CD;&#x7C7C;&#x578B;)&#x3002;&#x5728; FR13A &#x7684; OsGGT &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6C34;&#x6768;&#x9178;&#x548C;&#x82C4;&#x3002;OsGGT mRNA FR13A &#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E5F;&#x589E;&#x52A0;&#x4E59;&#x70EF;&#x3001; &#x8D64;&#x9709;&#x7D20;&#x3001; &#x8131;&#x843D;&#x9178;&#x3001; &#x5E72;&#x65F1;&#x548C;&#x76D0;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x4F46;&#x7532;&#x57FA;&#x8309;&#x8389;&#x9178;&#x7532;&#x916F;&#x5904;&#x7406;&#x54CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x51B7;&#x5E94;&#x6FC0;&#x5BF9;&#x8868;&#x8FBE;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; OsGGT &#x57FA;&#x56E0;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x6DF9;&#x6D9D;&#x80C1;&#x8FEB;&#x548C;&#x6709;&#x5173;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x9632;&#x5FA1;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5404;&#x79CD;&#x73AF;&#x5883;&#x538B;&#x529B;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

&#x8BC6;&#x522B;&#x548C;&#x6DF9;&#x6CA1;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; OsGGT (glycogenin &#x8461;) &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x6291;&#x5236;&#x6027;&#x6D88;&#x51CF;&#x6742;&#x4EA4;&#x7A3B; (&#x6C34;&#x7A3B;)&#x3002;

A submergence-induced gene, OsGGT, was cloned from 7-day submerged rice (Oryza sativa L. plants, FR13A (a submergence-tolerant cultivar, Indica), using suppression subtractive hybridization and both 5'- and 3'-rapid amplification of cDNA ends (RACE). The full-length OsGGT cDNA contains 1,273 bp with an open reading frame of 1,140 bp (17-1,156) that encodes 379 amino acids. Its deduced amino acid sequence is homologous with glycogenin glucosyltransferase. We found that the OsGGT gene is located in the 17,970-20,077 bp region of genome fragment AAAA01002475.1 of the Indica cultivar and in the 53,293-51,186 bp region of genome fragment AC037426.12 of chromosome 10 of the Japanica cultivar. A time-course study showed that OsGGT-gene expression increased in FR13A during submergence but decreased in IR42 (submergence-intolerant cultivar, Indica). The expression of the OsGGT gene in FR13A was induced by salicylic acid and benzyladenine. The accumulation of OsGGT mRNA in FR13A also increased in response to ethylene, gibberellin, abscisic acid, drought and salt treatment, but methyl jasmonate treatment and cold stress had no effect on expression. These results suggest that the OsGGT gene could be related to submergence stress and associated with a general defensive response to various environmental stresses.

Identification and cloning of a submergence-induced gene OsGGT (glycogenin glucosyltransferase) from rice (Oryza sativa L.) by suppression subtractive hybridization.

Un gene indotta da sommersione, OsGGT, &egrave; stato clonato da 7 giorni sommerso riso (Oryza sativa L. piante, FR13A (una cultivar tollerante sommersione, Indica), mediante soppressione sottrattiva ibridazione e sia 5&#39; e 3&#39;-rapida amplificazione del cDNA ends (gara). Il full-length cDNA OsGGT contiene 1.273 bp con un open reading frame di 1.140 bp (17-1.156) che codifica 379 aminoacidi. La sequenza aminoacidica dedotta &egrave; omologo con glicogenina glucosiltransferasi. Abbiamo scoperto che il gene &egrave; localizzato nella regione 17.970-20.077 bp del frammento del genoma AAAA01002475.1 di cultivar Indica e della regione 53.293-51.186 bp del frammento del genoma AC037426.12 del cromosoma 10 di cultivar Japanica di OsGGT. Un tempo-corso studio ha mostrato che espressione genica OsGGT aumentato in FR13A durante l&#39;immersione ma &egrave; diminuito in IR42 (sommersione-intollerante cultivar, Indica). L&#39;espressione del gene OsGGT in FR13A &egrave; stata indotta da acido salicilico e benzyladenine. L&#39;accumulo di mRNA di OsGGT in FR13A aumentato anche in risposta all&#39;etilene, gibberellina, acido abscissico, siccit&agrave; e salata trattamento, ma trattamento Jasmonato di metile e stress da freddo ha avuto alcun effetto sull&#39;espressione. Questi risultati suggeriscono che il gene OsGGT poteva essere correlato allo stress di sommersione e associato a una generale risposta difensiva a varie sollecitazioni ambientali.

Identificazione e clonazione di un gene indotta da sommersione OsGGT (glicogenina glucosiltransferasi) da riso (Oryza sativa L.) tramite l&#39;ibridazione sottrattiva soppressione.

