Sıçanlarda Kronik İmplantasyon için Periferik Sinir Stimülasyon Elektrotlarının Hazırlanması

Özet

Küçük kemirgenlerde kullanılmak üzere kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotları oluşturmak için mevcut yaklaşımlar genellikle özel ekipman ve / veya yüksek eğitimli personel gerektirir. Bu protokolde kronik olarak implante edilebilen manşet elektrotlar imal etmek için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım göstermekte ve sıçanlarda vagus sinir stimülasyonu (VNS) için etkinliğini gösteriyoruz.

Özet

Periferik sinir manşet elektrotlar uzun nörolojik ve ilgili alanlarda stimülasyon için kullanılmıştır, örneğin, vagus veya siyatik sinirler. Birkaç yeni çalışmalar motor rehabilitasyon geliştirmek için merkezi sinir sistemi plastisite artırılması kronik VNS etkinliğini göstermiştir, yok olma öğrenme, ve duyusal ayrımcılık. Bu tür çalışmalarda kullanılmak üzere kronik implante edilebilir cihazların inşası farelerin küçük boyutları nedeniyle zordur ve tipik protokoller personel ve zaman alan mikrofabrikasyon yöntemlerinin kapsamlı bir şekilde eğitilmesini gerektirir. Alternatif olarak, ticari olarak kullanılabilir implante edilebilir manşet elektrotlar önemli ölçüde daha yüksek bir maliyetle satın alınabilir. Bu protokolde, sıçanlarda kullanılmak üzere küçük, kronik implante edilebilir periferik sinir manşet elektrotlarının yapımı için basit, düşük maliyetli bir yöntem salıyoruz. Ketamin/ksilazin anestezili sıçanlarda VNS'nin hem implantasyon sırasında hem de cihaz implantasyonundan 10 hafta sonrasına kadar Hering-Breuer refleksinin aktivasyonuile tutarlı solunum hızında düşüşler ürettiğini göstererek manşet elektrotlarımızın kısa ve uzun vadeli güvenilirliğini doğrularız. Ayrıca, vns'yi motor kortikal harita plastisitesini teşvik etmek için yetenekli kol pres performansıyla eşleştirerek manşet elektrotlarının kronik stimülasyon çalışmalarında kullanıma uygunluğunu gösteriyoruz.

Giriş

Son zamanlarda, periferik sinirlerin uyarılması için kronik implante edilebilir manşet elektrotlar için talep büyüdü, çalışmalar giderek çok sayıda inflamatuar hastalıkların tedavisinde bu tekniğin preklinik yararlılığını göstermek gibi^1,2,3 ve nörolojik bozukluklar^{4,5,6,7,8,9,10,11,12,13,14,15}. Kronik VNS, örneğin, öğrenme bağlamları çeşitli neokortikal plastisite geliştirmek için gösterilmiştir, motor rehabilitasyon iyileştirilmesi^4,5,6,7,8, yok olma öğrenme 10^{,1111,12,13,14}, ve duyusal ayrımcılık¹⁵. Ticari olarak mevcut periferik sinir manşet elektrotlar genellikle sipariş yerine getirilmesi ve nispeten yüksek maliyetler için uzun süre ile ilişkilidir, hangi erişilebilirlik sınırlayabilir. Alternatif olarak, kronik implante edilebilir manşet elektrotların "şirket içi" imalatı için protokoller sınırlı kalır ve kemirgen anatomisi küçük boyutları nedeniyle belirli zorluklar sunar. Kronik kemirgen deneyleri için manşet elektrotlar oluşturmak için mevcut protokoller genellikle karmaşık ekipman ve tekniklerin yanı sıra kapsamlı eğitimli personel kullanımını gerektirir. Bu protokolde, daha önce yayınlanmış ve yaygın olarak kullanılan yöntemlere dayalı manşet elektrot imalatı için basitleştirilmiş bir yaklaşım göstermek^16,17. Kronik implante edilmiş elektrotlarımızın farelerdeki işlevselliğini, sol servikal vagus sinirinin etrafına manşet implantasyonu sırasında, manşet elektrotlarına uygulanan stimülasyonun SpO2'de nefes alma ve düşmenin başarılı bir şekilde kesilmesine neden olduğunu göstererek doğrulmaktayız. Afferent pulmoner reseptör vagal liflerin stimülasyonu Hering-Breuer refleks meşgul bilinmektedir, hangi beyin sapında çeşitli solunum çekirdeğiin inhibisyonu bastırma ilham^{sonuçları 18}. Böylece, Hering-Breuer refleksi ile tutarlı nefes kesilmesi, ve SpO2 ortaya çıkan düşüş, anestezili sıçanlarda uygun elektrot implantasyonu ve manşet fonksiyonu için basit bir test sağlar. Kronik implante edilmiş manşet elektrotların uzun süreli işlevselliğini doğrulamak için, implantasyon sırasında refleks yanıtları ölçüldü ve implantasyondan altı hafta sonra aynı hayvanlarda elde edilen yanıtlarla karşılaştırıldı. İkinci bir grup sıçana, bir kol presleme görevinde davranış eğitimi nden sonra VNS manşet elektrotları yerleştirildi. Bu sıçanlarda, VNS doğru görev performansı ile eşleştirilmiş kortikal motor harita yeniden düzenlenmesi üretilen, daha önce yayınlanan çalışmalar ile tutarlı^19,20,21,22. Cihaz implantasyonundan 5-10 hafta sonra meydana gelen anestezi altında motor kortikal haritalama sırasında, VNS'nin nefes almanın kesilmesini ve SpO_2'de%5'ten fazla düşüşe yol açtığını doğrulayarak VNS ile tedavi edilen hayvanlarda manşet fonksiyonunu daha da doğruladık.

