Bu çalışma, Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, Almanya, projeler C7 ve C6) ve IZKF Münster (Çekirdek birim SMAP) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich ve radyo-üretmek için mükemmel bir teknik yardım ve Daniel Burkert ve Sven Fatum için Roma Priebe minnettarız.

1. Donör Organ Kurtarma <ol><li> Stereotaktik mikroskop, 8-10 haftalık sıçan (verici ve alıcı vücut ağırlığı aynı olmalıdır) rekor ağırlık ayarlayın. </li><li> Donör sıçan (Lewis Brown Norveç F1, İbni F1) oksijen / izofluran inhalasyon (izofluran% 4/2 L / dk oksijen) kullanarak anestezisi. 2-2.5% için izofluran düşürerek anestezi koruyun. </li><li> Ameliyat yastığı anestezi sıçan yerleştirin. Ped üzerine yapışkan bant ile sıçan ekstremite düzeltmek ve sıçan gözleri oftalmik merhem (Bepanthen, Bayer) geçerlidir. </li><li> Tıraş ve sıçan karın dezenfekte ve pubis gelen karaciğer kaudal sınırına bir ventral orta hat kesi yapmak. Dikkatli bir şekilde sağ tarafa bağırsak hareket ettirerek sol böbrek ve damarları Açığa. Sol böbrek üzerinde gazlı bez ince bir tabaka yerleştirin ve kuruma önlemek için ısıtılmış izotonik serum fizyolojik ile nemlendirin. </li><li> Dikkatle (Dumont Açılı İpucu Forseps ile yağ dokusu incelemek Dumont SS-45 Forseps Inox Tıp, Güzel Bilim Araçları, Sip 11203-25) sol üreter saran. Üreter ile doğrudan temastan kaçının, bunun yerine, yeterli çevre yağ dokusu ile seferber. </li><li> Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak renal arter sol renal ven ayırın. Her iki gemi tüm yağ ve bağ dokusu çıkarın ve adrenal ve testis damarları dağlamak. </li><li> Sırasıyla, sol renal arter ve ven yukarıda ve kavşak altında aorta ve inferior vena kava (IVC) incelemek ve tüm giden arterler dağlamak. </li><li> Superior mezenterik arter yakın mümkün olduğunca, sol renal arter üzerinde bir mikrocerrahi kelepçe (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-04) ile böbreküstü aort Kelepçe. Cerrahi ipek kullanarak infrarenal aorta (5-0, Vömel, sanat yok. 14739) sol renal arter altında yaklaşık 5 mm Arter. </li><li> Cerrahi ipek ile infrarenal IVC (5-0, Vömel) Arter ve böbreküstü IVC kelepçebir mikrocerrahi kelepçe ile (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-03). </li><li> Ince makas (- ToughCut Düz 11.5 cm, Güzel Bilim Araçları, Sip 14058-11 Iris Makas) kullanarak mümkün olduğunca yakın IVC için renal ven kesin. </li><li> Yavaş yavaş ekleyerek 2 ml buz gibi soğuk HTK perfüzyon solüsyonu (CUSTODIOL HTK, Dr Franz Köhler Chemie) ile yerinde böbrek serpmek bir kanül (Microlance 3 27G ¾, BD, Sip 302.200) infrarenal aort. Onaylayın böbrek renk değişiklikleri (şimdi zeytin renkli). </li><li> İlk olarak, daha sonra, infrarenal aorta böbreküstü aort transect ve mümkün olduğunca yakın mesane nihayet üreter. </li><li> Buz üzerinde HTK perfüzyon çözüm üreter ve mağaza ile birlikte böbrek ve damar kaynağını çıkarın. </li><li> Vasküler kelepçeler ve anestezi altında kalbin üst üste eksizyon kaldırarak donör sıçan Euthanize. </li></ol> 2. Alıcı hazırlanması ve naklition <ol><li> Stereotaktik mikroskop, sıçan rekor ağırlık ayarlayın. </li><li> Izofluran% 4 ile alıcı sıçan (Lewis) anestezisi. 2-2.5% için izofluran düşürerek anestezi koruyun. </li><li> Ameliyat yastığı anestezi sıçan yerleştirin. Ped üzerine yapışkan bant ile sıçan ekstremite düzeltmek ve sıçan `ın Gözleri oftalmik merhem uygulayın. Bir rektal sıcaklık sensörü ve bir ısınma takımını kullanarak Monitör ve kontrol çekirdek vücut sıcaklığı. Ameliyat sırasında tekrar tekrar sıcaklık, solunum ve hayvanın kalp hızı kontrol. </li><li> Tıraş ve karın dezenfekte ve pubis gelen karaciğer kaudal sınırına bir ventral orta hat kesi yapmak. Deri travma en aza indirmek için bir neşter forcutting deri kullanın. Sağ tarafa bağırsak hareket ettirerek sol böbrek ve damarları Açığa. </li><li> Dikkatle Dumont Açılı İpucu forseps ve pamuklu kullanarak böbrek kapsülü kaldırın. </li><li> Böbrek yakın sol renal arter, ven ve üreter tıkamakcerrahi iplik (4-0 Mersilen, Ethicon, kedi. yok. EH6732H) kullanarak iki ligasyonu ile hilusu. Sadece böbrek hilusu bırakarak böbrek tüketim büyük bir kısmı,. Pamuklu çubukla kesim yüzeyi temiz ve kanama kontrol edin. Gerekirse başka bir bağ ekleyin. </li><li> Dikkatlice pamuklu çubukla kuyruk sitede infrarenal aorta ve vena kava kapsayan bağ dokusu ile açık açık incelemek. </li><li> Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak infrarenal aorta ve vena kava herhangi bir görünür sinir ayırın. </li><li> İlk testis damarlarının dallanma altında ve ortak iliak damarların dallanma Yukarıdaki ikinci bir: dikkatlice iki 2-4 mm uzunlukta açıklıklar oluşturan, infrarenal aort ve vena kava arasındaki bağ dokusu sayfası aracılığıyla incelemek. Arasında iliolumbar arter ve venler dağlamak. </li><li> Iki açıklık her ile, tek bir cerrahi iplik (Ethicon, kedi no.EH6665E. Mersilen 0) çizin. Bu konuları infrarenal çekin kullanmahafifçe dorsal sitede dallanma gemilere erişmek için hayvanın sağ tarafına aort ve vena kava. Iki açıklık arasında bu kapların her yakmak ve daha sonra cerrahi konuları çıkarın. </li><li> Daha sonra, aort ile üst açılışında başlayan ve üst açılış (Mikro Serrefines de vena kava ile biten dört mikrocerrahi kelepçeleri (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-04) saat yönünde uygulama tarafından aorta ve IVC tıkamak , Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-03). </li><li> Daha sonra dikkatli bir şekilde delmek bir iğne ile aort izole kısmının üst biten (Microlance 3 27G ¾, BD, Sip 302.200), ince bir yay makas (Vannas Bahar Makas alt bıçak takın - 3 mm Bıçak, Güzel Bilim delinme açıklıktan Araçları, cat.no 15000-00) ve kısa boyuna kesi yapmak. Herhangi bir geri kalan kan kaldırmak için buz soğukluğunda HTK perfüzyon çözeltisi ile izole aort yıkayın. </li><li> Aynı şekilde, dikkatli bir şekilde delmekbir iğne ile vena kava izole kısmının alt biten, delinme açıklıktan ince bir bahar makas alt bıçak yerleştirin ve kısa bir süre aort kesi altında biten uzunlamasına bir kesi yapmak. Yine, kalan kan kaldırmak için gemi yıkayın. </li><li> Depolama çözümü gelen böbrek greft çıkarın. Sol böbrek eski konumunu altına yerleştirin ve doğru yönde olduğundan emin olun. </li><li> Greft renal arter yönünü kontrol edin ve herhangi bir bükülme olmadığından emin olmak. Daha sonra greft üzerine gazlı bez ince bir sayfa koyun ve soğumaya buz HTK perfüzyon çözümü ile nemlendirin ve kuruma önlemek için. </li><li> Üst ilk önce, daha sonra alt ucunda - greft renal arter cerrahi iplik (.. Ethilon 9-0, Ethicon, kedi hiçbir 2809G) ile içine açıldığı aort parçasının suprarenal kısmının açılması sabitleştirmek aort insizyon yapıldı. Cerrahi iplik kullanarak sürekli bir dikiş ile saat yönünde kesi kapatın(Ethilon 9-0), Dumont Açılı İpucu forseps ve kavisli bir Castroviejo iğne tutucu (Güzel Bilim Araçları, kedi. Yok. 12061-01). Daha sonra, bir saatin ikinci sürekli dikiş ile bağ dokusu ile ilk dikiş kapsamaktadır. Şimdi, greft aort parçasının sadece alt kısmı kapalı kalır. Düzenli buz HTK perfüzyon çözeltisi ile greft serin. </li><li> Dikiş sızdırmazlık ve bütünlüğünü doğrulamak yanı sıra, greft kalan kan kaldırma aort greft parçasının açık olan ucuna takılan, kör bir iğne ile buz soğukluğunda HTK perfüzyon çözeltisi 1 ml greft serpmek. Daha sonra, cerrahi ipek ile aort parçası (5-0, Vömel) açık olan ucuna ligate. </li><li> Greft renal ven yönünü kontrol edin ve herhangi bir bükülme olmadığından emin olmak. </li><li> Vena kava de kesi alt ucunda sonra, üst birinci - cerrahi diş (Ethilon 9-0) ile greft damarın açılması sabitleşmek. Kesi kapatıncerrahi iplik (Ethilon 9-0), Dumont Açılı İpucu forseps ve kavisli bir Castroviejo iğne tutucu kullanarak sürekli bir dikiş ile saat yönünde. Düzenli buz HTK perfüzyon çözeltisi ile greft serin. </li><li> En üst vena kava kelepçe ile başlayan, mikrocerrahi kelepçeleri sökün tersine. Son aort kelepçe çıkardıktan sonra, dikkatlice pamuklu çubukla sonunda hafif kanamayı durdurmak. Birkaç saniye sonra greft pembe renkli dönecek ve uretric kasılmaları görünmelidir. </li><li> Alıcı `nın mesane içine greft üreter ekleme dikkatli bir Vannas Bahar Makas (Öğrenci Vannas Bahar Makas düz, Güzel Bilim Araçları, Sip 91500-09 kullanarak mesane üstündeki kas küçük bir düzeltme ekini kaldırmak için .) Daha sonra, Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak greft üreter çevreleyen doku (çoğunlukla yağ) çıkarın. Bu nedenle, dikkatle üreter ucu kapmak ve yavaşça çevreleyen yağ, bağ dokusu ayrı ve gömülü gemileri sağa solaters yönde çekerek bunu m. Bir cerrahi iplik (Prolen 6-0, Ethicon, kedi. Yok. 8697H) sonunda uretric ucu sabitleşmek ve ekli iğne ile mesane önceden hazırlanmış üst perfore. Mesane ile üreter çekin ve ikinci bir perforasyon ile tabanında bunu çıkın. </li><li> Cerrahi iplik (Ethilon 9-0) ile mesane üstündeki doku ayrılmış üreter gelen daha önce sabitleşmek. Ekli cerrahi iplik ile üreter ucu kesilmiş ve hafifçe aşağıdan iterek mesane içine geri üreter çekin. Daha sonra, cerrahi iplik (Ethilon 9-0) ile ikinci mesane delinme kapatın. </li><li> Cerrahi dikiş ipliğinin (Mersilen 0) kullanarak iki sürekli ama ayrı dikişlerle karın duvarı ve cilt kapatın. Pividon İyot kullanarak yara dezenfekte ve yara ağrı kontrolü için ameliyat sonrası üç gün buprenorfin (kg / BW / teklif başına 0.1 mg) sc yönetmek. </li></ol> 3. Görüntüleme Allogreft Reddetme<ol><li> Izofluran 2-2.5% kullanarak Tokluk sıçan anestezisi. </li><li> 30 MBq FDG (0.1 ila 30 MBq FDG ml% 0.9 NaCl), bir 24 G kateter (Braun, Introcan, 4.252.500-01) kullanılarak, yanal kuyruk damarı yoluyla kateterizasyonu IV tatbik edilir. Daha sonra, 0.9 ml% 0.9 NaCl çözeltisi ile kateter tasfiye. </li><li> Saatte% 0.9 NaCl çözeltisi, 1 ml IV enjeksiyonu ile tarama ve hidrat da hayvan başlangıcına kadar anestezi olmadan bir süzgeç, sıçan bırakın. </li><li> Tarama başlamadan önce hemen izofluran% 2 kullanılarak yeniden anestezisi sıçan. </li><li> Yüksek çözünürlükte anestezi sıçan yerleştirin çok telli oda-tabanlı hayvan PET kamera quadHIDAC (Oxford Pozitron Systems Ltd, Oxford, UK). PET tarayıcı uzaysal çözünürlüğü 1,0 mm ve tüm FOV (çap, 165 mm; aksiyel uzunluk, 280 mm) üzerinde sabittir. Bir pulse oksimetre ile bir rektal sıcaklık sensörü ve kontrol anestezi kullanarak tarama sırasında Monitör ve kontrol vücut ısısı. </li><li> 60 m için dinamik satın alma başlayınFDG böbrek atılımı nedeniyle böbreklerde izleyici birikimini azaltmak için FDG-enjeksiyon sonrası 180 dakika başlangıç. </li><li> Renal parankim belirlenmesi için ve 18 F-boşluk 5 hesaplanması için tarayıcı içinde sıçan konumunu taşımadan 18 F-florür iv 5 MBq uygulayın ve 60 dakika hemen sonra 18 F-florür enjeksiyon başka bir PET taraması gerçekleştirin. Her iki tarama görüntüleri yeniden. 2 dakika böbrek korteks yaklaşık 18 F-florür enjeksiyon (perfüzyon-faz) sonra yeniden görüntülerde elle ilgi hacmi (VOI) iz ve FDG görüntülere VOI aktarın. Dikkatlice VOI gelen renal pelvis dahil değildir. Her iki tarama görüntüleri yeniden ve elle böbrek korteks çevresinde ilgi bir hacim (VOI) iz. Listesi mod veri 0.4 × 0.4 × 0.4 mm 3 bir voksel boyutu ile görüntü içine yeniden inşa edildi. Dikkatlice VOI gelen renal pelvis dahil değildir. </li><li> Oranı o tarafından FDG tutulumu hesaplamakf toplam sayısı ve hacmi ve enjekte doz (% ID) yüzdesini hesaplar. Biz görüntü analizi için MATLAB (Sürüm R2011b, MathWorks, Natick, MA, ABD) ve tomografik görüntüleme (TİM) Sürüm 2.8 kullanılır. </li></ol>

<ol>
	<li>Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+and+chronic+nephropathy:+a+systematic+review+of+the+literature.">Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature.</a> Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).</li><li>Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+in+the+rat.">Kidney transplantation in the rat.</a> Nature. 194, 309-310 (1962).</li><li>Reuter, S., Schn&#246;ckel, U., Schr&#246;ter, R., Schober, O., Pavenst&#228;dt, H., Sch&#228;fers, M., Gabri&#235;ls, G., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-invasive+imaging+of+acute+renal+allograft+rejection+in+rats+using+small+animal+F-FDG-PET.">Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET.</a> PLoS. One. 4, e5296 (2009).</li><li>Reuter, S., Schn&#246;ckel, U., Edemir, B., Schr&#246;ter, R., Kentrup, D., Pavenst&#228;dt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabri&#235;ls, G., Sch&#228;fers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+of+noninvasive+serial+assessment+of+acute+renal+allograft+rejection+by+18F-FDG+PET+to+monitor+treatment+efficiency.">Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency.</a> J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).</li><li>Schn&#246;ckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Sch&#228;fers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabri&#235;ls, G., Sch&#228;fers, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+18F-fluoride+small+animal+PET+to+noninvasively+assess+renal+function+in+rats.">Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats.</a> Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).</li><li>Grabner, A., Schn&#246;ckel, U., Kentrup, D., Sch&#228;fers, M., Reuter, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+Non-Invasive+Molecular+Imaging+of+Acute+Allograft+Rejection+by+Gamma+Scintigraphy+and+Positron+Emission+Tomography.">Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography.</a> Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).</li><li>Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Banff+97+working+classification+of+renal+allograft+pathology.">The Banff 97 working classification of renal allograft pathology.</a> Kidney Int. 55, 713-723 (1999).</li><li>Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schr&#246;ter, R., Neugebauer, U., Gabri&#235;ls, G., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+modulates+gene+expression+in+the+collecting+duct.">Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).</li><li>Velic, A., Gabri&#235;ls, G., Hirsch, J. R., Schr&#246;ter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+rejection+after+rat+renal+transplantation+leads+to+downregulation+of+Na++and+water+channels+in+the+collecting+duct.">Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct.</a> Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).</li><li>Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schr&#246;ter, R., Pavenst&#228;dt, H., Gabri&#235;ls, G., Bleich, M., Schlatter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+role+of+NHE-3+inhibition+in+rat+renal+transplantation+undergoing+acute+rejection.">Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection.</a> Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

FDG-PET görüntüleme akut rejeksiyon tanısı için yeni bir seçenektir. Nedeniyle non-invaziv ve özel doğa, FDG-PET iğne biyopsisi ile klasik teşhis göre avantajları. Biyopsi, FDG-PET analizi tüm greft sınırlı örneklem büyüklüğü aksine. Ayrıca, bir antikoagülan tedavisi hastalara uygulayabilirsiniz, ve bir tekrar tekrar tedavi etkinliği 4 izlemek için örneğin PET önlemler gerçekleştirebilirsiniz. Buna ek olarak, biz zaten AR, iskemi reperfüzyon hasarı ve akut kalsinöri...

<table><tbody><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Equipment&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Mathieu Needle Holder - 14 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>12010-14</td><td></td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>12061-01</td><td></td></tr><tr><td>Surgical Scissors - Sharp_Blunt</td><td>Fine Science Tools</td><td>14001-12</td><td></td></tr><tr><td>Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>Student Vannas Spring Scissors </td><td>Fine Science Tools</td><td>91500-09</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-00</td><td></td></tr><tr><td>Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm</td><td>Fine Science Tools</td><td>91121-12</td><td></td></tr><tr><td>Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical</td><td>Fine Science Tools</td><td>11203-25</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock</td><td>Fine Science Tools</td><td>18056-14</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-03</td><td></td></tr><tr><td>Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm</td><td>Fine Science Tools</td><td>18055-04</td><td></td></tr><tr><td colspan="4">&lt;strong&gt;Reagent&lt;/strong&gt;</td></tr><tr><td>Isoflurane (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Forene 100% v/v)</td><td>Abott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>cutane antiseptic (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Octeniderm) </td><td>Sch&amp;#252;lke</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Povidone Iodine (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Betaisodona)</td><td>Mundipharma</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ophthalmic ointment (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Bepanthen)</td><td>Bayer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Temgesic)</td><td>RB Pharmaceuticals</td><td></td><td></td></tr><tr><td>HTK perfusion solution (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; CUSTODIOL HTK)</td><td>Dr. Franz K&amp;#246;hler Chemie</td><td></td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Mersilene 0</td><td>Ethicon</td><td>EH6665E</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Mersilene 4-0</td><td>Ethicon</td><td>EH6732H</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Prolene 6-0</td><td>Ethicon</td><td>8697H</td><td></td></tr><tr><td>surgical thread Ethilon 9-0</td><td>Ethicon</td><td>2809G</td><td></td></tr><tr><td>surgical silk 5-0</td><td>V&amp;#246;mel</td><td>14739</td><td></td></tr><tr><td>Canula (&lt;em&gt;e.g.&lt;/em&gt; Microlance 3, 27G &amp;#190;)</td><td>BD</td><td>302200</td><td></td></tr></tbody></table>

non-invasive imaging of acute allograft rejection after rat renal transplantation using 18f-fdg pet

Son dönem böbrek hastalığı olan hasta sayısı ve böbrek allogreft alıcı sayısı sürekli artmaktadır. Akut hücresel allogreft rejeksiyon (AR) atakları uzun süreli allogreft hayatta kalmak için olumsuz bir prognostik faktördür, ve zamanında tanı allogreft fonksiyonu 1 için çok önemlidir. Şu anda, AR sadece kesinlikle invaziv bir yöntem olarak, greft yaralanmaya ve hatta kaybı önemli bir risk bares, çekirdek iğne biyopsisi ile teşhis edilebilir. Ayrıca, biyopsi AR odak veya yamalı ise yanlış negatif sonuçlar neden olabilir antikoagülan ilaçlar ve bu tekniğin sınırlı örnekleme sitesi alan hastalarda mümkün değildir. Bunun bir sonucu olarak, bu genellikle çeşitli nakil modellerin kullanımı da dahil olmak üzere hayvanlarda yapılması gereken yeni AR tespit yöntemleri için süregelen bir araştırma yol açtı. 60&#39;lı sıçan böbrek nakli Examin için köklü bir deneysel yöntem olduğu içinAR 2 tirme ve analizi. Ayrıca küçük hayvan pozitron emisyon tomografisi (PET) allojenik uninephrectomized sıçan böbrek nakli modelinde AR değerlendirmek ve bir non-invaziv, özel için yeni bir seçenek olarak greft FDG-PET görüntüleme teklif 18 F-florodeoksiglukoz (FDG) kullanarak Biz burada mevcut insan durum 3 için de AR ve erken tanı. Ayrıca, bu yöntem, transplant reddi 4 ölçümünün düzeltilmesi için takibi için uygulanabilir.

Histoloji Ret şiddeti inflamasyon derecesi ile yansıtılır ise AR lökosit sırasında, yani özellikle T-lenfositler, nakli içine alınırlar. Burada tasvir Periyodik Asit-Schiff (PAS) boyama (Şekil 1), renal allogreft AR, yani glomerülit, tübülit saptandı, endothelialitis ve greft infiltrasyon (Şekil 1, atx POD4) (POD = günde) önemli histolojik belirtileri gösterir ret belirtileri yerli kontrolü böbrek (Şekil 1, TO) d...

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET at JoVE.com

Sıçan Böbrek Transplantasyonu Sonrası Akut Allogreft Reddinin 18F-FDG PET Kullanılarak İnvaziv Olmayan Görüntülenmesi | Tıp | Video

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Biz burada non-invaziv 18F-florodeoksiglukoz ile pozitron emisyon tomografisi kullanılarak akut allogreft reddi değerlendirmek için bir sıçan böbrek nakli modeli sunuyoruz.

Sıçan Böbrek Nakli sonra Akut Allogreft Reddi non-invaziv Görüntüleme Kullanımı<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG PET

The number of patients with end-stage renal  disease, and the number of kidney allograft recipients continuously increases.  Episodes of acute cellular ...

non-invasive-imaging-acute-allograft-rejection-after-rat-renal

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Medicine

Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Human Biology

Osmoregulation and Excretion

SCIENTISTS IN ACTION

16.9K Görüntüleme.  University of Münster. Biz burada non-invaziv 18F-florodeoksiglukoz ile pozitron emisyon tomografisi kullanılarak akut allogreft reddi değerlendirmek için bir sıçan böbrek nakli modeli sunuyoruz.

Video: Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET

Machine Learning Algorithms for Early Detection of Bone Metastases in an Experimental Rat Model

Machine learning (ML) algorithms permit the integration of different features into a model to perform classification or regression tasks with an accuracy exceeding its constituents. This protocol describes the development of an ML algorithm to predict the growth of breast cancer bone macrometastases in a rat model before any abnormalities are observable with standard imaging methods. Such an algorithm can facilitate the detection of early metastatic disease (i.e., micrometastasis) that is regularly missed during staging examinations.
The applied metastasis model is site-specific, meaning that the rats develop metastases exclusively in their right hind leg. The model&#8217;s tumor-take rate is 60%&#8211;80%, with macrometastases becoming visible in magnetic resonance imaging (MRI) and positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) in a subset of animals 30 days after induction, whereas a second subset of animals exhibit no tumor growth.
Starting from image examinations acquired at an earlier time point, this protocol describes the extraction of features that indicate tissue vascularization detected by MRI, glucose metabolism by PET/CT, and the subsequent determination of the most relevant features for the prediction of macrometastatic disease. These features are then fed into a model-averaged neural network (avNNet) to classify the animals into one of two groups: one that will develop metastases and the other that will not develop any tumors. The protocol also describes the calculation of standard diagnostic parameters, such as overall accuracy, sensitivity, specificity, negative/positive predictive values, likelihood ratios, and the development of a receiver operating characteristic. An advantage of the proposed protocol is its flexibility, as it can be easily adapted to train a plethora of different ML algorithms with adjustable combinations of an unlimited number of features. Moreover, it can be used to analyze different problems in oncology, infection, and inflammation.

This protocol was designed to train a machine learning algorithm to use a combination of imaging parameters derived from magnetic resonance imaging (MRI) and positron emission tomography/computed tomography (PET/CT) in a rat model of breast cancer bone metastases to detect early metastatic disease and predict subsequent progression to macrometastases.

Deneysel Bir Sıçan Modelinde Kemik Metastazlarının Erken Teşhisi İçin Makine Öğrenme Algoritmaları

Machine learning (ML) algorithms permit the integration of different features into a model to perform classification or regression tasks with an accuracy ...

Kanser Araştırmaları

Non-Invasive PET/MR Imaging in an Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and evaluate novel therapeutic approaches. Non-invasive whole-body imaging using positron emission tomography (PET) provides critical insights into the in vivo characteristics of tissues at the molecular level in real-time. We present here a protocol for orthotopic HCC xenograft creation with and without hepatic artery ligation (HAL) to induce tumor hypoxia and the assessment of their tumor metabolism in vivo using [18F]Fluoromisonidazole ([18F]FMISO) and [18F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG) PET/magnetic resonance (MR) imaging. Tumor hypoxia could be readily visualized using the hypoxia marker [18F]FMISO, and it was found that the [18F]FMISO uptake was higher in HCC mice that underwent HAL than in the non-HAL group, whereas [18F]FDG could not distinguish tumor hypoxia between the two groups. HAL tumors also displayed a higher level of hypoxia-inducible factor (HIF)-1&#945; expression in response to hypoxia. Quantification of HAL tumors showed a 2.3-fold increase in [18F]FMISO uptake based on the standardized value uptake (SUV) approach.

Here, we present a protocol to create orthotopic hepatocellular carcinoma xenografts with and without hepatic artery ligation and perform non-invasive positron emission tomography (PET) imaging of tumor hypoxia using [18F]Fluoromisonidazole ([18F]FMISO) and [18F]Fluorodeoxyglucose ([18F]FDG).

Hepatosellüler Karsinomun Ortotopik Fare Modelinde Non-İnvaziv PET/MR Görüntüleme

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and ...

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to return to normal in a large majority of patients2, which is mainly due to current lack of clinical treatment for acute stroke. This necessitates understanding the physiological effects of cerebral ischemia on brain tissue over time and is a major area of active research. Towards this end, experimental progress has been made using rats as a preclinical model for stroke, particularly, using non-invasive methods such as 18F-fluorodeoxyglucose (FDG) coupled with Positron Emission Tomography (PET) imaging3,10,17. Here we present a strategy for inducing cerebral ischemia in rats by middle cerebral artery occlusion (MCAO) that mimics focal cerebral ischemia in humans, and imaging its effects over 24 hr using FDG-PET coupled with X-ray computed tomography (CT) with an Albira PET-CT instrument. A VOI template atlas was subsequently fused to the cerebral rat data to enable a unbiased analysis of the brain and its sub-regions4. In addition, a method for 3D visualization of the FDG-PET-CT time course is presented. In summary, we present a detailed protocol for initiating, quantifying, and visualizing an induced ischemic stroke event in a living Sprague-Dawley rat in three dimensions using FDG-PET.

Non-invasive Imaging and Analysis of Cerebral Ischemia in Living Rats Using Positron Emission Tomography with 18F-FDG

Brain damage resulting from cerebral ischemia may be non-invasively imaged and studied in rats using pre-clinical positron emission tomography coupled with the injectable radioactive probe, 18F-fluorodeoxyglucose. Further, the use of modern software tools that include volume of interest (VOI) brain templates dramatically increase the quantitative information gleaned from these studies.

Pozitron Emisyon Tomografi ile kullanma Non-invaziv Görüntüleme ve Serebral iskemi Analizi Yaşam Sıçanlarda<sup&gt; 18</sup&gt; F-FDG

Stroke is the third leading cause of death among Americans 65 years of age or older1. The quality of life for patients who suffer from a stroke fails to ...

Tıp

Mouse Kidney Transplantation: Models of Allograft Rejection

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely replicates both the technical and pathological processes that occur in human renal transplantation. Although mouse models of allogeneic rejection in organs other than the kidney exist, and are more technically feasible, there is evidence that different organs elicit disparate rejection modes and dynamics, for instance the time course of rejection in cardiac and renal allograft differs significantly in certain strain combinations. This model is an attractive tool for many reasons despite its technical challenges. As inbred mouse strain haplotypes are well characterized it is possible to choose donor and recipient combinations to model acute allograft rejection by transplanting across MHC class I and II loci. Conversely by transplanting between strains with similar haplotypes a chronic process can be elicited were the allograft kidney develops interstitial fibrosis and tubular atrophy. We have modified the surgical technique to reduce operating time and improve ease of surgery, however a learning curve still needs to be overcome in order to faithfully replicate the model. This study will provide key points in the surgical procedure and aid the process of establishing this technique.

Here, we present a protocol to study the immunology of rejection. The surgical model presented reports a short operating time and a concise technique. Depending on the donor-recipient strain combination, the transplanted kidney may develop acute cellular rejection or chronic allograft damage, defined by interstitial fibrosis and tubular atrophy.

Fare Böbrek Transplantasyonu: Allogreft Reddi Modelleri

Rejection of the transplanted kidney in humans is still a major cause of morbidity and mortality. The mouse model of renal transplantation closely ...

Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate (RGD)-peptide for Angiogenesis

The &#945;v&#946;3 integrin is a heterodimeric adhesion molecule involved in tumor cell migration and angiogenesis. The integrin is overexpressed in angiogenic tumor endothelial cells, where it typically has a low concentration. This specific expression of &#945;v&#946;3 makes it a valid biomarker for antiangiogenic and imaging drugs. As a functional imaging modality, positron emission tomography (PET) provides information about biochemical and physiological changes in vivo, due to its unique high sensitivity at the nanomolar scale. Hence, radiometal-based PET radiopharmaceuticals have received great attention for the non-invasive quantification of tumor angiogenesis. This paper provides a systemic protocol to prepare a new radiometal-labeled peptide for the evaluation of angiogenesis. This protocol contains information about radiochemical reliability, lipophilicity, cell uptake, serum stability, and pharmacokinetic properties. The 68Ga-RGD-peptide is one of the representative PET ligands toward &#945;v&#946;3 integrin. Here, we introduce a protocol to prepare a 68Ga-RGD-peptide and the evaluation of its biological efficacy.

Preparing a 68Ga-labeled Arginine Glycine Aspartate RGD-peptide for Angiogenesis

The &#945;v&#946;3 integrin is a type of adhesion protein that is highly expressed on activated endothelial cells undergoing angiogenesis. Thus, evaluating the integrity of the integrin is of great interest in oncology. Here, we introduce a method to prepare 68Ga-labeled radiopeptides and a method to assess its biological effectiveness.

68Ga etiketli arginin glisin aspartat (RGD) hazırlama-peptid angiogenez için

The &#945;v&#946;3 integrin is a heterodimeric adhesion molecule involved in tumor cell migration and angiogenesis. The integrin is overexpressed in ...

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of renal replacement therapy. Over the past few decades, the rat kidney transplantation model has been used to study the immunological phenomena of rejection and tolerance. This model has become an indispensable tool to test new immunomodulatory pharmaceuticals and regimens prior to proceeding with expensive preclinical large animal studies.
This protocol provides a detailed overview of how to reliably perform orthotopic kidney transplantation in rats. This protocol includes three distinctive steps that increase the probability of success: perfusion of the donor kidney by flushing through the portal vein and the use of a cuff system to anastomose the renal veins and ureters, thereby decreasing cold and warm ischemia times. Using this technique, we have achieved survival rates beyond 6 months with normal serum creatinine in animals with syngeneic or tolerant kidney transplants. Depending on the aim of the study, this model can be modified by pre- or posttransplant treatments to study the acute, chronic, cellular, or antibody-mediated rejection. It is a reproducible, reliable, and cost-effective animal model to study different aspects of kidney transplantation.

The purpose of this manuscript and protocol is to explain and demonstrate in detail the surgical procedure of orthotopic kidney transplantation in rats. This method is simplified to achieve the correct perfusion of the donor kidney and shorten the reperfusion time by using the venous and ureteral cuff anastomosis technique.

Ortootopik Rat böbrek nakli: bir roman ve Basitleştirilmiş cerrahi yaklaşım

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

A Rat Orthotopic Renal Transplantation Model for Renal Allograft Rejection

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential model to investigate the mechanism of renal allograft rejection in pre-clinical studies and could aid in the development of novel approaches to improve the long-term survival of renal allografts. Donor kidney implantation in rat orthotopic renal transplantation is commonly performed by end-to-side anastomosis to recipients' aorta and inferior vena cava. In this model, the donor's kidney was implanted using end-to-end anastomosis to the recipients' renal artery and renal vein. The donor's ureter was anastomosed to the recipient's bladder in an end-to-side 'tunnel' method. This model contributes to better healing of ureter-bladder anastomosis and increases the recipients' survival by avoiding interference with blood supply and venous reflux of the lower body. This model can be used to investigate the mechanisms of acute and chronic immune and pathologic rejection of renal allografts. Here, the study describes the detailed protocols of this orthotopic renal transplantation between rats.

The rat orthotopic renal transplantation model contributes to investigating the mechanism of renal allograft rejection. The current model increases the recipients' survival without interference with blood supply and venous reflux of the lower body using an end-to-end anastomosis of kidney implantation and an end-to-side "tunnel" method of ureter-bladder anastomosis.

Renal Allogreft Rejeksiyonu için Sıçan Ortotopik Böbrek Transplantasyonu Modeli

Renal allograft rejection limits the long-term survival of patients after renal transplantation. Rat orthotopic renal transplantation is an essential ...

High-Resolution Cardiac Positron Emission Tomography/Computed Tomography for Small Animals

Positron emission tomography (PET) and computed tomography (CT) are among the most employed diagnostic imaging techniques, and both serve in understanding cardiac function and metabolism. In preclinical research, dedicated scanners with high sensitivity and high spatio-temporal resolution are employed, designed to cope with the demanding technological requirements posed by the small heart size and very high heart rates of mice and rats. In this paper, a bimodal cardiac PET/CT imaging protocol for experimental mouse and/or rat models of cardiac diseases is described, from animal preparation and image acquisition and reconstruction to image processing and visualization.
In particular, the 18F-labeled fluorodeoxyglucose ([18F]FDG)-PET scan allows for the measurement and visualization of glucose metabolism in the different segments of the left ventricle (LV). Polar maps are convenient tools to display this information. The CT part consists of a time-resolved 3D reconstruction of the entire heart (4D-CT) using retrospective gating without electrocardiography (ECG) leads, allowing the morphofunctional evaluation of the LV and the subsequent quantification of the most important cardiac function parameters, such as ejection fraction (EF) and stroke volume (SV). Using an integrated PET/CT scanner, this protocol can be executed within the same anesthesia induction without the need to reposition the animal between different scanners. Hence, PET/CT can be seen as a comprehensive tool for the morphofunctional and metabolic evaluation of the heart in several small animal models of cardiac diseases.

Here, we present an experimental imaging protocol for the quantification of cardiac function and morphology using high-resolution positron emission tomography/computed tomography for small animals. Both mice and rats are considered, discussing the different requirements of computed tomography contrast agents for the two species.

Yüksek Çözünürlüklü Kardiyak Pozitron Emisyon Tomografisi/Küçük Hayvanlar için Bilgisayarlı Tomografi

Positron emission tomography (PET) and computed tomography (CT) are among the most employed diagnostic imaging techniques, and both serve in understanding ...

Liver Transplantation in Rats and Analyzing Allograft Patency

Heterotopic Auxiliary Whole Liver Rat Transplant Model Utilizing a Hepaticoureterostomy for Allograft Rejection Studies

Small animal transplant models are indispensable for organ tolerance studies investigating feasible therapeutic interventions in preclinical studies. Rat liver transplantation (LTx) protocols typically use an orthotopic model where the recipients&#39; native liver is removed and replaced with a donor liver. This technically demanding surgical procedure requires advanced micro-surgical skills and is further complicated by lengthy anhepatic and lower body ischemia times. This prompted the development of a less complicated heterotopic method that can be performed faster with no anhepatic or lower body ischemia time, reducing post-surgery stress for the recipient animal.
This heterotopic LTx protocol includes two main steps: excising the liver from the donor rat and transplanting the whole liver into the recipient rat. During the excision of the donor liver, the surgeon ligates the supra-hepatic vena cava (SHVC) and hepatic artery (HA). On the recipient side, the surgeon removes the left kidney and positions the donor liver with the portal vein (PV), infra-hepatic vena cava (IHVC), and bile duct facing the renal vessels. Further, the surgeon anastomoses the recipient&#39;s renal vein end to end with the IHVC of the liver and arterializes the PV with the renal artery using a stent. A hepaticoureterostomy is utilized for biliary drainage by anastomosing the bile duct to the recipient&#39;s ureter, permitting the discharge of bile via the bladder.
The average duration of the transplantation was 130 min, cold ischemia duration was around 35 min, and warm ischemia duration was less than 25 min. Hematoxylin and eosin histology of the auxiliary liver from syngeneic transplants showed normal hepatocyte structure with no significant parenchymal alterations 30 days post-transplant. In contrast, 8-day post-transplant allogeneic graft specimens demonstrated extensive lymphocytic infiltration with a Banff Schema rejection activity index score of 9. Therefore, this LTx method facilitates a low morbidity rejection model alternative to orthotopic LTx.

The rat heterotopic auxiliary liver transplant protocol described here offers a practical investigational tool for exploring mechanisms of hepatic allograft rejection. This model helps to alleviate the surgical hurdles and animal stress of orthotopic liver transplantation in rats.

Small animal transplant models are indispensable for organ tolerance studies investigating feasible therapeutic interventions in preclinical studies. Rat ...

FDG Based PET/CT Scan: A Method of Using Radiotracer for Non-invasive Imaging of Tumor Metabolism

Source: Momcilovic M. et al., <a href="https://www.jove.com/v/57167/utilizing-18f-fdg-petct-imaging-quantitative-histology-to-measure">Utilizing&#160;18F-FDG PET/CT Imaging and Quantitative Histology to Measure Dynamic Changes in the Glucose Metabolism in Mouse Models of Lung Cancer.</a> J. Vis. Exp. (2018)
This article describes multimodality imaging of cancerous tissues with PET and CT diagnostic imaging by using a radiotracer 18F-FDG. Cancerous tissue with high glycolytic activity uptakes more 18F-FDG.

FDG Tabanlı PET/BT Taraması: Tümör Metabolizmasının Non-invaziv Görüntülemesi için Radyoizleyici Kullanma Yöntemi

Source: Momcilovic M. et al., Utilizing&#160;18F-FDG PET/CT Imaging and Quantitative Histology to Measure Dynamic Changes in the Glucose Metabolism in ...

Sıçan Böbrek Nakli sonra Akut Allogreft Reddi non-invaziv Görüntüleme Kullanımı

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler