Yazarlar illüstrasyonlar katkılarından dolayı Dr. Andrew King, doktora ve Katrina Kral kabul etmek istiyoruz. NIH hibe: R00HL087927.

1. Başlangıç ​​Cerrahi Prosedür önce Not: önce herhangi bir hayvan prosedürleri, kurum / kuruluş aracılığıyla uygun izni almış olmasını sağlamak . Tüm hayatta kalma ameliyatları olduğu gibi, cerrahi steril koşullar altında yapılır ve uygun ağrı kesiciler ve başarılı bir sonuç için gerekli antibiyotik kullanılır emin olun. <ol><li> Kateterizasyon prosedürü başlamadan önce onlar patent sağlamak için steril serum fizyolojik ile püskürtülerek kateterler değerlendirir. </li><li> Sıçan anestezisi. </li><li> Cerrahi prosedür için sıçan hazırlayın. <ol class="lalpha"><li> Tıraş, boynun arka (kürek kemikleri arasında) ve iç bacak bölgesini içeren cerrahi bölgelerde, kürk. </li><li> Sırasıyla Betadine ve% 70 etanol fırçalayın kullanarak, traş cerrahi bölgelerde merkezinde başlayan ve dairesel bir süpürme dışa fırçalayın. Tekrar% 70 etanol ile son bir temizlik ile biten 3 kez, her bölge için bu. </li><li> Cerrahi alanlar üzerinde steril bir yüzey ve yer steril örtüyü hayvan yerleştirin. (Basın-n-Seal araştırmacı prosedür boyunca hayvan izlemenize olanak veren ideal bir cerrahi olmayan örtü.) </li></ol></li><li> Cerrahi prosedür için tüm cerrahi aletler olun sterilize edilmiştir. </li></ol> 2. Kateter Yerleştirme Cerrahi Alanları hazırlanması <ol><li> Rat (midesi) eğilimli döşeme ile, yaklaşık ½ inç (12 mm), omuz kanatları veya makas ile bir neşter sonra disseke künt bir subkutan &quot;cep&quot; seviyesinde boynun arka tarafında yatay bir kesi yapmak arka yaklaşık dörtte bir boyutu. Bu kateter arter çekti ve bu nedenle de kaldırılmıştır olduğunu yani, bu yüzden hayvan büyüme ve / veya hareket için telafi edecek küçük bir miktar tüp yerleştirmek için bir alan olarak kullanılacaktır yerdid inç (Alternatif olarak bu adımı hemen önce kateter tünel yapılabilir.) </li><li> Sıçan sırtını (yatar pozisyonda) üzerine yerleştirin ve inguinal bölgede yaklaşık ½ inç (12 mm) kesi, arka bacak doğal açısı boyunca bir kesi yapmak. </li><li> (Künt uçlu makas ve / veya pamuklu genellikle 45 derecelik bir açıyla tutarak bu kolay lokalizasyon sağlar (künt ucu makas, hemostat, pamuklu, vb kullanabilirsiniz) bağ dokusu (Şekil 1) ayırmak için disseke Blunt femoral arter ve ven kadar ilgi bölge) maruz kalmaktadır. <ol class="lalpha"><li> Ven koyu kırmızı renkli ve arter ven daha net ve parlak. Arter boyunca uzanan sinir ton beyazımsı. </li></ol></li><li> Cathete küçük bir bölümüne yerleştirme için bacağın iç yanında bacak bölgede cilt altında küçük bir açık bölge (yani cebinde, yaklaşık dörtte bir boyutu) teşrih Bluntr (tekrar hesap hayvan hareketi içine almak ve kronik yerleşimi hayvan büyüme). </li><li> Arter ve ven tam olarak görebilecek şekilde retraktörlere kesi alanı içine yerleştirin. </li><li> Ince ucu hafifçe arter ve ven femoral arter boyunca sinir (beyaz renkli) ayrı forsepsi. (Şekil 2) sinir kesmek veya zarar vermemeye dikkat edin. </li><li> Arter / ven yaklaşık ¼ inç (5-7 mm) uzunluğundaki bölümde teşhir etmeye çalışıyor, tek bir birim olarak arter ve ven ayırın. </li><li> Arter ven ayırma işlemi tekrarlayın. Gemilere, cerrahi aletler (yani ince uçlu forseps) dik tutun ve paralel olarak gemilerin ayrı. Bu gemilerin, yırtılma, batıcı veya zarar kaçınarak yardımcı olur. Altında ve yavaş yavaş açılması ve forseps Bu yinelenen arter ve ven arasındaki ince ucu forseps yavaşça koyarak, yavaş yavaş gemilerin ayrı olacaktır. Not: bazı yırtılma ya da gözlemlemek eğerkanama, kanama durana kadar steril bir pamuklu çubukla ve / veya 2 x 2 alan üzerinde yer gazlı bez ve basınç kullanmak ardından cerrahi ile devam ediyor. </li></ol> 3. Kateter Tünel <ol><li> Yeri steril tuzlu su kesi üzerinde 2 x 2 gazlı bez ıslatılır ve onun mide hayvan çevirmek. </li><li> Rochester daha önce yapılan ve kalça seviyesine kadar geri subkutan forseps kılavuzu [hemostat ipuçları omurganın doğru (değil işaret edilir sağlamak arkasındaki kesi içine Pean forseps (uzun düz forseps) yerleştirin. ) omurilik yaralanmasına önlemek için]. Yaklaşık kalça bölgesi, bacak bölgede yapılan kesi doğru hemostat ucu açmak ve hazırlanan bacak insizyonu hemostat ucu itin. </li><li> Forseps ile kateter (arter / ven eklenecektir sonu) sonuna hafifçe kavrayın ve yavaşça yapıldı boşluğu yoluyla kateterler çekinve sonuçta boyun insizyonu dışarı. </li><li> , Ilgili kateter ucunda 20 U / ml Heparin / tuzlu su ile doldurulur uygun körelmiş ucu iğne şırınga yerleştirin ve kateterler (hiç hava kabarcığı olmadığından emin olmak) heparinize / tuzlu su ile doldurun. Kateterler patent olduğunu bir kez daha kontrol edin ve herhangi bir hasar kateterler geldi. Kateter hatları içine almak ve tekrar sırtına sıçan açmak için herhangi bir hava sağlamak için kateter hatlarının sonuna kadar bağlı olan şırınga bırakın. </li></ol> 4. Femoral Ven ve arter içine kateterler takılması (Şekil 3) <ol><li> Femoral ven altında steril 4.0 ipek / iplik katlanmış bir parçası yerleştirin ve sonra katlanmış sonunda ipek kesmek. Şimdi iki adet ipek ven altında olacaktır. Veya alternatif olarak, tek tek damar altında 2 adet 4.0 ipek. </li><li> Ven altına ipek, bacak doğru parçası (distal ucu) ve diğer vücut doğru ayırın. Tsonra küçük hemostat kullanarak, yani vücuda yakın tarafında gevşek bir ligatür, ipek kavramak ve öğretilen çekin ama düğüm sıkmayın. Bacak (distal uç) doğru çekin ve mümkün olduğunca diğer ipek parçası bu üçlü bir düğüm içine kravat, ipek küçük hemostat kavramak ve öğretilen çekin. Bu yöntem damar kateter (adım 4) takılması için gerekli olan kesi yapmak daha kolay yapma, kan ile doldurmak için izin verecektir. </li><li> Lidokain damar üzerine 1-2 damla yerleştirin. </li><li> Vanna mikro diseksiyon makas kullanarak, yaklaşık venin küçük bir kesi yapmak ¼ ve 45 derecelik bir açıyla. </li><li> Insizyon ve forseps başka bir çifti kullanılarak içine ince uçlu forseps (45 forseps) yerleştirin; ven kateter dikkatle beslenirler. Araştırmacı forseps altında ve damar içine yavaşça venöz kateter yerleştirmek için izin verecek, damar içine yerleştirilir forseps yavaşça açın. </li><li> Kateter tam olarak takıldığında (uygunx. 6-7 cm) (kateter yaparken işareti cerrah, kateterin tam olarak takıldığında belirlenmesinde yardımcı olmak için kateter yerleştirilir) (bu karın vena kava venöz kateter yerleştirir), damar çevresinde ön ligatür sıkın üçlü bir düğüm bağlama ve kateter (ven kapatılmasıy değil olduğundan emin olun). Bacak yakın ipek sütür (posterior ligatürün), daha güvenli bir kateter (üçlü düğüm) ve yerleştirme sağlamak için kullanın. Dikiş düğüm çok sıkı ve kateter işlevsel olduğunu olmadığını sağlamaya yardımcı olur kateter, gözle görülür küçük bir kan kalmayıncaya kadar yavaş yavaş şırınga geri çekin. Kontrol ettikten sonra, pistonu kan kateter artık görünür oluncaya kadar bastırın. Not: gerekirse 2 kateter femoral ven içine eklemek mümkündür. </li><li> Aşağıdaki istisnalar ile femoral arter kateteri yerleştirmek için 9-13 arasındaki adımları tekrarlayın: <ol class="lalpha"><li> Üçlü bir düğüm ile bacak (posterior) en yakın ipek kravat ve tau çekinkateter yerleştirme için kesi yapmadan önce vücut (ön) yakınındaki gevşek ligatür ipe önce GHT. Bu arter kan daha kolay kesim yapma ile doldurmak için izin verecektir. Proksimal dikiş arter arter kesim için önce kapamak için öğretilen çekilir olun. Kesim yapıldığında kan kaybını önlemek. </li><li> Arteriyel kateter femoral arter yaklaşık 5 cm (abdominal aorta kateter) yerleştirin. </li><li> Dikiş ile kateter tespit ederken, dikiş ve kateter kapatılmasıy çok sıkı olmadığından emin olun. </li></ol></li></ol> 5. Wrap-up Cerrahi <ol><li> Bacak iç kateter ve yeri (döngü künt önceki disseke alanında sığmalı) çeyrek boyutlu döngü bir kuruş olun. Hem de kateter yerleştirildikten sonra, kas tabakası içine 5.0 cerrahi sütür 1-2 dikiş ile sabitleyin. </li><li> 4.0 sürekli olmayan sütür Ethilon ile insizyon kapatınes. </li><li> Sıçan midesi üzerine getirin ve kateterler, arka disseke cebinde çeyrek yeri ve büyüklüğü hakkında başka bir döngü yapmak. Kesi dikiş ile kapatın. </li><li> Vetbond bir damla kullanarak, arka kateterler güvenli. </li><li> Kelepçe yastıklı hemostat ile geri kesi yakın kateter ve şırınga ucundan kaldırın. </li><li> Fit bir ip tipi ceket ile sıçan, kateterler (heparin kilit korumak için) kap ve yastıklı hemostat kaldırmak. </li></ol> - Uzun vadeli bakım için 20 U / ml heparin / serum fizyolojik salin çözeltisi ile kateter değiştirin. 6. Kateter bakımı (prosedür sırasında steril eldiven giyilmelidir) <ol><li> Kelepçe yastıklı forseps ile kateter. </li><li> Kateter fişini çıkartın. </li><li> Kateter üzerine kilit solüsyonu ile künt uçlu bir şırınga yerleştirin. </li><li> Forseps çözülme. </li><li> Kateter kilit solüsyonu ile doldurun (hacim pre-determined genellikle 0.3 ml). </li><li> Kateter, kateter ucu herhangi bir kan akışı önlemek ve şırınga kaldırmak için kızarma ise sıkıştırın. </li><li> Kateter fişi değiştirin. </li><li> Forseps çözülme ve kateterin ucu kan olduğundan emin olmak için biraz fiş hafifçe itin. </li></ol> 7. Kan Örnekleme (prosedür sırasında steril eldiven giyilmelidir) Kelepçe yastıklı forseps ile kateter. <ol><li> Kateter fişini çıkartın. </li><li> Künt uçlu bir şırınga ve atın kullanarak kilidi çözüm yavaşça geri çekin. </li><li> Kateter örnekleme şırınga takın ve yavaş yavaş örnek çekilme. </li><li> Kelepçe yastıklı forseps ile kateter ve kateter üzerine kilit solüsyonu ile bir şırınga ve kilit solüsyonu ile kateter yeniden doldurmak. </li><li> Çözeltisi ile kateter yeniden dolum esnasında kateter sıkıştırın. </li><li> Kateter fişini tekrar takın. </li><li> Yastıklı forseps kaldırın ve yavaşça itin t<html> o biraz daha takın. </li></ol> 8. İlaç İnfüzyon <ol><li> Kelepçe yastıklı forseps ile kateter. </li><li> Kateter fişini çıkartın. </li><li> Künt uçlu bir şırınga ve atın kullanarak kilidi çözüm yavaşça geri çekin. </li><li> Kateter ilaç şırınga takın ve hayvan içine madde demlenmeye. <ul><li> çoklu enjeksiyon gerekiyorsa bir hayvan böylece daha az sıvı infüzyon gerektiren, 3 yollu stopcock yanı sıra bir ara kullanabilirsiniz. </li><li> bir de sürekli infüzyon steril bir filtre ile sabit bir infüzyon şırınga pompası ekleyebilirsiniz. </li></ul></li><li> Yastıklı forseps ile kelepçe ve kilit bir çözüm olan bir şırınga ve kateter üzerine kilit çözüm kateter yeniden doldurmak. </li><li> Çözeltisi ile kateter yeniden dolum esnasında kateter sıkıştırın. </li><li> Kateter fişini tekrar takın. </li><li> Yastıklı forseps fişi kaldırın ve yavaşça biraz daha itin. </li></ol>e &quot;&gt; 9 Kan Basıncı ve Nabız Örnekleme <ol><li> Kelepçe yastıklı forseps ile arteriyel kateter ve kateter fişi çekin. </li><li> Arteriyel hat basınç dönüştürücü takın. </li><li> Kan basıncı toplama yazılımı kullanarak üretim yönergeleri izleyin. </li><li> Kan basıncı izleme süresi bitiminde, yastıklı forseps kullanarak kateter kelepçe ve transdüser bağlantısını kesmek. </li><li> Kateter kilit solüsyonu ile temizleme ve kateter fişi yerine yukarıda açıklandığı gibi. </li></ol> 10. Temsilcisi Sonuçlar Bir temsilci kan basıncını ölçmek serbestçe hareket bilinçli bir hayvan alınmış ve Şekil 4&#39;te sunulmuştur. Fenilefrin (3 ug / kg, iv), bir alfa 1 adrenerjik reseptör agonisti, eş zamanlı olarak femoral arteriyel hattan kan basıncı ölçümü sırasında, kan basıncı artırmak için femoral ven hattı içine verildi. Fentolamin (4 mg / kg, iv)seçici olmayan bir alfa-adrenerjik antagonist, sonra kan basıncı düşürmek için verildi. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig1.jpg" /> Şekil 1 doku Künt diseksiyon. Sırtında sıçan, arka bacak açısı yaklaşık ½ inç (12 mm) kesi yapılmış ve künt, femoral arter ve ven maruz bağ dokusu disseke künt makas veya hemostat kullanarak olacaktır. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig2.jpg" /> Şekil 2, femoral arter ve bağ dokusundan ven ayrılması . <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig3.jpg" /> Şekil 3. Kateter yerleştirme. Vanna mikro diseksiyon makas, damar yoluyla yolu 45 derecelik bir açı (üst) = yaklaşık küçük bir kesi yeri ve th içine ince uçlu forseps yerdee insizyon ve forseps başka bir çifti kullanılarak (orta) damar içine kateter beslenirler. Son olarak, kateter yerleştirilmesi tamamlandıktan sonra kateter yeri (alt) dikin. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3496/3496fig4.jpg" /> Şekil 4 serbestçe hareket bilinçli bir hayvandan alınan Temsilcisi kan basıncını ölçmek.

<ol>
	<li>Tabata, Y., Chang, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermittent+vascular+access+for+extracorporeal+circulation+in+conscious+rats:+a+new+technique.">Intermittent vascular access for extracorporeal circulation in conscious rats: a new technique.</a> Artif. Organs. 6, 213-215 (1982).</li><li>Chester, J. F., Weitzman, S. A., Malt, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantable+device+for+drug+delivery+and+blood+sampling+in+the+rat.">Implantable device for drug delivery and blood sampling in the rat.</a> J. Appl. Physiol. 59, 1665-1666 (1985).</li><li>Koeslag, D., Humphreys, A. S., Russell, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+long-term+venous+cannulation+in+rats.">A technique for long-term venous cannulation in rats.</a> J. Appl. Physiol. 57, 1594-1596 (1984).</li><li>Hall, R. I., Ross, L. H., Bozovic, M., Grant, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+of+obtaining+repeated+venous+blood+samples+from+the+conscious+rat.">A simple method of obtaining repeated venous blood samples from the conscious rat.</a> J. Surg. Res. 36, 92-95 (1984).</li><li>Burt, M. E., Arbeit, J., Brennan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+arterial+and+venous+access+in+the+unrestrained+rat.">Chronic arterial and venous access in the unrestrained rat.</a> Am. J. Physiol. 238, H599-H603 (1980).</li><li>Cocchetto, D. M., Bjornsson, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methods+for+vascular+access+and+collection+of+body+fluids+from+the+laboratory+rat.">Methods for vascular access and collection of body fluids from the laboratory rat.</a> J. Pharm. Sci. 72, 465-492 (1983).</li><li>Rigalli, A., E, D. L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Experimental surgical models in the laboratory rat. , (2009).</li><li>Waynforth, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> F.P.A. Experimental and surgical tehcnique in the rat. , (2007).</li><li>Yoburn, B. C., Morales, R., Inturrisi, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+vascular+catheterization+in+the+rat:+comparison+of+three+techniques.">Chronic vascular catheterization in the rat: comparison of three techniques.</a> Physiol. Behav. 33, 89-94 (1984).</li><li>Staub, J. F., Coutris, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+technique+for+multiple,+high-rate+blood+samplings+via+an+external+cannula+in+rats.">A technique for multiple, high-rate blood samplings via an external cannula in rats.</a> J. Appl. Physiol. 46, 197-199 (1979).</li><li>Steffens, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+frequent+sampling+of+blood+and+continuous+infusion+of+fluids+in+the+rat+without+disturbing+the+animal.">A method for frequent sampling of blood and continuous infusion of fluids in the rat without disturbing the animal.</a> Physiol. Behav. 4, 833-836 (1969).</li><li>Thrivikraman, K. V., Huot, R. L., Plotsky, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Jugular+vein+catheterization+for+repeated+blood+sampling+in+the+unrestrained+conscious+rat.">Jugular vein catheterization for repeated blood sampling in the unrestrained conscious rat.</a> Brain. Res. Brain. Res. Protoc. 10, 84-94 (2002).</li><li>Vahl, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+analysis+of+ACTH+and+corticosterone+sampling+methods+in+rats.">Comparative analysis of ACTH and corticosterone sampling methods in rats.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 289, E823-E828 (2005).</li><li>Buhler, H. U., da Prada, M., Haefely, W., Picotti, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+adrenaline,+noradrenaline+and+dopamine+in+man+and+different+animal+species.">Plasma adrenaline, noradrenaline and dopamine in man and different animal species.</a> J. Physiol. 276, 311-320 (1978).</li><li>Fagin, K. D., Shinsako, J., Dallman, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+housing+and+chronic+cannulation+on+plasma+ACTH+and+corticosterone+in+the+rat.">Effects of housing and chronic cannulation on plasma ACTH and corticosterone in the rat.</a> Am. J. Physiol. 245, E515-E520 (1983).</li><li>Ling, S., Jamali, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+cannulation+surgery+and+restraint+stress+on+the+plasma+corticosterone+concentration+in+the+rat:+application+of+an+improved+corticosterone+HPLC+assay.">Effect of cannulation surgery and restraint stress on the plasma corticosterone concentration in the rat: application of an improved corticosterone HPLC assay.</a> J. Pharm. Pharm. Sci. 6, 246-251 (2003).</li><li>Fink, G. D., Bryan, W. J., Mann, M., Osborn, J., Werber, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Continuous+blood+pressure+measurement+in+rats+with+aortic+baroreceptor+deafferentation.">Continuous blood pressure measurement in rats with aortic baroreceptor deafferentation.</a> Am. J. Physiol. 241, H268-H272 (1981).</li><li>Van Vliet, B. N., Chafe, L. L., Antic, V., Schnyder-Candrian, S., Montani, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+and+indirect+methods+used+to+study+arterial+blood+pressure.">Direct and indirect methods used to study arterial blood pressure.</a> J. Pharmacol. Toxicol Methods. 44, 361-373 (2000).</li><li>Wang, J., Tempini, A., Schnyder, B., Montani, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+blood+pressure+during+long-term+ouabain+infusion+in+Long-Evans+rats.">Regulation of blood pressure during long-term ouabain infusion in Long-Evans rats.</a> Am. J. Hypertens. 12, 423-426 (1999).</li><li>Bunag, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Facts+and+fallacies+about+measuring+blood+pressure+in+rats.">Facts and fallacies about measuring blood pressure in rats.</a> Clin. Exp. Hypertens. A. 5, 1659-1681 (1983).</li></ol>

Bu video-makale Üretim ve Serbest Giriş ADInstruments tarafından desteklenmektedir.

Arter ve ven kateterizasyonu tarihsel hem de akut ve kronik kan basıncı, örnek kan izlemek için kullanılan ve deneysel sıçan hayvan modeli 1-4 maddelerin teslim edilmiştir. Bu cerrahi instrumentations önemli yararı, kan örneklemesi, ilaç ve kan basıncı izleme dahil olmak üzere izleme prosedürleri, hayvan 1 minimal bozuklukları ve / veya stres ile yapılacak izin vermesidir . Sayısız araştırmacılar protokolleri yazılı ve laboratuvar, cerrahi prosedür 5-8 gerçekleştirir hangi özel metodolojiler var . Video ve resimler Laboratuvarımızda femoral arteriyel ve venöz kateterizasyon prosedürü konusunda başarılı olmak için ne bulmuştur göstermektedir. Sıçanlar yaygın alınmasında kendi küçük boyut ve kolaylık nedeniyle bilimsel çalışmalar çok sayıda laboratuvarda kullanılır. Kronik bir kaç yer vardırkateter, birkaç isim juguler ven, abdominal aorta, karotis arter ve femoral arter, de dahil olmak üzere, bir hayvan içinde yerleştirilebilir. Sıçan femoral kateter açıklığı arttırılmış olan uzunluğu kronik kateterizasyon sonuçları için konumu ve diğer kateter yerlerde 9 ile karşılaştırıldığında cerrahi öncesi hayvan ağırlığı en hızlı kurtarma vardı. Sayısız araştırmacılar akut hem de kronik kan örneklemesi 1-5,11-13 için kalıcı kateterler kullandık. Birçok çalışmada, bir hayvan birden fazla kan gereklidir ve dış kanülasyon / kateterizasyon-travmatik olmayan doğası nedeniyle avantajlı bir metodoloji çizer; hayvan bilinçli ise ayrıca böylece anesteziklerin etkileri sınırlı değildir, yapılabilir. ve aynı zamanda hayvan serbestçe 1,10 hareket olabilir. Kan örnekleri elde etmek ve kemirgenlerde stres hormonları ölçmek için en iyi yöntem, uzun 6,13 tartışıla gelmiştir. Farmakokinetik Studi ile ilgili olarakkronik olarak implante kateter sistemini kullanarak, es, araştırma hayvan kateterizasyon en az kısıtlama ile tekrar kan örnekleme izin verir. Ayrıca, çalışmalar ele (30 saniye) ve 14 (5 dakika) ölçülü hayvanların serbestçe göre sıçan (juguler kateter) hareket plazma adrenalin, noradrenalin ve dopamin azalmış bazal konsantrasyonları gösterilmiştir. Plazma kortikosteron düzeylerini ölçerek stres artar ayırt etmek için ek bir yöntem. Daha önce bile, plazma kortikosteron düzeylerinin kronik kanüllü sıçan 15 yüksek olduğunu cerrahi kurtarma kez 3-4 gün olduğunu öne sürüldü . Ancak, metodoloji son gelişmeler uncannulated sıçanlarda 16 juguler ven kanüle sıçanlarda bazal plazma kortikosteron seviyeleri açısından hiçbir fark olmadığını tespit ettik. Buna ek olarak, kortikosteron analizi için HPLC metodoloji de göstermiştir ki kortikosteroidkısıtlama stresi bir seviyeleri yükseltilmiş, ancak istikrarlı juguler kateterizasyon sonrası 16. Kronik kateterizasyon ek bir kullanımı, kan basıncı ve kemirgenler kalp hızı ölçümü. Sıçan, kan basıncı ve kalp hızı ölçmek için kullanılan birden fazla metodolojileri vardır, bu non-invaziv kuyruk manşet metodolojileri, radiotelemetry prosedürleri ve doğrudan kalıcı kateterler. Her yöntemin avantajları ve dezavantajları, diğer yayınlarda ayrıntılı olarak açıklanmıştır. Kalıcı sıvı dolu kateterler sıçan içinde birden çok arterler içine implante edilebilir. Femoral arter bu ölçmek için kullanılabilecek bir arter. Kateterin distal ucunda kan basıncı / kalp hızı ölçümleri, kalibre edilmiş bir basınç dönüştürücü bağlanmıştır. Kateter hayvan serbest dolaşımına izin döner bağlı bir koruyucu bahar aylarında ev sahipliği, ya da bir düğmeye cerrahi bağlı olabilirolarak hayvan implante. Kalıcı kateterler uzun vadeli hayvan 17,18 stresi en aza indirerek avantajı var. Malzemeleri ucuz yanı sıra, kalibrasyon 19 sayısız hafta nispeten düşük stres koşullarında basıncını ölçer ve sürekli uzun vadeli önlemler için kolay elde edilebilir. Dezavantajları da dahil olmak üzere, bu tekniği vardır söz olmasaydı Biz gafil olurdu, cerrahi invaziv tekniği, kateter bakımı, açıklık, kateter implantasyon nedeniyle arter hasar ve korumak için gerekli potansiyel bir kaç isim enfeksiyon. Kronik implante arteriyel kateterler kan basıncı doğrudan kayıtları kronik önlemler için daha fazla teknik olarak oldukça zor ama daha doğru ve hayvan bozmadan sürekli yapılabilir. Kuyruk manşet ölçümleri daha az doğru, ancak bunlar ameliyat gerektirmez ve de tekrar edilebilired. Kuyruk manşet metodolojileri darbe 20 tespiti kolaylaştırmak için kuyruk damarlarını genişletecek hayvan ısıtma yanı sıra dikkatle ele alınmayı gerektirir. İşleme ve eklenen ısı stresi böylece gerçekten doğru önlemlerin sağlanması, kan basıncı ölçümleri etkileyebilir. Ayrıca, doğrudan olmayan tail-cuff metodu kolay eş zamanlı kan örneklemesi veya ilaç idaresi izin vermez. Doğrudan bir ölçümü elde edilebilecek ek bir yöntem telemetrik metodoloji kullanıyor. Telemetri sürekli kısıtlama olmadan veya anestezi 18 bilinçli serbestçe hareket hayvanlar uzun süre kan basıncı (ve diğer tedbirler) yüksek kaliteli kayıtlar sağlar. Ancak, telemetri cihazları ideal ise çok pahalı. Telemetri ile karşılaştırıldığında, kateterizasyon faydaları şunlardır: azalmıştır &quot;kurulum&quot; ve operasyonel maliyetler, ilaçların kolayca yönetmek ve kolayca bilinçli serbestçe hareket hayvanların kan örnekleri almak yeteneği. Administratminimal, böylece hayvan için stresi en aza indirmek ve daha doğru ölçmek için izin, hayvan rahatsız ederken, ilaçlar ve kimyasal maddeler ve araştırma hayvandan kan örnekleri elde iyon yapılabilir.

