JoVE Logo
Yazarlar
Bize Ulaşın

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Yardımcı karaciğer nakli başarısız karaciğer rejenerasyonu kadar, akut karaciğer yetmezliğinde geçici bir destek sağlar. Portal ven ve arteri (PVA) ile heterotopik yardımcı karaciğer transplantasyonu (HALT) yeterli karaciğer fonksiyon oluşturur. Biz greft morfolojisi ve fonksiyonu üzerinde portal ven arteriali etkisini incelemek için, sıçan benzer bir tekniği geliştirdi.

Özet

Akut karaciğer yetmezliği yardımcı karaciğer nakli ilginç bir alternatif bir yaklaşımdır. Amaç başarısız doğal karaciğer yeniden kadar geçici bir destek sağlamaktır. 1-3 APOLT metodu, yardımcı kesimleri-en ortotopik implantasyon teknik sorunların çoğunu kaçırır. Ancak bu yöntem doğal karaciğer ve greft. 4 1998 yılında hem geniş rezeksiyon gerektirir, Erhard portal ven ve arteri (PVA) (Şekil 1) kullanılarak heterotopik yardımcı karaciğer transplantasyonu (HALT) geliştirdi. Bu teknik ilk klinik sonuçlar vaat gösterdi. 5-6 Biz greft morfolojisi ve fonksiyonu (Şekil 2) debi ayarlı PVA etkisini incelemek için sıçan akış düzenlenen PVA ile, bir HALT-teknik geliştirdi.

Orijinal boyutunun% 30 düşürülmüş bir karaciğer greft, heterotopically sağ böbreğin eksplantasyonu sonra alıcının sağ renal bölgede implante edildi.60; Greft kızıl-hepatik kaval ven alıcının infrahepatic kaval ven ile anastomoz edildi. Donörün portal ven arteriali stent tekniği ile alıcının sağ renal arter yoluyla yürütülmüştür. Arteriyelize portal ven kan akış düzenleme 0.3 mm'lik bir iç çapa sahip bir stent kullanımı ile elde edilmiştir. Greft çölyak gövde uç-yan alıcının aorta ve safra kanalı ile anastomoz duodenum içine implante oldu. Yerli karaciğer subtotal rezeksiyon akut karaciğer yetmezliğine yol açan yapıldı. 7

Bu şekilde, 112 transplantasyon yapılmıştır. Perioperatif sağkalım oranı% 90 idi ve 6 haftalık sağkalım oranı% 80 idi. Altı hafta işleminden sonra yerli karaciğer 9.8 ± 1 g ile 2.3 ± 0.8 g ağırlığında bir artış gösteren sokulabilir. Şu anda, greft ağırlığı 2.3 ± 0.8 g 3.3 ± 0.8 g 'a düşmüştür. Biz greft morfolojisi ve fonksiyonu açısından umut verici uzun vadeli sonuçlar elde etmek mümkün. Yerli karaciğer yeniler kadar akış düzenlenen PVA ile HALT güvenilir akut karaciğer yetmezliği köprü.

Giriş

Akut karaciğer yetmezliği% 60-80 mortalite oranı. 8 akut karaciğer yetmezliği yol açan klinik tıpta önemli bir sorun teşkil etmektedir, yardımcı karaciğer transplantasyonu akut faz köprü için umut verici bir alternatif tedavi yöntemidir. Yerli karaciğer immünosüpresyonun ilaçlar kesilebilir rejenerasyon aşağıdaki yenilemek için sol ve. Bunun bir sonucu olarak, aşı Atrofik olacaktır. Ancak yardımcı karaciğer nakli için ameliyat tekniği halen tartışılmaktadır. 1-3 Bu bağlamda, Terpstra greft için alan eksikliği rapor, portal kan fenomen ve venöz konjesyon ve drenaj sorunu çalmak. 9-10 donörün portal ven Alıcının portal ven uca-yan anastomoz edildi. Bu greft ve yerli karaciğer arasında ve portal ven trombozu portal akım rekabet sonuçlandı. Bu teknik sorunların çoğu APOLT-yöntemin kullanılması (orthotop ile önlenebiliric yardımcı segmentleri implantasyonu). 4 Ancak bu yöntem doğal karaciğer ve greft. 4 1998 yılında hem geniş rezeksiyon gerektirir, Erhard ve ekibi portal ven ve arteri (PVA) (Şekil 1 kullanan heterotopik yardımcı karaciğer transplantasyonu (HALT) geliştirdi ). Hilusu ve yerli karaciğerin portal ven bu yöntemin kullanımı ile saygı gösterilir. Bu yerli karaciğer kurtarma rahatsız olabilir gibi portal ven trombozu ve portal kan gibi istenmeyen yan etkileri alıcı çalmak fenomen, yedek parça. Buna ek olarak, doğal karaciğer ve greft yaygın bir biçimde karaciğer rezeksiyonu (greft) ve rejenerasyon (yerli karaciğer) kapatmak için kullanılabilecek ve sonuçta daha az kanama ve daha fazla kalan toplam karaciğer parenkimal kütlesi ile, bu yöntem için gereklidir. Bu teknik ilk klinik sonuçlar vaat gösterdi. 5-6 Bu deneysel çalışmanın amacı portal ven ve arteri içinde olan bir HALT tekniğinin gelişmesi olduAraştırma amacıyla, sıçan (Şekil 2). Ilk deneylerde karaciğer kapsül reperfüzyon ve masif kanama sonrasında nakledilen greft tıkanıklık sonuçlandı, damar dikkate arteriyelize portal kan akımı regülasyonu sürmedi. 11 arteriyelize portal vende sonra kan akışı bu yana 0.3 mm'lik bir iç çapa ve 8 mm arasında bir uzunluğa sahip olan bir stent ile ayarlanmıştır. Pilot Deneyler, 0.3 mm'lik bir stentin çapı, üst fizyolojik aralığında arteriyelize portal ven içinde bir ortalama kan akımını verir olduğunu göstermiştir (1.7 +/- 0.4 ml / dak / g karaciğer ağırlık). Kan akımı düzenleme özelliğine sahip 12 Sonuçlarımız kan akış regülasyonu büyük portal olmadan alıcının iliak arter yoluyla PVA ile yaptığı deneylerde. 13 DURDURMASI gerçekleştirilen ve sinüzoid kısıtlarını meydana Hong, sonuçları ile ilişkilidir.

Bizim video amacı d etmektiradım adım emonstrate sıçanda bu ne.w deneysel cerrahi tekniği. Uzun vadede önerilen teknik karaciğer rejenerasyonu ve inter-karaciğer rekabet ve portal ven damarlanma, portal ven hiperperfüzyon ve portal kan akımı düzenlenmesinde çalışmalarda kullanılabilir.

Protokol

1. Deney Hayvanları

  1. Hayvan koruma FELASA kurallarına uygun olarak, yapılacaktır tüm deneyler için bir Yerel Etik Kurul onayı (K 40, 17/99) edinin.
  2. (Örneğin, Charles River WIGA GmbH, Sulzfeld, Almanya) herhangi bir ticari üreticiden satın almak için erkek Lewis sıçanları mevcuttur kullanın. Burada, 224 hayvanlar (112 bağış, 112 alıcılar) 112 nakli gerçekleştirmek için kullanılmıştır. Alıcılar, ameliyat sonrası 6 haftada feda edildi. Operasyon sırasında, hayvanlar 250-350 g ağırlıkta olması gerekmektedir.
  3. Yiyecek ve su ücretsiz erişim ile iklim kontrollü odalarda hayvanları tutun.

2. Anestezi ve Operatif Hazırlık

  1. 1 l / dk arasında bir oksijen akış hızı ve anestezi sağlamak için% 5 anestezi gazı ile bir buharlaştırıcı izofloran ile anestezi makineye bağlı bir pleksiglas kutuya sıçan yerleştirin. % 1.5 isofluorane de anestezi koruyun.
  2. Yılında sıçan yerleştirinBir ısınma plaka üzerinde sırtüstü yatar pozisyonda.
  3. Bir epilasyon kremi ile karın kürk çıkarın.
  4. Aşağıdaki gibi steril bir cerrahi alan hazırlayın: benchtop temizlemek için bir dezenfektan kullanın. Ilk kesi sitesi kullanım klorheksidin dezenfeksiyon, alkol saniye ve son olarak, bodur solüsyonu (örn, klorheksidin ve% 70 izopropil alkol) için. Bir tek kullanımlık cerrahi önlük ve cerrahi eldiven giyin.
  5. Steril mikrocerrahi aletler kullanın.
  6. 12-20 kat büyütmeli bir operasyon mikroskobu kullanın.

3. Cerrahi Prosedür

  1. Donör operasyonu

    Hazırlık
    1. Median laparotomi gerçekleştirin ve sol lateral lob ve Higgins tarafından açıklandığı gibi greft medyan lobu rezeke. 14
    2. Daha sonra triadın hazırlar. İlk küçük safra tıkanıklığı ve dilatasyon uyarmak için safra Arter. Daha sonra bağlanır ve gastroduode transeksiyonunal ven ve arter. Daha sonra, çölyak gövde ve ortak hepatik arter izole ve sol gastrik arter ve dalak arteri transect. Sıkışık safra kanalı kesilirken, ve içine bir 20-G stent tanıtmak. Stent yerleştirme bütün hilar safra kanalı sistemi drenaj sağlamalıdır. Stent distal safra transect.
    3. Sağ sağ renal venin üstüne kaval ven infrahepatic segmenti izole eder.

      Perfüzyon
    4. Çölyak gövde üzerinde aorta bağlanmasını takiben, portal ven kelepçe ve sarın. Portal ven içine perfüzyon kateter (14 g) ortaya koyar ve histidin-triptofan-ketoglutarat (HTK) solüsyonunun 30 ml (12 cm H2O, 4 ° C) ile perfüzyon gerçekleştirin.
    5. Diyaframı ve perfüzata dışarı akmasına izin suprahepatik kaval ven kesti.
    6. Aort yama ile birlikte çölyak gövde tüketim ve histidin-triptofan-ketoglutarat çözümü ile durulayın.

      Eksplantasyonu
    7. Sağ sağ renal venin yukarıda infrahepatic kaval ven transect.
    8. Ardından, portal vende 0,3 mm çapında bir stent yerleştirmek ve dikilen ile sabitleyin. Aşağıdaki işlemi sırasında, portal ven sağ renal arter yoluyla arteriyelize edilir. Stent distal portal ven transect.
    9. Suprahepatik kaval ven ligasyonu sonra, diyaframın bir manşet ile birlikte transect.
    10. Greft Eksplantasyona ve buz üzerinde bir plastik torba içinde 4 ° santigrat histidin-triptofan-ketoglutarat (HTK) solüsyonunun saklayın. Infrahepatic kaval ven yerleştirin köşe dikişler (8-0 etilon).
  2. Alıcı operasyonu
    1. Median laparotomi gerçekleştirin ve infrahepatic kaval ven hazırlamak. Ardından, sağ renal arter ve üreter izole üreter Arter ve transect. Kökeni de sağ renal arter Kelepçe, sonra sağ renal ven Arter. Sonra her iki kesilerinden sonra yenidennal gemiler, nefrektomi yapma. Daha sonra, sağ renal arter kısaltmak heparin tuzlu su çözeltisi (40 UI heparin / ml tuz çözeltisi) ile durulayın.
    2. Infrahepatic kaval ven oval lümen oluşturmak için infrahepatic kaval ven proksimal ve distal klemplemesinden sonra dikilen proksimal sağ renal ven transect. Heparin tuzlu su çözeltisi ile kaval ven durulayın. Alıcının karnın sağ renal bölgede greft dikiniz.
    3. Bir 8-0 etilon çalışan sütür ile Alıcının kaval ven donörün infrahepatic kaval ven uç-yan anastomoz.
    4. Heparin / tuzlu su çözeltisi ile yıkandıktan sonra, sağ renal arter (Şekil 3) içine portal ven stent getirmektedir. 2 ilmek (8-0 etilon) ile portal ven ve renal arter bağlayın. Bir bağ (örgülü ipek siyah 7-0) ile renal arter bağlayan stent Fix.
    5. Reperfüzyona izin verecek şekilde, ilk olarak, daha sonra, arteryel kelepçe kaldırmakvenöz kelepçeleri (Şekil 4).
    6. Infrarenal aort hazırlayın, sonra yakın ve uzak microclamp yerleştirin ve sağ hem de kelepçeler arasındaki aort insizyon. Bir 10-0 etilon çalışan sütür ile, aort yama kullanarak, aorta ve vericinin çölyak gövde arasında bir uç-yan anastomoz gerçekleştirin.
    7. Duodenum içine safra kanalı yerleştirin: duodenum duvarında bir kese dikişi uygulayın, sağ kese ortasında duodenum duvarında küçük bir kesi yapmak. Duodenum içine stent safra kanalı tanıtmak ve kese dikişi sıkın. Son olarak, sıkıca birbirine iki dikiş (etilon 8-0) (Şekil 5) ile onikiparmak bağırsağı ve safra kanalı tutun.
    8. Daha sonra doğal karaciğer rezeksiyonu ara toplam birinci Emond ve diğerleri tarafından tarif gerçekleştirin. Akut karaciğer yetmezliği taklit. 7
    9. Yeniden lateral karın duvarına, birlikte diyafram bir manşet ile, greft suprahepatik kaval ven Fix4-0 vicryl sütür ile cipient. Tuzlu su çözeltisi (Şekil 6) ile karın durulayın.
    10. Kas tabakası için 4-0 vicryl çalışan dikiş ve kutanöz için 3-0 vicryl çalışan dikiş kullanın.

4. Kurtarma ve Postoperatif Yönetimi

  1. Hayvanlar bir kızılötesi ısınma lambası altında anestezi kurtarmak edelim.
  2. 2 gün boyunca 0,03-0,05 mg / kg bw sn her 8-12 st bir dozda buprenorfin enjekte edilir.
  3. Genel durumunu ve hastalık ya da enfeksiyon belirtileri ilişkin hayvanları inceleyin.

İlk Yerli Karaciğer Ağırlık 5. Hesaplama

Aşağıdaki şekilde, ilk ana karaciğer ağırlığı hesaplayın: Tüm karaciğer ağırlığı rezeke karaciğer lobları ağırlığını çıkarmak içinden (vücut ağırlığının (+/-% 0,49 arasında bir standart sapma ile bu değer% 2.66, N ile önceki deneylerde saptandı = Aynı soy ve a 80 hayvanlarge)). 15

Sonuçlar

Transplantasyon süresi ortalama yaklaşık 150 dakika idi. Soğuk iskemi zamanı, 64 +/- 7 dk sıcak iskemi süresi en az 25 dakika idi.

Perioperatif sağkalım oranı% 90 idi ve 6 haftalık sağkalım oranı% 80 idi. % 20 kayıp postoperatif ilk haftasında çünkü stent çıkık ve safra kaçağı (dört hayvanlar) peritonit nedeniyle oldu ve nedeni aşağıdaki beş hafta boyunca pnömoni, karın içi abse ve ileus (yedi hayvanlar). Hayatta kalan hayvanların mükemmel bir genel durumda...

Tartışmalar

İlk heterotopik yardımcı sıçan karaciğer nakli Lee ve arkadaşları tarafından tanımlanmıştır., 1966 yılında 16 Hess tarafından izledi. Greft 17 portal ven alıcının portal ven ile anastomoz edildi. Bu işlem sırasında, yerli karaciğer portal venöz kan dolaşımı tehlikeye düşer.

1991 yılında Hong kan akış regülasyonu büyük portal olmadan. Alıcının iliak arter yoluyla PVA ile 13 DURDURMASI gerçekleştirilen ...

Açıklamalar

Tüm Yazarlar herhangi bir çıkar ilan etti.

Teşekkürler

Bu çalışma "Deutsche Forschungsgemeinschaft" (DFG) tarafından finanse edildi. K. Schleimer NRW Lise Meitner Bilim Bakanlığı Bursu ve Araştırma tarafından desteklenmiştir. Biz onu mükemmel düzenleme yardım için Bayan Mary-Joan Blümich teşekkür etmek istiyorum. Dr Maria Kokozidou Fresenius 2011_A61 finanse edildi.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
Braided Silk black 7-0 Ethicon Products892100
Vicryl 3-0Ethicon ProductsJ285G
Vicryl 4-0Ethicon ProductsJ284G
Ethilon 8-0Ethicon Products1714G
Ethilon 10-0Ethicon Products7770G
Vasofix safety 14GB Braun2758853
Vasofix safety 20GB Braun2758818
2 French (0.012”/0.3 mm ID x 0.025”/0.6 mm OD) x 24”/60 cm polyurethane catheterAccess technologies a division of Norfolk Medical, Inc., Illinois, USACNC-2P
HTK solution, CustodiolDr. Franz Köhler Chemie GmbH, Alsbach-Hähnlein, Germany
Isofluorane 5 %Any genericon
HeparinAny genericon
0.9% salineAny genericon
BuprenorphineAny genericon

Referanslar

  1. Boudjema, K., et al. Auxiliary liver transplantation for fulminant and subfulminant hepatic failure. Transplantation. 59, 218-223 (1995).
  2. Boudjema, K., Jaeck, D., Siméoni, U., Bientz, J., Chenard, M. P., Brunot, P. Temporary auxiliary liver transplantation for subacute liver failure in a child. The Lancet. 342, 778-779 (1993).
  3. Chenard-Neu, M. P., et al. Auxiliary liver transplantation: Regeneration of the native liver and outcome in 30 patients with fulminant hepatic failure - a multicenter European study. Hepatology. 23, 1119-1127 (1996).
  4. Gubernatis, G., Pichlmayr, R., Kemnitz, J., Gratz, K. Auxiliary partial orthotopic liver–transplantation (APOLT) for fulminant hepatic failure: first successful case report. World J Surg. 15, 660-666 (1991).
  5. Erhard, J., Lange, R., Giebler, R., Rauen, U., de Groot, H., Eigler, F. W. Arterialization of the portal vein in orthotopic and auxiliary liver transplantation. Transplantation. 60, 877-879 (1995).
  6. Erhard, J., et al. Auxiliary liver transplantation with arterialization of the portal vein for acute hepatic failure. Transpl Int. 11, 266-271 (1998).
  7. Emond, J., Capron-Laudereau, M., Meriggi, F., Bernuau, J., Reynes, M., Houssin, D. Extent of Hepatectomy in the rat. Eur Surg Res. 21, 251-259 (1989).
  8. Mas, A., Rode`s, J. Fulminant hepatic failure. Lancet. 349, 1081-1085 (1997).
  9. Terpstra, O. T. Auxiliary liver grafting: a new concept in liver transplantation. The Lancet. 342, 758 (1993).
  10. Terpstra, O. T., Reuvers, C. B., Schalm, S. W. Auxiliary heterotopic liver transplantation. Transplantation. 45, 1003-1007 (1988).
  11. Schleimer, K., Lange, R., Rauen, U., Erhard, J. Auxiliary liver transplantation in acute liver failure in the rat - an illustrated description of a new surgical approach. Langenbecks Arch Surg. 384 (2), 204-208 (1999).
  12. Schleimer, K., et al. Physiologic microcirculation of the heterotopically transplanted rat liver with portal vein arterialization depending on optimal stent diameter. Med Sci Monit. 28 (BR140-145), (2006).
  13. Hong, H. Q., et al. Study of portal arterialization with auxiliary liver in rats. Hiroshima J. Med. Sci. 40, 29-33 (1991).
  14. Higgins, G. M., Anderson, R. M. Experimental pathology of the liver. I--Restoration of the liver of the white rat following partial surgical removal. Arch. Path. 12, 186-202 (1931).
  15. Schleimer, K., et al. Auxiliary liver transplantation with flow-regulated portal vein arterialization offers a successful therapeutic option in acute hepatic failure--investigations in heterotopic auxiliary rat liver transplantation. Transpl Int. 19 (7), 581-588 (2006).
  16. Lee, S., Edgington, T. S. Liver transplantation in the rat. Surg. Forum. 17, 220-222 (1966).
  17. Hess, F., Willemen, A., Jerusalem, C. Auxiliary liver transplantation in the rat, influence of the condition of the recipient's liver on the fate of the graft. Eur. Surg. Res. 9, 270-279 (1977).
  18. Aguirrezabalaga, J., Arnal, F., Marini, M., Centeno, A., Fernandez-Selles, C., Rey, I., Gomez, M. Auxiliary liver transplantation with portal arterialization in the rat: description of a new model. Microsurgery. 22, 21-26 (2002).
  19. Palmes, D., Dietl, K. H., Drews, G., Holzen, J. P., Spiegel, H. U. Auxiliary partial orthotopic liver transplantation: treatment of acute liver failure in a new rat model. Langenbecks Arch Surg. (386), 534-541 (2002).
  20. Schleimer, K., et al. Improved microcirculation of a liver graft by controlled portal vein arterialization. J Surg Res. 116 (2), 202-210 (2004).
  21. Schleimer, K., et al. Portal hyperperfusion causes disturbance of microcirculation and increased rate of hepatocellular apoptosis: investigations in heterotopic rat liver transplantation with portal vein arterialization. Transplant Proc. 38 (3), 725-729 (2006).

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 91yard mc karaci er transplantasyonus anportal ven damarlanmaak d zenlemeakut karaci er yetmezli i

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Bize Ulaşın

KÜTÜPHANEYE TAVSİYE ET

JoVE HABER BÜLTENLERİ

Araştırma

Eğitim

Yazarlar

Kütüphaneciler

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır