The authors would like to thank John Kristensen and S&#248;ren Braad Andersen from the Department of Communication, Aarhus University Hospital, Denmark, for their exceptional help with filming and editing. Animal technician Diana Gyldenl&#248;ve and veterinarian Birgitte Kousgaard, Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Denmark for assisting with animal care. This study was supported by the Lundbeck Foundation, the Laerdal Foundation for Acute Medicine, Central Denmark Region&#8217;s Research Foundation, Augustinus Foundation, Aase and Ejnar Danielsens Foundation, the Institute of Clinical Medicine Aarhus University Hospital, Br&#248;drene Hartmanns Foundation, Karen Elise Jensens Foundation, Fonden til L&#230;gevidenskabens Fremme, and Marie Dorthea og Holger From, Haderslevs Fond.

Mevcut protokol Danimarka Hayvan Deneyleri Müfettişliği tarafından onaylandı. Tüm test hayvanları prosedürler boyunca anestezi uygulandı. Bu protokolün çoğaltılması, ulusal etik ve hayvan refahı kurallarına uygun olarak yürütülen ve yerel etik komiteleri tarafından onaylanmalıdır. 1. Hayvanlar <ol><li> 2.000 gr - yaklaşık 1.500 ağırlığında Danimarkalı Landrace domuz yavrusu &lt;24 saat eski. </li></ol> 2. Anestezi ve Bakım Sıvıları <ol><li> Sevofluran yönetim, alkol bezlerden, periferik damar içi kateter, lastik bant, tuzlu su ile şırıngalar, propofol (5 mg / kg) için bir maske, fentanil (10 ug / kg) ve prokain benzilpenisilin: anestezi için gerekli olan ekipman (Şekil 1) hazırlayın (15,000 IU / kg). </li><li> Bir solunum maskesi ile% 1-2 sevofluran sunarak anestezi neden olur. <ol><li> Palpebral ve çekilme refl için değerlendirerek anestezi derinliğini değerlendirmekgiderler. Piglet derinden anestezi olduğunu zaman belli, perkütan kulak damar içine periferik intravenöz kateter yerleştirin. </li><li> Periferik damar içi kateter açıklığını onaylamak için, steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kateteri yıkayın. Propofol (5 mg / kg) ve fentanil (/ kg 10 ug) bolus enjeksiyonları uygulayın. Bolus enjeksiyon yönetimine müteakiben steril% 0.9 tuzlu su 1-2 ml kullanarak intravenöz kateter ikinci kez yıkayın. </li><li> Iki ayrı bir şırınga infüzyon pompalarında propofol (10 mg / ml) ve fentanil (10 ug / mi) ile bir yer şırınga. Intravenöz kateter bağlı olan tek bir satır halinde infüzyon katılarak üç yollu iki şırınga pompaları iv tüpleri bağlayın. Sürekli propofol infüzyonu (4-12 mg / kg / saat) ve fentanil (10 ug / kg / st) başlatın. Sürekli infüzyon çalışan sonra, propofol ve fentanil ek bolus enjeksiyonları vermeyin. </li><li> Sevofluran gaz ANEST durdurulmalıdır yönetimilerine. </li><li> Antibiyotik profilaksisi için yerel kurallar uyarınca intramüsküler prokain benzilpenisilin (15,000 IU / kg) deri altından veya enjekte edilir. Günlük tekrarlayın. Video domuz yavruları im tatbikat ile karşılaştırıldığında daha yüksek bir plazma konsantrasyonu ve daha uzun yarı ömür ile sonuçlandığı gösterilmiştir SC uygulamasına göstermektedir. </li><li> Gözlerin kurumasını önlemek için göz yağlama merhem sürün. Bir cep şeklindeki açıklık oluşturmak için yavaşça alt göz kapağını aşağı çekin. Cebin içinde merhem küçük bir miktar sıkın. Kapat göz merhemi dağıtmak için. Kuruluk saatlik kontrol edin ve gerekirse yeniden uygulayın. </li><li> % 5 dekstroz, sürekli bir infüzyon hızı / 10 ml / kg / saat% 0.45 NaCl iv başlatın. Sırasında ve hipoksi sonrasında 5 ml / kg / saat hızını azaltın. 2-10 mmol / L arasında kan şekeri düzeylerini korumak için infüzyon hızı ayarlayın. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52454/52454fig1.jpg" /> Figuanestezi ve entübasyon 1. donatım yeniden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 3. Entübasyon ve Havalandırma <ol><li> Entübasyon için gerekli ekipman (Şekil 1) hazırlayın: açılması için roküronyum bromür (1 mg / kg) kas gevşemesi için, bir halat sapan (Şekil 1&#39;de gösterildiği gibi aynı 4 mm naylon halat iki ucunu kravat birlikte bir daire oluşturacak şekilde) ağız, pamuklu bir düz bıçak Xylocaine sprey (100 mg / ml), manşon olan çeşitli büyüklükte endotrakeal tüpler, 500 mi kendinden şişen torba (3.0 mm, 2.5 mm, 2.0 mm tipleri) (torba valf bezi ve veteriner larengoskop uçlu havalandırma, manşet enflasyon ve stetoskop için 2 ml şırınga için) maske. </li><li> Aşağıdaki adımları izleyerek entübe: <ol><li> Her taraftan boynunu destekleyen yatar pozisyonda yerleştirin piglet düz bir laringeal pas güvenlientübasyon için adaçayı. </li><li> Sternal çentik (genellikle yaklaşık 13 cm) burun ucundan ölçerek endotrakeal tüpün uzunluğu tahmin edin. </li><li> Üst çene etrafında Yeri halat sapan (aşağı bakan) ve açık ağzı tutmak için yukarı alt çene ve dil tutun. </li><li> Kas gevşemesini teşvik etmek için rokuronyum bromür (1 mg / kg), iv uygulayın. </li><li> Yukarı dilini kaldırmak için laringoskop kullanın. </li><li> Pamuk ya da yemek borusuna retrovert veya yumuşak damak arkasında yakalanmış olabilir Piglet uzun epiglottis, ücretsiz bez uçlu kullanın. </li><li> Aritenoid kıkırdaklar ve ses tellerinin tam görünüm sağlayan dil kökünde karşı kaldırdı epiglottis tutmak için laringoskop Advance. </li><li> Laringeal spazmları önlemek için larinks topikal xylocaine spreyi (100 mg / ml) uygulayın. </li><li> Ses tellerinin sayesinde endotrakeal tüp ilerletin. Dar trakea kıkırdaklarının geçişini yardımcı olmak için bir dönme hareketi kullanın. Peşin tüp maille Hesapönceden ölçülmüş mesafe rding ve manuel ventilasyon için kendi kendine şişen torba (poşet valf maske) bağlanın. Xylocaine spreyi ile endotrakeal tüpün distal 1/3 sprey entübasyon sırasında sürtünmeyi azaltmak için. </li><li> Doğru endotrakeal tüp yerleştirme onaylamak için: nefes almada zorluk herhangi bir endikasyon için gözlemlemek, her iki akciğerde içine ikili hava girişi için dinleme göğüs ausculate, görsel endotrakeal tüpün proksimal yönünde yoğunlaşma varlığını teyit ve end tidal karbon varlığını doğrulamak kolorimetrik karbondioksit dedektörü ile veya varsa mekanik ventilatöre bağlı ekspiratuar CO 2 okuma ile dioksit. Normal end tidal karbondioksit% 5 civarında olduğunu. Bir normal görünümlü dalga ile birlikte% 2 üzerinde bir değer endotrakeal tüp trakea olduğunu teyit edecektir. </li><li> Aspirasyonu önlemek için endotrakeal tüp şişirin. Olmalıdır Kol hava basıncı en az 25 cm iskemik hasarı engellemek için H2O<html> çevredeki dokuya. Yerinde endotrakeal tüpü tutarak, tüpün etrafında bant parçası rüzgar, çene kapatın ve yerine tüp sabitlemek için burnu etrafında bantlama devam edin. Yavaşça yerinde kalmasını sağlamak için tüp çekin. </li><li> Mekanik ventilatöre endotrakeal tüp bağlayın. </li></ol></li><li> Ventilatör ayarlarını yapma: hacim kontrollü ventilasyon, tidal volüm (TV): 10 ml / kg [veya tepe inspiratuar basıncı 15 cm basınç kontrollü ventilasyon ile (PIP)]. Pozitif ekspirasyon sonu basınç (PEEP): 5 cm. I: E oranı 1: 2. Solunum hızı: 35 (4.5-5.5 kPa arasındaki end-tidal CO 2 korumak için hızını ayarlamak). </li></ol> 4. İzleme ve Vücut Sıvısı Örnekleme <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig2.jpg" /> Izlemek için 2. Ekipman rakam.ank &quot;&gt; bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız. <ol><li> Sürekli rektal sıcaklık ölçümü, elektrokardiyografi (EKG) elektrotlar, pulse oksimetre, jilet ve EEG elektrotları için yapışkan bant, steril yağlayıcı, sonda: izleme (Şekil 2) için gerekli ekipman hazırlayın. <ol><li> Bir arka bacak üzerine yerleştirin doygunluk probu, rektal sıcaklık probu yağlayın ve rektum içine 6 cm yerleştirin 38,5-39 ° C fizyolojik düzeyde rektal sıcaklığı korumak için havai radyant ısıtıcı ve / veya ısıtılmış şişme hava yatağı yerleştirin ve yer EKG elektrotlar. </li><li> Derialtı iğne EEG elektrotları yerleştirilmesi için 1 cm x 1 cm alanlarını tıraş yüzüstü pozisyonda piglet yerleştirin; Her kulağın önünde tek ve sadece gözlerinin arkasında orta hatta referans elektrot. Alkollü bir bezle temizleyin elektrot sitesini, daha sonra iğne elektrot deri altına yerleştirin. Sırtüstü po yapışkan bant ve dönüş domuz yavrusu ile güvenli elektrotlarlan de. </li><li> AEEG monitörü açın. NOT: EEG entegre genlik üst ve alt kenar boşlukları ile yoğun bir iz oluşur. Bu modelde Alt ve üst kenar boşlukları genellikle bebeklerde görülen genellikle daha yüksektir 15-50 mV vardır. Hipoksi sırasında EKG o eser yanlış aEEG iz yükseltebilir, dikkat etmek önemlidir. Bolus ilaçlar (propofol veya fentanil) da geçici aEEG iz baskılayabilir ve deney sırasında mümkünse kaçınılmalıdır. Ilaç ve klinik olayların İdaresi aEEG izi yorumlanmasını kolaylaştırmak için işaretlenmiş olmalıdır. </li></ol></li><li> Steril eldiven, steril örtü, neşter, alkol bezlerden, steril mendil, göbek ven kateteri (5 Fr), umbilikal arter kateteri (3.5 Fr: merkezi arteriyel kan basıncı takibi ve kan örneklemesi (Şekil 3) için göbek kateterleri yerleştirmek için gerekli olan ekipman hazırlayın ), dikiş forseps, kavisli mikro forseps, makas, iğne tutucu ve sütür (setiÖrneğin, boyut 3-0), şeffaf yapışkan yama, kan örneklemesi için 5 ml şırınga. </li></ol><img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig3.jpg" /> Göbek hatları ve kan örneklemesi için 3. Ekipman rakam. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <ol start="3"><li> Sterilize ve göbek çevresi asmak. Mümkün olduğunca cilde yakın göbek bağını kesmek için bir neşter kullanın. Bu anestezi Piglet umbilikal damarların maruz etmezse, damarları ortaya çıkarmak için göbek cilde göbek kordonu altında 2 mm kesti. Iki küçük göbek arterler ve daha büyük bir göbek ven (Şekil 4) belirleyin. </li><li> Arter (Şekil 4) dilate ve umbilikal arter kateter eklemek için kavisli mikro forseps kullanın(3.5 Fr). 3 x ağırlık cm Tahmin ekleme uzunluğu (kg) + 10 (otopsi renal arterlerin üzerinde inen aorta doğru yerleştirme dayalı ampirik formülü). </li><li> İkinci 5 Fr kateter göbek ven içine 5 cm (Şekil 4) yerleştirin. Kan dönüşü ile intravasküler kateter yerleştirme doğrulayın. Göbek etrafında bir çanta-string sütür koyarak Güvenli kateterler, dikiş göbek kateterleri her etrafında biter geçmesine ve bir düğüm. Yapışkanlı örtü ile kateterler örtün. </li><li> Önceden belirlenmiş zaman noktalarında kan örnekleri toplamak: 45 dakika hipoksik hasara 4) hipoksik saldırıdan sonra 2 st sonunda hipoksik hasara 3) içine 1) derhal hipoksi önce 2) 30 dakika. Kan örnekleri için deney diğer zaman noktaları amacına bağlı olarak seçilebilir. </li><li> Hipoksi-iskemi (Tablo 1) yol açtığı kan gazı değişiklikleri doğrulamak için hipoksi esnasında alınan kan örneklerinden arter kan gazı analizi kullanın. Domuz yavrusu düşük hemoglobin a sahip olduğunu unutmayınt doğum ve (8 g / dL civarında) sık kan örnekleme anemik hale gelebilir. 24 saat içinde beraberlik başına en az 2 ml kan / kg vücut ağırlığı, en az 5 ml kan / kg vücut ağırlığı çekiniz ve kan örneklemesi için yerel yönergelere uygun. Anemi belirtileri hematokrit ve taşikardi azalan içerir. </li><li> Intra-arteriyel kan basıncı izleme (MABP) devam için bir monitöre arteriyel hattı bağlayın. Sıvı ve ilaç uygulaması için venöz hattını kullanın. </li></ol><img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig4.jpg" /> 4. Göbek damarları Şekil. Umbilikal ven (sağda) ve iki göbek arterler (solda) birini. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 5. hipoksi <ol><li> Izleme tamamladıktan sonra 60 dakika bekleyin. % 4 O 2 geçerek hipoksi øndükle </sub&gt; /% 96 N 2 gaz karışımı. Yakından hayati parametreleri ve aEEG izlemek ve 45 dk hipoksi devam ediyor. </li><li> AEEG iz (üst kenar boşluğu &lt;7 mV) düz sonra, ilham oksijen fraksiyonu (FiO 2) değiştirerek oksijenasyonu ayarlayın ve Şekil 5&#39;te gösterilen akış şemasına göre aEEG düz bir iz muhafaza yüksek FiO 2 seviyesine ortalama hava yolu basıncı. En az 10 dakika süreyle bazal% 70 altında MABP için Amaç ve alt FiO 2 gerekirse hipotansiyon ve iskemi sağlamak. Hipotansiyon tarif edilen seviyesi daha önce ilgili hipoksik iskemik beyin yaralanması meydana getirmek için diğer 19,13,30 tarafından gösterilmiştir. </li><li> Ciddi hipotansiyon durumunda (MABP &lt;25 mm Hg) aşağıdaki şekilde kademeli olarak tedavi: kısa bir süre için% 1-5 FiO 2 geliştirmek, tuzlu su, bolus (10 ml / kg), dopamin infüzyonu (5-20 ug / kg / dk), ve noradrenalinin (20 ng-1 ug / kg / dak) infüzyonu. </li><li> &gt; 10 dakika süren nöbetler halinde (klonik, tonik or miyoklonik nöbetler, genellikle fokal veya aEEG genliği ani değişiklikler) tarafından belirtildiği gibi () aşağıdaki enjeksiyon geçmeden önce 30 dakika izin ile adım adım tedavi: fenobarbital iv 20 mg / kg tekrarlayın fenobarbital iv 20 mg / kg yavaş bolus ve midazolam iv 0.5 mg / kg&#39;dır. <ol><li> Nöbetler gelişebilir ve ilaç tedavisi ötanazi yanıt vermeyen iseniz gösterilir. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig5.jpg" /> Oksijenasyonda ayarlamaları gösteren Şekil 5. hipoksi-iskemi akış şeması. Akış aEEG yanıta göre (F i O 2 ve P aw). Havayolu basıncı (P aw) Ortalama PIP / TV (düşük PIP alt P aw verir) ve solunum hızı değiştirilerek ayarlandı (düşük RR alt P aw verir). AEEG = Üst iz marjı &lt;5 mV ve iz alt marjı&gt; 3 uV (ortalama 4 mV) hedefleyin. HedefKalp atım hızı (KAH) =&gt; 80. Hedef ortalama arteriyel kan basıncı (MABP) = MABP&gt; 25. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> 6. 72 saat sağkalım <ol><li> Hipoksik hakaret sonra yakından piglet Monitör ve yavaş yavaş propofol ve fentanil infüzyon oranlarını azaltmak. Hayvan gönüllü nefes edildiği noktada Tüpü. </li><li> Yaşam süresi boyunca, yoğun bakım ve izleme eğitimli personel tarafından 24 saat seyretmek ile bir hayvan tesisinde domuz yavrusu tutun. Iv glukoz infüzyonları 20 ml yönetme / saatlik 2-3 kg. Hipoksi-iskemi kısmi şişe beslenme sonrası 26-48 saat sonra başlatılabilir. Öğürme refleksi mevcut değilse trakea ve akciğerlere aspirasyon biberonla besleme yoluyla oluşabilir. </li><li> Deney ile ilgili ise, Thoresen ve ark tarafından geliştirilen puanlama sistemi kullanılarak nörolojik durumlarını değerlendirmek., TarifOrijinal yayında 17 ayrıntı. </li></ol> 7. Sonuç Değerlendirmesi <ol><li> 72 saat sonra, uyutmak ve 2. bölümde açıklanan ve 3. Munkeby ark 31 ve diğerleri 2 tarafından açıklandığı gibi MR ilgili görüntüleme yöntemleri ile tarama gerçekleştirin tekrar havalandırın. </li><li> Deneyin sonunda pentobarbitalin letal dozu ile domuz yavrusu euthanize (5 g / kg, iv). </li><li> Deneyin amaca göre muayene için beyin hazırlayın. <ol><li> Formalin sabit doku beyin histoloji için.:. Robertson ve diğ 2 tarafından tarif edildiği gibi paraformaldehid diseksiyon ve sonrası sabitleme ardından PBS içinde% 4 paraformaldehit ile kardiyak perfüzyon, kullanım Chakkarapani ark 1 veya Liu ve diğerleri, 18 ya da beyin kaldırmak Andresen ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi ve% 4 paraformaldehid içinde bırakın. 32 </li><li> Analiz için Snap-dondurulmuş doku gerektiren (örneğin, RNAAnaliz veya enzim aktivitesi deneyleri, 33). ilgi beyin bölgelerini teşrih, beyin çıkarın ve ek dondurularak azami 1 cm&#39;lik doku blokları sıvı azot içinde x 1 cm Munkeby ve arkadaşları tarafından tarif edildiği gibi 33 </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Chakkarapani, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+enhances+hypothermic+neuroprotection+in+asphyxiated+newborn+pigs.">Xenon enhances hypothermic neuroprotection in asphyxiated newborn pigs.</a> Annals of. 68, 330-341 (2010).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Melatonin+augments+hypothermic+neuroprotection+in+a+perinatal+asphyxia+model.">Melatonin augments hypothermic neuroprotection in a perinatal asphyxia model.</a> Brain : a journal of neurology. 136, 90-105 (2013).</li><li>Lawn, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Every+Newborn:+progress,+priorities,+and+potential+beyond+survival.">Every Newborn: progress, priorities, and potential beyond survival.</a> Lancet. 384, 189-205 (2014).</li><li>Lee, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrapartum-related+neonatal+encephalopathy+incidence+and+impairment+at+regional+and+global+levels+for+2010+with+trends+from+1990.">Intrapartum-related neonatal encephalopathy incidence and impairment at regional and global levels for 2010 with trends from 1990.</a> Pediatric research. 74, 50-72 (2013).</li><li>Kurinczuk, J. J., White-Koning, M., Badawi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+neonatal+encephalopathy+and+hypoxic-ischaemic+encephalopathy.">Epidemiology of neonatal encephalopathy and hypoxic-ischaemic encephalopathy.</a> Early human development. 86, 329-338 (2010).</li><li>Shankaran, S., Woldt, E., Koepke, T., Bedard, M. P., Nandyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+neonatal+morbidity+and+long-term+central+nervous+system+sequelae+of+perinatal+asphyxia+in+term+infants.">Acute neonatal morbidity and long-term central nervous system sequelae of perinatal asphyxia in term infants.</a> Early human development. 25, 135-148 (1991).</li><li>Robertson, C. M., Finer, N. N., Grace, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=School+performance+of+survivors+of+neonatal+encephalopathy+associated+with+birth+asphyxia+at+term.">School performance of survivors of neonatal encephalopathy associated with birth asphyxia at term.</a> The Journal of pediatrics. 114, 753-760 (1989).</li><li>Bennet, L., Booth, L., Gunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+biomarkers+for+hypoxic-ischemic+encephalopathy.">Potential biomarkers for hypoxic-ischemic encephalopathy.</a> Seminars in feta., &amp; neonatal medicine. 15, 253-260 (2010).</li><li>Yager, J. Y., Ashwal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+perinatal+hypoxic-ischemic+brain+damage.">Animal models of perinatal hypoxic-ischemic brain damage.</a> Pediatric neurology. 40, 156-167 (2009).</li><li>Buckley, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maturation+of+circulatory+system+in+three+mammalian+models+of+human+development.">Maturation of circulatory system in three mammalian models of human development.</a> Comparative biochemistry and physiology. A, Comparative. 83, 1-7 (1986).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+aspects+of+the+brain+growth+spurt.">Comparative aspects of the brain growth spurt.</a> Early human development. 3, 79-83 (1979).</li><li>Dobbing, J., Sands, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+growth+and+development+of+human+brain.">Quantitative growth and development of human brain.</a> Archives of disease in childhood. 48, 757-767 (1973).</li><li>Foster, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+survival+model+of+hypoxia/ischaemia+in+the+piglet+suitable+for+neuroprotection+studies.">An improved survival model of hypoxia/ischaemia in the piglet suitable for neuroprotection studies.</a> Brain research. 919, 122-131 (2001).</li><li>LeBlanc, M. H., Li, X. Q., Huang, M., Patel, D. M., Smith, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=AMPA+antagonist+LY293558+does+not+affect+the+severity+of+hypoxic-ischemic+injury+in+newborn+pigs.">AMPA antagonist LY293558 does not affect the severity of hypoxic-ischemic injury in newborn pigs.</a> Stroke; a journal of cerebral circulation. 26, 1908-1914 (1995).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nicotine+affects+the+expression+of+brain-derived+neurotrophic+factor+mRNA+and+protein+in+the+hippocampus+of+hypoxic+newborn+piglets.">Nicotine affects the expression of brain-derived neurotrophic factor mRNA and protein in the hippocampus of hypoxic newborn piglets.</a> J Perinat Med. 37, 553-560 (2009).</li><li>Cheung, P. Y., Gill, R. S., Bigam, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+swine+model+of+neonatal+asphyxia.">A swine model of neonatal asphyxia.</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2011).</li><li>Thoresen, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+survival+model+of+posthypoxic+encephalopathy.">A piglet survival model of posthypoxic encephalopathy.</a> Pediatric research. 40, 738-748 (1996).</li><li>Liu, X., Tooley, J., Loberg, E. M., Suleiman, M. S., Thoresen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immediate+hypothermia+reduces+cardiac+troponin+I+after+hypoxic-ischemic+encephalopathy+in+newborn+pigs.">Immediate hypothermia reduces cardiac troponin I after hypoxic-ischemic encephalopathy in newborn pigs.</a> Pediatric research. 70, 352-356 (2011).</li><li>Bjorkman, S. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxic/Ischemic+models+in+newborn+piglet:+comparison+of+constant+FiO2+versus+variable+FiO2+delivery.">Hypoxic/Ischemic models in newborn piglet: comparison of constant FiO2 versus variable FiO2 delivery.</a> Brain research. 1100, 110-117 (2006).</li><li>Robertson, N. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Which+neuroprotective+agents+are+ready+for+bench+to+bedside+translation+in+the+newborn+infant.">Which neuroprotective agents are ready for bench to bedside translation in the newborn infant.</a> The Journal of pediatrics. 160, 544-552 (2012).</li><li>Jacobs, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cooling+for+newborns+with+hypoxic+ischaemic+encephalopathy.">Cooling for newborns with hypoxic ischaemic encephalopathy.</a> Cochrane Database Syst Rev. 1, CD003311 (2013).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+21+or+100%+oxygen+in+hypoxic+nicotine-pretreated+newborn+piglets:+possible+neuroprotective+effects+of+nicotine.">Resuscitation with 21 or 100% oxygen in hypoxic nicotine-pretreated newborn piglets: possible neuroprotective effects of nicotine.</a> Neonatology. 93, 36-44 (2008).</li><li>Karlsson, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+hypothermia+as+selective+head+cooling+or+whole+body+cooling+does+not+protect+brain+or+body+in+newborn+pig+subjected+to+hypoxia-ischemia.">Delayed hypothermia as selective head cooling or whole body cooling does not protect brain or body in newborn pig subjected to hypoxia-ischemia.</a> Pediatric research. 64, 74-78 (2008).</li><li>Kovacs, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxia-induced+release+of+alpha-melanocyte-stimulating+hormone+in+newborn+pigs.">Asphyxia-induced release of alpha-melanocyte-stimulating hormone in newborn pigs.</a> Peptides. 22, 1049-1053 (2001).</li><li>Varvarousi, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asphyxial+cardiac+arrest,+resuscitation+and+neurological+outcome+in+a+Landrace/Large-White+swine+model.">Asphyxial cardiac arrest, resuscitation and neurological outcome in a Landrace/Large-White swine model.</a> Laboratory animals. 45, 184-190 (2011).</li><li>Tammela, O., Pastuszko, A., Lajevardi, N. S., Delivoria-Papadopoulos, M., Wilson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity+of+tyrosine+hydroxylase+in+the+striatum+of+newborn+piglets+in+response+to+hypocapnic+hypoxia.">Activity of tyrosine hydroxylase in the striatum of newborn piglets in response to hypocapnic hypoxia.</a> Journal of neurochemistry. 60, 1399-1406 (1993).</li><li>Cote, A., Barter, J., Meehan, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Age-dependent+metabolic+effects+of+repeated+hypoxemia+in+piglets.">Age-dependent metabolic effects of repeated hypoxemia in piglets.</a> Canadian journal of physiology and pharmacology. 78, 321-328 (2000).</li><li>Tichauer, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+severity+of+perinatal+hypoxia-ischemia+in+piglets+using+near-infrared+spectroscopy+to+measure+the+cerebral+metabolic+rate+of+oxygen.">Assessing the severity of perinatal hypoxia-ischemia in piglets using near-infrared spectroscopy to measure the cerebral metabolic rate of oxygen.</a> Pediatric research. 65, 301-306 (2009).</li><li>Jasani, M. S., Salzman, S. K., Tice, L. L., Ginn, A., Nadkarni, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetic+regimen+effects+on+a+pediatric+porcine+model+of+asphyxial+arrest.">Anesthetic regimen effects on a pediatric porcine model of asphyxial arrest.</a> Resuscitation. 35, 69-75 (1997).</li><li>Chakkarapani, E., Thoresen, M., Liu, X., Walloe, L., Dingley, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xenon+offers+stable+haemodynamics+independent+of+induced+hypothermia+after+hypoxia-ischaemia+in+newborn+pigs.">Xenon offers stable haemodynamics independent of induced hypothermia after hypoxia-ischaemia in newborn pigs.</a> Intensive care medicine. 38, 316-323 (2012).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+piglet+model+for+detection+of+hypoxic-ischemic+brain+injury+with+magnetic+resonance+imaging.">A piglet model for detection of hypoxic-ischemic brain injury with magnetic resonance imaging.</a> Acta radiologica. 49, 1049-1057 (2008).</li><li>Andresen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newborn+piglets+exposed+to+hypoxia+after+nicotine+or+saline+pretreatment:+long-term+effects+on+brain+and+heart.">Newborn piglets exposed to hypoxia after nicotine or saline pretreatment: long-term effects on brain and heart.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 22, 161-168 (2009).</li><li>Munkeby, B. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resuscitation+with+100%+O2+increases+cerebral+injury+in+hypoxemic+piglets.">Resuscitation with 100% O2 increases cerebral injury in hypoxemic piglets.</a> Pediatric research. 56, 783-790 (2004).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Nedeniyle karmaşıklığına, açıklanan model sadece akredite tesislerde uygulanabilir ve hayvan araştırmalarında deneyimli. Yerel etik komiteler tarafından onaylanması öncesinde deneylerin başlamasından alınmalı ve optimum hayvan refahı her zaman sağlanmalıdır. Model test hayvanlarının hayatta kalma dayanmaktadır gibi, steril bir ortam enfeksiyonları önlemek için invazif prosedürler esnasında muhafaza edilmesi önemlidir. tüm anestezik ilaçların potansiyel nöro-...

Perinatal asfiksi Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) ile ilişkili akut ve sıklıkla öngörülemeyen bir durumdur. Bu protokolün genel amacı, perinatal hipoksik iskemik ensefalopati bir domuz yavrusu hayatta kalma modeli ortaya koymaktır. Bu model yenidoğan beyin üzerinde ve kan, beyin omurilik sıvısı ve idrar gibi vücut sıvılarında nöropatolojisi deneysel tedaviler, manyetik rezonans görüntüleme ve spektroskopi (MRG ve MRS) ve biyobelirteçlerin hipoksi-iskemi çeşitli derecelerde etkisini araştırmak için kullanılabilir . modeli aynı zamanda küresel hipoksi-iskemi etkilenen bütün bunlar kardiyovasküler sistemi, solunum sistemi, böbrek ve karaciğer, soruşturma için yararlı olduğu kanıtlanmıştır. Perinatal asfiksi tehlikeye oksijen kaynağı intrapartum veya hemen doğum sonrası dönemde sonucudur. İntrapartum hipoksik olaylar dünyanın 2.9 değirmen yaklaşık dörtte, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl için hesap2012 3 iyon neonatal ölümler. 2010 1,15 milyon bebeklerde doğum asfiksi 4 Aşağıdaki neonatal ensefalopati geliştiği tahmin edilmektedir. HIE gebelik 34 haftadan sonra doğan bebeklerde ensefalopati olarak tanımlanan sanayileşmiş dünyada 1-3 / 1000 canlı doğumda 5 oluşur ve 8.5 / 1000 canlı doğumda kadar gelişmekte olan ülkelerde 4. ölüm riski% 10-60 olduğunu ve hayatta kalanların% 30-100 6,7 nörolojik handikap riski. 50200000 sakatlık ayarlanmış yaşam yılları (DALY) intrapartum hipoksik olaylar 4 atfedilir. Halen HIE için destekleyici başka tek tedavi sonrası hipoksik hipotermi olduğunu. Böylece, tanı yöntemleri ve tedavi stratejileri gelişmeler HIE 8 yönetimini geliştirmek için gereklidir. Perinatal asfiksi ve neonatal beyin hasarı yönetiminde sonrası prognozu gelişmeler altta yatan hastalık mekanizmaları bilgisini genişleterek dayalı bird olası tedaviler. Farklı klinik olaylar HİE yol açabilir ve tek bir doğumevinde insidans düşük 5 olarak HIE hayvan modelleri özellikle yararlıdır. Prognostik ve tanılama araçları ve tedavi stratejileri, yeni test ederken biyolojik çeşitliliği etkisi minimize edilebileceği bir deney düzeneği, esastır. Bir hayvan modeli böylece uyarılan yaralanma ve hastalık ve İt&#39;s sonucu 9 katılan dinamik bir süreç altında yatan patolojik mekanizmaların anlaşılmasına katkıda, mümkün olduğunca yakından klinik durum yaklaştığı gerekir. Yenidoğan HIE hayvan modelleri kemirgenler, kuzu, domuz da dahil olmak üzere türlerin bir dizi ihtiva ederler. Buna karşılık, yeni doğmuş domuz yavrusu teslimat 11,12 zamanında boyutu ile ilgili olarak, kalp-damar sistemi 10 ve beyin vadeli insan bebeğe daha fazla benzerliği vardır. Piglet modelinde İzleme, enstrümantasyon ve sonuç değerlendirme tha benzerHİE ile bebeklerin klinik bakımda kullanılan t. Bu duruma göre, bu modelden yenidoğan bakım çevrilmesinden yüksek derecede vardır. Perinatal hipoksi ve HIE domuz yavrusu modelleri çok grup tarafından kullanılan ve alanda 13 bir dizi farklılık göstermektedir. Deneyin amacına göre, çok dikkat ilaçların seçimi ödenmelidir, hipoksi-iskemi, hakaret süresini ve şiddetini, post-hakaret resüsitasyon ve bakımı, ve sonuçları değerlendirme kontrol yöntemi uyarma yöntemi. Randomize bir çalışma tasarımı her zaman girişimsel çalışmalarda kullanılması gereken yanlılığı önlemek için. hipoksik iskemik yaralanma uyaran uygulanacak yöntem önemlidir. HİE giden küresel hipoksi sıklıkla beyin, kalp, akciğerler, böbrek ve karaciğer ile ilgili çoklu organ yetmezliği ile sonuçlanır. Değerlendirilen sonuçlarına göre, HIE modelleri fokal iskemi, örneğin güveniyor ziyade küresel hipoksi ve iskemi dayanmalıdır., Arabanın ligasyonu ileotid arterler 14. Ortalama kan basıncı&gt; 40 mm Hg 2 korurken yeni bir kağıt hipoksi kombinasyonu (FiO 2% 12) ve karotid arter sıkıştırma uyguladı. Başka bir grup negatif baz fazlalığı&gt; 20 mmol / L kadar% 8 O 2 küresel hipoksi kaynaklı veya arteriyel kan basıncı (MABP) &lt;15 mm Hg ortalama ve 4 saat 15 de hayvanların kurban. Hipoksi aynı zamanda kardiyak output ile titre edilmiştir MABP (bazal% 30-40) ve arteriyel pH (6,95-7,05), 16 (30-35 mm Hg). Bu raporda sunulan benzer aEEG bastırma ile titre küresel hipoksi-iskemi, modelleri elektrofizyolojik, klinik olarak ensefalopati gösterdi ve oksijensiz dönem bebek 17,18 bulunan durumuna nöropatolojik karşılaştırılabilir olması. indüklenen HIE derecesi önemlidir. HIE yararlı bir hayvan modeli, aynı zamanda, yeni dia test edilmesi için izin vermelidirusul ve tedavi seçenekleri gnostik. Bunu sağlamak için, modeller, yeni tedaviler değerlendirirken az alakalı olacağını çok az veya hiç tedavi potansiyeline sahip ciddi beyin hasarı gibi tedavi potansiyel var ılımlı HIE neden olmalıdır. Hipoksiye tolerans testi hayvanlar arasında önemli oranda değişmektedir. Önceki çalışmalar daha tutarlı bir beyin hasarı elde edilebileceğini göstermiştir ve daha fazla hayvan genlik entegre elektroensefalografi (aEEG) tarafından değerlendirilir her Piglet serebral yanıta göre uyarılan hipoksi bireyselleştirmekte ziyade boyunca bir dizi FiO 2 değeri kullanılarak 17,19 hayatta olduğunu hipoksik olayı. aEEG bastırma süresi 45 dakika aEEG bastırma &lt;artmaktadır 20 dk aEEG bastırma ve şiddetli nöbetler&gt; az sayıdaki histopatolojik değişikliklerle, beyin hasarının derecesine ilişkilidir. HİE için nöroprotektif tedavilerin bir yeni yorum davranışsal sonuç ölç sağlayan yaşam modelleri için ihtiyaç tespithayvan modellerinde 20 ures. Sunulan HIE Piglet modelinin sayısız avantajı vardır. Bu sonuç, insan fizyolojisine çevirmek için son derece muhtemeldir bir tür dayanmaktadır. AEEG Küresel hipoksi-iskemi modelleri çoklu organ yetmezliği ve hipoksi-iskemi titrasyon biyomarkerler, MR ve davranış ile ilgili zaman noktalarında değerlendirilebilir şekilde hayatta kalma klinik sonuçlarla ilgili beyin hasarı tutarlı bir derecede neden olur. Perinatal asfiksi ve HİE Piglet modelleri HIE patofizyolojisi içine geçerli içgörü önemli katkıda değil, aynı zamanda başarılı bir sonuçta insanlarda yeni tedaviler sonucu, klinik çalışmalar öncesinde var. Piglet model çalışmaları HIE 21 için bir tedavi olarak hipotermi kurulmasında önemli bir rol oynadı ve yenidoğan resüsitasyon araştırması 22 kullanılır. Asfiksi ve HİE, bir araştırma içinde yaparken çeşitli gruplar piglet modelleri kullanmışD çalışmaları hipotermi 23, a-melanosit uyarıcı hormon 24, kalp durması 25, tirozin hidroksilaz aktivitesi 26, tekrar hipoksik maruz 27, NMDA reseptör aktivitesi 14 içerir ve yakın kızıl ötesi spektroskopi 28. prosedür sırasında küçük ayarlamalar çok hafif ya da çok şiddetli beyin hasarı 29,2 ya sebep olabilir, bu raporda sunulan Piglet HIE modeli ile çalışmak teknik açıdan zor. Biz mevcut literatür önce yayınlanmış modeller üretmek için yeterli ayrıntı yoktu bulundu. Böylece, burada HIE çalışmaları için bu gelişmiş modeli kurmak için araştırmacıların sağlayan bu raporda bir domuz yavrusu 72 saat hayatta kalma modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürlerin her adımını göstermektedir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1034">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Warm-touch-pediatric blanket</td>
			<td style="width:211px;">Covidien</td>
			<td style="width:176px;">5030840</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adhesive Apertrue Drape</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>915447</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Utility Drape (sterile) 75x80 cm</td>
			<td>Barrier</td>
			<td>800530</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Neoflon</td>
			<td>BD - Luer</td>
			<td>391350</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Laryngoscope</td>
			<td style="width:211px;">Miller</td>
			<td style="width:176px;">85-0045</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 2.5 mm&#160;</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>111-25</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 3.0 mm with cuff</td>
			<td>Unomedical</td>
			<td>MM61110030</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endotracheal tube 3.5 mm with cuff</td>
			<td>Unomedical</td>
			<td>MM61110035</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Anesthesia machine</td>
			<td style="width:211px;">GE Healthcare</td>
			<td style="width:176px;">1009-9002-000</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">EEG - electrodes/disposable subdermal needle electrode</td>
			<td>Cephalon</td>
			<td>ACCE120550</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ECG - electrodes</td>
			<td>medtronic</td>
			<td>3010107-003</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">ECG-electrodes for MR</td>
			<td>philips</td>
			<td>ACCE120550</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Arterial blood sampler - aspirator</td>
			<td>Radiometer medical ApS</td>
			<td>956552</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyurethane Umbilical vein catheter (5 Fr/Ch)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8888160341</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyurethane Umbilical vein catheter (3,5 Fr/ch)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8888160333</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture set (size 3-0)</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>8886 623341</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">BD Spinal needle 0.7x38mm</td>
			<td>BD needles</td>
			<td>405254</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">Gas with 96% Nitrogen / 4% oxygen</td>
			<td style="width:211px;">Air Liquide</td>
			<td style="width:176px;">made on order</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:647px;">NeuroMonitor (CFM) system</td>
			<td>Natus Medical Incorporated</td>
			<td>OBM70002</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy

Hipoksik-iskemik ensefalopati (HİE) neden Doğum asfiksi, dünya çapında 0.660.000 ölüm her yıl, dünyanın en 2,9 milyon neonatal ölümlerin yaklaşık dörtte oluşturuyor. HİE hayvan modelleri HIE patofizyoloji anlaşılmasına katkıda bulunmuştur ve bağlı perinatal asfiksi beyin hasarı meydana dinamik bir süreç sermiştir. Bu nedenle, hayvan çalışmaları taciz sonrası tedavi stratejileri için bir zaman penceresi sürmüşlerdir. Hipotermi pdiglet modellerinde HIE için bir tedavi olarak test edilmiştir ve daha sonra, klinik testlerde de etkili olmuştur. Modelin Varyasyonları adjuvan nöro-koruyucu yöntemler ve ksenon ve melatoninin domuz yavrusu çalışmaları çalışmada uygulanmıştır klinik faz yol açmıştır I ve II çalışmalarda 1,2. domuz yavrusu HİE modeli daha yenidoğan resuscitation- ve hemodinamik çalışmalar hem de hücresel seviyede serebral hipoksi araştırmalarda kullanılır. Bununla birlikte, teknik olarak zorprotokolde modeli ve varyasyonları ya çok hafif ya da çok şiddetli beyin yaralanmaya neden olabilir. Bu yazıda, yenidoğan HIE istikrarlı bir domuz yavrusu modelinin kurulması için gerekli teknik prosedürleri göstermektedir. İlk olarak, yenidoğan piglet (&lt;24 saat eski, ortanca ağırlık 1500 gr), anestezi entübe ve yenidoğan yoğun bakım ünitesinde bulunan kıyaslanabilir bir kurulumda izlenir. Küresel hipoksi-iskemi küresel hipoksi, hipotansiyon ile iskemi ve serebral hipoksi gösteren düz bir iz genlik entegre EEG (aEEG) ulaşmak için inspirasyon oksijen fraksiyonu düşürerek indüklenir. Hayatta kalma aEEG tepki ve kan basıncına göre oksijen ayarlayarak teşvik edilmektedir. Beyin hasarı 72 saat sonra histopatolojik ve manyetik rezonans görüntüleme ile ölçülür.

kaynaklı hakaret sırasında meydana beyinde hipoksi-iskemi etkileri aEEG izini kaydedilerek belgelenmiştir. Temsili aEEG izi, Şekil 6&#39;da gösterilmiştir. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52454/52454fig6.jpg" /> Şekil 6. Temsilcisi aEEG iz. Nedeniyle hipoksi-iskemi Düşük genlik. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52454/52454fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini ...

Watch this Scientific Journal Video about A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy at JoVE.com

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

a-piglet-model-of-neonatal-hypoxic-ischemic-encephalopathy

Research

JoVE Journal

Medicine

19.5K Görüntüleme.  Institute of Clinical Medicine, Aarhus University Hospital. Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy. 

Video: A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

A Swine Model of Neonatal Asphyxia

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, perfusion deficit, hypoxic-ischemic encephalopathy, pulmonary hypertension, vasculopathic enterocolitis, renal failure and thrombo-embolic complications. Animal models are developed to help us understand the patho-physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. In comparison to rodents and newborn lambs, the newborn piglet has been proven to be a valuable model. The newborn piglet has several advantages including similar development as that of 36-38 weeks human fetus with comparable body systems, large body size (&tilde;1.5-2 kg at birth) that allows the instrumentation and monitoring of the animal and controls the confounding variables of hypoxia and hemodynamic derangements.
We here describe an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia and allow us to examine the systemic and regional hemodynamic changes during the asphyxiating and reoxygenation process as well as the respective effects of interventions. Further, the model has the advantage of studying multi-organ failure or dysfunction simultaneously and the interaction with various body systems. The experimental model is a non-survival procedure that involves the surgical instrumentation of newborn piglets (1-3 day-old and 1.5-2.5 kg weight, mixed breed) to allow the establishment of mechanical ventilation, vascular (arterial and central venous) access and the placement of catheters and flow probes (Transonic Inc.) for the continuously monitoring of intra-vascular pressure and blood flow across different arteries including main pulmonary, common carotid, superior mesenteric and left renal arteries. Using these surgically instrumented piglets, after stabilization for 30-60 minutes as defined by Z&lt;10% variation in hemodynamic parameters and normal blood gases, we commence an experimental protocol of severe hypoxemia which is induced via normocapnic alveolar hypoxia. The piglet is ventilated with 10-15% oxygen by increasing the inhaled concentration of nitrogen gas for 2h, aiming for arterial oxygen saturations of 30-40%. This degree of hypoxemia will produce clinical asphyxia with severe metabolic acidosis, systemic hypotension and cardiogenic shock with hypoperfusion to vital organs. The hypoxia is followed by reoxygenation with 100% oxygen for 0.5h and then 21% oxygen for 3.5h. Pharmacologic interventions can be introduced in due course and their effects investigated in a blinded, block-randomized fashion.

Large animal models have good translational values in the examination of physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. Using newborn piglets, we develop an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia which has advantages of studying the systemic and regional hemodynamics, oxygen transport with biochemical and pathologic pathways and correlations.

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, ...

Tıp

Assessment of Perigenital Sensitivity and Prostatic Mast Cell Activation in a Mouse Model of Neonatal Maternal Separation

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the age of 50, yet it is the least understood and studied chronic pelvic pain disorder. A significant subset of patients with chronic pelvic pain report having experienced early life stress or abuse, which can markedly affect the functioning and regulation of the hypothalamic-pituitary-adrenal (HPA) axis. Mast cell activation, which has been shown to be increased in both urine and expressed prostatic secretions of CP/CPPS patients, is partially regulated by downstream activation of the HPA axis. Neonatal maternal separation (NMS) has been used for over two decades to study the outcomes of early life stress in rodent models, including changes in the HPA axis and visceral sensitivity. Here we provide a detailed protocol for using NMS as a preclinical model of CP/CPPS in male C57BL/6 mice. We describe the methodology for performing NMS, assessing perigenital mechanical allodynia, and histological evidence of mast cell activation. We also provide evidence that early psychological stress can have long-lasting effects on the male urogenital system in mice.

We are measuring perigenital mechanical sensitivity and mast cell activation in the prostate of male C57BL/6 mice that underwent an early life stress paradigm &#8211; neonatal maternal separation, in order to induce a preclinical model of chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome.

Yenidoğan Anneden Ayrılma Fare Modelinde perigenital Duyarlılık ve Prostat Mast Hücre aktivasyonu Değerlendirilmesi

Chronic prostatitis/chronic pelvic pain syndrome (CP/CPPS) has a lifetime prevalence of 14% and is the most common urological diagnosis for men under the ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, standardized battery of neonatal mouse motor tests. These tests can validate injury or disease models, determine treatment efficacy and/or assess motor behaviors in new transgenic strains. This paper presents a series of neonatal motor tests to evaluate general motor function, including ambulation, hindlimb foot angle, surface righting, negative geotaxis, front- and hindlimb suspension, grasping reflex, four limb grip strength and cliff aversion. Mice between the ages of post-natal day 2 to 14 can be used. In addition, these tests can be used for a wide range of neurological and neuromuscular pathologies, including cerebral palsy, hypoxic-ischemic encephalopathy, traumatic brain injury, spinal cord injury, neurodegenerative diseases, and neuromuscular disorders. These tests can also be used to determine the effects of pharmacological agents, as well as other types of therapeutic interventions. In this paper, motor deficits were evaluated in a novel neonatal mouse model of cerebral palsy that combines hypoxia, ischemia and inflammation. Forty-eight hours after injury, five tests out of the nine showed significant motor deficits: ambulation, hindlimb angle, hindlimb suspension, four limb grip strength, and grasping reflex. These tests revealed weakness in the hindlimbs, as well as fine motor skills such as grasping, which are similar to the motor deficits seen in human cerebral palsy patients.

Presented is a concise battery of mouse neonatal motor tests. Using these tests, neonatal motor deficits can be demonstrated in a variety of neonatal motor disorders. By having a standardized set of tests, results from different studies can be compared, allowing for better and accurate reporting between groups.

Cerebral Palsy bir Yenidoğan Fare Modeli Motor Testleri A Pil

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Yenidoğan Farelerde Miyokard Enfarktüsü, Kalp Rejenerasyon Bir Model

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity (AIDN): A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children. Recent investigations in animals have raised concerns that anesthesia exposure may lead to neuronal apoptosis, known as anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN). Furthermore, some clinical studies in children have suggested that anesthesia exposure may lead to neurodevelopmental deficits later in life. Nonetheless, an ideal animal model for preclinical study has yet to be developed. The neonatal piglet represents a valuable model for preclinical study, as they share a striking number of developmental similarities with humans.
The anatomy and physiology of piglets allow for implementation of rigorous human perioperative conditions in both survival and non-survival procedures. Femoral artery catheterization allows for close monitoring, thus enabling prompt correction of any deviation of the piglet's vital signs and chemistries. In addition, there are multiple developmental similarities between piglets and human neonates. The techniques required to use piglets for experimentation will require experience to master. A pediatric anesthesiologist is a critical member of the investigative team. We describe, in a general sense, the appropriate use of a piglet model for neurodevelopmental study.

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity AIDN: A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN) research has focused on rodents, which are not broadly applicable to humans. Non-human primate models are more relevant, but are cost-prohibitive and difficult to use for experimentation. The piglet, in contrast, is a clinically relevant, practical animal model ideal for the study of anesthetic neurotoxicity.

Anesteziye Bağlı Gelişimsel Nörotoksisite (AIDN) Çalışması İçin Bir Piglet Modelinin Kullanımı: Bir Translasyonel Sinirbilimi Yaklaşımı

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children.  Recent investigations in animals have raised concerns that ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Neonatal BALB/c Mouse Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight infants, with high mortality and unclear pathogenesis. The cause of NEC may be related to inflammatory immune regulatory system abnormalities. An NEC animal model is an indispensable tool for NEC disease immune research. NEC animal models usually use C57BL/6J neonatal mice; BALB/c neonatal mice are rarely used. Related studies have shown that when mice are infected, Th2 cell differentiation is predominant in BALB/c mice compared to C57BL/6J mice. Studies have suggested that the occurrence and development of NEC are associated with an increase in T helper type 2 (Th2) cells and are generally accompanied by infection. Therefore, this study used neonatal BALB/c mice to induce an NEC model with similar clinical characteristics and intestinal pathological changes as those observed in children with NEC. Further study is warranted to determine whether this animal model could be used to study Th2 cell responses in NEC.

Nekrotizan Enterokolit'in Yenidoğan BALB/c Fare Modeli

Necrotizing enterocolitis (NEC) is the most severe gastrointestinal (GI) disease that often occurs in premature infants, especially very low birth weight ...

Effect of Hyaluronic Acid 35 kDa on an In Vitro Model of Preterm Small Intestinal Injury and Healing Using Enteroid-Derived Monolayers

In vitro scratch wound assays are commonly used to investigate the mechanisms and characteristics of epithelial healing in a variety of tissue types. Here, we describe a protocol to generate a two-dimensional (2D) monolayer from three-dimensional (3D) non-human primate enteroids derived from intestinal crypts of the terminal ileum. These enteroid-derived monolayers were then utilized in an in vitro scratch wound assay to test the ability of hyaluronan 35 kDa (HA35), a human milk HA mimic, to promote cell migration and proliferation along the epithelial wound edge. After the monolayers were grown to confluency, they were manually scratched and treated with HA35 (50 &#181;g/mL, 100 &#181;g/mL, 200 &#181;g/mL) or control (PBS). Cell migration and proliferation into the gap were imaged using a transmitted-light microscope equipped for live-cell imaging. Wound closure was quantified as percent wound healing using the Wound Healing Size Plugin in ImageJ.&#160;The scratch area and rate of cell migration and the percentage of wound closure were measured over 24 h. HA35 in vitro accelerates wound healing in small intestinal enteroid monolayers, likely through a combination of cell proliferation at the wound edge and migration to the wound area. These methods can potentially be used as a model to explore intestinal regeneration in the preterm human small intestine.

Effect of Hyaluronic Acid 35 kDa on an In Vitro Model of Preterm Small Intestinal Injury and Healing Using Enteroid-Derived Monolayers

This protocol describes a method to establish and perform a scratch wound assay on two-dimensional (2D) monolayers derived from three-dimensional (3D) enteroids isolated from non-human primate ileum.

Hyaluronik Asit 35 kDa'nın Enteroid Kaynaklı Tek Katmanlı Erken İnce Bağırsak Hasarı ve İyileşmesinin In Vitro Modeline Etkisi

In vitro scratch wound assays are commonly used to investigate the mechanisms and characteristics of epithelial healing in a variety of tissue types. ...

In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

Necrotizing enterocolitis (NEC) is a devastating disease affecting preterm infants, characterized by intestinal inflammation and necrosis. Enteroids have recently emerged as a promising system to model gastrointestinal pathologies. However, currently utilized methods for enteroid manipulation either lack access to the apical surface of the epithelium (three-dimensional [3D]) or are time-consuming and resource-intensive (two-dimensional [2D] monolayers). These methods often require additional steps, such as microinjection, for the model to become physiologically translatable. Here, we describe a physiologically relevant and inexpensive protocol for studying NEC in vitro by reversing enteroid polarity, resulting in the apical surface facing outward (apical-out). An immunofluorescent staining protocol to examine enteroid barrier integrity and junctional protein expression following exposure to tumor necrosis factor-alpha (TNF-&#945;) or lipopolysaccharide (LPS) under normoxic or hypoxic conditions is also provided. The viability of 3D apical-out enteroids exposed to normoxic or hypoxic LPS or TNF-&#945; for 24 h is also evaluated. Enteroids exposed to either LPS or TNF-&#945;, in combination with hypoxia, exhibited disruption of epithelial architecture, a loss of adherens junction protein expression, and a reduction in cell viability. This protocol describes a new apical-out NEC-in-a-dish model which presents a physiologically relevant and cost-effective platform to identify potential epithelial targets for NEC therapies and study the preterm intestinal response to therapeutics.

In Vitro Apical-Out Enteroid Model of Necrotizing Enterocolitis

This protocol describes an apical-out necrotizing enterocolitis (NEC)-in-a-dish model utilizing small intestinal enteroids with reversed polarity, allowing access to the apical surface. We provide an immunofluorescent staining protocol to detect NEC-related epithelial disruption and a method to determine the viability of apical-out enteroids subjected to the NEC-in-a-dish protocol.

İn Vitro Nekrotizan Enterokolitin Apikal-Out Enteroid Modeli

Necrotizing enterocolitis (NEC) is a devastating disease affecting preterm infants, characterized by intestinal inflammation and necrosis. Enteroids have ...