Burada tavşanlar için kemik değiştirme malzemelerini kemik rejenerasyon kapasiteleri açısından değerlendirmek amacıyla bir cerrahi protokol sıyoruz. Bu tavşan kalvarial modelinin temel prensibi kafatasının kortikal kısmının üstüne dikey olarak yeni kemik dokusu büyümektir. Bu model, kemik büyüme desteği ve nevasaskülarizasyon desteği açısından oral ve kraniyofasiyal kemik rejenerasyonu için kemik ikame malzemelerinin değerlendirilmesini sağlar.
Olgun kemik üzerinde yeni kemik dokusunun ektopik büyümesini ölçer gibi model kemik rejenerasyondeğerlendirmek için son derece önemlidir. Geleneksel modeller ile karşılaştırıldığında, hangi yeni kemik yapay sonunda ilk seviyesine geri dönmek için oluşturulan defektdoldurmak için yeniler. Tavşan kafatasları üzerinde sabit lenmiş büyük silindirler kullanılarak osteoiletim, osteoindüksiyon, osteonezoz ve vaskülergenezin indüktörü malzemeler canlı veya kurban edilen hayvanlar üzerinde değerlendirilebilir.
Prosedürü gösteren Laurin Marger, bizim laboratuvar bir araştırma görevlisi olacak, ve ben. Hayvanları yatıştırdıktan sonra, kulaktan marjinal vene intravenöz bir kanula yerleştirin ve entübasyon tamamlanana kadar kapalı tutun. Eğilimli pozisyonda tavşan yerleştirin ve dikey uzantısı başını korumak.
% 10 lidokain püskürtme tarafından yerel olarak trakea anestezik. Hava akımı tüp içinde duyulabilir kadar tavşan trakea içine küçük çaplı endotrakeal tüp kaydırın. Bu gırtlak açacak ve kesin tüp ekleme kolaylaştırmak.
Daha sonra, tüpün trakeaya konumunu düzeltmek için tüpe bir kılavuz yerleştirin. Küçük çaplı tüpü çıkarın ve kılavuzda kesin endotrakeal tüp kaydırın. Kılavuzu çıkarın ve cihazı nefes borusuna kapatmak ve engellemek için endotrakeal tüpün ucundaki balonu şişirin.
Sürekli analjezi neden fentanil bol. Anestezi yi teşvik etmek için propofol kilogramı başına 2-4 miligram ve saat başına dört mililitre lik ringer, isovolumetrik koşulları korumak için asetat. Hemen saf oksijen% 3 sevofluran ile hayvan havalandırmak.
İlk olarak, ameliyat masasına 39 derece santigrat dereceye ayarlanmış ısıtılmış bir ped üzerine tavşan yerleştirin ve rektal sıcaklık sondası yerleştirin. Kafa derisini tıraş et. Siteyi dezenfekte etmek için % 10 providone iyot ile cildi temizleyin.
Sonra, steril bir cerrahi perde ile tavşan perde ve kafatasının bir erişim alanı kesip. Cerrahi bölgeyi ikinci kez %10 oranında iyot ile dezenfekte edin. Başlamak için, kafatası üzerinde lidokain bir deri altı enjeksiyonu ile yerel anestezi.
Periostun indikse olduğundan emin olmak için, yörüngelerden dış oksipital protuberance için calvarial sagital hattı boyunca deri yoluyla eğim için neşter kullanın. Kesiğin her iki tarafındaki periostiyi hafifçe yükseltmek için periosteal asansörü kullanın. Siteyi steril salinle durula.
İlk olarak, kafatası üzerinde medya ve koronal dikişler bulmak. Bu anatomik çizgilerin bir haç oluşturduğunu unutmayın. Silindirler, haç tarafından tanımlanan kadranda her birine yerleştirilir ve silindirin kenarının dikişin üzerinde olmamasını sağlar.
İlk silindiri sol üst kadranda yerleştirin ve cihazı mümkün olduğunca düz bir şekilde yerleştirin. Direnç hissedilene kadar silindirin konumunu güçlü el basıncı ile düzeltin ve mikro vidada vidala. Vida kafasının silindir sekmesiyle difüst olduğundan emin olun.
Silindirin diğer sekmesini kafatasına sıkıca sabitlemek için aynı şekilde düzeltin. Silindirin kemiğe hermetik olarak sabitolduğundan emin olun. Sonra diğer üç çeyreğin her biri üzerine bir silindir sabitlemek için tüm bu prosedürü tekrarlayın.
Başlamak için, silindir tarafından sınırlanan alanın merkezinde kemik üzerinde yuvarlak bir çapak ile tuzlu sulama altında bir intermedüller delik matkap. Kanamanın göründüğünden emin olun. Daha sonra, silindirin iç kenarlarında iki sekme vidaları geçen eksen boyunca iki intermedüller delik matkap.
Dik aks boyunca, silindirin iç kenarlarında iki intermedullary delik daha delin. Diğer üç silindir için bu delme işlemini tekrarlayın. Daha sonra, malzeme örneği ile ağzına ilk silindir doldurun.
Kapağı takarak silindiri kapatın. Diğer üç silindir için bu dolum işlemini tekrarlayın. Silindirlerin üzerindeki deriyi aralıklı rezorbable olmayan bir dikişle kapatın ve yaranın üzerine püskürtülebilir bir pansuman uygulayın.
Bundan sonra, analjezi ve anestezi kaynağı durdurmak ve otonom solunum kurtarma için kontrol edin. Hayvan otonom nefes aldıktan sonra havalandırmayı durdurun. Tam uyanış önce saf oksijen altında hayvan korumak.
Buprenophine hidroklorür deri altı enjekte edin. Cerrahi analjezi sonrası olarak üç gün boyunca her altı saatte bir enjeksiyonu tekrarlayın. Su ve tam besleme ile her zamanki konut aktarımı önce hayvan tamamen uyanmak için izin verin.
Bu videoda açıklanan model osteoiletim, osteoindüksiyon, osteogenezis ve kemik yerine neoaskülarizasyon değerlendirilmesi adamıştır. Ameliyat tamamlandıktan sonra canlı hayvanlarda kemik tomografisi kullanılarak farklı zaman noktalarında kemik büyümesi izlenebilir. Ek analizhayvanların kurban edilmesi gerektiğini.
Ötenaziden sonra numuneler kesilir ve silindirler dikkatlice çıkarılır. Biyopsiler daha sonra PBS'de %4 formaldehit çözeltisi ile sabitlenir. Bundan sonra kemik büyümesini değerlendirmek için mikrotomografi kullanılabilir.
Histolojik boyama için numuneler de işlenebilir. Histomorfometrik analiz ve spesifik lekeler daha spesifik olarak analizi tamamlamak mümkündür. Bu protokol cerrahi bir yöntem olduğundan, tüm adımlar kritiktir ve doğru şekilde takip edilmelidir.
Özellikle tavşan taşıma ve anestezi konusunda hayvan deneyleri için eğitilme önemlidir. Açıklanan yöntemlerin dışında, hücreler daha spesifik olarak akış sitometrisi kullanılarak analiz edilebilir. Malzeme evrimi, kemik dokusu olgunlaşması ve mekanik de nano girinti kullanılarak değerlendirilebilir, örneğin.
Bu modelin yardımıyla birçok değerlendirme yapılmıştır. Örneğin, titanyum veya seramik kafesler için, GBM membranlar, osteojenik faktörler, yenidoğan ikameveya kemik rejenerasyon işlemi sırasında neovasaskülarizasyon mekanizması.
