Name: embolic middle cerebral artery occlusion (mcao) for ischemic stroke with homologous blood clots in rats
Uploaded: 2014-09-17T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats at JoVE.com

This work was supported by National Institutes of Health grants HL087990 (G.L.).

Etik Beyanı: (330-380 g ağırlığında) Sprague-Dawley sıçanları bu protokolde kullanılmıştır. Bu protokol LSU Sağlık Bilimleri Merkezi-Shreveport Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmış ve (sekizinci baskı, Ulusal Bilimler Akademisi, 2011 &#39;Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanımı için Kılavuz&#39; ile uyumlu olduğunu edildi ). Modifiye PE-50 Tube 1. Hazırlık <ol><li> Yavaş yavaş tüp yumuşatmak, El bir gaz ateş üzerinde bir 30 cm uzunluğunda PE-50 tüpü tutmak. Yavaşça tüp germek. </li><li> Bir dijital kumpas (Şekil 1) kullanarak gerilmiş tüp üzerinde bir nokta seçin, işaretlemek ve (dış çapı: 0,30-0,34 mm) 1 cm uzunluğunda ucu 25 cm uzunluğunda segmentine modifiye PE-50 tüp kesti. </li></ol> Homolog kan pıhtılaşması 2. Hazırlık <ol><li> % 70, N 2 O ve% 30 Ç izofluran (indüksiyon için 5%, bakım için 2-3%) olan sıçan anestezisi &lt;kan toplanması öncesinde bir yüz maskesi ile alt&gt; 2. Bir ayak tutam tarafından anestezi onaylayın. </li><li> Yayımlanmış yöntemle 4 ile bir donör sıçan femoral arter kateterizasyonu gerçekleştirin ve 20 cm uzunluğunda PE-50 tüp içine doğrudan femoral arter kan aktarın. Pıhtı kan, oda sıcaklığında 2 saat boyunca Tüp, ve daha sonra 4 ° C&#39;de 22 saat boyunca muhafaza tüpü. Not: sokulmuş adım 3.1 de tarif edildiği gibi, aseptik teknikle gerçekleştirilir. Donör sıçan başka numuneler için elde edilir. </li><li> 50 mm&#39;lik parçalar halinde PE-50 tüpü kesip, normal tuz içeren steril bir Petri kabı içine tüpten pıhtı dışarı floş. </li><li> 60 mm uzunluğunda PE-10 tüpü içine 50 mm uzunluğunda bir pıhtı aktarın ve 23 G iğne ile, normal tuzlu su ihtiva eden 1 ml şırınga bağlı olan bir 20 cm uzunluğunda PE-50 tüpü için PE-10 tüp her biri ucunu (Şekil 2) . </li><li> Kan hücreleri çıkarmak için, hangi 5 dakika boyunca diğer bir şırınga sürekli alternatif hareket ile pıhtı Shiftpıhtı ve fibrin çekirdek bozmadan, ekstravasküler pıhtılaşmış pıhtı kırılgan en aza indirmek. </li><li> 40 mm uzunluğunda segmentine pıhtı kesin ve aseptik koşullar altında adım 1.2 de tarif edildiği gibi bir tadil edilmiş 50-PE kateter yoluyla pıhtı segmentini aktarın. Not: Tüm PE boru etilen oksit ile sterilize edilir. </li></ol> 3. Embolizan Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (Şekil 3A, B) <ol><li> (En az 121 ° C, 15 dakika boyunca 15 PSI) otoklav ile tüm cerrahi aletleri sterilize. % 70 etanol kullanılarak ameliyat masası ve ilişkili cerrahi ekipmanı sterilize. </li><li> Adım 2.1 açıklandığı gibi izofluran ile sıçan anestezisi. Her iki arka ayakları üzerinde bir ayak tutam yaparak anestezi derinliği test ve (pençe çekilmesi) gözlenen herhangi bir hareketi hayvan ameliyatı yapmak için yeterli anestezi olmadığını gösterir. Anestezi altında iken kuruluğunu önlemek için her iki göze de veteriner merhem küçük bir miktar uygulayın. Ventral boyun ve baş re kürk Tıraşelektrik kesme makineleri ile bölgelerini cilt alanları ortaya çıkarmak için. </li><li> Bir ısıtma yastığı yatar pozisyonda sıçan yerleştirin. Bir rektal prob, kontrolü yerleştirin ve bir homotermik battaniye kontrol ünitesi kullanılarak 36.5-37.5 ° C arasında vücut ısısını korumak. </li><li> % 70 etanol ile takip% 10 povidon-iyot ile traş cildi ve çevresindeki kürk dezenfekte edin. </li><li> Bir mikroskop altında boyun üzerinde 2 cm uzunluğunda orta hat kesi olun. Cerrahi alanında ortaya çıkarmak ve sağ karotis arter (CCA), eksternal karotid arter (ECA), internal karotid arter (ICA) ve pterigopalatin arter (KİK) çevresindeki sinirler ve fasya (Şekil 3A) ücretsiz teşrih Ekartörleri kullanın. Not: hiçbir Yardımcısı hayvan hazırlamak için yardımcı olur Ameliyattan önce, steril eldiven değiştirmek. </li><li> (Vagus siniri zarar vermeden) çevreleyen sinirler CCA serbest incelemek ve arterin altında steril 5-0 ipek sütür koyun. Bir kayma düğüm (# 1) kravat ve küçük HEMOS kullanarak dikiş kavramaktat ve vücuda bakan tarafta öğretilen çekin. </li><li> ECA ve onun iki