<p class="jove_title"> NIH3T3 hücrelerinin hazırlanması: </p><p class="jove_step"> Ejeksiyon için A. Hücreler </p><ol><li> Sonra da hücre, hücre medya ile seyreltilmiş 1:1, ve T75 balonuna 15 ml Falcon tüp transfer Trypsinize </li><li> Santrifüj edilerek pelet hücreleri aşağı Spin süpernatant aspirat ve hücreleri DPBS ile yıkayın </li><li> Pelet içine hücreleri tekrar aşağı çevirin ve süpernatant aspirat </li><li> Medyada yeniden süspanse hücreleri </li><li> Hemasitometre (~ 200 X 10 <sup>4</sup> T75 şişesi başına hücre / ml) ile hücre yoğunluğunu </li><li> Santrifüj hücre çözümü, supernatant aspirat, medya uygun miktarda ve değişik hücre konsantrasyonları için tekrar süspansiyon </li></ol><p class="jove_step"> B. Hücre ejeksiyon </p><ol><li> Çıkarılmaya kullanmadan önce Vortex hücreleri </li><li> Enjektöre hücre çözümü 200 mcL transfer </li><li> Darbe jeneratörü uygun modu ayarlama <ol><li> Çıkarırken, tek damlacıkları ve çoklu damlacıkları (patlamaları), &quot;E. BUR&quot; modunda darbe jeneratör </li><li> Sürekli damlacık ejeksiyon için, &quot;NORM&quot; moduna darbe jeneratör </li></ol></li><li> Sinyali ayarları değiştirin <ol><li> 5 V ve LOL 0 V ve emin olun &quot;LIM&quot; LED HIL: yüksek seviye ve düşük seviye çıkış voltajı ayarla </li><li> Sinyal kare dalga olarak ayarlayın </li><li> Solenoid valf &quot;WID&quot; değerini değiştirerek veya görev döngüsü değişen açık damlacık ejeksiyon zaman miktarını değiştirme (&quot;HİZMET&quot;) </li><li> &quot;BAŞINA&quot; değerini değiştirerek ejeksiyon frekans değiştir </li><li> &quot;BUR&quot; değerini değiştirerek bir patlama çıkarılır damlacıkların sayısını değiştirme </li></ol></li><li> Mikroskobu ile görüntüleme için hazırlanmış yüzey üzerine Çıkar hücre çözümü </li></ol><p class="jove_step"> C. Boyama </p><ol><li> 0.5 mcL Calcein-AM ve DPBS ml başına 2 mcL ethidium homodimer boya çözüm Makyaj </li><li> Boya çözüm daldırın hazırlanan substrat </li><li> İzin örnek 37 az 10 dakika süreyle inkübe ° C görüntüleme önce </li></ol><p class="jove_title"> Deney Doğrulama </p><ol><li> Nikon Eclipse TE-2000 U Floresan Mikroskobu <ol><li> Spot gelişmiş yazılım (Diagnostics, Inc.) </li><li> Ölü / Canlı Testi </li></ol></li></ol>

<p class="jove_content">The authors have nothing to disclose.</p>

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Fluorescent Microscope</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Nikon</td>
<td>Eclipse TE-2000 U</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Solenoid valve cell ejector</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Operation frequency: 1 KHz, 30psi, 50nl~0.5ul. 12V Valve Driver: 2.5 Amp drive current
</td>
</tr>
<tr>
<td>5-Gallon Portable air tank</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Coleman</td>
<td>Powermate CT5</td>
<td>Pressurized air: 30 PSI </td>
</tr>
<tr>
<td>Pressure regulators</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Marsh Bellofram</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Pulse Generator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>HP8112A</td>
<td>Actuation frequency generation: 50 MHz
</td>
</tr>
<tr>
<td>XYZ-stage</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Newmark Systems</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>With Stepping motor: 6inch travel xy-stage(NLS4-6-25), 2.5inch travel z-stage(NLS4-2.5-25), 3axis controller(NSC-G3), 0.1um resolution</td>
</tr>
<tr>
<td>NIH 3T3</td>
<td>Cell-line</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>fibroblasts</td>
</tr>
<tr>
<td>Trypsin</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>0.05% solution</td>
</tr>
<tr>
<td>NIH 3T3 cell medium</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>DPBS</td>
<td>Buffer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>T75</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Tissue culture flasks</td>
</tr>
<tr>
<td>Plastic conical tubes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>15 ml, for tissue culture</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

title cell encapsulation by droplets

Watch this Scientific Journal Video about Title Cell Encapsulation by Droplets at JoVE.com

Droplets tarafından Başlığı Hücre Kapsülleme