Djc Optometri Sağlık Bilimleri Koleji Western University tarafından sağlanan finansman. Grafik tasarım için Irisa Tam&#39;a özel teşekkürler.

Tüm hayvancılık ve deneyler onaylanmış ve ilgili kurum veya diğer yasal gereklerin Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından belirlenen kurallara uygun olarak yapılmalıdır. 1.. Zebra balığı Bakımı <ol><li> 10 saat karanlık-14 saat ışık döngüsü 16 28.5 ° C&#39;de standart koşullar altında zebrafish koruyun. </li><li> Yaklaşık 3 balık / L. tank yoğunluğunda yetişkin zebrafish tutun </li></ol> 2. Optokinetik yanıt (OKR) <ol><li> Tamburu 14,5 cm çapa, ayarlanabilir ışık şiddeti ayarları (300-8.000 lux) ile bir stereo mikroskop ve bir bilgisayar (Şekil 1a) kullanarak özel OKR kayıt cihazını oluşturun. <ol><li> Bitişik bir monitöre canlı yem sağlamak ve görüntü yakalama ve kayıt için izin verir mikroskop bir kamera takın. </li><li> Accommo bir bilgisayara bağlı bir mikrodenetleyici ile dönen bir kontroltarihi, çeşitli hız ve yön seçimleri. </li></ol></li><li> 2-3 dakika boyunca 0.016% tricaine balık anestezisi ve sonra kenar üzerinde asılı gözleri ve solungaçları ile küçük bir platform üzerinde balık yer. </li><li> Balık vücut üzerinde ince bir sünger / havlu yerleştirin ve hareketsiz tutmak için balık üzerinde balık karşılamak için şekilli köpük 2-3 adet, pin. Balık kuyruğu hareketini sınırlama balık yaralanmasına neden olmadan hareketsizleştirme için çok önemli bir yönü olduğu bulunmuştur, ve en iyi köpük düz parça kullanılarak elde edilmiştir. (Şekil 1b) </li><li> OKR kayıt cihazının döner tambur içinde uygun olduğu, silindir şeklinde bir su dolu bir tank içinde balık yerleştirin. Yaklaşık 7.3 cm tamburun kenarından gözlü, dik balık konumlandırmak için platform üzerinde mıknatıslar kullanın. Balık, birkaç dakika içinde anestezi canlandırmak gerekir - normal solunum devam eder ve rastgele göz hareketleri dikkat edilmelidir. </li><li> Bir bas yerleştirine dönen tambur içine derecesi (CPD) başına 0.07 döngüleri ızgara ve rotasyonu ve video çekimi başlamak için bilgisayar kontrolleri meşgul (12 rpm hız, bu kağıt için kullanılan, ancak 8-16 rpm hızları benzer sonuçlar vermelidir). </li><li> Bir ilk OKR ızgara tabanından ortaya sonra, kısa bir süre dönüşü duraklama ve daha küçük bir ızgara (daha yüksek uzamsal frekans) ile ızgara değiştirin. </li><li> Bir OKR artık ortaya olabilir kadar bu işlemi tekrarlayın. Bir modifiye merdiven yaklaşım aşağıdaki bir okr neden ve sonra okr kaybını doğrulamak için bir yanıt ortaya çıkarmak için başarısız ızgarayı kullanarak tekrarlamak küçük mazgal sınayın. Nihai ızgara birinci söndürme olayı için göreceli değiştirilir, bu işlem, en küçük tespit ızgara için gerçek bir yanıt doğrulamak için tekrar edilebilir. </li><li> Ters göz bitişik çizgili siyah bir plastik oklüder koyarak monoküler görme keskinliği ölçümleri alın. (2,6-2,7 adımları) yukarıdaki işlemi tekrarlayın. </li><li>Tıkayıcı yeniden konumlandırma ve yeniden adımlar 2,6-2,7 tekrarlayarak karşısında gözün keskinliği edinin. </li><li> Her bir göz doğru keskinliği önlemler, aşağıdaki adımlarda hesaplanabilir, böylece balık tank altında referans ölçüm şeridi kullanarak test prosedürü sırasında çizgili dan mesafe dikkat edin. </li></ol> 3. Görsel Keskinliğini Hesaplama <ol><li> CPD hesaplayarak görme keskinliği edinin: <img alt="Denklem 1" fo:content-width="0.7in" src="/files/ftp_upload/50832/50832eq1.jpg" width="70px" /> Bir ızgara için lens merkezinden mesafedir, ve h OKR (Şekil 1c) gözlendiği en küçük ızgaranın bir döngünün uzunluğudur. </li><li> Birleştirilen görme keskinliği ölçümleri için, ortalama sol ve sağ göz hem de a-değeri kullanılır. </li></ol>

<ol>
	<li>Brockerhoff, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+screen+for+isolating+zebrafish+mutants+with+visual+system+defects.">A behavioral screen for isolating zebrafish mutants with visual system defects.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92, 10545-10549 (1995).</li><li>Neuhauss, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+disorders+of+vision+revealed+by+a+behavioral+screen+of+400+essential+loci+in+zebrafish.">Genetic disorders of vision revealed by a behavioral screen of 400 essential loci in zebrafish.</a> J. Neurosci. 19, 8603-8615 (1999).</li><li>Schumann, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+objective+determination+of+visual+acuity+on+the+basis+of+the+optokinetic+nystagmus.">The objective determination of visual acuity on the basis of the optokinetic nystagmus.</a> Am. J. Optom. Arch. Am. Acad. Optom. 29, 575-583 (1952).</li><li>Gorman, J. J., Cogan, D. G., Gellis, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+apparatus+for+grading+the+visual+acuity+of+infants+on+the+basis+of+opticokinetic+nystagmus.">An apparatus for grading the visual acuity of infants on the basis of opticokinetic nystagmus.</a> Pediatrics. 19, 1088-1092 (1957).</li><li>Fulton, A. B., Manning, K. A., Dobson, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+behavioral+method+for+efficient+screening+of+visual+acuity+in+young+infants.+II.+Clinical+application.">A behavioral method for efficient screening of visual acuity in young infants. II. Clinical application.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 17, 1151-1157 (1978).</li><li>Huizinga, E., Van Der Meulen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vestibular+rotatory+and+optokinetic+reactions+in+the+pigeon.">Vestibular rotatory and optokinetic reactions in the pigeon.</a> Ann. Otol. Rhinol. Laryngol. 60, 927-947 (1951).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+Acuity+and+Contrast+Sensitivity+of+Adult+Zebrafish.">Visual Acuity and Contrast Sensitivity of Adult Zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Mueller, K. P., Schnaedelbach, O. D., Russig, H. D., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VisioTracker,+an+innovative+automated+approach+to+oculomotor+analysis.">VisioTracker, an innovative automated approach to oculomotor analysis.</a> J. Vis. Exp. (56), e3556 (2011).</li><li>Zou, S. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+the+optokinetic+response+to+study+visual+function+of+zebrafish.">Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish.</a> J. Vis. Exp. (36), e1742 (2010).</li><li>Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+measurements+of+the+optokinetic+response+in+adult+fish.">Quantitative measurements of the optokinetic response in adult fish.</a> J. Neurosci. Methods. 186, 29-34 (2010).</li><li>Li, L., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+dominant+form+of+inherited+retinal+degeneration+caused+by+a+non-photoreceptor+cell-specific+mutation.">A dominant form of inherited retinal degeneration caused by a non-photoreceptor cell-specific mutation.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 94, 11645-11650 (1997).</li><li>Ren, J. Q., McCarthy, W. R., Zhang, H., Adolph, A. R., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+visual+responses+of+wild-type+and+hypopigmented+zebrafish.">Behavioral visual responses of wild-type and hypopigmented zebrafish.</a> Vision Res. 42, 293-299 (2002).</li><li>Maaswinkel, H., Mason, B., Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ENU-induced+late-onset+night+blindness+associated+with+rod+photoreceptor+cell+degeneration+in+zebrafish.">ENU-induced late-onset night blindness associated with rod photoreceptor cell degeneration in zebrafish.</a> Mech. Ageing Dev. 124, 1065-1071 (2003).</li><li>Stujenske, J. M., Dowling, J. E., Emran, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bugeye+mutant+zebrafish+exhibits+visual+deficits+that+arise+with+the+onset+of+an+enlarged+eye+phenotype.">The bugeye mutant zebrafish exhibits visual deficits that arise with the onset of an enlarged eye phenotype.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 4200-4207 (2011).</li><li>Veth, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+zebrafish+lrp2+result+in+adult-onset+ocular+pathogenesis+that+models+myopia+and+other+risk+factors+for+glaucoma.">Mutations in zebrafish lrp2 result in adult-onset ocular pathogenesis that models myopia and other risk factors for glaucoma.</a> PLoS Genet. 7, e1001310 (2011).</li><li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> THE ZEBRAFISH BOOK, A guide for the laboratory use of zebrafish (Danio rerio). , (2007).</li><li>Cagenello, R., Arditi, A., Halpern, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Binocular+enhancement+of+visual+acuity.">Binocular enhancement of visual acuity.</a> J. Opt. Soc. Am. A Opt. Image Sci. Vis. 10, 1841-1848 (1993).</li><li>Brockerhoff, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measuring+the+optokinetic+response+of+zebrafish+larvae.">Measuring the optokinetic response of zebrafish larvae.</a> Nat. Protoc. 1, 2448-2451 (2006).</li><li>Hodel, C., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Computer-based+analysis+of+the+optokinetic+response+in+zebrafish+larvae.">Computer-based analysis of the optokinetic response in zebrafish larvae.</a> CSH Protoc. 2008, pdb prot4961 (2008).</li><li>Huber-Reggi, S. P., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+optokinetic+response+in+zebrafish+by+computer-based+eye+tracking.">Analysis of optokinetic response in zebrafish by computer-based eye tracking.</a> Methods Mol. Biol. 935, 139-160 (2013).</li><li>Tappeiner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+and+contrast+sensitivity+of+adult+zebrafish.">Visual acuity and contrast sensitivity of adult zebrafish.</a> Front. Zool. 9, 10 (2012).</li><li>Saszik, S., Bilotta, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+temperature+on+the+dark-adapted+spectral+sensitivity+function+of+the+adult+zebrafish.">The effects of temperature on the dark-adapted spectral sensitivity function of the adult zebrafish.</a> Vision Res. 39, 1051-1058 (1999).</li><li>Haug, M. F., Biehlmaier, O., Mueller, K. P., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+acuity+in+larval+zebrafish:+behavior+and+histology.">Visual acuity in larval zebrafish: behavior and histology.</a> Front. Zool. 7, 8 (2010).</li><li>Curcio, C. A., Sloan, K. R., Kalina, R. E., Hendrickson, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+photoreceptor+topography.">Human photoreceptor topography.</a> J. Comp. Neurol. 292, 497-523 (1990).</li><li>Kalloniatis, M., Luu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual Acuity. , (1995).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Vesileyle balık su tankının içine kaçabilir. Bu kuyruk hareketsiz hale getirmek için önemlidir. Balığın vücut üzerinde ince bir sünger / havlu Ayrıca kullanımı da uzun süre askıya balık tutmak için çok değerli olduğu tespit edildi. Biz balık zarar vermeden bu yordamı kullanarak daha 30 dakika boyunca hareketsiz balık tutmayı başardık. Zaman bu miktar binoküler ve monoküler hem keskinliği yapmak için fazlasıyla yeterli. Fiziksel olarak dönen bir birimin ya da dijital bir görüntü 18-22 sunarak buradan ve başka bir yerde tarif edildiği gibi ızgaranın sunumu ya da yapılabilir. Her iki tür avantaj ve dezavantajları var. Biz hem maliyet nedenleri ve teknik özellikleri için fiziksel rotasyon kullanmayı seçti. Bilgisayar ve görüntüleme cihazları hariç, burada açıklanan OKR cihaz yaklaşık 150 $ için inşa edilebilir. OKR vis belirleyici bir amacı, bir araçtıryetişkin Zebrafish ual keskinliği. Vizyon için birkaç diğer visuomotor analizler önceki deneylerde kullanılan ve ağır konu olmamışsa olsa bile elektroretinogram başarıyla, yetişkin zebrabalıkları gözünde yapılmış olsa da, yetişkin zebrabalıkları OKR birçok yeni deneysel şartlarda 22 kapıyı açar. Bu çalışmada göz hastalığı modellerinde görme keskinliği farkı tanımlayarak, zamanla görme keskinliği değişiklikleri ölçmede okr adlı programını gösterdi ve monoküler görme keskinliği belirlemede gelmiştir. İlginç olarak, erişkin zebra balığı görme İnsan gözü (20/20) ile karşılaştırıldığında, yaklaşık 20/1, 000 (0.60 cpd -0,3 logMAR&#39;dan dönüştürüldüğünde) &#39;dir. Bu kötü görünse de, Zebra balığı gözleri çok iyi çevresi için uygundur. 6.5 su cm, polikarbonat birkaç milimetre, ve hava başka bir santimetre bakarak görsel görevi rağmen, balık oldukça iyi bir performans! Biz yetişkin zebrabalıkları keskinliği Abo olduğunu bulunduut. 23. Kontrast bunların fotoreseptör aralık verilmiş çıkarsanabilecek% 70 olduğu optimum insan performans ile ~ 20/12, ki bu yaklaşık% 80 20/10 öngörülen ve yetişkin Zebrafish görme yeteneğini ölçmek için OKR teknik etkileyici 24 25. Bağımsız göz görme keskinliği ölçüm tekniği, bir gözü tedavi edilebilir ve diğer bir kontrol olarak kullanılmıştır edildiği çalışmalar için olanak sağlayacaktır. Ayrıca, bu tür katarakt gelişir lrp2/bugeye veya balık gibi asimetrik göz gelişimi ile balık daha doğru takip edilebilir. Bu bakım doğru çizgiler için gözlerden mesafeyi ölçmek için ve görüş alanını tam tıkamak için alınması gerektiği unutulmamalıdır. Bu teknik Zebrafish görme fonksiyonunun daha doğru ve spesifik önlemlere kapıyı açmak gerekir.

Zebra balığı (Br.rerio) nedeniyle diğer omurgalılar, kısa yaşam döngüsü, ve genetik olarak değiştirilmiş mutantlar 1,2 kullanılabilirliği kendi retinanın benzerliği görsel fizyoloji çalışmak için iyi bir model vardır. Optokinetik refleks / tepki / nistagmus (OKR) düzgün takip ve hızlı sakkaddan göz hareketlerinin bir kombinasyonudur. 60 yılı aşkın için klinisyenler OKR objektif hastalarda görme keskinliği ölçümü için kullanılan ve bebek görme yeteneklerinin 3-5 belirlenmesi için özellikle yararlıdır edilebilir olduğunu göstermiştir. Hayvanlarda okr kaydedilmiş ilk kullanımı 1950&#39;lerde 6 güvercin kullanıyordum. Daha yakın zamanlarda, OKR larva zebrabalıkları görsel fonksiyonu değerlendirmede ve genellikle görme bozukluğu 1,2 olan genetik mutantlar için ekran için kullanılan için değerli bir araç haline gelmiştir. OKR yaygın larva Zebrafish görme fonksiyonunu belirlemek için kullanılmış olsa da, sadece son zamanlarda yetişkin zebra kanıtlanmıştır7-10 arası balık. Tappeiner tarafından yeni bir kağıt ve diğ. Geleneksel fareler için kullanılan piyasada mevcut optomotor sistemi kullanır, OptoMotry, yetişkin zebrafish görme keskinliği hatta çeşitli açısal hızlarda 7 karşısında, derece başına 0.59 çevrimler (CPD) ~, oldukça sabit kaldığını göstermek için . OKR larva zebra balığı çalışmalarda oldukça yararlı olduğu kanıtlanmıştır, ancak görsel davranışı için diğer yöntemler başarıya ilişkin olarak değişen derecelerde zebra balığı yetişkinlerde kullanılmıştır. Kaçış tepkisi deneyi hem pigmentasyon mutantlar, parlak ışık koşullarında 11,12 görsel tepkiler azalttı, albino ve yakut Zebra balığı gösterdi. Bu aynı kaçış tepkisi deneyi de başarıyla yaş 13 2 yıllık da olsa, gece körlüğü d mutantlar belirlemiştir. Ancak, kaçış tepkisi tahlil kusurları olmadan değildir. Bu kesin bir görme fonksiyonu atfetmek zordur ve sadece bir brüt approximatio olduğunuGörsel değişikliklerin n - değişiklik tanımlanır önce büyük bir değişiklik alır anlamına gelir. Görme bozukluğu olan yetişkin zebrafish belirlenmesi için geliştirilmiş olan bir başka yöntem, optomotor tepkisi (OMR) 11&#39;dir. Bu deneyde, balık merkezinde bir opak sütun ile dairesel tankı yerleştirilir. Siyah ve beyaz çizgili tankı etrafında döndürün ve balık şerit hareket yönünde yüzme ile görevlendirilmiştir. Kaçış tepkisi gibi, OMR yetişkin zebrafish visuomotor yetenekleri üzerinde duruluyor. Ancak böyle lrp2/bugeye mutantlar 14 gibi görme bozuklukları, balık tanımlamak için başarıyla kullanılmaktadır. Lrp2/bugeye Zebra balığı sergi buphthalmos, yüksek göz içi basıncı, OMR azalmış, ve progresif retinal dejenerasyon 14,15. Birçok çalışmalar genellikle öznel ve kant olamaz yetişkin zebrabalıkları visuomotor yetenekleri, kullanmışitatively analiz edilmiştir. Okr kullanarak, bir daha objektif yetişkin balık görme keskinliği eğitim görebilirsiniz. Biz başlangıçta larva çalışmaları 1 için kullanılan bir sonra modellenmiştir kendi OKR cihazı, inşa etmişlerdir. Bu çalışmada OKR tek gözlü ve zebrabalıkları binoküler görme keskinliği her iki hesaplamak için kullanılabileceğini göstermektedir.

<table><tbody><tr><td>Super Low Light Black White Video Security Camera</td><td>Super Circuits</td><td>PC164CEX-2</td><td> Any low light camera may be used</td></tr><tr><td>Arduino Duemilanove microcontroller</td><td>Adafruit Industries</td><td></td><td> The Arduino Uno is also compatible with the speed control software.</td></tr><tr><td>Tricaine Methanesulfonate</td><td>VWR</td><td>101107-950</td><td></td></tr></tbody></table>

the optokinetic response as a quantitative measure of visual acuity in zebrafish

Zebra balığı genellikle larva balık odaklanmış veya basit bir tepki göstermiştir önceki yöntemlerden ancak birçok görme araştırma için kanıtlanmış bir modeli vardır. Daha yakın Zebrafish yetişkin görsel davranış ilgi haline gelmiştir, ancak belirli tepkilerini ölçmek için yöntemler gelen yeni. Bu açığı gidermek için, biz tekrar tekrar ve doğru bir yetişkin zebrabalıkları görme keskinliği ölçmek için optokinetik yanıtı (OKR) kullanmak için bir yöntem geliştirmek için yola çıktı. Burada Yetişkin Zebra Görme keskinliği, binoküler ve monoküler keskinliği dahil olmak üzere, ölçülebilir olduğunu göstermektedir. Balık işlemi sırasında zarar olmadığından, görme keskinliği zaman kısa veya uzun süreler boyunca ölçülebilir ve karşılaştırılabilir. Burada anlatılan görme keskinliği ölçümleri istenirse hızlı, yüksek verim için ve ek görsel işlemler için izin de yapılabilir. Bu analiz türü ilaç müdahale çalışmalarında ya da hastalığın ilerlemesine soruşturmalarına vesile olur.

OKR Cihaz İşlevsellik Yukarıda açıklandığı ve Şekil az bakım ile 1 fonksiyonlar gösterildiği gibi OKR cihaz. Kuyruk immobilize, aşama 2.3 &#39;de belirtildiği gibi, kayıt sırasında ölçülü balıkları tutmak için çok önemlidir. Yeterince hareketsiz, balık zaman uzun süreler için OKR cihazda tutulabilir. Daha fazla veri, her bir balık için toplanır, böylece Sonuç olarak, bakım, ilk hareketsiz adımları sırasında alınmalıdır. Görme keskinliği ölçümleri Binoküler OKR kolayca normal erişkin balık açığa çıkartılır. Yukarıdaki prosedürü izleyerek bir çok yaştan zebrabalıkları (Şekil 2) için görme keskinliği bulabilirsiniz. Biz kaydedilen en iyi dürbün mekansal keskinliği 0.74 gbm oldu. Şekil 2 &#39;de belirtildiği gibi, iki gözlü keskinliği genellikle yaşla orantılı olarak artar (n = 46, p = 0.002 ile SPSS V14 ANOVA), fakat düzeyleri offyaş yaklaşık 12 ay sonra. Yabani tip, biz yaştaki lrp2/bugeye balık 5 aylık vahşi tip balık olarak ölçülen görme keskinliği karşılaştırıldığında, biz lrp2/bugeye balık anlamlı keskinliği (p &lt;0.001 azaltılmış buldu: 0.49 ± 0.05 gbm; n = 8; lrp2/bugeye: 0.35 ± 0.06, n = 10; Excel kullanarak Student T-testi). Sağ göz tıkanmasıyla sol göz için görme keskinliği tam tersi tespit edilebilir. Binoküler keskinliği karşılaştırıldığında, binoküler toplama insan görme 17 (Şekil 3) benzer görülmektedir. Binoküler görme keskinliği genellikle sağ (OD) veya sol bağımsız olarak ölçülen (OS) keskinliği ya% 5-10 daha iyi oldu. Bazı bireysel balık için fark% 25 iyileşme oldu. <img alt="Şekil 1" fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig1.jpg" width="500px" /> Şekil 1. OKR recording. A) OKR cihaz ayarlanabilir ışık yoğunluğu ayarlarında (300-8.000 lux) ile davul ve mikroskop dönen 14,5 cm çapında oluşur. Bir kamera bitişik bir monitörde bir canlı yayın sağlar. Derece (GBM) göre gereken şekilde dönen tambur saat yönünde ve saatin tersi yönde değiştirilebilir ve uzamsal frekans ızgaralar hem de çeşitli hız ayarı vardır yerleştirilir ve çıkarılır. B) Balık güvenli ve döner tamburun ortasına yerleştirilir. C) döngüleri hesaplanır Mhg = kullanarak <img alt="" src="img2.png" /> <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig1highres.jpg" target="_blank">Daha büyük resmi görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 2," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig2.jpg" width="500px" /> Şekil 2. Görme keskinliği yaşla birlikte değişir. Grafik 5 ölçülen bağımsız görme keskinliğini gösterir -<html> Yaş 15 ay. Görme keskinliği genellikle gelişmenin ilk yıl boyunca artar ve daha sonra 15 aylıkken (p = SPSS v14 kullanarak 0.002 ANOVA) de biraz azalır. Her nokta ya 1 ya da birkaç balık temsil edebilir. Görme keskinliği devir / derece (CPD) olarak ölçülür. (N = toplam 46, 5 ayda 8; 6 ayda 4; 8 ayda 7, 9 ayda 6; 10 ayda 11; 11 aylıkken 2; 12 ayda 2 ve 15 ayda 6). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig2highres.jpg" target="_blank">buraya tıklayın Daha büyük resmi görmek için</a> . <img alt="Şekil 3," fo:content-width="6in" src="/files/ftp_upload/50832/50832fig3.jpg" width="500px" /> Şekil 3,. Binoküler görme keskinliği toplamı etkisi. Binoküler (OU) görme keskinliği sağda (OD) veya sola (OS) göz keskinliği göre genellikle daha yüksektir. Bu özel gruptaki OS keskinliği daha düşük bulunmuştur. (* P = 0.006, N = 8),jove.com/files/ftp_upload/50832/50832fig3highres.jpg &quot;target =&quot; _blank &quot;&gt; büyük resmi görebilmek için buraya tıklayın.

Watch this Scientific Journal Video about The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish at JoVE.com

The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Zebra balığı birçok araştırma alanları için değerli bir araç olmuştur. Burada görsel bir yanıt ortaya çıkarmak ve yetişkin Zebrafish fonksiyonel görme keskinliği hesaplamak için bir yöntem ortaya koymaktadır.

Zebra balığı görme keskinliğinin bir nicel ölçü olarak Optokinetik Tepki

Zebrafish are a proven model for vision research, however many of the  earlier methods generally focused on larval fish or demonstrated a simple  ...

the-optokinetic-response-as-quantitative-measure-visual-acuity

Research

JoVE Journal

Neuroscience

20.4K Görüntüleme.  Western University of Health Sciences.  Zebra balığı birçok araştırma alanları için değerli bir araç olmuştur. Burada görsel bir yanıt ortaya çıkarmak ve yetişkin Zebrafish fonksiyonel görme keskinliği hesaplamak için bir yöntem ortaya koymaktadır. 

Video: The Optokinetic Response as a Quantitative Measure of Visual Acuity in Zebrafish

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

Here we describe a modified version of a double fluorescence in situ hybridization (dFISH) method optimized for detecting two mRNAs of interest in fresh frozen brain sections. Our group has successfully used this approach to study gene co-regulation. More specifically, we have used this dFISH method to explore the anatomical organization, neurochemical properties, and the impact of sensory experience in central sensory circuits, at single cell resolution. This protocol has been validated in brain tissue from mice, rats and songbirds but is expected to be easily adaptable to other vertebrate species, as well as to an array of non-neural tissues. In this film we provide a detailed demonstration of the main steps of this procedure.

Double Fluorescence in situ Hybridization in Fresh Brain Sections

This protocol involves a non-radioactive in-situ hybridization procedure that enables the simultaneous identification of two transcript species, at a single cell resolution, in thin sections of the vertebrate brain.

Çift Floresans In situ Taze Beyin Bölüm Hibridizasyon

Here we describe a modified version of a double fluorescence in situ hybridization (dFISH) method optimized for detecting two mRNAs of interest in fresh ...

Nörobilim

A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities 

The optokinetic reflex (OKR) is a basic visual reflex exhibited by most vertebrates and plays an important role in stabilizing the eye relative to the visual scene. However, the OKR requires that an animal detect moving stripes and it is possible that fish that fail to exhibit an OKR may not be completely blind. One zebrafish mutant, the no optokinetic response c (nrc) has no OKR under any light conditions tested and was reported to be completely blind. Previously, we have shown that OFF-ganglion cell activity can be recorded in these mutants. To determine whether mutant fish with no OKR such as the nrc mutant can detect simple light increments and decrements we developed the visual motor behavioral assay (VMR). In this assay, single zebrafish larvae are placed in each well of a 96-well plate allowing the simultaneous monitoring of larvae using an automated video-tracking system. The locomotor responses of each larva to 30 minutes light ON and 30 minutes light OFF were recorded and quantified. WT fish have a brief spike of motor activity upon lights ON, known as the startle response, followed by return to lower-than baseline activity, called a freeze. WT fish also sharply increase their locomotor activity immediately following lights OFF and only gradually (over several minutes) return to baseline locomotor activity. The nrc mutants respond similarly to light OFF as WT fish, but exhibit a slight reduction in their average activity as compared to WT fish. Motor activity in response to light ON in nrc mutants is delayed and sluggish. There is a slow rise time of the nrc mutant response to light ON as compared to WT light ON response. The results indicate that nrc fish are not completely blind. Because teleosts can detect light through non-retinal tissues, we confirmed that the immediate behavioral responses to light-intensity changes require intact eyes by using the chokh (chk) mutants, which completely lack eyes from the earliest stages of development. In our VMR assay, the chk mutants exhibit no startle response to either light ON or OFF, showing that the lateral eyes mediate this behavior. The VMR assay described here complements the well-established OKR assay, which does not test the ability of zebrafish larvae to respond to changes in light intensities. Additionally, the automation of the VMR assay lends itself to high-throughput screening for defects in light-intensity driven visual responses.

A Behavioral Assay to Measure Responsiveness of Zebrafish to Changes in Light Intensities

We developed the Visual-Motor Response to quantitate the motor output of larval zebrafish in response to light increments and decrements. We also examined zebrafish vision mutants, including the no optokinetic response (nrc) mutants, which were thought to be completely blind when tested by another vision assay, the optokinetic reflex.

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

The optokinetic reflex (OKR) is a basic visual reflex exhibited by most vertebrates and plays an important role in stabilizing the eye relative to the ...

Biyoloji

VisioTracker, an Innovative Automated Approach to Oculomotor Analysis

Investigations into the visual system development and function necessitate quantifiable behavioral models of visual performance that are easy to elicit, robust, and simple to manipulate. A suitable model has been found in the optokinetic response (OKR), a reflexive behavior present in all vertebrates due to its high selection value. The OKR involves slow stimulus-following movements of eyes alternated with rapid resetting saccades. The measurement of this behavior is easily carried out in zebrafish larvae, due to its early and stable onset (fully developed after 96 hours post fertilization (hpf)), and benefitting from the thorough knowledge about zebrafish genetics, for decades one of the favored model organisms in this field. Meanwhile the analysis of similar mechanisms in adult fish has gained importance, particularly for pharmacological and toxicological applications.
Here we describe VisioTracker, a fully automated, high-throughput system for quantitative analysis of visual performance. The system is based on research carried out in the group of Prof. Stephan Neuhauss and was re-designed by TSE Systems. It consists of an immobilizing device for small fish monitored by a high-quality video camera equipped with a high-resolution zoom lens. The fish container is surrounded by a drum screen, upon which computer-generated stimulus patterns can be projected. Eye movements are recorded and automatically analyzed by the VisioTracker software package in real time.
Data analysis enables immediate recognition of parameters such as slow and fast phase duration, movement cycle frequency, slow-phase gain, visual acuity, and contrast sensitivity.
Typical results allow for example the rapid identification of visual system mutants that show no apparent alteration in wild type morphology, or the determination of quantitative effects of pharmacological or toxic and mutagenic agents on visual system performance.

The VisioTracker is an automated system for the quantitative analysis of visual performance of larval and small adult fish based on the recording of eye movements. It features full control over visual stimulus properties and real-time analysis, enabling high-throughput research in fields such as visual system development and function, pharmacology, neural circuit studies and sensorimotor integration.

VisioTracker, Okülomotor Analizi Yenilikçi Otomatik Yaklaşım

Investigations into the visual system development and function necessitate quantifiable behavioral models of visual performance that are easy to elicit, ...

Using the optokinetic response to study visual function of zebrafish

Optokinetic response (OKR) is a behavior that an animal vibrates its eyes to follow a rotating grating around it. It has been widely used to assess the visual functions of larval zebrafish1-5. Nevertheless, the standard protocol for larval fish is not yet readily applicable in adult zabrafish. Here, we introduce how to measure the OKR of adult zebrafish with our simple custom-built apparatus using a new protocol which is established in our lab. Both our apparatus and step-by-step procedure of OKR in adult zebrafish are illustrated in this video. In addition, the measurements of the larval OKR, as well as the optomotor response (OMR) test of adult zebrafish, are also demonstrated in this video. This OKR assay of adult zebrafish in our experiment may last for up to 4 hours. Such OKR test applied in adult fish will benefit to visual function investigation more efficiently when the adult fish vision system is manipulated.
Su-Qi Zou and Wu Yin contributed equally to this paper.

Optokinetic response has been widely used to assess the visual functions of larval zebrafish. Nevertheless, the standard protocol for larval fish is not yet readily applicable in adults1-5. Here, we introduce how to measure the OKR of adult zebrafish using a new protocol which is established in our lab.

Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt

Optokinetic response (OKR) is a behavior that an animal vibrates its eyes to follow a rotating grating around it. It has been widely used to assess the ...

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response is a vision-based, reflexive behavior that has been observed in all vertebrates tested. Tadpole eyes are small so the tail flip response was used as alternative measure, which requires a trained technician to record the subtle response. We developed an alternative behavior assay based on the fact that tadpoles prefer to swim on the white side of a tank when placed in a tank with both black and white sides. The assay presented here is an inexpensive, simple alternative that creates a response that is easily measured. The setup consists of a tripod, webcam and nested testing tanks, readily available in most Xenopus laboratories. This article includes a movie showing the behavior of tadpoles, before and after severing the optic nerve. In order to test the function of one eye, we also include representative results of a tadpole in which each eye underwent retinal axotomy on consecutive days. Future studies could develop an automated version of this assay for testing the vision of many tadpoles at once.

A Simple Behavioral Assay for Testing Visual Function in Xenopus laevis

Xenopus laevis tadpoles prefer swimming on the white side of a black/white tank. This behavior is guided by their vision. Based on this behavior, we present a simple assay to test the visual function of tadpoles.

Test Görsel Fonksiyonu için Basit Bir Davranış Testi<em&gt; Xenopus laevis</em

Measurement of the visual function in the tadpoles of the frog, Xenopus laevis, allows screening for blindness in live animals. The optokinetic response ...

Electroretinogram Analysis of the Visual Response in Zebrafish Larvae

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the surface of the cornea, electrical activity generated in response to light can be measured and used to assess the activity of retinal cells in vivo. This manuscript describes the use of the ERG to measure visual function in zebrafish. Zebrafish have long been utilized as a model for vertebrate development due to the ease of gene suppression by morpholino oligonucleotides and pharmacological manipulation. At 5-10 dpf, only cones are functional in the larval retina. Therefore, the zebrafish, unlike other animals, is a powerful model system for the study of cone visual function in vivo. This protocol uses standard anesthesia, micromanipulation and stereomicroscopy protocols that are common in laboratories that perform zebrafish research. The outlined methods make use of standard electrophysiology equipment and a low light camera to guide the placement of the recording microelectrode onto the larval cornea. Finally, we demonstrate how a commercially available ERG stimulator/recorder originally designed for use with mice can easily be adapted for use with zebrafish. ERG of larval zebrafish provides an excellent method of assaying cone visual function in animals that have been modified by morpholino oligonucleotide injection as well as newer genome engineering techniques such as Zinc Finger Nucleases (ZFNs), Transcription Activator-Like Effector Nucleases (TALENs), and Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/Cas9, all of which have greatly increased the efficiency and efficacy of gene targeting in zebrafish. In addition, we take advantage of the ability of pharmacological agents to penetrate zebrafish larvae to evaluate the molecular components that contribute to the photoresponse. This protocol outlines a setup that can be modified and used by researchers with various experimental goals.

We present a method for the electroretinographic (ERG) analysis of zebrafish larvae utilizing micromanipulation and electroretinography techniques. This is a simple and straightforward method for assaying visual function of zebrafish larvae in vivo.

Zebra balığı Larva Görsel Tepki Elektroetinogram Analizi

The electroretinogram (ERG) is a noninvasive electrophysiological method for determining retinal function. Through the placement of an electrode on the ...

A New Optokinetic Testing Method to Measure Rat Vision

Optokinetic nystagmus (OKN) is a reflexive eye movement initiated by the motion of visual stimuli in the field of vision. The head-tracking movement associated with OKN is commonly used as a measure of visual function in rodents. To record OKN responses in normal and experimental rats, a simple and inexpensive apparatus has been developed. This setup uses two tablet screens to display the OKN visual stimulus consisting of high contrast black and white stripes generated using the OKN Stripes Visualization Web Application, a freely available software. The rat is placed inside a clear Plexiglass holder that limits&#160;movement so that the&#160;rat&#39;s head continuously faces the OKN display screen. The position of the rat holder can be changed to adjust the distance between the rat and the display screen. A micro-camera positioned above the rat holder is used to record the rat&#39;s visual activities. These recordings can be used for quantitative assessments. Based on the presence or absence of clear head-tracking, the OKN responses at different spatial frequencies can be determined. The collected data demonstrates a novel technique for reliable measurement of visual acuity in normal and retinal degenerate rats.

The Optokinetic Nystagmus (OKN) behavioral testing method is used for the assessment of visual acuity in rodents. Here a simple method is demonstrated that can be easily set up in research laboratories for a reliable assessment of visual function in both normal and experimental rats.

Optokinetic nystagmus (OKN) is a reflexive eye movement initiated by the motion of visual stimuli in the field of vision. The head-tracking movement ...

Farelerde Optokinetik Refleks Tepkilerinin Değerlendirilmesi: Yeni Bir Yüksek Hassasiyetli Protokol

Quantification of Visual Feature Selectivity of the Optokinetic Reflex in Mice

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize retinal images. Due to its importance and robustness, the OKR has been used to study visual-motor learning and to evaluate the visual functions of mice with different genetic backgrounds, ages, and drug treatments. Here, we introduce a procedure for evaluating OKR responses of head-fixed mice with high accuracy. Head fixation can rule out the contribution of vestibular stimulation on eye movements, making it possible to measure eye movements triggered only by visual motion. The OKR is elicited by a virtual drum system, in which a vertical grating presented on three computer monitors drifts horizontally in an oscillatory manner or unidirectionally at a constant velocity. With this virtual reality system, we can systematically change visual parameters like spatial frequency, temporal/oscillation frequency, contrast, luminance, and the direction of gratings, and quantify tuning curves of visual feature selectivity. High-speed infrared video-oculography ensures accurate measurement of the trajectory of eye movements. The eyes of individual mice are calibrated to provide opportunities to compare the OKRs between animals of different ages, genders, and genetic backgrounds. The quantitative power of this technique allows it to detect changes in the OKR when this behavior plastically adapts due to aging, sensory experience, or motor learning; thus, it makes this technique a valuable addition to the repertoire of tools used to investigate the plasticity of ocular behaviors.

Yazar Spotlight: Farelerde optokinetik refleksin görsel özellik seçiciliğini incelemek için doğru ve nicel bir yaklaşım 

Here, we describe a standard protocol for quantifying the optokinetic reflex. It combines virtual drum stimulation and video-oculography, and thus allows precise evaluation of the feature selectivity of the behavior and its adaptive plasticity.

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi

The optokinetic reflex (OKR) is an essential innate eye movement that is triggered by the global motion of the visual environment and serves to stabilize ...

Zebra balığı görme keskinliğinin bir nicel ölçü olarak Optokinetik Tepki

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Çift Floresans In situ Taze Beyin Bölüm Hibridizasyon

Işık Parlaklıkları değişiklikler Zebra balığı, Duyarlılık Tedbir Davranış Testi

VisioTracker, Okülomotor Analizi Yenilikçi Otomatik Yaklaşım

Zebrafish görme fonksiyonu çalışma optokinetik yanıt

Test Görsel Fonksiyonu için Basit Bir Davranış Testi

Zebra balığı Larva Görsel Tepki Elektroetinogram Analizi

A New Optokinetic Testing Method to Measure Rat Vision

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi

Farelerde Optokinetik Refleksin Görsel Özellik Seçiciliğinin Ölçülmesi