Childs et al.¹⁷ ve Rios et al.^16'dan yakın zamanda yayınlanan protokoller, basitleştirilmiş manşet elektrot üretim yaklaşımı için iyi onaylanmış bir başlangıç noktası sağlar, çünkü bu popüler yöntem kemirgenlerde kronik VNS çalışmaları yürüten birden fazla laboratuvar tarafından kullanılmıştır^{1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11}. Orijinal yöntem, manşet elektrot imalatının tamamlanması bir saatten fazla sürer ve güvenilir bir şekilde gerçekleştirmek için kapsamlı bir eğitim gerektiren ince mikrotelleri manipüle etmek için birkaç yüksek hassasiyetli adım içerir. Burada açıklanan basitleştirilmiş yaklaşım önemli ölçüde daha az malzeme ve araç gerektirir ve en az eğitimli personel tarafından bir saatten az bir sürede tamamlanabilir.

Protokol

Bu protokolde açıklanan tüm prosedürler, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na uygun olarak yürütülmektedir ve Dallas'taki Texas Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.

1. Uyarıcı manşet elektrot imalatı

1. Manşet borularını hazırlayın.
   1. Bir jilet kullanarak, 2,5 mm uzunluğunda polimer boru bir parça kesti. Borunun içine bir ataş veya forceps yerleştirin ve bir tarafta manşet boru duvarından uzunlamasına bir yarık yapmak için bıçağı kullanın.
   2. Büşeleri borudan çıkarın ve uzun eksene dik olan manşetin orta çizgisinden büyük bir dikiş iğnesi yerleştirin. İğneyi yarıktan (üstten) ve karşıdaki tüpün ortasına (alt) yerleştirin. Kalan montaj adımları sırasında yerine manşet pin için köpük tahta içine iğne yerleştirin.
2. İmplantasyon sırasında manşet kapatmayı güvence altına almak için dikiş yerleştirin.
   1. Küçük dikiş iğnesini manşet duvarından, orta hatta, bir tarafta üst yarıktan yaklaşık 0,5 mm'ye yerleştirin. Manşet borularına zarar vermemek için iğneyi içten dışa yerleştirin. İğnegözüne 2 cm uzunluğunda 6/0 dikiş yerleştirin ve sütün ucunu manşete sokmak için iğneyi boru duvarından çekin.
   2. İpliği yerinde bırakarak, iğneyi çıkarın ve manşetin orta hattı boyunca ilk deliğin yaklaşık 0,5 mm altında, boru duvarından ikinci bir delik sapla. Sütürü iğnenin gözüne yerleştirin ve iğneyi boru duvarından geçirerek sütü manşetten tekrar geçirin.
   3. Dikiş ipliği her iki ucu şimdi manşet dış tarafında olmalıdır. Sütürü üst delikten ~1,5 cm, alt delikten ~0,5 mm uzatır.
   4. Alt delikten uzanan dikişkısa ucuna UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve alt kuyruk neredeyse boru dış duvar ile floş kadar uzun dikiş ucunu çekin. Yapıştırıcıyı tedavi etmek için UV değnekkullanın ve sütürü sıkıca yerinde tutun.
   5. Manşetin karşı tarafında 1.2.1 ile 1.2.3 adımlarını tekrarlayın.
3. Platin:İridyum (Pt:Ir) tel kablolarını yerleştirin.
   1. Manşet duvarında 4 delik yapmak için küçük dikiş iğnesi kullanın. Her bir delik, manşetin her iki tarafındaki üst yarıktan yaklaşık 0,5-0,8 mm uzaklıkta, dik orta hattan yaklaşık 0,5-0,8 mm uzaklıkta olmalıdır.
      DİkKAT: İpuçlarının en tutarlı ve doğru yerleştirilmesi için, dikiş yerleşimini kılavuz olarak kullanarak, tüm delikleri açmak için iğneyi içten dışa yerleştirin.
   2. Dikiş iğnesini tekrar takın, bu kez dıştan içe, kurşun deliğinden 1. İğnenin gözüne 7,5 cm uzunluğunda pt:Ir telinin yaklaşık 0,5 cm'sini yerleştirin ve borunun içinden geçirerek tel inip manşet duvarından geçirin. Teli manşetin dış tarafına ~4,5 cm kadar uzamış olacak şekilde ayarlayın(Şekil 1A).
   3. İğneyi tekrar kurşun deliğinden geçirin, yine dıştan içe çalışır ve ayrıca iğneyi kurşun deliğinden doğrudan kurşun deliğinden 2'ye yerleştirin 1. Pt:Ir telinin kısa (iç) ucunun ~0,5 cm'sini iğnenin gözüne takın ve borudan geçirerek tel kurşunu manşet duvarlarından geçirin.
      NOT: Pt:Ir telinin her iki ucu artık manşetin dış tarafında olmalı ve yarık kenarının etrafında ve kurşun deliğinden 1(Şekil 1B)bir tel halkası oluşur.
   4. Pt:Ir kablosunun 3 ve 4'ün kurşun deliklerinden geçmesi için 1.3.1'den 1.3.3'e kadar adımları tekrarlayın.
   5. Bir bütan çakmak kullanarak, pt:Ir tellerin ucundaki 5-6 mm uzunluktaki yalıtımı kurşun deliği 2 ve kurşun deliği 4'ten dikkatlice çıkarın.
      DİkKAT: Manşetin ters kalanına zarar vermemek için uçları manşet in geri kalanından dikkatlice izole edin. Yaralanmayı önlemek için kabloları tutmak için araçları kullanın.
   6. Kabloları son konumlarına yerleştirmek için çıplak kabloyu manşetin içine hizala. Bunu yapmak için, pt:Ir telinin ucunu, 1 no'lu delikten, telin yalıtımsız kısmı delik 1 ile temize çıkana kadar uzanan ucunu yavaşça çekin. 3 ve 4 kurşun delikleri ile dişli tel inyalıtımsız ucunu hizalamak için diğer kurşun ile tekrarlayın.
   7. Kurşun delikleri 1 ve 3 manşetin dış tarafındaki tel halkalara az miktarda UV kürü yapıştırıcısı uygulayın. Yapışkanı tedavi etmek ve müşteri adaylarını yerinde sabitlemek için UV değnekini kullanın.
   8. Yalıtımsız Pt:Ir tel ibarelerini manşetin iç duvarına itmek için küçük bir pipet ucu kullanın. İpuçları yerleştirildikten sonra, 2 ve 4 arasındaki kurşun deliklerinden uzanan tellerin uçlarını keserek yaklaşık 1 mm'lik telin manşet duvarının dışına uzanıp uzandığını belirtin.
   9. Telin 1 mm kuyruklarını manşetin dış yüzeyine doğru katlayın ve onları birbirine kısaltmamaya özen inin. Sadece iki kuyrukları kapsayacak şekilde UV kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın ve kurşun yerleşimi güvenli ve elektrik yalıtımı sağlamak için yapıştırıcı tedavi.
      DİkKAT: Kabloları izole etmek ve hedef dışı uyarılmayı önlemek için dışa maruz kalan Pt:Ir yüzeylerini yapıştırıcı ile tam olarak kapsaymak önemlidir.
4. Pt:Ir tel ilerlüne dikiş emniyeti ile sabit.
   1. Köpük tahtadan manşet montaj ile büyük iğne çıkarın. İğnegözüne 3 cm uzunluğunda 6/0 dikiş takın ve orta noktada manşetin alt kısmından dikiş çıkarmak için iğneyi borudan çekin.
   2. Pt:Ir kurşun emniyeti için dikiş ipliğini tamamlamak için küçük dikiş iğnesine geçin. İğneyi aynı orta hat deliğinden geçirin, borunun ve telin deformasyonundan kaçınmak için içten dışa doğru tekrar çalışın. Sütürün dış kuyruğunu iğnegözüne yerleştirin ve manşetin kenarına dikiş halkası oluşturmak için iğneyi manşet duvarından çekin(Şekil 1C).
      NOT: Dikişin manşetin uzun ekseni boyunca yöneltilmesini ve boruya karşı düz yatmasını sağlamak için pratisyen hekimler kullanın ve mikroskop altında çalışın. Bu adım, kurşunların manşetin iç tarafında ayrı kalmasını ve manşet orta hattına yanal olarak yerleştirilmesini sağlar.
   3. Manşetin dış tarafında, sütür uçları yarım düğüm halinde bağlayarak manşetin diğer ucu etrafında ikinci bir döngü oluşturun. Dikişin manşetin uzun ekseni boyunca çalıştığından ve boruya karşı düz olduğundan emin olun. Düğüm sıkı tutarken bu boru karşı düz yatıyor, uv kürü yapıştırıcı küçük bir miktar uygulayın yarım düğüm ve yerinde tutmak için tedavi.
   4. Dikiş ipliğin uçlarını mümkün olduğunca düğüme yakın dikkatlice kesin. Gerekirse, dikişkısa uçları yapıştırmak için ek UV kürü yapıştırıcı sıyrık küçük bir miktar kullanın, böylece tüp karşı düz yatıyordu(Şekil 1D).
5. Lehim konektörü pt:Ir tel kablolarına bağlanır.
   1. Bir bütan çakmak kullanarak, Pt:Ir tel kablolarının her birinin sonundaki ~3 mm'lik yalıtımı çıkarın. Bir altın iğnenin fincan tarafını lehimle (Bkz. Malzemeler Tablosu)her kurşunun yalıtımsız ucuna kadar.
6. Monte edilen cihazın empedansını test edin.
   1. Altın pimleri bir LCR metre veya elektrot empedans kontrol modülü girişlerine bağlayın ve test frekansını 1 kHz'e ayarlayın. Altın kurşun pimleri ve prob konektörleri kuru tutmaya özen, tuzlu dolu küçük bir kabın içinde manşet boru (ve Pt:Ir stimülasyon temasları iç manşet) batırın. Monte edilmiş manşetin implantasyona geçmeden önce 1 kHz'de 2 kΩ'den daha az bir empedansa sahip olduğunu doğrulayın.
      NOT: Yüksek empedans genellikle yetersiz Pt:Ir yüzey alanı maruz gösterir, yalıtım yetersiz kaldırma gibi faktörler nedeniyle ortaya çıkabilir, manşet iç yapıştırıcı kazara uygulama, kırık tel iplikçikleri, vb. Manşetler ayrıca, uzun süreli kullanımda kısa temaslara neden olabilecek kırık veya kötü yerleştirilmiş tel iplikçikler için de kontrol edilmelidir.

2. Baş-kapak yapımı

NOT: Headcap montaj prosedürleri daha önce yayınlananlara benzer (Childs ve ark.¹⁷), ve burada kolaylık sağlamak için özetlenmiştir.

1. Başlık¹⁷ montajı
   1. 30 AWG tel sargı, bir ~13 mm uzunluğunda ve bir ~10 mm uzunluğunda iki küçük parça kesin. Her iki kablonun her iki ucundaki ~1,5 mm'lik yalıtımı sökün. Her telin bir ucuna altın bir iğnenin pim tarafını, bardağa mümkün olduğunca yakın şekilde lehimle. Lehim eklemi ötesinde pin fazla uzunlukta kesmek için tel kesiciler kullanın.
   2. 4 iğneli mikro şerit konektörün iki merkezi lehim kaplarına AWG kablolarının diğer uçlarını lehimleme.
   3. Tel başlığı bükmek konektöre doğru yol açar ve şekil 2A'dagösterildiği gibi altın pimleri birbirine paralel olarak konektöre karşı düz bir yere yerleştirin. Kısa kabloya bağlı pim, uzun kabloya bağlı pimin altına yerleştirilmelidir. Yerine headcap yol güvenliğini sağlamak için tırnak akrilik, diş çimentosu veya UV kür yapıştırıcı kullanın.

3. Cihaz kullanımı

1. Kronik vagus sinir stimülasyonu için manşet elektrotlarını yerleştirin.
   NOT: Tüm cerrahi işlemler steril veya aseptik teknik kullanılarak uygun anestezi altında, NIH Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Rehberine uygun olarak ve lokal IACUC onayı ile yapılmalıdır. Aşağıdaki yordamlar aygıtın temsili kullanımını göstermek içindir ve kapsamlı olması amaçlanmamıştır.
   1. Bir stereotaksik çerçeve içinde sıçan yerleştirin ve headcap / konektör implantasyonu için kafatası yüzeyini ortaya çıkarmak için parietal ve oksipital kemikler üzerinde sagital kesi yapmak. Dikkatle kafatası 4 delik matkap ve kuyumcu vidaları yerleştirin. Kafatası ve vidalar için headcap güvenli diş akrilik kullanın.
   2. Stereotaksik çerçeve den sıçan çıkarın ve sağ tarafında yatıyordu. Boynun sol tarafında deride dikey bir kesi yapın ve sterilomastoid ve sternohyoid kaslar arasında ve omohyoid kas altında bulunan karotis arter, sol vagus sinirini dikkatlice inceleyin.
   3. Manşetin tüneli deri altında kafatasına doğru gidiyor. Altın pimleri kullanarak müşteri adaylarını başlık başına bağlayın.
   4. Vagus sinirini manşetin içine yerleştirin ve kelepçe dikişlerine çift düğüm atarak cihazı kapatın. Künt, iletken olmayan kancalar ile sinir manipüle ederek veya sinir çevreleyen bağ dokusu kavrayarak implantasyon sırasında sinir zarar önlemek için dikkatli olun.
   5. Cihaza stimülasyon uygulayarak implantı test edin (10 s tren 0.8 mA, 30 Hz, 100 μs bifhasic darbeler). Uygun implantasyon nefes kesilmesi ve SpO_2%5 veya daha fazla bir düşüş ile sonuçlanacaktır.
   6. Kapak altın iğneler ve diş akrilik ile maruz yol açar, dikiş ile yakın yaralar, ve tuzlu kesi siteleri temizlemek, alkol, ve povidon iyot çözeltisi.
   7. NIH yönergeleri ve IACUC onayı doğrultusunda replasman sıvıları, analjezikler ve postoperatif bakım sağlayın.
2. Uyanık davranış sırasında vagus siniri uyarmak.
   NOT: Hayvanlar belirli motor görevleri yerine getirirken VNS'nin teslimi daha önce görevle ilgili kasların motor haritası gösterimini genişletmek için gösterilmiştir. Bu doğrulanmış paradigmayı cihaz kullanımının temsili bir örneğini sağlamak için kullanırız, ancak diğer birçok davranışsal paradigma ve/veya stimülasyon parametreleri alternatif uygulamalarla ilgili olabilir. Sıçanlar cihaz implantasyonu ndan önce burada kullanılan kol pres görevi üzerinde yeterlilik için eğitildi. Ameliyat sonrası, iyi performans vns doğum dan önce tekrar doğrulandı: sıçanlar günde iki 30 dakika eğitim seanslarında en az 100 başarılı deneme yaptı. VNS, 5 gün boyunca sonraki 10 eğitim seansında doğru kol presleri ile eşleştirilmişti.
   1. Sıçanı implante edilmiş baş kapağı aracılığıyla bir uyarıcı jeneratöre bağlayın ve uygun stimülasyon ayarlarına ayarlayın. Motor kortikal haritanın VNS kaynaklı yeniden düzenlenmesi için, her doğru kol presini, her biri 100 μ'lik genişliğe ve 800°A genliğe sahip 15 biphasik darbeden oluşan tek bir trenle eşleştirin.
   2. Bir stimülasyon treni, on 30 dk eğitim seansları boyunca her başarılı kolu prestespit hemen sonra teslim edilir. VNS-teslimat sırasında, akım stimülasyonunun başarılı bir şekilde teslimini izlemek için bir osiloskop kullanın.
3. Kronik implante manşet fonksiyonunu doğrulayın.
   1. Son VNS eşleştirilmiş eğitim oturumu24 saat içinde, motor korteks¹⁹fonksiyonel somatotopik harita ölçmek için intrakranial mikrostimülasyon (ICMS) kullanın^,20,21,22.
   2. Motor korteksin ICMS haritalaması için anestezi indüksiyonundan sonra, Hering-Breuer refleksi ile uyumlu, SpO₂ seviyelerinde nefes alma ve azaltmanın kesilmesine neden olacak 30 Hz, 0.8 mA akım stimülasyon (100 μs biphasic darbeler) 10 s tren uygulayarak manşet fonksiyonunu tekrar doğrulayın.
      NOT: Uygulamaya bağlı olarak, güvenilir bir SpO₂ damlası %5'ten az gözlenirse veya daha yüksek akım genlikleri (1,6 mA'ye kadar) güvenilir bir şekilde SpO_2'deen az %5 azalma üretirse, manşet işlevi kabul edilebilir. SpO_2'de solunumun kesilmesi ve/veya güvenilir bir düşüşün gözlemlenmemesi implant yetmezliğinin göstergesidir.

