Atomik Kuvvet Mikroskobu Kullanılarak Sertlik Ölçümü için Fare Retina Kılcal Damarlarının ve Subendotelyal Matriksin İzolasyonu

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

545 Views

•

10:02 min

•

July 12th, 2024

DOI :

10.3791/66922-v

July 12th, 2024

•

Irene Santiago Tierno¹^,²^,³, Mahesh Agarwal¹^,², Nikolaos Matisioudis²^,⁴, Sathishkumar Chandrakumar¹^,², Kaustabh Ghosh¹^,²^,³

¹Department of Ophthalmology, University of California, Los Angeles, ²Doheny Eye Institute, ³Molecular, Cellular, and Integrative Physiology Interdepartmental PhD Program, University of California, Los Angeles, ⁴Department of Bioengineering, University of Pennsylvania

Transkript

Diyabetin görmeyi tehdit eden önemli bir mikrovasküler komplikasyonu olan erken diyabetik retinopatide vasküler inflamasyonun retina kapillerlerinde dejenerasyona neden olduğu bilinmektedir. Laboratuvarımız, vasküler sertlik şeklindeki mekanik ipuçlarının erken diyabette bu anormal retinal vasküler değişikliklere katkıda bulunup bulunamayacağını ve nasıl katkıda bulunabileceğini araştırıyor. Diyabetik retinopatiyi erken aşamada önlemenin yollarını geliştirmeye yönelik artan bir ilgi vardır ve özellikle diyabetin erken dönemlerinde ortaya çıkan ve retinal nörovasküler disfonksiyona katkıda bulunan retina iltihabını inhibe etmeye odaklanmaktadır.

Son çalışmalarımız, genetik ve biyokimyasal faktörlere ek olarak, vasküler sertlik gibi mekanik ipuçlarının erken diyabette retina inflamasyonunu teşvik edebileceğini göstermektedir. Protokolümüz, araştırmacıların atomik kuvvet mikroskobu kullanarak sonraki sertlik ölçümleri için sağlam retina damarlarını ve subendotelyal matrisi izole etmelerine izin verecektir. Bu ölçümler, diyabetik retinopati ve makula dejenerasyonu ile ilişkili vasküler defektlerin gelişiminde vasküler sertlik ve endotelyal mekanobiyolojinin rolünü belirlemeye yardımcı olacaktır.

Atomik kuvvet mikroskobu, dakika nano iki pikton düzeyinde enterasyon kuvvetleri uygulayarak, kan damarları, hücreler ve erişilebilir ölçümler gibi yumuşak biyolojik numunelerin sertliğini doğrudan ölçmek için hassas, doğru ve güvenilir bir teknik sunar. Bildiğimiz kadarıyla, bu tür hassas ölçümler bir atomik kuvvet mikroskobu kullanılarak benzersiz bir şekilde mümkündür. Son çalışmalarımız, diyabette retina kılcal damarlarının daha sert hale geldiğini ve bunun da retina vasküler inflamasyonuna ve dejenerasyonuna yol açtığını göstermiştir.

Gelecekte daha etkili tedaviler için mikrobiyoloji temelli anti-inflamatuar hedefleri belirleme potansiyeli olarak diyabetik retinopatinin mekanik regülasyonunun daha derin bir şekilde anlaşılması.

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

JoVE de Bu Ay

Say 209

Sertlik l m

Atomik Kuvvet Mikroskobu

Subendotelyal Matriks

Klinik ncesi Do rulama

Bu videodaki bölümler

0:00

Introduction

2:07

Isolation of Retinal Capillaries from a Mouse Eye for Atomic Force Microscope Stiffness Measurement

5:09

Collection of Subendothelial Matrix from Retinal Microvascular Endothelial Cell (REC) Cultures for Atomic Force Microscope (AFM) Stiffness Measurement