JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

Bu çalışmada bir silikon kauçuk enjeksiyon bileşik ve yumuşak doku X-ray sistemi kullanarak ince damar yapıları incelemek için basit bir iki boyutlu anjiyografik yöntem sunuyor.

Özet

Anjiyografi damar yapıları çeşitli araştırma alanlarında çalışma için önemli bir araçtır. Bu çalışmada bir silikon kauçuk enjeksiyon bileşik ve yumuşak doku X-ray sistemi kullanarak sabitlenmemiş, taze doku ince damar yapısını inceleyerek basit bir anjiyografik Yöntem tanıtmaktır. Bu çalışmada özellikle Estetik ameliyatta kullanılan flep toprakları üzerinde odaklanmıştır. Bu çalışmada anjiyografi Sprague-Dawley rat kullanarak çeşitli deneysel koşullarda bileşik bir silikon kauçuk enjeksiyon ile çalışmaktadır. İlk olarak, MV bileşik 15 mL ve seyreltici 15 mL karıştırılır. O zaman, kür Aracısı 1,5 mL hazırlanır ve 24G kateter fare ortak karotid arter içinde cannulated. Üçlü stopcock sonra bir kateter bağlı ve radyoopak aracı hazır kür aracı ile karışık sonra hemen dökülme enjekte edilir. Son olarak, aracı katılaşır gibi örnek hasat edilir ve Anjiyografik görüntüyü yumuşak doku X-ray sistemi kullanarak elde edilir. Bu yöntem iyi damar yapıları gösteren bu yüksek kaliteli anjiyografi kolay ve basit içinde kısa bir süre içinde elde edilebilir gösterir.

Giriş

Atar ve toplar damarlardaki gibi vasküler yapıların incelenmesi Rekonstrüktif Cerrahi özellikle ilgi önemli bir alandır. Bu alanda yaygın olarak flep ameliyatı gerçekleştirilir. Bu nedenle, anjiyografik görüntüleme aktif kapak toprakları, angiosome ve damar kaynağı taze doku1incelemek için kullanılır. Özellikle, iyi damarlara deliciler (Cilt ulaşan derin gemileri ortaya çıkan damarları) gibi iyi gemileri de dahil olmak üzere, gözlemlemek ve gemiler (gemiler arasında bitişik angiosomes bağlanması)2 choke sürekli çabaları olmuştur. . Bu gemi iki tür perforator flap rekonstrüksiyonu alanında önemli ve araştırma3,4ana odak vardır.

Çeşitli malzemeler anjiyografi içinde kullanılır. Birincisi, çini mürekkebi, hangi kan damarlarının gross anatomi gözlemleyerek yardımcı olur bu. Ancak, x, bu nedenle anjiyografik görüntüler elde edilemiyor. Daha yaygın olarak kullanılan radyoopak kurşun oksit ve Baryum malzemelerdir. Ancak, toksisite kurşun oksit çok önemli bir dezavantajı ve zaman toz şekli nedeniyle su ile karışık kullanmak sakıncalıdır. Baryum toksisite ücretsizdir; Ancak, seyreltme sonra kullanılması gereken gibi çok mümkün değildir. Radyoopak bu malzemelerin her ikisi de kılcal geçemez; Bütün damar yapısı analiz gerekir, bu nedenle, bu onları arter enjekte ve ayrı ayrı5damar gereklidir. Buna ek olarak, jelatin ile birleştirilmelidir diye iki malzeme anatomik disseksiyon sırasında boya akıntıya neden. Kurşun oksit-jelatin ve Baryum-jelatin karışımları1,6,7kuvvetlendirmek için en az bir gün atın.

Bilgisayarlı tomografi (CT) anjiyografi başka bir yaygın kullanılan yöntem ve üç boyutlu (3D) yapıları8ile ilgilenen yardımcı olabilir. Ancak, damarlar olamaz etkili5görüntülenir. Bu yöntem iyi damarlara şok damarlar gibi açık görselleştirme belirli donanımları kullanarak zaman dışında zordur. BT anjiyografi tüm laboratuvarlarda kullanılan çok daha pahalı ekipman ihtiyacını bir dezavantaj olabilir. Buna karşılık, yumuşak doku X-ray sistemi nispeten ucuz ve daha kolay çalışabilir. Bu sistem yumuşak dokuları görüntülemek için en uygun ve yüksek kaliteli yumuşak doku görüntüler daha basit X-ray sistemi sağlar. Her ne kadar yumuşak doku X-ray sistemin kendisi 3D görüntü göstermek değil, iyi vasküler yapılar BT anjiyografi daha iyi bir şekilde görmenize yardımcı olabilir. Bu nedenle, biz birçok deneylerde, özellikle çeşitli kapak modelleri ve temel anatomi2,9yumuşak doku X-ray sistemi kullanmışlardır.

Son olarak, silikon kauçuk enjeksiyon bileşik anjiyografi kullanımı sayısız avantajı vardır. Çeşitli renk aracıları hazır için enjekte edilebilir ve çini mürekkebi gibi ayırt renkleri görüntüler. Bu nedenle, aynı anda gross anatomi ve anjiyografi eğitim mümkündür. Bu hem kılcal damarlar geçmek ve iyi vasküler yapılar imtihanlarını mümkün hale damarlar görüntülenmeyecektir izin verebilirsiniz. Jelatin karışımı farklı olarak, silikon kauçuk enjeksiyon bileşik bir kısa süre içinde yaklaşık 15 dakika, herhangi bir ek prosedürler olmaksızın katılaşır. Tüm süreç şematik görüntüsü Şekil 1' deki özetlenir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Hayvan konular da dahil olmak üzere tüm yordamları kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komiteler, Seul Ulusal Üniversitesi Hastanesi (IACUC No 10-0184) tarafından onaylanmış olması. Bu iletişim kuralı flep damarlara üzerinde araştırma için optimize edilmiştir. Bu örnek önceki raporlar dört bölge flep modelinde temel alır.

1. bir flep koşul oluşturma

Not: Vasküler bir değişiklik bir sıçan flep modelinde 4-5 gün önce görünür tahmini6,7oluşturmak önemlidir.

  1. 7-hafta-yaşlı erkek Sprague-Dawley rat 200-250 g ağırlığında kullanın.
  2. Anestezi indüksiyon ve bakım için 2-%2,5 3-5 oranında isoflurane kullanarak fareler. Anestezi derinliği yeterli olduğunu doğrulamak için bir ayak çimdik para çekme yansıma sınama gerçekleştirin.  Meloksikam 5 mg/kg subkutan ağrı için enjekte.
  3. Bir hayvan saç kesme makinesi ve saç dökücü krem (Tioglikolik asit, %80) kullanarak gövde tıraş. Steril Cerrahi alan % 10 povidone-iyot ve steril bir koşul yordamları boyunca korumak için steril bir örtü ile hazırlayın. Bir veteriner merhem kuruluğu önlemek için gözler için geçerlidir. Tüm aletler steril durumda koruyun.
  4. Uygun flep koşul oluşturun.
    1. Alt karın sirkumferansiyel Cilt kapağı tasarımdan 4 x 12 cm. Yerleştirme Merkezi xiphoid süreci ve penis (Şekil 1) arasında flep ölçme arkasına, mark.
    2. Cerrahi bir bıçak kullanarak işaretlendiği şekilde kesi yapmak.
    3. Makas, deri ve panniculus carnosus de dahil olmak üzere kullanarak kapağı incelemek.
    4. Vasküler Transpediküler [ikili derin sirkumfleks iliyak (DCI) damarları ve ikili yüzeysel inferior epigastrik (SIE) damarları], alt karın çevresinde teşrih ve cerrahi bir büyüteç ve Mikrocerrahi araçlarını kullanarak vasküler Transpediküler bulaşmasına neden.
    5. Korumak veya gemilerin istenen koşullara bağlı olarak ligate.
    6. Bir cerrahi bıçak veya makas kullanılarak dorsal orta çizgi boyunca flep bölün.
    7. Özgün konumuna flep yatıyordu ve deri zımba ile düzeltebilirim.
    8. Topikal merhem cerrahi yara 3 gün geçerli ve Meloksikam 5 mg/kg doz, sözlü olarak 3 gün boyunca günde bir kez yönetmek olarak ameliyat sonrası analjezi sağlar.
    9. Fareyi sternal recumbency korumak için yeterli bilinci yerine onaylayın. Fareyi kafesin içine dönün ve konut alanına taşıyın. Bir Elizabeth uygulamak yaka her fareler için.

2. Araçlar hazırlanması

  1. 24 G kateter ve üç yollu stopcock hazırlayın.
  2. Sivrisinek forseps, küçük makas, cerrahi bir neşter ve cerrahi bir bıçak hazırlayın.
  3. Anjiyografik Ajan (Silikon Kauçuk enjeksiyon bileşik) hazırlayın.
    1. Eritici steril numune toplama Kupası ile bileşik renk Ajan karışımı. Ağırlığa göre eşit bir miktar olun: bileşik renk aracının 15 mL ve bir fare (Sprague-Dawley rat, 200-250 g) MV seyreltici 15 mL.
    2. %5 ağırlık veya karışım çözüm hemen önce enjeksiyon hacmi başına kür Aracısı Ekleme: bir fare (Sprague-Dawley rat, 200-250 g) Ajan kür 1,5 mL.

3. fare arter hazırlık

  1. İsoflurane fareler (indüksiyon için % 3-5) ve bakım için % 2-2.5 anestezi için kullanın. Anestezi derinliği yeterli olduğunu doğrulamak için bir ayak çimdik para çekme yansıma sınama gerçekleştirin.
  2. Bir hayvan saç kesme makinesi ve saç dökücü krem (Tioglikolik asit, %80) kullanarak boyun tıraş.
  3. Ortak karotid arter10maruz.
    1. 2-cm ensizyon scapulae arasında olun.
    2. Tükürük bezi karmaşık maruz kadar daha derin sivrisinek forseps ve künt makas kullanarak incelemek.
    3. Tükürük bezi geri çekmek ve açık açık omohyoid kas boyuna incelemek.
    4. Ortak karotid arter incelemek.
  4. Siyah ipek ile ortak karotid arter sefalik ve kaudal tarafında kanca ve bunu yapıştırmayın.
    1. Bir kravat proksimal dikiş yapmak ve şişkinliği arter korumak için çekiş tutmak.
    2. Kaudal kenarındaki bir ipek dikiş 24 G kateter sağlamak için hazır olun.

4. cannulation

  1. 24 G kateter kullanarak hazırlanmış karotid arter cannulate.
  2. Kaudal Side'de önceden yapılmış kravat sıkın ve kateter enjeksiyon sırasında değil çıkarmak için dikkatli olun.
  3. Kür Ajan (adım 1.3.2) hazırlayın.
  4. Üçlü stopcock güvenli bir şekilde eklenen kateter takın.
    1. Aerodramus kan kateter negatif basınç boş bir Ģırınga kullanarak ekleyerek onaylamak.

5. enjeksiyon

  1. Göz ve ayak rengi değişti kadar silikon kauçuk enjeksiyon bileşik enjekte et.
    Not: Renk değişikliği enjekte sıvı ilerledikçe görünmelidir (enjeksiyon miktarı ise yaklaşık 25-30 mL her fare için).
  2. Üçlü stopcock kilitlemek ve aracı katılaşır kadar bekleyin.
    1. Aracı ile özellikle belgili tanımlık tenkıye Üçlü stopcock kaldırırken kontamine değil dikkatli olun. Gazlı bez veya vinil gibi koruyucu bir bariyer çevresi enjeksiyon uzaydan ayırmak için kullanın.
      Dikkat: Herhangi bir kirlenme bileşik radyo-opak olduğundan anjiyografik görüntü analiz zorlaştırır.
    2. Kalp ve solunum kesilmesi onaylayın. Anestezi durdurmak.
    3. Sertlik oranı kalan aracı ile bir referans (yaklaşık 15 dk gerekli) olarak gözlemlemek.

6. örnek hasat

  1. Flep içinde herhangi bir damar yapısına zarar önlemek için panniculus carnosus flep dışında 1 cm cerrahi bir bıçak kullanarak bir kesi yapmak.
  2. Adım 1.4 (altında panniculus carnosus uçak) daha önce disseke uçaktan boyunca teşrih ve flep ve vasküler Transpediküler makas (damar yapısı içinde kapak dahil) kullanarak da dahil olmak üzere doku hasat.
  3. Transpediküler 5-0 ipek dikiş kullanarak flep ligate ve flep vücuttan ayrı. Damar yapısı zarar vermemeye dikkat et.

7. anjiyografik görüntü yakalama

  1. O değil katlayın, yavaşça forseps kullanarak cerrahi örtüsü üzerinde yerleştirin sağlayarak numune, dışarı yayılır.
  2. Radyografi görüntü al.
    1. Film kaset alan yükleme örnek için yatan numune aktarın.
    2. Yumuşak doku X-ray sistemi 60 kVp, 5 ayarla mA ve 5 s korunmasızlık.
  3. Bir karanlık odada bir otomatik gelişme makine kullanarak filmi banyo.
  4. Filmin olası en yüksek çözünürlükte tarama.

8. görüntü6,7,11 analiz

  1. Atar ve toplar damarlardaki akışı ve çapı süreklilik dayalı ayrım.
    1. Transpediküler arter ve muayene ediliyor hedef gemisi odak girifli başlatın.
    2. Çapları yazılımıyla görüntü açarak ölçmek.
      1. Düz düğmesini tıklatın ve aynı uzunluğu ölçek çubuğu bir çizgi çizin.
      2. Açık analiz | Ayarla ölçek menü ve içine mesafe bilinenölçek çubuğu değerini girin.
      3. Düz düğmesini tıklatın ve bunların çapı ölçülecek gerek gemi bir çizgi çizin.
      4. Açık analiz | Ölçü menü ve uzunluğuonaylayın.
  2. Flep yaşam alanı göz önünde bulundurarak vasküler desen çözümlemek.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

Bu protokol sonrası Sprague-Dawley rat flep vascularity incelenmiştir. Alt karın 4 x 12 cm ölçülen arka bir çevresel cilt flep bizim önceki raporlarda tabanlı damgasını vurdu. Her örnek farklı damar durumdaydı.

Tüm kapakları yüksek derin sirkumfleks iliyak arter (DCIA) ve damar dayalı ve çeşitli konumlardan arterler ile supercharged. Grup 1 kontrolü olduğunu, Grup 2 Ipsilateral yüzeysel inferior epigastrik...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Silikon Kauçuk enjeksiyon bileşik anjiyografi kolayca gerçekleştirilebilir does değil istemek pahalı ekipmanlar ve pek çok avantajları sunuyor. Hastaların preoperatif ve intraoperatif değerlendirme aksine hayvanlar ve kadavra kullanarak deneyler belirli koşullara, daha çeşitli ve derin çalışmalar etkinleştirme ayrıntıları sağlayabilir. Değişiklikleri çeşitli bağlamlarda önce klinik uygulamaları6,7,11g...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Açıklamalar

Yazarlar ifşa gerek yok.

Teşekkürler

Bu eser (2017R1A2B1006403) Kore hükümeti (Bilim Bakanlığı ve ICT) tarafından finanse edilen bir Ulusal Araştırma Vakfı Hibe yoluyla orta kariyer araştırmacı programı tarafından desteklenmiştir.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-112White color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-117Orange color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-120Blue color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-122Yellow color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-130Red color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-132Clear agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection CompoundsFlow Tech Inc.MV-DiluentDiluent
MICROFIL CP-101 For Cast Corrosion PreparationsFlow Tech Inc.CP-101Curing agent
SOFTEX X-ray film photographing inspection equipmentSOFTEXCMB-2Soft tissue x-ray system
Film FujifilmIndustrial X-ray Film (FR 12x16.5cm)
Automatic Development MachineFujifilmFPM 2800
Rat Sprague-Dawley rat weighing 200-250 g
Three-way stopcock
24-guage catheter
Image JNational Institutes of Health https://imagej.nih.gov/ij/

Referanslar

  1. Taylor, G. I., Minabe, T. The Angiosomes of the Mammals and Other Vertebrates. Plastic and Reconstructive Surgery. 89 (2), 181-215 (1992).
  2. Taylor, G. I., Palmer, J. H. The vascular territories (angiosomes) of the body: experimental study and clinical applications. British Journal of Plastic Surgery. 40 (2), 113-141 (1987).
  3. Geddes, C. R., Morris, S. F., Neligan, P. C. Perforator flaps: evolution, classification, and applications. Annals of Plastic Surgery. 50 (1), 90-99 (2003).
  4. Saint-Cyr, M., Schaverien, M. V., Rohrich, R. J. Perforator Flaps: History, Controversies, Physiology, Anatomy, and Use in Reconstruction. Plastic and Reconstructive Surgery. 123 (4), 132-145 (2009).
  5. Lie, K. H., Taylor, G. I., Ashton, M. W. Hydrogen peroxide priming of the venous architecture: a new technique that reveals the underlying anatomical basis for venous complications of DIEP, TRAM, and other abdominal flaps. Plastic and Reconstructive Surgery. 133 (6), 790-804 (2014).
  6. Chang, H., Nobuaki, I., Minabe, T., Nakajima, H. Comparison of Three Different Supercharging Procedures in a Rat Skin Flap Model. Plastic and Reconstructive Surgery. 113 (1), 277-283 (2004).
  7. Chang, H., Minn, K. W., Imanishi, N., Minabe, T., Nakajima, H. Effect of Venous Superdrainage on a Four-Territory Skin Flap Survival in Rats. Plastic and Reconstructive Surgery. 119 (7), 2046-2051 (2007).
  8. Rozen, W. M., Stella, D. L., Ashton, M. W., Phillips, T. J., Taylor, G. I. Three-dimensional CT angiography: a new technique for imaging microvascular anatomy. Clinical Anatomy. 20 (8), 1001-1003 (2007).
  9. Taylor, G. I., Chubb, D. P., Ashton, M. W. True and "choke" anastomoses between perforator angiosomes: part i. anatomical location. Plastic and Reconstructive Surgery. 132 (6), 1447-1456 (2013).
  10. Feng, J., Fitz, Y., et al. Catheterization of the carotid artery and jugular vein to perform hemodynamic measures, infusions and blood sampling in a conscious rat model. Journal of Visualized Experiments. (95), e51881(2015).
  11. Park, S. O., Cho, J., Imanishi, N., Chang, H. Effect of distal venous drainage on the survival of four-territory flaps with no pedicle vein: Results from a rat model. Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 71 (3), 410-415 (2018).
  12. Park, S. O., Chang, H., Imanishi, N. The free serratus anterior artery perforator flap-A case report and anatomic study. Microsurgery. 36 (4), 339-344 (2016).
  13. Imanishi, N., Nakajima, H., Minabe, T., Chang, H., Aiso, S. Anatomical relationship between arteries and veins in the paraumbilical region. British Journal of Plastic Surgery. 56 (6), 552-556 (2003).
  14. Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Rohrich, R. J. Three- and four-dimensional arterial and venous anatomies of the thoracodorsal artery perforator flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1578-1587 (2008).
  15. Schaverien, M., Saint-Cyr, M., Arbique, G., Hatef, D., Brown, S. A., Rohrich, R. J. Three- and Four-Dimensional Computed Tomographic Angiography and Venography of the Anterolateral Thigh Perforator Flap. Plastic and Reconstructive Surgery. 121 (5), 1685-1696 (2008).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T psay 143anjiyografisilikon kau uk enjeksiyon bile imkur un oksitBaryumflep b lgeangiosomeradyoopak malzemeanjiyografik Ajan

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır