Biz nezaketle veri toplama katkıda Kol Lab ek üyeleri (Andries Ferreira, Danarae Aleman, Alexis Mok, Kaitlin Flynn, Elizabeth Bearce ve Matan Kadosh) ve el yazması gözden (Andries Ferreira, Rebecca Schneider, Kate Robbins) teşekkür ederim. Biz de bu çalışmada kullanılan kemirgen gözlem tüplerin tasarım girişi ve imalat için MU Fizik Makinesi Shop Prof.Dr.Roderic Schlotzhauer ve Edwin Honse kabul. Ve Jan Ivey (Missouri Üniversitesi Araştırma Hayvan Cath Lab Müdürü - Tıp Fakültesi) - Biz Malea Jan Kunkel (Veteriner Koleji Veteriner Radyoloji Danışman ve Missouri Üniversitesi Cerrahi Bölümü), özellikle müteşekkiriz Biz kemirgen VFSS protokolü geliştirilen yüksek enerjili fluoroscopes çalışırken sürekli sabır ve motivasyon göstermek için. NIH / NIDCD (TE Kol), NIH / NINDS (GK Pavlath), Otolaryngo Bu çalışma için kaynakları dahil Finansmanlogy - Baş ve Boyun Cerrahisi start-up fonları (TE Kol), MU PRIME Fonu (TE Kol), Mizzou Advantage (TE Kol), ve Yaşlanma üzerine MU Merkezi (TE Kolu).

Bu yazı için Açık Erişim Glenbrook tarafından desteklenmektedir.

