Başlamak için, özofagus biyopsilerinden izole edilen hücreleri alın ve bunları 10 mikromolar Y27632 ile dört mililitre KSFM'de yeniden süspanse edin. Hücreleri bir T25 hücre kültürü şişesine aktarın. Keratinositler, %60 ila %80 birleşme özelliğine sahip bir tek tabaka oluşturduğunda, P1 hücrelerini geçer.
Daha sonra P2 birincil keratinositlerini hava sıvı arayüz kültürü için TRANSWELL eklerine tohumlayın. Yedinci günde hava ikmali yapmak için, alt haznedeki besiyerini yüksek kalsiyumlu KSFM ile değiştirin ve besiyerini üst hazneden aspire edin.