Sonuçlar

Vagus sinir manşet elektrotlar ve headcaps kronik sıçanlarda daha önce yayınlanan cerrahi işlemlere göre implante edildi^{17,19,20,21,22}. İmplantasyondan önce, 1 kHz'de empedans manşet kurşunları arasında ölçüldü ve manşet borusu saline batırıldı (empedans = 1.2 ± 0.17 kΩ [ortalama ± std]; N = 9). Sadece salinde 2 kΩ'den az empedanslı m...

Tartışmalar

Burada kemirgenlerde kullanılmak üzere kronik olarak implante edilebilen uyarıcı manşet elektrotlarının montajı için basit, düşük maliyetli bir yaklaşım tanımlıyoruz ve bu yeni ortaya çıkan tedavinin klinik öncesi araştırmalarını kolaylaştırıyoruz. Bu basitleştirilmiş yöntem hiçbir özel eğitim veya ekipman gerektirir ve diğer yaklaşımlar^16,26,,27,28ile karşı...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Biocompatible polyurethane-based polymer tubing, 0.080" OD x 0.040" ID	Braintree Scientific	MRE080 36 FT
Dissecting microscope	AM Scopes	#SM-6T-FRL
Fine Serrated Scissors, straight, 22mm cutting edge	Fine Science Tools	#14058-09	for cutting Pt/Ir wire and suture thread
Forceps, #5 Dumont forceps, straight, 11 cm, 0.1 x 0.06 mm tip	Fine Science Tools	#11626-11
Forceps, ceramic tipped forceps, 0.3 mm x 30 mm tips	Electron Microscopy Sciences	#78127-71
Gold Pins, PCB Press Fit Socket	Mill-Max	#1001-0-15-15-30-27-04-0	or similar small pins for connecting cuff leads to headcap
Isobutane lighter	BIC	#LCP21-AST	for de-insulating Pt/Ir wire
Micro strip connector with latch, 4-pin	Omnetics	A24002-004 / PS1-04-SS-LT
Pipette tip, 10 uL	VWR	89079-464
Platinum-Iridium (90/10%) Wire, 0.001" (diameter) x 9 strands, PTFE insulated	Sigmund Cohn	10IR9/49T
Razor Blade, Single Edge, Surgical Carbon Steel No.9	VWR	#55411-050	for cutting MicroRenathane tubing
Sewing needle, ca. 4.0 cm length x 0.7 mm diameter (size 6-7)	Singer	00276	Smaller needle for threading Pt/Ir wire
Sewing needle, ca. 4.5 cm length x 0.8 mm diameter (size 2-3)	Singer	00276	Larger needle for pinning cuff during assembly and for threading suture
Small foam board	Juvo+/Amazon	B07C9637SJ	for fabrication platform; our dimensions are ca. 2.5" x 3.5" x 1" (L x W x H)
Solder, multicore lead-free, 0.38mm diameter	Loctite/Multicore	#796037
Soldering station	Weller	WES51	or similar soldering iron compatible with long conical tips (this part has been discontinued)
Soldering tip, long conical, 0.01" / 0.4 mm	Weller	1UNF8
Suture, nonabsorbable braided silk ,size 6/0	Fine Science tools	#18020-60
UV (405 nm) spot light	Henkel/Loctite	#2182207
UV Light Cure Adhesive 25 ml	Henkel/Loctite	AA 3106	or similar biocompatible UV cure adhesive
Wire wrapping wire, 30 AWG	Digikey	K396-ND