Integra dermal rejenerasyon şablon nazik Integra LifeSciences Corporation tarafından sağlanmıştır. Çalışmalarını destekleyen fonların Kaynaklar: (. No 15090007) Bu çalışma kısmen CIRM-Bmbf Erken Translational II Ödülü ve Genom düzenlenmesi için FONDAP Merkezi&#39;nin jte hem tarafından finanse edilmiştir.

İskelelerin 1. Hazırlık <ol><li> 12 mm biyopsi yumruklar kullanarak iskelelerinin örnekleri oluşturun. </li><li> , Darağacında içine biyoaktif molekülleri veya hücreleri tanıtmak nazikçe steril bir gazlı bez ile onları sıkarak iskeleleri tahliye etmek. Daha sonra biyolojik olarak aktif moleküllerin ya da ilgi hücreleri içeren bir çözeltinin 160 ul ilave edilerek rehidrate iskeleleri. Çift-kontrol gibi MTT Tahliller gibi metabolik deneyleri yoluyla hücreleri ile biyoaktivasyonunun başarısını. </li><li> Eğer gerekli ise aşama 1.2 &#39;de tarif edildiği gibi, rehidrasyon boyunca yine bir fibrin-trombin çözeltisi ya da bir hidrojel içinde, örneğin bunları sağlayarak bileşikler ya da hücreler bir yapı iskeleti içine test edilecek sabitleyin. NOT: bileşikleri veya hücrelerin mekanik malzeme eklemek değilsiniz Bu adım yardımcı olabilir. Bir de bileşiklerin serbest dinamiklerini kontrol edebilir .. </li><li> Kestirme tarafından, her deney ve kontrol grubundaki her iskele altına alınacaktır titanized kafesleri, hazırlayıngr üzerinden yuvarlak şekilli parçalar, çapı yaklaşık 14 mm. NOT: titanized örgü yara yatağından rejenere doku sınırlandırmak için gerekli fiziksel bir sınır olarak çalışmaktadır. </li></ol> 2. Hayvanlar <ol><li> Sunulan modelin uygulanmasından önce, ilgili hayvan koruma yasaları danışmak ve yerel yetkililerden izin almak. Bu çalışmada, bütün deneyler mevcut Alman hayvan refahı Kanuna göre, fareler ile yapıldı ve Yukarı Bavyera Bölge Hükümeti (Regierung von Oberbayern) tarafından onaylanmıştır. </li><li> Dikkatle hayvan ve gerginlik seçin. Modeli fareler için kurulmuş olmasa da bu, sıçanlar, tavşanlar, domuzlar ya da diğer yaygın olarak hayvanlar için tercüme edilebilir. </li><li> Eğer kürklü hayvanlar ile çalışıyoruz durumda, iskelelerinin implantasyon öncesi hayvanların sırtını traş. NOT: Bu çalışma 20 g ve 25 g, ancak farklı yaş ve b arasında bir vücut ağırlığı ile yaşları 6 ila 8 haftalık fareler kullanırody ağırlıkları da kullanılabilir. </li></ol> 3. Anestezi <ol><li> Steril koşullar altında operasyon gerçekleştiirlmesidir. Hayvanın normal vücut sıcaklığının muhafaza edilmesi amacıyla, bir sıcak tutma mat kullanın. </li><li> Anestezi Enhalatif önce hayvan / kg vücut ağırlığı 0.05-0.1 mg, deri altına her 8 saat arasında bir dozda Buprenorphin alır. </li><li> Inhalatif anestezi (Isoflurane) altında hayvan koyun veya eşdeğer standart prosedürleri uygulamak. Yavaşça hayvanın ayak sıkarak veya bir deri tutam yoluyla yada anestezi onaylayın. </li><li> , Exsiccosis önlemek işlemin başında 0.5 ml fizyolojik tuzlu su çözeltisi deri altından enjekte edilmesiyle gerçekleştirilebilmektedir. </li></ol> Cilt 4. eksizyonu <ol><li> Yüzükoyun pozisyonda hayvan koyun ve ince bir ucu kalıcı kalem (Şekil 1A) ile fare arka orta hat işaretleyin. </li><li> Eksizyon alanını tanımlayın. Fig gösterilen bölgede kusurları yerleştirin1C yeniden. Kusurları çok kaudalden konursa, hayvanlar sosları ve iskeleleri kaldırmak için daha eğilimli olduğunu unutmayın. </li><li> 10 mm biyopsi yumruk (Şekil 1B) ile bilateral kusurları yuvarlak oluşturun. Delgi dikkatli bir şekilde deriye karşı zorlanır edilmesi ve deri yoluyla tamamen kesmek için, ancak eksizyon alanı (Şekil 1C ve 1E) tanımlamak için kullanılmamalıdır. </li><li> Forseps ile yavaşça belirgin cilt kaldırın ve ince cerrahi makas (Şekil 1F) kullanarak işaretli daire boyunca insizyon. Kanama durumunda, dikkatli bir şekilde, steril bir gazlı bez ile sıkıştırır. Eksizyon bir adım-adım açıklaması Şekil 1&#39;de gösterilmiştir. NOT: arıza nedeniyle cilt elastikiyeti defekt genişlemesini telafi etmek, iskeleleri oluşturmak için daha küçük bir yumruk ile oluşturulur. </li></ol> 5. İskele İmplantasyon <ol><li> Tita için yer yapmak içinrin, mesh, 2-4 mm (Şekil 2A) için yara sınırlarda deri ve altta uzanan doku ayrılmasını uzanır. </li><li> Doğrudan yara yatak ve yara kenarlarının (Şekil 2A ve B) altında defekt içine örgü titanized yerleştirin. </li><li> Yer doğrudan ağ üzeri iskeleleri. </li><li> Hafif yapı iskeletinin (Şekil 2C) üzerine bir kenarın bırakılmayacağı, 4-6 tek mili ile bitişik yara kenarlarına iskeleleri dikin. NOT: biyobozunur sütür kullanmaktan kaçının. </li><li> Yara alanına (Şekil 2D) izlenmesini izin verirken skafoldun korumak için kusurlar üzerinde şeffaf bir yara pansuman dikin. </li></ol> 6. Ameliyat Sonrası Bakım <ol><li> Soyunma ve iskelelerinin karşılıklı manipülasyon önlemek için kafes başına bir fare tutmak. </li><li> Gözlemleyerek motor aktivite, vücut ağırlığı, ağrı işaretleri, tolerans ile günlük olarak hayvanın genel durumunu değerlendirirpansuman ve otomatik kurcalanmaları. Ayrıca kanama, lokal ve sistemik enfeksiyon belirtileri ve soyunma pozisyon için yara alanı izlemek. </li><li> Hayvanın ağrı en aza indirmek için, 0.05-0.1 mg / kg vücut ağırlığı ya da eşdeğer bir analjezik ilaç dozunda günlük Buprenorphin enjekte edilir. </li><li> Fare yara pansuman kaldırır ya da zarar verirse, değiştirmek veya anestezi altında takın. </li></ol> İskele 7. Ötanazi ve Eksplantasyonu <ol><li> İstenen zaman noktalarında, pentobarbital (150 mg / kg) aşırı dozda alınması ile hayvanlar kurban. </li><li> Iskeleler ve olası (Şekil 3A) ve arka fare deri kadar içermelidir kalıcı bir kalem ile deri eksizyon sitesi işaretleyin. </li><li> Makas veya neşter bir çift ile işaretlenmiş çizgiler boyunca cildi İnsizyon. (Künt hazırlık yoluyla altta yatan doku, Fi iskeleler ve titanized örgü dahil tüm cilt, AyırGüre 3B). </li><li> Petri kabı uzattı Eksplante doku yerleştirin (Şekil 3C ve D) </li></ol> Vasküler Network 8. Görselleştirme ve <ol><li> Transillumination: <ol><li> Beyaz ışık (100 Watt standart ampul) güçlü bir kaynağı üzerinde bir Petri kabı monte edilerek, bir transillüminasyonu aygıtını kurun. </li><li> Dijital fotoğraf elde etmek için transilluminator üzerinde bir dijital kamera düzeltmek. </li><li> Ters transillüminasyon cihazın üzerine Petri tabağına numuneler. </li><li> Normal deri eşit büyüklükte alanları yanı sıra makro modunda tam iskelelerinin fotoğraf çekmek. Daha fazla dijital analiz için TIFF formatında görüntüleri depolamak. </li><li> , Başka biyokimyasal ve histolojik analizi için doku kaydedin. </li></ol></li><li> Dijital segmentasyon ve miktar: <ol><li> Fr elde edilebilir VesSeg-Aracı yazılımı indirin ve yükleyin: görevli ee <a href="http://www.isip.uni-luebeck.de/index.php?id=150&amp;L=2%255">http://www.isip.uni-luebeck.de/index.php?id=150&amp;L=2%255</a> . </li><li> VesSeg-Tool yazılımı ile resmi açın. </li><li> Dijital analiz (Seç → Görüntü) için yapı iskelesi kapsadığı görüntünün alanını seçin. </li><li> Seçeneğini &quot;Histeri eşikleme&quot; (Hesapla damar artırılması → Top-Hat dönüşüm → Görüntü → Gemi geliştirme filtre → Histeri eşiklendirme) kullanın gemilerin kontrastını artırmak için. </li><li> Damar haritası (Görüntü → Gemi geliştirme filtre → Histeri eşikleme → Eşik sınırları) içinde segmentasyonu ile devam edin. Ilk eşik (&quot;Gemi kapsama&quot;), bu yüzden bile uzaktan gemi gibi her piksel, geminin olarak etiketlenmiş olacaktır seçin. Özellikle damar benzeri damarlarda etiketli edilecek böylece sadece bu pikselleri ikinci eşik (&quot;Arka kapsama&quot;) seçin. </li><li> Olmayan yakalanan gemiler eklemek ve genellikle tüyleri ve dikiş gibi uzun ve ince, damar benzeri yapılar olan ortak yalancı pozitif yapıları ortadan kaldırmak için manuel otomatik segmentasyon teklifi edin. </li><li> Gemilerin uzunluğu ve (İkili görüntü istatistiği → Görüntü → Görüntü istatistik) gemiler tarafından kapsanan toplam alanını hesaplayın. NOT: damar uzunluklarının hesaplanması için, elde edilen damar harita kaplar 20 bir piksel genişliğinde hatlarına incelmiş. </li></ol></li><li> Yerli dokuya% 100 bir değer atanması, iskeleler gibi aynı parametreleri altında yerli deri alanını analiz eder ve o değere iskele ilgilidir. Beyaz piksellerin yüzdesini normal dokuda% 60 ve% 30 iskele ise, örneğin, bu iskeletin% 50 vaskülarizasyonun temsil eder. Not: Beyaz gemiler kapsama iskelesi etrafında bir kare alana atanır. Beyaz piksel kapsama yükünüzün sayısını ayarlayındairenin alanı kare (4 x R2) önemli ölçüde daha küçük (π x R2) olduğu dering. </li></ol>

<ol>
	<li>Rahaman, M. N., Mao, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+composite+tissue+constructs+for+regenerative+medicine.">Stem cell-based composite tissue constructs for regenerative medicine.</a> Biotechnology and Bioengineering. 91 (3), 261-284 (2005).</li><li>Lutolf, M. P., Hubbell, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+biomaterials+as+instructive+extracellular+microenvironments+for+morphogenesis+in+tissue+engineering.">Synthetic biomaterials as instructive extracellular microenvironments for morphogenesis in tissue engineering.</a> Nature Biotechnology. 23, 47-55 (2005).</li><li>Machens, H. G., Berger, A. C., Mailaender, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioartificial+skin.">Bioartificial skin.</a> Cells Tissues Organs. 167, 88-94 (2000).</li><li>Priya, S. G., Jungvid, H., Kumar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skin+tissue+engineering+for+tissue+repair+and+regeneration.">Skin tissue engineering for tissue repair and regeneration.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. 14, 105-118 (2008).</li><li>Papavasiliou, G., Cheng, M. H., Brey, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+vascularization+of+polymer+scaffolds.">Strategies for vascularization of polymer scaffolds.</a> Journal of Investigative Medicine. 58 (7), 838-844 (2010).</li><li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+tissue+engineering:+breathing+life+into+constructed+tissue+substitutes.">Angiogenesis in tissue engineering: breathing life into constructed tissue substitutes.</a> Tissue Engineering. 12, 2093-2104 (2006).</li><li>Zhong, S. P., Zhang, Y. Z., Lim, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+scaffolds+for+skin+wound+healing+and+dermal+reconstruction.">Tissue scaffolds for skin wound healing and dermal reconstruction.</a> Wiley Interdisciplinary Reviews Nanomedicine and Nanobiotechnology. 2 (5), 510-525 (2010).</li><li>Liu, G., Zhang, Y., Liu, B., Sun, J., Li, W., Cui, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bone+regeneration+in+a+canine+cranial+model+using+allogeneic+adipose+derived+stem+cells+and+coral+scaffold.">Bone regeneration in a canine cranial model using allogeneic adipose derived stem cells and coral scaffold.</a> Biomaterials. 34 (11), 2655-2664 (2013).</li><li>Hansson, A., Di Francesco, T., Falson, F., Rousselle, P., Jordan, O., Borchard, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+and+evaluation+of+nanoparticles+for+directed+tissue+engineering.">Preparation and evaluation of nanoparticles for directed tissue engineering.</a> International Journal of Pharmaceutics. 439 (1-2), 73-80 (2012).</li><li>Sarkar, S. D., Farrugia, B. L., Dargaville, T. R., Dhara, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chitosan-collagen+scaffolds+with+nano/microfibrous+architecture+for+skin+tissue+engineering.">Chitosan-collagen scaffolds with nano/microfibrous architecture for skin tissue engineering.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part A. 18, (2013).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+knitted+mesh-reinforced+collagen-chitosan+hybrid+scaffold+in+the+one-step+repair+of+full-thickness+skin+defects+in+rats.">The roles of knitted mesh-reinforced collagen-chitosan hybrid scaffold in the one-step repair of full-thickness skin defects in rats.</a> Acta Biomaterials. 9 (8), 7822-7832 (2013).</li><li>Rizzi, S. C., Upton, Z., Bott, K., Dargaville, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+dermal+wound+healing:+biomedical+device+approaches.">Recent advances in dermal wound healing: biomedical device approaches.</a> Expert Review of Medical Devices. 1, 143-154 (2010).</li><li>des Rieux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=3D+systems+delivering+VEGF+to+promote+angiogenesis+for+tissue+engineering.">3D systems delivering VEGF to promote angiogenesis for tissue engineering.</a> Journal of Controlled Release. 150, 272-278 (2011).</li><li>Reckhenrich, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioactivation+of+dermal+scaffolds+with+a+non-viral+copolymer-protected+gene+vector.">Bioactivation of dermal scaffolds with a non-viral copolymer-protected gene vector.</a> Biomaterials. 32, 1996-2003 (2011).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Key+Regulatory+Roles+of+the+PI3K/Akt+Signaling+Pathway+in+the+Functionalities+of+Mesenchymal+Stem+Cells+and+Applications+in+Tissue+Regeneration.">The Key Regulatory Roles of the PI3K/Akt Signaling Pathway in the Functionalities of Mesenchymal Stem Cells and Applications in Tissue Regeneration.</a> Tissue Engineering Part B Rev. 19, 516-528 (2013).</li><li>Fedorovich, N. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+endothelial+progenitor+cells+in+prevascularized+bone+tissue+engineering:+development+of+heterogenous+constructs.">The role of endothelial progenitor cells in prevascularized bone tissue engineering: development of heterogenous constructs.</a> Tissue Engineering Part A. 16 (7), 2355-2367 (2010).</li><li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteogenesis+and+angiogenesis+of+tissue-engineered+bone+constructed+by+prevascularized+&#946;-tricalcium+phosphate+scaffold+and+mesenchymal+stem+cells.">Osteogenesis and angiogenesis of tissue-engineered bone constructed by prevascularized &#946;-tricalcium phosphate scaffold and mesenchymal stem cells.</a> Biomaterials. 36, 9452-9461 (2010).</li><li>Cuadra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+results+of+burned+hands+treated+with+Integra.">Functional results of burned hands treated with Integra.</a> Journal of Plastic, Reconstructive &amp; Aesthetic Surgery. 65 (2), 228-234 (2012).</li><li>Wilcke, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF(165)+and+bFGF+protein-based+therapy+in+a+slow+release+system+to+improve+angiogenesis+in+a+bioartificial+dermal+substitute+in+vitro+and+in+vivo.">VEGF(165) and bFGF protein-based therapy in a slow release system to improve angiogenesis in a bioartificial dermal substitute in vitro and in vivo.</a> Langenbecks Arch Surg. 392 (3), 305-314 (2007).</li><li>Condurache, A., Aach, T., Grzybowsky, S., Machens, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vessel+segmentation+and+analysis+in+laboratory+skin+transplant+micro-angiograms.">Vessel segmentation and analysis in laboratory skin transplant micro-angiograms.</a> Proceedings of the Eighteenth IEEE Symposium on Computer-Based Medical Systems. , 21-26 (2005).</li><li>Danner, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+human+sweat+gland-derived+stem+cells+for+enhancing+vascularization+during+dermal+regeneration.">The use of human sweat gland-derived stem cells for enhancing vascularization during dermal regeneration.</a> Journal of Investigative Dermatology. 132 (6), 1707-1716 (2012).</li><li>Shaterian, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real+Time+Analysis+of+the+Kinetics+of+Angiogenesis+and+Vascular+Permeability+in+an+Animal+Model+of+Wound+Healing.">Real Time Analysis of the Kinetics of Angiogenesis and Vascular Permeability in an Animal Model of Wound Healing.</a> Burns. 35 (6), 811-817 (2009).</li><li>McDonald, D. M., Choyke, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+angiogenesis:+from+microscope+to+clinic.">Imaging of angiogenesis: from microscope to clinic.</a> Nature Medicine. 9 (6), 713-725 (2003).</li><li>Bergeron, L., Tang, M., Morris, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+vascular+injection+techniques+for+the+study+of+perforator+flaps.">A review of vascular injection techniques for the study of perforator flaps.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 117, 2050-2057 (2006).</li><li>Schlatter, P., K&#246;nig, M. F., Karlsson, L. M., Burri, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+study+of+intussusceptive+capillary+growth+in+the+chorioallantoic+membrane+(CAM)+of+the+chicken+embryo.">Quantitative study of intussusceptive capillary growth in the chorioallantoic membrane (CAM) of the chicken embryo.</a> Microvascular Research. 54 (1), 65-73 (1997).</li><li>Lehr, H. A., Leunig, M., Menger, M. D., Nolte, D., Messmer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal+skinfold+chamber+technique+for+intravital+microscopy+in+nude+mice.">Dorsal skinfold chamber technique for intravital microscopy in nude mice.</a> American Journal of Pathology. 143 (4), 1055-1062 (1993).</li><li>Menger, M. D., J&#228;ger, S., Walter, P., Hammersen, F., Messmer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+studies+on+the+microvasculature+of+transplanted+islets+of+Langerhans+in+vivo.">A novel technique for studies on the microvasculature of transplanted islets of Langerhans in vivo.</a> International journal of microcirculation, clinical and experimental. 9 (1), 103-117 (1990).</li><li>Laschke, M. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+spheroids+of+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+are+potent+initiators+of+blood+vessel+formation+in+porous+polyurethane+scaffolds.">Three-dimensional spheroids of adipose-derived mesenchymal stem cells are potent initiators of blood vessel formation in porous polyurethane scaffolds.</a> Acta Biomaterials. 9 (6), 6876-6884 (2013).</li><li>Ega&#241;a, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+human+mesenchymal+cells+to+improve+vascularization+in+a+mouse+model+for+scaffold-based+dermal+regeneration.">Use of human mesenchymal cells to improve vascularization in a mouse model for scaffold-based dermal regeneration.</a> Tissue Eng Part A. 15 (5), 1191-1200 (2009).</li><li>Condurache, A., Aach, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vessel+segmentation+in+angiograms+using+hysteresis+thresholding.">Vessel segmentation in angiograms using hysteresis thresholding.</a> Proceedings of the Ninth IAPR Conference on Machine Vision Applications. , 269-272 (2005).</li><li>Ega&#241;a, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+method+to+visualize+and+quantify+vascular+networks+in+native+and+tissue+engineered+skin.">Ex vivo method to visualize and quantify vascular networks in native and tissue engineered skin.</a> Langenbecks Archives of Surgery. 394, 349-356 (2009).</li></ol>

Faiz deyimi Çatışma: Tüm yazarlar: Yok Finansal Açıklamalar: Yazarların hiçbiri bu metinde söz ürünleri, cihazlar veya uyuşturucu herhangi bir mali ilgi var.

Biyomalzeme içindeki damarlanma süreçleri incelemek için yeni, güvenilir yöntemlerin geliştirilmesini talep doku mühendisliği yapıları kan perfüzyon geliştirerek başarılı yaklaşımları kurmak için bir ihtiyaç vardır. Ex vivo olarak görülebilir iskele vaskülarizasyon yapmak için yaygın yöntemler bir yüksek çözünürlüklü bir araç sağlar mikroskobu kullanımını içerir. Çoğu durumda olsa da, bu yöntem küçük doku alanlarında analizlerine sınırlı ve pahalı ve zaman al?...

Son yıllarda, doku mühendisliği, vücudun kendi hücrelerine 1 ile doku defektleri değiştirmek için yeni bir tedavi seçeneği açtı. Doku rejenerasyonu fizyolojik sürecini desteklemek amacıyla, iskeleleri yara yatağından hücrelerin büyümesine ve kusur 2,3 geri yükleyebilirsiniz bir senaryo sağlayan bir biyobozunur yapı olarak tasarlanmıştır. Yetersiz vaskülarizasyon biyosentetik iskeleler 4 klinik atılım da tutar, ana engel olarak kabul edilir. Hücre büyümesinin ile, besin ve oksijen artar ve malzeme vaskülarizasyonu için talep gerekli olur. Yetersiz veya gecikmiş damarlanma nedenle doku mühendisliği ürünlerinin 5 merkez kangrene neden olabilir. Ek olarak, kan damarları, bağışıklık yetkin hücrelerin sağlamak ve yenileyici alanında metabolik kalıntılarını çıkarın. Yüksek enfeksiyon oranları ve düşük rejenerasyon yalnızcaamaçlayan doku mühendisliği gözlenen yetersiz kan perfüzyon sonuçları, bazı iskeleleri 6,7 vaskülarizasyonunu artırarak önlenecekse. Biyomalzemenin kendisi ve iskele mikro anahtar rolü üzerinde damarlanma odak geliştirmeyi hedefliyoruz Çeşitli stratejiler. 8,9 restore edilecek şekilde (yeniden), rejenerasyon tamir den iyileşme sürecini değişen birine yakın fizyolojik özelliklere sahip bir doku üreten yeni yaklaşımlar geliştirmeye yoğun araştırma çabaları vardır. Kendi rejeneratif potansiyeli açısından incelenmiştir ve değerlendirildi biyomalzemeler kollajen, fibrin, kitosan ve aljinat 10,11 dahil. Bu biyomalzemeler kullanılan ve doku decellularization, kendini montaj, hızlı prototipleme gibi farklı stratejiler kullanarak yeni iskeleler inşa ve 12 electrospinning için omurga olarak kombine edilebilir. Gelişmiş içinde içinvücudun kendi kendini yenileme kapasitesi ance, iskeleleri bioactivated edilebilir. Rekombinant anjiyojenik büyümenin birleştirilmesi gibi faktörlere 14 şifreleyen 13 veya gen vektörleri iskele vaskülarizasyonunu artırdığı gösterilmiştir faktörleri. Kök hücrelerin kullanımı yaygın olarak mezenkimal stromal hücreleri ve endotelyal progenitör hücreler, en dikkat 15,16 kazanmıştır damarlanmasını artırmak için umut verici bir strateji olarak gösterilmiştir. Diğer yaklaşımlar transplantasyon 17 öncesinde prefabrik damar ağları içeren yapıları inşa etmek için çalışırlar. Yoğun iskele tasarım çabaları ve onların biyo-aktivasyon rağmen, hiçbir strateji masif yanık yaralanmalarında dermal değiştirmeleri hariç, klinik olarak anlamlı düzeyde vaskülarizasyonunu geliştirilmiş ve var, klinik rutin içine bulasıcı malzemelerin çevirisi sadece tereddütle 18 gerçekleşiyor . Nedenlerinden biri damarlanmaYapay doku yapıları, hala çözülmemiş bir sorundur in vivo yaklaşımlar yeni teknolojilerin başarısını değerlendirmek için zorluk olduğunu. In vitro deneyler iskelelerinin vaskülarizasyon potansiyelinin ilgili önemli bilgiler sağlayabilir, ancak uygun hayvan modelleri, bu tür malzeme biyolojik uyumluluk, özel bir önem güvenlik ve etkinlik tedavi ve, doku vaskülarizasyonu gibi başlıca parametreleri incelemek için gereklidir inşa. Bu nedenle, güvenilir araçlar görselleştirmek ve damar ağları in vivo esastır ölçmek için. Bu çalışmada biz Eksplante iskeleleri içindeki damar ağı görselleştirme ve kantifizasyonunu basit ve güvenilir bir yöntem mevcut. Bu yöntem, doku transillüminasyon ve dijital segmentasyon dayanmaktadır. Bu yöntem, non-invazif olduğu için, hedef maddenin daha fazla moleküler ve histolojik analizler sağlar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1091">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:319px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:223px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:431px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Ethilon P-3 13 mm 3/8 circle 5-0</td>
			<td style="width:223px;">Ethicon, Norderstedt, Germany</td>
			<td style="width:119px;">698G</td>
			<td>Ethilon polyamid-6 precision point-reverse cutting suture</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Biopsy punches (10 mm)</td>
			<td style="width:223px;">Xiomedics, Acuderm inc., Fort Lauderdale, FL, USA</td>
			<td style="width:119px;">P1050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Biopsy punches (12 mm)</td>
			<td style="width:223px;">Xiomedics, Acuderm inc., Fort Lauderdale, FL, USA</td>
			<td style="width:119px;">P1250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Digital camera&#160;</td>
			<td style="width:223px;">Ricoh, Hannover, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Cx1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Gazin Mullkompresse&#160;</td>
			<td style="width:223px;">Lohmann und Rauscher, Neuwied, Germany</td>
			<td style="width:119px;">13622</td>
			<td>Sterile gauze (10 cm x 10 cm)</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Double-layer collagen-based scaffold (8 &#39;x 10&#39;)</td>
			<td style="width:223px;">Integra Life Science Corporation, Plainsboro, NJ, USA</td>
			<td style="width:119px;">88101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Isoflurane, liquid-gas for inhalative anesthesia&#160;</td>
			<td style="width:223px;">Baxter, Unterschleissheim, Germany</td>
			<td style="width:119px;">100196040</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Pentobarbital, 16 g / 100 ml</td>
			<td style="width:223px;">Fa. Merial, Hallbergmoos</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Nuri Nu/Nu Nude mice, CrLNU-Foxn1nu</td>
			<td style="width:223px;">Charles River, Sulzfeld, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Strain code 088</td>
			<td>Athymic nude mice, 6 to 8 weeks of age and with a body weight between 20 to 25 g&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Buprenorphine (0.3 mg/ml)</td>
			<td style="width:223px;">Essex Pharma GmbH, Munich, Germany</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Titanized mesh (15 cm x 15 cm), extralight</td>
			<td style="width:223px;">PFM Medical AG, K&#246;ln, Germany</td>
			<td style="width:119px;">6000029</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;width:319px;">Tissucol Duo S Immuno 2 ml</td>
			<td style="width:223px;">Baxter Germany GmbH, Unterschlei&#223;heim, Germany</td>
			<td style="width:119px;">B1332020110614</td>
			<td>Fibrin-thrombin solution&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="40">
			<td height="40" style="height:40px;">Transparent adhesove drape (30.5 cm x 26 cm)</td>
			<td style="width:223px;">KCI Medical Products, Wimborne Dorset, UK</td>
			<td style="width:119px;">M6275009/10</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a full skin defect model to evaluate vascularization of biomaterials in vivo

Yetersiz vaskülarizasyon doku mühendisliği yapılarının klinik başarısını sınırlayan önemli faktörlerden biri olarak kabul edilir. Vaskülarizasyonu geliştirmeye yönelik yeni stratejiler değerlendirmek için güvenilir yöntemler görünür biyo-yapay iskeleler yeni kan damarlarının büyümesini olarak yapmak ve sonuçlarını ölçmek için gereklidir. Yıl geçmiş çift üzerinde, bizim grup transilüminasyon ile kan damarlarının doğrudan görüntülenmesine olanak tanıyan dijital segmentasyon yoluyla nicelikleme imkanı sağlayan tam bir cilt defekti modelini tanıttı. Bu modelde, bir cerrahi farelerin arka tam cilt bozuklukları oluşturur ve test edilen malzeme ile değiştirir. Moleküller veya ilgi duyulan hücrelerin de potansiyel etkisini incelemek için bu tür malzemelerin dahil edilebilir. Kişinin kendi seçtikleri bir gözlem süresinden sonra, malzeme değerlendirme için Eksplante edilir. İkili yaralar inci iç karşılaştırmalar yapma imkanı sağlamakde çalışma için gerekli hayvan sayısını azaltılması gibi bireyler arasında etkilerini en aza indirmek. Diğer yaklaşımlar karşılaştırıldığında, bizim yöntem basit, güvenilir ve maliyet etkin analizi sunar. Biz farklı biyomalzeme ve biyo-aktivasyon yaklaşımların vaskülarizasyonunu sınarken yüksek çözünürlüklü tarama gerçekleştirmek için bir rutin araç olarak bu modeli hayata geçirdik.

Güvenilir bir ikili tam bir cilt defekti cilt çalışmada (Şekil 2) altında biyomalzeme ile değiştirilebilir fare (Şekil 1) oluşturulabilir. Burada önemli bir komplikasyon enfeksiyon ya da yabancı cisim reaksiyonu, ne de makroskopik bulgular sırasında ya da cerrahi bir prosedür sonra gözlenir. Bir fare kaldırır Nadir durumlarda, bir iskele kaybolur. Yara kasılma (Şekil 3) hiç görülmedi. Doku transillüminasyonu hem yerli doku ve implante iskeleleri ...

Watch this Scientific Journal Video about A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo at JoVE.com

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

Vaskülarizasyon başarılı doku mühendisliği yaklaşımları anahtarıdır. Bu nedenle, güvenilir teknolojileri doku yapıları vasküler ağların gelişimini değerlendirmek için gereklidir. Burada görselleştirmek ve in vivo damarlanmayı ölçmek için basit ve maliyet-etkin bir yöntem mevcut.

A Tam Cilt Hata Modeli Biyomateryallerin vaskülarizasyonunu değerlendirin<em&gt; In Vivo</em

Insufficient vascularization is considered to be one of the main factors limiting the clinical success of tissue-engineered constructs. In order to ...

a-full-skin-defect-model-to-evaluate-vascularization-biomaterials

Research

JoVE Journal

Bioengineering

A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

12.1K Görüntüleme.  Technische Universität München.  Vaskülarizasyon başarılı doku mühendisliği yaklaşımları anahtarıdır. Bu nedenle, güvenilir teknolojileri doku yapıları vasküler ağların gelişimini değerlendirmek için gereklidir. Burada görselleştirmek ve in vivo damarlanmayı ölçmek için basit ve maliyet-etkin bir yöntem mevcut. 

Video: A Full Skin Defect Model to Evaluate Vascularization of Biomaterials In Vivo

The Three-Dimensional Human Skin Reconstruct Model: a Tool to Study Normal  Skin and Melanoma Progression

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells behave differently when they are grown within a 3D extra-cellular matrix and also interact with other cells (1-5). Mouse models have been broadly utilized to study tissue morphogenesis in vivo. However mouse and human skin have significant differences in cellular architecture and physiology, which makes it difficult to extrapolate mouse studies to humans. Since melanocytes in mouse skin are mostly localized in hair follicles, they have distinct biological properties from those of humans, which locate primarily at the basal layer of the epidermis. The recent development of 3D human skin reconstruct models has enabled the field to investigate cell-matrix and cell-cell interactions between different cell types. The reconstructs consist of a "dermis" with fibroblasts embedded in a collagen I matrix, an "epidermis", which is comprised of stratified, differentiated keratinocytes and a functional basement membrane, which separates epidermis from dermis. Collagen provides scaffolding, nutrient delivery, and potential for cell-to-cell interaction. The 3D skin models incorporating melanocytic cells recapitulate natural features of melanocyte homeostasis and melanoma progression in human skin. As in vivo, melanocytes in reconstructed skin are localized at the basement membrane interspersed with basal layer keratinocytes. Melanoma cells exhibit the same characteristics reflecting the original tumor stage (RGP, VGP and metastatic melanoma cells) in vivo. Recently, dermal stem cells have been identified in the human dermis (6). These multi-potent stem cells can migrate to the epidermis and differentiate to melanocytes.

In this report, we describe the three-dimensional skin reconstruct model which mimics human skin in architecture and composition. Melanocyte physiology, melanoma progression and the fate of dermal stem cells have been investigated using the skin reconstruct model. The model is also useful as a preclinical tool for drug assessment.

Üç Boyutlu İnsan Cilt Model Yeniden İnşa: Aracı Normal Cilt ve Melanom İlerleme Eğitim

Most in vitro studies in experimental skin biology have been done in 2-dimensional (2D) monocultures, while accumulating evidence suggests that cells ...

Biyomühendislik

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic valve leaflets are composed of interstitial cells suspended within an extracellular matrix (ECM) and are lined with an endothelial cell monolayer. The valve withstands a harsh, dynamic environment and is constantly exposed to shear, flexion, tension, and compression. Research has shown calcific lesions in diseased valves occur in areas of high mechanical stress as a result of endothelial disruption or interstitial matrix damage1-3. Hence, it is not surprising that epidemiological studies have shown high blood pressure to be a leading risk factor in the onset of aortic valve disease4. 
The only treatment option currently available for valve disease is surgical replacement of the diseased valve with a bioprosthetic or mechanical valve5. Improved understanding of valve biology in response to physical stresses would help elucidate the mechanisms of valve pathogenesis. In turn, this could help in the development of non-invasive therapies such as pharmaceutical intervention or prevention. Several bioreactors have been previously developed to study the mechanobiology of native or engineered heart valves6-9. Pulsatile bioreactors have also been developed to study a range of tissues including cartilage10, bone11 and bladder12. The aim of this work was to develop a cyclic pressure system that could be used to elucidate the biological response of aortic valve leaflets to increased pressure loads. 
The system consisted of an acrylic chamber in which to place samples and produce cyclic pressure, viton diaphragm solenoid valves to control the timing of the pressure cycle, and a computer to control electrical devices. The pressure was monitored using a pressure transducer, and the signal was conditioned using a load cell conditioner. A LabVIEW program regulated the pressure using an analog device to pump compressed air into the system at the appropriate rate. The system mimicked the dynamic transvalvular pressure levels associated with the aortic valve; a saw tooth wave produced a gradual increase in pressure, typical of the transvalvular pressure gradient that is present across the valve during diastole, followed by a sharp pressure drop depicting valve opening in systole. The LabVIEW program allowed users to control the magnitude and frequency of cyclic pressure. The system was able to subject tissue samples to physiological and pathological pressure conditions. This device can be used to increase our understanding of how heart valves respond to changes in the local mechanical environment.

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

A cyclic pressure bioreactor capable of subjecting heart valve tissue to physiological and pathological pressure conditions has been designed. A LabVIEW program allows users to control pressure magnitude, amplitude and frequency. This device can be used to study the mechanobiology of heart valve tissue or isolated cells.

Devirli Basınç Biyoreaktör Tasarım Ex vivo</emAort Kalp Vanalar> Eğitim

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

Generation of a Three-dimensional Full Thickness Skin Equivalent and Automated Wounding

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models reflect the human wound situation better than animal models. Although two-dimensional models are widely used to investigate processes such as cellular migration and proliferation, models that are more complex are required to gain a deeper knowledge about wound healing. Besides a suitable model system, the generation of precise and reproducible wounds is crucial to ensure comparable results between different test runs. In this study, the generation of a three-dimensional full thickness skin equivalent to study wound healing is shown. The dermal part of the models is comprised of human dermal fibroblast embedded in a rat-tail collagen type I hydrogel. Following the inoculation with human epidermal keratinocytes and consequent culture at the air-liquid interface, a multilayered epidermis is formed on top of the models. To study the wound healing process, we additionally developed an automated wounding device, which generates standardized wounds in a sterile atmosphere.

The goal of this protocol is to build up a three-dimensional full thickness skin equivalent, which resembles natural skin. With a specifically constructed automated wounding device, precise and reproducible wounds can be generated under maintenance of sterility.

Üç-boyutlu Tam Kalınlığı Deri Üretimi Eşdeğer ve Otomatik Yaralama

In vitro models are a cost effective and ethical alternative to study cutaneous wound healing processes. Moreover, by using human cells, these models ...

Sandwich-like Microenvironments to Harness Cell/Material Interactions

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. However in vivo, most of the cells are completely surrounded by the extracellular matrix (ECM), resulting in a three-dimensional (3D) distribution of receptors. This may trigger differences in the outside-in signaling pathways and thus in cell behavior.
This article shows that stimulating the dorsal receptors of cells already adhered to a 2D substrate by overlaying a film of a new material (a sandwich-like culture) triggers important changes with respect to standard 2D cultures. Furthermore, the simultaneous excitation of ventral and dorsal receptors shifts cell behavior closer to that found in 3D environments. Additionally, due to the nature of the system, a sandwich-like culture is a versatile tool that allows the study of different parameters in cell/material interactions, e.g., topography, stiffness and different protein coatings at both the ventral and dorsal sides. Finally, since sandwich-like cultures are based on 2D substrates, several analysis procedures already developed for standard 2D cultures can be used normally, overcoming more complex procedures needed for 3D systems.

The following protocol describes the procedure to assemble sandwich-like cultures to be used as an intermediate stage between bi-dimensional (2D) and three-dimensional (3D) cellular environments. The engineered systems can have applications in microscopy, biomechanics, biochemistry and cell biology assays.

Sandviç gibi mikroçevrelerde Hücre / Malzeme Etkileşimleri Harness

Cell culture has been traditionally carried out on bi-dimensional (2D) substrates where cells adhere using ventral receptors to the biomaterial surface. ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and trade one defect for another. Tissue engineering holds the promise to address this increasing demand. However, most tissue engineering strategies fail to generate stable and functional tissue substitutes because of poor vascularization. This paper focuses on an in vivo tissue engineering chamber model of intrinsic vascularization where a perfused artery and a vein either as an arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration is directed inside a protected hollow chamber. In this chamber-based system angiogenic sprouting occurs from the arteriovenous vessels and this system attracts ischemic and inflammatory driven endogenous cell migration which gradually fills the chamber space with fibro-vascular tissue. Exogenous cell/matrix implantation at the time of chamber construction enhances cell survival and determines specificity of the engineered tissues which develop. Our studies have shown that this chamber model can successfully generate different tissues such as fat, cardiac muscle, liver and others. However, modifications and refinements are required to ensure target tissue formation is consistent and reproducible. This article describes a standardized protocol for the fabrication of two different vascularized tissue engineering chamber models in vivo.

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

This is a guideline for constructing in vivo vascularized tissue using a microsurgical arteriovenous loop or a flow-through pedicle configuration inside a tissue engineering chamber. The vascularized tissues generated can be employed for organ regeneration and replacement of tissue defects, as well as for drug testing and disease modeling.

Bir ıntrinsic Vaskülarizasyon tarafından Doku Mühendisliği<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku Mühendisliği Odası

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...

A Method for Evaluating Timeliness and Accuracy of Volitional Motor Responses to Vibrotactile Stimuli

Artificial sensory feedback (ASF) systems can be used to compensate for lost proprioception in individuals with lower-limb impairments. Effective design of these ASF systems requires an in-depth understanding of how the parameters of specific feedback mechanism affect user perception and reaction to stimuli. This article presents a method for applying vibrotactile stimuli to human participants and measuring their response. Rotating mass vibratory motors are placed at pre-defined locations on the participant's thigh, and controlled through custom hardware and software. The speed and accuracy of participants' volitional responses to vibrotactile stimuli are measured for researcher-specified combinations of motor placement and vibration frequency. While the protocol described here uses push-buttons to collect a simple binary response to the vibrotactile stimuli, the technique can be extended to other response mechanisms using inertial measurement units or pressure sensors to measure joint angle and weight bearing ratios, respectively. Similarly, the application of vibrotactile stimuli can be explored for body segments other than the thigh.

This article describes a technique for applying vibrotactile stimuli to the thigh of a human participant, and measuring the accuracy and reaction time of the participant&#39;s volitional response for various combinations of stimulation location and frequency.

Vibrotactile Uyaranların için İstemli motor Yanıtları güncelliği ve doğruluğundan değerlendirilmesi için bir yöntem

Artificial sensory feedback (ASF) systems can be used to compensate for lost proprioception in individuals with lower-limb impairments.  Effective design ...

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major pathogens in BAI. Current experimental BAI mammalian animal models such as mouse models are costly and time-consuming, and therefore not suitable for high throughput analysis. Thus, novel animal models as complementary systems for investigating BAI in vivo are desired. In the present study, we aimed to develop a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of bacterial infection in the presence of biomaterials based on fluorescence microscopy. In addition, the provoked macrophage response was studied. To this end, we used fluorescent protein-expressing S. aureus and transgenic zebrafish embryos expressing fluorescent proteins in their macrophages and developed a procedure to inject bacteria alone or together with microspheres into the muscle tissue of embryos. To monitor bacterial infection progression in live embryos over time, we devised a simple but reliable method of microscopic scoring of fluorescent bacteria. The results from microscopic scoring showed that all embryos with more than 20 colony-forming units (CFU) of bacteria yielded a positive fluorescent signal of bacteria. To study the potential effects of biomaterials on infection, we determined the CFU numbers of S. aureus with and without 10 &#181;m polystyrene microspheres (PS10) as model biomaterials in the embryos. Moreover, we used the ObjectJ project file &#34;Zebrafish-Immunotest&#34; operating in ImageJ to quantify the fluorescence intensity of S. aureus infection with and without PS10 over time. Results from both methods showed higher numbers of S. aureus in infected embryos with microspheres than in embryos without microspheres, indicating an increased infection susceptibility in the presence of the biomaterial. Thus, the present study shows the potential of the zebrafish embryo model to study BAI with the methods developed here.

A Zebrafish Embryo Model for In Vivo Visualization and Intravital Analysis of Biomaterial-associated Staphylococcus aureus Infection

The present study describes a zebrafish embryo model for in vivo visualization and intravital analysis of biomaterial-associated infection over time based on fluorescence microscopy. This model is a promising system complementing mammalian animal models such as mouse models for studying biomaterial-associated infections in vivo.

Bir zebra balığı embriyo Model In Vivo görselleştirme ve Staphylococcus aureus Intravital analiz Biomaterial ilişkili enfeksiyon

Biomaterial-associated infection (BAI) is a major cause of the failure of biomaterials/medical devices. Staphylococcus aureus is one of the major ...

A Reliable and Reproducible Critical-Sized Segmental Femoral Defect Model in Rats Stabilized with a Custom External Fixator

Orthopedic research relies heavily on animal models to study mechanisms of bone healing in vivo as well as investigate the new treatment techniques. Critical-sized segmental defects are challenging to treat clinically, and research efforts could benefit from a reliable, ambulatory small animal model of a segmental femoral defect. In this study, we present an optimized surgical protocol for the consistent and reproducible creation of a 5 mm critical diaphyseal defect in a rat femur stabilized with an external fixator. The diaphyseal ostectomy was performed using a custom jig to place 4 Kirschner wires bicortically, which were stabilized with an adapted external fixator device. An oscillating bone saw was used to create the defect. Either a collagen sponge alone or a collagen sponge soaked in rhBMP-2 was implanted into the defect, and the bone healing was monitored over 12 weeks using radiographs. After 12 weeks, rats were sacrificed, and histological analysis was performed on the excised control and treated femurs. Bone defects containing only collagen sponge resulted in non-union, while rhBMP-2 treatment yielded the formation of a periosteal callous and new bone remodeling. Animals recovered well after implantation, and external fixation proved successful in stabilizing the femoral defects over 12 weeks. This streamlined surgical model could be readily applied to study bone healing and test new orthopedic biomaterials and regenerative therapies in vivo.

In vivo mammalian models of critical-sized bone defects are essential for researchers studying healing mechanisms and orthopedic therapies. Here, we introduce a protocol for the creation of reproducible, segmental, femoral defects in rats stabilized using external fixation.

Güvenilir ve tekrarlanabilir kritik ölçekli gelen bir Segmental femur kusur manken özel eksternal fiksatör ile stabilize Sıçanlarda

Orthopedic research relies heavily on animal models to study mechanisms of bone healing in vivo as well as investigate the new treatment techniques. ...

In Vivo Two-Color 2-Photon Imaging of Genetically-Tagged Reporter Cells in the Skin

Fibroblasts are mesenchymal cells that change their morphology upon activation, ultimately influencing the microenvironment of the tissue they are located in. Although traditional imaging techniques are useful in identifying protein interactions and morphology in fixed tissue, they are not able to give insight as to how quickly cells are able to bind and uptake proteins, and once activated how their morphology changes in vivo. In the present study, we ask 2 major questions: 1) what is the time-course of fibroblast activation via toll-like receptor-4 (TLR4) and lipopolysaccharide (LPS) interaction and 2) how do these cells behave once activated? Using 2-photon imaging, we have developed a novel technique to assess the ability of LPS-FITC to bind to its cognate receptor, TLR4, expressed on peripheral fibroblasts in the genetic reporter mouse line; FSP1cre; tdTomatolox-stop-lox&#160;in vivo. This unique approach allows researchers to create in-depth, time-lapse videos and/or pictures of proteins interacting with live cells that allows one to have an increased level of granularity in understanding how proteins can alter cellular behavior.

Morphological changes occur in immune responsive fibroblast cells following activation and promote alterations in cellular recruitment. Utilizing 2-photon imaging in conjunction with a genetically engineered Fibroblast-specific protein 1 (FSP1)-cre; tdTomato floxed-stop-floxed (TB/TB) mouse line and green fluorescently tagged lipopolysaccharide-FITC, we can illustrate highly specific uptake of lipopolysaccharide in dermal fibroblasts and morphological changes in vivo.

İn vivo Iki renkli 2-foton görüntüleme genetiği etiketlenmiş Reporter hücrelerinin cilt içinde

Fibroblasts are mesenchymal cells that change their morphology upon activation, ultimately influencing the microenvironment of the tissue they are located ...

Calvarial Model of Bone Augmentation in Rabbit for Assessment of Bone Growth and Neovascularization in Bone Substitution Materials

The basic principle of the rabbit calvarial model is to grow new bone tissue vertically on top of the cortical part of the skull. This model allows assessment of bone substitution materials for oral and craniofacial bone regeneration in terms of bone growth and neovascularization support. Once animals are anesthetized and ventilated (endotracheal intubation), four cylinders made of polyether ether ketone (PEEK) are screwed onto the skull, on both sides of the median and coronal sutures. Five intramedullary holes are drilled within the bone area delimited by each cylinder, allowing influx of bone marrow cells. The material samples are placed into the cylinders which are then closed. Finally, the surgical site is sutured, and animals are awaken. Bone growth may be assessed on live animals by using microtomography. Once animals are euthanized, bone growth and neovascularization may be evaluated by using microtomography, immune-histology and immunofluorescence. As the evaluation of a material requires maximum standardization and calibration, the calvarial model appears ideal. Access is very easy, calibration and standardization are facilitated by the use of defined cylinders and four samples may be assessed simultaneously. Furthermore, live tomography may be used and ultimately a large decrease in animals to be euthanized may be anticipated.

Here we present a surgical protocol in rabbits with the aim to assess bone substitution materials in terms of bone regeneration capacities. By using PEEK cylinders fixed onto rabbit skulls, osteoconduction, osteoinduction, osteogenesis and vasculogenesis induced by the materials may be evaluated either on live or euthanized animals.

Kemik İkmal Malzemelerinde Kemik Büyümesi ve Neaskülarizasyonunun Değerlendirilmesi İçin Tavşanda Kemik Büyütmenin Kalvarial Modeli

The basic principle of the rabbit calvarial model is to grow new bone tissue vertically on top of the cortical part of the skull. This model allows ...