<html><table border="1"><tbody><tr><td> Isim </td><td> Tip </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td></tr><tr><td> Arter Kateter </td><td> Sarf </td><td> Sayıştay İnfüzyon </td><td> RFA-01 </td></tr><tr><td> Venöz Kateter </td><td> Sarf </td><td> Bilimsel Emtia, Inc. </td><td> BB518-20 &amp; BB31785-V / 2 </td></tr><tr><td> 27g 1 / 2 &quot;Blunt İğne </td><td> Ekipman </td><td> Entegre Dağıtım Solutions, Inc. </td><td> 9991113 </td></tr><tr><td> 23g 1 / 2 &quot;Blunt İğne </td><td> Ekipman </td><td> Entegre Dağıtım Solutions, Inc. </td><td> 9991109 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508/" target="_blank">PowerLab/8SP</a> </td><td> Ekipman </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td>w.adinstruments.com/products/hardware/research/product/PL3508 / &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; ML765 </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">Dört Köprüsü</a> </td><td> Ekipman </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/FE224/" target="_blank">ML118</a> </td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/software/research/LabChart-Software/" target="_blank">LabChart 7.2</a> </td><td> Yazılım </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a> </td><td></td></tr><tr><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">Stopcock &amp; Kablo ile BP Transducer</a> </td><td> Ekipman </td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/" target="_blank">ADInstruments</a></td><td> <a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/research/product/MLT844/" target="_blank">MLT844</a> </td></tr><tr><td> Tek Kanal Dönebilir </td><td> Ekipman </td><td> Instech </td><td> 375/22PS </td></tr><tr><td> Tek Eksenli Counter Denge Döner Dağı </td><td> Ekipman </td><td> Instech </td><td> CM375BP </td></tr><tr><td> Covance İnfüzyon Harness </td><td> Ekipman </td><td> Instech </td><td> CIH105 </td></tr><tr><td> Masa Üstü İsofluranın Anestezi Ünitesi </td><td> Ekipman </td><td> Protech Uluslararası, Inc. </td><td> 61020 </td></tr><tr><td> Kemirgen Anestezi Maskesi </td><td> Ekipman </td><td> Protech Uluslararası, Inc. </td><td> RAM-02 </td></tr><tr><td> Kemirgen İndüksiyon Odası </td><td> Ekipman </td><td> Protech Uluslararası, Inc. </td><td> RIC-01 </td></tr><tr><td> Anestezi Gaz Filtresi Kapak </td><td> Ekipman </td><td> Protech Uluslararasıdiğerleri, Inc. </td><td> 80120 </td></tr><tr><td> Masaüstü Laminar Flow Hood </td><td> Ekipman </td><td> Sentry Hava Systems, Inc. </td><td> SS-200-WSL </td></tr><tr><td> Oster Altın A5 </td><td> Ekipman </td><td> Oster Profesyonel Ürünler </td><td> 78005-140 </td></tr><tr><td> Çift Gooseneck Kılavuz Fiber Optik Işık </td><td> Ekipman </td><td> LW Scientific, Inc. </td><td> ILL-1502-DGG1 </td></tr><tr><td> Deltaphase İzotermal Pad </td><td> Ekipman </td><td> Braintree Bilimsel </td><td> 39DP </td></tr><tr><td> Pamuk uçlu Aplikatörler </td><td> Sarf </td><td> Solon Üretim Şirketi </td><td> 36200 </td></tr><tr><td> Tül Süngerler 2 &quot;x2&quot; </td><td> Sarf </td><td> Kendall curity </td><td> 2146 </td></tr><tr><td> 5-0 Naylon Sütür </td><td> Sarf </td><td> Ethicon </td><td> 661G </td></tr><tr><td> 4-0 İpek Sütür </td><td> Sarf </td><td> Deknatel </td><td> 8-S, 136.075-0208 </td></tr><tr><td> Doku Yapıştırıcı </td><td> Sarf </td><td> 3M </td><td> 1469SB </td></tr><tr><td> Splinter &amp; Fixation Forseps </td><td> Ekipman </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-55 </td></tr><tr><td> Öğrenci Doku Forseps </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 91121-12 </td></tr><tr><td> Micro Forseps / Bracken Forseps </td><td> Ekipman </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 10-1942 </td></tr><tr><td> Ekstra Güzel Graefe Forseps </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 11152-10 </td></tr><tr><td> Olsen-Hegar Needle Holder </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 12002-12 </td></tr><tr><td> Öğrenci Halsted-Sivrisinek Hemostat </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 91308-12 </td></tr><tr><td> Rochester Pean Kuvvetlerip </td><td> Ekipman </td><td> Biyomedikal Araştırma Instruments, Inc. </td><td> 31-1640 </td></tr><tr><td> Öğrenci Cerrahi Makas </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 91402-12 </td></tr><tr><td> Dumont Forseps </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 11251-35 </td></tr><tr><td> Mikro Diseksiyon Makas </td><td> Ekipman </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-210 </td></tr><tr><td> Şaşılık Makas </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 14075-11 </td></tr><tr><td> Hartman Hemostat </td><td> Ekipman </td><td> Güzel Bilim Araçlar, Inc. </td><td> 13003-10 </td></tr><tr><td> Doku Makas </td><td> Ekipman </td><td> George Tiemann &amp; Company </td><td> 160-150 </td></tr><tr><td> Geri çekme kası </td><td> Ekipman </td><td> Custom Made </td><td></td></tr></tbody></table>

femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements

Birden fazla çalışma alanlarında, gerekli laboratuvar çalışmalarında dolaşım sistemine erişim. Farmakolojik çalışmalar sıçanlarda kronik implante edilen kateterler kullanılarak etkili bir araştırmacı izni ve insanca maddeler yönetmek, tekrarlanan kan örnekleme yapmak ve bilinçli doğrudan kan basıncı ve kalp hızı ölçümleri yardımcı olur. Sonra kateter yerleştirilir uzun vadeli örnekleme mümkündür. Açıklığı ve kateter ömrü kilit kullanılan çözüm, kızarma rejimi ve kateter malzemesi de dahil olmak üzere birçok faktöre bağlıdır. Bu video sıçan femoral arter ve venöz kateterizasyon yöntemi gösterecektir. Buna ek olarak video, femoral ven ve arteriyel kan örneklemesi, ilaç ve bilinçli bir serbestçe hareket eden sıçan kan basıncı ve kalp hızı ölçümleri alarak arteriyel kateter kullanımı için kateterler kullanımını göstermek. Dönebilen bir sisteme bağlı bir halata ve koşum takımı, hayvan ho olmasını sağlayacaktırhayvan minimal bozulma ile araştırmacı tarafından kullanılan ve örnekler almış. Kateter açıklığını korumak için, kateter dikkatli günlük bakım potansiyel kontaminasyonu en aza indirmek için kilit çözüm (100 U / ml heparinize salin), makine zemin künt uçlu şırınga iğneleri ve şırınga filtreleri kullanmak gereklidir. Dikkatli cerrahi aseptik teknikler, uygun kateter malzemeleri ve dikkatli bir kateter bakım teknikleri sayesinde, uzun süre (birkaç hafta) için patent kateterler ve sağlıklı hayvanlar sürdürmek mümkün.

Watch this Scientific Journal Video about Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements at JoVE.com

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Sıçanlarda kan damarlarının Kronik kateterizasyon sık sık bir süre üzerinden veya direkt bilinçli bir kan basıncı ölçümü için kan örneği almak, maddelerin yönetimi için gereklidir. Sıçan ve ilgili bilinçli hayvan kan basıncı ölçümleri Femoral arteriyel kateterizasyon gösterilmelidir.

Kan Örnekleme, İlaç İdaresi ve Bilinçli Kan Basıncı ve Nabız ölçümleri Femoral Arter ve Venöz Kateterizasyon

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

femoral-arterial-venous-catheterization-for-blood-sampling-drug

Research

JoVE Journal

Medicine

123.9K Görüntüleme.  Michigan State University. Sıçanlarda kan damarlarının Kronik kateterizasyon sık sık bir süre üzerinden veya direkt bilinçli bir kan basıncı ölçümü için kan örneği almak, maddelerin yönetimi için gereklidir. Sıçan ve ilgili bilinçli hayvan kan basıncı ölçümleri Femoral arteriyel kateterizasyon gösterilmelidir.

Video: Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

Catheterization of the Carotid Artery and Jugular Vein to Perform Hemodynamic Measures, Infusions and Blood Sampling in a Conscious Rat Model

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. Intra-tracheal inoculation of a known amount of bacteria has been successfully used to reproduce the pathogenesis of pneumonia which then develops into sepsis. Monitoring hemodynamic parameters and providing standard clinical treatment including infusion of antibiotics, fluids and drugs to maintain blood pressure is critical to simulate routine supportive care in this model but to do so requires both arterial and venous vascular access. The video details the surgical technique for implanting carotid artery and common jugular vein catheters in an anesthetized rat. Following a 72 hr recovery period, the animals will be re-anesthetized and connected to a tether and swivel setup attached to the rodent housing which connects the implanted catheters to the hemodynamic monitoring system. This setup allows free movement of the rat during the study while continuously monitoring pressures, infusing fluids and drugs (antibiotics, vasopressors) and performing blood sampling.

Vascular accesses to measure hemodynamics, provide fluids and perform blood sampling are important to any small animal model study. We present a technique for implanting catheters into the carotid artery and the common jugular vein in an anesthetized rat for connecting to a system to perform monitoring, infusions and sampling.

Karotis Arter ve Ven Juguler kateterizasyon bir Bilinçli Rat Modelinde, İnfüzyonları ve Kan Örnekleme hemodinamik Tedbirleri Gerçekleştirme

The success of a small animal model to study critical illness is, in part, dependent on the ability of the model to simulate the human condition. ...

