Biz Beth Rauch ve Wisconsin Üniversitesi Küçük Hayvan Görüntüleme Tesis manyetik rezonans görüntüleme için teşekkür ederiz. Wisconsin-Madison Üniversitesi Beyin Cerrahisi Anabilim Dalı, bu iş için fon sağladı.

MCAO Rat Modeli Cerrahi öncesi hazırlıklar Aseptik teknik, bütün hayatta kalma cerrahi işlemler için kullanılmalıdır. Cerrahi çalışma yüzeyine ticari dezenfektan ile dezenfekte edin ve otoklav ile steril cerrahi aletler, perdeler, gazlı bez, bezlerden, dikiş, bisturi ağızları paketleri hazırlamak. Cerrahi maske, saç kaput ve steril eldiven giyilmelidir. A Germinator kuru boncuk sterilizatör da bir oturum sırasında birden fazla sıçan ameliyatları yapılabilir. Prosedürleri arasında cerrahi aletler tekrar sterilize etmek için kullanılır. Emici ped altında Prewarm su-ceketli homeothermic battaniye ve yeri, ameliyat sırasında sıçan hipotermi önlemek için. <ol><li> Spontan hipertansif sıçan (ya da seçtiğiniz diğer sıçan suşu) indüksiyon odasına yerleştirin ve anestezi neden izofluran (% 5 anestezi makinesi 1.0 L / dk O 2 ve 1.0 L / dk N 2 O set olması lazım). % 1-2 izofluran anesteziyi idame ettirmek için indirin. </li><li> Her iki gözde Yapay Tears merhem sürün. </li><li> Tıraş kesme makineleri (# 10 bıçak Oster A5) kullanılarak prospektif kesi yeri ötesinde, boğaz ve sol boyun bölgesi. </li><li> Bir gazlı bezle Betadine uygulayın ve cerrahi bölgenin merkezi başlayarak dışa doğru helezonik cildi dezenfekte edin. Benzer bir model ped hareketli,% 70 etanol içeren steril gazlı bezle durulayın. Toplam üç kür için her iki adımları tekrarlayın. </li><li> Prospektif kesi yeri boyunca subkutan% 0.5 bupivakain 0.2 ml enjekte edilir. </li><li> Steril cerrahi örtü ile steril stockinette veya kapak yerleştirin sıçan. </li></ol> Geçici MCA oklüzyonu <ol start="7"><li> Operasyon mikroskobu altında, ventral orta hat kesi yapılır ve yüzeysel fasya disseke edilir. </li><li> Son olarak sternomastoid kas ve sindirimve (parlak beyaz tendinöz kısmı ile kolayca tespit); trakea üzerinde orta hat yatıyor sternohyoid, yüzeysel fasya altında, bir üçgen oluşturan sol ve üç kaslara glandüler doku. </li><li> Karotis arter (kaza sonucu doku hasarı en aza indirmek için bazı özel künt diseksiyon tercih edilebilir) tanımlamak için üçgen içinde dikkatli keskin ve künt diseksiyon yapılır. Iç, dış ve ortak karotid arterler (ECA, ICA, CCA) maruz kalmaktadır. Karotis arter büyük ve gözle görülür bir bakliyat. Vagus siniri ortak ve iç karotid arterlerin lateral boyunca dolaşan ve keskin bir ortak ve iç karotid arterlerin kapalı disseke edilir. </li><li> İki ECA dalları sonra ilk şubesini mediale başlığı ve ikinci şubesini yanal başlığı, keskin disseke. Her iki şubesi daha büyük gemilerin harekete geçirilmesi daha kolay sağlar, koterize ve kesilir. </li><li> ECA, şimdi daha rostrally disseke edilir. Hyoid kemik karşılaştı olabilir ve bu rostral diseksiyon ölçüde sınırlayacaktır. Eksternal karotid arter distalde olarak 6-0 ipek sütür ile mümkün bağlıdır. </li><li> Bir başka 6-0 ipek sütür ICA ile bifurkasyon yakın ECA çevresinde gevşek olarak yerleştirilir. Oklüzyon için kullanılmak üzere bir sonraki adımda intraluminal dikiş burada geçiyor olacak gibi gemi kapamak için değil emin olun. </li><li> Mikrocerrahi klipleri çatallanma yakın ortak ve iç karotid arterler üzerine yerleştirilir. </li><li> Eksternal karotid arter iki ipek sütür bağları arasında bir ilk kısmi arteriyotomi oluşturulur. </li><li> 4-0 prolen sütür ECA lümen içine silikon kaplı yuvarlak, bir ucundan bir bükülme 2.0 cm ile 2.2 -3.0 cm uzunluğunda, mikrocerrahi klibi bulunan CCA doğru tanıtmak. Bu dikişler ticari olarak mevcuttur (Doccol Corp, Redlands, CA, USA). ECA ve ICA çatallanma altında güdük güdük ve pozisyon ücretsiz Cut ECA kalan kısmı (kısmi arteriyotomi yerinde), bu daha kolay intraluminal dikiş ICA slayt sağlayacaktır. </li><li> Intraluminal naylon dikiş ve kanama önlemek güvenli ve daha sonra ICA mikrovasküler klibini kaldırmak için ipek sütür ECA güdük etrafında sıkın. Kanama kontrol etmek için çıkarmadan önce yavaş yavaş klibi açın. </li><li> Orta serebral arter (MCA), ECA ve ICA lümen naylon dikiş ilerleyen devam edin. Bu uzunluk, genellikle 18-20 mm ve ekleme önce dikiş kink yerleştirmek için nedeni budur. Naylon sütür bir değişken uzunluğu takıldıktan sonra, direnç hissedilebilir. Bu geminin dışında halen naylon sütür ile oluşursa, dikiş muhtemelen pterigopalatin arter (aşağıdaki nota bakınız) girdiğini gösterir. Geri çekin ve eğri sütür biraz daha mediale çalışacağı, ICA boyunca devam etmek. Ayrıca, Kamu İhale kökenli diseksiyon yolu daha iyi görselleştirmek için yapılabilirintraluminal filament. Direnç ve 2 cm bükülmüş pozisyonda sonra hissedilir kadar naylon sütür eklemek için devam edin. Bu noktada, intraluminal dikiş MCA kökeni engelledi. OSA oklüzyonu, bir lazer Doppler debimetre (tek bir donanım kaynağı için Malzemeler tabloya bakınız) kullanılarak bölgesel serebral kan akımında azalma izleme ile teyit edilebilir. Ayrıca bu gemi intraluminal sütür ile yanlışlıkla entübasyon önlemek için, eğer tercih ICA pterigopalatin arter kökeni, doğrudan bağlanır olabilir unutmayın. </li><li> Zamanlayıcı ve kayıt oklüzyon başlangıç ​​zamanı başlayın. </li><li> CCA microclip çıkarın. </li><li> 3-0 ipek sütür (basit bir sürekli desen reperfüzyon için yeniden açılmasını kolaylaştıracaktır) ile hızlı bir kesi (dermis, panniculus carnosus, subkutan doku katmanlarına) kapatın ve sıçan bir kurtarma kafes dikkatlice yerleştirin. Burun ve ağız çevresinde kafes katında yatak malzemesi ve anestezi monitör kurtarma ücretsiz olup olmadığını kontrol edin. </li></ol> MCA kan akım Restorasyonu (reperfüzyon) <ol start="21"><li> Oklüzyon dönem sonu kısa bir süre önce, sıçan yeniden uyutmak Betadine ve% 70 etanol (3 döngüleri, daha önce olduğu gibi) ile kesi yeri dezenfekte ve kapanış sütür kaldırarak kesi yeniden. </li><li> Önce olduğu gibi, CCA bir microclip yerleştirin. </li><li> Kapatılmasıy dikiş partway ICA, ICA ile dikiş sonu görünür oluncaya kadar çekin. ICA / ECA tamamen dikiş ÇIKARMAYIN ! </li><li> Intraluminal dikiş sonunda yukarıda ICA microclip yerleştirin. </li><li> Tamamen kapatılmasıy dikiş kaldırmak ve ECA güdük sıkıca kapalı kravat. Oklüzyonu sonunda (reperfüzyon başlangıç) zaman. </li><li> ICA microclip çıkarın. </li><li> CCA microclip çıkarın. </li><li> Bölgede birkaç damla steril serum fizyolojik ile ıslatın ve basit bir kesintiye desen kullanırken 3-0 ipek sütür ile kesi katmanları (dermis, panniculus carnosus, derialtı dokusu) kapatın. </li><li> Peritoneal boşluğa (kurumsal yönergeleri izleyerek ya da diğer uygun post-operatif ağrı kesici) 0.05 mg / kg buprenorfin yönetme. </li><li> 5cc prewarmed serum fizyolojik intraperitoneal olarak enjekte edilir. Bu kurtarma aşamasında hidrasyon sağlayacaktır. </li><li> Anesteziden sıçan kurtarma izleyin. </li><li> Sıçan kurtarıldı sonra, kuyruk sıçan tutan ve sıçan, her iki taraf için açabilirsiniz olup olmadığını gözlemlemek enfarktüsü davranışsal endikasyon için test edin. Sadece bir tarafa Curling bekleniyor. Basit puanlama ölçekleri ilk post-infarkt behavorial işleyişi (Tartışma) kaydetmek için kullanılan olabilir. </li><li> Buprenorfin (yukarıdaki gibi aynı doz) Ek enjeksiyonu için her 6 ila 8 saat 24 saat ağrı kesici verilmelidir. Hayvan rahatsızlık belirtileri gösteriyor ise analjezi uzatın. </li></ol> Temsilcisi Sonuçlar <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Endovasküler sütür ile orta serebral arter tıkanıklığı sıçan kraniyal dolaşım sisteminin basitleştirilmiş bir şeması MCA kökeni kapatılmasıy bir silikon kaplı intraluminal sütür ile gösterilir. Sol ECA OA ve ST dalları bağlandı ve ECA güdük etrafında bir dikiş kravat yerine intraluminal dikiş tutar olmuştur. ACA, anterior serebral arter, BA, baziler arter; CCA, karotis arter; ECA, eksternal karotid arter; ICA, internal karotid arter; MCA, orta serebral arter, OA, oksipital arter; PCA, posterior serebral arter; PComA, arka iletişim arter; PPA, pterigopalatin arter; ST, üstün tiroid arter. Sasaki ve ark. 4 ve Lee 3 uyarlanmıştır Şekil. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2. Sıçan beyni 24 saat koronal bölümleri Temsilcisi manyetik rezonans görüntüleme, 1 saat geçici MCAO sonra Beyin ödemi fokal iskemi ile birlikte T2 ağırlıklı MR görüntülerde görüntülenmiştir . Infarkt bölgesi T2 görüntülerde hiperintens (parlak) görünür. Benzer infarkt şekilleri, difüzyon ağırlıklı görüntüleme ve 5 haritalama görünen difüzyon katsayısı gibi daha ileri MRG teknikleri ile görülebilir. <img src="/files/ftp_upload/1978/1978fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3. Sıçan beyin Temsilcisi koronal bölümleri, 1 saat geçici MCAO sonra TTC 24 saat ile boyandı. TTC boyama Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi aynı sıçan serebral korteks ve striatum beyaz (boyasız) enfarkte bölgelerinde ortaya koymaktadır. Belirlenen nihai enfarkt alan histolojik T2 lezyon biraz daha küçük olsa da fokal iskemik lezyonların genel desen, MRG T2 ağırlıklı görüntülerde görülen benzer olduğunu unutmayın.

<ol>
	<li>van Gijn, J., Dennis, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Issues+and+answers+in+stroke+care.">Issues and answers in stroke care.</a> Lancet. 352, SIII23-27 (1998).</li><li>Macrae, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+models+of+focal+cerebral+ischaemia.">New models of focal cerebral ischaemia.</a> British Journal of Clinical Pharmacology. 34, 302-302 (1992).</li><li>Lee, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphology+of+cerebral+arteries.">Morphology of cerebral arteries.</a> Pharmacol Ther. 66, 149-173 (1995).</li><li>Sasaki, M., Honmou, O., Kocsis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+model+and+intravenous+cellular+delivery.">A rat middle cerebral artery occlusion model and intravenous cellular delivery.</a> Methods Mol Biol. 549, 187-195 (2009).</li><li>Br&#229;tane, B. T., Bastan, B., Fisher, M., Bouley, J., Henninger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+lesion+volume+determination+on+diffusion+weighted+images+vs.+apparent+diffusion+coefficient+maps.">Ischemic lesion volume determination on diffusion weighted images vs. apparent diffusion coefficient maps.</a> Brain Res. 1279, 182-188 (2009).</li><li>Chen, S. T., Hsu, C. Y., Hogan, E. L., Maricq, H., Balentine, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+of+focal+ischemic+stroke+in+the+rat:+reproducible+extensive+cortical+infarction.">A model of focal ischemic stroke in the rat: reproducible extensive cortical infarction.</a> Stroke. 17, 738-743 (1986).</li><li>Dogan, A., Ba&#351;kaya, M. K., Rao, V. L., Rao, A. M., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraluminal+suture+occlusion+of+the+middle+cerebral+artery+in+Spontaneously+Hypertensive+rats.">Intraluminal suture occlusion of the middle cerebral artery in Spontaneously Hypertensive rats.</a> Neurol Res. 20, 265-270 (1998).</li><li>Ogata, J., Fujishima, M., Morotomi, Y., Omae, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cerebral+infarction+following+bilateral+carotid+artery+ligation+in+normotensive+and+spontaneously+hypertensive+rats:+a+pathological+study.">Cerebral infarction following bilateral carotid artery ligation in normotensive and spontaneously hypertensive rats: a pathological study.</a> Stroke. 7, 54-60 (1976).</li><li>Brint, S., Jacewicz, M., Kiessling, M., Tanabe, J., Pulsinelli, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+brain+ischemia+in+the+rat:+methods+for+reproducible+neocortical+infarction+using+tandem+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+and+ipsilateral+common+carotid+arteries.">Focal brain ischemia in the rat: methods for reproducible neocortical infarction using tandem occlusion of the distal middle cerebral and ipsilateral common carotid arteries.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 474-485 (1988).</li><li>Duverger, D., MacKenzie, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+quantification+of+cerebral+infarction+following+focal+ischemia+in+the+rat:+influence+of+strain,+arterial+pressure,+blood+glucose+concentration,+and+age.">The quantification of cerebral infarction following focal ischemia in the rat: influence of strain, arterial pressure, blood glucose concentration, and age.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 8, 449-461 (1988).</li><li>Coyle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+susceptibilities+to+cerebral+infarction+in+spontaneously+hypertensive+(SHR)+and+normotensive+Sprague-Dawley+rats.">Different susceptibilities to cerebral infarction in spontaneously hypertensive (SHR) and normotensive Sprague-Dawley rats.</a> Stroke. 17, 520-525 (1986).</li><li>Slivka, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+and+hyperglycemia+in+experimental+stroke.">Hypertension and hyperglycemia in experimental stroke.</a> Brain Res. 562, 66-70 (1991).</li><li>Bouley, J., Fisher, M., Henninger, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+between+coated+vs.+uncoated+suture+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+rat+as+assessed+by+perfusion/diffusion+weighted+imaging.">Comparison between coated vs. uncoated suture middle cerebral artery occlusion in the rat as assessed by perfusion/diffusion weighted imaging.</a> Neurosci Lett. 412, 185-190 (2007).</li><li>Schmid-Elsaesser, R., Zausinger, S., Hungerhuber, E., Baethmann, A., Reulen, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+critical+reevaluation+of+the+intraluminal+thread+model+of+focal+cerebral+ischemia:+evidence+of+inadvertent+premature+reperfusion+and+subarachnoid+hemorrhage+in+rats+by+laser-Doppler+flowmetry.">A critical reevaluation of the intraluminal thread model of focal cerebral ischemia: evidence of inadvertent premature reperfusion and subarachnoid hemorrhage in rats by laser-Doppler flowmetry.</a> Stroke. 29, 2162-2170 (1998).</li><li>Shimamura, N., Matchett, G., Tsubokawa, T., Ohkuma, H., Zhang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+silicon-coated+nylon+suture+to+plain+nylon+suture+in+the+rat+middle+cerebral+artery+occlusion+model.">Comparison of silicon-coated nylon suture to plain nylon suture in the rat middle cerebral artery occlusion model.</a> J Neurosci Methods. 156, 161-165 (2006).</li><li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats.">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20, 84-91 (1989).</li><li>Shigeno, T., McCulloch, J., Graham, D. I., Mendelow, A. D., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pure+cortical+ischemia+versus+striatal+ischemia.+Circulatory,+metabolic,+and+neuropathologic+consequences.">Pure cortical ischemia versus striatal ischemia. Circulatory, metabolic, and neuropathologic consequences.</a> Surgical neurology. 24, 47-51 (1985).</li><li>Bederson, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+middle+cerebral+artery+occlusion:+evaluation+of+the+model+and+development+of+a+neurologic+examination.">Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination.</a> Stroke. 17, 472-476 (1986).</li></ol>

Yazarlar ifşa çatışan çıkarları var. Bu protokol, Tıp ve Halk Sağlığı ve uymaktadır deney hayvanlarının kullanımı için sağlık kuralları National Institutes of Wisconsin-Madison Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylandı.

Serebral iskemi Kemirgen modelleri, küresel veya fokal ve geri dönüşümlü veya dönüşümsüz olarak sınıflandırılabilir. Biz insan inmeli hastalarda aşağıdaki rekanalizasyon oluşabilir reperfüzyon hasarı taklit etmek için bir tersinir fokal iskemi modeli kullanın. Iken sıçan hisse senetleri, insan, Circle Willis ve tutarsız infarkt hacimleri 6 leptomeningeal anastomozlar sonuçları nedeniyle kapsamlı intrakranial kollateral dolaşım benzer kafatası dolaşımı avantaj. Infarkt 7-10 normotansif sıçanlara kıyasla fokal serebral iskemi maruz SHRs büyüktür, çünkü spontan hipertansif sıçan (SHR) suşu kullanın. SHRs inme endüksiyon da daha tutarlı ve yaygın olarak kullanılan diğer suşların 11 daha az ölüm oluşturabilir. Dalgalanmalar infarkt hacimleri değişkenliği ekleyebilirsiniz Buna ek olarak, fizyolojik parametrelere, ameliyat boyunca takip edilmelidir; bu parametrelerin iskemik hasarı arttırabilir 2,12 kan basıncı, arteriyel O 2 ve CO 2 düzeyleri, hipotermi ve hiperglisemi, . Hipotermi esastır, ameliyat sırasında bir termoregülatuar ısıtma yastığı sıçan yerleştirerek, bu nedenle nöronal iskemik hasarın derecesini azaltmak, çünkü özellikle endişe vericidir. Biz ticari bir girişim infarkt boyutu 13-15 tutarlılığını artırmak için bu yordamı silikon kaplı sütür hazırlanan istihdam etmektedir. Geleneksel olarak, MCA kapamak için kullanılan intraluminal sütür alev yuvarlama 3-0 naylon sütür ucu veya kat küçük bir tutkal boncuk 16 dikiş ucu bir sıcak tutkal tabancası kullanarak tarafından hazırlanmıştır. Bu prosedürler, belirli bir sıçan damar çapı eşleşen bir dikiş bulmadan oklüzyon birkaç deneme gerektirebilir, dolayısıyla farklı uç çap ve dikişlerle üretir. Bu video açıklanan MCAO yöntem Ek varyasyonları daha distal tıkanıklığı, kollateral kan akımı 6,9 azaltmak için saf bir kortikal enfarkt 17 ve aynı anda MCA ve ipsilateral karotis arter oklüzyonu için lentikülostriat dalları koruyucu içerir . Fonksiyonel etkileri inme, belirli görevleri açıklar basit bir puanlama ölçekte yansıtılmıştır davranış testleri, çeşitli kullanılarak tespit edilebilir. Örneğin, Bederson ve ark. 18 yüksek bir vücut pozisyonu, lateral itme asimetrik direnç, ve açık alan çizerek davranışı ön ayakları fleksiyon ölçüde bir nörolojik skoru derecelendirme sıçanlarda geliştirdi. Yükselmiş ve başka hiçbir açıkları sergileyen hem ön ayakları yere uzanan Sıçanlar derecelendirildi &quot;Normal&quot; (0), sadece kontralateral ön ayakları fleksiyon ile sıçan &quot;Orta açıkları (1)&quot; sınıflandırılmış idi. &quot;Şiddetli notu 2&quot; sıçan yanal kuvvet kontralateral tarafta azalmış direnç gösterilir ve &quot;Ciddi grade 3&quot; sıçan ayrıca çizerek davranışları yapan. Düşük dereceli davranış açıkları her zaman bir sonraki daha yüksek dereceli gözlenen (örneğin, grade 2 ve 3 hayvan da ön ayakları fleksiyon görüntülenir) ve bu puanları infarkt 18 farklılıklar tahmin edildi. Bu nedenle inme fonksiyonel açıklarının hızlı, tutarlı bir yarı-kantitatif bir değerlendirme için, böyle basit bir skorlama sistemi sağlar. Beyin enfarktüsü ölçüde ölçümü yaygın cresyl menekşe, TTC (Nissl leke) veya hematoksilen ve eosin ile doku hasarı histolojik boyama ile gerçekleştirilir. Manyetik rezonans görüntüleme teknikleri difüzyon ağırlıklı oklüzyon sonra doku hasat için gerek kalmadan, her bir sıçan bir infarkt hacminin belirlenmesi için izin erken zaman noktalarında infarkt görselleştirmek için MR. MCAO sonra sıçan görüntüleme ama önce tedavi yönetimi değişkenlik karıştırıcı etkilerinin azaltılması, tüm deney ve kontrol hayvanların benzer vuruş başlatmak için deneyimli araştırmacı güven verir; Bu, inme sonrası bir nöroprotektif tedavi etkinliğinin belirlenmesine yönelik çalışmalar özellikle değerli İnme indüksiyon.

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td> 4-0 Nylon suture</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Doccol Corporation</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>2-3 mm silicon coating length, 0.39 mm tip diameter</td>
</tr>
<tr>
<td>Spontaneously hypertensive rats</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Charles River Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>290-300 g, male</td>
</tr>
<tr>
<td>Gaymar T/Pump thermoregulatory pump and pads</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Gaymar Industries</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vetroson V-10 bipolar electrosurgical unit</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Summit Hill Laboratories</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Germinator 500 glass bead sterilizer</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>CellPoint Scientific </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Vasamedics Bpm2Laserflo blood perfusion monitor</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>TSI Inc.</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>		</tbody>
		</table>
		</div>

focal cerebral ischemia model by endovascular suture occlusion of the middle cerebral artery in the rat

İnme, 1 dünya çapında yetişkin sakatlık ve ölüm üçüncü önde gelen nedenidir önde gelen nedenidir . Insan inme, son derece değişken bir klinik devlet vardır; Ancak, fokal iskemi gelişimi hayvan modellerinde deneysel olarak infarkt hacmi tekrarlanabilirliği sağlamak esastır. Rat nispeten düşük hayvancılık maliyetleri ve insanlar 2,3 kafa dolaşımı benzerliği nedeniyle inme için yaygın olarak kullanılan bir hayvan modeli. İnsanlarda, orta serebral arter (MCA) inme sendromlar ve MCA tıkanıklığı (MCAO) birden çok yöntem en sık etkilenen hayvan modellerinde bu klinik sendrom taklit etmek için tarif edilmiştir. Rekanalizasyon yaygın oklüzyon bir süre sonra insan, reperfüzyon bir akut inme sonrası oluşur çünkü bu modellerin çoğunda dahil edilmiştir. Bu video, spontan hipertansif sıçan (SHR) geçici endovasküler dikiş MCAO modeli ortaya koymaktadır. Silikon meme kaplama ile filament reperfüzyon ile 60 dakika için MCA kökenli intraluminally yerleştirilir. Wistar veya Sprague-Dawley sıçan suşları, en uygun oklüzyon süresi değişebilir unutmayın. Sıçan inme birçok davranışsal göstergeler. Fokal iskemi doğruladı ve T2 ağırlıklı manyetik rezonans görüntüleri kullanarak beynin bölümleri MCAO 24 saat sonra 2,3,5-triphenyltetrazolium klorür (TTC) ile boyanarak.

Watch this Scientific Journal Video about Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat at JoVE.com

Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Sıçan iskemik beyin hasarı Cerrahi indüksiyon inme araştırma için yaygın olarak kullanılan bir model. Burada orta serebral arter oklüzyonu ile fokal serebral iskemi indüksiyon göstermektedir. Histolojik boyama ve manyetik rezonans görüntüleme ile enfarkt Görselleştirme de gösterilir.

Endovasküler Dikiş Rat Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Fokal Serebral İskemi Model

Stroke is the leading cause of disability and the third leading cause of death in adults worldwide1. In human stroke, there exists a highly variable ...

focal-cerebral-ischemia-model-endovascular-suture-occlusion-middle

Research

JoVE Journal

Neuroscience

79.2K Görüntüleme.  University of Wisconsin-Madison. Sıçan iskemik beyin hasarı Cerrahi indüksiyon inme araştırma için yaygın olarak kullanılan bir model. Burada orta serebral arter oklüzyonu ile fokal serebral iskemi indüksiyon göstermektedir. Histolojik boyama ve manyetik rezonans görüntüleme ile enfarkt Görselleştirme de gösterilir.

Video: Focal Cerebral Ischemia Model by Endovascular Suture Occlusion of the Middle Cerebral Artery in the Rat

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of motor and cognitive disabilities. Its high prevalence poses a serious health burden, as stroke is among the principal causes of long-term disability and death worldwide1. Recovery of neuronal function is, in most cases, only partial. So far, treatment options are very limited, in particular due to the narrow time window for thrombolysis2,3. Determining methods to accelerate recovery from stroke remains a prime medical goal; however, this has been hampered by insufficient mechanistic insights into the recovery process. Experimental stroke researchers frequently employ rodent models of focal cerebral ischemia. Beyond the acute phase, stroke research is increasingly focused on the sub-acute and chronic phase following cerebral ischemia. Most stroke researchers apply permanent or transient occlusion of the MCA in mice or rats. In patients, occlusions of the MCA are among the most frequent causes of ischemic stroke4. Besides proximal occlusion of the MCA using the filament model, surgical occlusion of the distal MCA is probably the most frequently used model in experimental stroke research5. Occlusion of a distal (to the branching of the lenticulo-striate arteries) MCA branch typically spares the striatum and primarily affects the neocortex. Vessel occlusion can be permanent or transient. High reproducibility of lesion volume and very low mortality rates with respect to the long-term outcome are the main advantages of this model. Here, we demonstrate how to perform a chronic cranial window (CW) preparation lateral to the sagittal sinus, and afterwards how to surgically induce a distal stroke underneath the window using a craniotomy approach. This approach can be applied for sequential imaging of acute and chronic changes following ischemia via epi-illuminating, confocal laser scanning, and two-photon intravital microscopy.

Lateral Chronic Cranial Window Preparation Enables In Vivo Observation Following Distal Middle Cerebral Artery Occlusion in Mice

Surgical occlusion of a distal middle cerebral artery branch (MCAo) is a frequently used model in experimental stroke research. This manuscript describes the basic technique of permanent MCAo, combined with the insertion of a lateral cranial window, which offers the opportunity for longitudinal intravital microscopy in mice.

Yanal Kronik Kranial Pencere Hazırlık sağlar<em&gt; İn Vivo</em&gt; Farelerde Distal Orta Serebral Arter Tıkanıklığı takiben Gözlem

Focal cerebral ischemia (i.e., ischemic stroke) may cause major brain injury, leading to a severe loss of neuronal function and consequently to a host of ...

Nörobilim

A Rat Model of Mild Intrauterine Hypoperfusion with Microcoil Stenosis

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies of this phenomenon have been performed in either models with severe intrauterine ischemia or models with gradient degree of intrauterine hypoperfusion. No study has been performed in a model on uniform mild intrauterine hypoperfusion (MIUH). Two models have been used for studies of MIUH: a model based on suture ligation of either side of the arterial arcade formed with the uterine and ovarian arteries, and a transient model based on clipping the bilateral ovarian arteries and aorta having patency. Those two rodent models of MIUH have some limitations, e.g., not all fetuses are subjected to MIUH, depending on their position in the uterine horn. In our MIUH model, all fetuses are subjected to a comparable level of intrauterine hypoperfusion. MIUH was achieved by mild stenosis of all four arteries feeding the uterus, i.e., the bilateral uterine and ovarian arteries.
Arterial stenosis was induced by metal microcoils wrapped around the feeding arteries. Producing arterial stenosis with microcoils allowed us to control, optimize, and reproduce decreased blood flow with very little inter-animal variability and a low mortality rate, thus enabling accurate evaluation. When microcoils with an inner diameter of 0.24 mm were used, the blood flow in both the placenta and fetus was mildly decreased (approximately 30% from the pre-stenosis level in the placenta). The offspring of our MIUH model clearly demonstrates long-lasting alterations in neurological, neuroanatomical and behavioral test results.

Mild intrauterine hypoperfusion was produced by artery stenosis with metal microcoils wrapped around the uterine and ovarian arteries in rats at embryonic day 17. This procedure produced prenatal hypoperfusion and intrauterine growth restriction.

Microcoil stenoz ile hafif intrauterin hipoperfüzyon fare modeli

Intrauterine hypoperfusion/ischemia is one of the major causes of intrauterine/fetal growth restriction, preterm birth, and low birth weight. Most studies ...

Effects of Blast-induced Neurotrauma on Pressurized Rodent Middle Cerebral Arteries

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral vascular effects. Impact (i.e., non-blast) traumatic brain injury (TBI) is known to decrease pressure autoregulation in the cerebral vasculature in both humans and experimental animals. The hypothesis that blast-induced traumatic brain injury (bTBI), like impact TBI, results in impaired cerebral vascular reactivity was tested by measuring myogenic dilatory responses to reduced intravascular pressure in rodent middle cerebral arterial (MCA) segments from rats subjected to mild bTBI using an Advanced Blast Simulator (ABS) shock tube. Adult, male Sprague-Dawley rats were anesthetized, intubated, ventilated and prepared for Sham bTBI (identical manipulation and anesthesia except for blast injury) or mild bTBI. Rats were randomly assigned to receive Sham bTBI or mild bTBI followed by sacrifice 30 or 60 min post-injury. Immediately after bTBI, righting reflex (RR) suppression times were assessed, euthanasia at the time points post-injury was completed, the brain was harvested and the individual MCA segments were collected, mounted and pressurized. As the intraluminal pressure perfused through the arterial segments was reduced in 20 mmHg increments from 100 to 20 mmHg, MCA diameters were measured and recorded. With decreasing intraluminal pressure, MCA diameters steadily increased significantly above baseline in the Sham bTBI groups while MCA dilator responses were significantly reduced (p &#60; 0.05) in both bTBI groups as evidenced by the impaired, smaller MCA diameters recorded for the bTBI groups. In addition, RR suppression in the bTBI groups was significantly (p &#60; 0.05) higher than in the Sham bTBI groups. MCA&#39;s collected from the Sham bTBI groups exhibited typical vasodilatory properties to decreases in intraluminal pressure while MCA&#39;s collected following bTBI exhibited significantly impaired myogenic vasodilatory responses to reduced pressure that persisted for at least 60 min after bTBI.

Here, we present a protocol to describe methods for ex vivo vascular reactivity determination following a primary blast traumatic brain injury (bTBI) using isolated, pressurized, rodent middle cerebral arterial (MCA) segments. bTBI induction is accomplished using a shock tube, also known as an Advanced Blast Simulator (ABS) device.

Serebral arterler patlama kaynaklı Neurotrauma etkilerini basınçlı kemirgen orta

Though there have been studies on the histopathological and behavioral effects of blast exposure, fewer have been dedicated to blast&#39;s cerebral ...

Modeling Stroke in Mice: Transient Middle Cerebral Artery Occlusion via the External Carotid Artery

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options are limited to a small proportion of stroke patients within the first hours after stroke. Novel therapeutic strategies are being extensively investigated, especially to prolong the therapeutic time window. These current investigations include the study of important pathophysiological pathways after stroke, such as post-stroke inflammation, angiogenesis, neuronal plasticity, and regeneration. Over the last decade, there has been increasing concern about the poor reproducibility of experimental results and scientific findings among independent research groups. To overcome the so-called &#8220;replication crisis&#8221;, detailed standardized models for all procedures are urgently needed. As an effort within the &#8220;ImmunoStroke&#8221; research consortium (https://immunostroke.de/), a standardized mouse model of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo) is proposed. This model allows the complete restoration of the blood flow upon removal of the filament, simulating the therapeutic or spontaneous clot lysis that occurs in a large proportion of human strokes. The surgical procedure of this &#8220;filament&#8221; stroke model and tools for its functional analysis are demonstrated in the accompanying video.

Different models of middle cerebral artery occlusion (MCAo) are used in experimental stroke research. Here, an experimental stroke model of transient MCAo via the external carotid artery (ECA) is described, which aims to mimic human stroke, in which the cerebrovascular thrombus is removed due to spontaneous clot lysis or therapy.

Farelerde Modelleme İnme: Dış Karotid Arter yoluyla Geçici Orta Serebral Arter Tıkanıklığı

Stroke is the third most common cause of mortality and the leading cause of acquired adult disability in developed countries. To date, therapeutic options ...

A Model for Encephalomyosynangiosis Treatment after Middle Cerebral Artery Occlusion-Induced Stroke in Mice

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The brain's ability to self-heal after ischemic stroke is limited by inadequate blood supply in the impacted area. Encephalomyosynangiosis (EMS) is a neurosurgical procedure that achieves angiogenesis in patients with moyamoya disease. It involves craniotomy with placement of a vascular temporalis muscle graft on the ischemic brain surface. EMS has never been studied in the setting of acute ischemic stroke in mice. The hypothesis driving this study is that EMS enhances cerebral angiogenesis at the cortical surface surrounding the muscle graft. The protocol shown here describes the procedure and provides initial data supporting the feasibility and efficacy of the EMS approach. In this protocol, after 60 min of transient middle cerebral artery occlusion (MCAo), mice were randomized to either MCAo or MCAo + EMS treatment. The EMS was performed 3-4 h after occlusion. The mice were sacrificed 7 or 21 days after MCAo or MCAo + EMS treatment. Temporalis graft viability was measured using nicotinamide adenine dinucleotide reduced-tetrazolium reductase assay. A mouse angiogenesis array quantified angiogenic and neuromodulating protein expression. Immunohistochemistry was used to visualize graft bonding with brain cortex and change in vessel density. The preliminary data here suggest that grafted muscle remained viable 21 days after EMS. Immunostaining showed successful graft implantation and increase in vessel density near the muscle graft, indicating increased angiogenesis. Data show that EMS increases fibroblast growth factor (FGF) and decreases osteopontin levels after stroke. Additionally, EMS after stroke did not increase mortality suggesting that protocol is safe and reliable. This novel procedure is effective and well-tolerated and has the potential to provide information of novel interventions for enhanced angiogenesis after acute ischemic stroke.

The protocol aims to provide methods for encephalomyosynangiosis-grafting of a vascular temporalis muscle flap on the pial surface of ischemic brain tissue-for the treatment of non-moyamoya acute ischemic stroke. The approach's efficacy in increasing angiogenesis is evaluated using a transient middle cerebral artery occlusion model in mice.

Farelerde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Kaynaklı İnme Sonrası Ensefalomiyosinanjiyoz Tedavisi İçin Bir Model

There is no effective treatment available for most patients suffering with ischemic stroke, making development of novel therapeutics imperative. The ...

Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Fareleri Modelinin Kurulması

A Modified Transcranial Middle Cerebral Artery Occlusion Model to Study Stroke Outcomes in Aged Mice

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. The filament MCAO model typically exhibits a massive cerebral infarction in C57Bl/6 mice that sometimes includes brain tissue in the territory supplied by the posterior cerebral artery, which is largely due to a high incidence of posterior communicating artery atresia. This phenomenon is considered a major contributor to the high mortality rate observed in C57Bl/6 mice during long-term stroke recovery after filament MCAO. Thus, many chronic stroke studies exploit distal MCAO models. However, these models usually produce infarction only in the cortex area, and consequently, the assessment of post-stroke neurologic deficits could be a challenge. This study has established a modified transcranial MCAO model in which the MCA at the trunk is partially occluded either permanently or transiently via a small cranial window. Since the occlusion location is relatively proximal to the origin of the MCA, this model generates brain damage in both the cortex and striatum. Extensive characterization of this model has demonstrated an excellent long-term survival rate, even in aged mice, as well as readily detectable neurologic deficits. Therefore, the MCAO mouse model described here represents a valuable tool for experimental stroke research.

Yazar Spotlight: İnme Araştırmalarında Yenilikçi Teknikler ve Gelecekteki Yönelimler 

This protocol demonstrates a unique mouse stroke model with a medium-sized infarct and an excellent survival rate. This model allows preclinical stroke researchers to extend the ischemia duration, use aged mice, and assess long-term functional outcomes.

Yaşlı Farelerde İnme Sonuçlarını İncelemek için Modifiye Transkraniyal Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

In experimental stroke research, middle cerebral artery occlusion (MCAO) with an intraluminal filament is widely used to model ischemic stroke in mice. ...

Orta serebral arter tıkanıklığı ile geçici serebral iskemi modeli

Transient Middle Cerebral Artery Occlusion Model of Stroke

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies during the acute phase of ischemic stroke. To gain insights into stroke physiopathology and develop innovative therapeutic approaches, in vivo rodent models of stroke play a fundamental role. The availability of genetically modified animals has particularly propelled the use of mice as experimental stroke models.
In stroke patients, occlusion of the middle cerebral artery (MCA) is a common occurrence. Consequently, the most prevalent experimental model involves intraluminal occlusion of the MCA, a minimally invasive technique that doesn't require craniectomy. This procedure involves inserting a monofilament through the external carotid artery (ECA) and advancing it through the internal carotid artery (ICA) until it reaches the branching point of the MCA. After a 45 min arterial occlusion, the monofilament is removed to allow reperfusion. Throughout the process, cerebral blood flow is monitored to confirm the reduction during occlusion and subsequent recovery upon reperfusion. Neurological and tissue outcomes are evaluated using behavioral tests and magnetic resonance imaging (MRI) studies.

Yazar Spotlight: Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli ile İskemik İnme Hasarının Değerlendirilmesi 

This protocol describes the model of transient focal cerebral ischemia in mice through intraluminal occlusion of the middle cerebral artery. Additionally, examples of outcome assessment are shown using magnetic resonance imaging and behavioral tests.

İnmenin Geçici Orta Serebral Arter Oklüzyon Modeli

Stroke stands as a major cause of death or chronic disability globally. Nevertheless, existing optimal treatments are limited to reperfusion therapies ...