Djc Optometri Sağlık Bilimleri Koleji Western University tarafından sağlanan finansman. Grafik tasarım için Irisa Tam&#39;a özel teşekkürler.

Tüm hayvancılık ve deneyler onaylanmış ve ilgili kurum veya diğer yasal gereklerin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından belirlenen kurallara uygun olarak yapılmalıdır. 1.. Zebra balığı Bakımı <ol><li> 10 saat karanlık-14 saat ışık döngüsü 16 28.5 ° C&#39;de standart koşullar altında zebrafish koruyun. </li><li> Yaklaşık 3 balık / L. tank yoğunluğunda yetişkin zebrafish tutun </li></ol> 2. Optokinetik yanıt (OKR) <ol><li> Tamburu 14,5 cm çapa, ayarlanabilir ışık şiddeti ayarları (300-8.000 lux) ile bir stereo mikroskop ve bir bilgisayar (Şekil 1a) kullanarak özel OKR kayıt cihazını oluşturun. <ol><li> Bitişik bir monitöre canlı yem sağlamak ve görüntü yakalama ve kayıt için izin verir mikroskop bir kamera takın. </li><li> Accommo bir bilgisayara bağlı bir mikrodenetleyici ile dönen bir kontroltarihi, çeşitli hız ve yön seçimleri. </li></ol></li><li> 2-3 dakika boyunca 0.016% tricaine balık anestezisi ve sonra kenar üzerinde asılı gözleri ve solungaçları ile küçük bir platform üzerinde balık yer. </li><li> Balık vücut üzerinde ince bir sünger / havlu yerleştirin ve hareketsiz tutmak için balık üzerinde balık karşılamak için şekilli köpük 2-3 adet, pin. Balık kuyruğu hareketini sınırlama balık yaralanmasına neden olmadan hareketsizleştirme için çok önemli bir yönü olduğu bulunmuştur, ve en iyi köpük düz parça kullanılarak elde edilmiştir. (Şekil 1b) </li><li> OKR kayıt cihazının döner tambur içinde uygun olduğu, silindir şeklinde bir su dolu bir tank içinde balık yerleştirin. Yaklaşık 7.3 cm tamburun kenarından gözlü, dik balık konumlandırmak için platform üzerinde mıknatıslar kullanın. Balık, birkaç dakika içinde anestezi canlandırmak gerekir - normal solunum devam eder ve rastgele göz hareketleri dikkat edilmelidir. </li><li> Bir bas yerleştirine dönen tambur içine derecesi (CPD) başına 0.07 döngüleri ızgara ve rotasyonu ve video çekimi başlamak için bilgisayar kontrolleri meşgul (12 rpm hız, bu kağıt için kullanılan, ancak 8-16 rpm hızları benzer sonuçlar vermelidir). </li><li> Bir ilk OKR ızgara tabanından ortaya sonra, kısa bir süre dönüşü duraklama ve daha küçük bir ızgara (daha yüksek uzamsal frekans) ile ızgara değiştirin. </li><li> Bir OKR artık ortaya olabilir kadar bu işlemi tekrarlayın. Bir modifiye merdiven yaklaşım aşağıdaki bir okr neden ve sonra okr kaybını doğrulamak için bir yanıt ortaya çıkarmak için başarısız ızgarayı kullanarak tekrarlamak küçük mazgal sınayın. Nihai ızgara birinci söndürme olayı için göreceli değiştirilir, bu işlem, en küçük tespit ızgara için gerçek bir yanıt doğrulamak için tekrar edilebilir. </li><li> Ters göz bitişik çizgili siyah bir plastik oklüder koyarak monoküler görme keskinliği ölçümleri alın. (2,6-2,7 adımları) yukarıdaki işlemi tekrarlayın. </li><li>Tıkayıcı yeniden konumlandırma ve yeniden adımlar 2,6-2,7 tekrarlayarak karşısında gözün keskinliği edinin. </li><li> Her bir göz doğru keskinliği önlemler, aşağıdaki adımlarda hesaplanabilir, böylece balık tank altında referans ölçüm şeridi kullanarak test prosedürü sırasında çizgili dan mesafe dikkat edin. </li></ol> 3. Görsel Keskinliğini Hesaplama <ol><li> CPD hesaplayarak görme keskinliği edinin: <img alt="Denklem 1" fo:content-width="0.7in" src="/files/ftp_upload/50832/50832eq1.jpg" width="70px" /> Bir ızgara için lens merkezinden mesafedir, ve h OKR (Şekil 1c) gözlendiği en küçük ızgaranın bir döngünün uzunluğudur. </li><li> Birleştirilen görme keskinliği ölçümleri için, ortalama sol ve sağ göz hem de a-değeri kullanılır. </li></ol>

<ol>
	<li>Brockerhoff, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+screen+for+isolating+zebrafish+mutants+with+visual+system+defects.">A behavioral screen for isolating zebrafish mutants with visual system defects.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92, 10545-10549 (1995).</li><li>Neuhauss, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+disorders+of+vision+revealed+by+a+behavioral+screen+of+400+essential+loci+in+zebrafish.">Genetic disorders of vision revealed by a behavioral screen of 400 essential loci in zebrafish.</a> J. Neurosci. 19, 8603-8615 (1999).</li><li>Schumann, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+objective+determination+of+visual+acuity+on+the+basis+of+the+optokinetic+nystagmus.">The objective determination of visual acuity on the basis of the optokinetic nystagmus.</a> Am. J. Optom. Arch. Am. Acad. Optom. 29, 575-583 (1952).</li><li>Gorman, J. J., Cogan, D. G., Gellis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+apparatus+for+grading+the+visual+acuity+of+infants+on+the+basis+of+opticokinetic+nystagmus.">An apparatus for grading the visual acuity of infants on the basis of opticokinetic nystagmus.</a> Pediatrics. 19, 1088-1092 (1957).</li><li>Fulton, A. B., Manning, K. A., Dobson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+method+for+efficient+screening+of+visual+acuity+in+young+infants.+II.+Clinical+application.">A behavioral method for efficient screening of visual acuity in young infants. II. Clinical application.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 17, 1151-1157 (1978).</li><li>Huizinga, E., Van Der Meulen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vestibular+rotatory+and+optokinetic+reactions+in+the+pigeon.">Vestibular rotatory and optokinetic reactions in the pigeon.</a> Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 60, 927-947 (1951).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+Acuity+and+Contrast+Sensitivity+of+Adult+Zebrafish.">Visual Acuity and Contrast Sensitivity of Adult Zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Mueller, K. P., Schnaedelbach, O. D., Russig, H. D., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VisioTracker,+an+innovative+automated+approach+to+oculomotor+analysis.">VisioTracker, an innovative automated approach to oculomotor analysis.</a> J. Vis. Exp. (56), e3556 (2011).</li><li>Zou, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+optokinetic+response+to+study+visual+function+of+zebrafish.">Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (36), e1742 (2010).</li><li>Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurements+of+the+optokinetic+response+in+adult+fish.">Quantitative measurements of the optokinetic response in adult fish.</a> J. Neurosci. Methods. 186, 29-34 (2010).</li><li>Li, L., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dominant+form+of+inherited+retinal+degeneration+caused+by+a+non-photoreceptor+cell-specific+mutation.">A dominant form of inherited retinal degeneration caused by a non-photoreceptor cell-specific mutation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 11645-11650 (1997).</li><li>Ren, J. Q., McCarthy, W. R., Zhang, H., Adolph, A. R., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+visual+responses+of+wild-type+and+hypopigmented+zebrafish.">Behavioral visual responses of wild-type and hypopigmented zebrafish.</a> Vision Res. 42, 293-299 (2002).</li><li>Maaswinkel, H., Mason, B., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ENU-induced+late-onset+night+blindness+associated+with+rod+photoreceptor+cell+degeneration+in+zebrafish.">ENU-induced late-onset night blindness associated with rod photoreceptor cell degeneration in zebrafish.</a> Mech. Ageing Dev. 124, 1065-1071 (2003).</li><li>Stujenske, J. M., Dowling, J. E., Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bugeye+mutant+zebrafish+exhibits+visual+deficits+that+arise+with+the+onset+of+an+enlarged+eye+phenotype.">The bugeye mutant zebrafish exhibits visual deficits that arise with the onset of an enlarged eye phenotype.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 4200-4207 (2011).</li><li>Veth, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+zebrafish+lrp2+result+in+adult-onset+ocular+pathogenesis+that+models+myopia+and+other+risk+factors+for+glaucoma.">Mutations in zebrafish lrp2 result in adult-onset ocular pathogenesis that models myopia and other risk factors for glaucoma.</a> PLoS Genet. 7, e1001310 (2011).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> THE ZEBRAFISH BOOK, A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Cagenello, R., Arditi, A., Halpern, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Binocular+enhancement+of+visual+acuity.">Binocular enhancement of visual acuity.</a> J. Opt. Soc. Am. A Opt. Image Sci. Vis. 10, 1841-1848 (1993).</li><li>Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae.">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nat. Protoc. 1, 2448-2451 (2006).</li><li>Hodel, C., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-based+analysis+of+the+optokinetic+response+in+zebrafish+larvae.">Computer-based analysis of the optokinetic response in zebrafish larvae.</a> CSH Protoc. 2008, pdb prot4961 (2008).</li><li>Huber-Reggi, S. P., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+optokinetic+response+in+zebrafish+by+computer-based+eye+tracking.">Analysis of optokinetic response in zebrafish by computer-based eye tracking.</a> Methods Mol. Biol. 935, 139-160 (2013).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+contrast+sensitivity+of+adult+zebrafish.">Visual acuity and contrast sensitivity of adult zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Saszik, S., Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+temperature+on+the+dark-adapted+spectral+sensitivity+function+of+the+adult+zebrafish.">The effects of temperature on the dark-adapted spectral sensitivity function of the adult zebrafish.</a> Vision Res. 39, 1051-1058 (1999).</li><li>Haug, M. F., Biehlmaier, O., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+in+larval+zebrafish:+behavior+and+histology.">Visual acuity in larval zebrafish: behavior and histology.</a> Front. Zool. 7, 8 (2010).</li><li>Curcio, C. A., Sloan, K. R., Kalina, R. E., Hendrickson, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+photoreceptor+topography.">Human photoreceptor topography.</a> J. Comp. Neurol. 292, 497-523 (1990).</li><li>Kalloniatis, M., Luu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual Acuity. , (1995).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Vesileyle balık su tankının içine kaçabilir. Bu kuyruk hareketsiz hale getirmek için önemlidir. Balığın vücut üzerinde ince bir sünger / havlu Ayrıca kullanımı da uzun süre askıya balık tutmak için çok değerli olduğu tespit edildi. Biz balık zarar vermeden bu yordamı kullanarak daha 30 dakika boyunca hareketsiz balık tutmayı başardık. Zaman bu miktar binoküler ve monoküler hem keskinliği yapmak için fazlasıyla yeterli. Fiziksel olarak dönen bir birimin ya da dijital bir görüntü 18-22 sunarak buradan ve başka bir yerde tarif edildiği gibi ızgaranın sunumu ya da yapılabilir. Her iki tür avantaj ve dezavantajları var. Biz hem maliyet nedenleri ve teknik özellikleri için fiziksel rotasyon kullanmayı seçti. Bilgisayar ve görüntüleme cihazları hariç, burada açıklanan OKR cihaz yaklaşık 150 $ için inşa edilebilir. OKR vis belirleyici bir amacı, bir araçtıryetişkin Zebrafish ual keskinliği. Vizyon için birkaç diğer visuomotor analizler önceki deneylerde kullanılan ve ağır konu olmamışsa olsa bile elektroretinogram başarıyla, yetişkin zebrabalıkları gözünde yapılmış olsa da, yetişkin zebrabalıkları OKR birçok yeni deneysel şartlarda 22 kapıyı açar. Bu çalışmada göz hastalığı modellerinde görme keskinliği farkı tanımlayarak, zamanla görme keskinliği değişiklikleri ölçmede okr adlı programını gösterdi ve monoküler görme keskinliği belirlemede gelmiştir. İlginç olarak, erişkin zebra balığı görme İnsan gözü (20/20) ile karşılaştırıldığında, yaklaşık 20/1, 000 (0.60 cpd -0,3 logMAR&#39;dan dönüştürüldüğünde) &#39;dir. Bu kötü görünse de, Zebra balığı gözleri çok iyi çevresi için uygundur. 6.5 su cm, polikarbonat birkaç milimetre, ve hava başka bir santimetre bakarak görsel görevi rağmen, balık oldukça iyi bir performans! Biz yetişkin zebrabalıkları keskinliği Abo olduğunu bulunduut. 23. Kontrast bunların fotoreseptör aralık verilmiş çıkarsanabilecek% 70 olduğu optimum insan performans ile ~ 20/12, ki bu yaklaşık% 80 20/10 öngörülen ve yetişkin Zebrafish görme yeteneğini ölçmek için OKR teknik etkileyici 24 25. Bağımsız göz görme keskinliği ölçüm tekniği, bir gözü tedavi edilebilir ve diğer bir kontrol olarak kullanılmıştır edildiği çalışmalar için olanak sağlayacaktır. Ayrıca, bu tür katarakt gelişir lrp2/bugeye veya balık gibi asimetrik göz gelişimi ile balık daha doğru takip edilebilir. Bu bakım doğru çizgiler için gözlerden mesafeyi ölçmek için ve görüş alanını tam tıkamak için alınması gerektiği unutulmamalıdır. Bu teknik Zebrafish görme fonksiyonunun daha doğru ve spesifik önlemlere kapıyı açmak gerekir.

Zebra balığı (Br.rerio) nedeniyle diğer omurgalılar, kısa yaşam döngüsü, ve genetik olarak değiştirilmiş mutantlar 1,2 kullanılabilirliği kendi retinanın benzerliği görsel fizyoloji çalışmak için iyi bir model vardır. Optokinetik refleks / tepki / nistagmus (OKR) düzgün takip ve hızlı sakkaddan göz hareketlerinin bir kombinasyonudur. 60 yılı aşkın için klinisyenler OKR objektif hastalarda görme keskinliği ölçümü için kullanılan ve bebek görme yeteneklerinin 3-5 belirlenmesi için özellikle yararlıdır edilebilir olduğunu göstermiştir. Hayvanlarda okr kaydedilmiş ilk kullanımı 1950&#39;lerde 6 güvercin kullanıyordum. Daha yakın zamanlarda, OKR larva zebrabalıkları görsel fonksiyonu değerlendirmede ve genellikle görme bozukluğu 1,2 olan genetik mutantlar için ekran için kullanılan için değerli bir araç haline gelmiştir. OKR yaygın larva Zebrafish görme fonksiyonunu belirlemek için kullanılmış olsa da, sadece son zamanlarda yetişkin zebra kanıtlanmıştır7-10 arası balık. Tappeiner tarafından yeni bir kağıt ve diğ. Geleneksel fareler için kullanılan piyasada mevcut optomotor sistemi kullanır, OptoMotry, yetişkin zebrafish görme keskinliği hatta çeşitli açısal hızlarda 7 karşısında, derece başına 0.59 çevrimler (CPD) ~, oldukça sabit kaldığını göstermek için . OKR larva zebra balığı çalışmalarda oldukça yararlı olduğu kanıtlanmıştır, ancak görsel davranışı için diğer yöntemler başarıya ilişkin olarak değişen derecelerde zebra balığı yetişkinlerde kullanılmıştır. Kaçış tepkisi deneyi hem pigmentasyon mutantlar, parlak ışık koşullarında 11,12 görsel tepkiler azalttı, albino ve yakut Zebra balığı gösterdi. Bu aynı kaçış tepkisi deneyi de başarıyla yaş 13 2 yıllık da olsa, gece körlüğü d mutantlar belirlemiştir. Ancak, kaçış tepkisi tahlil kusurları olmadan değildir. Bu kesin bir görme fonksiyonu atfetmek zordur ve sadece bir brüt approximatio olduğunuGörsel değişikliklerin n - değişiklik tanımlanır önce büyük bir değişiklik alır anlamına gelir. Görme bozukluğu olan yetişkin zebrafish belirlenmesi için geliştirilmiş olan bir başka yöntem, optomotor tepkisi (OMR) 11&#39;dir. Bu deneyde, balık merkezinde bir opak sütun ile dairesel tankı yerleştirilir. Siyah ve beyaz çizgili tankı etrafında döndürün ve balık şerit hareket yönünde yüzme ile görevlendirilmiştir. Kaçış tepkisi gibi, OMR yetişkin zebrafish visuomotor yetenekleri üzerinde duruluyor. Ancak böyle lrp2/bugeye mutantlar 14 gibi görme bozuklukları, balık tanımlamak için başarıyla kullanılmaktadır. Lrp2/bugeye Zebra balığı sergi buphthalmos, yüksek göz içi basıncı, OMR azalmış, ve progresif retinal dejenerasyon 14,15. Birçok çalışmalar genellikle öznel ve kant olamaz yetişkin zebrabalıkları visuomotor yetenekleri, kullanmışitatively analiz edilmiştir. Okr kullanarak, bir daha objektif yetişkin balık görme keskinliği eğitim görebilirsiniz. Biz başlangıçta larva çalışmaları 1 için kullanılan bir sonra modellenmiştir kendi OKR cihazı, inşa etmişlerdir. Bu çalışmada OKR tek gözlü ve zebrabalıkları binoküler görme keskinliği her iki hesaplamak için kullanılabileceğini göstermektedir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="593">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="64">
			<td height="64" style="height:64px;width:209px;">Super Low Light Black White Video Security Camera</td>
			<td style="width:143px;">Super Circuits</td>
			<td style="width:119px;">PC164CEX-2</td>
			<td style="width:124px;"> Any low light camera may be used</td>
		</tr>
		<tr height="106">
			<td height="106" style="height:106px;width:209px;">Arduino Duemilanove microcontroller</td>
			<td style="width:143px;">Adafruit Industries</td>
			<td style="width:119px;"> </td>
			<td style="width:124px;"> The Arduino Uno is also compatible with the speed control software.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Tricaine Methanesulfonate</td>
			<td>VWR</td>
			<td>101107-950</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the optokinetic response as a quantitative measure of visual acuity in zebrafish

Zebra balığı genellikle larva balık odaklanmış veya basit bir tepki göstermiştir önceki yöntemlerden ancak birçok görme araştırma için kanıtlanmış bir modeli vardır. Daha yakın Zebrafish yetişkin görsel davranış ilgi haline gelmiştir, ancak belirli tepkilerini ölçmek için yöntemler gelen yeni. Bu açığı gidermek için, biz tekrar tekrar ve doğru bir yetişkin zebrabalıkları görme keskinliği ölçmek için optokinetik yanıtı (OKR) kullanmak için bir yöntem geliştirmek için yola çıktı. Burada Yetişkin Zebra Görme keskinliği, binoküler ve monoküler keskinliği dahil olmak üzere, ölçülebilir olduğunu göstermektedir. Balık işlemi sırasında zarar olmadığından, görme keskinliği zaman kısa veya uzun süreler boyunca ölçülebilir ve karşılaştırılabilir. Burada anlatılan görme keskinliği ölçümleri istenirse hızlı, yüksek verim için ve ek görsel işlemler için izin de yapılabilir. Bu analiz türü ilaç müdahale çalışmalarında ya da hastalığın ilerlemesine soruşturmalarına vesile olur.

OKR Cihaz İşlevsellik Yukarıda açıklandığı ve Şekil az bakım ile 1 fonksiyonlar gösterildiği gibi OKR cihaz. Kuyruk immobilize, aşama 2.3 &#39;de belirtildiği gibi, kayıt sırasında ölçülü balıkları tutmak için çok önemlidir. Yeterince hareketsiz, balık zaman uzun süreler için OKR cihazda tutulabilir. Daha fazla veri, her bir balık için toplanır, böylece Sonuç olarak, bakım, ilk hareketsiz adımları sırasında alınmalıdır. Görme keskinliği ölçümleri Binoküler OKR kolayca normal erişkin balık açığa çıkartılır. Yukarıdaki prosedürü izleyerek bir çok yaştan zebrabalıkları (Şekil 2) için görme keskinliği bulabilirsiniz. Biz kaydedilen en iyi dürbün mekansal keskinliği 0.74 gbm oldu. Şekil 2 &#39;de belirtildiği gibi, iki gözlü keskinliği genellikle yaşla orantılı olarak artar (n = 46, p = 0.002 ile SPSS V14 ANOVA), fakat düzeyleri offyaş yaklaşık 12 ay sonra. Yabani tip, biz yaştaki lrp2/bugeye balık 5 aylık vahşi tip balık olarak ölçülen görme keskinliği karşılaştırıldığında, biz lrp2/bugeye balık anlamlı keskinliği (p &lt;0.001 azaltılmış buldu: 0.49 ± 0.05 gbm; n = 8; lrp2/bugeye: 0.35 ± 0.06, n = 10; Excel kullanarak Student T-testi). Sağ göz tıkanmasıyla sol göz için görme keskinliği tam tersi tespit edilebilir. Binoküler keskinliği karşılaştırıldığında, binoküler toplama insan görme 17 (Şekil 3) benzer görülmektedir. Binoküler görme keskinliği genellikle sağ (OD) veya sol bağımsız olarak ölçülen (OS) keskinliği ya% 5-10 daha iyi oldu. Bazı bireysel balık için fark% 25 iyileşme oldu. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig1.jpg" width="500px" /> Şekil 1. OKR recording. A) OKR cihaz ayarlanabilir ışık yoğunluğu ayarlarında (300-8.000 lux) ile davul ve mikroskop dönen 14,5 cm çapında oluşur. Bir kamera bitişik bir monitörde bir canlı yayın sağlar. Derece (GBM) göre gereken şekilde dönen tambur saat yönünde ve saatin tersi yönde değiştirilebilir ve uzamsal frekans ızgaralar hem de çeşitli hız ayarı vardır yerleştirilir ve çıkarılır. B) Balık güvenli ve döner tamburun ortasına yerleştirilir. C) döngüleri hesaplanır Mhg = kullanarak <img alt="" src="img2.png" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig1highres.jpg" target="_blank">Daha büyük resmi görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 2," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig2.jpg" width="500px" /> Şekil 2. Görme keskinliği yaşla birlikte değişir. Grafik 5 ölçülen bağımsız görme keskinliğini gösterir -<html> Yaş 15 ay. Görme keskinliği genellikle gelişmenin ilk yıl boyunca artar ve daha sonra 15 aylıkken (p = SPSS v14 kullanarak 0.002 ANOVA) de biraz azalır. Her nokta ya 1 ya da birkaç balık temsil edebilir. Görme keskinliği devir / derece (CPD) olarak ölçülür. (N = toplam 46, 5 ayda 8; 6 ayda 4; 8 ayda 7, 9 ayda 6; 10 ayda 11; 11 aylıkken 2; 12 ayda 2 ve 15 ayda 6). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig2highres.jpg" target="_blank">buraya tıklayın Daha büyük resmi görmek için</a> . <img alt="Şekil 3," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig3.jpg" width="500px" /> Şekil 3,. Binoküler görme keskinliği toplamı etkisi. Binoküler (OU) görme keskinliği sağda (OD) veya sola (OS) göz keskinliği göre genellikle daha yüksektir. Bu özel gruptaki OS keskinliği daha düşük bulunmuştur. (* P = 0.006, N = 8),jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig3highres.jpg &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; büyük resmi görebilmek için buraya tıklayın.

Watch this Scientific Journal Video about The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish at JoVE.com

The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Zebra balığı birçok araştırma alanları için değerli bir araç olmuştur. Burada görsel bir yanıt ortaya çıkarmak ve yetişkin Zebrafish fonksiyonel görme keskinliği hesaplamak için bir yöntem ortaya koymaktadır.

Zebra balığı görme keskinliğinin bir nicel ölçü olarak Optokinetik Tepki

Zebrafish are a proven model for vision research, however many of the  earlier methods generally focused on larval fish or demonstrated a simple  ...

the-optokinetic-response-as-quantitative-measure-visual-acuity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.3K Görüntüleme.  Western University of Health Sciences.  Zebra balığı birçok araştırma alanları için değerli bir araç olmuştur. Burada görsel bir yanıt ortaya çıkarmak ve yetişkin Zebrafish fonksiyonel görme keskinliği hesaplamak için bir yöntem ortaya koymaktadır. 

Video: The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Hyponeophagia: A Measure of Anxiety in the Mouse

Before the present day, when fast-acting and potent rodenticides such as alpha-chloralose were not yet in use, the work of pest controllers was often hampered by a phenomenon known as "bait shyness". Mice and rats cannot vomit, due to the tightness of the cardiac sphincter of the stomach, so to overcome the problem of potential food toxicity they have evolved a strategy of first ingesting only very small amounts of novel substances. The amounts ingested then gradually increase until the animal has determined whether the substance is safe and nutritious. So the old rat-catchers would first put a palatable substance such as oatmeal, which was to be the vehicle for the toxin, in the infested area. Only when large amounts were being readily consumed would they then add the poison, in amounts calculated not to affect the taste of the vehicle. The poisoned bait, which the animals were now readily eating in large amounts, would then swiftly perform its function.
Bait shyness is now used in the behavioural laboratory as a way of measuring anxiety. A highly palatable but novel substance, such as sweet corn, nuts or sweetened condensed milk, is offered to the mice (or rats) in a novel situation, such as a new cage. The latency to consume a defined amount of the new food is then measured.
Robert M.J. Deacon can be reach at <a href="mailto:robert.deacon@psy.ox.ac.uk">robert.deacon@psy.ox.ac.uk</a>

Mice and rats, due to their innate cautiousness, are initially slow in consuming a novel food, particularly in a novel place. This hyponeophagia can readily be measured in the laboratory, even though laboratory animals are much less anxious than their wild counterparts

Hyponeophagia: Fare Anksiyete ölçün

Before the present day, when fast-acting and potent rodenticides such as alpha-chloralose were not yet in use, the work of pest controllers was often ...

Nörobilim

A Dual Tracer PET-MRI Protocol for the Quantitative Measure of Regional Brain Energy Substrates Uptake in the Rat

We present a method for comparing the uptake of the brain&#39;s two key energy substrates: glucose and ketones (acetoacetate [AcAc] in this case) in the rat. The developed method is a small-animal positron emission tomography (PET) protocol, in which&#160;11C-AcAc and 18F-fluorodeoxyglucose (18F-FDG) are injected sequentially in each animal. This dual tracer PET acquisition is possible because of the short half-life of 11C (20.4 min). The rats also undergo a magnetic resonance imaging (MRI) acquisition seven days before the PET protocol. Prior to image analysis, PET and MRI images are coregistered to allow the measurement of regional cerebral uptake (cortex, hippocampus, striatum, and cerebellum). A quantitative measure of 11C-AcAc and 18F-FDG brain uptake (cerebral metabolic rate; &#956;mol/100 g/min) is determined by kinetic modeling using the image-derived input function (IDIF) method. Our new dual tracer PET protocol is robust and flexible; the two tracers used can be replaced by different radiotracers to evaluate other processes in the brain. Moreover, our protocol is applicable to the study of brain fuel supply in multiple conditions such as normal aging and neurodegenerative pathologies such as Alzheimer&#39;s and Parkinson&#39;s diseases.

Small-animal positron emission tomography enables the assessment of the brain&#39;s two main energy substrates:&#160;glucose and ketones. In the present method, 11C-acetoacetate and 18F-fluorodeoxyglucose are injected sequentially in each animal, and their uptake is measured quantitatively in specific brain regions determined from the magnetic resonance images.

Rat Bölgesel Beyin Enerji Yüzeyleri Alımına Kantitatif Tedbir için A Çift Tracer PET-MR Protokolü

We present a method for comparing the uptake of the brain&#39;s two key energy substrates: glucose and ketones (acetoacetate [AcAc] in this case) in the ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the surface of the cornea, electrical activity generated in response to light can be measured and used to assess the activity of retinal cells in vivo. This manuscript describes the use of the ERG to measure visual function in zebrafish. Zebrafish have long been utilized as a model for vertebrate development due to the ease of gene suppression by morpholino oligonucleotides and pharmacological manipulation. At 5-10 dpf, only cones are functional in the larval retina. Therefore, the zebrafish, unlike other animals, is a powerful model system for the study of cone visual function in vivo. This protocol uses standard anesthesia, micromanipulation and stereomicroscopy protocols that are common in laboratories that perform zebrafish research. The outlined methods make use of standard electrophysiology equipment and a low light camera to guide the placement of the recording microelectrode onto the larval cornea. Finally, we demonstrate how a commercially available ERG stimulator/recorder originally designed for use with mice can easily be adapted for use with zebrafish. ERG of larval zebrafish provides an excellent method of assaying cone visual function in animals that have been modified by morpholino oligonucleotide injection as well as newer genome engineering techniques such as Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucleases (TALENs), and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/Cas9, all of which have greatly increased the efficiency and efficacy of gene targeting in zebrafish. In addition, we take advantage of the ability of pharmacological agents to penetrate zebrafish larvae to evaluate the molecular components that contribute to the photoresponse. This protocol outlines a setup that can be modified and used by researchers with various experimental goals.

We present a method for the electroretinographic (ERG) analysis of zebrafish larvae utilizing micromanipulation and electroretinography techniques. This is a simple and straightforward method for assaying visual function of zebrafish larvae in vivo.

Zebra balığı Larva Görsel Tepki Elektroetinogram Analizi

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise from extra-retinal sources. Ex vivo ERG provides an efficient method to dissect the function of retinal cells directly from an intact isolated retina of animals or donor eyes. In addition, ex vivo ERG can be used to test the efficacy and safety of potential therapeutic agents on retina tissue from animals or humans. We show here how commercially available in vivo ERG systems can be used to conduct ex vivo ERG recordings from isolated mouse retinas. We combine the light stimulation, electronic and heating units of a standard in vivo system with custom-designed specimen holder, gravity-controlled perfusion system and electromagnetic noise shielding to record low-noise ex vivo ERG signals simultaneously from two retinas with the acquisition software included in commercial in vivo systems. Further, we demonstrate how to use this method in combination with pharmacological treatments that remove specific ERG components in order to dissect the function of certain retinal cell types.

Simultaneous ex vivo Functional Testing of Two Retinas by in vivo Electroretinogram System

Ex vivo ERG can be used to record electrical activity of retinal cells directly from isolated intact retinas of animals or humans. We demonstrate here how common in vivo ERG systems can be adapted for ex vivo ERG recordings in order to dissect the electrical activity of retinal cells.

Eşzamanlı<em&gt; Ex vivo</emİki retina&gt; Fonksiyonel Test tarafından<em&gt; In vivo</em&gt; Elektroretinogram Sistemi

An In vivo electroretinogram (ERG) signal is composed of several overlapping components originating from different retinal cell types, as well as noise ...

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model organisms such as the fruit fly, Drosophila melanogaster. Drosophila is useful for understanding the basic neurobiology underlying cognitive deficits resulting from mutations in genes associated with human cognitive disorders, such as intellectual disability (ID) and autism. This work describes a methodology for testing learning and memory using a classic paradigm in Drosophila known as courtship conditioning. Male flies court females using a distinct pattern of easily recognizable behaviors. Premated females are not receptive to mating and will reject the male&#39;s copulation attempts. In response to this rejection, male flies reduce their courtship behavior. This learned reduction in courtship behavior is measured over time, serving as an indicator of learning and memory. The basic numerical output of this assay is the courtship index (CI), which is defined as the percentage of time that a male spends courting during a 10 min interval. The learning index (LI) is the relative reduction of CI in flies that have been exposed to a premated female compared to na&#239;ve flies with no previous social encounters. For the statistical comparison of LIs between genotypes, a randomization test with bootstrapping is used. To illustrate how the assay can be used to address the role of a gene relating to learning and memory, the pan-neuronal knockdown of Dihydroxyacetone phosphate acyltransferase (Dhap-at) was characterized here. The human ortholog of Dhap-at, glyceronephosphate O-acyltransferase (GNPT), is involved in rhizomelic chondrodysplasia punctata type 2, an autosomal-recessive syndrome characterized by severe ID. Using the courtship conditioning assay, it was determined that Dhap-at is required for long-term memory, but not for short-term memory. This result serves as a basis for further investigation of the underlying molecular mechanisms.

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

This protocol describes a Drosophila learning and memory assay called courtship conditioning. This classic assay is based on a reduction of male courtship behavior after sexual rejection by a non-receptive premated female. This natural form of behavioral plasticity can be used to test learning, short-term memory, and long-term memory.

Öğrenme ve Bellek Tedrisi Olan Drosophila Kurbanlığı İklimlendirme

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model ...

Using Optical Coherence Tomography and Optokinetic Response As Structural and Functional Visual System Readouts in Mice and Rats

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for the investigation of processes of neurodegeneration, neuroprotection and neuro-repair involving the visual system, as these often correlate well with retinal changes. As a functional readout, visually evoked compensatory eye and head movements are commonly used in experimental models involving the visual function. Combining both techniques allows a quantitative in vivo investigation of structure and function, which can be used to investigate the pathological conditions or to evaluate the potential of novel therapeutics. A great benefit of the presented techniques is the possibility to perform longitudinal analyses allowing the investigation of dynamic processes, reducing variability and cuts down the number of animals needed for the experiments. The protocol described aims to provide a manual for acquisition and analysis of high quality retinal scans of mice and rats using a low cost customized holder with an option to deliver inhalational anesthesia. Additionally, the proposed guide is intended as an instructional manual for researchers using optokinetic response (OKR) analysis in rodents, which can be adapted to their specific needs and interests.

A detailed protocol for the assessment of structural and visual readouts in rodents by optical coherence tomography and optokinetic response is presented. The results provide valuable insights for ophthalmologic as well as neurologic research.

Optik koherens tomografi ve Optokinetic yanıt yapısal ve işlevsel görsel sistemin çıktıları fareler ve sıçanlar olarak kullanma

Optical coherence tomography (OCT) is a fast, non-invasive, interferometric technique allowing high-resolution retinal imaging. It is an ideal tool for ...

A Scalable Model to Study the Effects of Blunt-Force Injury in Adult Zebrafish

Blunt-force traumatic brain injuries (TBI) are the most common form of head trauma, which spans a range of severities and results in complex and heterogenous secondary effects. While there is no mechanism to replace or regenerate the lost neurons following a TBI in humans, zebrafish possess the ability to regenerate neurons throughout their body, including the brain. To examine the breadth of pathologies exhibited in zebrafish following a blunt-force TBI and to study the mechanisms underlying the subsequent neuronal regenerative response, we modified the commonly used rodent Marmarou weight drop for the use in adult zebrafish. Our simple blunt-force TBI model is scalable, inducing a mild, moderate, or severe TBI, and recapitulates many of the phenotypes observed following human TBI, such as contact- and post-traumatic seizures, edema, subdural and intracerebral hematomas, and cognitive impairments, each displayed in an injury severity-dependent manner. TBI sequelae, which begin to appear within minutes of the injury, subside and return to near undamaged control levels within 7 days post-injury. The regenerative process begins as early as 48 hours post-injury (hpi), with the peak cell proliferation observed by 60 hpi. Thus, our zebrafish blunt-force TBI model produces characteristic primary and secondary injury TBI pathologies similar to human TBI, which allows for investigating disease onset and progression, along with the mechanisms of neuronal regeneration that is unique to zebrafish.

We modified the Marmarou weight drop model for adult zebrafish to examine a breadth of pathologies following blunt-force traumatic brain injury (TBI) and the mechanisms underlying subsequent neuronal regeneration. This blunt-force TBI model is scalable, induces a mild, moderate, or severe TBI, and recapitulates injury heterogeneity observed in human TBI.

Yetişkin Zebra Balıklarında Künt Kuvvet Yaralanmasının Etkilerini Incelemek İçin Ölçeklenebilir Bir Model

Blunt-force traumatic brain injuries (TBI) are the most common form of head trauma, which spans a range of severities and results in complex and ...

Shuttle Box Assay as an Associative Learning Tool for Cognitive Assessment in Learning and Memory Studies using Adult Zebrafish

Cognitive deficits, including impaired learning and memory, are a primary symptom of various developmental and age-related neurodegenerative diseases and traumatic brain injury (TBI). Zebrafish are an important neuroscience model due to their transparency during development and robust regenerative capabilities following neurotrauma. While various cognitive tests exist in zebrafish, most of the cognitive assessments that are rapid examine non-associative learning. At the same time, associative-learning assays often require multiple days or weeks. Here, we describe a rapid associative-learning test that utilizes an adverse stimulus (electric shock) and requires minimal preparation time. The shuttle box assay, presented here, is simple, ideal for novice investigators, and requires minimal equipment. We demonstrate that, following TBI, this shuttle box test reproducibly assesses cognitive deficit and recovery from young to old zebrafish. Additionally, the assay is adaptable to examine either immediate or delayed memory. We demonstrate that both a single TBI and repeated TBI events negatively affect learning and immediate memory but not delayed memory. We, therefore, conclude that the shuttle box assay reproducibly tracks the progression and recovery of cognitive impairment.

Learning and memory are potent metrics in studying either developmental, disease-dependent, or environmentally induced cognitive impairments. Most cognitive assessments require specialized equipment and extensive time commitments. However, the shuttle box assay is an associative learning tool that utilizes a conventional gel box for rapid and reliable assessment of adult zebrafish cognition.

Yetişkin Zebra Balığı Kullanarak Öğrenme ve Bellek Çalışmalarında Bilişsel Değerlendirme için İlişkisel Bir Öğrenme Aracı Olarak Mekik Kutusu Tahlil

Cognitive deficits, including impaired learning and memory, are a primary symptom of various developmental and age-related neurodegenerative diseases and ...

Farelerde Optokinetik Refleks Tepkilerinin Değerlendirilmesi: Yeni Bir Yüksek Hassasiyetli Protokol

Quantification of Visual Feature Selectivity of the Optokinetic Reflex in Mice

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize retinal images. Due to its importance and robustness, the OKR has been used to study visual-motor learning and to evaluate the visual functions of mice with different genetic backgrounds, ages, and drug treatments. Here, we introduce a procedure for evaluating OKR responses of head-fixed mice with high accuracy. Head fixation can rule out the contribution of vestibular stimulation on eye movements, making it possible to measure eye movements triggered only by visual motion. The OKR is elicited by a virtual drum system, in which a vertical grating presented on three computer monitors drifts horizontally in an oscillatory manner or unidirectionally at a constant velocity. With this virtual reality system, we can systematically change visual parameters like spatial frequency, temporal/oscillation frequency, contrast, luminance, and the direction of gratings, and quantify tuning curves of visual feature selectivity. High-speed infrared video-oculography ensures accurate measurement of the trajectory of eye movements. The eyes of individual mice are calibrated to provide opportunities to compare the OKRs between animals of different ages, genders, and genetic backgrounds. The quantitative power of this technique allows it to detect changes in the OKR when this behavior plastically adapts due to aging, sensory experience, or motor learning; thus, it makes this technique a valuable addition to the repertoire of tools used to investigate the plasticity of ocular behaviors.

Yazar Spotlight: Farelerde optokinetik refleksin görsel özellik seçiciliğini incelemek için doğru ve nicel bir yaklaşım 

Here, we describe a standard protocol for quantifying the optokinetic reflex. It combines virtual drum stimulation and video-oculography, and thus allows precise evaluation of the feature selectivity of the behavior and its adaptive plasticity.

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize ...