Fare Diyafram Fonksiyonu Diagnostik Ultrason Görüntüleme

Özet

Bunların diagnostik ultrason görüntülemede insan ve hayvan deneklerde çeşitli solunum hastalıkları teşhis etkili olduğu kanıtlanmıştır. Biz özellikle fare modellerinde diyafram kinetik analiz Dr Zuo'nun laboratuvarı tarafından kullanılan kapsamlı bir ultrason protokol göstermektedir. Bu aynı zamanda fare solunum kas fonksiyonu üzerine nicel bilgi verebilir bir non-invaziv bir araştırma tekniğidir.

Özet

Kemirgen solunum iskelet kaslarının fonksiyonu analizi, özellikle diyafram, genel olarak invazif cerrahi prosedürler kullanılarak kas şeritleri izole edilmesi ile gerçekleştirilir. Bu vitro diyafram aktivite değerlendirilmesi etkili bir yöntem olmasına rağmen, hayatta olmayan ameliyat gerektirir. , Bir in vivo işlem olarak non-invazif ultrason görüntüleme uygulaması kurban hayvan sayısını azaltır sadece bu yana faydalı değil, aynı zamanda canlı farelerde hastalığın ilerlemesinin izlenmesi için uygundur. Böylece, ultrason görüntüleme yöntemi olasılıkla çeşitli solunum yolu hastalıklarına neden olduğu kas hasarı hafifletmek yeni tedavilerin geliştirilmesine yardımcı olabilir. Özel olarak, obstrüktif akciğer hastalıklarının klinik tanıları, ultrason görüntüleme diyafram kas yorgunluğu erken başlamasını tespit etmek için diğer standart testler ile bağlantılı olarak kullanılmak üzere bir potansiyele sahiptir. Geçerli protokol, doğru diyafram contracti değerlendirmek için nasıl tarifbir tanı ultrason görüntüleme tekniği kullanılarak bir fare modelinde ğı.

Giriş

Son zamanlarda tanısal ultrason görüntüleme teknikleri renovasküler hipertansiyon ve pankreas kanseri ^1,2 fare modelleri ile uygulanmıştır. Bununla birlikte, bu teknikler geniş bir kemirgen solunum kası fonksiyonu deneyde kullanılan edilmemiştir. Bu nedenle, farelerde diyafram hareketlilik in vivo boyuna değerlendirmeler için değerli bir araç olarak bir teşhis ultrason görüntüleme yöntemi geliştirdik.

Tanısal ultrason görüntüleme için çeşitli avantajları vardır. Örneğin, bu, invaziv olmayan güvenli, taşınabilir ve nispeten düşük maliyetle ³ gerçek zaman ölçümleri sağlar. Özellikle, bazı düşük frekanslı ultrason cihazları hava hapsi, şiddetli hava akımı kısıtlanması ile ⁴ hafif kronik obstrüktif akciğer hastalığı (KOAH) bir klinik özelliklerini tespit başardık. Böylece, tanısal ultrason görüntüleme, gerçek zamanlı izleme için kolay erişilebilir ve tekrarlanabilir tarama yöntemi olarak hizmet edebilir solunum bozuklukları.

Teşhis ultrason görüntüleme teknikleri sık sık büyük bir hayvan veya insan deneklere uygulanır. Ancak, küçük ölçekli konularda ultrason gerçekleştirme zorlukları muhtemelen fare modelleri üzerinde ultrason görüntüleme çalışmaları, sınırlı sayıda olmuştur. Mevcut protokol fare diyafram fonksiyonu ölçmek için yeni bir yöntem açıklar. Diyafram fonksiyonu çeşitli kemirgen çalışmalar olmuştur rağmen ek olarak, sonuçların en ötenazi hayvan ^5-7 doğrudan kas şeritleri izole tarafından üretildi. Buna karşılık, diyafram aktivitesini analiz etmek için, bir in vivo diagnostik ultrason görüntüleme yöntemi kullanılarak hayvan sayısı deney için kurban azalır. Ayrıca, diyafram büzülmeyi arttırmak odaklanan uzun süreli tedaviler doğru hayvanlar feda etmeden kemirgen modellerinde ultrason ile değerlendirilebilir.

ntent "> Laboratuvarda olarak, görselleştirme hem de in vivo olarak diyafram fonksiyonunun anlaşılmasına yardımcı olan hayvanlara invazif yöntemler önler ve tedavi geliştirilmesinde yardımcı bir ultrason makinesi kullanılarak fare diyafram etkinliğini analiz etmek için etkili bir yöntem geliştirdik solunum yolu fonksiyon bozukluğu tedavileri.

Protokol

Hayvan denekleri tüm prosedürler onaylanan ve Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) yönetmelikler ve yönergeler doğrultusunda ve uyum tamamlanmıştır.

1.. Fare Anestezi

1. Cerrahi bir havlu sarılı ısıtılmış bir izotermal pad ile temiz bir prosedür masa kurmak. Isıtma yastığı hayvana potansiyel stres azaltırken hayvanın çekirdek sıcaklığı stabilize etmek için 30 ° C ve 34 ° C arasında muhafaza edilmelidir.
2. Aşağıdaki parametreler ile bir anestezi indüksiyon odasında fare yerleştirin: Oksijen debisi 1,5 L / dk ve% 3,5 'e ayarlamak izofluran buharlaştırıcı ayarlanır. Komple sedasyon 1-2 dakika içinde yer almalıdır. Bir indüksiyon odası mevcut değilse, bir çan kavanoz izofluran ile doğrudan temasını engellemek için hayvan alt kısmında yerleştirilmiş bir tel örgü ile birlikte kullanılabilir.
3. Hemen indüksiyon odasından fareyi çıkarın o zamanlarTamamen (fare gönüllü motor fonksiyonlarını kaybeder sağlanır) anestezi. Anestezi bakımı için, hayvana bir burun konisi uygulanır. Oksijen akış hızı, yaklaşık 0.5 L / dak indirilmelidir ve izofluran buharlaştırıcı 1,5-2,5% aralığında ayarlanmalıdır.
   1. Göz kuruluğu ⁸ azaltmak için doğrudan kornealara oftalmik merhem küçük bir miktar uygulayın. Buna ek olarak, anestezi sırasında, fare pedal çekme refleksi yokluğu korumak gerekir, mukoza pembe bir renk kalmalıdır, ve nefes istikrarlı görünmelidir.

2.. Diagnostik Ultrason Görüntüleme Prosedür için hazırlanıyor

1. Bu tür cerrahi bant gibi çıkarılabilir bir yapıştırıcı ile ısıtılmış prosedürü masaya fare her bacağı dizginlemek.
2. Elektrikli tıraş makinesi kullanarak, göğüs boşluğuna kadar karın ve yarım arasındaki ventral vücut yüzeyinde saç kaldırmak. Ayrıca yeniden epilasyon kremi uygulayıntıraş bıçağı tarafından kesilmiş değildir kalan saç hareket ettirin. 2-3 dakika sonra nemli bir gazlı bezle krem ​​siliniz.
3. Bir suyla nemlendirilmiş gazlı bez kullanarak aşırı saç çıkarın ve% 70 alkol veya antiseptik eşdeğeri ile traş bölgeyi temizleyin. Ultrason probu diyafram fonksiyonunu görselleştirmek için bu bölgeye uygulanır. Bir topikal analjezik nedeniyle epilasyon küçük cilt tahriş yaşıyorsanız hayvanlara sağlanabilir.

3.. Diagnostik Ultrason Görüntüleme Protokolü

1. Ultrason cihazının açın ve optimum çözünürlüğü elde etmek üzere yüzdesi ile cihaz üzerindeki çıkış gücü (gerekirse) ayarlayın.
2. Fare diyafram kasılması uygun görselleştirme sağlar B (parlaklık) modu, M (hareket) modunda, ya da her ikisi görüntüleme önce, birine ultrason makinesi ayarlayın.
3. Farenin üst karın ultrason jeli küçük bir miktar uygulayın ve göğüs boşluğuna doğru jel masaj.
4. Ultra yerleştirinkalbe doğru bu bölgede ve yukarı doğru açı bunu dönüştürücünün ses. Görüntünün optimize edilmiş bir çözünürlük elde edilene kadar prob ayarlayın. Not: Bu protokol için, bir mikro-dışbükey dizi veya doğrusal faz dizi dönüştürücü nedeniyle küçük ayak izi ve mükemmel eksenel çözünürlük ⁹ kullanmak için ideal bir prob; frekans bant genişliği boyunca ayarlanabilir ve bu deneyler için 6,5-12 MHz bir dizi kullanılabilir gerekmektedir.
5. Geçici diyafram görüntüleri kaydetmek ve seçilen kasılmaları görüntülemek için dondurma düğmesine basın.
6. Diyafragma gezi yanı sıra solunum oranının daha sonraki ölçümler için izin veren bir cine döngüsü olarak kayıt kaydedin. Not: Görüntülerin çerçeveleri gelecek analizi ⁹ bilgisayar hafızasında veya harici sabit disk üzerinde kaydedilebilir.
   1. Kesinlikle ultrason yazılım parçası olan elektronik kumpas kullanarak kısalmaya rahatlama diyafram hareketinin derinliğini ölçmek.
   2. Dönüştürmekcine loop bir MPEG dosyası içine dosya ve kayıt döneminde diyafragma kasılmaları sayısını sayarak solunum hızını belirler. Alternatif olarak, min (solunum oranı) başına kasılmaları sayısı M-mod görüntü sayılır.

4. Mesaj Anestezi Hayvan Kurtarma

1. Fare tamamen 1 saat içinde anestezi kurtarmak gerekir. Bu sternal yatma korumak için yeterli bilince kavuşana kadar sahipsiz hayvan bırakmayın.

Sonuçlar

Fare diyaframın tipik bir ultrason görüntüsü Şekil 1A'da gösterilmiştir. Fare diyafram maksimum düşey deplasman kaydedildi. Bu mesafe tam ultrason yazılım. Tablo 1 üç farklı farelerden diyafram kasılmaları, bu mesafe ölçümleri bir parçası olan elektronik kaliperler kullanılarak daralmaya rahatlama diyafram hareket derinliğini ölçülerek hesaplanmıştır. Bir MPEG dosyası içine sine döngü dosya dönüştürme sonra, solunum hızı altı ikinci kayıt d?...

Tartışmalar

Mevcut deney protokolü, invazif olmayan, in vivo yaklaşımı ile bir fare modelinde diyafram faaliyete özgü teşhis ultrason görüntüleme teknikleri geliştirir. Anestezi cihaz ayarları bireysel fareler anestezi farklı yanıt verebilir beri biraz her hayvan için ayarlanabilir yaklaşmıştır değerlerdir. Yanlış anestezi yönetimini önlemek için, düzenli olarak kalp hızı, solunum hızı ve vücut ısısı gibi fare hayati işaretleri takip etmek önemlidir. Paylaşılmamış saç görseli bulan...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Veterinary digital ultrasonic diagnostic imaging system	Edan	DUS 3 VET	Ultrasound parameters include: frequency of 6.5 MHz, Depth of 29 mm. Note: An equivalent ultrasound machine may be used for this protocol
Micro-convex array transducer	Edan	C611	Or equivalent
GE Logiq i hand-carried unit (HCU)	GE Healthcare	GE Logiq i hand-carried unit (HCU)	Or equivalent
GE 12 MHz linear array probe	GE Healthcare	12L-RS	Or equivalent
Veterinary anesthetic vaporizer	Webster Veterinary	Serial #: W422021	Isoflurane was exclusively used with this vaporizer (or equivalent). A custom made induction chamber for anesthesia was assembled for initial anesthesia. Maintenance anesthesia was performed using a nose cone
Isothesia (Isoflurane, USP)	Butler Schein	29405 250ML PVL	Or equivalent
Enviro-pure anesthesia absorbing canister	Surgivet Smiths Medical PM, Inc.	Part #: 32373B10	Or equivalent
Ultrasound transmission gel	HM Sonic	N/A	Or equivalent
Puralube vet ointment	Puralube	NDC 17033-211-38	Or equivalent
Deltaphase isothermal pad	Braintree Scientific Inc.	39DP	Or equivalent
Hair remover	Nair	N/A	Or equivalent
Electric razor	Remington	HC-5015	Or equivalent
Surgical tape	3M Micropore	1530-1	Or equivalent
Gauze sponges	Dynarex	3262	Or equivalent