This study was supported by a grant from the Dutch Kidney Foundation (KJPB 08.0003). 
Carolien Rothuizen is acknowledged for her contribution to the study. Hoang Pham is acknowledged for his assistance with the pathology work-up.

Tüm deneyler Leiden Üniversitesi Tıp Merkezi hayvan refahı komitesi tarafından kabul edildi. 1. Hayvan Hazırlama ve Anestezi <ol><li> % 3-4 izofluran ile dolu bir sürekli anestezi indüksiyon odasında fare (1-3 aylık) anestezisi. </li><li> boyun ve elektrik ustura kullanılarak sol üst bacağın iç kısmının ventral tarafında Tıraş ve saç kaldırmak için bir parça bant kullanın. </li><li> Her iki göze göz merhem sürün. </li><li> Burun solunum maskesi sabit olduğu ısıtma battaniye hayvan yerleştirin. yapışkan bant kullanılarak burun maskesi baş sabitleşmek. <ol><li> Aşağıdaki akış oksijen zenginleştirilmiş hava kümesi kullanılarak 1.5-2.0% bir konsantrasyonda izofluran teslim: Hava 0,3 L / dk,% 100 oksijen / dk 0.2 L. Anestezi derinliğini değerlendirmek ve gerekirse izofluran konsantrasyonu ayarlamak için ayak parmakları arasında cilt çimdik. </li></ol></li><li> hayvan sabitleşmekBir yatar pozisyonda yaklaşık 37 ° C ayarlanır tüm ekstremitelerde yapışkan bant ile ısıtma battaniye. </li><li> 0.1 mg bir dozajda sodyum klorür (NaCl),% 0.9 içinde çözüldü buprenorfin enjekte / hayvan kanadında steril% 0.9 NaCl, deri altından 0.5 ml ile birlikte kg. </li><li> Hazırlanan alana klorheksidin tentürü% 0.5 uygulayın. </li></ol> 2. Cilt insizyonu <ol><li> cerrah yönelik kafa ile mikroskop altında hayvan yerleştirin. </li><li> Bir mikro makas kullanılarak ventral boyun orta hatta yaklaşık 1.5 cm boyuna kesi yapmak. </li><li> forseps ile tükürük bezleri tut ve kısmen yara dışında olana kadar cranially sağ tükürük bezi yerinden. </li></ol> 3. Kesme ve Damar Hazırlama <ol><li> Belirleyin ve açık açık yayarak onun perivasküler dokudan tamamen sağ eksternal juguler ven dorsomedial dalı teşrih sadeceLongside ve damar yönünde. </li><li> disseke ven etrafında bir döngü (10.0 dikiş) yerleştirin ve kilitlemeden bir düğüm uygulayın. </li></ol> 4. Sternocleidomastoid Muscle Çıkarma <ol><li> forseps kullanarak, açık açık sınırındaki yayarak çevresinden sağ sternokleidomastoid kas teşrih. İzole kas altında açık forseps bir çift koyun ve bir 6.0 sütür ile proksimal ve distal Arter. Daha sonra, bir cauterizer kullanarak kas tüketim. </li></ol> 5. Kesme ve karotis arter hazırlanması <ol><li> Belirlemek ve forseps kullanarak sağ karotis arter teşrih. arterin manipülasyon yardımcı olmak için arter etrafında bir 6.0 dikiş ipliğinin yerleştirin. </li><li> olarak distal ve proksimal mümkün olduğunca vasküler kelepçeler uygulayın. </li><li> özel bir mikro makas kullanılarak yaklaşık 1 mm arter ortasında uzunlamasına bir kesi olun. </li><li> durulamaBir heparin solüsyonu ile arter [100 IU / ml] damar kan temizlenene kadar. </li><li> Tedbir ve genişliğe damar kıskacı [1.1 mm] maç için gerekirse insizyon uzunluğunu ayarlayın. </li></ol> Ven 6. ligasyonu <ol><li> proksimale önceden hazırlanan damarın bir damar kelepçe uygulayın ve ven etrafında bir dikiş ipliği yerleştirin. </li><li> Daha önce yerleştirildi 10.0 sütür kullanarak mümkün olduğunca distale damar dikiş ipliğinin üzerine yerleştirilir ve bağlamak bir Hemostat kullanarak damara nazik kuyruk çekiş uygulayın. </li><li> ligasyon sadece proksimal bir makas kullanarak damarı kesti. </li><li> vasküler forseps kullanarak, hafifçe ven lümeni açın ve bir heparin solüsyonu [100 IU / ml] ile durulayın. </li></ol> Anastomoz Bölüm 1 7. oluşturulması <ol><li> Altı o &#39;bir dikişle ardından 00:00 pozisyonunda 2 kare knot kullanarak bir kesintiye sütür (10.0) ile artere ven bağlayınSaat konumu. kendi ekseni etrafında dönmesine izin vermeden artere ven bağlamak için emin olun. Cerrahi pozlama geliştirmek amacıyla hayvan döndürün. </li><li> ven etrafında bir dikiş ipliğinin yerleştirin ve bir Hemostat kullanarak nazik yanal çekiş uygulayın. </li><li> Aynı kesintiye sütür kullanarak, anastomoz görünür ventral tarafında yaklaşık 3-4 ek sütür koyarak anastomoz tamamlayın. </li></ol> 8. Heparin İdaresi <ol><li> Isıtma Battaniye 180 ° döndürün ve sol üst bacak üzerinde mikroskop odaklanın. </li><li> Üst bacağın iç kısmında uzunlamasına çalıştırır ve deri yoluyla görülebilir bir damar yapısı bakarak femoral ven / arter / sinir demeti tanımlayın. doğrudan uzunlamasına bir şekilde femoral ven üzerinde yaklaşık 1 cm mikro makas ile bir kesi yapmak. </li><li> Dikkatlice femoral ven perivasküler doku incelemek ve bir doz o heparin enjektefemoral ven 0.2 IU / g vücut ağırlığı f. </li></ol> Anastomoz Bölüm 2 9. oluşturulması <ol><li> boyun bölgesinde dönün ve ven çevresinde yerleştirildi dikiş ipliği çıkarın. </li><li> Daha sonra ven üzerinde ve tekrar karotid arter altında, karotis arter altında geçen bir dikiş ipliğinin (6.0) yerleştirin. (Şekil 1 L) </li><li> venöz damar kelepçesini çıkarın. </li><li> Sonra, aynı anda hem vasküler kelepçeler bükerek yarısı tamamlanmış arteriyovenöz fistül saat yönünde karotid arter ekseni boyunca 180 ° çevirerek ve dikiş ipliğinin uçlarına medial traksiyon uygulanır. </li><li> Adım 7.2&#39;de tarif edildiği gibi aynı şekilde anastomoz tamamlayın. </li></ol> 10. Vasküler Kelepçe Kaldırma <ol><li> dikiş ipliği çıkarın ve vasküler 180 ° saat yönünün tersinde kelepçeleri döndürün. </li><li> proksimal damar kelepçe ile takip distal vasküler kelepçesini sökün. </li> &lt;li&gt; hafifçe damar forseps ile venöz çıkış yolunu tıkayarak anastomoz açıklığı değerlendirin. Patent anastomoz durumunda, ön-tıkayıcı venöz bölüm ritmik bir tarzda genişler. Orijinal anatomik pozisyonu kullanarak forseps doğru tükürük bezi değiştirin. </li></ol> 11. Cilt Kapatma ve Ameliyat Sonrası Bakım <ol><li> kesintisiz bir dikiş (6.0) ile üst bacağın cilt kapatın. </li><li> kesintisiz bir dikiş (6.0) ile boyun cilt kapatın. </li><li> ısıtıcı battaniye hayvan çıkarın ve 0.5 ml NaCl% 0.9 deri altına enjekte edilir. </li><li> bir ısıtma lambası ile ısıtılan karanlık kafeste hayvan koyun ve tamamen kurtarmak edelim. bir hayvan tamamen kurtarmak değil, bu nedeniyle cerrahi alanda kanama bir hemodinamik şok muzdarip değil emin olun. Böyle bir şişmiş boyun ve kan sızıntısı olarak işaretler için bak. </li><li> bupr ilk enjeksiyonundan sonra yaklaşık 6 saat sonraenorphine, ek 72 saat için yeterli analjezi sağlamak için, üretici tarafından tavsiye edilen bir dozda buprenorfin subkutan bir sürekli salimli formülasyonun bir doz enjekte edilir. </li></ol> 12. Doku Hasat <ol><li> karın içinden verilen bir midazolam (5 mg / kg) ihtiva eden anestezi karışımının, medetomidin (0.5 mg / kg) ve fentanil (0.05 mg / kg) ile hayvan anestezisi. </li><li> olmayan bir ısıtılmış silikon mat içine pençeleri ve yanakları ile iğneler sokarak bir yatar pozisyonda hayvan sabitleşmek. </li><li> Mikro makas ile boyun yara üzerinde yaklaşık 1.5-2.0 cm bir kesi yapmak. </li><li> AVF ayır ve kolay tanımlanması için proximal- distal arter ve venöz çıkış yolunda etrafında dikiş konuları (6.0) yerleştirin. </li><li> protokol bölümünde 10.3 açıklandığı gibi AVF açıklığını değerlendirmek. </li><li> medial laparotomi u yaparak periton boşluğuna açınMikro makas şarkı. <ol><li> midklavikuler doğrultusunda kaudal başlayan bir makas kullanarak sağ ve sol ventral göğüs kafesinin içinden kesin. Bir mikro makas kullanılarak, forseps kullanarak cranially bu bölümü ventral göğüs kafesinin orta kısmına bağlanır ve daha sonra yerinden olan diyaframı transect. </li><li> alt kaval ven bulun ve bir mikro makas ile transect. </li></ol></li><li> sol ventrikül bir iğne 23 iğne takın ve damariçi sıvı neredeyse netleşene kadar yaklaşık 100 mmHg basınçta PBS ile serpmek. </li><li> iğne çıkarmadan hemen yaklaşık 100 mm Hg arasında bir basınçta 10 dakika için% 4 formalin ile serpmek. </li><li> Mikro makas ile arterler ve damar hem de bölücü ile AVF tüketim ve% 4 formalin çözeltisi O / N daldırın. </li></ol> 13. Doku Gömme ve Kesit <ol><li> Üreticinin Protoco göre parafin için doku Süreçl. protokol aşağıdaki oluşuyordu uygulanan: <ol><li> Oda sıcaklığında 1 saat için 70 etanol,% batırın. 2x tekrarlayın. </li><li> Oda sıcaklığında 1 saat için% 96 etanol içinde bırakın. 2x tekrarlayın. </li><li> Oda sıcaklığında 1 saat boyunca etanol% 99,5 oranında bırakın. kez tekrarlayın. </li><li> Oda sıcaklığında 1.5 saat etanol% 99,5 oranında bırakın. </li><li> Oda sıcaklığında 1 saat için ksilen içinde% 100 bırakın. kez tekrarlayın. </li><li> 62 ° C &#39;de 1 saat boyunca Parafin batırın. 2x tekrarlayın. </li></ol></li><li> venöz çıkış yolu gömme kaset dik yönlendirilir, böylece parafin içine AVF gömün. </li><li> Bir mikrotom kullanılarak, her bir 5 mikron kalınlığında 30 bölümden oluşan 12 seri bölümler oluşturmak. Sonra her seri bölümün, anastomoz yakın alanda başlayarak düzenli bir şekilde on iki kadar pozisyon biri başlayarak tek montaj camına bir bölümüne yerleştirin. </li></ol>

<ol>
	<li>Rotmans, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+for+Studying+Pathophysiology+of+Hemodialysis+Access.">Animal Models for Studying Pathophysiology of Hemodialysis Access.</a> The Open Urology &amp; Nephrology Journal. 7, 14-21 (2014).</li><li>Kwei, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+adaptive+responses+of+the+vascular+wall+during+venous+arterialization+in+mice.">Early adaptive responses of the vascular wall during venous arterialization in mice.</a> Am.J.Pathol. 164 (1), 81-89 (2004).</li><li>Castier, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+neointima+lesions+associated+with+arteriovenous+fistulas+in+a+mouse+model.">Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model.</a> Kidney Int. 70 (2), 315-320 (2006).</li><li>Krishnamoorthy, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+wall+shear+stress+profiles+influence+the+magnitude+and+pattern+of+stenosis+in+a+pig+AV+fistula.">Hemodynamic wall shear stress profiles influence the magnitude and pattern of stenosis in a pig AV fistula.</a> Kidney Int. 74 (11), 1410-1419 (2008).</li><li>Ene-Iordache, B., Cattaneo, L., Dubini, G., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anastomosis+angle+on+the+localization+of+disturbed+flow+in+'side-to-end'+fistulae+for+haemodialysis+access.">Effect of anastomosis angle on the localization of disturbed flow in 'side-to-end' fistulae for haemodialysis access.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 28 (4), 997-1005 (2013).</li><li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+remodeling+and+intimal+hyperplasia+in+a+novel+murine+model+of+arteriovenous+fistula+failure.">Vascular remodeling and intimal hyperplasia in a novel murine model of arteriovenous fistula failure.</a> J.Vasc.Surg. 59 (1), 192-201 (2014).</li><li>Rekhter, M., Nicholls, S., Ferguson, M., Gordon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+proliferation+in+human+arteriovenous+fistulas+used+for+hemodialysis.">Cell proliferation in human arteriovenous fistulas used for hemodialysis.</a> Arterioscler. Thromb. 13 (4), 609-617 (1993).</li><li>Falk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+and+salvage+of+arteriovenous+fistulas.">Maintenance and salvage of arteriovenous fistulas.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 17 (5), 807-813 (2006).</li><li>Tordoir, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+evaluation+of+failure+modes+in+autogenous+radiocephalic+wrist+access+for+haemodialysis.">Prospective evaluation of failure modes in autogenous radiocephalic wrist access for haemodialysis.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 18 (2), 378-383 (2003).</li><li>Dixon, B. S., Novak, L., Fangman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodialysis+vascular+access+survival:+upper-arm+native+arteriovenous+fistula.">Hemodialysis vascular access survival: upper-arm native arteriovenous fistula.</a> Am. J. Kidney Dis. 39 (1), 92-101 (2002).</li><li>Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+arteriovenous+fistula+model.">The mouse arteriovenous fistula model.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 20 (7), 946-950 (2009).</li><li>Kang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+and+systemic+hemodynamic+responses+following+the+creation+of+a+murine+arteriovenous+fistula.">Regional and systemic hemodynamic responses following the creation of a murine arteriovenous fistula.</a> Am. J. Physiol Renal Physiol. 301 (4), F845-F851 (2011).</li><li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+is+a+key+regulator+of+outward+remodeling+in+arteriovenous+fistulas.">Elastin is a key regulator of outward remodeling in arteriovenous fistulas.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 49 (4), 480-486 (2015).</li><li>Kennedy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+renal+failure+cause+an+atherosclerotic+milieu+in+patients+with+end-stage+renal+disease.">Does renal failure cause an atherosclerotic milieu in patients with end-stage renal disease.</a> Am. J. Med. 110 (3), 198-204 (2001).</li><li>Cheung, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerotic+cardiovascular+disease+risks+in+chronic+hemodialysis+patients.">Atherosclerotic cardiovascular disease risks in chronic hemodialysis patients.</a> Kidney Int. 58 (1), 353-362 (2000).</li><li>Lee, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+venous+neointimal+hyperplasia+prior+to+dialysis+access+surgery.">Severe venous neointimal hyperplasia prior to dialysis access surgery.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 26 (7), 2264-2270 (2011).</li><li>Kokubo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CKD+accelerates+development+of+neointimal+hyperplasia+in+arteriovenous+fistulas.">CKD accelerates development of neointimal hyperplasia in arteriovenous fistulas.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 20 (6), 1236-1245 (2009).</li></ol>

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

AVF hemodiyaliz tedavisi zayıf noktası olarak kabul edilir. Ne yazık ki, AVF hala başarısızlık 8-10 sayısının yüksek muzdarip. altında yatan mekanizmalar hakkında geniş araştırmalara rağmen kesin patofizyolojisi bilinmemektedir. AVF yetmezliği için çok sayıda fare modelleri, literatürde 2,3,11,12 tarif edilmiştir. Ancak, bu modellerin hiçbiri en klinik durumlarda kullanılır arteriyel yan anastomoz yapılandırmasına venöz ucu içermektedir. Elde edilen hemodinamik profil...

Fonksiyonel damar erişim kanalı hayatta kalmak için kronik hemodiyaliz bağlıdır böbrek yetmezliği olan hastalar için hayati önem taşımaktadır. Bir arteriovenöz fistül (AVF) inşaatı halen damar erişim için tercih edilen bir seçimdir. Ancak, AVF ilgili komplikasyonlar, kronik hemodiyaliz hastaları için önemli bir morbidite nedeni oluşturmaktadır. geniş bilimsel çabalara rağmen, romanın hiçbiri AVF dayanıklılık ölçüde geliştirme ile sonuçlanırsa vermedi AVF erişimi ile ilgili komplikasyonları azaltmak için yaklaşımlar. Bu hayal kırıklığı ilerleme parçası hemodiyaliz erişim başarısızlık, altta yatan patofizyoloji eksik anlayış ile ilgilidir. yakından insan patoloji taklit AV erişim yetersizliği, hayvan modellerinde patofizyolojisi çözülmeye büyük önem taşımaktadır. Bu açıdan, sadece hayvan türleri değil, aynı zamanda anastomoz gerekli önleyici coagulatory tedavisi ve süresi dalgalanma sonra takipRy hesabı 1 alınmalıdır. Büyük hayvanlar yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi hedeflenmiştir müdahale çalışmaları için en uygun olmakla birlikte, fare modelleri nedeniyle transgenik farelerin durumu AV erişim hatası altında yatan moleküler mekanizmalar daha fazla fikir edinmek için büyük bir potansiyele sahiptir. Buna ek olarak, bir fare sayıda büyük hayvan kullanımı ile karşılaştırıldığında daha düşük maliyetle, bu amaç için kullanılabilir. AVF hatası ilk sıçangil modeli Kwei ve diğ. 2. Bu modelde 2004 de tarif edilmiştir, AVF karotid arter ve damar içi kateter kullanılarak bir uç uca bir tarzda jugular damar kullanılarak inşa edildi. Uçtan uca konfigürasyonu ve bir damardan kateter varlığı, insana ait AVF&#39;lerin için, bu modelde geçerliliği sınırlamasına rağmen bu model AVF&#39;lerin erken damar uyum incelemek için yararlı olabilir. Geliştirilmiş bir AVF modeli Castier ve arkadaşları tarafından tanıtıldı. 3 hangi ucu içindekarotid arter juguler ven tarafına bağlanır. Bununla birlikte, hemodiyaliz hastalarında AVF genellikle arter tarafına bir ven uç anatomizing tarafından inşa edilir. Bu kanal 4 içinde hemodinamik profili belirler beri AVF tam konfigürasyonu AV erişim modelinin önemli bir özelliğidir. İkinci disfonksiyon ve intimal hiperplazi (İH) 5 sonraki gelişimini endotel önemli bir katkıda bulunuyor. İnsanlarda 6 kullanılmaktadır edilen bir yeni mürin modeli en son aynı anatomik konfigürasyonu ile geliştirilmiştir. Bu modelde, AVF sütürler ile karotis arter tarafına eksternal juguler venin bir dalı sonuna anastomoz ile C57BL / 6 farelerde oluşturulur. Bu yazıda, biz kompleks patofizyolojisi çözülmeye amaçlayan bu fare modelinin yaygın kullanımı, kolaylaştırmak için bu modelin mikrocerrahi prosedürü odaklanmakHemodiyaliz giriş başarısızlık.

<table><tbody><tr><td>Dissecting microsocpe</td><td>Leica</td><td>M80</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Medicon</td><td>07.61.25</td><td></td></tr><tr><td>Vascular forceps</td><td>S&amp;amp;T</td><td>JFL-3D.2</td><td></td></tr><tr><td>Vascular forceps</td><td>S&amp;amp;T</td><td>D-5a.2</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Roboz</td><td>SS/45</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissor 5 mm blade</td><td>Fine science tools</td><td>15000-08</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissor 2 mm blade</td><td>Fine science tools</td><td>15000-03</td><td></td></tr><tr><td>Scissor</td><td>Medicon</td><td>05.12.21</td><td></td></tr><tr><td>Clip applier 1</td><td>S&amp;amp;T</td><td>CAF-4</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clamp 1</td><td>S&amp;amp;T</td><td>B-1V</td><td></td></tr><tr><td>Clip applier 2</td><td>BBraun</td><td>FE572K</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clamp 2</td><td>BBraun</td><td>FE740K</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatic forceps</td><td>BBraun</td><td>BH110</td><td></td></tr><tr><td>10.0 sutures</td><td>BBraun</td><td>G1117041</td><td></td></tr><tr><td>6.0 sutures</td><td>BBraun</td><td>768464</td><td></td></tr><tr><td>Cauterizer</td><td>Fine science tools</td><td>18010-00</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Medicon</td><td>11.82.18</td><td></td></tr><tr><td>Ocular ointment</td><td>Pharmachemie</td><td>41821101</td><td></td></tr><tr><td>Chlorhexidine tincture 0,5%</td><td>Leiden University Medical Center</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Heparin</td><td>Leo Pharma</td><td>012866-08</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphin</td><td>RB Pharmaceuticals&amp;nbsp;</td><td>283732</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Pharmachemie</td><td>45,112,110</td><td></td></tr><tr><td>Anesthesia mask</td><td>Maastricht university</td><td>custom made</td><td></td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Actavis</td><td>AAAC6877</td><td></td></tr><tr><td>Dexmedetomidine</td><td>Orion</td><td>141-267</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl</td><td>Bipharma</td><td>15923002</td><td></td></tr><tr><td>Continuous anaesthetic induction chamber</td><td>Vet-tech solutions</td><td>AN010R</td><td></td></tr></tbody></table>

a novel murine model of arteriovenous fistula failure: the surgical procedure in detail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the exact pathophysiology remains unknown. In order to unravel the pathophysiology a murine model of AVF-failure was developed in which the configuration of the anastomosis resembles the preferred situation in the clinical setting. A model was described in which an AVF is created by connecting the venous end of the branch of the external jugular vein to the side of the common carotid artery using interrupted sutures. At a histological level, we observed progressive stenotic intimal lesions in the venous outflow tract that is also seen in failed human AVFs. Although this procedure can be technically challenging due to the small dimensions of the animal, we were able to achieve a surgical success rate of 97% after sufficient training. The key advantage of a murine model is the availability of transgenic animals. In view of the different proposed mechanisms that are responsible for AVF failure, disabling genes that might play a role in vascular remodeling can help us to unravel the complex pathophysiology of AVF failure.

Anastomoz (Şekil 1) oluşturulduktan sonra, açıklık kısa bir damar forseps ile venöz çıkış yolunu tıkayarak değerlendirilmelidir. anastomoz patent olduğunda, tıkanma vasküler sistem yakın açıkça pulsatil bir tarzda genişletmek gerekir. Buna ek olarak, açıklık kızılötesi floroskopi etkin bir şekilde anjiyografi gibi fonksiyonları (NIRF) (Şekil 2) yakın kullanılarak teyit edilir. Cerrahi işlem bir başarısızlık (Şekil 2) tasvir gibi ana...

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail at JoVE.com

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

Arteriovenöz Fistül Yetersizliğinin A Novel Fare Modeli: Detay Cerrahi Prosedür

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

a-novel-murine-model-arteriovenous-fistula-failure-surgical-procedure

Research

JoVE Journal

Medicine

13.0K Görüntüleme.  Leiden University Medical Center. Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

Video: A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

Fare Aortocaval Fistül Teknik Yönleri

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Tıp

Adult Mouse Venous Hypertension Model: Common Carotid Artery to External Jugular Vein Anastomosis.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model creating an artificial fistula between the common carotid artery (CCA) and the external jugular vein (EJV) has been widely described and proved technically feasible. This construct provokes a consistent cerebral venous hypertension (CVH), and therefore has helped studying the contribution of venous hypertension to formation, clinical symptoms, and prognosis of brain AVMs and dural AVFs. Equivalent mice models have been only scarcely described and have shown trouble with stenosis of the fistula. An established murine model would allow the study of not only pathophysiology but also potential genetic therapies for these cerebrovascular diseases.
We present a model of arteriovenous fistula that produces a durable intracranial venous hypertension in the mouse. Microsurgical anastomosis of the murine CCA and EJV can be difficult due to diminutive anatomy and frequently result in a non-patent fistula. In this step-by-step protocol we address all the important challenges encountered during this procedure. Avoiding excessive retraction of the vein during the exposure, using 11-0 sutures instead of 10-0, and making a carefully planned end-to-side anastomosis are some of the critical steps. Although this method requires advanced microsurgical skills and a longer learning curve that the equivalent in the rat, it can be consistently developed.
This novel model has been designed to integrate transgenic mouse techniques with a previously well-established experimental system that has proved useful to study brain AVMs and dural AVFs. By opening the possibility of using transgenic mice, a broader spectrum of valid models can be achieved and genetic treatments can also be tested. The experimental construct could also be further adapted to the study of other cerebrovascular diseases related with venous hypertension such as migraine, transient global amnesia, transient monocular blindness, etc.

We describe a method for creating a reliable model of cerebral venous hypertension in the adult mouse. This model has been widely described and tested in the rat. This new counterpart in the mice opens the possibility of using genetic modified animals and thereby broadens the applications of the model.

Yetişkin Fare Venöz Hipertansiyon Modeli: Dış Boyun Ven Anastomoza Ortak Karotis Arter.

The understanding of the pathophysiology of brain arteriovenous malformations and arteriovenous fistulas has improved thanks to animal models. A rat model ...

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

Endovasküler Aort Anevrizma Onarımı Yeni Bir murin Modeli

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Murine Model of Femoral Artery Wire Injury with Implantation of a Perivascular Drug Delivery Patch

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. While these therapies lead to the rapid restoration of blood flow, these technologies remain limited by restenosis in the case of bare metal stents and angioplasty, or reduced healing and possibly enhanced risk of thrombosis in the case of drug eluting stents. A key pathophysiological mechanism in the formation of restenosis is intimal hyperplasia caused by the activation of vascular smooth muscle cells and inflammation due to arterial stretch and injury. Surgeries that induce arterial injury in genetically modified mice are useful for the mechanistic study of the vascular response to injury but are often technically challenging to perform in mouse models due to the their small size and lack of appropriate sized devices. We describe two approaches for a surgical technique that induces endothelial denudation and arterial stretch in the femoral artery of mice to produce robust neointimal hyperplasia. The first approach creates an arteriotomy in the muscular branch of the femoral artery to obtain vascular access. Following wire injury this arterial branch is ligated to close the arteriotomy. A second approach creates an arteriotomy in the main femoral artery that is later closed through localized cautery. This method allows for vascular access through a larger vessel and, consequently, provides a less technically demanding procedure that can be used in smaller mice. Following either method of arterial injury, a degradable drug delivery patch can be placed over or around the injured artery to deliver therapeutic agents.

We describe a surgical technique that produces wire injury in the femoral artery of mice to induce neointimal hyperplasia to serve as a model testing system for the perivascular delivery of therapeutic compounds for the inhibition of restenosis.

Bir Perivasküler Drug Delivery Patch İmplantasyonunda ile Femoral Arter Tel Yaralanma sıçan Modeli

Percutaneous interventions including balloon angioplasty and stenting have been used to restore blood flow in vessels with occlusive vascular disease. ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

Fare Arteriovenöz Fistül Endotelyumunun için intraluminal Drug Delivery

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

Bir outflow stenozu ile Aokaval fistül kullanarak Merkezi venöz stenozis murine modeli

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Creating Radio-cephalic Arteriovenous Fistula in the Forearm with a Modified No-Touch Technique

Autologous arteriovenous fistula (AVF) is the primary and best option to obtain vascular access for hemodialysis treatment; other options are arteriovenous graft (AVG) and central venous catheterization (CVC). The implementation of radio-cephalic autologous arteriovenous fistula (RC-AVF) in the forearm was preferred among patients with superior vascular conditions. However, there is a high rate of early fistula failure. The chosen surgical method is understood to have an effect on the maturation of the fistula. New surgical procedures such as radial artery deviation and reimplantation (RADAR) have been significantly improved for juxta-anastomotic stenosis. Nevertheless, new problems such as stenosis of arteries and narrowing of surgical indication were also found. In this report, we presented a modified no-touch technique (MNTT) to create an RC-AVF, in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.

We present a modified no-touch technique (MNTT) to create a radio-cephalic arteriovenous fistula (RC-AVF) in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.

Modifiye Dokunmama Tekniği ile Forearm'da Radyo-sefalik Arteriovenöz Fistül Oluşturma

Autologous arteriovenous fistula (AVF) is the primary and best option to obtain vascular access for hemodialysis treatment; other options are ...

A Murine Model of Hemodialysis Access-Related Hand Dysfunction

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement therapies such as hemodialysis continues to increase. Autogenous arteriovenous fistula (AVF) placement remains a primary vascular access option for ESRD patients. Unfortunately, approximately half of the hemodialysis patients experience dialysis access-related hand dysfunction (ARHD), ranging from subtle paresthesia to digital gangrene. Notably, the underlying biologic drivers responsible for ARHD are poorly understood, and no adequate animal model exists to elucidate the mechanisms and/or develop novel therapeutics for the prevention/treatment of ARHD. Herein, we describe a new mouse model in which an AVF is created between the left common iliac artery and vein, thereby facilitating the assessment of limb pathophysiology. The microsurgery includes vessel isolation, longitudinal venotomy, creation of arteriovenous anastomosis, and venous reconstruction. Sham surgeries include all the critical steps except for AVF creation. Iliac AVF placement results in clinically relevant alterations in central hemodynamics, peripheral ischemia, and impairments in hindlimb neuromotor performance. This novel preclinical AVF model provides a useful platform that recapitulates common neuromotor perturbations reported by hemodialysis patients, allowing researchers to investigate the mechanisms of ARHD pathophysiology and test potential therapeutics.

This protocol details the surgical steps of murine common iliac arteriovenous fistula creation. We developed this model to study hemodialysis access-related limb pathophysiology.

Hemodiyaliz Erişimi ile İlişkili El Disfonksiyonunun Bir Murine Modeli

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement ...

A Modified Technique for Arteriovenous Fistula Construction in Rabbits

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury to the veins and arteries during the operation and hemodynamic changes can lead to intimal hyperplasia, leading to juxta-anastomotic stenosis. To reduce injury to the veins and arteries during the operation, this study proposes a new modified no-touch technique (MNTT) for AVF construction that can decrease the rate of juxta-anastomotic stenosis and improve the AVF patency. To unravel the hemodynamic changes and mechanisms of the MNTT, this study presented an AVF procedure using this technique. Although this procedure is technically challenging, 94.4% procedural success was achieved after adequate training. Ultimately, 13 out of 34 rabbits had a functional AVF 4 weeks after the surgery, leading to a 38.2% AVF patency rate. However, at 4 weeks, the survival rate was 86.1%. Ultrasonography showed active blood flow through AVF anastomosis. Furthermore, the spiral laminar flow was observed in the vein and artery near the anastomosis, suggesting that this technique may improve the hemodynamics of the AVF. On histological observation, significant venous intimal hyperplasia was observed at the AVF anastomosis, whereas no significant intimal hyperplasia was observed at the proximal external jugular vein (EJV) of the anastomosis. This technique will improve the understanding of the mechanisms underlying the use of MNTT for AVF construction and provide technical support for the further optimization of the surgical approach in AVF construction.

The present protocol proposes the creation of an arteriovenous fistula in rabbits using a modified no-touch technique. The technique involves the side-to-side anastomosis of the common carotid artery and external jugular vein without the dissection of the perivenous tissues or cutting off the artery.

Tavşanlarda Arteriovenöz Fistül Yapımı için Modifiye Bir Teknik

Juxta-anastomotic stenosis is a challenging problem that often causes non-maturation and decreases the patency of an arteriovenous fistula (AVF). Injury ...

RV Hacim Aşırı Yük Fare Modelini Oluşturmak için Modifiye Arteriyovenöz Fistül Cerrahisi

Establishment and Confirmation of a Postnatal Right Ventricular Volume Overload Mouse Model

Right ventricular (RV) volume overload (VO) is common in children with congenital heart disease. In view of distinct developmental stages,the RV myocardium may respond differently to VO in children compared to adults. The present study aims to establish a postnatal RV VO model in mice using a modified abdominal arteriovenous fistula. To confirm the creation of VO and the following morphological and hemodynamic changes of the RV, abdominal ultrasound, echocardiography, and histochemical staining were performed for 3 months. As a result, the procedure in postnatal mice showed an acceptable survival and fistula success rate. In VO mice, the RV cavity was enlarged with a thickened free wall, and the stroke volume was increased by about 30%-40% within 2 months after surgery. Thereafter, the RV systolic pressure increased, corresponding pulmonary valve regurgitation was observed, and small pulmonary artery remodeling appeared. In conclusion, modified arteriovenous fistula (AVF) surgery is feasible to establish the RV VO model in postnatal mice. Considering the probability of fistula closure and elevated pulmonary artery resistance, abdominal ultrasound and echocardiography must be performed to confirm the model status before application.

Yazar Spotlight: Doğum Sonrası Sağ Ventrikül Hacmi Aşırı Yük Fare Modelinin Kurulması ve Onaylanması  

This protocol presents the establishment and confirmation of a postnatal right ventricular volume overload (VO) model in mice with abdominal arteriovenous fistula (AVF), which can be applied to investigate how VO contributes to postnatal heart development.