We acknowledge Stephanie Gorgeard, Thierry Scheerlink (Toshiba France), and Christophe Lazare (Bracco France).

NOT: Bu yazıda anlatılan yöntemleri Tıp, Paris, Fransa (CEEALV / 2011-08-01) arasında Lariboisière Okulu Biyoetik Komitesi tarafından onaylandı. 1. Enstrüman Hazırlık <ol><li> Hazırlayın ve kateter aşağıdaki araçları temizleyin: Mikro forseps, mikro-makas, mikro vasküler kelepçe, büyük makas, cerrahi iplik (Siyah örgülü ipek 4-0) ve 14 G kateter. Bir heparin çözeltisi (5000 U / ml) ile kateter Heparinize. </li><li> Hazırlayın ve laminektomi için aşağıdaki araçları temizleyin: Büyük makas, neşter ve kemik kesici. Laminektomi (Şekil 1) sırasında omuriliği zarar riskini azaltmak için tasarlanmış bir ısmarlama kemik kesici ile laminektomi gerçekleştirin. </li><li> Set-up hayvan konumlandırılması ve stabilizasyonu için kullanılan 3D-çerçeve. ısmarlama çerçeve forseps ile birlikte bir Eksternal Fiksatör Hoffman 3 unsurları ile inşa edilmiştir yüklenebileceğinih hayvanın bel omurgasını uyması için kavisli oylandı. </li><li> Omurilik yaralanması biyomekanik için kullanılan ağırlık bırak cihazı (çarpma) hazırlayın. NOT: ısmarlama çarpma cihazı 3D yazılımı ile tasarlandı ve 3D basılmıştır. </li><li> Ultrason Makineyi açın. </li><li> Kontrast madde sulandırma için kiti hazırlayın. Not: Kit liyofilize edilmiş toz, 25 mg, 5 ml sodyum klorür ve bir mini başak transfer sistemi (Şekil 2) ihtiva eden 1, önceden doldurulmuş bir şırınga ihtiva eden 1 şişe içerir. kontrast madde yeniden oluşturulmak üzere adımlar (5. bölümünde) aşağıda detaylandırılmıştır. </li></ol> 2. Juguler Ven Kateterizasyon (Şekil 3) <ol><li> % 4 izofluran ile hayvan anestezisi. Yatar pozisyonda hayvan yerleştirin. Pençeleri bir forseps ile sıkışmak zaman hayvan tepkisiz sağlayarak doğru anesthetization onaylayın. Und sırasında kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner merhem sürüner anestezi. </li><li> Boyun Tıraş ve cildi temizleyin. Boynun orta hat üzerinde bir kesi yapmak. Internal juguler ven bulmak için sternocleidomastoidian kas geri çekin. Ven rostral kısmında bir bitişik harfleri sıkın. </li><li> Ven, ligature altında 1 cm üzerinde bir mikrovasküler kelepçe uygulayın. Sadece kelepçe bırakıldığında sıkın olmaya hazır düğümlü kelepçe altında, ven etrafında başka geçirin. </li><li> Kelepçe ve rostral dikilen arasındaki damar (venotomi) duvarını açın. Ven lümeninde 14 G kateter tanıtılması ve kalbin doğru itin. </li><li> Bu kelepçe karşı karşıya gelince, ikincisi bırakın ve daha fazla kateter itin. Sıkıca iç kateter ile damara düğüm sıkarak, ven kateteri sabitleyin. </li><li> Kateter venöz kan küçük bir miktar geri çekilmesi ve daha sonra daha sonra heparinize tuzlu su ile yıkama ile kateterin açıklığı değerlendirmek. Bu c tıkanıklığı önlerpotansiyel bir kan pıhtısı ile atheter. </li><li> Kontrast madde (mikro kabarcıklar) daha enjeksiyon için kateter esnek boruyu bağlayın. Kullanıma hazır olana kadar (mühürlü) kapalı tutun. </li></ol> 3. Spine erişme laminektomi ve Rat Konumlandırma (3D-çerçevede) <ol><li> Düz eğilimli yatay konumda hayvan yerleştirin. Tıraş ve hayvan arkasını (torakal bölge) temizleyin. </li><li> Palpasyon (Şekil 4) son kaburga (sıçan XIII) tanımlayın. Bu kimse XIII torakal vertebra (ThXIII) yerini tahmin etmek için izin verir. </li><li> ThXIII merkezli orta hat üzerinde 4 cm&#39;lik cilt kesisi, emin olun. Cilt insizyonu ve altta yatan bursa açın. Arka kasların künt yanı sıra omurga omurga süreçlerinin ipuçlarını dikkate alın. </li><li> Dikkatle XIII kaburga palpe edilerek ThXIII omurga sürecini lokalize. Not: XIII yiv bu yüzden ThXIII bağlanır ve loca kolay temsil ederThXIII tanımlanması için te anatomik dönüm. Bu adım, ThXII lokalizasyonu spinöz olarak L1 ve L2 (birinci ve ikinci bel vertebralar) Thix sağlar. </li><li> Kas künt kesin ve L2 Thix dan spinöz süreçleri, laminalar ve faset eklemleri açığa iki tarafında kasları ayırın. Enine süreçlerden kasları ayırarak L1 ve L2 lateral yönlerini Açığa. </li><li> Pozisyon (Şekil 5) sabitlemek için 3D-çerçeve üzerinde hayvanın kesici dişleri Hook. Modifiye forseps ile L1 ve L2 vertebralar kelepçe. Hayvan stabilize etmek için, 3D-çerçeveye modifiye forseps bağlayın. </li><li> Yavaşça tüm omurgayı sıkın ve tezgah toraks yükseltmek amacıyla kaudal lomber omurga tutan forseps çekin. Not: Açıklanan düzenleme ile, hayvan nefes mümkün olmalıdır. Ayrıca, göğüs kafesi, omurga ve omurga solunum hareketlerinin rağmenkordon da hareketsiz kalmalıdır. </li><li> Thix gelen ThXII için spinöz prosedürlerinden çıkarın. Yavaşça ThXII sol lamina altında kemik kesici alt bıçak yerleştirin ve sonra lamina (Şekil 6) kesmek için kemik kesici kapatın. </li><li> Doğru lamina için aynı manevrayı tekrarlayın ve art arda arka kemer çıkarın. Dört seviyesi laminektomi elde etmek için Thix üzere omurganın ThXI önceki adımları tekrarlayın. Her omur hem faset eklemleri kaldırın. NOT: prosedür boyunca, yerel kanamadan operasyon alanını temizleyin. Bunun için, ılık tuzlu su ile pamuk bezlerden ve sulama kullanın. Hemostaz sistematik dakika içinde gerçekleşir. </li></ol> 4. CEU Probe Konumlandırma <ol><li> Ultrason jeli ile duramateri örtün. Bu prob ve omurilik (Şekil 7) arasındaki ultrason dalgalarının etkili iletimi sağlar. </li><li> Ultrason probu zekâ stabilizeDaha sonra, bir mafsallı kol ile 3D-çerçeveye bağlanabilir hektar kelepçesi. El ile prob yerleştirin. Sonda eğik bir boyuna sagital dilim elde etmek odaklı olduğundan emin olun. Doğru bir konumda, omurilik görüntü dikey ise ve omurilik merkezi kanal omurilik tam segmenti boyunca görülebilir. NOT: Konumlandırma ultrason makinesinin ekranda gerçek zamanlı B-mod görüntü ile yönlendirilmelidir. ultrason probunun odak mesafesi omuriliğin merkezi kanal ile aynı hizada olmalıdır. Şu anda, omurilik arka yüzleri sonuçta çarpma konumlandırılması için sağlayacak erişilebilir. </li><li> Ne zaman optimal pozisyonu stabilize etmek için eklemli kol kilitleyin. </li></ol> Kontrast Agent 5. Hazırlık - mikro-Sulandırma <ol><li> Ticari sulandırma kiti içeriğini kullanarak ve tig onu sıkarak piston kolu bağlamakhtly şırınga (saat yönünde) içine. Transfer sistemi blister açın ve şırınga ucu kapağı çıkarın. Transfer sistemi kapağını açın ve transfer sistemi şırınga bağlayın (sıkıca bağlayın). </li><li> Flakon koruyucu diski çıkarın. Şeffaf kovan içine flakon kaydırın </li><li> transfer sistemi ve sıkıca bastırın yerine flakon kilitlemek için. </li><li> Dalgıç çubuk üzerinde iterek şişenin içine şırınga içeriğini boşaltın. Beyaz renkteki bir sütümsü homojen bir sıvı elde etmek için bir küçük şişe içinde, tüm içerikleri karıştırmak için 20 saniye boyunca kuvvetli bir şekilde çalkalanır. </li><li> Sistemi ters çevirin ve dikkatlice şırınga içine kontrast madde çıkarın. Transfer sisteminden şırınga sökün. (Belirtildiği gibi), sulandırıldıktan sonra elde edilen dispersiyon, 1 ml mikro-kabarcıkların 8 ul kükürt heksafluorür içerir. 100 ml&#39;lik enjektöre kabarcıkların süspansiyon çizin. Elektrikli pompa içine 100 ml şırınga yerleştirin. Kapağı kapatın. </li><li> Yeniden sürekli ajitasyon başlatOluşturduğu mikro-kabarcıklar. Mikro-kabarcık süspansiyonu tutar şırınga, yavaş dönmesi ile elde edildi sabit bir ajitasyon. Esnek tüp yoluyla boyun kateter pompası bağlayın. &quot;Harmonic Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Not: mikro-kabarcıklar özellikle algılanabilir ve görsel edilebileceği moduna ikinci uygun olmasıdır. Bu mod B-mod aksine mikrokabarcıkları yok etmez, düşük mekanik endeksi vardır. </li><li> Kontrast maddenin bir birinci doz (400 | il) infüzyonu ile kateter temizleyin. Bu ilk infüzyon sırasında mikro kabarcıklar ultrason ekranında görünmüyor olmadığını kontrol edin. Bu (sıçan kan dolaşımına şırınga) Bütün devre sağlam ve açık olduğunu doğrular. </li><li> Omurilik parankimi ve kan dolaşımında