This study was supported by a grant from the Dutch Kidney Foundation (KJPB 08.0003). 
Carolien Rothuizen is acknowledged for her contribution to the study. Hoang Pham is acknowledged for his assistance with the pathology work-up.

כל הניסויים אושרו על ידי הוועדה על רווחת בעלי החיים של המרכז הרפואי של אוניברסיטת ליידן. 1. הכנת בעלי חיים אלחוש <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את העכבר (גיל 1-3 חודשים) בתא אינדוקציה רציף הרדמה מלאה isoflurane 3-4%. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לגלח את הצד הגחוני של הצוואר והחלק הפנימי של הרגל השמאלית העליונה באמצעות מכונת גילוח חשמלית ולהשתמש חתיכת סרט כדי להסיר את השיער. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל משחת עיניים על שתי עיניים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את חיה על שמיכת החימום שעליו מסכת אוורור האף הוא קבועה. לקבע את הראש כדי להסוות את האף באמצעות נייר דבק. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לספק isoflurane בריכוז של 1.5-2.0% באמצעות סט אוויר מועשר בחמצן בבית הזרימה הבא: אוויר 0.3 ליטר / דקה, 100% חמצן 0.2 ליטר / דקה. לצבוט את העור בין האצבעות כדי להעריך את עומק ההרדמה ולהתאים את ריכוז isoflurane במידת הצורך. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבע את בעל החייםשמיכה חימום עם סרט דביק על כל האיברים, כי הוא נקבע על כ 37 מעלות צלזיוס במצב שכיבה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להזריק עצירות מומס נתרן כלורי (NaCl) 0.9% במינון של 0.1 מ&quot;ג / ק&quot;ג יחד עם 0.5 מ&quot;ל של תת-עורית NaCl 0.9% סטרילי ב בכנף של החיה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל כלורהקסידין תמיסה 0.5% לאזור המוכן. </li></ol> חתך בעור 2. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם את החיה תחת מיקרוסקופ עם הראש כלפי המנתח. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע חתך אורכי של כ 1.5 ס&quot;מ קו האמצע של הצוואר הגחון באמצעות מספריים מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> תפוס את בלוטות הרוק עם מלקחיים לעקור את בלוטת רוק התקינה cranially עד שהוא בחלקו מחוץ הפצע. </li></ol> 3. ביתור, הכנת הווריד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לזהות באופן בוטה לנתח את הסניף dorsomedial של וריד הצוואר חיצוני תקין לחלוטין מרקמות perivascular שלה על ידי הפצת רקlongside ובכיוון של כלי הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים לולאה (10.0 תפר) סביב הוריד גזור ולהחיל בקשר אחד מבלי לנעול אותו. </li></ol> 4. הסרת שרירי sternocleidomastoid <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחיים, לנתח את שריר sternocleidomastoid התקין בבוטות מסביבתה על ידי הפצה לאורך גבולה. מניח זוג מלקחיים פתוח מתחת לשריר המבודד ולקשור אותו proximally ו distally עם התפר 6.0. בהמשך לכך, שיחתוך את השריר באמצעות cauterizer. </li></ol> 5. לנתח הכנת עורק Common הראש <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה לנתח את עורק התרדמה המשותף הנכון באמצעות מלקחיים. מניחים חוט 6.0 תפר סביב עורק לסייע המניפולציה של העורק. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מלחציים וסקולרית כמו distally ו proximally ככל האפשר. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ביצוע חתך אורכי באמצע העורק של כ 1 מ&quot;מ באמצעות מספריים מיקרו מיוחדים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שוטפים אתעורק עם פתרון הפרין [100 IU / ml] עד הספינה ברור של דם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מדוד ולהתאים את אורך החתך במידת הצורך כדי להתאים את רוחב מהדק כלי הדם [1.1 מ&quot;מ]. </li></ol> 6. קשירת הווריד <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מלחציים וסקולרית proximally של וריד כבר מוכן ומקום חוט תפר סביב הווריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החל מתיחת זנב עדינה אל וריד באמצעות haemostat כי מושם על חוט התפר ולקשור את הווריד כמו distally ככל האפשר באמצעות התפר 10.0 שהונח קודם לכן. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותך את הווריד באמצעות מספריים רק proximally אל הקשירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בעזרת מלקחי כלי דם, בעדינות לפתוח את לומן של עורק ולשטוף אותו עם פתרון הפרין [100 IU / ml]. </li></ol> 7. יצירת השקת חלק 1 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חבר את הווריד אל עורק עם תפר שהופסק (10.0) באמצעות 2 קשרים מרובעים בבית בעמדה מספר שתים-עשרה השעה ואחריו תפר בשש o &#39;עמדת שעון. הקפד לחבר את הווריד אל העורק ללא שמאפשר לו לסובב סביב צירו. סובב את החיה על מנת לשפר את החשיפה כירורגית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מקם חוט תפר סביב הווריד ולהחיל מתיחה לרוחב עדינה באמצעות haemostat. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השימוש באותה תפרי הקטע, להשלים ההשקה ידי צבת כ 3-4 תפרים נוספים בצד הגחון הגלוי של השקה. </li></ol> 8. מינהל הפרין <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חימום סובב שמיכה 180 ° ולמקד את המיקרוסקופ על הרגל השמאלית העליונה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> זהה את צרור וריד / עורק / עצב הירך ידי מחפש מבנה כלי הדם שיוצא אורכי בחלק המדיאלי של הרגל העליונה וניתן לראות דרך העור. עושים חתך עם מספריים מיקרו של כ 1 ס&quot;מ ישירות מעל וריד הירך באופן לאורכו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> בזהירות לנתח את רקמת perivascular של וריד הירך ו להזריק הפרין בכל o מנהf 0.2 משקל גוף IU / g ב וריד הירך. </li></ol> 9. יצירת השקת חלק 2 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חזור אל אזור הצוואר ולהסיר את חוט תפירה שהונח סביב הוריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניחים חוט תפירה (6.0) שעובר ובהמשך מתחת העורק הראשי, על הווריד ושוב מתחת העורק הראשי. (איור 1 ליטר) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מהדק כלי הדם מוריד. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר מכן, לסובב את פיסטולה arteriovenous השלימה מחצית 180 ° לאורך ציר של עורק התרדמה באופן כיוון השעון על ידי סיבוב בו זמנית הן את מלחציים וסקולרית ולהחיל המתיחה המדיאלי אל קצות חוט תפירה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> השלם את ההשקה באותו אופן כפי שמתואר בשלב 7.2. </li></ol> הסרת דם קלאמפ 10. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את חוט תפירה וסובב את כלי הדם מלחציים 180 ° נגד כיוון השעון. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את מהדק כלי הדם דיסטלי ואחריו מהדק כלי הדם הפרוקסימלי. </li> &lt;li&gt; הערך את patency של השקה ידי גורם לחסימה בדרכי יצוא הוורידים בעדינות עם מלקחי כלי הדם. במקרה של השקת פטנט, בסעיף ורידי מראש הגורם לחסימה ירחיב באופן pulsatile. מקם מחדש את בלוטת רוק הזכות באמצעות מלקחי עמדת אנטומיים מקוריים. </li></ol> 11. עור סגר לאחר ניתוח טיפול <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את העור של הרגל העליונה עם תפר ללא הפרעה (6.0). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> סגור את העור של הצוואר עם תפר ללא הפרעה (6.0). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הסר את החיה מן השמיכה חימום ולהזריק 0.5 מ&quot;ל NaCl 0.9% מתחת לעור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מניח את החיה בכלוב חשוך כי הוא מחומם עם מנורת חימום ולתת לו להחלים לחלוטין. כאשר בעל חיים לא להחלים לחלוטין, לוודא שהוא לא סובל מהלם המודינמי עקב דימום באזור כירורגית. חפש סימנים כגון צוואר נפוחות דליפת הדם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לאחר כ -6 שעות לאחר הזריקה הראשונה של buprenorphine, להזריק מנה בודדת של ניסוח מתמשך-ההפצה של תת עורי עצירות במינון מומלץ על-ידי היצרן, על מנת לספק שיכוך כאבים הולם עבור שעות 72 נוספות. </li></ol> קציר רקמות 12. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להרדים את החיה עם הרדמה-תערובת המכילה midazolam (5 מ&quot;ג / ק&quot;ג), medetomidine (0.5 מ&quot;ג / ק&quot;ג) ו פנטניל (0.05 מ&quot;ג / ק&quot;ג) מנוהל intraperitoneally. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לקבע את החיה שכיבה על ידי החדרת מחטים דרך הכפות והלחיים שלה לתוך מחצלת סיליקון שאינו מחומם. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> עושים חתך של כ 1.5-2.0 ס&quot;מ מעל הצלקת בצוואר עם מספריים מיקרו. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לנתח את AVF, ומניח אשכולות תפר (6.0) ברחבי proximal-, עורק דיסטלי ודרכי יצוא ורידים לצורך זיהוי קל. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להעריך את patency של AVF כמתואר בסעיף 10.3 של הפרוטוקול. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> פתח את חלל הצפק על ידי ביצוע פיום בטן המדיאלי uלשיר את מספרי מייקרו. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חותכים דרך כלוב הצלעות הגחון שמאלה וימינה בעזרת זוג מספריים החל caudally בקו midclavicular. באמצעות מספרי מייקרו, transect הסרעפת מחוברת בחלקו האמצעי של כלוב צלעות גחון ובהמשך לעקור את החלק הזה cranially באמצעות מלקחיים. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> אתר את וריד caval הנחות transect זה עם מספרי מייקרו. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> הכנס מחט מחט מד 23 בחדר השמאלי ו perfuse עם PBS בלחץ של כ 100 מ&quot;מ כספית עד שהנוזל intravasal הוא כמעט ברור. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> מבלי להסיר את המחט, עכשיו perfuse עם פורמלין 4% במשך 10 דקות בלחץ של כ 100 מ&quot;מ כספית. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> והבלו AVF ידי חוצים שני עורקי וריד עם מספריים מיקרו לצלול אותו O פתרון פורמלין 4% / N. </li></ol> רקמות 13. טבעת ואת חתך <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לעבד את רקמת פרפין פי של protoco הייצורl. הפרוטוקול הוחל כלל את הפעולות הבאות: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול 70% אתנול עבור שעה 1 ב RT. חזור 2x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול ב 96% אתנול עבור שעה 1 ב RT. חזור 2x. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול 99.5% אתנול עבור שעה 1 ב RT. חזור פעם אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול 99.5% אתנול עבור 1.5 שעות ב RT. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול קסילן 100% במשך שעה 1 ב RT. חזור פעם אחת. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> לטבול parafin עבור שעה 1 ב 62 מעלות צלזיוס. חזור 2x. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> שבץ AVF פרפין כך בדרכי יצוא הוורידים הוא מכוון בניצב קלטת ההטבעה. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> באמצעות microtome, ליצור 12 קטעים סדרתי כל אחת בהיקף של 30 חלקים עם עובי 5 מיקרומטר. אז של כל מקטע סדרתי, למקם קטע אחד על כוס הרכבת יחיד החל עמדה אחת עד שתים עשר בצורה מסודרת החל באזור הקרוב ההשקה. </li></ol>