şubesi, oksipital arter (OA) ve superior tiroid arter (STA) ayır. Bir veteriner elektrocerrahi ünitesi kullanılarak iki şubesi coagulate. ECA altında steril 6-0 ipek dikişlerle iki adet yerleştirin. </li><li> Arter, kafasına doğru tek parça (uzak ucu) ve vücuda dönük alt alta yerleştirilmiş iki ipek ayırın. (2 #) başlığına en yakın olan tarafında, küçük bir hemostat olan ipek kavrama ve çekme kafasına doğru öğretilen sıkı bitişik harfleri bağla. Daha sonra kullanmak için başka ipek ile gevşek bir düğüm (# 3) hazırlayın. </li><li> (Vagus siniri zarar vermeden) çevreleyen sinirler ICA ve PPA parçalara ayır. 6-0 sütür (# 4) ile PPA kravat. ICA (# 5) etrafında 6-0 sütür ile bir kayma düğüm yapın. Alternatif olarak, bir mikrovasküler klibi kullanarak ICA klibi. </li><li> Bir Vannas tarzı yaylı makas ile sıkı (# 2) ve gevşek (# 3) ligatures arasındaki ECA içine küçük bir delik (sokmak 1/2) kesin. Modifiye PE-50 küvet yerleştirinCCA çatallanma kesi ve önceden içine kan pıhtısı içeren e. (3 #) yeterli lümen etrafında içinde yaşayan tüp hareketliliğini korumak sağlamak için gevşek ligatürün sıkın. </li><li> Güdük özgür ve ECA ve ICA çatallanma altında güdük konumlandırmak için küçük deliğin yerinde ECA kesti; Bu modifiye tüp kolayca ICA slayt sağlayacaktır. ICA açın ve kateterin ucu MCA kökenini ulaşıncaya kadar yavaşça (~ 17 mm bifurkasyondan) ICA ECA&#39;nın lümeninden tüp önceden. Not: Önce ECA,% 70 etanol ile borunun steril dış yüzeyi borunun ucu yerleştirin ve daha sonra steril fizyolojik tuzlu su ile yıkayın. </li><li> 100 ul Hamilton şırıngası (Şekil 3B) ile 10 saniye boyunca 10 ul tuzlu su ile birlikte modifiye edilmiş PE-50 kateterden pıhtı enjekte edilir. </li><li> 5 dakika sonra ECA kateteri. ECA kravat ve CCA açın. Boyun kesi dikin. </li></ol> 4. İzleme Bölgesel Beyin Kan Akışı (bBKA) <ol><li> Önceki MCA oklüzyon, kafatası kemiği ortaya çıkarmak için kafa derisi 1.2 cm uzunluğunda orta hat kesi yapmak. Bir diş kazıyıcı ve steril pamuk swapları ile kafatası kemik üzerinde dokuları çıkartın. Not: Ameliyattan önce, maruz kafa derisi alanı ve çevresindeki kürk% 70 etanol ile takip% 10 povidon-iyot ile dezenfekte edilir. </li><li> 2 mm posterior ve 0.7 mm&#39;lik bir küresel paslanmaz çelik çapak (Şekil 4) kullanılarak 5 mm bregma yanal yerleştirilmiş bir 1,5 mm çapında bir çapak delik delin. NOT: sağlam dura tutun. </li><li> Prob dura yüzeyinden 0.5 mm yerleştirin. 0 (taban çizgisi) en kan akımında, 5, 15, 30, 60, 90 Monitör, emboli ve sonra 120 dakika devam 5, 15, 30, 45, ve tPA intravenöz uygulanmasından sonra 60 dk. RCBF&#39;nin son ölçümden sonra, kafa derisi kesi dikiş ile kapatılır. Not: boyun kesi öncesinde biz MCA occlus önce taban olarak kan akımında ölçümiyonu temsil etmektedir. Mesaj MCA tıkanıklığı biz boyun kesi dikiş kapatılmasından sonra kan akımında ölçmek. Böylece boyun kesi steril tutulur. </li></ol> 5. Post-operatif Bakım <ol><li> Su kaybını önlemek ve hemen cerrahi ve ağrının giderilmesi için gerektiği kadar 6-12 saat sonra Buprenex (0,05 mg / kg, sc) enjekte etmek için salin solüsyonu, deri altında, 2.5 ml enjekte edilir. </li><li> Izofluran anestezi durdurun. 37 ° C veteriner kurtarma odasında sıçan yerleştirin (hayvan sıcak tutmak) ve gözlem tutmak. Sıçan anestezi kurtarmak için genellikle 10 dakika sürer. Ardından, steril bir kafes içine hayvan koymak kafes içinde bir Petri kabındaki bazı ıslatılmış yemek yerleştirmek, ve hayvan sterilizasyon odasına kafesi dönmek. </li><li> Inme sonrası 24 saat, sodyum pentobarbital (100 mg / kg vücut ağırlığı, IP) aşırı dozda sıçan euthanize. </li></ol> 6. Nörolojik Eksikliği Puan <ol><li> Öncesi ve embolizasyon sonrası 2 saatte Bederson skoru gerçekleştirin. Bir sınıflandırma kullanabilirsiniz s0-3 cale olarak daha önce 5 açıklandığı: kuyruk sıçan yükselterek, 0, zemine hem ön ayakları uzanan ve başka hiçbir açıkları sergileyen hayvan (normal hareket); 1, kuyruk tarafından sıçan yükselterek, kontralateral ön ayakları esnetin; 2, çizerek olmadan yanal itme (ve ön ayakları fleksiyon) karşı dirençte azalma; 3, çizerek ile grade 2 aynı davranış. NOT: embolizasyondan sonra 2 saatte Bederson skoru = 0 (yok açığını) gösteren Sıçanlar daha fazla çalışma dışında tutulmuştur. </li></ol>