Tıp

Quantification of the Immunosuppressant Tacrolimus on Dried Blood Spots Using LC-MS/MS

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United States. Tacrolimus is a narrow therapeutic index drug and as such requires therapeutic drug monitoring and dose adjustment based on its whole blood trough concentrations. To facilitate home therapeutic drug and adherence monitoring, the collection of dried blood spots is an attractive concept. After a finger stick, the patient collects a blood drop on filter paper at home. After the blood is dried, it is mailed to the analytical laboratory where tacrolimus is quantified using high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) in combination with a simple manual protein precipitation step and online column extraction.
For tacrolimus analysis, a 6-mm disc is punched from the saturated center of the blood spot. The blood spot is homogenized using a bullet blender and then proteins are precipitated with methanol/0.2 M ZnSO4 containing the internal standard D2,13C-tacrolimus. After vortexing and centrifugation, 100 &#181;l of supernatant is injected into an online extraction column and washed with 5 ml/min of 0.1 formic acid/acetonitrile (7:3, v:v) for 1 min. Hereafter, the switching valve is activated and the analytes are back-flushed onto the analytical column (and separated using a 0.1% formic acid/acetonitrile gradient). Tacrolimus is quantified in the positive multi reaction mode (MRM) using a tandem mass spectrometer.
The assay is linear from 1 to 50 ng/ml. Inter-assay variability (3.6%-6.1%) and accuracy (91.7%-101.6%) as assessed over 20 days meet acceptance criteria. Average extraction recovery is 95.5%. There are no relevant carry-over, matrix interferences and matrix effects. Tacrolimus is stable in dried blood spots at RT and at +4 &#176;C for 1 week. Extracted samples in the autosampler are stable at +4 &#176;C for at least 72 hr.

Here we describe a high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (HPLC-MS/MS) assay to quantify the immunosuppressant tacrolimus in dried blood spots using a simple manual protein precipitation step and online column extraction.

LC-MS / MS kullanarak Kurutulmuş Kan Spotlar Immünosupresan Tacrolimus Niceleme

The calcineurin inhibitor tacrolimus is the cornerstone of most immunosuppressive treatment protocols after solid organ transplantation in the United ...

Apical Resection Mouse Model to Study Early Mammalian Heart Regeneration

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring cardiomyocytes lost due to injury and disease. In contrast to the robust cardiac regeneration of certain lower vertebrates, adult mammalian hearts typically show minimal capacity for heart regeneration and repair. However, recent studies have sparked considerable scientific interest with the finding that, between postnatal day 1 to 7 (P1 to P7), the neonatal mouse heart retains significant regenerative potential after apical resection (i.e., surgical amputation and exposure of left ventricular apex). One major controversy over this finding might be due to the diverse surgery-related procedures used in efforts to replicate or expand upon this important finding. These instructions dynamically present the materials and methodology for apical resection in a mouse model. The salient steps of this rodent survival surgery involve hypothermia anesthesia, thoracotomy, surgical amputation of heart ventricular apex, and suture and recovery of mice. The approach described could expand the application of the apical resection mouse model for cardiovascular research.

A step-by-step video protocol of apical resection is demonstrated in this study. Apical resection is a recently highlighted surgical approach in mammalian heart regeneration research. This study may promote the application of apical resection as a standard methodology in research into the mechanism underlying heart regeneration.

Apikal Rezeksiyon Fare Modeli Erken Memeli Kalp Rejenerasyon Eğitim

Cardiovascular disease plagues the whole world due to intensive lifestyle changes. Heart regeneration holds great promise for repairing and restoring ...

Novel Approach for Simultaneous Recording of Renal Sympathetic Nerve Activity and Blood Pressure with Intravenous Infusion in Conscious, Unrestrained Mice.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity (RSNA) is of great interest in many areas of research such as chronic kidney disease, hypertension, heart failure, diabetes and obesity. Unequivocal assessment of the role of the sympathetic nervous system is thus imperative for proper interpretation of experimental results and understanding of disease processes. RSNA has been traditionally measured in anesthetized rodents, including mice. However, mice usually exhibit very low systemic blood pressure and hemodynamic instability for several hours during anesthesia and surgery. Meaningful interpretation of RSNA is confounded by this non-physiological state, given the intimate relationship between sympathetic nervous tone and cardiovascular status. To address this limitation of traditional approaches, we developed a new method for measuring RSNA in conscious, freely-moving mice. Mice were chronically instrumented with radio-telemeters for continuous monitoring of blood pressure as well as a jugular venous infusion catheter and custom-designed bipolar electrode for direct recording of RSNA. Following a 48-72 hour recovery period, survival rate was 100% and all mice behaved normally. At this time-point, RSNA was successfully recorded in 80% of mice, with viable signals acquired up to 4 and 5 days post-surgery in 70% and 50% of mice, respectively. Physiological blood pressures were recorded in all mice (116&plusmn;2 mmHg; n=10). Recorded RSNA increased with eating and grooming, as well-established in the literature. Furthermore, RSNA was validated by ganglionic blockade and modulation of blood pressure with pharmacological agents. Herein, an effective and manageable method for clear recording of RSNA in conscious, freely-moving mice is described.

Anesthetized mice exhibit non-physiological systemic blood pressure, which precludes meaningful assessment of autonomic tone given the intimate relationship between blood pressure and the autonomic nervous system. Thus, a novel method to simultaneously record renal sympathetic nerve activity and blood pressure with intravenous infusion in conscious mice is outlined.

Böbrek sempatik sinir etkinliği ve kan basıncı bilinçli, intravenöz infüzyon ile aynı anda kayıt için yeni yaklaşımın kontrolsüz fareler.

Renal sympathetic nerves contribute significantly to both physiological and pathophysiological phenomena. Evaluating renal sympathetic nerve activity ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

A Chronic Cardiac Ischemia Model in Swine Using an Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but regardless of the approach, an in vivo model is needed to test each treatment. The pig is one of the most used large animal models for cardiovascular disease. Its heart is very similar in anatomy and function to that of a human. The ameroid placement technique creates an ischemic area of the heart, which has many useful applications in studying myocardial infarction. This model has been used for surgical research, pharmaceutical studies, imaging techniques, and cell therapies.
There are several ways of inducing an ischemic area in the heart. Each has its advantages and disadvantages, but the placement of an ameroid constrictor remains the most widely used technique. The main advantages to using the ameroid are its prevalence in existing research, its availability in various sizes to accommodate the anatomy and size of the vessel to be constricted, the surgery is a relatively simple procedure, and the post-operative monitoring is minimal, since there are no external devices to maintain. This paper provides a detailed overview of the proper technique for the placement of the ameroid constrictor.

The purpose of this protocol is to demonstrate the placement of a delayed constricting device (an ameroid constrictor) around a coronary artery in a swine model. This device creates an ischemic area of the heart that is useful for studying new diagnostic imaging techniques and new methods of treatment.

Bir Ameroid yılanı kullanarak domuz kronik kalp iskemi modelinde

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...

Routine Screening Method for Microparticles in Platelet Transfusions

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood banks. Cells fragment off microparticles (MP) when they are stressed. Blood and blood components may contain cellular fragments from a variety of cells, most notably from activated platelets. When performing their roles as innate immune cells and major players in coagulation and hemostasis, platelets change shape and generate microparticles. With dynamic light scattering (DLS)-based microparticle detection, it is possible to differentiate activated (high microparticle) from non-activated (low microparticle) platelets in transfusions, and optimize the use of this scarce blood product. Previous research suggests that providing non-activated platelets for prophylactic use in hematology-oncology patients could reduce their risk of becoming refractory and improve patient care. The goal of this screening method is to routinely differentiate activated from non-activated platelets. The method described here outlines the steps to be performed for routine platelet inventory management in a hospital blood bank: obtaining a sample from a platelet transfusion, loading the sample into the capillary for DLS measurement, performing the DLS test to identify microparticles, and using the reported microparticle content to identify activated platelets.

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative in hospital blood banks. The goal is to differentiate activated from non-activated platelets to optimize the use of platelets. Providing non-activated platelets to hematology-oncology patients might reduce their high risk to become refractory.

Trombosit transfüzyonları Microparticles için yöntem eleme rutin

Platelet inventory management based on screening microparticle content in platelet concentrates is a new quality improvement initiative for hospital blood ...

Absorbent Microbiopsy Sampling and RNA Extraction for Minimally Invasive, Simultaneous Blood and Skin Analysis

Conventional skin biopsy limits the clinical research that involves cosmetically sensitive areas or pediatric applications due to its invasiveness. Here, we describe the protocol for using&#160;an absorbent microneedle-based device, absorbent microbiopsy, for minimally invasive sampling of skin and blood mixture. Our goal is to help facilitate rapid progress in clinical research, the establishment of biomarkers for skin disease and reducing the risk for clinical research participants. In contrast to conventional skin biopsy techniques, the absorbent microbiopsy can be performed within seconds and does not require intensive training due to its simple design. In this report, we describe the use of absorbent microbiopsy, including loading and application, on a&#160;volunteer. Then, we show how to isolate RNA from the absorbed sample. Finally, we demonstrate the use of quantitative reverse transcription PCR (RT-qPCR) to quantify mRNA expression levels of both blood (CD3E and CD19) and skin (KRT14 and TYR). The methods that we describe utilize off the shelf kits and reagents. This protocol offers a minimally invasive approach for simultaneous sampling of skin and blood within the same absorbent microbiopsy matrix. We have found human ethics committees, clinicians and volunteers to be supportive of this approach to dermatological research.

In this article, we demonstrate how the absorbent microbiopsy technique is performed and how the sample can be used for RNA extraction for simple and simultaneous sampling of skin and blood in a minimally invasive manner.

Emici Microbiopsy örnekleme ve RNA çıkarma minimal invaziv, eşzamanlı kan ve cilt analizi için

Conventional skin biopsy limits the clinical research that involves cosmetically sensitive areas or pediatric applications due to its invasiveness. Here, ...

Simultaneous Electrocardiography Recording and Invasive Blood Pressure Measurement in Rats

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. Research focusing on cardiovascular disease models, potential cardiovascular therapeutic targets or pharmaceutical agents requires assessment of systemic arterial pressure and heart rhythm changes. In situations where radio telemetry systems are not available or affordable, the technique of femoral artery cannulation is an alternative way to obtain intra-arterial pressure waveform recordings and systemic BP measurements. This technique is economical and can be performed with standard equipment in animal facilities. However, invasive arterial pressure recording requires cannulation of small arteries, which can be a challenging surgical skill. Here, we present step-by-step protocols for femoral artery cannulation procedures. Key procedures include the calibration of the data acquisition system, tissue dissection and femoral artery cannulation, and setup of the arterial cannulation system for pressure recording. Surface electrocardiography recording procedures are also included. We also present examples of BP recordings from normotensive and hypertensive rats. This protocol allows reliable direct recordings of systemic BP with simultaneous electrocardiography.

Here, we describe a setup for simultaneous recording of electrocardiography and intra-arterial blood pressure (BP) in experimental rats, which can be done with standard equipment in animal facilities and can be applied to physiological or pharmacological studies to investigate pathogenic or therapeutic mechanisms in cardiovascular medicine.

Eşzamanlı elektrokardiyografi kayıt ve invaziv kan basınç ölçüm sıçanlarda

For studies related to cardiovascular physiology or pathophysiology, blood pressure (BP) and electrocardiography are basic observational parameters. ...

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor because of the acceleration of intimal hyperplasia due to the exposure to arterial blood pressure. The present protocol is designed for the establishment of experimental venous intimal hyperplasia by interposing rabbit jugular veins to the ipsilateral carotid arteries. The protocol does not require surgical procedures deep in the body trunk and the extent of the incision is limited, which is less invasive for the animals, allowing long-term observation after implantation. This simple procedure enables researchers to investigate strategies to attenuate the progression of intimal hyperplasia of the implanted vein grafts. Using this protocol, we reported the effects transduction of microRNA-145 (miR-145), which is known to control the phenotype of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from the proliferative to the contractile state, into harvested vein grafts. We confirmed the attenuation of intimal hyperplasia of vein grafts by transducing miR-145 before implantation surgery through the phenotype change of the VSMCs. Here we report a less invasive experimental platform to investigate the strategies that can be used to attenuate intimal hyperplasia of vein grafts in revascularization surgeries.

The present protocol aims to experimentally create venous intimal hyperplasia by subjecting veins to arterial blood pressure for developing strategies to attenuate venous intimal hyperplasia following revascularization surgery using vein grafts.

Arteriyel Kan Basıncı Altında İntimal Hiperplazi değerlendirmek için Ven Greftleri kullanarak Revaskülarizasyon Cerrahisi Taklit Bir Tavşan Venöz Interposition Modeli

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...