<ol>
	<li>Rotmans, J. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+Models+for+Studying+Pathophysiology+of+Hemodialysis+Access.">Animal Models for Studying Pathophysiology of Hemodialysis Access.</a> The Open Urology &amp; Nephrology Journal. 7, 14-21 (2014).</li><li>Kwei, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+adaptive+responses+of+the+vascular+wall+during+venous+arterialization+in+mice.">Early adaptive responses of the vascular wall during venous arterialization in mice.</a> Am.J.Pathol. 164 (1), 81-89 (2004).</li><li>Castier, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+neointima+lesions+associated+with+arteriovenous+fistulas+in+a+mouse+model.">Characterization of neointima lesions associated with arteriovenous fistulas in a mouse model.</a> Kidney Int. 70 (2), 315-320 (2006).</li><li>Krishnamoorthy, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodynamic+wall+shear+stress+profiles+influence+the+magnitude+and+pattern+of+stenosis+in+a+pig+AV+fistula.">Hemodynamic wall shear stress profiles influence the magnitude and pattern of stenosis in a pig AV fistula.</a> Kidney Int. 74 (11), 1410-1419 (2008).</li><li>Ene-Iordache, B., Cattaneo, L., Dubini, G., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+anastomosis+angle+on+the+localization+of+disturbed+flow+in+'side-to-end'+fistulae+for+haemodialysis+access.">Effect of anastomosis angle on the localization of disturbed flow in 'side-to-end' fistulae for haemodialysis access.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 28 (4), 997-1005 (2013).</li><li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+remodeling+and+intimal+hyperplasia+in+a+novel+murine+model+of+arteriovenous+fistula+failure.">Vascular remodeling and intimal hyperplasia in a novel murine model of arteriovenous fistula failure.</a> J.Vasc.Surg. 59 (1), 192-201 (2014).</li><li>Rekhter, M., Nicholls, S., Ferguson, M., Gordon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+proliferation+in+human+arteriovenous+fistulas+used+for+hemodialysis.">Cell proliferation in human arteriovenous fistulas used for hemodialysis.</a> Arterioscler. Thromb. 13 (4), 609-617 (1993).</li><li>Falk, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maintenance+and+salvage+of+arteriovenous+fistulas.">Maintenance and salvage of arteriovenous fistulas.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 17 (5), 807-813 (2006).</li><li>Tordoir, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prospective+evaluation+of+failure+modes+in+autogenous+radiocephalic+wrist+access+for+haemodialysis.">Prospective evaluation of failure modes in autogenous radiocephalic wrist access for haemodialysis.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 18 (2), 378-383 (2003).</li><li>Dixon, B. S., Novak, L., Fangman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodialysis+vascular+access+survival:+upper-arm+native+arteriovenous+fistula.">Hemodialysis vascular access survival: upper-arm native arteriovenous fistula.</a> Am. J. Kidney Dis. 39 (1), 92-101 (2002).</li><li>Yang, B., Shergill, U., Fu, A. A., Knudsen, B., Misra, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+arteriovenous+fistula+model.">The mouse arteriovenous fistula model.</a> J. Vasc. Interv. Radiol. 20 (7), 946-950 (2009).</li><li>Kang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regional+and+systemic+hemodynamic+responses+following+the+creation+of+a+murine+arteriovenous+fistula.">Regional and systemic hemodynamic responses following the creation of a murine arteriovenous fistula.</a> Am. J. Physiol Renal Physiol. 301 (4), F845-F851 (2011).</li><li>Wong, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elastin+is+a+key+regulator+of+outward+remodeling+in+arteriovenous+fistulas.">Elastin is a key regulator of outward remodeling in arteriovenous fistulas.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 49 (4), 480-486 (2015).</li><li>Kennedy, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+renal+failure+cause+an+atherosclerotic+milieu+in+patients+with+end-stage+renal+disease.">Does renal failure cause an atherosclerotic milieu in patients with end-stage renal disease.</a> Am. J. Med. 110 (3), 198-204 (2001).</li><li>Cheung, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerotic+cardiovascular+disease+risks+in+chronic+hemodialysis+patients.">Atherosclerotic cardiovascular disease risks in chronic hemodialysis patients.</a> Kidney Int. 58 (1), 353-362 (2000).</li><li>Lee, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severe+venous+neointimal+hyperplasia+prior+to+dialysis+access+surgery.">Severe venous neointimal hyperplasia prior to dialysis access surgery.</a> Nephrol. Dial. Transplant. 26 (7), 2264-2270 (2011).</li><li>Kokubo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CKD+accelerates+development+of+neointimal+hyperplasia+in+arteriovenous+fistulas.">CKD accelerates development of neointimal hyperplasia in arteriovenous fistulas.</a> J. Am. Soc. Nephrol. 20 (6), 1236-1245 (2009).</li></ol>

החוקרים אין לי מה לחשוף.

AVF נחשב לעקב אכילס בטיפול המודיאליזה. למרבה הצער, AVF עדיין סובל ממספר גבוה של כישלון 8-10. למרות שנערכו מחקרים מקיפים על המנגנונים, פתופיזיולוגיה המדויק אינו ידוע. מודלים בעכברים רבים לכישלון AVF כבר תוארו בספרות 2,3,11,12. עם זאת, אף אחד מן המודלים האלה לשלב למבוי ורידים לתצורת השקת צד עורקי המשמש ביותר המצב הקליני. זה מאוד רלוונטי מאז פרופיל המודינמי כתוצאה ממלאת תפקיד חשוב שיפוץ כלי דם. יתר על כן, החלק מן המודלים המשמש חפת סינטתית עבור חיבור בין העורק לוריד 2,11, אשר אינם משמשים במסגרת קלינית. כדי לשפר את הרלוונטיות הקלינית, ולכן פתחנו מודל בעכברים בם למבוי ורידים חד-צדדי על השקה צד עורקים נוצר בין סניף של juguוריד lar ו עורקים תרדמה משותפת עם תפרים קטע 6. במודל זה שינויי histomorphological מכריעים נצפו כולל השיפוץ החוצה היפרפלזיה intimal מתקדמת, בסופו של דבר מוביל לכישלון AVF. היבט חיוני של ההליך הכירורגי הוא פרוטוקול ההרדמה. מומלץ להשתמש הרדמה משאיפת isoflurane, שכן פעולה זו מהווה שיטה בטוחה וקלה להשגת תקופות ממושכות של הרדמה. האחרון חשוב במיוחד עבור שלב ההכשרה שבו ההליך כולו עשוי להימשך עד 3 שעות. על מנת ליצור בחדר ההכרח וריד היצוא החוצה של פיסטולה arteriovenous, שריר sternocleidomastoid ipsilateral צריך להיות ניכר. בהתייחס לטיפול הכלי במהלך הניתוח, דיסקציה של כלי צריכה להתבצע באופן בוטה באמצעות מלקחיים. שימוש מלקחיים ישרים וסקולרית מיוחדים הם recommended עבור טיפול תפעול ישיר של כלי כפי שהם מספקים יותר דיוק לייצר נזק מכני פחות בשל קצה מעוגל. השימוש האשכולות תפר כמו לולאות כלי בשילוב עם hemostat יכול לסייע בטיפול רקמות בטוח ויותר מכך, הצגת הרקמה בצורה אופטימלית כאשר שימש יד שלישית שהוא חיוני כדי הליך זה יכול להתבצע ללא כל סיוע ישיר. אין ספק, הצעד הקשה ביותר בהליך הם המיקומים תפר בין העורק לווריד. יש להקפיד שלא תפר את -side &quot;חזרה&quot; של השקה עם -side &quot;חזית&quot;, כמו זה יוביל היצרות של השקה שיכול להוביל לכשל מוקדם של AVF. כדי למנוע זאת, עמדת קצה של מלקחי כלי דם שבין שני קירות של כלי שיט על מנת להפריד ביניהם. הקושי הטכני יכול להיחשב הגבלה של המודל הזה. עם זאת, אנחנו לא חושבים הב הליך זה הוא מאתגר יותר מאשר הדגם כי הוא כיום בשימוש נרחב ביותר 3,6. קשה להעיר הערה כללית על גודל המדגם למחקרים עתידיים, כמו גודל המדגם המחושב אינו תלוי רק השוני בין בעלי חיים, אלא גם על &quot;כוח&quot; של התערבות. אנו מעריכים כי גודל קבוצה של כ 10 עכברים (לא כולל עכברים לנשור המחקר בגלל תקלה טכנית של AVF) צריך להיות מספיק מחקרים המתמקדים את התפקיד של גנים ספציפיים בכישלון AVF. לאחרונה, הצלחנו להשיג תוצאות משמעותיות עם גודל קבוצה ממוצעת של 10 חיות במחקר על עצם את התפקיד של ואלסטין murine AVF שיפוץ 13. היבט אחד של מודל Murine שלנו דורש דיון נוסף. זה ידוע כי סביבת אורמיה בחולים עם אי ספיקת כליות סופנית תורם שפע של מחלות לב וכלי דם כולל hyperplasi intimal ורידיםאפילו לפני ניתוח גישת המודיאליזה 14-16. המודל הנוכחי זה אינו כולל את המילייה אורמיה. לכן, שילוב של מודל של אי-ספיקת כליות כרונית 17 יהיה צעד כתוסף יקר כדי לשפר את תקפות המודל murine זה.

צינור גישה וסקולרית פונקציונלי הוא בעל חשיבות רבה עבור חולים עם אי ספיקת כליות שתלויות המודיאליזה כרוני להישאר בחיים. • הקמת פיסטולה arteriovenous (AVF) היא כיום הבחירה המועדפת עבור גישה וסקולרית. עם זאת, סיבוכים הקשורים AVF מהווים אחד הגורמים העיקריים לתחלואה לחולים על המודיאליזה כרונית. למרות מאמצים מדעיים נרחבים, אף אחד רומן גישות להפחית סיבוכי גישה הקשורות AVF לא לגרום לשיפור משמעותי של עמידות AVF. חלק התקדמות מאכזבת מתייחס הבנה החלקית של הפתופיזיולוגיה הבסיסית של כישלון גישה המודיאליזה. כדי לפענח את הפתופיזיולוגיה של כישלון גישת AV, במודלים של בעלי חיים כי מחק הפתולוגיה אנושית הם בעלי חשיבות עליונה. מבחינה זו, לא רק את בעלי החיים, אלא גם את האתר anastomotic, הטיפול האנטי-coagulatory הנדרש ואת משך מעקב אחרי גלר&quot;י צריך להילקח בחשבון 1. בעוד בעלי חיים גדולים הם המתאימים ביותר עבור מחקרי התערבות מכוונת לפתח אסטרטגיות טיפוליות חדשות, יש מודלים בעכברים הפוטנציאל הגדול ביותר להשיג תובנה יותר את המנגנונים המולקולריים שבבסיס כישלון גישה AV בשל הזמינות של עכברים טרנסגניים. בנוסף, מספר רב של עכברים יכול לשמש למטרה זו ובעלויות נמוכות יותר לעומת שימוש בבעלי חיים גדולים יותר. המודל murine הראשון של כישלון AVF תוארה בשנת 2004 על ידי Kwei ואל et. 2 במודל זה, AVFs נבנו באמצעות העורק הראשי ואת וריד הצוואר בצורה מקצה לקצה באמצעות קטטר intravascular. המודל זה יכול להיות שימושי כדי ללמוד הסתגלות ורידים מוקדם AVFs למרות תצורת מקצה לקצה ואת הנוכחות של קטטר תוך-להגביל את תוקפו של המודל הזה עבור AVFs אדם. מודל AVF משופר הוצג על ידי Castier ו et al. 3 שבו סוףעורק התרדמה מחובר בצד של וריד הצוואר. עם זאת, AVFs במטופלי המודיאליזה בנוי בדרך כלל על ידי ניתח סוף הווריד לצד עורק. התצורה המדויקת של AVF היא מאפיין חיוני של מודל גישת AV שכן הוא קובע את הפרופיל המודינמי בתוך הצינור 4. האחרון הוא תורם חשוב אנדותל תפקוד והפיתוח הבא של היפרפלזיה intimal (IH) 5. מודל בעכברים חדשני שפותח לאחרונה עם תצורת אנטומי זהה מנוצל בבני אדם 6. במודל זה, AVF נוצרות בעכברים C57BL / 6 על ידי anastomosing סוף סניף של וריד הצוואר חיצוני לצד של עורק התרדמה המשותף עם התפרים שהופסק. בעבודה הנוכחית, אנו מתמקדים ההליך מיקרו של מודל זה על מנת להקל על השימוש הנרחב של מודל בעכברים, מתוך מטרה לחשוף את פתופיזיולוגיה מורכביםכישלון גישה המודיאליזה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="697">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:247px;">Dissecting microsocpe</td>
			<td style="width:219px;">Leica</td>
			<td style="width:117px;">M80</td>
			<td style="width:115px;"></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Forceps</td>
			<td>Medicon</td>
			<td>07.61.25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Vascular forceps</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>JFL-3D.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Vascular forceps</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>D-5a.2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Forceps</td>
			<td>Roboz</td>
			<td>SS/45</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Micro scissor 5 mm blade</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>15000-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Micro scissor 2 mm blade</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>15000-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Scissor</td>
			<td>Medicon</td>
			<td>05.12.21</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Clip applier 1</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>CAF-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Vascular clamp 1</td>
			<td>S&#38;T</td>
			<td>B-1V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Clip applier 2</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>FE572K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Vascular clamp 2</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>FE740K</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Hemostatic forceps</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>BH110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">10.0 sutures</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>G1117041</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">6.0 sutures</td>
			<td>BBraun</td>
			<td>768464</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Cauterizer</td>
			<td>Fine science tools</td>
			<td>18010-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Needle holder</td>
			<td>Medicon</td>
			<td>11.82.18</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Ocular ointment</td>
			<td>Pharmachemie</td>
			<td>41821101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Chlorhexidine tincture 0,5%</td>
			<td>Leiden University Medical Center</td>
			<td>NA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Heparin</td>
			<td>Leo Pharma</td>
			<td>012866-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Buprenorphin</td>
			<td>RB Pharmaceuticals&#160;</td>
			<td>283732</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Isoflurane</td>
			<td>Pharmachemie</td>
			<td>45,112,110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Anesthesia mask</td>
			<td>Maastricht university</td>
			<td>custom made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Midazolam</td>
			<td>Actavis</td>
			<td>AAAC6877</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Dexmedetomidine</td>
			<td>Orion</td>
			<td>141-267</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Fentanyl</td>
			<td>Bipharma</td>
			<td>15923002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Continuous anaesthetic induction chamber</td>
			<td>Vet-tech solutions</td>
			<td>AN010R</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a novel murine model of arteriovenous fistula failure: the surgical procedure in detail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the exact pathophysiology remains unknown. In order to unravel the pathophysiology a murine model of AVF-failure was developed in which the configuration of the anastomosis resembles the preferred situation in the clinical setting. A model was described in which an AVF is created by connecting the venous end of the branch of the external jugular vein to the side of the common carotid artery using interrupted sutures. At a histological level, we observed progressive stenotic intimal lesions in the venous outflow tract that is also seen in failed human AVFs. Although this procedure can be technically challenging due to the small dimensions of the animal, we were able to achieve a surgical success rate of 97% after sufficient training. The key advantage of a murine model is the availability of transgenic animals. In view of the different proposed mechanisms that are responsible for AVF failure, disabling genes that might play a role in vascular remodeling can help us to unravel the complex pathophysiology of AVF failure.

לאחר הקמתה של ההשקה (איור 1), patency יש לבחון בקרוב על ידי גורם לחסימה בדרכי יצוא הוורידים עם מלקחי כלי דם. כאשר השקה הוא פטנט, הפרוקסימלי בדרך וסקולרית על חסימה צריך להרחיב בבירור באופן pulsatile. בנוסף, patency אושר על ידי שימוש ליד fluoroscopy אינפרא אדום (NIRF) שמתפקד ביעילות כמו אנגיוגרפיה (איור 2). כישלון בהליך כירורגי יכול להוביל לחסימה של השקה כפי מתואר (איור 2). כשל זה יכול להיגרם על ידי אזור anastomotic צר מדי, פיתול של הכלי, מנת הפרין לקויה או מיקום תפר בשוגג שמחבר את הצד הקדמי של השקה אל הצד האחורי. ברמה היסטולוגית, בתהליך של שיפוץ וסקולרית AVF יכול להיחקר באלגנטיות באמצעות מודל זה. שיפוץ וסקולרית AVF מתרחש כתוצאה שלהגידול בתזרים ואת לחץ הדם. בעכברים, תגובה זו מתאפיינת בגידול היקף (למשל, כלפי חוץ שיפוץ) מה שמוביל לעלייה באזור luminal ב 2 השבועות הראשונים לאחר הניתוח. לאחר 2 שבועות אלה, באזור luminal פוחת בהדרגה עקב עצירה בשיפוץ החוצה העיבוי שוטף של הגלימה הפנימית. היווצרות נגעי stenotic פרוגרסיבי אלו גורמות לחסימה של 50% של AVF ב 4 שבועות לאחר ניתוח. לכן, נקודת הזמן האופטימלי לקצור את AVFs יהיה ב 2 שבועות לאחר הניתוח, שכן בשלב זה, ניתוח נכון של תגובה וסקולרית פטנט AVF עדיין ריאלי. Immunostaining של דרך יצוא הוורידים ב 2 שבועות לאחר ניתוח מראה כי תא הסלולר של אינטימה מורכב בעיקר יקטין שריר אלפא-חלקה (α-SMA) תאים חיוביים (איור 3), כפי שנצפה AVFs אדם נכשל גם 7. לאור המורכבות<html> הליך מיקרו, זה מציאותי להתמודד עם כשל טכני של ההליך ביחס של העכברים. בידיים שלנו, שיעור ההצלחה של ההליך היה 67% בהתחלה. עם זאת, עם הכשרה נוספת שיעור זה הוגדל עד 97%. הסיבה העיקרית לכישלון הייתה דימום (60%), ואחריו פקק חריפה (27%) ו anesthesia- מוות קשור (13%). לאחר הכשרה מספקת, ההליך הכירורגי ניתן לבצע כ 1 שעה. <img alt="איור 1" src="/files/ftp_upload/53294/53294fig1.jpg" /> ערכת איור 1. מפורטת של הליך כירורגי (A - T). שלבים עיקריים ליצירה מוצלחת של AVF. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53294/53294fig1large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> בתשובה לשאלה 2 &quot;src =&quot; / files / ftp_upload / 53,294 / 53294fig2.jpg &quot;/&gt; איור 2. תמונות מקרוסקופית של פטנטים AVFs המוסתרת. (א) AVF פטנט עם מהדק כלי הדם על העורק הראשי משותף דיסטלי. (ב) האפיל AVF. (חץ לבן) מציין את כיוון זרימת הדם. (ג) AVF פטנט הפגינו באמצעות fluoroscopy אינפרא אדום הקרוב. (חץ אדום) עולה עורק. (חץ כחול) מציין בדרכי יצוא ורידי. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53294/53294fig2large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a> <img alt="איור 3" src="/files/ftp_upload/53294/53294fig3.jpg" /> איור 3. stainings היסטולוגית של דרכי יצוא ורידי של AVF ביום 14 לעומת כלי שליטה unoperated (A - B). סקירה מורפולוגיים באמצעות hematoxylin, phloxin ו saffרון מראה עלייה ברורה בפיתוח היפרפלזיה היקף הספינה intimal 14 ימים ממועד יצירת AVF. (C - D) מכתים immunohistochemical הוכחת כי רוב התאים להציג את היפרפלזיה intimal הם אלפא שריר חלק אקטין חיובית. (L) לומן; (IH) היפרפלזיה intimal; סרגל:. 200 מיקרומטר <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53294/53294fig3large.jpg" target="_blank">אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.</a>

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail at JoVE.com

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

מודל Murine רומן של אי מורסה arteriovenous: ההליך הכירורגי בהרחבה

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

a-novel-murine-model-arteriovenous-fistula-failure-surgical-procedure

Universidad San Sebastian

Research

JoVE Journal

Medicine

12.9K Views.  Leiden University Medical Center. Here we present a murine model of arteriovenous fistula (AVF) failure in which a clinically relevant anastomotic configuration is incorporated. This model can be used to study the pathophysiology and to test possible therapeutic interventions.

Video: A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and acquired diseases. Apart from congenital or inherited abnormalities with the requirement for long-term expression of the delivered gene, several non-inherited perinatal conditions, where short-term gene expression or pharmacological intervention is sufficient to achieve therapeutic effects, are considered as potential future indications for this kind of approach. Candidate diseases for the application of short-term prenatal therapy could be the transient neonatal deficiency of surfactant protein B causing neonatal respiratory distress syndrome1,2 or hyperoxic injuries of the neonatal lung3. Candidate diseases for permanent therapeutic correction are Cystic Fibrosis (CF)4, genetic variants of surfactant deficiencies5 and &alpha;1-antitrypsin deficiency6.
Generally, an important advantage of prenatal gene therapy is the ability to start therapeutic intervention early in development, at or even prior to clinical manifestations in the patient, thus preventing irreparable damage to the individual. In addition, fetal organs have an increased cell proliferation rate as compared to adult organs, which could allow a more efficient gene or stem cell transfer into the fetus. Furthermore, in utero gene delivery is performed when the individual's immune system is not completely mature. Therefore, transplantation of heterologous cells or supplementation of a non-functional or absent protein with a correct version should not cause immune sensitization to the cell, vector or transgene product, which has recently been proven to be the case with both cellular and genetic therapies7.
In the present study, we investigated the potential to directly target the fetal trachea in a mouse model. This procedure is in use in larger animal models such as rabbits and sheep8, and even in a clinical setting9, but has to date not been performed before in a mouse model. When studying the potential of fetal gene therapy for genetic diseases such as CF, the mouse model is very useful as a first proof-of-concept because of the wide availability of different transgenic mouse strains, the well documented embryogenesis and fetal development, less stringent ethical regulations, short gestation and the large litter size.
Different access routes have been described to target the fetal rodent lung, including intra-amniotic injection10-12, (ultrasound-guided) intrapulmonary injection13,14 and intravenous administration into the yolk sac vessels15,16 or umbilical vein17. Our novel surgical procedure enables researchers to inject the agent of choice directly into the fetal mouse trachea which allows for a more efficient delivery to the airways than existing techniques18.

We developed a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents into the mouse fetus. The delivery route is more efficient in targeting the fetal mouse lungs than the commonly used intra-amniotic injection. This procedure has to date not been described in a mouse model.

גישה ניתוחית חדשנית למנהל Intratracheal של סוכני יו במודל של עכברים עוברי

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

מודל עכברי של ריפוי פצע

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

היבטים טכניים של מורסת Aortocaval מאוס

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation of the animal for surgery, opening the thoracic body wall, exposing the desired rib from the surrounding intercostal muscles, excising the desired section of rib without inducing a pneumothorax, and closing the incisions. Compared to the bones of the appendicular skeleton, the ribs are highly accessible. In addition, no internal or external fixator is necessary since the adjacent ribs provide a natural fixation. The surgery uses commercially available supplies, is straightforward to learn, and well-tolerated by the animal. The procedure can be carried out with or without removing the surrounding periosteum, and therefore the contribution of the periosteum to repair can be assessed. Results indicate that if the periosteum is retained, robust repair occurs in 1 - 2 months. We expect that use of this protocol will stimulate research into rib repair and that the findings will facilitate the development of new ways to stimulate bone repair in other locations around the body.

The overall goal of this procedure is to successfully resect a portion of bone from the rib of a mouse. The procedure was developed as a model to study large-scale long bone repair.

הליך כירורגי לResecting צלעות העכבר: מודל לתיקון עצם ארוך בקנה מידה גדולה

This protocol introduces researchers to a new model for large-scale bone repair utilizing the mouse rib. The procedure details the following: preparation ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

החדרת תרופות Intraluminal אל האנדותל מורסה arteriovenous עכבר

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

Murine Distal Colostomy, A Novel Model of Diversion Colitis in C57BL/6 Mice

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a diverting enterostomy. The etiology of this disease remains ill-defined but appears to differ from that of classical inflammatory bowel diseases such as Crohn's disease and ulcerative colitis. Research aimed to decipher the pathophysiological mechanisms leading to the development of this disease has been severely hampered by the lack of an appropriate murine model. This protocol generates a murine model of DC that facilitates the study of the immune system's role and its interaction with the microbiome in the development of DC. In this model using C57BL/6 animals, distal parts of the colon are excluded from the fecal stream by creating a distal colostomy, triggering the development of mild to moderate inflammation in the excluded bowel segments and reproducing the hallmark lesions of human DC with a moderate systemic inflammatory response. In contrast to the rat model, a large number of genetically-modified murine models on the C57BL/6 background are available. The combination of these animals with our model allows the potential roles of individual cytokines, chemokines, or receptors of bioactive molecules (e.g., interleukin (IL)-17; IL-10, chemokine CXCL13, chemokine receptors CXCR5 and CCR7, and the sphingosine-1-phosphate receptor 4) to be assessed in the pathogenesis of DC. The availability of congenic mouse strains on the C57BL/6 background largely facilitates transfer experiments to establish the roles of distinct cell types involved in the etiology of DC. Finally, the model offers the opportunity to assess the influences of local interventions (e.g., modification of the local microbiome or local anti-inflammatory therapy) on mucosal immunity in affected and non-affected bowel segments and the on systemic immune homeostasis.

Murine distal colostomy provides a murine model for human diversion colitis, a predominantly lymphocytic colitis in colon segment excluded from the fecal stream.

מאתר למעי הגס הדיסטלי, מודל הרומן של הסחה קוליטיס בעכברים C57BL/6

Diversion colitis (DC) is a frequent clinical condition occurring in patients with bowel segments excluded from the fecal stream as a result of a ...

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ligation of the inferior vena cava (IVC) in the outflow of the fistula, mimicking central venous stenosis. Technical aspects of this model are introduced. The aorta and IVC are exposed, following an abdominal incision. The infra-renal aorta and IVC are dissected for proximal clamping, and the distal aorta is exposed for puncture. The IVC at the midpoint between the left renal vein and the aortic bifurcation is carefully dissected to place an 8-0 suture beneath the IVC. After clamping the aorta and IVC, an AVF is created by puncturing the infra-renal aorta through both walls into the IVC with a 25 G needle, followed by ligating a 22 G intra-venous (IV) catheter and IVC together. The catheter is then removed, creating a reproducible venous stenosis without occlusion. The aorta and IVC are unclamped after confirming primary hemostasis. This novel model of central vein stenosis is easy to perform, reproducible, and will facilitate studies on AVF failure.

An aortocaval fistula was created by puncturing the murine infra-renal aorta through both walls into the inferior vena cava and was followed by creation of a stenosis in its outflow via partial ligation of the inferior vena cava. This reproducible model can be used to study central venous stenosis.

מודל מורנה של היצרות הורידים המרכזית באמצעות Aortocaval פיסטולה עם היצרות זרימה יוצאת

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

המודל הכירורגי של מורנה של Elastase אקטואלי המושרה מפרצת אבי העורקים החזי

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Creating Radio-cephalic Arteriovenous Fistula in the Forearm with a Modified No-Touch Technique

Autologous arteriovenous fistula (AVF) is the primary and best option to obtain vascular access for hemodialysis treatment; other options are arteriovenous graft (AVG) and central venous catheterization (CVC). The implementation of radio-cephalic autologous arteriovenous fistula (RC-AVF) in the forearm was preferred among patients with superior vascular conditions. However, there is a high rate of early fistula failure. The chosen surgical method is understood to have an effect on the maturation of the fistula. New surgical procedures such as radial artery deviation and reimplantation (RADAR) have been significantly improved for juxta-anastomotic stenosis. Nevertheless, new problems such as stenosis of arteries and narrowing of surgical indication were also found. In this report, we presented a modified no-touch technique (MNTT) to create an RC-AVF, in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.

We present a modified no-touch technique (MNTT) to create a radio-cephalic arteriovenous fistula (RC-AVF) in which the venous and arterial wall avoid devascularization and the radial artery does not sever.