<ol>
	<li>Overgaard, K., Sereghy, T., Boysen, G., Pedersen, H., H&#248;yer, S., Diemer, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+reproducible+cerebral+infarction+using+thrombotic+blood+clot+emboli.">A rat model of reproducible cerebral infarction using thrombotic blood clot emboli.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 12 (3), 484-490 (1992).</li><li>Zhang, R. L., Chopp, M., Zhang, Z. G., Jiang, Q., Ewing, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+model+of+focal+embolic+cerebral+ischemia.">A rat model of focal embolic cerebral ischemia.</a> Brain Res. 766 (1-2), 83-92 (1997).</li><li>Dinapoli, V. A., Rosen, C. L., Nagamine, T., Crocco, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+MCA+occlusion:+a+precise+embolic+stroke+model.">Selective MCA occlusion: a precise embolic stroke model.</a> J. Neurosci. Methods. 154 (1-2), 233-238 (2006).</li><li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling,+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements.">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> J Vis Exp. 59 (3496), (2012).</li><li>Bederson, J. B., Pitts, L. H., Tsuji, M., Nishimura, M. C., Davis, R. L., Bartkowski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17 (3), 472-476 (1986).</li><li>Henninger, N., Bouley, J., Br&#229;tane, B. T., Bastan, B., Shea, M., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laser+Doppler+flowmetry+predicts+occlusion+but+not+tPA-mediated+reperfusion+success+after+rat+embolic+stroke.">Laser Doppler flowmetry predicts occlusion but not tPA-mediated reperfusion success after rat embolic stroke.</a> Exp Neurol. 215 (2), 290-297 (2009).</li><li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Annexin+A2+combined+with+low-dose+tPA+improves+thrombolytic+therapy+in+a+rat+model+of+focal+embolic+stroke.">Annexin A2 combined with low-dose tPA improves thrombolytic therapy in a rat model of focal embolic stroke.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 30 (6), 1137-1146 (2010).</li><li>Cheng, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activated+protein+C+inhibits+tissue+plasminogen+activator-induced+brain+hemorrhage.">Activated protein C inhibits tissue plasminogen activator-induced brain hemorrhage.</a> Nat Med. 2 (11), 1278-1285 (2006).</li><li>Taniguchi, H., Andreasson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hypoxic-ischemic+encephalopathy+model+of+perinatal+ischemia.">The hypoxic-ischemic encephalopathy model of perinatal ischemia.</a> J Vis Exp. 21 (955), (2008).</li><li>Sicard, K. M., Fisher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+focal+brain+ischemia.">Animal models of focal brain ischemia.</a> Exp Transl Stroke Med. 1 (7), (2009).</li><li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia.">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neurosci Lett. 438 (2), 180-185 (2008).</li><li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats.">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).</li><li>Westendorp, W. F., Nederkoorn, P. J., Vermeij, J. D., Dijkgraaf, M. G., van de Beek, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-stroke+infection:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Post-stroke infection: a systematic review and meta-analysis.</a> BMC Neurol. 11 (110), (2011).</li></ol>

We do not have any potential conflicting interests to disclose.

Bu çalışmada, MCA kökeni, bir fibrin pıhtısı zengin tarafından kapatılan edildiği sıçan, bir embolik MCAO felç modelinde gerçekleştirmek için standart bir yöntem gösterilmiştir. Bu modelin en büyük avantajı ise: fibrin-zengin kan pıhtısı ile MCA kök tıkanıklığı insanlarda tromboembolik inme benzer, embolik inme modeli fibrinolitik tedavinin klinik öncesi soruşturma yapılması için uygundur, ve bu model geliştirmek olduğunu MCA tarafından sağlanan topraklarında bir tekrarlanabilir ...

A correction was made to <a href="/video/51956">Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats</a>. The institution information was updated.
The institution "Louisiana State University Health Science Center" was changed to "Louisiana State University Health Science Center, Shreveport".

A correction was made to <a href="/video/51956">Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats</a>. The institution information was updated.

Erratum: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

İnme ABD&#39;de ölüm üçüncü önde gelen nedenidir, ancak akut inme için tedavi seçenekleri sınırlı kalmıştır. Şu anda, kan pıhtıları çözmek için yeniden birleştirici doku plazminojen aktivatörü (tPA) intravenöz infüzyon akut iskemik inmenin en etkili yöntemdir. Bununla birlikte, tPA ve kullanımı bu yakın tedavi açısı ile ve intraserebral kanama riski ile sınırlıdır. Bu nedenle, trombolitik araştırma için uygun inme bir modeli acilen ihtiyaç vardır. Orta serebral arter (OSA) en sık insanlarda inme tıkalı arter olduğunu. Bu arter üzerinde duruldu, iskemik inme birçok hayvan modelleri kurulmuştur. Şu anda, MCA tıkanarak kemirgen fokal iskemi modelleri başlıca iki tip geliştirilmiştir: sütür MCAO modeli ve embolik MCAO modeli. Intraluminal sütür tekniği ile MCAO modeller yaygın mekanizması odaklı inme araştırmalarında kullanılan olmasına rağmen, bu dikiş modelleri yokİnsan strok% 80&#39;ine kadar olan mimik insan felç, tromboz veya embolizmden kaynaklanır. Ancak, kan pıhtıları kullanarak embolik inme modeli yakından insan inme taklit ve trombolitik çalışma için uygun kabul edilir. Bu model, embolik ilk olarak 1992 yılında Overgaard ve ark. 1 ile sıçanlarda geliştirilmiş ve Zhang ve arkadaşları tarafından karakterize edildi. 1997 2 ve Dinapoli ve ark. 2006 3&#39;te. Embolik MCAO artan bir ilgi kaynağı haline gelmiş olmasına rağmen, karşılaşılan sorunlar vardır, birçok laboratuvar. Bu yazıda, MCA topraklarında öngörülebilir bir enfarktüs gelişebilir yetişkin sıçan homolog kan pıhtısı ile embolik MCAO&#39;dan üretilmesi için standart bir yöntem ortaya koymaktadır. Bu makalede sunulan teknikler Araştırmacılar felç araştırma için bu modeli kurulması için teknik sorunların üstesinden gelmek için yardımcı olmalıdır.

<table><tbody><tr><td>rh-tPA</td><td>Chemical</td><td>Genentech</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-triphenyltetrazolium chloride</td><td>Chemical</td><td>Sigma</td><td>T8877</td></tr><tr><td>Anesthesia vaporizer</td><td>Equipment</td><td>Soma Technology</td><td>Drager Vapor 19.1&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Rechargeable high speed micro drill</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>18000-17</td></tr><tr><td>Curved scissors</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>14117-14</td></tr><tr><td>Dumont forceps (Medical #7)</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>11270-20</td></tr><tr><td>Dumont forceps (Medical #5)</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-35</td></tr><tr><td>Vannas-style spring scissors</td><td>Equipment</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-03</td></tr><tr><td>Veterinary recovery chamber&amp;nbsp;</td><td>Equipment&amp;nbsp;</td><td>Peco Services&amp;nbsp;</td><td>V1200&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Genie plus syringe pump</td><td>Equipment</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td></td></tr><tr><td>Rat brain matrix</td><td>Equipment</td><td>Kent Scientific Corporation</td><td>RBMA-310C</td></tr><tr><td>Digital caliper&amp;nbsp;</td><td>Equipment</td><td>World Precision Instruments</td><td>501601</td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>Equipment</td><td>World Precision Instruments</td><td>PZMTIII-BS-LWD</td></tr><tr><td>Hamilton syringe</td><td>Equipment</td><td>Hamilton</td><td>model 710</td></tr><tr><td>Homeothermic blanket control unit</td><td>Equipment</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td></tr><tr><td>Electric clipper</td><td>Equipment</td><td>Braintree Scientific</td><td>CLP-9931</td></tr><tr><td>Veterinary electrosurgical unit</td><td>Equipment</td><td>MACAN Manufacturing Company</td><td>MV-9</td></tr><tr><td>Blood flowmeter</td><td>Equipment</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab 4/30</td><td>Equipment</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>LabChart 7.2</td><td>software</td><td>Adinstruments</td><td></td></tr><tr><td>1 ml syringe</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>309659</td></tr><tr><td>23 G needle</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305143</td></tr><tr><td>30 G needle</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>305106</td></tr><tr><td>PE-50 tubing</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427517</td></tr><tr><td>PE-10 tubing</td><td>Consumable</td><td>Becton, Dickinson and Company</td><td>427400</td></tr><tr><td>6-0 Silk suture</td><td>Consumable</td><td>Harvard apparatus</td><td>723287</td></tr><tr><td>5-0 Silk suture</td><td>Consumable</td><td>Harvard Apparatus</td><td>517607</td></tr></tbody></table>

embolic middle cerebral artery occlusion (mcao) for ischemic stroke with homologous blood clots in rats

Rekombinant doku plazminojen aktivatörü (tPA) kullanımı ile Klinik, trombolitik tedavi akut iskemik inme için en etkili tedavi yöntemidir. Bununla birlikte, tPA ve kullanımı bu yakın tedavi açısı ile ve hemorajik transformasyon riski ile sınırlıdır. Iskemik inme tedavisi için yeni trombolitik ajanlar ve stratejiler incelemek için uygun inme modeller geliştirmek için acil bir ihtiyaç vardır. Intraluminal sütür MCAO&#39;dan ve embolik MCAO&#39;dan: Şu anda, iskemik inme modelleri başlıca iki türü sıçanlar ve farelerde geliştirilmiştir. Intraluminal sütür tekniği ile MCAO modeller yaygın mekanizması odaklı inme araştırmalarında kullanılan rağmen, bu sütür modelleri klinik durumu taklit değil ve trombolitik çalışmalar için uygun değillerdir. Bu modeller arasında, emboli MCAO modeli yakından insan iskemik inme taklit ve trombolitik tedavinin klinik öncesi araştırma için uygundur. Bu emboli modelin ilk Ov tarafından sıçanlarda geliştirilen1992 yılında diğ. 1 ergaard ve ayrıca Zhang ve arkadaşları tarafından karakterize edilir. 1997 2&#39;de. embolik MCAO artan ilgi kazanmış olmasına rağmen, çok sayıda laboratuarlar tarafından karşılaşılan sorunlar vardır. Trombolitik araştırma için artan ihtiyaçlarını karşılamak için, biz MCA topraklarında öngörülebilir bir enfarktüs hacmini geliştirmek sıçan, embolik MCAO&#39;dan son derece tekrarlanabilir model sunuyoruz. Kısaca, bir tadil edilmiş 50-PE tüp hafifçe MCA kökenini ulaşır kateterin ucuna kadar iç karotid arterin (ICA) lümenine dış karotid arter (ECA) ilerletilir. Kateter sayesinde, tek bir homolog kan pıhtısı MCA kökeni yerleştirilir. MCA tıkanıklığının başarısını belirlemek için, bölgesel serebral kan akımı izlendi, nörolojik açıkları ve enfarktüs hacimleri ölçüldü. Bu çalışmada sunulan teknikler inme araştırma için bu modeli kurulması için teknik sorunların üstesinden gelmek için araştırmacılara yardımcı olmalıdır. &lt;/ P&gt;

Lazerli Doppler flowmetri (LDF), serebral iskemi 6,7 indüksiyonu sırasında kan akımında izlemek için kullanıldı. Bizim laboratuvar dahil pek çok laboratuar başarılı MCA tıkanıklığı olan hayvanları tanımlamak için kan akımında kullanarak edilmiştir, ancak bazal eşikleri ölçüm site ile ilgili laboratuarlar arasında değişiyordu. LDF bir prob 2 mm&#39;lik posterior konumlandırılmış ve daha önce 6 açıklandığı gibi 5 mm&#39;lik bregma lateral. CBF, 0 ° C&#39;de iz...

Watch this Scientific Journal Video about Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats at JoVE.com

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke.

Sıçanlar Homolog Kan pıhtısı ile İskemik İnme emboli Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO)

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

embolic-middle-cerebral-artery-occlusion-mcao-for-ischemic-stroke

Research

JoVE Journal

Medicine

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

26.9K Görüntüleme.  Louisiana State University Health Science Center, Shreveport. In this paper, we demonstrate a standard method for producing an embolic middle cerebral artery occlusion with homologous blood clots (fibrin-rich) in adult rat. This model closely mimics human ischemic stroke and is suitable for preclinical study of thrombolytic therapy for ischemic stroke. 

Video: Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable clinical state; in the development of animal models of focal ischemia, however, achieving reproducibility of experimentally induced infarct volume is essential. The rat is a widely used animal model for stroke due to its relatively low animal husbandry costs and to the similarity of its cranial circulation to that of humans2,3. In humans, the middle cerebral artery (MCA) is most commonly affected in stroke syndromes and multiple methods of MCA occlusion (MCAO) have been described to mimic this clinical syndrome in animal models. Because recanalization commonly occurs following an acute stroke in the human, reperfusion after a period of occlusion has been included in many of these models. In this video, we demonstrate the transient endovascular suture MCAO model in the spontaneously hypertensive rat (SHR). A filament with a silicon tip coating is placed intraluminally at the MCA origin for 60 minutes, followed by reperfusion. Note that the optimal occlusion period may vary in other rat strains, such as Wistar or Sprague-Dawley. Several behavioral indicators of stroke in the rat are shown. Focal ischemia is confirmed using T2-weighted magnetic resonance images and by staining brain sections with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) 24 hours after MCAO.

Surgical induction of ischemic brain damage in the rat is a widely used model for stroke research. Here we demonstrate the induction of focal cerebral ischemia by occlusion of the middle cerebral artery. Visualization of the resulting infarct by histological staining and magnetic resonance imaging is also shown.

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

Nörobilim

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the brain (ischemic stroke) 2. Since most ischemic strokes (~80%) occur in the territory of middle cerebral artery (MCA) 3, many animal stroke models that have been developed have focused on this artery. The intraluminal monofilament model of middle cerebral artery occlusion (MCAO) involves the insertion of a surgical filament into the external carotid artery and threading it forward into the internal carotid artery (ICA) until the tip occludes the origin of the MCA, resulting in a cessation of blood flow and subsequent brain infarction in the MCA territory 4. The technique can be used to model permanent or transient occlusion 5. If the suture is removed after a certain interval (30 min, 1 h, or 2 h), reperfusion is achieved (transient MCAO); if the filament is left in place (24 h) the procedure is suitable as a model of permanent MCAO. This technique does not require craniectomy, a neurosurgical procedure to remove a portion of skull, which may affect intracranial pressure and temperature 6. It has become the most frequently used method to mimic permanent and transient focal cerebral ischemia in rats and mice 7,8. To evaluate the extent of cerebral infarction, we stain brain slices with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) to identify ischemic brain tissue 9. In this video, we demonstrate the MCAO method and the determination of infarct size by TTC staining.

We demonstrate in the video a method for producing a middle cerebral artery occlusion in adult mice using an intraluminal monofilament. We also show how to evaluate the extent of cerebral infarction by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) staining.

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Tıp

Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, obesity and diabetes. Accordingly, when evaluating therapies for stroke in animals, it is important to select a model with excellent face validity. Ischemic stroke accounts for 80% of all strokes, and the majority of these occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA), often inducing infarcts that affect the sensorimotor cortex, causing persistent plegia or paresis on the contralateral side of the body. We demonstrate in this video a method for producing ischemic stroke in elderly rats, which causes sustained sensorimotor disability and substantial cortical infarcts. Specifically, we induce permanent distal middle cerebral artery occlusion (MCAO) in elderly female rats by using diathermy forceps to occlude a short segment of this artery. The carotid artery on the ipsilateral side to the lesion was then permanently occluded and the contralateral carotid artery was transiently occluded for 60 min. We measure the infarct size using structural T2-weighted magnetic resonance imaging (MRI) at 24 hr and 8 weeks after stroke. In this study, the mean infarct volume was 4.5% &#177; 2.0% (standard deviation) of the ipsilateral hemisphere at 24 hr (corrected for brain swelling using Gerriet&#8217;s equation, n = 5). This model is feasible and clinically relevant as it permits the induction of sustained sensorimotor deficits, which is important for the elucidation of pathophysiological mechanisms and novel treatments.

Here we present a protocol to produce permanent distal middle cerebral artery occlusion in elderly female rats with simultaneous occlusion of the carotid arteries to generate large cortical infarcts and sustained deficits. We show confirmation of the lesion size using structural MRI at 24 hr and 8 weeks after stroke.

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Stroke typically occurs in elderly people with a range of comorbidities including carotid (or other arterial) atherosclerosis, high blood pressure, ...

Induction of Ischemic Stroke and Ischemia-reperfusion in Mice Using the Middle Artery Occlusion Technique and Visualization of Infarct Area

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of stroke on tissue injury and to evaluate the effectiveness of therapeutic interventions, several experimental models in a variety of species were developed. They include complete global cerebral ischemia, incomplete global ischemia, focal cerebral ischemia, and multifocal cerebral ischemia. The model described in this protocol is based on the middle cerebral artery occlusion (MCAO) and is related to the focal ischemia category. This technique produces consistent focal ischemia in a strictly defined region of the hemisphere and is less invasive than other methods. The procedure described is performed on mice, given the availability of several genetic variants and the high number of tests standardized for mice to aid in the behavioral and neurodeficit evaluation.

We describe a mouse model of stroke induced by the occlusion of the middle cerebral artery using a silicone coated suture. The protocol can be applied to induce permanent occlusion or a temporary ischemia, followed by reperfusion.

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Cerebrovascular disease is highly prevalent in the global population and encompasses several types of conditions, including stroke. To study the impact of ...

Middle Cerebral Artery Occlusion Allowing Reperfusion via Common Carotid Artery Repair in Mice

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue plasminogen activator (tPA) as an approved drug treatment to target ischemic strokes. Current research in the field of ischemic stroke focuses on better understanding the pathophysiology of stroke, to develop and investigate novel pharmaceutical targets. Reliable experimental stroke models are crucial for the progression of potential treatments. The middle cerebral artery occlusion (MCAO) model is clinically relevant and the most frequently used surgical model of ischemic stroke in rodents. However, the outcomes of this model, such as lesion volume, are associated with high levels of variability, particularly in mice. The alternative MCAO model described here allows the reperfusion of the common carotid artery (CCA) and the increased perfusion of the middle cerebral artery (MCA) territory, using a tissue pad with fibrinogen-based sealant to repair the vessel, and the improved welfare of the mice by avoiding external carotid artery (ECA) ligation. This reduces the reliance on the Circle of Willis, which is known to be highly anatomically variable in mice. Representative data show that using this alternative surgical approach decreases the variability in lesion volumes between the traditional MCAO approach and the alternative approach described here.

Intraluminal filament occlusion of the middle cerebral artery is the most frequently used in vivo model of experimental stroke in rodents. An alternative surgical approach to allow common carotid artery repair is performed here, which allows the reperfusion of the common carotid artery and a full reperfusion to the middle cerebral artery territory.

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

The ischemic stroke is a major cause of adult long-term disability and death worldwide. The current treatments available are limited, with only tissue ...

Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Fareleri Modelinin Kurulması

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

Yazar Spotlight: İnme Araştırmalarında Yenilikçi Teknikler ve Gelecekteki Yönelimler 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

İskemik İnme Fare Modeli Geliştirmek için Distal Orta Arter Oklüzyonu

Induction of Acute Ischemic Stroke in Mice Using the Distal Middle Artery Occlusion Technique

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic stroke patients are eligible to receive intravascular thrombolysis or mechanical thrombectomy therapy within the optimal time window. Among those stroke survivors, around two-thirds suffer neurological dysfunctions over an extended period. Establishing a stable and repeatable experimental ischemic stroke model is extremely significant for further investigating the pathophysiological mechanisms and developing effective therapeutic strategies for ischemic stroke. The middle cerebral artery (MCA) represents the predominant location of ischemic stroke in humans, with the MCA occlusion serving as the frequently employed model of focal cerebral ischemia. In this protocol, we describe the methodology of establishing the distal MCA occlusion (dMCAO) model through transcranial electrocoagulation in C57BL/6 mice. Since the occlusion site is located at the cortical branch of MCA, this model generates a moderate infarcted lesion restricted to the cortex. Neurological behavioral and histopathological characterization have demonstrated visible motor dysfunction, neuron degeneration, and pronounced activation of microglia and astrocytes in this model. Thus, this dMCAO mouse model provides a valuable tool for investigating the ischemiastroke and worth of popularization.

Yazar Spotlight: İnme Araştırmaları için Farelerde Güvenilir Bir Distal MCA Oklüzyon Modeli Oluşturma

Here, we present a protocol to establish a distal middle cerebral artery occlusion (dMCAO) model through transcranial electrocoagulation in C57BL/6J mice and evaluate the subsequent neurological behavior and histopathological features.

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Ischemic stroke remains the predominant cause of mortality and functional impairment among the adult populations globally. Only a minority of ischemic ...

Sıçanlar Homolog Kan pıhtısı ile İskemik İnme emboli Orta Serebral Arter Tıkanıklığı (MCAO)

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fare Modeli

Yaşlı Sıçanlarda Ortak Karotis Arter Tıkanıklığı ile Kalıcı Distal Orta Serebral Sahne Kortikal İskemi Sürekli Engelli Eğitim için

Enfarktüs Bölgesi Orta Arter Tıkanıklığı Tekniği ve Görselleştirme kullanma Fare İskemik İnme ve İskemi-reperfüzyon indüksiyon

Orta serebral arter tıkanıklığı ortak karotid arter onarım ile reperfüzyon farelerde izin

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu

Distal Orta Arter Oklüzyonu Tekniği Kullanılarak Farelerde Akut İskemik İnme İndüksiyonu