Laboratuar Farelerinde Aradığınız Kokain Footshock Bağlı Yürürlüğe Girmesi incelenmesi için Usulü

Özet

Iade prosedürleri olarak bilinen nüks Hayvan modelleri, ilaç arayan kötüleşen stresin rolü incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Burada, hafif, aralıklı elektrik footshock akut maruz kalma yoluyla laboratuvar sıçanlarda arayan kokain iade inducing için bir yöntem raporu.

Özet

Uyuşturucu bağımlılığı en sinsi yönü yüksek nüks eğilimi. Iade prosedürleri olarak bilinen nüks Hayvan modelleri, nörobiyoloji ve fenomenoloji, uyuşturucu kullanımı relaps çalışma yaygın olarak kullanılmaktadır. Usul varyasyonları, son birkaç on yılda ortaya çıkmış olsa da, en geleneksel iade işlemleri ilaç öz-yönetim (SA) modeli dayanır. Bu modelde, bir hayvanın, ilaç elde etmek için bir edimsel tepki gerçekleştirmek için eğitilmiştir. Daha sonra, davranış stopaj yanıt şarta takviye tarafından söndürüldü. Ilaç arayan Yürürlüğe Girmesi sonra ayrı bir olay, örneğin eğitim, ilaç, ilaç-ilişkili ipuçları tekrar maruz kalma, ya da bir stres ¹ maruz enjeksiyon olarak tetiklenir.

Yürürlüğe Girmesi prosedürleri başlangıçta sıçan ve maymunlar ^{1, 2} uyuşturucu arayan yeniden eğitim ilaç akut olmayan şarta maruz kalma yeteneği incelemek için geliştirilmiştir. Yürürlüğe Girmesi prosedürler bu ^{yana, 1, 3,} 4 arayan ilaç relaps, ilaç ilişkili ipuçları ve çeşitli stres formlarına maruz kalma gibi çevresel uyaranlara, rol çalışma modifiye edilmiştir.

Geçtiğimiz 15 yıl içinde, iade edebiyatının önemli bir odak noktası ilaç relaps stresin rolü olmuştur. Bu ilişkiyi çalışmak için stres en sık kullanılan formlar biri hafif, aralıklı, elektrik footshocks akut maruz kalma. Footshock stres yeteneği arayan ilaç iade ikna etmek için intravenöz eroin SA ⁵ öyküsü olan sıçanlarda Shaham ve arkadaşları (1995) tarafından gösterilmiştir. Daha sonra, intravenöz kokain, metamfetamin ve nikotin SA yanı sıra sözlü etanol SA ^{3, 6} geçmişleri olan fareler jeneralize etkisi oldu.

Ilaç arayan footshock indüklenen iade güvenilir ve sağlam olarak elde edilebilmesine rağmen, bazı parametrik değişkenler için duyarlı olma eğilimindedir bir sonucudur. Bunlar yok ve tekrar test oturumların düzenlenmesi, footshock stres yoğunluğu ve süresi, ve nesli ve iade için test sırasında uyuşturucu ile ilişkili ipuçlarının varlığı. Burada stres ve arayan kokain arasındaki ilişkiyi incelemek için tutarlı bir başarı ile kullanmış olduğunuz arayan kokain footshock indüklenen iadesi için bir protokol mevcut.

Protokol

1. Hayvan Konut ve Aklimatizasyon Prosedürleri

1. Vivaryum geldikten anda 300-325 gr ağırlığında Bay Uzun Evans sıçan, su şişeleri ve gıda karşılamak için tel ızgara kapaklar, geri dönüştürülmüş kağıt pelet yataklar içeren standart plastik kafeslerde ayrı ayrı yerleştirilmiştir.
2. Sıçanlar, sıcaklık ve nem kontrollü vivaryum, ışık-karanlık bir ters programı (19:00 - 07:00 üzerinde ışıklar) tutulur.
3. Gıda ve su ad libitum deney boyunca kafeslerde.
4. Sıçanlar, ameliyat öncesinde bir hafta boyunca vivaryum ve konut koşulları iklime alıştırmak için izin verilir. Sıçanlarda bu süre içinde beslenme, rutin temizlik haricinde rahatsız bırakılır ve ağırlık izlenmesi.

2. İntravenöz Kateterizasyon Cerrahisi

1. Isofluran gaz anestezi altında ve standart aseptik cerrahi teknikler kullanarak, sıçan, sağ juguler ven silastik kateterler ile hazırlanır. Kafatası yüzeyi modifiye edilmiş bir kanül (Plastik One) ve kanül içine kateter çıkar kuyumcular 'vida ve diş çimento ile kafatasına monte edilir. Cerrahi prosedürlerinin ayrıntılı bilgi ^{için, 8, 7 'den} bakınız.
2. Ameliyat sonunda, kateter yaklaşık 0.2 ml,% 50 heparin (1000 IU) ve% 50 dekstroz (25 g/50 ml) içeren bir solüsyon ile temizlendi. Bir plastik bloker kateter dış enkaz korumak için ve kateter açıklığını korumak için kanül açılması üzerine yerleştirilir.
3. Ameliyat sırasında ve ameliyattan bir gün sonra tekrar, sıçanlarda analjezik Ketoprofen 5 mg / kg SC, yönetilmektedir.
4. Sıçanlar, deney başlamadan önce cerrahi kurtarmak için en az yedi gün izin verilir. Bu süre zarfında rutin temizlik ve beslenme hariç, ağırlık ve genel sağlık günlük olarak izlenmesi, fareler, ev kafeslerde rahatsız bırakılır. Iyileşme döneminin son gününde, kateter, kateter açıklık doğrulamak için heparin / dekstroz solüsyonu (Bölüm 2.2) ile temizlendi.

3. Davranış Usulleri

Tüm davranışsal prosedürleri Med Associates Inc (St Albans, VT) tarafından sağlanan ekipman kullanılarak yürütülmektedir. Özel bir odada ev sahipliği cihaz, standart edimsel odaları, ses azaltıcı bir muhafaza içinde yer alan her bir kümesi içerir. Her edimsel odasına iki geri çekilebilir kolları, paslanmaz çelik çubuk yerden hem yükseltilmiş 6.5 cm ile donatılmıştır. Beyaz bir uyarı ışığı sadece bir kolu üzerinde bulunan ve o kolunu (sözde "aktif" bir kolu) eşzamanlı bir infüzyon pompası (RAZEL Scientific Instruments, St Albans uyaran ışık ve aktivasyon aydınlatma sonuç yanıtları, VT). Pompa edimsel odasının hemen dışında bir raf üzerinde bulunan, ancak ses azaltıcı bir muhafaza içinde. Diğer kolu (sözde "aktif değil" kolu) deneysel tüm prosedürler boyunca odasında bırakılır; Bu kolu yanıt sonucu olmadan. Son olarak, her iki meclisin de sabit akım, aralıklı, kaçınılmaz, elektrik footshock çelik çubuk zemin karıştırma yoluyla sunmak için donatılmıştır. Tüm deneysel koşullar (örneğin, uyaran sunumları, ilaç infüzyonları, şok teslim) yanı sıra verilerin kaydedilmesi ve konsolidasyon, test odaları ve merkezi bir bilgisayar işletim Med Associates yazılım (MED-IV) arasındaki arabirimler aracılığıyla gerçekleştirilir.

5 aşamalarında deney yapılır: 1) alışma; 2) Kokain SA, 3) İlaç ücretsiz dönemi; 4) Extinction, ve 5) iadesi için test. Tüm aşamalarında (ilaçsız dönemi için hariç), sıçan, günlük oturumları için konut oda edimsel test odalarına transfer edilir. Hayvanlar, küçük plastik kaplarda, ayrı ayrı aktarılır. Gıda ve su edimsel odaları mevcut değildir.

1. Alışma
   1. Ilk kokain SA oturumu (bkz. Bölüm 3.2) önceki yirmi dört saat, sıçanlarda 2 saat tek bir oturum sırasında edimsel odaları alışmakta izin verilir, bu oturum sırasında aktif kolu geri çekilir.
2. Kokain SA Eğitimi
   1. Her bir günlük eğitim oturumundan önce, fareler konut oda tartılır. Daha sonra onlar edimsel odalarına transfer edilir.
   2. Edimsel odaları, bir bahar ve boru montaj (ilaç infüzyon pompası uzanan) konuyor üzerine kafatası monte kanül bağlıdır.
   3. Sıçanlar günlük izin sırasında kokain HCl kendi kendini yönetmek 3 saat 8-10 gün toplam oturumları, (ya da ardışık olarak ya da 5 ve 6 oturumları arasında iki müdahale "gün kapalı").
   4. (9:00-12:00) sabah ve öğleden sonra (13:00-16:00) arasında alternatif SA oturumları. T hem de sonraki aşamalarında (yani yok ve test) deney prosedürleri denk gelmesi nedeniyle, SA seans zamanlama dönüşümlü olaraktüm hayvanlar için günün IME'ler (bkz. Bölüm 3.4 ve 3.5); bu nedenle, bu düzenleme sonraki ilaç arama davranışı, günün herhangi bir karıştırıcı etkilerini önler.
   5. Her eğitim oturumu sırasında hayvanlar aktif kolu retrakte edimsel odalarına yerleştirilmiş, 5 dakikalık bir iklimlendirme süre önce gelmelidir.
   6. Eğitimin başında aktif kolu odasına uzatılır ve uyaran ışık (aktif kolu üzerinde bulunan) 30 aydınlatılmış s Buna ek olarak, evde ışık şu anda aktif ve oturum boyunca aydınlatılmış kalır. Birlikte, bu olaylar kokain durumu sinyali.
   7. Oturumu sırasında, aktif kolu yanıtları donatı sabit-oran-1 programı kokain 3-infüzyonu (0.23 mg/65 mcL, iv) ile takviye edilmiştir. Infüzyon pompası ve ilaç dağıtım aktivasyonu ile eş zamanlı olarak aktif kolu üzerinde uyaran ışık 20-s aktivasyon. Bu 20-ışık sunum ek aktif kolu yanıtları kaydedildi, ancak takviye sırasında bir "zaman aşımı" dönemi tekabül eder.
   8. Hayvanlar en fazla 3 saatlik seans başına 50 infüzyonları bir izin verilir. Biz rutin olarak çalışmalarımızı bu kriteri dayatmak ve deneyim, büyük ölçüde ortadan kaldıran değil, aşırı doz nedeniyle ölüm olayları azalttığını buldular.
   9. Her günlük oturumun sonunda, sıçanlar 'kateter 0.2-0.3 ml heparin dekstroz solüsyonu ile temizlendi (bkz. Bölüm 2.2) ve fareler, evlerine kafes döndü.
3. Uyuşturucuya süresi
   1. Son kokain SA seanstan sonra en az yedi gün evlerine kafeste, sıçan (beslenme, rutin temizlik haricinde, ağırlık izleme) rahatsız bırakılır.
4. Kokain eğitimli davranış ve hayvanların neslinin
   1. Sıçanlar nesli eğitim 9:00-10:00 arasında edimsel odalarına transfer edilir.
   2. İlkbahar ve boru montaj kafatası monte kanül bağlıdır.
   3. SA eğitim koşulları ile tutarlı, nesli her geçen gün eğitim sırasında hayvanlar aktif kolu retrakte edimsel odalarına yerleştirilmiş, 5 dakikalık bir iklimlendirme dönemi öncesinde.
   4. Sıçanlar sonra 30 dakika aralıklarla ayrılmış 60 dakika, dört nesli seans verilmiştir. Her 60 dakikalık seans eğitim oturumlarının başlangıç ​​(yani, evin ışığı aydınlatma, aktif kolu uzatılması, ve aktif kolu üzerinde uyaran ışık 30 saniye aydınlatma) meydana gelen aynı olaylar başlatılır. SA eğitim sırasında mevcut olan tüm oturumlar boyunca bu aktif kolu yanıtları hariç, (yani, 20 sn ve infüzyon pompası 3-s aktivasyon için uyaran ışık yanıt şarta aydınlatma) korunur artık kokain infüzyonları ile takviye edilmiştir . Aktif kolu, her 60 dakika yok oturumda ayrı 30 dakika aralıklarla sırasında, geri çekilir ve evin ışığı söner.
   5. Son 60 dakikalık oturumun sonunda, sıçan, evlerine kafes döndü.
   6. Adımlar 3.4.1. 3.4.5 için. 3 gün üst üste tekrarlanır.
5. Footshock stres kokain eğitimli davranış Yürürlüğe Girmesi
   1. Sıçanlar 9:00-10:00 arasında edimsel odalarına transfer edilir
   2. Edimsel odaları konuyor üzerine, ilkbahar ve boru montaj kafatası monte kanül bağlıdır.
   3. Eğitim ve nesli için gerekli koşulları ile uyumlu olarak, sıçanlarda aktif kolu ile edimsel odaları yerleştirilmiştir sırasında, 5 dakikalık bir iklimlendirme süre, retrakte sağlanmaktadır.
   4. Sıçanlar sonra nesillerinin tükenme aşamasında verilen bu aynı 30 dakika arayla ayrılmış iki 60 dakika yok oturumları (bakınız 3.4.4) verilmiştir.
   5. 60 dakikalık ikinci seanstan sonra daha önce aktif bir kolu üzerinde yanıtların toplam sayısı 15 den az ise, hayvanlar ek bir 30 dakika aradan sonra iade için bir test verilmiştir. Bu 30 dakika arayla footshock veya sahte footshock (yani, hiçbir footshock), (3.5.6.) Uygulanır. 15 veya daha az aktif kolu yanıtların bir kriter ikinci seanstan sonra elde değil ise, iade için, ek bir nesli seans (lar) Test öncesinde verilir.
   6. On dakika sonra 60 dakikalık ikinci nesli oturumu (veya 15 ya da daha az yanıtları yok kriter kurmak için gerekli 60 dakika herhangi bir ek yok seans (lar) sonra), hayvanlar 20 dakika (veya sahte aralıklı elektrik footshock stres maruz edimsel odasında footshock). Footshock aktif kolu geri çekilir ve ev ve uyarı ışıkları sönmüş bir süre içinde verilir. Footshock ortalama 40 sn (10-70 s aralık) aralıklarla değişken bir zaman çizelgesine göre teslim edilir. Her şok bir yoğunluk 0.9 mA teslim süresi 0.5 sn. Footshock Bu parametreler kapsamlı bir pilot çalışma dayanmaktadırkokain isteyen güvenilir iade kurmak için minimum footshock maruz kalmanın yoğunluğu ve süresi, laboratuarımızda gerçekleştirilmektedir. Bu parametreler altında, hayvan 0,5 s şok yansıtıcı atlama yanıt sergileyen ve zaman zaman kısa bir seslendirme yayarlar. Hayvanlar şok dönemi boyunca gözlenen olmasına rağmen, şok yoğunluğu sıkıntı daha belirgin işaretler ikna etmek için yeterli büyüklükte değildir.
   7. Yok olma koşulları (yani hemen altında aşağıdaki footshock oturumun sona ermesi, aktif kolu uzatılır ve sıçanlarda kola basın izin verilen yanıtlar kokain takviye değildir, ancak, infüzyon pompası, uyarıcı ışık ve aktivasyon aydınlatma sonucu devam? .) Bu süre, iade için bir test olarak tanımlanır ve genellikle süresi 1-3 saattir. En yanıt test seansının başlarında (ilk 30 dakika-1 saat) oluşur ve daha sonra, daha genişletilmiş bir test süre söndürmüştür. Böylece, 1 saat test uzun test dönemleri etkisi daha tam nesli profili ile iade etkiyi yakalamak için yeterli olacaktır.
   8. Tekrarlayan ölçümler tasarımı istihdam, her sıçan footshock ve sahte footshock koşullar altında test edilir. Adımlar 3.5.1. için 3.5.8, bir sonraki test gününde tekrarlanır ve iade (footshock veya sahte footshock) için alternatif bir test uygulanır.

4. Temsilcisi Sonuçlar:

Şekil 1, öz-yönetim, eğitim, yok olma, ve tekrar test sırasında aktif ve inaktif kollarını faaliyeti için Stilize tepki profilleri.

Şekil 1 Burada açıklanan deney protokolünde çeşitli aşamalarında elde edilen tipik stilize edimsel tepki profilleri sunar.

1. Aktif kolu yanıtları

1. Kokain SA eğitim Şekil 1 (sol panel), haşlama ve aktif kolu presleri toplam sayısı sayısı hem de içeren tipik bir kokain SA eğitim eğrisi gösterir . Sıçanlar davranış kurulduktan sonra, sonraki oturumda ilaç alımının istikrarlı bir oranı (genellikle% 20 daha az-session arası varyans) korumak, genellikle 1-3 seans içinde kokain SA kazanmak ve.
2. Kokain eğitimli davranış Extinction Extinction Gün 1 yanıtları ilk kez takviyeli olmayan, aktif kolu yanıtlarının toplam sayısı, başlangıçta daha yüksek olduğunu (orta panel) Şekil 1'de görüleceği eğitim aşamasında (sözde "yok patlama" ne karşılık gelen) sonunda; yavaş yavaş nesli dört oturumda, yanıt azalır. Tükenme Günlük 2 ve 3, bazı kurtarma yanıt (bir önceki günün son oturumu sırasında gözlenen göreli) gözlenebilir; Ancak, cevaplar genellikle genellikle tükenme önceki gün başında daha az ve nesli o gün için dört seans içinde daha hızlı ilerler.
3. Kokain Yürürlüğe Girmesi aramaktadır. Şekil 1 (sağ panel) görülebilir aralıklı footshock maruz kalma 20 dakika, takviyeli olmayan bir önceki nesli oturumun sonunda gözlenen göreli aktif kolu yanıt bir artışa neden olur . Footshock sahte footshock uygulandığında hangi koşullar altında gözlenen göreli yanıt da bir artışa neden olur. Böylece, footshock stres arayarak kokain iade olarak ifade edilebilir: 1) yok oturumda yanıtlara göre footshock için maruz kaldıktan sonra güçlendirilmiş olmayan yanıtların artan sayıda footshock önce veya 2) non-takviyeli artan sayıda sahte footshock footshock akrabası sonra karşılıklar.

2. İnaktif kolu yanıtları

Bu deneysel tüm aşamalarında, inaktif bir kolu ile ilişkili çok düşük tepki düzeyleri vardır, Şekil 1 (kırmızı çizgi) görülebilir. Ancak, bu kolu yanıt mütevazı bir artış bazen footshock strese maruz kalınmasının ardından görülmektedir. Yanıt böyle bir artış meydana geldiği durumlarda bile, aktif kolu yanıt artış orantılı olarak çok daha büyük olma eğilimindedir.

Tartışmalar

Geçen birkaç on yıl içinde, üç varyasyon SA iade prosedürünün laboratuvar sıçan ve maymunlarda uyuşturucu arayan iade çalışma geliştirilmiştir. Prosedürel varyasyonlar farklılıkları tanımlamak, öncelikle ilaç SA, yok, ve test oturumları, aynı ^gün içinde 1 ya da farklı günlerde oluşup oluşmadığına ilişkindir. Bu yazıda anlatılan prosedür yok ve test oturumları ayrı "içinde arasındaki" oturum varyasyon, ilaç SA günlük oturumları sırasında nedeniyle oluşur (yani arasında oturumda şekilde) olarak adlandırılan, ancak yok ve test, aynı gün içinde (yani, içinde oturumda şekilde) ^{[örneğin, 7, 9]} ortaya çıkar . Alternatif olarak, oturumlar arasında "sözde" prosedürleri, deney tüm aşamaları sırayla meydana gelen SA, nesli ve test oturumları (yani, tüm aşamalarında oturumları arasında) farklı günlerde verilmiştir [örneğin, ^{8, 10, 11].} Buna karşılık, "oturumları içinde" tam prosedürler, SA eğitim, yok, ve test oturumları, aynı gün içinde ^[örneğin, 12] ortaya çıkar.

Iade prosedürünün farklı varyasyonlarını kullanarak arayan ilaç footshock indüklenen iade raporları var yayınlanmış olmasına rağmen, biz yok ve test aynı meydana geldiğinde bu stres (kokain SA öyküsü olan hayvanların en az) en etkili olabilmesi için bulduk gün (yani, "içinde" oturumları şekilde). Alternatif olarak, "oturumları arasında" tamamen kullanarak işlem arayan kokain güvenilir footshock indüklenen iade alma başarı vardı, ancak sadece hayvanların nesli ve test deneme sırasında ^8, ya da en azından boyunca SA odaları ev sahipliği hangi koşullar altında ^13. Bu arasında oturum yaklaşım, mevcut protokol açıklanan üzerinde dezavantajı, eğitimli ve bir kerede test edilebilir konuların sayısını sınırlayan ve böylece, veri toplama etkinliği azaldığı. İşbu Protokol şartlar altında yalnızca bir grup hayvan söndürüldü ve belirli bir zamanda test rağmen bir hafta iki grup sıçan SA eğitim aşamasının başlangıç ​​zamanı inanılmaz, daha fazla verim elde edilebilir. Bu senaryoda, ikinci grup SA eğitim 2 Hafta girerken birinci grup sıçanlarda bir uyuşturucu ücretsiz faz girebilirsiniz ve daha sonra, ikinci grup ilaç ise ilk grup yok ve test yürütülmektedir olabilir -ücretsiz faz. Bu yaklaşım, kaynakların daha verimli kullanılmasına izin verir ve çok etkili ve güvenilir footshock indüklenen iade liderlik ederken, veri toplama oranını hızlandırır.

Önemlisi, bizim prosedürü, iade için önceden ilaç takviyeli davranış ve test yok uyuşturucu ile ilişkili ipuçlarının varlığında oluşur. Ilaç ilişkili ipuçları yokluğunda yok eğitim veya test yürütülen hiçbir zaman olmasına rağmen, (test söndürüldü ipuçlarının yokluğunda oluştuğunda stres aslında iade inducing etkisiz olabilir, kişisel iletişim dayalı anlayış kokain SA tarihinin en az hayvanların durumda). Bu değişkenin sistematik bir inceleme ve pozlar teorik etkileri, gelecekteki araştırmalar için önemli bir soru.

Son bir usul faktör olmadığını garanti Yorum iade footshock stres etkisi bağlam manipülasyonlara son derece hassas görünüyor. Örneğin, footshock stres, ilaç, ilaç SA ve nesli ortaya çıktığı bir ortamda uygulandığında eğer arayan iade inducing tek etkili olduğunu, bir roman bağlamında footshock stres maruz oluşursa arayan ilaç eski haline gelmez, ¹⁴ iade üzerindeki etkileri stres ve ilaç ortamı arasında önemli bir etkileşim göstermektedir.

Sonuç olarak, footshock iade işlemleri, bu yazıda anlatılan gibi, stres ve ilaç nüks arasındaki ilişkiyi düzenleyen temel davranış ve nörobiyolojik mekanizmaları aydınlatmak için hatırı sayılır bir başarı ile kullanılır olmuştur. Gerçekten, bu işlemler, farmakolojik ön işlemleri ya da belirli nöronal substratlar hedef nörokimyasal manipülasyonları içerecek şekilde değişiklik olduğunda, stres ile arayan ilaç iade nörobiyoloji karakterize için güçlü bir araç olarak hizmet edebilir.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package		Med Associates, Inc.	MED-008-CT-B1
Deep extra tall MDF sound attenuating cubicle	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-018MD
Standard modular test chamber with drug infusion top and waste pan	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-008CT
Stainless steel grid floor	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-005
House light, hooded, 28V	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-215M
Stimulus light 1” white lens	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-221M
Low profile retractable response lever	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	ENV-112CM
SmartCtrl 8 Input/16 output package	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	DIG-716P2
Single speed syringe pump, 3.33 RPM	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	PHM-100
Rat self infusion package	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	PHM-119B-23-D
Drug Delivery, Arm assembly	Basic Drug Self-Administration Test Package for Rat Package Component	Med Associates, Inc.	PHM-110-SAI
Square wave aversive stimulator	Footshock Stress Component	Med Associates, Inc.	ENV-414S
Patented quick disconnect harness for stainless steel grid floor	Footshock Stress Component	Med Associates, Inc.	ENV-005-QD
Shock output cable	Footshock Stress Component	Med Associates, Inc.	SG-219G-10
MED-PC IV Software	Software	Med Associates, Inc.	SOF-735