&#x51A0;&#x6C34;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; OsGGT&#x3001;7 &#x65E5;&#x9593;&#x6D78;&#x6F2C;&#x7C73;&#x304B;&#x3089;&#x8907;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (Oryza sativa l. &#x690D;&#x7269;&#x3001;FR13A &#xFF08;&#x306F;&#x51A0;&#x6C34;&#x8010;&#x6027;&#x54C1;&#x7A2E;, &#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AB;&#xFF09;&#x3001;&#x6291;&#x5236;&#x30B5;&#x30D6;&#x30C8;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; &#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x4E21;&#x65B9; 5&#39;-&#x3068; 3&#39;-&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x62E1;&#x5927;&#x306E; cDNA &#x306E;&#x7AEF; &#xFF08;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B9;&#xFF09; &#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;1,273 OsGGT cDNA &#x3092;&#x542B;&#x3080; bp 1,140 &#x306E;&#x958B;&#x3044;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0; &#x30FB; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068; bp &#xFF08;17-1,156) 379 &#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x3092;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x76F8;&#x540C;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x65AD;&#x7247;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AB;&#x54C1;&#x7A2E; AAAA01002475.1 17,970 20,077 bp &#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x65AD;&#x7247;&#x3057;&#x304B;&#x54C1;&#x7A2E;&#x306E; 10 &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E; AC037426.12 &#x306E; 53,293 51,186 bp &#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; OsGGT &#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x7814;&#x7A76; OsGGT &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x304C; FR13A &#x3067;&#x51A0;&#x6C34;&#x6642;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;IR42 &#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; &#xFF08;&#x51A0;&#x6C34;&#x504F;&#x72ED;&#x306A;&#x54C1;&#x7A2E;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AB;&#xFF09;&#x3002;FR13A &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; OsGGT &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30EA;&#x30C1;&#x30EB;&#x9178;&#x3068;&#x30D9;&#x30F3;&#x30B8;&#x30EB;&#x30A2;&#x30C7;&#x30CB;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;FR13A &#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; OsGGT mRNA &#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3082;&#x30A8;&#x30C1;&#x30EC;&#x30F3;&#x3001;&#x30B8;&#x30D9;&#x30EC;&#x30EA;&#x30F3;, &#x30A2;&#x30D6;&#x30B7;&#x30B8;&#x30F3;&#x9178;&#x3001;&#x5E72;&#x3070;&#x3064;&#x3068;&#x5869;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB; &#x30B8;&#x30E3;&#x30B9;&#x30E2;&#x30F3;&#x9178;&#x6CBB;&#x7642;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x5897;&#x52A0;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5BD2;&#x51B7;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x304C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;OsGGT &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x51A0;&#x6C34;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3001;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x74B0;&#x5883;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x9632;&#x5FA1;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x540C;&#x5B9A;&#x3068;&#x51A0;&#x6C34;&#x8A98;&#x767A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; OsGGT (&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B2;&#x30CB;&#x30F3; &#x30B0;&#x30EB;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;) &#x306E;&#x30A4;&#x30CD; (Oryza sativa l.) &#x304B;&#x3089;&#x6291;&#x5236;&#x5DEE;&#x3057;&#x5F15;&#x304D;&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xCE68;&#xC218; &#xC720;&#xBC1C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; OsGGT, 7 &#xC77C; &#xCE68;&#xC218; &#xC300;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD588;&#xB2E4; (Oryza sativa L. &#xC2DD;&#xBB3C;, FR13A (&#xCE68;&#xC218;&#xC5D0; &#xAC15;&#xD55C; &#xD488;&#xC885;, Indica), &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xBC95; &#xAD50; &#xC7A1; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xB450; 5&#39;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;-&#xBC0F; cDNA &#xB05D; (&#xACBD;&#xC8FC;)&#xC758; 3&#39;-&#xAE09;&#xC18D; &#xC99D;&#xD3ED;. 1,273&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; OsGGT cDNA 1,140&#xC758; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; bp 379 &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0;&#xC744; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD558;&#xB294; bp (17-1156). &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xCD94;&#xB860;&#xB41C; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC11C; &#xC5F4;&#xC740; glycogenin glucosyltransferase&#xC640; &#xB3D9;&#xC885;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; OsGGT &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xAC01;&#xC758; Indica &#xD488;&#xC885;&#xC758; AAAA01002475.1 17,970 20,077 bp &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xD55C; &#xAC8C;&#xB188; &#xC870;&#xAC01;&#xC758; Japanica &#xD488;&#xC885;&#xC758; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; 10 AC037426.12 53,293 51,186 bp &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC2DC;&#xAC04;-&#xACFC;&#xC815; &#xACF5;&#xBD80; &#xD588;&#xB2E4; OsGGT &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC7A0;&#xC218; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; fr13a&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; ir42&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; (&#xCE68;&#xC218; &#xC720;&#xC81C;&#xD488; &#xD488;&#xC885;, Indica). Fr13a&#xC5D0;&#xC11C; OsGGT &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xC0B4;&#xB9AC;&#xC2E4;&#xC0B0; &#xBC0F; benzyladenine&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Fr13a&#xC5D0;&#xC11C; OsGGT Mrna&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xB610;&#xD55C; &#xC5D0;&#xD2F8;&#xB80C;, &#xC9C0; &#xBCA0; &#xB810; &#xB9B0;, abscisic &#xC0B0;, &#xAC00;&#xBB44; &#xBC0F; &#xC18C;&#xAE08; &#xCC98;&#xB9AC; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBA54; &#xD2F8; jasmonate &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xAE30; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; OsGGT &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xC218; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xD658;&#xACBD; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xC5B4; &#xC751;&#xB2F5; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC218; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC2DD;&#xBCC4; &#xBC0F; &#xCE68;&#xC218; &#xC720;&#xBC1C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; OsGGT (glycogenin glucosyltransferase)&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xAC10;&#xBC95; &#xAD50; &#xC7A1; &#xD558; &#xC5EC; &#xC300; (Oryza sativa L.) &#xBCF5;&#xC81C;.

Un gen inducida por sumersi&oacute;n, OsGGT, fue reproducido de arroz sumergida de 7 d&iacute;as (plantas de Oryza sativa L., FR13A (un cultivar sumersi&oacute;n-tolerante, Indica), mediante hibridaci&oacute;n sustractiva de supresi&oacute;n y ambos 5&#39;-y 3&#39;-r&aacute;pido de cDNA extremos (raza). El cDNA de OsGGT cuerpo entero contiene 1.273 bp con un marco de lectura abierto de 1.140 bp (17-1.156) que codifica 379 amino&aacute;cidos. Su secuencia de amino&aacute;cidos deducida es hom&oacute;logo con glucogenina glucosiltransferasa. Encontramos que el gen se encuentra en la regi&oacute;n de bp 17.970-20.077 del fragmento del genoma AAAA01002475.1 del cultivar Indica y en la regi&oacute;n de bp 53.293-51.186 del fragmento del genoma del cromosoma 10 del cultivar Japanica AC037426.12 de OsGGT. Un estudio del tiempo-curso demostr&oacute; que OsGGT-genes aumentaron en FR13A durante la inmersi&oacute;n, pero disminuyeron en IR42 (intolerante a la sumersi&oacute;n cultivar, Indica). La expresi&oacute;n del gen OsGGT en FR13A fue inducida por &aacute;cido salic&iacute;lico y benciladenina. La acumulaci&oacute;n de mRNA de OsGGT en FR13A tambi&eacute;n aument&oacute; en respuesta a etileno, giberelina, &aacute;cido absc&iacute;sico, sequ&iacute;a y tratamiento de sal, pero trato de jasmonate de metilo y estr&eacute;s fr&iacute;o no tuvo ning&uacute;n efecto sobre la expresi&oacute;n. Estos resultados sugieren que el gen de la OsGGT podr&iacute;a ser relacionadas con el estr&eacute;s de sumersi&oacute;n y asociado a una respuesta defensiva general a distintas presiones ambientales.

Identificaci&oacute;n y clonaci&oacute;n de un gen inducida por sumersi&oacute;n OsGGT (glucogenina glucosiltransferasa) de arroz (Oryza sativa L.) por hibridaci&oacute;n sustractiva de supresi&oacute;n.

Ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x662F;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x8BB8;&#x591A;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x950C;&#x624B;&#x6307;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (Igf2) &#x4E8C;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684; unmethylated &#x5B55;&#x4EA7;&#x5987;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x5370;&#x8BB0;&#x7684; Igf2/H19 &#x5370;&#x8BB0;&#x57DF;&#x548C;&#x5F62;&#x5F0F;&#x8FDC;&#x8DDD;&#x79BB; intrachromosomal &#x5FAA;&#x73AF;&#x4E0E;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4EA4;&#x4E92;&#x63A7;&#x5236;&#x533A; &#xFF08;ICR&#xFF09; &#x805A;&#x96C6; Igf2 &#x5BA3;&#x4F20;&#x5458;&#x3002;Polycomb &#x9547;&#x538B;&#x590D;&#x6742; 2 &#x88AB;&#x62DB;&#x8058;&#x901A;&#x8FC7;&#x7684; Suz12&#xFF0C;&#x4E0E; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5728; 27 &#x8D56;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 &#xFF08;H3-K27&#xFF09; &#x548C;&#x4EA7;&#x5987; Igf2 &#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x5236;&#x6B62;&#x3002;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x6216;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987; ICR &#x5E9F;&#x9664;&#x6B64;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5FAA;&#x73AF;&#x3001; &#x51CF;&#x5C11;&#x7532;&#x57FA;&#x5316; H3 K27 &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4; Igf2 &#x5370;&#x8BB0;&#x7684;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;RNA &#x5E72;&#x6270;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684; Suz12 &#x4E5F;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0; Igf2 &#x4EA7;&#x5987;&#x548C; Igf2 &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F; biallelic &#x91CD;&#x65B0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;Ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x548C; Suz12 &#x4ECE;&#x6838;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x4EFB;&#x4E00;&#x86CB;&#x767D; coprecipitated &#x548C;&#x53CC;&#x6742;&#x4EA4;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x5F7C;&#x6B64;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53D1;&#x73B0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x5176;&#x4E2D; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x63A7;&#x5236;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7B56;&#x5212;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x811A;&#x624B;&#x67B6;&#x62DB;&#x8058;&#x548C;&#x7ED1;&#x5B9A; polycomb &#x9547;&#x538B;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

Ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x7531;&#x7B56;&#x5212;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A; polycomb &#x9547;&#x538B;&#x590D;&#x6742; 2 intrachromosomal &#x5FAA;&#x73AF;&#x8C03;&#x8282; Igf2 &#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

CTCF is a zinc finger DNA-binding protein that regulates the epigenetic states of numerous target genes. Using allelic regulation of mouse insulin-like growth factor II (Igf2) as a model, we demonstrate that CTCF binds to the unmethylated maternal allele of the imprinting control region (ICR) in the Igf2/H19 imprinting domain and forms a long-range intrachromosomal loop to interact with the three clustered Igf2 promoters. Polycomb repressive complex 2 is recruited through the interaction of CTCF with Suz12, leading to allele-specific methylation at lysine 27 of histone H3 (H3-K27) and to suppression of the maternal Igf2 promoters. Targeted mutation or deletion of the maternal ICR abolishes this chromatin loop, decreases allelic H3-K27 methylation, and causes loss of Igf2 imprinting. RNA interference knockdown of Suz12 also leads to reactivation of the maternal Igf2 allele and biallelic Igf2 expression. CTCF and Suz12 are coprecipitated from nuclear extracts with antibodies specific for either protein, and they interact with each other in a two-hybrid system. These findings offer insight into general epigenetic mechanisms by which CTCF governs gene expression by orchestrating chromatin loop structures and by serving as a DNA-binding protein scaffold to recruit and bind polycomb repressive complexes.

CTCF regulates allelic expression of Igf2 by orchestrating a promoter-polycomb repressive complex 2 intrachromosomal loop.

FCCT est un doigt de zinc liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN prot&#xE9;ine qui r&#xE9;gule les &#xE9;tats &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques de nombreux g&#xE8;nes cibles. Utiliser la r&#xE9;gulation all&#xE9;lique de la souris l&#x26;#39;insuline-like growth factor II (IGF2) comme un mod&#xE8;le, nous d&#xE9;montrons que FCCT se lie &#xE0; l&#x26;#39;all&#xE8;le non m&#xE9;thyl&#xE9; maternelle de la r&#xE9;gion de contr&#xF4;le d&#x26;#39;impression (ICR) dans le domaine Igf2/H19 empreinte et forme une intrachromosomique longue port&#xE9;e boucle d&#x26;#39;interagir avec les trois grappes promoteurs IGF2. 2 Polycomb complexe r&#xE9;pressive est recrut&#xE9; par l&#x26;#39;interaction de FCCT avec Suz12, conduisant &#xE0; la m&#xE9;thylation sp&#xE9;cifique de l&#x26;#39;all&#xE8;le &#xE0; la lysine 27 de l&#x26;#39;histone H3 (H3-K27) et &#xE0; la suppression des promoteurs maternels IGF2. Mutation cibl&#xE9;e ou la suppression de l&#x26;#39;ICR maternelle abolit cette boucle de chromatine, diminue all&#xE9;lique H3-K27 m&#xE9;thylation, et provoque une perte de l&#x26;#39;empreinte IGF2. Knockdown interf&#xE9;rence de l&#x26;#39;ARN du Suz12 conduit &#xE9;galement &#xE0; la r&#xE9;activation de l&#x26;#39;all&#xE8;le maternel et IGF2 biall&#xE9;lique expression IGF2. FCCT et Suz12 sont copr&#xE9;cipit&#xE9;s &#xE0; partir d&#x26;#39;extraits nucl&#xE9;aires avec des anticorps sp&#xE9;cifiques de la prot&#xE9;ine soit, et ils interagissent les uns avec les autres dans un syst&#xE8;me &#xE0; deux hybrides. Ces r&#xE9;sultats offrent un aper&#xE7;u g&#xE9;n&#xE9;ral des m&#xE9;canismes &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques qui r&#xE9;git l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes FCCT en orchestrant des structures de boucles de chromatine et en servant une prot&#xE9;ine liant l&#x26;#39;ADN &#xE9;chafaudage &#xE0; recruter et &#xE0; lier les complexes Polycomb r&#xE9;pressives.

FCCT r&#xE9;gule l&#x26;#39;expression all&#xE9;lique d&#x26;#39;IGF2 en orchestrant un promoteur-polycomb r&#xE9;pressive Complexe 2 Boucle intrachromosomique

CTCF ist eine Zinkfinger DNA-bindenden Protein, das die epigenetischen Staaten zahlreiche Zielgene regelt. Mit allelische Regulierung der Maus Insulin-Like Growth Factor II (Igf2) als Modell, wir zeigen, dass CTCF an die unmethylated m&uuml;tterlichen Allel des die Pr&auml;gung bindet Kontrollregion (ICR) in die Igf2/H19 Pr&auml;gung Dom&auml;ne und Formen eine weitr&auml;umige intrachromosomal Schleife zur Interaktion mit den drei gruppierten Igf2 Promotoren. Polycomb repressiven komplexe 2 ist durch das Zusammenwirken der CTCF mit Suz12, warb Allel-spezifische Methylierung an Lysin 27 von Histon H3 (H3-K27) und Unterdr&uuml;ckung der m&uuml;tterlichen Igf2 Promotoren. Gezielte Mutation oder Streichung von der m&uuml;tterlichen ICR schafft diese Chromatin-Schleife verringert allelische H3-K27-Methylierung und verursacht den Verlust von Igf2 Pr&auml;gung. RNA-Interferenz-Niederschlag des Suz12 f&uuml;hrt auch zu Reaktivierung der m&uuml;tterlichen Igf2-Allel und Biallelic Igf2 Ausdruck. CTCF und Suz12 sind coprecipitated von nuklearen Extrakte mit Antik&ouml;rper, die spezifisch f&uuml;r entweder Protein, und sie miteinander in einem zwei-Hybrid-System. Diese Erkenntnisse bieten Einblick in allgemeine epigenetischen Mechanismen, mit denen regelt CTCF Genexpression durch Orchestrierung Chromatin-Loop-Strukturen und durch das dienen als ein DNA-bindenden Protein Ger&uuml;st zu rekrutieren und repressive Polycomb-komplexe binden.

CTCF reguliert allelische Ausdruck des Igf2 durch Orchestrierung einer Projekttr&auml;ger-Polycomb repressiven komplexe 2 intrachromosomal Schleife.

CTCF &egrave; un dito di zinco DNA-binding protein che regola gli Stati epigenetici di numerosi geni bersaglio. Mediante regolamento allelica del mouse insulin-like growth factor II (Igf2) come un modello, dimostreremo che CTCF si lega all&#39;allele materno non metilato dell&#39;imprinting control (ICR) nella regione l&#39;Igf2/H19 imprinting dominio e forma un loop intracromosomica a lungo raggio per interagire con i tre cluster Igf2 promotori. Polycomb repressive 2 complesso &egrave; reclutato attraverso l&#39;interazione di CTCF con Suz12, leader di allele-specific metilazione a lisina 27 dell&#39;istone H3 (H3-K27) e di soppressione dei promotori Igf2 materni. Mutazione mirata o eliminazione dell&#39;ICR materna abolisce questo ciclo della cromatina, diminuisce la metilazione H3-K27 allelica e provoca perdita di imprinting Igf2. Atterramento di interferenza RNA di Suz12 conduce anche alla riattivazione dell&#39;allele Igf2 materna e Igf2 espressione biallelica. CTCF e Suz12 sono coprecipitated dagli estratti nucleari con anticorpi specifici per una proteina, e interagiscono con a vicenda in un sistema del due-ibrido. Questi risultati offrono insight in generale meccanismi epigenetici che CTCF governa l&#39;espressione di gene di orchestrare le strutture di ciclo della cromatina e servendo come un&#39;impalcatura di proteine DNA-binding per reclutare e associare polycomb repressive complessi.

CTCF regola l&#39;espressione allelica di Igf2 di orchestrare un promotore-polycomb repressive complesso 2 intracromosomica loop.

CTCF&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;II&#xFF08;IGF2&#xFF09;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;CTCF&#x304C;Igf2/H19&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5237;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5236;&#x5FA1;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x6BCD;&#x6027;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;ICR&#xFF09;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x9577;&#x8DDD;&#x96E2;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;3&#x3064;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5316;IGF2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;2&#x306F;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x306E;&#x30EA;&#x30B8;&#x30F3;27&#xFF08;H3-K27&#xFF09;&#x306E;&#x6BCD;&#x4F53;&#x3068;IGF2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;SUZ12&#x3068;CTCF&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x52DF;&#x96C6;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;ICR&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6B20;&#x5931;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;H3-K27&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;IGF2&#x5237;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; SUZ12&#x306E;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306B;&#x3082;&#x6BCD;&#x6027;IGF2&#x30A2;&#x30EC;&#x30EB;&#x3068;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;IGF2&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002; CTCF&#x3068;SUZ12&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x6297;&#x4F53;&#x3068;&#x6838;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x304B;&#x3089;&#x5171;&#x6C88;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;two-hybrid&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x4E92;&#x3044;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;CTCF&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7DE8;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3068;&#x30EA;&#x30AF;&#x30EB;&#x30FC;&#x30C8;&#x3068;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306B;DNA-&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3078;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CTCF&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;2&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x30AA;&#x30FC;&#x30B1;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;IGF2&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

CTCF &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; epigenetic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294;. CTCF&#xB294; &#xAC01; &#xC778; unmethylated &#xBAA8;&#xC131; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 2 (Igf2) &#xC138;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; Igf2/H19 &#xC7A5;&#xAC70;&#xB9AC; intrachromosomal &#xB8E8;&#xD504; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xAC01; &#xC778; 3&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3D9;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC601;&#xC5ED; (ICR) &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; Igf2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;. Polycomb &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 2 &#xBA54; &#xD2F8; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD2B9;&#xC815; &#xD654; lysine 27&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3 (H3 K27)&#xC640; &#xBAA8;&#xC131; Igf2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC120;&#xB3C4; CTCF Suz12&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBAA8;&#xC9D1;. &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB610;&#xB294; &#xBAA8;&#xC131; ICR&#xC758; &#xC0AD;&#xC81C;&#xAC00; chromatin &#xB8E8;&#xD504;&#xB97C; &#xB9D0;&#xC0B4; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; H3 K27 &#xBA54; &#xD2F8; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4E4;&#xACE0; Igf2 &#xAC01; &#xC778; &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD;. Suz12&#xC758; RNA &#xAC04;&#xC12D; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xB610;&#xD55C; &#xBAA8;&#xC131; Igf2 &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC0F; biallelic Igf2 &#xC2DD;&#xC758; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xB9AC;&#xB4DC;. CTCF&#xC640; Suz12 &#xC911; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xD575; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; coprecipitated &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; 2-&#xD558;&#xC774;&#xBE0C;&#xB9AC;&#xB4DC; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC11C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC;&#xB294; CTCF chromatin &#xB8E8;&#xD504; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xACC4;&#xD68D; &#xD558; &#xACE0; &#xBAA8;&#xC9D1; &#xD558; &#xACE0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD560; polycomb &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xC9C0; DNA &#xBB36;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE44; &#xACC4;&#xB85C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xC5EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC9C0;&#xBC30; &#xD558;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18; epigenetic &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CTCF &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; polycomb &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; 2 intrachromosomal &#xB8E8;&#xD504;&#xB97C; &#xAFB8;&#xBBF8;&#xACE0; &#xC5EC; Igf2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xC870;&#xC808;.

CTCF es un dedo de zinc de ADN-prote&#xED;na de uni&#xF3;n que regula los estados epigen&#xE9;ticos de numerosos genes diana. Uso de la regulaci&#xF3;n al&#xE9;lica del rat&#xF3;n similar a la insulina factor de crecimiento II (IGF2) como un modelo, nos demuestran que CTCF se une al alelo no metilado materna de la regi&#xF3;n de control de impresi&#xF3;n (ICR) en el dominio de la impronta IGF-2/H19 y forma una intracromosomal largo alcance bucle para interactuar con los tres promotores agrupados IGF2. 2 Polycomb compleja represiva ha sido contratado a trav&#xE9;s de la interacci&#xF3;n de CTCF con Suz12, dando lugar a la metilaci&#xF3;n del alelo-espec&#xED;ficas en la lisina 27 de la histona H3 (H3-K27) y la supresi&#xF3;n de los promotores de IGF2 materna. Mutaci&#xF3;n dirigida o la supresi&#xF3;n de la ICR materna elimina este bucle de la cromatina, disminuye al&#xE9;lica H3-K27 metilaci&#xF3;n, y causa la p&#xE9;rdida de la impronta Igf2. Ca&#xED;da de la interferencia de ARN Suz12 tambi&#xE9;n conduce a la reactivaci&#xF3;n del alelo materno Igf2 y expresi&#xF3;n Igf2 bial&#xE9;licas. CTCF y Suz12 se coprecipitan a partir de extractos nucleares con anticuerpos espec&#xED;ficos para cualquiera de las prote&#xED;nas, y que interact&#xFA;an entre s&#xED; en un sistema de dos h&#xED;bridos. Estos resultados ofrecen una visi&#xF3;n de los mecanismos epigen&#xE9;ticos generales por los que CTCF gobierna la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica mediante la orquestaci&#xF3;n de las estructuras de la cromatina de bucle y al servir como un andamio de prote&#xED;nas de uni&#xF3;n a ADN y se unen para contratar a los complejos Polycomb represivas.

CTCF regula la expresi&#xF3;n al&#xE9;lica de Igf2 orquestando un promotor-Polycomb represivas Complejo 2 Loop intracromos&#xF3;mica

Monoallelic espressione di IGF2 &egrave; regolata da CCCTC binding factor (CTCF) binding per l&#39;imprinting regione di controllo (ICR) sull&#39;allele materno, con conseguente formazione di un loop intracromosomica nella regione del promotore. Il dominio N-terminale di CTCF interagisce con SUZ12, parte del polycomb repressive complex-2 (PRC2), per tacere dell&#39;allele materno. Abbiamo sintetizzato decoy CTCF proteine, fondendo il CTCF acido desossiribonucleico-associazione zinco dito dominio di CpG metiltransferasi Sss1 o di avanzata proteina fluorescente verde. In fibroblasti umani normali e linee di cellule MCF7 il cancro al seno, le proteine decoy CTCF associato a unmethylated ICR e nella regione del promotore IGF2 ma non ha fatto interagire con SUZ12. EZH2, un&#39;altra parte di PRC2, fu in grado di metilare istone H3-K27 nella regione del promotore IGF2, con conseguente riattivazione dell&#39;allele impresso. Il ciclo intracromosomica tra l&#39;ICR materna e i promotori IGF2 non &egrave; stato osservato quando IGF2 imprinting &egrave; stato perso. CTCF governa epigeneticamente espressione allelica del gene di IGF2 di orchestrare le strutture di ciclo della cromatina che coinvolgono PRC2.

Interruzione del ciclo intracromosomica di proteine leganti il decoy fattore CCCTC abroga imprinting genomico del fattore di crescita insulino-simile umano II.

Monoallelic &#x7684; IGF2 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D7; CCCTC &#x7ED1;&#x5B9A;&#x56E0;&#x5B50; (ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#xFF09; &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5370;&#x8FF9;&#x4E0E;&#x968F;&#x540E;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A; intrachromosomal &#x5FAA;&#x73AF;&#x7684;&#x5B55;&#x4EA7;&#x5987;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x63A7;&#x5236;&#x533A;&#x57DF; (ICR)&#x3002;N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x57DF; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92; SUZ12&#xFF0C;polycomb &#x9547;&#x538B;&#x590D;&#x6742;-2 (PRC2) &#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x4EE5;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5408;&#x6210;&#x8BF1;&#x9975; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x878D;&#x5408; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x8131;&#x6C27;&#x6838;&#x7CD6;&#x6838;&#x9178;-&#x950C;&#x624B;&#x6307;&#x57DF;&#x540D;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; CpG &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176; Sss1 &#x6216;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E73;&#x817A;&#x764C; MCF7 &#x7EC6;&#x80DE;&#x682A;&#xFF0C;ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x8BF1;&#x9975;&#x86CB;&#x767D; unmethylated &#x6C11;&#x4E8B;&#x548C; IGF2 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E0E; SUZ12 &#x4E0D;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;EZH2&#xFF0C;PRC2&#xFF0C;&#x53E6;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x65E0;&#x6CD5; methylate &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3-K27 IGF2 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6062;&#x590D;&#x7684;&#x5370;&#x8FF9;&#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;Intrachromosomal &#x5FAA;&#x73AF;&#x4EA7;&#x5987;&#x6C11;&#x4E8B;&#x548C; IGF2 &#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E0D;&#x6307;&#x51FA; IGF2 &#x5370;&#x8BB0;&#x65F6;&#x4E22;&#x5931;&#x3002;Ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF; epigenetically &#x7684;&#x7B56;&#x5212;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7ED3;&#x6784;&#x6D89;&#x53CA; PRC2 &#x7BA1;&#x8F96; IGF2 &#x7684;&#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x7531; CCCTC &#x86CB;&#x767D;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x9975; intrachromosomal &#x5FAA;&#x73AF;&#x4E2D;&#x65AD;&#x5E9F;&#x9664;&#x4EBA;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; II &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5370;&#x8BB0;&#x3002;

Monoallelic expression of IGF2 is regulated by CCCTC binding factor (CTCF) binding to the imprinting control region (ICR) on the maternal allele, with subsequent formation of an intrachromosomal loop to the promoter region. The N-terminal domain of CTCF interacts with SUZ12, part of the polycomb repressive complex-2 (PRC2), to silence the maternal allele. We synthesized decoy CTCF proteins, fusing the CTCF deoxyribonucleic acid-binding zinc finger domain to CpG methyltransferase Sss1 or to enhanced green fluorescent protein. In normal human fibroblasts and breast cancer MCF7 cell lines, the CTCF decoy proteins bound to the unmethylated ICR and to the IGF2 promoter region but did not interact with SUZ12. EZH2, another part of PRC2, was unable to methylate histone H3-K27 in the IGF2 promoter region, resulting in reactivation of the imprinted allele. The intrachromosomal loop between the maternal ICR and the IGF2 promoters was not observed when IGF2 imprinting was lost. CTCF epigenetically governs allelic gene expression of IGF2 by orchestrating chromatin loop structures involving PRC2.

Interruption of intrachromosomal looping by CCCTC binding factor decoy proteins abrogates genomic imprinting of human insulin-like growth factor II.

L&#x26;#39;expression d&#x26;#39;IGF2 monoall&#xE9;lique est r&#xE9;gul&#xE9;e par des facteurs de liaison CCCTC (FCCT) de liaison &#xE0; la r&#xE9;gion de commande d&#x26;#39;impression (IC) sur l&#x26;#39;all&#xE8;le maternel, avec formation cons&#xE9;cutive d&#x26;#39;une boucle de intrachromosomique &#xE0; la r&#xE9;gion promotrice. Le domaine N-terminal de FCCT interagit avec SUZ12, une partie du complexe polycomb r&#xE9;pressive-2 (PRC2), pour couper l&#x26;#39;all&#xE8;le maternel. Nous avons synth&#xE9;tis&#xE9; leurres prot&#xE9;ines CTCF, fusionnant les FCCT acide d&#xE9;soxyribonucl&#xE9;ique domaine de liaison &#xE0; doigt de zinc &#xE0; CpG SSS1 m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase ou de renforcement de la prot&#xE9;ine fluorescente verte. Dans des fibroblastes humains normaux et de cellules de cancer du sein MCF7 lignes, les prot&#xE9;ines CTCF leurres li&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;ICR non m&#xE9;thyl&#xE9; et &#xE0; la r&#xE9;gion promotrice IGF2 mais n&#x26;#39;a pas interagir avec SUZ12. EZH2, une autre partie de PRC2, a &#xE9;t&#xE9; incapable de m&#xE9;thylation des histones H3-K27 dans la r&#xE9;gion promotrice IGF2, ce qui entra&#xEE;ne la r&#xE9;activation de l&#x26;#39;all&#xE8;le imprim&#xE9;. La boucle intrachromosomique entre l&#x26;#39;ICR maternelle et les promoteurs IGF2 n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e lorsque l&#x26;#39;empreinte IGF2 a &#xE9;t&#xE9; perdu. FCCT r&#xE9;git &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiquement l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne IGF2 all&#xE9;lique de structures de boucles en orchestrant la chromatine impliquant PRC2.

Interruption de la boucle intrachromosomique par CCCTC Binding Proteins Decoy Factor abroge Impression g&#xE9;nomique de l&#x26;#39;homme Insulin-like Growth Factor II

Monoallelisches Ausdruck des IGF2 wird geregelt durch CCCTC Bindung Faktor (CTCF) Bindung an die Pr&auml;gung Kontrollregion (ICR) auf das m&uuml;tterliche Allel, mit anschlie&szlig;enden Bildung eines intrachromosomal-Schleife der Promotor-Region. Die N-terminalen Dom&auml;ne von CTCF interagiert mit SUZ12, Teil des Polycomb repressiven Komplex-2 (PRC2), um das m&uuml;tterliche Allel zum Schweigen zu bringen. Wir die K&ouml;der CTCF Proteine, verschmelzen die CTCF Desoxyribonukleins&auml;ure-Bindung Zink-Fingergebiet CpG Methyltransferase Sss1 oder verbesserte gr&uuml;n fluoreszierendes Protein synthetisiert. In normalen menschlichen Fibroblasten und Brust MCF7 Krebszelllinien die CTCF K&ouml;der Proteine gebunden, unmethylated ICR und IGF2-Promotor-Region aber interagierte nicht mit SUZ12. EZH2, ein weiterer Teil des PRC2, konnte methyliere Histon H3-K27 in der IGF2-Promotor-Region, was zu Reaktivierung des eingepr&auml;gten Allels. Die intrachromosomal Schleife zwischen den m&uuml;tterlichen ICR und IGF2 Promotoren wurde nicht beobachtet als IGF2 Pr&auml;gung verloren war. CTCF regelt epigenetically allelische Genexpression von IGF2 von Chromatin-Loop-Strukturen mit PRC2 orchestriert.

Unterbrechung der intrachromosomal Schleifen von CCCTC bindende Faktor K&ouml;der Proteine hebt genomische Pr&auml;gung des menschlichen Insulin-Like Growth Factor II.

IGF2&#x306E;Monoallelic&#x5F0F;&#x304C;CCCTC&#x7D50;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;CTCF&#xFF09;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x5F8C;&#x7D9A;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x5237;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x5236;&#x5FA1;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;ICR&#xFF09;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; CTCF&#x306E;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x6BCD;&#x6027;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;2&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#xFF08;PRC2&#xFF09;&#x3001;SUZ12&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30B3;&#x30A4;CTCF&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;CpG&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;Sss1&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x878D;&#x5408;CTCF&#x30C7;&#x30AA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30DC;&#x6838;&#x9178;&#x7D50;&#x5408;&#x30B8;&#x30F3;&#x30AF;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6B63;&#x5E38;&#x30D2;&#x30C8;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E73;&#x764C;MCF7&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x3001;CTCF&#x30C7;&#x30B3;&#x30A4;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x975E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;ICR&#x304A;&#x3088;&#x3073;IGF2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;SUZ12&#x3068;&#x5BFE;&#x8A71;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; EZH2&#x3001;PRC2&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;IGF2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3-K27&#x3092;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; IGF2&#x5237;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#x304C;&#x5931;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x6BCD;&#x89AA;&#x306E;ICR&#x3068;IGF2&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; CTCF&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x6210;&#x7684;PRC2&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7DE8;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;IGF2&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

CCCTC&#x7D50;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x30C7;&#x30B3;&#x30A4;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5185;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;II&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;Abrogates

Monoallelic &#xD45C;&#xD604;&#xC758; IGF2 CCCTC &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC694;&#xC18C; (CTCF) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC740; &#xAC01; &#xC778;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; intrachromosomal &#xB8E8;&#xD504;&#xC758; &#xC774;&#xD6C4; &#xD615;&#xC131; &#xB41C; &#xBAA8;&#xC131; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; &#xC601;&#xC5ED; (ICR). CTCF N &#xB9E8;&#xB05D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBAA8;&#xC131; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; SUZ12, polycomb &#xC5B5;&#xC555; &#xC801;&#xC778; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;-2 (PRC2)&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; CTCF deoxyribonucleic &#xC0B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC544;&#xC5F0; &#xC190;&#xAC00;&#xB77D; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; CpG methyltransferase Sss1 &#xB610;&#xB294; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC735;&#xD569; &#xBBF8;&#xB07C; CTCF &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131;. &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC720; &#xBC29; &#xC554; MCF7 &#xC140; &#xB77C;&#xC778; CTCF &#xBBF8;&#xB07C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; unmethylated ICR &#xBC0F; IGF2 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; suz12&#xC640; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. EZH2, PRC2, &#xB2E4;&#xB978; &#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H3-K27 IGF2 &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xCC0D;&#xD78C;&#xB41C; &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC7AC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; methylate &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC131; ICR IGF2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774; intrachromosomal &#xB8E8;&#xD504; IGF2 &#xAC01; &#xC778; &#xC190;&#xC2E4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;. CTCF epigenetically &#xAFB8;&#xBBF8;&#xACE0; chromatin &#xB8E8;&#xD504; &#xAD6C;&#xC870; prc2&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;&#xC758; IGF2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Intrachromosomal CCCTC &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC694;&#xC18C; &#xBBF8;&#xB07C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC18;&#xBCF5;&#xC758; &#xC911;&#xB2E8; &#xC778;&#xAC04; &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; II&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xAC01; &#xC778; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xB294;.

Monoal&#xE9;lica expresi&#xF3;n de IGF2 est&#xE1; regulada por el factor CCCTC vinculante (CTCF) la uni&#xF3;n a la regi&#xF3;n de control de impresi&#xF3;n (ICR) en el alelo materno, con la consiguiente formaci&#xF3;n de un bucle intracromosomal a la regi&#xF3;n promotora. El dominio N-terminal de CTCF interact&#xFA;a con SUZ12, parte del complejo Polycomb represivo-2 (PRC2), para silenciar el alelo materno. Hemos sintetizado se&#xF1;uelo prote&#xED;nas CTCF, fusionando el CTCF &#xE1;cido desoxirribonucleico dominio de uni&#xF3;n a dedo de zinc de CpG PSE1 metiltransferasa o aumento de la prote&#xED;na verde fluorescente. En los fibroblastos humanos normales y de c&#xE1;ncer de mama MCF7 l&#xED;neas celulares, las prote&#xED;nas CTCF se&#xF1;uelo ligado a la ICR no metilado y para la regi&#xF3;n del promotor IGF2, pero no interactuar con SUZ12. EZH2, otra parte de PRC2, fue incapaz de metilar histona H3-K27 en la regi&#xF3;n promotora IGF2, dando como resultado la reactivaci&#xF3;n del alelo impreso. El lazo entre la ICR intracromosomal materna y los promotores de IGF2 no se observ&#xF3; cuando la impronta IGF2 se hab&#xED;a perdido. CTCF epigen&#xE9;ticamente regula la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica al&#xE9;lica de IGF2 por la orquestaci&#xF3;n de las estructuras de la cromatina bucle que involucran PRC2.

La interrupci&#xF3;n de bucle intracromos&#xF3;mica CCCTC por las prote&#xED;nas de uni&#xF3;n del factor Decoy abroga impronta gen&#xF3;mica de Derechos Humanos, similar a la insulina factor de crecimiento II

Jianqun Ling

Medical Service,
VA Palo Alto Health Care System,
Medical Service, VA Palo Alto Health Care System

Stanford University School of Medicine

Associated Chromosome Trap for Identifying Long-range DNA Interactions

Jianqun Ling

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Stanford University School of Medicine

Associated Chromosome Trap for Identifying Long-range DNA Interactions

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