Zebra Balığı Embriyolarının Hazırlanması ve Embriyolar Üzerinde Nöromüsküler ve Genel Toksisitenin Test Edilmesi için Kimyasallar

Başlamak için, embriyoları bölünme aşamalarında, özellikle doğal yumurtlamadan iki hücreli aşamadan sekiz hücreli aşamaya kadar, 10 santimetrelik bir Petri kabında toplayın. Temizlemek için Petri kabından döllenmemiş yumurtaları, kalıntıları ve pulları çıkarın. 15 mililitre E3 ortamı içeren bir Petri kabına 60 embriyo yerleştirin.

Embriyo içeren tüm tabakları suya batırılmış kağıt havlularla hazırlanmış nemlendirilmiş bir odaya yerleştirin. Daha sonra döllenmeden 72 saat sonra 28.5 santigrat dereceye ayarlanmış bir inkübatörde inkübe edin. Ardından, eksi 20 santigrat derece dondurucudan istenen kimyasal stok çözeltilerini alın ve çözülmesine izin verin.

Her kimyasalın E3 ortamında bir cam şişede seri seyreltmesini hazırlayın. Çözeltiyi yağış açısından inceleyin ve varsa kaydedin. Ardından, bir sonraki en yüksek konsantrasyonu elde etmek için daha fazla seyreltin.

Yağış kalmayana kadar kontrol edin ve tekrarlayın. Ardından maruz kalma çözeltisinin pH'ını kontrol edin ve kaydedin. PH 7.0 ila 8.5 aralığının dışına düşerse, hidroklorik asit veya sodyum hidroksit ile 7.4'e ayarlayın.

Kullanılmayan maruz kalma ortamlarını yerel yönetmeliklere uygun olarak atın.