Disfaji (yutma bozukluğu) her yaştan insanı etkileyen çok sayıda tıbbi durumların sık görülen bir belirtisidir. Örnekler felç, Parkinson hastalığı, Alzheimer hastalığı, beyin felci, kas distro-fisi, amiyotrofik lateral skleroz (ALS), Batten hastalığı, baş ve boyun kanseri, erken doğum ve gelişmiş yaşlanma bulunmaktadır. Disfaji oldukça tipik bakteriyel yüklü yiyecekler / sıvı / tükürük akciğerlere 1-4 aspire edildiğinde gelişir şiddetli beslenme veya pnömoni sonucu olarak, mortalite ile ilişkilidir. Bu zayıflatıcı ve yaşamı tehdit eden tıbbi durum Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde 15 milyon kişi her yıl yalnız 3 etkiler. Yüksek prevalans ve ilişkili olumsuz sonuçlara rağmen, yutma güçlüğü için güncel tedavi seçenekleri postural değişiklikler (örn, tucki, (yerine tedavi edici değil) (özel gıda / sıvı yoğunluklanna kaçınarak, örneğin) gibi diyet modifikasyonu gibi, yaklaşımları palyatif sınırlıyutma çenesi), motorlu yaklaşımları (örneğin, ağız boşluğu, yutak kasları hedef egzersizleri, ve larinks), duyusal yaklaşımlar (örn, uygulanması lezzet, sıcaklık ve / veya mekanik stimülasyonu), ve tüp besleme ng (örn, beslenme ve hidrasyon nazogastrik (NG) tüp veya perkütan endoskopik gastrostomi (PEG) tüp) yoluyla hastaya. Bu tedaviler sadece ziyade sorunun altında yatan nedenleri hedef daha semptomatik tedavi hizmet vermektedir. Nitekim, yutma güçlüğü için yeni, etkili tedavilerin bulunmasından büyük bir engel, her hastalık için muhtemelen farklı sorumlu patolojik mekanizmaların, sınırlı bilimsel bilgidir. Disfaji teşhis ağırlıklı bir modifiye baryum kırlangıç ​​çalışma olarak bilinen videofloroskopik yutma çalışma (VFSS) adı verilen bir radyografik prosedür kullanılarak yapılır. Geçtiğimiz 30-artı yıl boyunca, bu teşhis test EV için altın standart olarak kabul edilmiştiryutmak fonksiyonu 5-7 aluating. Bu test genellikle baryum sülfat 8,9 veya iyoheksol 10 hasta oturmak ya da gönüllü gıda ve oral kontrast madde ile karıştırılmış sıvı kıvamlara sindirerek sırasında floroskopi makinenin X-ışını demetinin yolu içinde standı sahip gerektirir. Hasta yutar zamanda mideye ağızdan seyahat ederken, gıda ve kontrast maddesini ihtiva eden sıvı bir bilgisayar monitörü ile gerçek zamanlı olarak görülebilir. Yumuşak doku yapıları da görülebilir ve yapısı göreceli ve fonksiyonu değerlendirilebilir. Hastalar yutma güçlüğü varlığını ve derecesini ölçmek için sonraki görüntüleme ve kare-kare analizi için kaydedilen video Bunların hepsi, her gıda ve sıvı kıvamda birkaç yutar gerçekleştirmek için istenir. Yutma çok sayıda fizyolojik bileşenleri tipik olarak laryn ve yutak ve yemek borusu, ölçüde ve süresi ile anatomik faringeal kırlangıcın tetik noktası, bolus geçiş süresi olarak analiz edilirgeal yükseklik, konum ve sonrası yutma kalıntı miktarı ve oluşumu ve aspirasyon 7,11 için fizyolojik nedeni. İnsan VFSS protokolünün Yönleri Son zamanlarda özgürce davranmak sıçan çalışmak için adapte edilmiş; Sıçanlar 12 test sırasında görüş videofloroskopik alanında kalır çünkü ancak sonuçlar sınırlı kalmıştır. VFSS önce fareler ile teşebbüs olmamıştır. Fare ve sıçanlarla yapılan kullanım için insan VFSS protokolü başarılı uyum anda mevcut murin (fare ve sıçan), insanlarda yutma güçlüğü neden olduğu bilinen hastalıkların yüzlerce model araştırmak için yeni bir araştırma metodu sağlayacaktır. Bu yeni yöntem (bundan böyle kemirgen VFSS olarak anılacaktır) bu nedenle patolojik olan kaslar, sinirler ve beyin dokusu içinde yatan nörofizyolojik mekanizmalar soruşturma ve yutma güçlüğü katkıda bulunmak için uygun disfaji fare modellerinin belirlenmesi ve doğrulama hızlandırmak istiyorum benn, insanlar. Ayrıca, kemirgen VFSS yutma fonksiyonu / doğrudan insanlara kıyasla olabilir disfonksiyon objektif ölçümler (biyomarkerler) tanımlanmasını izin verecektir. Bu çapraz-türler videofloroskopik biyomarkerler sonra daha iyi insanlarla klinik çalışmalara çevirmek fareler ve sıçanlar ile preklinik çalışmalarda, tedavi etkinliğini ölçmek için yeni sonuç önlemleri hizmet verebilir. Bu amaç için, sıçangil VFSS protokolü ~ her iki cinsiyetten 100 fare kullanılarak kurulmuştur. Tüm fareler C57 veya hibrid C57 / SJL suşları ya da vardı. C57 / SJL transgenik SOD1-G93A (veya SOD1) farelerin, ALS en yaygın kullanılan hayvan modelinin bir koloni için plan suşu iken C57 fareler genetik, değiştirilmiş değil. SOD1 koloni transgenik (yani, ALS-etkilenen) fareler ve nontransgen (yani, etkilenmemiş) littermates yaklaşık bir 50-50 karışımı oldu. sıçangil VFSS protokolü üç bileşenden oluşur: <ol><li&gt; bir floroskopi makine içinde sınırlı bir alanda sınırsız ayakta iken gönüllü beslenme ve yutma izin özel tasarlanmış gözlem odaları, </li><li> Oral kontrast ajanların caydırıcı tat / koku maskesi ve yutma yeterli görselleştirme izin için yeterli radiodensity üreten Tarifler, </li><li> Hayvan uyumu en üst düzeye Bir adım-adım test protokolü, toplam test süresi ve radyasyona maruz aza indirir, ve (yani, ağız, yutak, yemek borusu ve) yutma her aşaması için çeşitli yutmak parametrelerinin ölçümü izin verir. </li></ol> kombine etkisi tipik beslenme ve farelerin yutma davranışların değerlendirilmesine izin rahat, düşük stres, kendini besleme muayene ortamı oluşturur.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" >
	<tbody>
		<tr >
			<td >Name of Material/ Equipment</td>
			<td >Company</td>
			<td >Catalog Number</td>
			<td >Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate tubing for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >3161T41</td>
			<td>Body of observation tubes, 2&#34;X2&#34; diameter, 0.080&#34; thick wall</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate sheet&#160; for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9115K71</td>
			<td>End-caps for observation tubes, 2&#34;x12&#34;x3/4&#34;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Polycarbonate sheet&#160; for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >8574K281</td>
			<td>Peg-bowls for observation tubes</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silicone O-rings&#160; for end-caps of observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9396K108</td>
			<td>S1138 AS568-029, pack of 25 
			http://www.mcmaster.com/#o-rings/=t0wt5r&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silicone stoppers for observation chambers</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >2903K22</td>
			<td>Package of 10 stoppers to plug the oval opening in the top of the observation chamber when using a peg-bowl 
			http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3803/=t0y5at</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Centrifuge tubes for sipper tube bottles</td>
			<td >Evergreen Scientific</td>
			<td >222-3530-G80</td>
			<td>30 ml freestanding centrifuge tubes, with caps, sterile 
			https://www.evergreensci.com/labware-catalog/tubes-and-vials/30-and-50-ml-centrifuge-tubes/&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Silcone stoppers for sipper tube bottles</td>
			<td >Saint-Gobain Performance Plastics</td>
			<td >DX263031-10&#160;</td>
			<td>Number 31D, size: 26 mm bottom, 32 mm top, 30 mm high; 10 pack;&#160; 
			http://www.labpure.com/en/Products.asp?ID=179&#38;PageBrand=STOPPERS</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Stopper borers for sipper tube bottles</td>
			<td >Thomas Scientific</td>
			<td >3276G40</td>
			<td>Cork Borer Set that ranges from 3/16-15/16 inch&#160; 
			http://www.thomassci.com/Supplies/Corks/_/CORK-BORER-SET-316-1516-IN?q=Humboldt</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Drinking tubes for sipper tube bottles</td>
			<td >Ancare</td>
			<td >TD-100&#160;</td>
			<td>2 1/2&#8221; long drinking tubes with 5/16&#8221; opening, straight ball-spout 
			http://www.ancare.com/products/watering-equipment/open-drinking-tubes/straight-tubes-ball-point&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Iohexol for making oral contrast agent solution</td>
			<td >GE Healthcare</td>
			<td ></td>
			<td>350 mg iodine per ml 
			http://www3.gehealthcare.com/en/products/categories/contrast_media/omnipaque&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Chocolate syrup for flavoring oral contrast agent</td>
			<td >Herseys</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >10 ml syringe for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >309604</td>
			<td>Luer lock tip syringe without needle, 100 per box 
			http://www.bd.com/hypodermic/products/syringeswithoutneedles.asp</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Catheter tubing for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >427451</td>
			<td>Polyethylene Tubing (Non-Sterile) (PE 240) 100&#39; 
			http://www.bd.com/ds/productCenter/427451.asp&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Needle for syringe delivery system</td>
			<td >Becton, Dickinson and Company</td>
			<td >427560</td>
			<td>15-gauge needle, fits into PE 240 catheter tubing 
			http://www.bd.com/ds/productCenter/427560.asp&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Delrin acetal resin rod for syringe delivery system</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >8576K15</td>
			<td>1/2 inch diameter, black 
			http://www.mcmaster.com/#catalog/120/3609/=t0wvaf&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Acrylic sheeting for scissor lift</td>
			<td >Ponoko</td>
			<td ></td>
			<td>Laser cut 
			http://www.ponoko.com&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >3D printed ABS frame</td>
			<td >Engineering Rapid Prototyping Facility, University of Missouri</td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Brass rods for scissor lift</td>
			<td >Amazon</td>
			<td >TTRB-03-12-03</td>
			<td>made into axles 
			http://www.amazon.com/Brass-Seamless-Round-Tubing-Length/dp/B000FN898M</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Drawer slide for scissor lift</td>
			<td >Richelieu</td>
			<td >10292G116</td>
			<td>Attaches to base of scissor lift 
			http://www.lowes.com/pd_380986-93052-T35072G16_0__?productId=50041754</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >28BYJ-48 stepper motor for scissor lift</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td>2 each</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ULN2003 Darlington transistor array for scissor lift</td>
			<td >Toshiba</td>
			<td >ULN2003APG</td>
			<td>Used as stepper drivers (2 each)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >ATTINY85 microcontroller for scissor lift</td>
			<td >Atmel</td>
			<td >ATTINY85-20PU</td>
			<td>2 each 
			http://www.taydaelectronics.com/attiny85-attiny85-20pu-8-bit-20mhz-microcontroller-ic.html</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Nylon spur gear</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >57655K34</td>
			<td>2 each 
			http://www.mcmaster.com/#57655k34/=t0yaqz</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Nylon spur gear rack</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >57655K62</td>
			<td>2 each 
			http://www.mcmaster.com/#57655k62/=t0ybh9</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-40 nylon machine screws</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >95133A315</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#95133a315/=t0yd8q</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >4-40 nylon hex nuts</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >94812A200</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#94812a200/=t0ye29</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Buna-N O-Ring AS568A Dash No. 104</td>
			<td >McMaster-Carr</td>
			<td >9452K318</td>
			<td>Lift assembly 
			http://www.mcmaster.com/#9452k318/=t0yem7</td>
		</tr>
		<tr >
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

adapting human videofluoroscopic swallow study methods to detect and characterize dysphagia in murine disease models

Bu çalışma, translasyon disfaji araştırma kolaylaştırmak amacıyla murin hastalık modellerinde kullanılmak üzere çalışma (VFSS) yöntemleri yutma insan Videofloroskopik uyarlanmış. Başarılı sonuçlar üç kritik bileşenlere bağımlıdır: Kapalı bir alanda sınırsız ayakta iken kendi kendine beslenmesini izin test kabinleri, ticari olarak temin edilebilen oral kontrast maddelerin caydırıcı tat / koku maske tarifleri, ve bir adım-adım testi protokol kırlangıç ​​fizyolojisi kantifikasyonunu izin verir. Bu bileşenlerden bir veya daha fazlasını ortadan kaldırılması çalışma sonuçları üzerinde zararlı bir etkiye sahip olacaktır. Ayrıca, floroskopi sistemi enerji düzeyi yeteneği araştırılmıştır edilebilir yutmak parametreler belirleyecektir. Çoğu araştırma merkezleri fareler ve diğer küçük kemirgenler test ederken son derece kötü görüntü kalitesi ile sonuçlanır insanlar ve büyük hayvanlar ile kullanılmak için tasarlanmış yüksek enerji fluoroscopes var. Bu sınırlamaya rağmen, biz yedi VFS belirledikYeni sıçangil VFSS protokolü ile kombinasyon halinde, yüksek enerjili bir fluoroskop kullanıldığında farelerde sürekli ölçülebilirken S parametreleri. Biz son zamanlarda fareler ve diğer küçük kemirgenler ile kullanılmak üzere tasarlanmış son derece yüksek görüntüleme çözünürlüğü ve büyütme yetenekleri ile düşük enerji floroskopi sistemi elde. Yeni kemirgen VFSS protokolü ile birlikte bu yeni sistem kullanılarak ön çalışma, geleneksel (yani, yüksek enerji) kullanılarak elde edilen neredeyse iki sayı olduğu, farelerde sürekli ölçülebilir olan 13 yutmak parametrelerini tespit etti fluoroscopes. Bu yeni sistemin yeteneklerini optimize ek yutmak parametrelerinin belirlenmesi bekleniyor. Sonuçlar bugüne kadar tespit ve kemirgen hastalık modellerinin araştırılması için yüksek enerji fluoroscopes kullanırken aksi gözden kaçabilir yutmak fizyolojisinde ince değişiklikleri ölçmek için bir düşük enerji floroskopi sistemi kullanılarak yararını göstermektedir.

Biz başarıyla Test kendine beslenmeyi izin odaları, oral kontrast ajanlar lezzet için yemek tarifleri, ve yutma fizyolojisi miktarının izin veren bir adım-adım test protokolü içeren bir roman ve tekrarlanabilir kemirgen özel VFSS protokolü tasarladık. floroskopi sistemin enerji seviyesi yeteneği parametreleri farelerde incelenmiştir olabilir yutmak hangi belirlendi. Biz başlangıçta insanlar ve büyük hayvanlar ile kullanılmak üzere tasarlanmış yüksek enerji fluoroscopes kullanılan (örneğin, GE Advantx, 9600 GE OEC, ve Omega Kardiyak Cath CS-25, saniyede 30 kare her biri). Ancak, bu sistemlerin hayvan doldurma bakış alanının yalnızca küçük bir bölümünü sonuçlandı, test fareler için yeterli büyütme yetenekleri vardı (Şekil 9). Sonuç olarak, görüntü kalitesi imkansız yutma mekanizmasının en yapılarını görselleştirmek için render, son derece zayıftı. Bu sınırlamaya rağmen, biz 7 objektif VFS tespitS, sıçangil VFSS protokolü (Tablo 3) ile kombinasyon halinde bir geleneksel (örneğin, yüksek enerjili) fluoroskop kullanıldığında fareler için sürekli olarak ölçülebilir idi parametreleri yutmak. Buna ek olarak, ileri yaş (&gt; 18 aylık) ve son evre ALS şartlarına vallecular sağlıklı yetişkin farelerde yutma anatomik tetik noktası alanı (yaş 3-17 ay) yanı sıra, fareler tespit edilmiştir. <img alt="Şekil 9," src="/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" width="650" /> Şekil 9:. Yüksek Enerji Floroskopi Sistemleri Sol: Yüksek enerji (yani, geleneksel) floroskopi sistemleri kullanılarak elde edilen bir fare Temsilcisi görüntü. Fare ve böylece görüntüleme kemirgenler için geleneksel fluoroscopes yetersiz büyütme yeteneği gösteren, bakış floroskopi alanının sadece küçük bir bölümünü doldurur unutmayın. Sağ: Aynı görüntü büyütülmüş sonrası captuBir video düzenleme programı kullanılarak yeniden. Siyah ok: tetikleme noktasını (valleculae) yutmak. Beyaz ok:. Distal özofagus hap, GE kavşağı (beyaz yıldız) geçerek hemen önce <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig9highres.jpg" target="_blank">bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız.</a> <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0"><tbody><tr><td> KIRLANGIÇ PARAMETRELERİ </td><td style="width:140px"> Yüksek Enerji Sistemi </td><td style="width:140px"> Düşük Enerji Sistemi </td></tr><tr><td> Inter-Swallow Aralığı (ISI) </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Çene Gezi Hızı (Lick Hızı Eşdeğeri) </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Çene Gezi Mesafe </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Lick-Kırlangıç ​​Oranı </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Kırlangıç ​​Oranı </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Pharyngeal Transit Time (PTT) </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Farinks ile Bolus Hız </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Özofagus Transit Time (ETT) </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Özofagus ile Bolus Hız </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Farinks ve Özofagus ile bolus Hız </td><td> X </td><td> X </td></tr><tr><td> Bolus Alanı </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Faringeal Kalıntı Alanı </td><td></td><td> X </td></tr><tr><td> Sıvı hacmi Tüketilen </td><td> X </td><td> X </td></tr></tbody></table> Tablo 3: Düşük Enerji Floroskopi Sistemleri Karşı Yüksek Kullanma Parametreler nicelenebilir Swallow. Biz son zamanlarda düşük enerji büyütme floroskopi sistemi özellikle kullanım için laboratuara için tasarlanmış LabScope (Glenbrook Technologies, Randolph, NJ) olarak adlandırılan eldefareler ve diğer küçük kemirgenler (Şekil 10). Ancak, bu sistemin belirgin daha büyütme düzeyi imkansız görüş tek bir alanda bir fare tüm yutma mekanizması görüntülemek için render. Şekil 11. Pozisyon 1 izin tüm baş görselleştirme ve proksimal torasik bölgede gösterildiği gibi yerine, iki test pozisyonları, gereklidir. Bu konum, yutma ağız ve boğaz aşamalarda için gereklidir. Gastroözofageal (GE) kavşak kırlangıç ​​tetik noktası (yani, valleculae) konum 2 izin görselleştirme. Bu pozisyon yutma özofagus aşamasını değerlendirmek için gereklidir. Yeni sıçangil VFSS protokolü ile kombinasyon halinde LabScope kullanılarak elde edilen önceki çalışma, yüksek enerji (örneğin, geleneksel) fluoroscopes (Tablo 3) ile elde edilen, yaklaşık iki misli olan farelerde sürekli ölçülebilirken 13 amacı, kırlangıç ​​parametrelerini tespit etti. Bu o<html> örneğin, hyoid kemik, trakea ve servikal vertebra: utcome geleneksel sistemlerini kullanırken aslında görünmez sayısız anatomik yapıların görüntülenmesi sağlayan LabScope, (Şekil 12) gelişmiş büyütme yetenekleri atfedilir. Sonuç olarak, biz de laringeal penetrasyonu ve aspirasyon kanıt videoları analiz başardık. Ne penetrasyon de aspirasyon bağımsız sağlık ve hastalık durumlarının, bu çalışmada herhangi bir fare için gözlenmiştir. <img alt="Şekil 10," src="/files/ftp_upload/52319/52319fig10highres.jpg" width="650" /> Şekil 10:. LabScope Sol: LabScope küçük hayvanlar için bir masaüstü fluoroskop olarak gerçekleştirir. Sağ: etiketli bileşenleri ile LabScope Close-up görünümü. makaslı kaldırma tezgahı görüş floroskop alanı içinde bir gözlem odasına konumlandırıyor.<html> tp_upload / 52.319 / 52319fig10highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız. <img alt="Şekil 11," src="/files/ftp_upload/52319/52319fig11highres.jpg" width="650" /> Şekil 11:. Bir düşük enerji floroskopi sistemi kullanılarak elde edilen bir fare Düşük Enerji Floroskopi Sistemi Görüntüler. Yüksek büyütme yeteneği görüş floroskopi alanı içinde, tüm yutmak mekanizmasının görselleştirme önlediğini unutmayın. Sol: Pozisyon 1 - tüm baş ve proksimal torasik bölgede görselleştirme izin verir. yutmak tetik noktası (siyah ok) esas görüş alanı içinde ortalanır. Sağ: Pozisyon 2 - GE kavşağı (beyaz yıldız) için kırlangıç ​​tetik nokta (siyah ok) izin görselleştirme. Distal özofagusta (beyaz ok) geçen bolus unutmayın.<html> g11highres.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için burayı tıklayınız. <img alt="Şekil 12," src="/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" width="650" /> Şekil 12:. Anatomik Yapılar Görünür bile düşük büyütme ayarı (solda) Düşük Enerji Floroskopi Sistemi kullanarak, bir fare baş ve boyun kemikli yapıları (yani, LabScope) bizim düşük enerji floroskopi sistemini kullanarak kolayca görebilir. Siyah kare içinde anatomik yapılar gösterilir (ve etiketli) sağa yüksek büyütmede edilir. Kemikli yapılar Geliştirilmiş görselleştirme yüksek enerji fluoroscopes kullanarak analiz etmek imkansız birkaç ek yutmak parametrelerinin ölçümü izin verir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig12highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> t &quot;&gt; oranı ve ara kırlangıç ​​aralığı yeni sıçangil VFSS protokolü ile bir arada, düşük veya yüksek enerji floroskopi sistemleri kullanılarak tayin edilebilir temsil VFSS parametreleri Kırlangıç ​​Bu iki kırlangıç ​​parametreleri farelerin üç grup için ölçüldü:. SOD1-G93A hastalığa (yani, ALS modeli) (SOD1) transgenik fareler yaş, yaşlı C57 farelerin (yaş 18-24 ay) 4-5 ay arasında son dönem ve sağlıklı genç (4-8 ay kontrol grubu C57 fareler ve SOD1 kolonisinden nontransgen yavrularla) yaş. Tüm veriler düşük veya yüksek enerjili floroskopi sistemi kullanılarak, yalnızca içme emzik aittir. anlamlı fark SOD1 genç C57 fareler ve genç nontransgen (kontrol) fareler arasında bulundu yani bu nedenle, veri yaşlı C57 fareler ve son dönem SOD1 farelere kıyasla genç, sağlıklı farelerin genel &quot;kontrol&quot; gruba kombine edilmiştir oranı Swallow (;. Bu iki kırlangıç ​​parametrelerine koloni görelikesintisiz içme 2 ardışık saniye) sırasında yutar sayısı yaşlı C57 fareler ve kontrollere göre SOD1 farelerde için önemli ölçüde yavaş oldu. Inter-kırlangıç ​​aralığı (yani, iki ardışık yutar arasındaki süre) gruplar arasında anlamlı farklılık yoktu. Bu bulgular disfaji profilleri, her hastalık durumu (Şekil 13) için belirgin farklı olması muhtemel olduğu görüşünü desteklemektedir. <img alt="Şekil 13," src="/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" width="650" /> Şekil 13:. Ön Bulgular Bu rakam kemirgen VFSS protokolü kullanılarak sayısal iki VFSS yutmak parametreleri için temsili ön bulgular gösterir: oranı (solda) ve inter-yutmak aralığını (sağda) yutmak. Kırlangıç ​​oranı yaşlı C57 fareler ve kontrollere göre SOD1 farelerde için önemli ölçüde yavaş oldu. Anlamlı grup farklılıkları arası yutmak Inter belirlendival. Barlarda üstündeki Hatları, gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar (p &lt;0.05) göstermektedir Bonferroni ikili karşılaştırmalar kullanılarak belirlenen. Hata çubukları ± 1 SEM temsil eder. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52319/52319fig13highres.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models at JoVE.com

Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models

Bu çalışma, başarılı bir şekilde translasyon disfaji araştırma kolaylaştırmak amacıyla murin hastalık modellerinde kullanılmak üzere insan videofloroskopik yutma çalışma (VFSS) yöntemleri adapte edilmiştir.

İnsan Videofloroskopik Kırlangıç ​​Eğitim Yöntemleri uyarlanması Algılama ve Mürin Hastalık Modelleri disfajiyi Characterize

This study adapted human videofluoroscopic swallowing study (VFSS) methods for use with murine disease models for the purpose of facilitating ...

adapting-human-videofluoroscopic-swallow-study-methods-to-detect

Research

JoVE Journal

Medicine

20.9K Görüntüleme.  University of Missouri.  Bu çalışma, başarılı bir şekilde translasyon disfaji araştırma kolaylaştırmak amacıyla murin hastalık modellerinde kullanılmak üzere insan videofloroskopik yutma çalışma (VFSS) yöntemleri adapte edilmiştir. 

Video: Adapting Human Videofluoroscopic Swallow Study Methods to Detect and Characterize Dysphagia in Murine Disease Models

Methods to Quantify Pharmacologically Induced Alterations in Motor Function in Human Incomplete SCI

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating disorder, which produces profound deficits in volitional motor control. Following medical stabilization, recovery from SCI typically involves long term rehabilitation. While recovery of walking ability is a primary goal in many patients early after injury, those with a motor incomplete SCI, indicating partial preservation of volitional control, may have the sufficient residual descending pathways necessary to attain this goal. However, despite physical interventions, motor impairments including weakness, and the manifestation of abnormal involuntary reflex activity, called spasticity or spasms, are thought to contribute to reduced walking recovery. Doctrinaire thought suggests that remediation of this abnormal motor reflexes associated with SCI will produce functional benefits to the patient. For example, physicians and therapists will provide specific pharmacological or physical interventions directed towards reducing spasticity or spasms, although there continues to be little empirical data suggesting that these strategies improve walking ability.
In the past few decades, accumulating data has suggested that specific neuromodulatory agents, including agents which mimic or facilitate the actions of the monoamines, including serotonin (5HT) and norepinephrine (NE), can initiate or augment walking behaviors in animal models of SCI. Interestingly, many of these agents, particularly 5HTergic agonists, can markedly increase spinal excitability, which in turn also increases reflex activity in these animals. Counterintuitive to traditional theories of recovery following human SCI, the empirical evidence from basic science experiments suggest that this reflex hyper excitability and generation of locomotor behaviors are driven in parallel by neuromodulatory inputs (5HT) and may be necessary for functional recovery following SCI. 
The application of this novel concept derived from basic scientific studies to promote recovery following human SCI would appear to be seamless, although the direct translation of the findings can be extremely challenging. Specifically, in the animal models, an implanted catheter facilitates delivery of very specific 5HT agonist compounds directly onto the spinal circuitry. The translation of this technique to humans is hindered by the lack of specific surgical techniques or available pharmacological agents directed towards 5HT receptor subtypes that are safe and effective for human clinical trials. However, oral administration of commonly available 5HTergic agents, such as selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs), may be a viable option to increase central 5HT concentrations in order to facilitate walking recovery in humans. Systematic quantification of how these SSRIs modulate human motor behaviors following SCI, with a specific focus on strength, reflexes, and the recovery of walking ability, are missing.
This video demonstration is a progressive attempt to systematically and quantitatively assess the modulation of reflex activity, volitional strength and ambulation following the acute oral administration of an SSRI in human SCI. Agents are applied on single days to assess the immediate effects on motor function in this patient population, with long-term studies involving repeated drug administration combined with intensive physical interventions.

This video demonstrates modulation of reflex activity, volitional strength and ambulation through clinical and quantitative assessments in individuals with motor incomplete SCI as a result of acute oral administration of a serotonin reuptake inhibitor (SSRI).

İnsan Eksik SKY Motor Fonksiyonu İlaç İndüklenmiş değişiklikler belirlememize • yöntemleri

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating disorder, which produces profound deficits in volitional motor control. Following medical stabilization, ...

Tıp

Spectral Karyotyping to Study Chromosome Abnormalities in Humans and Mice with Polycystic Kidney Disease

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being analyzed 1, 2. This classical banding technique, however, is not reliable in identifying complex chromosomal aberrations such as those associated with cancer. To overcome the limitations of the banding technique, Spectral Karyotyping (SKY) is introduced to provide much reliable information on chromosome abnormalities.
SKY is a multicolor fluorescence in-situ hybridization (FISH) technique to detect metaphase chromosomes with spectral microscope 3, 4. SKY has been proven to be a valuable tool for the cytogenetic analysis of a broad range of chromosome abnormalities associated with a large number of genetic diseases and malignancies 5, 6. SKY involves the use of multicolor fluorescently-labelled DNA probes prepared from the degenerate oligonucleotide primers by PCR. Thus, every chromosome has a unique spectral color after in-situ hybridization with probes, which are differentially labelled with a mixture of fluorescent dyes (Rhodamine, Texas Red, Cy5, FITC and Cy5.5). The probes used for SKY consist of up to 55 chromosome specific probes 7-10.
The procedure for SKY involves several steps (Figure 1). SKY requires the availability of cells with high mitotic index from normal or diseased tissue or blood. The chromosomes of a single cell from either a freshly isolated primary cell or a cell line are spread on a glass slide. This chromosome spread is labeled with a different combination of fluorescent dyes specific for each chromosome. For probe detection and image acquisition,the spectral imaging system consists of sagnac interferometer and a CCD camera. This allows measurement of the visible light spectrum emitted from the sample and to acquire a spectral image from individual chromosomes. HiSKY, the software used to analyze the results of the captured images, provides an easy identification of chromosome anomalies. The end result is a metaphase and a karyotype classification image, in which each pair of chromosomes has a distinct color (Figure 2). This allows easy identification of chromosome identities and translocations. For more details, please visit Applied Spectral Imaging website (<a href="http://www.spectral-imaging.com/" target="_blank">http://www.spectral-imaging.com/</a>).
SKY was recently used for an identification of chromosome segregation defects and chromosome abnormalities in humans and mice with Autosomal Dominant Polycystic Kidney Disease (ADPKD), a genetic disease characterized by dysfunction in primary cilia 11-13. Using this technique, we demonstrated the presence of abnormal chromosome segregation and chromosomal defects in ADPKD patients and mouse models 14. Further analyses using SKY not only allowed us to identify chromosomal number and identity, but also to accurately detect very complex chromosomal aberrations such as chromosome deletions and translocations (Figure 2).

Spectral Karyotyping (SKY) is an advanced cytogenetics technique to identify genomic and chromosomal aberrations. This technique takes advantage of chromosome painting probes, which allow classification of all chromosomes. SKY can also identify complex chromosome aberrations and segregation defects in mice and humans with various diseases, including polycystic kidney disease.

Polikistik Böbrek Hastalığı Olan İnsanlar ve Fareler kromozom anomalileri Eğitim Spektral Karyotipik

Conventional method to identify and classify individual chromosomes depends on the unique banding pattern of each chromosome in a specific species being ...

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson's Disease

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease (PD) pathogenesis are less understood. Gene-environment interaction models have utility in unmasking the impact of specific cellular pathways in toxicity that may not be observed using a solely genetic or toxicant disease model alone.&#160;To evaluate if distinct LOX isozymes selectively contribute to PD-related neurodegeneration, transgenic (i.e. 5-LOX and 12/15-LOX deficient) mice can be challenged with a toxin that mimics cell injury and death in the disorder.&#160;Here we describe the use of a neurotoxin, 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP), which produces a nigrostriatal lesion to elucidate the distinct contributions of LOX isozymes to neurodegeneration related to PD. The use of MPTP in mouse, and nonhuman primate, is well-established to recapitulate the nigrostriatal damage in PD.&#160;The extent of MPTP-induced lesioning is measured by HPLC analysis of dopamine and its metabolites and semi-quantitative Western blot analysis of striatum for tyrosine hydroxylase (TH), the rate-limiting enzyme for the synthesis of dopamine. To assess inflammatory markers, which may demonstrate LOX isozyme-selective sensitivity, glial fibrillary acidic protein (GFAP) and Iba-1 immunohistochemistry are performed on brain sections containing substantia nigra, and GFAP Western blot analysis is performed on striatal homogenates.&#160;This experimental approach can provide novel insights into gene-environment interactions underlying nigrostriatal degeneration and PD.

Gene-environment Interaction Models to Unmask Susceptibility Mechanisms in Parkinson&#039;s Disease

Lipoxygenase (LOX) isozymes can generate products that may increase or decrease neuroinflammation and neurodegeneration.&#160;A gene-environment interaction study could identify LOX isozyme-specific effects. Using the 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) model of nigrostriatal damage in two LOX isozyme-deficient transgenic lines allows for comparison of the contribution of LOX isozymes on dopaminergic integrity and inflammation.

Parkinson Hastalığında Maskeyi Düşürme Duyarlılık Mekanizmalarına Gen-Çevre Etkileşim Modelleri

Lipoxygenase (LOX) activity has been implicated in neurodegenerative disorders such as Alzheimer&#39;s disease, but its effects in Parkinson&#39;s disease ...

Murine Model for Non-invasive Imaging to Detect and Monitor Ovarian Cancer Recurrence

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of care consisting of surgical debulking and combination chemotherapy consisting of platinum and taxane compounds, almost 90% of patients recur within a few years. In these patients the development of chemoresistant disease limits the efficacy of currently available chemotherapy agents and therefore contributes to the high mortality. To discover novel therapy options that can target recurrent disease, appropriate animal models that closely mimic the clinical profile of patients with recurrent ovarian cancer are required. The challenge in monitoring intra-peritoneal (i.p.) disease limits the use of i.p. models and thus most xenografts are established subcutaneously. We have developed a sensitive optical imaging platform that allows the detection and anatomical location of i.p. tumor mass. The platform includes the use of optical reporters that extend from the visible light range to near infrared, which in combination with 2-dimensional X-ray co-registration can provide anatomical location of molecular signals. Detection is significantly improved by the use of a rotation system that drives the animal to multiple angular positions for 360 degree imaging, allowing the identification of tumors that are not visible in single orientation. This platform provides a unique model to non-invasively monitor tumor growth and evaluate the efficacy of new therapies for the prevention or treatment of recurrent ovarian cancer.

We describe a non-invasive animal imaging platform that allows the detection, quantification, and monitoring of ovarian cancer growth and recurrence. This intra-peritoneal xenograft model mimics the clinical profile of patients with ovarian cancer.

Non-invaziv Görüntüleme için fare modeli Algılama ve Monitör Yumurtalık Kanseri nüks için

Epithelial ovarian cancer is the most lethal gynecologic malignancy in the United States. Although patients initially respond to the current standard of ...

Isolation and Excision of Murine Aorta; A Versatile Technique in the Study of Cardiovascular Disease

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated blood is the aorta. The aorta may become affected in diseases such as atherosclerosis and aneurysm. Researchers investigating these diseases would benefit from direct observation of the aorta to characterize disease progression as well as to evaluate efficacy of potential therapeutics. The goal of this protocol is to describe proper isolation and excision of the aorta to aid investigators researching cardiovascular disease. Isolation and excision of the aorta allows investigators to look at gross morphometric changes as wells as allowing them to preserve and stain the tissue to look at histologic changes if desired. The aorta may be used for molecular studies to evaluate protein and gene expression to discover targets of interest and mechanisms of action. This technique is superior to imaging modalities as they have inherent limitations in technology and cost. Additionally, primary isolated cells from a freshly isolated and excised aorta can allowing researchers to perform further in situ and in vitro assays. The isolation and excision of the aorta has the limitation of having to sacrifice the animal however, in this case the benefits outweigh the harm as it is the most versatile technique in the study of aortic disease.

Pathology of the aorta can lead to severe morbidity and mortality, therefore research of disease progression and potential therapies is warranted. Here, we present a protocol to isolate and excise the murine aorta to aid researchers in their investigation of cardiovascular disease.

İzolasyon ve Kemirgen Aort eksizyonu; Kardiyovasküler Hastalığı Çalışmasında Çok Yönlü Tekniği

Cardiovascular disease is a broad term describing disease of the heart and/or blood vessels. The main blood vessel supplying the body with oxygenated ...

Using Adeno-associated Virus as a Tool to Study Retinal Barriers in Disease

M&#252;ller cells are the principal glial cells of the retina. Their end-feet form the limits of the retina at the outer and inner limiting membranes (ILM), and in conjunction with astrocytes, pericytes and endothelial cells they establish the blood-retinal barrier (BRB). BRB limits material transport between the bloodstream and the retina while the ILM acts as a basement membrane that defines histologically the border between the retina and the vitreous cavity. Labeling M&#252;ller cells is particularly relevant to study the physical state of the retinal barriers, as these cells are an integral part of the BRB and ILM. Both BRB and ILM are frequently altered in retinal disease and are responsible for disease symptoms.
There are several well-established methods to study the integrity of the BRB, such as the Evans blue assay or fluorescein angiography. However these methods do not provide information on the extent of BRB permeability to larger molecules, in nanometer range. Furthermore, they do not provide information on the state of other retinal barriers such as the ILM. To study BRB permeability alongside retinal ILM, we used an AAV based method that provides information on permeability of BRB to larger molecules while indicating the state of the ILM and extracellular matrix proteins in disease states. Two AAV variants are useful for such study: AAV5 and ShH10. AAV5&#160;has a natural tropism for photoreceptors but it cannot get across to the outer retina when administered into the vitreous when the ILM is intact (i.e., in wild-type retinas). ShH10 has a strong tropism towards glial cells and will selectively label M&#252;ller glia in both healthy and diseased retinas. ShH10 provides more efficient gene delivery in retinas where ILM is compromised. These viral tools coupled with immunohistochemistry and blood-DNA analysis shed light onto the state of retinal barriers in disease.

To investigate the blood-retinal barrier permeability and the inner limiting membrane integrity in animal models of retinal disease, we used several adeno-associated virus (AAV) variants as tools to label retinal neurons and glia. Virus mediated reporter gene expression is then used as an indicator of retinal barrier permeability.

Aracı Olarak Adeno-ilişkili virüs kullanarak Hastalığında Retina Engelleri Eğitim için

M&#252;ller cells are the principal glial cells of the retina. Their end-feet form the limits of the retina at the outer and inner limiting membranes ...

Methods for Culturing Human Femur Tissue Explants to Study Breast Cancer Cell Colonization of the Metastatic Niche

Bone is the most common site of breast cancer metastasis. Although it is widely accepted that the microenvironment influences cancer cell behavior, little is known about breast cancer cell properties and behaviors within the native microenvironment of human bone tissue.We have developed approaches to track, quantify and modulate human breast cancer cells within the microenvironment of cultured human bone tissue fragments isolated from discarded femoral heads following total hip replacement surgeries. Using breast cancer cells engineered for luciferase and enhanced green fluorescent protein (EGFP) expression, we are able to reproducibly quantitate migration and proliferation patterns using bioluminescence imaging (BLI), track cell interactions within the bone fragments using fluorescence microscopy, and evaluate breast cells after colonization with flow cytometry. The key advantages of this model include: 1) a native, architecturally intact tissue microenvironment that includes relevant human cell types, and 2) direct access to the microenvironment, which facilitates rapid quantitative and qualitative monitoring and perturbation of breast and bone cell properties, behaviors and interactions. A primary limitation, at present, is the finite viability of the tissue fragments, which confines the window of study to short-term culture. Applications of the model system include studying the basic biology of&#160;breast cancer and other bone-seeking malignancies within the metastatic niche, and developing therapeutic strategies to effectively target breast cancer cells in bone tissues.

Protocols are described for studying breast cancer cell migration, proliferation and colonization in a human bone tissue explant model system.

Kültürleme İnsan Femur Doku Eksplantlarından yöntemleri Metastatik Niche Meme Kanseri Hücre Kolonizasyon Eğitim için

Bone is the most common site of breast cancer metastasis. Although it is widely accepted that the microenvironment influences cancer cell behavior, little ...

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying tissue compartments, restricting the transport of smaller molecules across the epithelium and almost completely prohibiting epithelial macromolecular transport. This selectivity is determined by the mucous gel layer, which limits the transport of lipophilic molecules and both the apical receptors and tight junctional protein complexes of the epithelium. In vitro cell culture models of the epithelium are convenient, but as a model, they lack the complexity of interactions between the microbiota, mucous-gel, epithelium and immune system. On the other hand, in vivo assessment of intestinal absorption or permeability may be performed, but these assays measure overall gastrointestinal absorption, with no indication of site specificity. Ex vivo permeability assays using &#34;intestinal sacs&#34; are a rapid and sensitive method of measuring either overall intestinal integrity or comparative transport of a specific molecule, with the added advantage of intestinal site specificity. Here we describe the preparation of intestinal sacs for permeability studies and the calculation of the apparent permeability (Papp) of a molecule across the intestinal barrier. This technique may be used as a method of assessing drug absorption, or to examine regional epithelial barrier dysfunction in animal models of gastrointestinal disease.

Ex Vivo Intestinal Sacs to Assess Mucosal Permeability in Models of Gastrointestinal Disease

This protocol describes the use of excised intestinal tissue preparations or "intestinal sacs" as an ex vivo model of intestinal barrier function. This model may be used to assess integrity of both the epithelial barrier and the mucous gel layer at specific intestinal sites in animal models of digestive disease.

Ex Vivo Bağırsak Sacs Gastrointestinal Hastalık Modelleri mukozal geçirgenliği Değerlendirmek için

The epithelial barrier is the first innate defense of the gastrointestinal tract and selectively regulates transport from the lumen to the underlying ...

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably reproduce the human disease are necessary to develop new therapies for this disease. The mouse hindlimb ischemia model has been widely used for this purpose, but the standard practice of inducing acute limb ischemia by ligation of the femoral artery can result in substantial tissue necrosis, compromising investigators&#39; ability to study the vascular and skeletal muscle tissue responses to ischemia. An alternative approach to femoral artery ligation is the induction of gradual femoral artery occlusion through the use of ameroid constrictors. When placed around the femoral artery in the same or different locations as the sites of femoral artery ligation, these devices occlude the artery over 1 - 3 days, resulting in more gradual, subacute ischemia. This results in less substantial skeletal muscle tissue necrosis, which may more closely mimic the responses seen in human PAD. Because genetic background influences outcomes in both the acute and subacute ischemia models, consideration of the mouse strain being studied is important in choosing the best model. This paper describes the proper procedure and anatomical placement of ligatures or ameroid constrictors on the mouse femoral artery to induce subacute or acute hindlimb ischemia in the mouse.

Surgical induction of hindlimb ischemia in the mouse is useful to examine angiogenesis, however this is compromised in certain inbred mouse strains that display marked ischemia-induced tissue necrosis. Methods are described to induce subacute limb ischemia using ameroid constrictors to circumvent this problem through the induction of gradual arterial occlusion.

Akut ve Subakut Fare Arka ayağın İskemi Yöntemleri

Peripheral artery disease (PAD) is a leading cause of cardiovascular morbidity and mortality in developed countries, and animal models that reliably ...

Ultrasound-guided Intracardiac Injection of Human Mesenchymal Stem Cells to Increase Homing to the Intestine for Use in Murine Models of Experimental Inflammatory Bowel Diseases

Crohn&#39;s disease (CD) is a common chronic inflammatory disease of the small and large intestines. Murine and human mesenchymal stem cells (MSCs) have immunosuppressive potential and have been shown to suppress inflammation in mouse models of intestinal inflammation, even though the route of administration can limit their homing and effectiveness 1,3,4,5. Local application of MSCs to colonic injury models has shown greater efficacy at ameliorating inflammation in the colon. However, there is paucity of data on techniques to enhance the localization of human bone marrow-derived MSCs (hMSCs) to the small intestine, the site of inflammation in the SAMP-1/YitFc (SAMP) model of experimental Crohn&#39;s disease. This work describes a novel technique for the ultrasound-guided intracardiac injection of hMSCs in SAMP mice, a well-characterized spontaneous model of chronic intestinal inflammation. Sex- and age-matched, inflammation-free AKR/J (AKR) mice were used as controls. To analyze the biodistribution and the localization, hMSCs were transduced with a lentivirus containing a triple reporter. The triple reporter consisted of firefly luciferase (fl), for bioluminescent imaging; monomeric red fluorescent protein (mrfp), for cell sorting; and truncated herpes simplex virus thymidine kinase (ttk), for positron emission tomography (PET) imaging. The results of this study show that 24 h after the intracardiac administration, hMSCs localize in the small intestine of SAMP mice as opposed to inflammation-free AKR mice. This novel, ultrasound-guided injection of hMSCs in the left ventricle of SAMP mice ensures a high success rate of cell delivery, allowing for the rapid recovery of mice with minimal morbidity and mortality. This technique could be a useful method for the enhanced localization of MSCs in other models of small-intestinal inflammation, such as TNF&#916;RE6. Future studies will determine if the increased localization of hMSCs by intra-arterial delivery can lead to increased therapeutic efficacy.

Murine studies in models of colonic inflammation have demonstrated that a small percentage (1 - 5%) of mesenchymal stem cells (MSC) injected intravenously or intraperitoneally home to the inflamed colon1,2. This study shows that ultrasound-guided intracardiac injections of MSCs result in increased localization to the intestine.

Ultrason destekli İntrakardiyak enjeksiyon bağırsak için giriş için deneysel iltihabi bağırsak hastalıkları fare modellerinde kullanım artırmak için insan Mezenkimal Kök hücre

Crohn&#39;s disease (CD) is a common chronic inflammatory disease of the small and large intestines. Murine and human mesenchymal stem cells (MSCs) have ...

İnsan Videofloroskopik Kırlangıç ​​Eğitim Yöntemleri uyarlanması Algılama ve Mürin Hastalık Modelleri disfajiyi Characterize

İnsan Videofloroskopik Kırlangıç Eğitim Yöntemleri uyarlanması Algılama ve Mürin Hastalık Modelleri disfajiyi Characterize