Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüsü, GAG hibe NS052535 ve EY014061 &amp; EY014997 ARL yanı sıra bir UL1DE019583-02 konsorsiyum ödül tarafından desteklenmiştir.

Yanlılığı önlemek için, değerlendirmeler yapan deneyci hayvanın genotipi bilgiye sahip olmamalıdır. Bireysel önlemler en şiddetli halini temsil eden ilgili fenotip ve 3 yokluğu temsil eden 0 ile 0-3 bir ölçekte puanlanır. Her bir test puan tekrarlanabilir olduğundan emin olmak için birden çok kez yapılır. Obezite açıklanan tüm önlemler yorumlanması karmaşık hale getirecektir. Araştırmacı fenotip puanlama sonuçları yağlanma olası rolü değerlendirmek için aşağıdaki fareleri tartmak isteyebilirsiniz. Ledge testi Çıkıntı testi, ataksilerin ve diğer birçok nörodejeneratif hastalıklar bozulmuş, doğrudan bir koordinasyon ölçüsüdür. Bu tedbir, serebellar ataksi insan belirtileri en doğrudan karşılaştırılabilir. <ol><li> Kaldırın fare kafes ve kafes çıkıntıya yerleştirin. Fareler genellikle çıkıntı boyunca yürüyüş ve kafes içine geri inmeye çalışacaktır. </li><li> Fare kafes çıkıntı boyunca yürür ve kendisini onun kafes içine düşürür olarak dikkate alınmalıdır. Yabani tip fare genellikle dengesini kaybetmeden çıkıntı boyunca yürüyecek ve incelikle kendisini kafese alt sırt, patilerini kullanarak. Bu 0 puan atanır. Fare çıkıntı boyunca yürürken temele kaybeder, ama aksi bir koordine görünür, 1 puan alır. Kafes içine inen etkili bir merkez yerine pençeleri arka bacaklar, ya da toprakları kullanmayın yoksa, 2 puan alır. Eğer çıkıntı düşer, ya da neredeyse bu yüzden, yürüme ya da kendisini düşürmek için çalışırken ya da sallar ve cesaret rağmen hareket reddediyor, 3 puan alır. Bazı fareler, onları kafes içine çıkıntı boyunca yürümeye ya da inmeye teşvik etmek için yumuşak bir dürtme gerektirir. </li><li> Çıkıntı test puanı kaydedin. </li></ol> Hindlimb clasping Clasping Hindlimb nörodejenerasyon fare modelleri, belirli ataksilerin [1] de dahil olmak üzere bir dizi hastalığın ilerlemesi bir belirteç. <ol><li> , Baz istasyonunun yakınında kuyruk kavrayın ve çevredeki tüm nesnelerin net bir fare kaldırın. </li><li> 10 saniye boyunca hindlimb pozisyonu dikkate alınmalıdır. Arka ayaklarında sürekli karın, dışa yayvan varsa, 0 puan atanır. Bir hindlimb askıya zaman% 50 daha fazla karın doğru geri çekilir, 1 puan alır. Hem arka ayaklarında zaman askıya% 50&#39;den fazla karın kısmen doğru geri çekilir, 2 puan alır. Arka ayaklarında tamamen geri çekilir ve karın askıya zaman% 50 daha fazla temas varsa, bu 3 puan alır. </li><li> Fare, kafese geri koyun ve hindlimb clasping puan kaydetmek. </li></ol> Yürüyüş Yürüyüş koordinasyon ve kas fonksiyonu bir ölçüsüdür. <ol><li> Onun kafes fare çıkarın ve baş araştırmacı uzak bakacak şekilde düz bir yüzey üzerine yerleştirin. </li><li> Yürür gibi arkasından fare uyun. Fare, vücut ağırlığı, karın yere dokunmadan değil, tüm ekstremitelerde desteklenen ve her iki arka ayaklarında eşit katılımıyla ile, normalde hareket ederse, 0 puan alır. Bir titreme gösterir ya da yürürken, gevşek görünür, 1 puan alır. Gösteriyorsa ciddi bir titreme, şiddetli topallama, pelvis indirdi, ya da ayak lokomosyon (&quot;ördek ayak&quot;) sırasında vücuttan uzaklaştıran noktası, 2 puan alır. Fare zorluk ilerlemeye ve zemin boyunca karın sürükler, 3 puan alır. </li><li> Fare, kafese geri koyun ve onun yürüyüş puan kaydetmek. </li></ol> Kifoz Kifoz karakteristik bir dorsal omurga eğriliği fare modelleri [2] nörodejeneratif hastalığın yaygın bir tezahürüdür. Nörodejenerasyon sekonder spinal kasları kas tonusu kaybı neden olur. <ol><li> Fare, kafesinden çıkarın ve düz bir yüzey üzerine yerleştirin. </li><li> Bu yürüyüşler olarak dikkate alınmalıdır. Fare yürür ve kalıcı kifoz bulunmamış kolayca omurgayı düzeltmek için mümkün ise, 0 puan alır. Fare hafif kifoz sergileyen ancak omurga düzeltmek mümkün ise, 1 puan alır. Omurganın tamamen düzeltmek için mümkün ve kalıcı ama hafif kifoz korur, 2 puan alır. Yürür ya da oturur, 3 puan atanır fare belirgin kifoz korur. </li><li> Fare, kafese geri koyun ve onun kifoz puan kaydetmek. </li></ol> Temsilcisi sonuçları Yeterli sayıda hayvan, bu yordamı suşları arasında ve zaman içinde aynı gerginlik içinde fenotip farklılıkları algılama yeteneğine sahiptir. Veri analizi için, alarak, her bir tedbir için puanının hesaplanmasındaher bireyin üç ölçümleri demek. Önlemler, her birey için bir kompozit fenotip skoru içine ayrı ayrı analiz ya da kombine edilebilir. Grafik ve önemini belirlemek için uygun istatistiksel yöntemler uygulanır. Şekil 1, bir fare transgenik SCA7 model bileşik bir fenotip değerlendirme sonuçlarını gösterir. Bu floxed SCA7 92Q transgenik model, 92 CAG tekrarları ile insan-7 ataksin gen loxP siteleri tarafından çevrili ve bir bakteriyel yapay kromozom ifade. Kompozit fenotip skoru 12 maksimum olası bir puan için clasping, çıkıntı yürüyüş, yürüme ve kifoz değerlendirmeler içerir. Insan hastalığı ilerici niteliği ile tutarlı bir artan kompozit fenotip skoru, floxed SCA7-92Q transgenik farelerin ilerici SCA7 fenotip olduğunu göstermiştir. <img src="/files/ftp_upload/1787/1787fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1 Floxed-SCA7-92Q farelere 20 hafta (*** p &lt;0.001 Bonferroni post-hoc 2-way ANOVA) başlayarak Sigara Transgenik littermates önemli ölçüde farklı bir ilerici SCA7 fenotip sergilerler. Fare, yürüyüş ve kifoz clasping çıkıntı testi için her biri 0-3 ölçek olarak değerlendirildi. Her yaşta her genotip için ortalama bileşik skoru hesaplandı. Barlar SEM temsil eder.

<ol>
	<li>Chou, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polyglutamine-expanded+ataxin-3+causes+cerebellar+dysfunction+of+SCA3+transgenic+mice+by+inducing+transcriptional+dysregulation.">Polyglutamine-expanded ataxin-3 causes cerebellar dysfunction of SCA3 transgenic mice by inducing transcriptional dysregulation.</a> Neurobiol Dis. 31 (1), 89-101 (2008).</li><li>Thomas, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+endogenous+androgen+receptor+protein+accelerates+motor+neuron+degeneration+and+accentuates+androgen+insensitivity+in+a+mouse+model+of+X-linked+spinal+and+bulbar+muscular+atrophy.">Loss of endogenous androgen receptor protein accelerates motor neuron degeneration and accentuates androgen insensitivity in a mouse model of X-linked spinal and bulbar muscular atrophy.</a> Hum Mol Genet. 15 (14), 2225-2238 (2006).</li><li>Ditzler, S., Stoeck, J., LeBlanc, M., Kooperberg, C., Hansen, S., Coppin, L., Olson, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Rapid+Neurobehavioral+Assessment+Reveals+that+FK506+Delays+Symptom+Onset+in+R6/2+Huntington's+Disease+Mice.">A Rapid Neurobehavioral Assessment Reveals that FK506 Delays Symptom Onset in R6/2 Huntington's Disease Mice.</a> Preclinica Research Articles. 1 (3), 115-126 (2003).</li></ol>

Bu çalışmalar, Washington Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu Üniversitesi tarafından onaylanmıştır.

Bu protokol, serebellar ataksi fare modelleri hastalık şiddetinin hassas ve kolay uygulanabilir bir değerlendirme olacak şekilde tasarlanmıştır. Skorlama sistemi bireysel bileşenleri nörodejenerasyon farklı fare modellerinde daha fazla veya daha az etkili olacaktır. Bu skorlama sistemi elemanları insan nörodejeneratif hastalığın fare modelleri, çeşitli ataksilerin, Huntington hastalığı ve spinobulbar müsküler atrofi [1-3] de dahil olmak üzere etkin bir şekilde değer...

a simple composite phenotype scoring system for evaluating mouse models of cerebellar ataxia

Biz cerebella ataksi fare modelleri, hastalık şiddeti, hızlı ve hassas ölçümü için bir protokol tanımlamaktadır. Spinoserebellar ataksileri, Huntington hastalığı ve spinobulbar müsküler atrofi de dahil olmak üzere çeşitli hastalık modellerinde fenotip değerlendirmeler, daha önce yayınlanmış türetilmiştir. Önlemler arka bacak clasping, çıkıntı testi, yürüme ve kifoz içerir. Her bir ölçüm, dört önlemler için 0-12 toplam 0-3 bir ölçekte kaydedilir. Da nörodejeneratif hastalık fenotiplerinin temporal ilerlemesi nicel sonuçları etkin bir şekilde etkilenen ve etkilenmeyen bireyler arasında ayrımcılık. Önlemler ayrı ayrı analiz veya daha fazla istatistiksel güç bir kompozit fenotip skoru birleştirilir. Dört açıklanan önlemlerin ideal bir kombinasyon söz konusu bozukluk bağlıdır. Biz transgenik fare modelinde spinoserebellar ataksi tip 7 (SCA7) bir hastalık şiddetini değerlendirmek için kullanılan protokol bir örnek sunmak. Albert R. La Spada ve Gwenn A. Garden Bu yazının eşit katkıda bulunmuştur.

Watch this Scientific Journal Video about A Simple Composite Phenotype Scoring System for Evaluating Mouse Models of Cerebellar Ataxia at JoVE.com

A Simple Composite Phenotype Scoring System for Evaluating Mouse Models of Cerebellar Ataxia

Biz serebellar ataksi fare modelleri, hastalık şiddeti, hızlı ve hassas ölçümü için bir protokol tanımlamaktadır. Önlemler arka bacak clasping, çıkıntı testi, yürüme ve kifoz içerir. Bu protokol, etkili bir şekilde etkilenen ve etkilenmeyen bireyler arasında ayrımcılık ve zamanla etkilenen bireylerin ilerlemesi algılar.

Serebellar Ataksi Fare Modelleri Değerlendirme Basit Kompozit Fenotip Puanlama Sistemi

We describe a protocol for the rapid and sensitive quantification of disease severity in mouse models of cerebella ataxia. It is derived from previously ...

a-simple-composite-phenotype-scoring-system-for-evaluating-mouse

Research

JoVE Journal

Neuroscience

35.4K Görüntüleme.  University of Washington. Biz serebellar ataksi fare modelleri, hastalık şiddeti, hızlı ve hassas ölçümü için bir protokol tanımlamaktadır. Önlemler arka bacak clasping, çıkıntı testi, yürüme ve kifoz içerir. Bu protokol, etkili bir şekilde etkilenen ve etkilenmeyen bireyler arasında ayrımcılık ve zamanla etkilenen bireylerin ilerlemesi algılar.

Video: A Simple Composite Phenotype Scoring System for Evaluating Mouse Models of Cerebellar Ataxia

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS)

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 years for the sporadic disease and around 50 years for the familial disease. Due to its progressive course, 50% of the patients die within 30 months of symptom onset. In order to evaluate novel treatment options for this disease, genetic mouse models of ALS have been generated based on human familial mutations in the SOD gene, such as the SOD1 (G93A) mutation. Most important aspects that have to be evaluated in the model are overall survival, clinical course and motor function. Here, we demonstrate the clinical evaluation, show the conduction of two behavioural motor tests and provide quantitative scoring systems for all parameters. Because an in depth analysis of the ALS mouse model usually requires an immunohistochemical examination of the spinal cord, we demonstrate its preparation in detail applying the dorsal laminectomy method. Exemplary histological findings are demonstrated. The comprehensive application of the depicted examination methods in studies on the mouse model of ALS will enable the researcher to reliably test future therapeutic options which can provide a basis for later human clinical trials.

Clinical Testing and Spinal Cord Removal in a Mouse Model for Amyotrophic Lateral Sclerosis ALS

A mouse model for amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is examined clinically and behaviorally. As a prerequisite for an accompanying immunohistological analysis the preparation of the spinal cord is depicted in detail.

Amyotrofik Lateral Skleroz için Fare Modeli (ALS) Klinik Test ve Omurilik Kaldırma

Amyotrophic lateral sclerosis (ALS) is a fatal neurodegenerative disorder resulting in progressive degeneration of motoneurons. Peak of onset is around 60 ...

Tıp

Low-Cost Gait Analysis for Behavioral Phenotyping of Mouse Models of Neuromuscular Disease

Measurement of animal locomotion is a common behavioral tool used to describe the phenotype of a given disease, injury, or drug model. The low-cost method of gait analysis demonstrated here is a simple but effective measure of gait abnormalities in murine models. Footprints are analyzed by painting a mouse&#8217;s feet with non-toxic washable paint and allowing the subject to walk through a tunnel on a sheet of paper. The design of the testing tunnel takes advantage of natural mouse behavior and their affinity for small dark places. The stride length, stride width, and toe spread of each mouse is easily measured using a ruler and a pencil. This is a well-established and reliable method, and it generates several metrics that are analogous to digital systems. This approach is sensitive enough to detect changes in stride early in phenotype presentation, and due to its non-invasive approach, it allows for testing of groups across life-span or phenotypic presentation.

Footprint analysis is a low-cost alternative to digitized gait analysis programs for researchers quantifying movement abnormalities in mice. Because of its speed, simplicity, and longitudinal potential, it is ideal for behavioral phenotyping of mouse models.

Nöromusküler hastalığın fare modellerinin davranışsal phenotyping için düşük maliyetli yürüyüş analizi

Measurement of animal locomotion is a common behavioral tool used to describe the phenotype of a given disease, injury, or drug model. The low-cost method ...

Davranış

<meta charset="utf8"></head><body>Merdiven Işın Testi Kullanılarak TH ile İlgili Murin Modellerinde Motor Performansın Değerlendirilmesi

A Versatile, Behavioral Method to Investigate Thyroid Hormone Effects on Cerebellar Function

Thyroid hormone (TH) action is essential during the development of the central nervous system, including the cerebellum. In case of TH deficiency in early life such as congenital hypothyroidism, patients display neurological disorders such as cognitive retardation and motor deficits. There are various studies using mouse models with tissue- or cell-specific TH deficiency to investigate the role of TH in the cerebellum. Compared to generalized congenital hypothyroid mice, cerebellar cell-specific TH-deficient mice display milder and subtler ataxic features, making the assessment of motor function difficult when using conventional tests such as the rotarod test. 
Due to the need for an alternative tool to assess motor function in TH-related animal models, we developed a versatile behavioral method called the "ladder beam test," in which we can design the various ladder tests depending on the severity of ataxia in model mice. We utilized transgenic mice expressing a dominant-negative TH receptor specifically in the cerebellar Purkinje cell, a sole output neuron in the cerebellar cortex modulating motor performance. The newly-built ladder beam test successfully detected robust impairments in motor performance in the transgenic mice at a greater level compared to the rotarod test. Disruption of motor learning was also detected in the ladder beam test but not in the rotarod test. The protocol with this novel behavioral apparatus can be applied to other animal models that may show mild ataxic phenotype to examine subtle changes in cerebellar function.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Farede Tiroid Hormonu Kaynaklı Motor Değişikliklerinin Doğru Bir Şekilde Değerlendirilmesi

Here we present a protocol for a versatile behavior test developed recently, the ladder beam test. This test has the advantage of detecting subtle cerebellar ataxia caused by a defect of thyroid hormone action in the central nervous system over the conventional behavior tests assessing motor performance.

Tiroid hormonunun serebellar fonksiyon üzerindeki etkilerini araştırmak için çok yönlü, davranışsal bir yöntem

Thyroid hormone (TH) action is essential during the development of the central nervous system, including the cerebellum. In case of TH deficiency in early ...

Davranışsal Testler Kullanarak Angelman Sendromunun Murin Modelini Doğrulama

Behavioral Characterization of an Angelman Syndrome Mouse Model

This manuscript describes a battery of behavioral tests available to characterize Angelman syndrome (AS)-like phenotypes in an established murine model of AS. We use the rotarod learning paradigm, detailed gait analysis, and nest building test to detect and characterize animal motor impairments. We test animal emotionality in the open field and elevated plus maze tests, as well as the affect in the tail suspension test. When AS mice are tested in the open field test, the results should be interpreted with care, since motor dysfunctions influence mouse behavior in the maze and alter activity scores.
The reproducibility and effectiveness of the presented behavioral tests has already been validated in several independent Uba3a mouse lines with different knockout variants, establishing this set of tests as an excellent validation tool in AS research. Models with the relevant construct and face validity will warrant further investigations to elucidate the pathophysiology of the disease and grant the development of causal treatments.

Yazar Spotlight: Bir Angelman Sendromu Murin Modelini Doğrulamak için Yüksek Derecede Tekrarlanabilir Davranış Testleri Dizisi 

This manuscript presents a set of highly reproducible behavioral tests to validate an Angelman syndrome mouse model.

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

This manuscript describes a battery of behavioral tests available to characterize Angelman syndrome (AS)-like phenotypes in an established murine model of ...

A Quick Phenotypic Neurological Scoring System for Evaluating Disease Progression in the SOD1-G93A Mouse Model of ALS

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening protocol, demonstrated in video herein, which reliably assesses the neuromuscular function of SOD1-G93A mice in a quick manner. This protocol encompasses a simple neurological scoring system (NeuroScore) designed to assess hindlimb function. NeuroScore is focused on hindlimb function because hindlimb deficits are the earliest reported neurological sign of disease in SOD1-G93A mice. The protocol developed by ALS TDI provides an unbiased assessment of onset of paresis (slight or partial paralysis), progression and severity of paralysis and it is sensitive enough to identify drug-induced changes in disease progression. In this report, the combination of a detailed manuscript with video minimizes scoring ambiguities and inter-experimenter variability thus allowing for the protocol to be adopted by other laboratories and enabling comparisons between studies taking place at different settings. We believe that this video protocol can serve as an excellent training tool for present and future ALS researchers.

This video protocol describes a sensitive, reliable, and quick method for evaluating the neuromuscular deficits in a transgenic mouse model of amyotrophic lateral sclerosis.

ALS SOD1-G93A Fare Modeli hastalığın ilerlemesine değerlendirilmesi için Hızlı Fenotipik Nörolojik Puanlama Sistemi

The SOD1-G93A transgenic mouse is the most widely used animal model of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). At ALS TDI we developed a phenotypic screening ...

Treating SCA1 Mice with Water-Soluble Compounds to Non-Specifically Boost Mitochondrial Function

Mitochondrial dysfunction plays a significant role in the aging process and in neurodegenerative diseases including several hereditary spinocerebellar ataxias and other movement disorders marked by progressive degeneration of the cerebellum. The goal of this protocol is to assess mitochondrial dysfunction in Spinocerebellar ataxia type 1 (SCA1) and assess the efficacy of pharmacological targeting of metabolic respiration via the water-soluble compound succinic acid to slow disease progression. This approach is applicable to other cerebellar diseases and can be adapted to a host of water-soluble therapies.
Ex vivo analysis of mitochondrial respiration is used to detect and quantify disease-related changes in mitochondrial function. With genetic evidence (unpublished data) and proteomic evidence of mitochondrial dysfunction in the SCA1 mouse model, we evaluate the efficacy of treatment with the water-soluble metabolic booster succinic acid by dissolving this compound directly into the home cage drinking water. The ability of the drug to pass the blood brain barrier can be deduced using high performance liquid chromatography (HPLC). The efficacy of these compounds can then be tested using multiple behavioral paradigms including the accelerating rotarod, balance beam test and footprint analysis. Cytoarchitectural integrity of the cerebellum can be assessed using immunofluorescence assays that detect Purkinje cell nuclei and Purkinje cell dendrites and soma. These methods are robust techniques for determining mitochondrial dysfunction and the efficacy of treatment with water-soluble compounds in cerebellar neurodegenerative disease.

We present a biochemical and behavioral protocol to evaluate the efficacy of mitochondria-targeted water-soluble compounds for the treatment of Spinocerebellar ataxia type 1 (SCA1) and other cerebellar neurodegenerative diseases.

suda çözünür Bileşikleri ile SCA1 Fare tedavisi, spesifik olmayan mitokondriyal fonksiyon Boost

Mitochondrial dysfunction plays a significant role in the aging process and in neurodegenerative diseases including several hereditary spinocerebellar ...

Serebellar Ataksi Fare Modelleri Değerlendirme Basit Kompozit Fenotip Puanlama Sistemi

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Amyotrofik Lateral Skleroz için Fare Modeli (ALS) Klinik Test ve Omurilik Kaldırma

Nöromusküler hastalığın fare modellerinin davranışsal phenotyping için düşük maliyetli yürüyüş analizi

Tiroid hormonunun serebellar fonksiyon üzerindeki etkilerini araştırmak için çok yönlü, davranışsal bir yöntem

Tiroid hormonunun serebellar fonksiyon üzerindeki etkilerini araştırmak için çok yönlü, davranışsal bir yöntem

Tiroid hormonunun serebellar fonksiyon üzerindeki etkilerini araştırmak için çok yönlü, davranışsal bir yöntem

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

Angelman Sendromlu Bir Fare Modelinin Davranışsal Karakterizasyonu

ALS SOD1-G93A Fare Modeli hastalığın ilerlemesine değerlendirilmesi için Hızlı Fenotipik Nörolojik Puanlama Sistemi

suda çözünür Bileşikleri ile SCA1 Fare tedavisi, spesifik olmayan mitokondriyal fonksiyon Boost