kalan birkaç kabarcıkların yıkımı görselleştirmek için &quot;B-modu&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. &quot;B-Mode&quot; yüksek frekans tranarıza onları sağlayan mikro kabarcık için Smits yüksek enerji. </li><li> Hayvan yaklaşık 30 dakika boyunca hareketsiz yatıyordu edelim. Bu dönem hemodinamik parametrelerin stabilizasyonu için izin verir. </li></ol> Bozulmamış Omurilik içinde SCBF 6. Değerlendirilmesi <ol><li> &quot;Harmonic Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Kontrast madde (400 ul), ve (2) kronometre eş zamanlı olarak (1) infüzyon başlatın. NOT: infüzyon sırasında, kan mikro-kabarcıkların konsantrasyonu omurilik (Şekil 8) kontrast dusunme sağlayan artmalıdır. Mikro kabarcıklar hızla tahrip olduğundan, mikrokabarcıkların kan konsantrasyonu enjeksiyonu omurilik kontrast görselleştirme ilerici bir azalma üretir tamamlandığında azalan başlar. </li><li> 1 dakika, select (basın) ultrason makinesinde &quot;Clip Store&quot; butonuna sonra. Bu r 1 dakika tasarruf sağlayacak biraw ultrason verileri ve kayıt görüntüleme, video (daha önce ultrason ekranında görüntülenen). </li><li> &quot;B-Mode&quot; ultrason makinesi olarak ayarlayın. Bu kalan mikrokabarcıkları ortadan kaldıracaktır. </li></ol> 7. Deneysel SCI <ol><li> ThX ve ThXI arasındaki kavşakta, çarpma ucu (spinal kord orta hatta üzerine) dura mater ile temas, böylece kilo damla çarpma cihazı yerleştirmek 3D çerçeveye bağlı mikromanipülatör kullanarak (Şekil 9) . NOT: Bu seviye ultrason aleti ile görülen omurilik segmentin orta uygun olmalıdır. vurucu ve çarpma gövde çapı 8 mm&#39;dir. yaralanma üretecektir çarpma ucu, çapı 3 mm dir. </li><li> 10 cm yüksekliğindeki pozisyonda çarpma cihazının forvet yerleştirin. Impaksiyon cihazın forvet bırakarak deneysel omurilik neden olur. forvet düşer ve bültenleri incie çarpma, omurilik yaralanmasına. ölçüye impaksiyon bir 10 g ağırlığına bir darbe eşdeğeri 10 cm yükseklikten düşürülen sunar. </li></ol> SCBF 5 dk Sonrası SCI 8. Değerlendirilmesi <ol><li> Bölüm 6 (SCBF Değerlendirilmesi) &#39;de açıklanan adımları tekrarlayın. microbubbles (Şekil 10) koyu kalır hasarlı mikrovasküler ve yaralanma merkez üssü geçmesi mümkün olmayacaktır. </li></ol> 9. Hayvan Kurban <ol><li> Pentobarbital intra-peritoneal öldürücü enjeksiyon (100 mg) ile bir hayvan ile öldürülür. </li></ol> Çevrimdışı Analizi SCBF 10. Kantitasyonu <ol><li> (Ultrason makinede) ölçümü için kullanılan Ultra uzatın Yazılımı başlatın. &quot;Dosyayı&quot; seçin ve ardından önceden kaydedilmiş ham veriyi seçin ve ilişkili dosyaları açın. (Seçerek) &quot;Chi Q&quot; tuşuna basarak &quot;miktar modu&quot; etkinleştirin. Select &quot;Set ROI&quot; (düğme) ve dairesel bir şekil seçin. </li><li> &quot;Yatırım getirisi Beraberlik&quot; ı seçin (düğme) ve omurilik (Şekil 11) faiz yedi bitişik dairesel bölgeleri (ROI) çizin. &quot;Montaj&quot; menüsünü açın ve işlev &quot;Eğri değerini&quot; seçeneğini seçin. Her bir ROI içindeki mikro kabarcık konsantrasyonu değişikliklerine karşılık, birkaç eğrileri görüntüleyen yazılım gözlemleyin. NOT: Her eğri bir &quot;perfüzyon-deperfusion&quot; profile sahiptir. eğrinin ilk aşaması düz ve kabarcıkların gelmeden önce döneme tekabül eder. İkinci aşamada, mikro-kabarcıkların konsantrasyonu hızlı infüzyon sonucu olarak artmaktadır. Bunlar kan disintegratse infüzyon tamamlandıktan sonra başlar, üçüncü aşamada, mikro-kabarcıkların konsantrasyonu giderek azalır. </li><li> C ikinci fazın başlangıcında ilk dikey çizgi yerleştirinurve ve &quot;SET&quot; i seçin. Bu analiz başlamak için yazılım bildirir. </li><li> &quot;SET&quot; seçeneğini bir kez daha kaydının sonunda ikinci dikey çizgi koyun ve. Bu analiz durdurmak için bir yazılım bildirir. </li><li> &quot;Cv&quot; menüsünden bakmak ve analiz &quot;Eğri Altındaki Alan&quot; karşılık &quot;EAA&quot; değeri, kayıt. Bu değer, karşılık gelen ROI içinde SCBF orantılıdır. </li></ol>

<ol>
	<li>Cadotte, D. W., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+cord+injury:+a+systematic+review+of+current+treatment+options.">Spinal cord injury: a systematic review of current treatment options.</a> Clin Orthop Relat Res. 469 (3), 732-741 (2011).</li><li>Beattie, M. S., Farooqui, A. A., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+current+evidence+for+apoptosis+after+spinal+cord+injury.">Review of current evidence for apoptosis after spinal cord injury.</a> J Neurotrauma. 17 (10), 915-925 (2000).</li><li>MacDonald, J. W., Sadowsky, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal-cord+injury.">Spinal-cord injury.</a> Lancet. 359 (9304), 417-425 (2002).</li><li>Mautes, A. E., Weinzierl, M. R., Donovan, F., Noble, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+events+after+spinal+cord+injury:+contribution+to+secondary+pathogenesis.">Vascular events after spinal cord injury: contribution to secondary pathogenesis.</a> Phys Ther. 80 (7), 673-687 (2000).</li><li>Martirosyan, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+supply+and+vascular+reactivity+of+the+spinal+cord+under+normal+and+pathological+conditions.">Blood supply and vascular reactivity of the spinal cord under normal and pathological conditions.</a> J Neurosurg Spine. 15 (3), 238-251 (2011).</li><li>Blight, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+morphology+of+chronic+spinal+cord+injury+in+the+cat:+analysis+of+myelinated+axons+by+line-sampling.">Cellular morphology of chronic spinal cord injury in the cat: analysis of myelinated axons by line-sampling.</a> Neuroscience. 10 (2), 521-543 (1983).</li><li>Bassingthwaighte, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Validity+of+microsphere+depositions+for+regional+myocardial+flows.">Validity of microsphere depositions for regional myocardial flows.</a> Am J Physiol. 253 (1 Pt 2), H184-H193 (1987).</li><li>Drescher, W. R., Weigert, K. P., Bunger, M. H., Hansen, E. S., Bunger, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+blood+flow+in+24-hour+megadose+glucocorticoid+treatment+in+awake+pigs.">Spinal blood flow in 24-hour megadose glucocorticoid treatment in awake pigs.</a> J Neurosurg. 99 (3 Suppl), 286-290 (2003).</li><li>Golanov, E. V., Reis, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+oxygen-sensitive+neurons+of+the+rostral+ventrolateral+medulla+to+hypoxic+cerebral+vasodilatation+in+the+rat.">Contribution of oxygen-sensitive neurons of the rostral ventrolateral medulla to hypoxic cerebral vasodilatation in the rat.</a> J Physiol. 495 (Pt 1), 201-216 (1996).</li><li>Ueda, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+on+spinal+cord+blood+flow+and+function+by+interruption+of+bilateral+segmental+arteries+at+up+to+three+levels:+experimental+study+in+dogs).">Influence on spinal cord blood flow and function by interruption of bilateral segmental arteries at up to three levels: experimental study in dogs).</a> Spine (Phila Pa 1976). 30 (20), 2239-2243 (2005).</li><li>Carlson, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sustained+spinal+cord+compression:+part+II:+effect+of+methylprednisolone+on+regional+blood+flow+and+recovery+of+somatosensory+evoked+potentials).">Sustained spinal cord compression: part II: effect of methylprednisolone on regional blood flow and recovery of somatosensory evoked potentials).</a> J Bone Joint Surg Am. 85-A (1), 95-101 (2003).</li><li>Hamamoto, Y., Ogata, T., Morino, T., Hino, M., Yamamoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+direct+measurement+of+spinal+cord+blood+flow+at+the+site+of+compression:+relationship+between+blood+flow+recovery+and+motor+deficiency+in+spinal+cord+injury.">Real-time direct measurement of spinal cord blood flow at the site of compression: relationship between blood flow recovery and motor deficiency in spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 32 (18), 1955-1962 (2007).</li><li>Horn, E. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+intrathecal+hypotension+on+tissue+perfusion+and+pathophysiological+outcome+after+acute+spinal+cord+injury).">The effects of intrathecal hypotension on tissue perfusion and pathophysiological outcome after acute spinal cord injury).</a> Neurosurg Focus. 25 (5), E12 (2008).</li><li>Phillips, J. P., George, K. J., Kyriacou, P. A., Langford, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+photoplethysmographic+changes+using+a+static+compression+model+of+spinal+cord+injury.">Investigation of photoplethysmographic changes using a static compression model of spinal cord injury.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2009, 1493-1496 (2009).</li><li>Phillips, J. P., George, K. J., Kyriacou, P. A., Langford, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Investigation+of+photoplethysmographic+changes+using+a+static+compression+model+of+spinal+cord+injury.">Investigation of photoplethysmographic changes using a static compression model of spinal cord injury.</a> Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2009, 1493-1496 (2009).</li><li>Ishikawa, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet+adhesion+and+arteriolar+dilation+in+the+photothrombosis:+observation+with+the+rat+closed+cranial+and+spinal+windows.">Platelet adhesion and arteriolar dilation in the photothrombosis: observation with the rat closed cranial and spinal windows.</a> J Neurol Sci. 194 (1), 59-69 (2002).</li><li>Soubeyrand, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+and+spatial+quantification+using+contrast-enhanced+ultrasonography+of+spinal+cord+perfusion+during+experimental+spinal+cord+injury.">Real-time and spatial quantification using contrast-enhanced ultrasonography of spinal cord perfusion during experimental spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 37 (22), E1376-E1382 (1976).</li><li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+spinal+cord+perfusion+by+using+contrast-enhanced+ultrasound+in+a+porcine+model+with+acute+spinal+cord+contusion).">Quantitative assessment of spinal cord perfusion by using contrast-enhanced ultrasound in a porcine model with acute spinal cord contusion).</a> Spinal Cord. 51 (3), 196-201 (2012).</li><li>Postema, M., Gilja, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+and+targeted+ultrasound.">Contrast-enhanced and targeted ultrasound.</a> World J Gastroenterol. 17 (1), 28-41 (2011).</li><li>Soubeyrand, M., Badner, A., Vawda, R., Chung, Y. S., Fehlings, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Very+High+Resolution+Ultrasound+Imaging+for+Real-Time+Quantitative+Visualisation+of+Vascular+Disruption+After+Spinal+Cord+Injury.">Very High Resolution Ultrasound Imaging for Real-Time Quantitative Visualisation of Vascular Disruption After Spinal Cord Injury.</a> J Neurotrauma. , (2014).</li><li>Akhtar, A. Z., Pippin, J. J., Sandusky, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+spinal+cord+injury:+a+review.">Animal models in spinal cord injury: a review.</a> Rev Neurosci. 19 (1), 47-60 (2008).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial conflict of interest. The ultrasound machine was graciously lent by the Toshiba France company. The Vueject pump was graciously lent by the Bracco France company.

Biz sıçan SKY kontüzyon modelinde CEU nasıl kullanılacağını tarif olmasına rağmen, bu protokol, diğer deneysel hedefleri veya SCI modellerini uyacak şekilde modifiye edilebilir. Biz ancak zaman noktalarının sayısı ve SCBF ölçümleri arasındaki gecikme, diğer çalışmaların ihtiyaçlarını karşılamak için adapte edilebilir, (yaralanma ve 15 dakika sonrası SKY öncesi) sadece iki kez noktalarında SCBF ölçmek için seçtiniz. Örneğin, önceki çalışmaları 17, ilk saat sonrası ...

Travmatik spinal kord yaralanması (SKY) duyusal motorda ciddi bozulma ve özerk fonksiyonlar giden bir yıkıcı bir durumdur. Bugüne kadar, tedavi hastalardaki etkinliğini göstermiştir. Böyle nedenle, potansiyel tedavilerin değerlendirmesini artıracak ve daha fazla yaralanma pathiophysiology 1 aydınlatmak yeni teknikler belirlemek önemlidir. SCI olarak birincil ve ikincil yaralanma adlandırılan iki ardışık aşamadan oluşur. Birincil yaralanma ilk mekanik hasara karşılık gelir. Ayrıca ilk lezyon, doku hasarı ve dolayısıyla nörolojik defisit 2,3 ilerici genişlemesine katkıda ikincil yaralanma grupları (örneğin inflamasyon, oksidatif stres ve hipoksi gibi) çeşitli biyolojik olayların bir çağlayan Oysa. SCI akut aşamasında, nöro-koruyucu tedaviler ikincil yaralanma patoloji ve sh azaltılması hedefleniyorbuna göre nörolojik sonuçlarını iyileştirmek ould. Birçok ikincil yaralanma olayları arasında, iskemi çok önemli bir rol oynar 4,5&#39;ten. SCI merkez üssü düzeyinde, hasarlı parankimal mikrodamarlar etkili omurilik kan akımını (SCBF) engel. Ayrıca, SCBF de önemli ölçüde hasar merkezinden, özellikle &quot;iskemik penumbra bölgesi&quot; olarak bilinen bir alanı çevreleyen bölgede azalır. SCBF hızlı bir şekilde bu bölgeler içinde geri alınamaz ise, iskemi ek parankimal nekroz ve daha fazla sinir doku hasarına neden olabilir. Hatta en ufak bir doku koruma fonksiyonu önemli etkileri olabilir gibi, iskemi sonrası SCI azaltabilir ilaçlar ve tedaviler geliştirmek için önemli ilgi alanıdır. Bu olguyu vurgulamak için, önceki çalışma miyelinli akson sadece% 10 olduğunu göstermiştir korunması SKY sonrası 6 kedilerde yürüyüş izin için yeterli oldu. Çeşitli teknikler SCBF değerlendirmek için tarif edilmiş olmasına rağmeny tüm önemli sınırlamaları vardır. Örneğin, radyoaktif mikro-7,8 ve C14-iodopyrine otoradyografi 9&#39;a göre bir kullanım daha sonra hayvan kurban gerektirir ve daha sonraki zaman noktalarında tekrarlanmaz. Hidrojen boşluk tekniği 10 daha omuriliğe zarar verebilir intraspinal elektrotlar, ekleme bağlıdır. Lazer Doppler görüntüleme, 14,15 photoplethysmography ve in vivo ışık mikroskobu 16 ölçüm 11-13 çok sınırlı derinlik / alan varken. Ekibimiz daha önce kontrastlı ultrason (CEU) görüntüleme gerçek zamanlı değerlendirmek için kullanılabileceğini gösterdi ve in vivo sıçan omurilik parankimi 17 SCBF değişir. Benzer bir teknik, Huang ve arkadaşları tarafından uygulanmış olduğunu not etmek önemlidir. SCI 18 bir domuz modelinde. CEU gri tonlama morfolojik im ilişkilendirmek sağlar ultrason görüntüleme belirli bir mod uygularkan akımı 19 mekansal dağılımı ile (konvansiyonel B-mode ile elde edilir) yaşları. SCBF görüntüleme ve miktar eko-kontrast maddelerin intravasküler enjeksiyonu dayanır. kontrast madde (ortalama çapa, yaklaşık 2.5 mm ve çapı en az 6 um olan% 90) kükürt heksafluorür mikro-kabarcıkları oluşur fosfolipidler ile stabilize. mikro kabarcıklar böylece kan ekojenisitesini ve kan akışına göre dokuların artan kontrast artırıcı prob yaydığı ultrason ışınını yansıtacak. Bu yansıyan sinyalin yoğunluğuna göre ilgi konusu bir bölgedeki kan akışını değerlendirmek mümkündür. mikro-kabarcıklar, aynı zamanda, güvenli ve klinik olarak, insanlarda uygulanmıştır. kükürt heksafluorür hızlı bir şekilde temizlenir (terminal yarılanma ömrü anlamına 12 dk) ve kullanılan kükürt heksaflorür fazla% 80, enjeksiyondan sonra 2 dakika içinde nefes verme hava geri kazanılır. Bu protokol CEU im kullanmak için basit bir yol sağlarsıçan SCBF değişiklikleri değerlendirmek için yaşlanma.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1154">
	<tbody>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:229px;">Company</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td style="width:299px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">External Fixator Hoffman 3</td>
			<td style="width:229px;">Stryker, Kalamazoo, USA</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Modular system used to build the custom made 3D frame and the jointed arm holding the ultrasound probe</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Toshiba Applio</td>
			<td style="width:229px;">Toshiba, Tokyo, Japan</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Ultrasound machine</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Sonovue</td>
			<td style="width:229px;">Bracco, Milan, Italy</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Contrast agent : microbubbles</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Vueject pump</td>
			<td style="width:229px;">Bracco, Milan, Italy</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Electric pump for infusion of microbubbles bolus</td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:397px;">Aquasonic Ultrasound Gel</td>
			<td style="width:229px;">Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Ultrasound gel used to transmit the ultrasound waves</td>
		</tr>
		<tr height="44">
			<td height="44" style="height:44px;width:397px;">Isovet</td>
			<td style="width:229px;">Piramal Healthcare, Mumbai, India</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Isoflurane used for anesthesia</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Ultra Extend</td>
			<td style="width:229px;">Toshiba, Tokyo, Japan</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Software used for quantification of spinal cord blood flow</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:397px;">Mastercraft Five-piece Mini-pliers Set, Product #58-4788-6</td>
			<td style="width:229px;">Canadian Tire, Toronto, Canada</td>
			<td style="width:229px;"></td>
			<td>Set of pliers for Do-it-yourself job</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

contrast enhanced ultrasound imaging for assessment of spinal cord blood flow in experimental spinal cord injury

İndirimli omurilik kan akımı (SCBF) (yani, iskemi) travmatik omurilik yaralanması (SKY) patofizyolojisinde önemli bir rol oynar ve bu doğrultuda nöron koruyucu tedaviler için önemli bir hedeftir. Çeşitli teknikler SCBF değerlendirmek için tarif edilmiş olmasına rağmen, hepsi önemli sınırlamalar vardır. İkincisi aşmak için, gerçek zamanlı kontrastlı ultrason görüntüleme (CEU) kullanımını öneriyoruz. Burada SKY sıçan kontüzyon modelinde bu tekniğin uygulanmasını açıklar. Bir boyun kateterine sahip birinci kontrast ajanı kükürt heksafluorür kapsüllenmiş mikro-kabarcıkların bir sodyum klorür solüsyonu ile tekrar enjeksiyon için implante edilir. omurga daha sonra bir ısmarlama 3D çerçeve ile stabilize edilir ve omurilik dura mater Thix-ThXII bir laminektomi ile maruz kalmaktadır. ultrason prob, (ultrason jel ile kaplanmış), dura mater arka tarafına konumlandırılır. Ters başlangıçtaki SCBF, tek bir damar içi enjeksiyon (400 ul) değerlendirmekst madde sağlam omurilik mikrovasküler içinden geçişini kaydetmek için uygulanır. Bir ağırlık bırak cihaz, daha sonra SCI bir yeniden üretilebilen deneysel kontüzyon modeli oluşturmak için kullanılır. Kontrast madde sonrası SKY SCBF değişiklikleri değerlendirmek için yaralanma sonrası 15 dakika re-enjekte edilir. CEU Gerçek süre ve in vivo SCI, aşağıdaki SCBF değişikliklerin değerlendirilmesi sağlar. Yaralanmamış hayvanda, ultrason görüntüleme bozulmamış omurilik boyunca düzensiz kan akımı gösterdi. SCBF daha uzak sağlam yerlerde muhafaza kalmıştır Ayrıca, 15 dakika sonrası SCI, kritik iskemi üssü seviyesinde oldu. Üssü (rostral ve kaudal her ikisi de) bitişik bölgelerde SCBF önemli ölçüde azaltılmıştır. Bu daha önce açıklanan &quot;iskemik penumbra bölgesi&quot; karşılık gelir. Bu araç iskemi ve SCI sonra ortaya çıkan doku nekrozu sınırlama amaçlı tedavilerin etkilerini değerlendirmek için önemli bir ilgi alanıdır.

Protokolü, yukarıda tarif edilen ile, uzunlamasına bir omurga sagital segmenti boyunca SCBF harita mümkündür. Sağlıklı omurilik olarak parenkima (Şekil 12) içinde SCBF düzensizlikler gibi görünüyor. Bu başka bir hayvandan radiculo-medüller arterlerin değişken dağılımı (RMA) ile izah edilebilir. RMA ön spinal arter (ASA) ulaşmak ve bu nedenle omurilik parankimi kan akımı sağlayan atardamarların segmental anlamına gelir. Buna karşılık, radikül...

Watch this Scientific Journal Video about Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury at JoVE.com

Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

Contrast Enhanced Ultrasound imaging is a reliable in-vivo tool for quantifying spinal cord blood flow in an experimental rat spinal cord injury model. This paper contains a comprehensive protocol for application of this technique in association with a contusion model of thoracic spinal cord injury.

Deneysel Spinal Kord Yaralanmalarında Omurilik Kan Akımının Değerlendirilmesi için geliştirilmiş Ultrason Görüntüleme Kontrast

Reduced spinal cord blood flow (SCBF) (i.e., ischemia) plays a key role in traumatic spinal cord injury (SCI) pathophysiology and is accordingly an ...

contrast-enhanced-ultrasound-imaging-for-assessment-spinal-cord-blood

Research

JoVE Journal

Medicine

13.9K Görüntüleme.  Faculté de Médecine Paris Diderot Paris VII, U942. Contrast Enhanced Ultrasound imaging is a reliable in-vivo tool for quantifying spinal cord blood flow in an experimental rat spinal cord injury model. This paper contains a comprehensive protocol for application of this technique in association with a contusion model of thoracic spinal cord injury.

Video: Contrast Enhanced Ultrasound Imaging for Assessment of Spinal Cord Blood Flow in Experimental Spinal Cord Injury

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Tıp

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment (RMCA) in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination is disrupted by spinal cord injury (SCI), control of respiratory muscles innervated below the injury level is compromised1,2 leading to respiratory muscle dysfunction and pulmonary complications. These conditions are among the leading causes of death in patients with SCI3. Standard pulmonary function tests that assess respiratory motor function include spirometrical and maximum airway pressure outcomes: Forced Vital Capacity (FVC), Forced Expiratory Volume in one second (FEV1), Maximal Inspiratory Pressure (PImax) and Maximal Expiratory Pressure (PEmax)4,5. These values provide indirect measurements of respiratory muscle performance6. In clinical practice and research, a surface electromyography (sEMG) recorded from respiratory muscles can be used to assess respiratory motor function and help to diagnose neuromuscular pathology. However, variability in the sEMG amplitude inhibits efforts to develop objective and direct measures of respiratory motor function6. Based on a multi-muscle sEMG approach to characterize motor control of limb muscles7, known as the voluntary response index (VRI)8, we developed an analytical tool to characterize respiratory motor control directly from sEMG data recorded from multiple respiratory muscles during the voluntary respiratory tasks. We have termed this the Respiratory Motor Control Assessment (RMCA)9. This vector analysis method quantifies the amount and distribution of activity across muscles and presents it in the form of an index that relates the degree to which sEMG output within a test-subject resembles that from a group of healthy (non-injured) controls. The resulting index value has been shown to have high face validity, sensitivity and specificity9-11. We showed previously9 that the RMCA outcomes significantly correlate with levels of SCI and pulmonary function measures. We are presenting here the method to quantitatively compare post-spinal cord injury respiratory multi-muscle activation patterns to those of healthy individuals.

Evaluation of Respiratory Muscle Activation Using Respiratory Motor Control Assessment RMCA in Individuals with Chronic Spinal Cord Injury

The purpose of this publication is to present our original work on a multi-muscle surface electromyographic approach to quantitatively characterize respiratory muscle activation patterns in individuals with chronic spinal cord injury using vector-based analysis.

Kronik Spinal Kord Yaralanması Bireylerde Solunum Motor Kontrol Değerlendirmesi (RMCA) kullanarak Solunum Kas Aktivasyon Değerlendirilmesi

During breathing, activation of respiratory muscles is coordinated by integrated input from the brain, brainstem, and spinal cord. When this coordination ...

Implanting Glass Spinal Cord Windows in Adult Mice with Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in adult rodents is the standard experimental model for studying autonomic demyelinating diseases such as multiple sclerosis. Here we present a low-cost and reproducible glass window implantation protocol that is suitable for intravital microscopy and studying the dynamics of spinal cord cytoarchitecture with subcellular resolution in live adult mice with EAE. Briefly, we surgically expose the vertebrae T12-L2 and construct a chamber around the exposed vertebrae using a combination of cyanoacrylate and dental cement. A laminectomy is performed from T13 to L1, and a thin layer of transparent silicone elastomer is applied to the dorsal surface of the exposed spinal cord. A modified glass cover slip is implanted over the exposed spinal cord taking care that the glass does not directly contact the spinal cord. To reduce the infiltration of inflammatory cells between the window and spinal cord, anti-inflammatory treatment is administered every 2 days (as recommended by ethics committee) for the first 10 days after implantation. EAE is induced only 2-3 weeks after the cessation of anti-inflammatory treatment.
Using this approach we successfully induced EAE in 87% of animals with implanted windows and, using Thy1-CFP-23 mice (blue axons in dorsal spinal cord), quantified axonal loss throughout EAE progression. Taken together, this protocol may be useful for studying the recruitment of various cell populations as well as their interaction dynamics, with subcellular resolution and for extended periods of time. This intravital imaging modality represents a valuable tool for developing therapeutic strategies to treat autoimmune demyelinating diseases such as EAE.

We describe a method for implanting and maintaining glass windows over the exposed spinal cords of adult mice for studying experimental autoimmune encephalomyelitis. These windows provide chronic optical access to the spinal cord for monitoring cell dynamics at the subcellular level in live animals using two-photon microscopy.

Deneysel Otoimmün Encephalomyelitis Erişkin Farelerde Cam Omurilik Windows&#39;u implante

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) in adult rodents is the standard experimental model for studying autonomic demyelinating diseases such as ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

A Radyo-telemetrik Sistemi Omurilik transeksiyonu ve Embriyonik Nöral Hücre Greftler Kök Sıçanlarda Kardiyovasküler Fonksiyonu Monitör

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

Omurilik Sıkıştırma Yaralanma Kalibre Forseps Modeli

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

Bir Yenidoğan Fare Omurilik Sıkıştırma Yaralanması Modeli

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...