Name: Video: Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees
Uploaded: 2017-06-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 19 s

Görsel takip yazılımı ve ekipmanının kullanımı için Dr. Thomas Kuhar&#39;a teşekkür etmek isteriz. Teknik yardımları için James Wilson ve Scott O&#39;Neal&#39;a teşekkür ediyoruz.

1. Şeker agaroz küpleri hazırlayın <ol><li> 8 g şekeri tartın ve 50 mL&#39;lik bir Erlenmeyer şişeye yerleştirin. </li><li> Erlenmeyer şişesini 20 mL deiyonize su ile doldurun. Şişeyi döndürerek şekeri çözün. </li><li> 170 mg agaroz tartın ve şeker solüsyonuna ekleyin. </li><li> Şeker-agaroz çözeltisini bir mikrodalga fırında 25 saniye süreyle yüksek ısıtın. Agarozu şeker çözeltisine çözün. </li><li> Şişe ve şeker agaroz çözeltisinin soğumasına izin verin. NOT: Şişenin teması için serin olmalıdır, ancak çözeltinin katılaşmasına izin vermeyin. <ol><li> Kontrol işlemi için bir şeker agaroz küpü hazırlamak için, yarı soğutulmuş şeker-agaroz çözeltisini bir tartım teknesi kalıbına dökün. NOT: Ağırlık ölçüsü 1.5 x 1.5 x 0.3 cm 3 boyutundadır. </li><li> Kovucu tedavi için bir şeker agarozu-bileşik küpü hazırlamak için istenen miktarda bileşiği yarı soğutulmuş çözeltiye ekleyin ( örn. ,% 1 DEETUgar-agaroz çözeltisi (hac / hac)). Bileşimi karıştırmak için şişeyi döndürünüz ve daha sonra çözelti bir tartım teknesi kalıbına dökün. NOT: Bu noktada sekiz kontrol kalıbı ve sekiz test kalıbı hazırlanacaktır. Kontrol kalıpları itici içermez. </li></ol></li><li> 5-10 dakika boyunca bir buzdolabında kalıplarda şeker agaroz küpleri soğutun. Katılaşmış şeker agaroz küplerini tartım teknesi kalıplarından çıkarın ve nemli bir kağıt havlu içeren plastik bir kap içine yerleştirin. </li><li> Depolama için kapları bir buzdolabına yerleştirin. Şeker agaroz küpleri, hazırlandıktan sonraki 7 gün içinde kullanılmalıdır. </li></ol> 2. Video İzleme Yazılımının ve Deneysel Kurulumun Programlanması <ol><li> Ekranın sol tarafında bulunan Deneme Gezgini çubuğundaki (izleme yazılımında, Malzeme Tablosuna bakın) Deneme Ayarları altında, doğru kameranın seçili olduğundan ve video kaydının petri alanlarında ortalandığından emin olun.<ol><li> Video kaydı merkezileştirilmelidir, kameranın ayarlarına ve AOI kontrollerinin altına gidin ve merkez X ve orta Y seçeneklerini seçin. </li></ol></li><li> Deneme Ayarları&#39;nın altında, arenaların sayısını 16 olarak değiştirin. İzlenen Özellikler altında Orta nokta tespiti&#39;ni seçin. </li><li> Test için arena ayarlamak için Arena Ayarları&#39;nı seçin. <ol><li> 16 Petri kabını, kameranın altına yerleştirilmiş bir ışık kutusu üzerine 4 x 4 desen yerleştirin ( Şekil 1 ). NOT: Bu kaplar kayıt alanını oluşturmak için kullanılır ve boştur. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig1.jpg" /> Şekil 1: Işık kutusundaki petri tabağı düzenlemesi. Petri kapları, ışık kutusunun üstünde 4 x 4 blok halinde düzenlenmiştir. Bu düzenleme, v için kontrol ve itici işlemlerin kolaylıkla tanımlanmasını sağlarIz izleme protokolü. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="4"><li> Arena Ayarları&#39;nda, 16 petri tabağının resmini çekmek için sağ taraftaki alet panelinde bulunan kapmak arka plan düğmesini kullanın. Bu, arena kurulması için şablon olarak kullanılacaktır. </li><li> Arena Ayarları ekranının üst kısmındaki araç çubuğundan &quot;Elips oluştur&quot; u seçin ve yakalanan resimdeki petri kaplarından birinin çapıyla eşleşen bir daire oluşturun. Arena 1 işaretleyiciyi daireye yerleştirin ( Şekil 2 ). </li></ol><img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig2.jpg" /> Şekil 2: Görsel İzleme Yazılımı Arena Ayarlarının Ekran Görüntüleri. Çember içinde diyagonal şeritlerin gözlemlenmesi, dairenin algılama alanının onaylanmasını sağlar. bir<html> Her kare için Bölge 1 işaretleyici sağlanır ve her Petri kabının hedef bölgesini tanımlar. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="6"><li> Sağ taraf araç panelinde Arena 1&#39;in altında yer alan &quot;Bölge Grubu 1&quot; i seçin. Ekranın üst kısmındaki araç çubuğundan &quot;Dikdörtgen Oluştur&quot; u seçin. Bunu kullanarak 30 x 30 piksellik bir kare oluşturun ve daha sonra önceki aşamada oluşturulan çemberin ortasına yerleştirin. Üst araç çubuğundan &quot;Bölge Ekle&quot; yi seçin ve ardından karenin ortasını tıklayın. Alan 1 işaretçisini kare içinde olacak şekilde taşıyın. NOT: Oluşturulan kare besleme bölgesidir ve besleme bölgesinin tam olarak şeker agaroz küpten biraz daha büyük olduğu sürece listelenen boyutla aynı olması şart değildir. </li></ol>Les / ftp_upload / 55603 / 55603fig3.jpg &quot;/&gt; Şekil 3: Tamamlanan Arena Ayarlarının Ekran Görüntüleri. Tamamlanmış saha ayarları bu örneğe benzetilmelidir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="7"><li> Sağ taraftaki araç panelinde &quot;Arena 1&quot; i seçin ve ardından tüm arena kopyasını tıklayın. Açılır menüden &quot;All Other Arenas&quot; ı seçin ve ardından ok tıklayın. Kopyalanan arena ayarlarını, yakalanan resimdeki kalan petri kaplarına taşıyın (Şekil 3). <ol><li> &quot;Arena 1&quot; i seçin ve ardından üst araç çubuğunda &quot;Ölçek Kalibrasyonu&quot; nu seçin. Kalibrasyon çizgisini Arena 1 Petri kabının çapı boyunca çizin. Çap ölçümünü 9 cm&#39;ye (kullanılan Petri kaplarının çapı) değiştirin. Sağ taraf araç panelinde &quot;Arena Ayarlarını Doğrula&quot; seçeneğini seçin. </li></ol></li><li> Seç &quot;Algılama Ayarları &quot;nı tıklayın. </li><li> &quot;Algılama Ayarları 1&quot; i seçin ve ardından sağdaki alet kutusunda bulunan açılır menüden &quot;Gri Ölçeklendirme&quot; seçeneğini seçin. Algılama altında, aralığı 0 ila 83 olacak şekilde ayarlayın ( Şekil 4A ). </li><li> &quot;Tespit Ayarları&quot; na sağ tıklayın ve &quot;Algılama Ayarları 2&quot; adlı yeni bir ayar yapın. &quot;Gri Ölçeklendirme&quot; hala seçili olduğundan emin olun, ancak diğer parametreleri değiştirmeyin. NOT: Alanlar üzerinde video penceresinde büyük sarı daireler olacaktır. Bu, kayıttan önce Petri kaplarının doğru pozisyonlara yerleştirilmesine yardımcı olacaktır ( Şekil 4B ). </li></ol><img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig4.jpg" /> Şekil 4: Tespit Ayarları 1 ve 2&#39;nin Ekran Görüntüsü. ( A ) Grafik ölçeklendirme için düzeltilmiş arena&#39;nın nasıl olacağını gösterir.Bal arısı bir petri tablasına tabi tutulur. ( B ) Petri kaplarının konumlandırılması denemeler arasında yapılabilmesi için arena algılama alanını gösterir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="11"><li> Deneysel Gezgini&#39;nde &quot;Deneme Listesi&quot; ni seçin ve üst araç çubuğunda &quot;Değişken Ekle&quot; yi tıklayın. Kullanıcı tanımlı değişkeni &quot;Tedavi&quot; olarak adlandırın. Kullanıcı tanımlı Tedavi sütunundaki &quot;Önceden Tanımlı Değerler&quot; açılır çubuğunu seçin ve Önceden Tanımlı Değerler olarak C (kontrol) ve T (tedavi) değerlerini ekleyin. Üst araç çubuğunda bulunan &quot;Denemeleri Ekle&quot; düğmesini seçin. İki deneme yapın, sonra her arenada bir kontrol arenası (C) mi yoksa tedavi arenası mı (T) mi olduğunu seçin ( Şekil 5 ). </li></ol><img alt="Şekil 5" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig5.jpg" /> FiGure 5: Deneme Listesinin Ekran Görüntüsü. Arenaları doğru etiketlemek burada önemlidir, çünkü burada veriyi istatistiksel olarak analiz etmek için verileri ayıran bilgiler kullanılıyor. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="12"><li> Deneme Gezgini panelinin altındaki &quot;Veri Profili&quot; ni seçin. Sol sütunda &quot;Kullanıcı Tanımlı Bağımsız Değişkenler&quot; başlığı altında bulunan &quot;Tedavi&quot; yi seçin. Bu, akış şeması bulunan bölgeye bir &quot;Filtre&quot; kutusu ekleyecektir. Açılan pencerede &quot;C&quot; yi seçin ve ardından yeni oluşturulan filtreyi &quot;Başlat&quot; kutusuyla &quot;Sonuç 1&quot; kutusu arasına yerleştirin. Akış şeması okları, başlangıç ​​kutusundan filtreye ve sonunda sonuç olarak işaret edecek şekilde ayarlanmalıdır 1. <ol><li> Adım 2.12&#39;yi tekrarlayın, ancak bu sefer filtre için &quot;T&quot; seçin ve ardından&quot;Ortak Elemanlar&quot; bölümünün altındaki &quot;Sonuç&quot;. Yeni oluşturulan kutuları akış şeması alanına taşıyın ve kutuları oklarla bağlayın ( Şekil 6 ). </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 6" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig6.jpg" /> Şekil 6: Veri Profilinin Ekran Görüntüleri. Bu, istatistiksel analizde uygun ayrımı elde etmek için akış şemasının nasıl kurulması gerektiğini gösterir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="13"><li> Dosyayı kaydedin. </li></ol> 3. Bal arısı bireyleri toplamak <ol><li> Koruyucu kıyafetler koyun ve arılar (çoğunlukla foragers) toplamak için bir kovan seçin. </li><li> Kovanın dış ve iç kapağını çıkarın. Kovan içermeyen üst kovan gövdesinden bir çerçeve seçmek için bir kovan aracı kullanın.Çerçeveyi hafifçe kaldırma kutusundan çıkarın. </li><li> Çerçeveyi bal arı kraliçesi için kontrol edin. Orada değilse, bal arısı işçilerini çerçeveden alıp nakliye için bir kapa yerleştirin. Test edilecek her bileşik için iki tam deneme yapabilmek için yeteri kadar kişi toplayın (kontrol grubu olan denek başına 16 kişi kullanılır). NOT: Toplanan bireyler öncelikli olarak hazırlayıcı olmalıdır; Bununla birlikte, koleksiyonda hemşire arıları gibi yaşlı kişiler de olabilir. </li><li> Bal arılarının çıkarıldığı zamanı not edin. Hava delikleri içeren 9 cm x 7 cm x 9 cm&#39;lik bir plastik kutuya aktarın ve 32 ° C&#39;de ve% 70 bağıl nemdeki bir inkübatöre yerleştirin. </li><li> Bal arılarını 15 saat boyunca aç bırakın. NOT: Bal arıları test edilmeden önce akşamlar toplanırsa genellikle iyi olur. </li></ol> 4. Görsel İzleme Testi Yapın <ol><li> Görsel izleme programını başlatın ve kaydetmeyi açın.Bu deney için yaratılan deney dosyası. </li><li> &quot;Tespit Ayarları 2&quot; ni seçin. </li><li> Kontrol şeker agaroz küpleri 16 Petri tabağının 8&#39;inin merkezlerine yerleştirin. Kalan 8 yemekte şeker agaroz bileşiği (caydırıcılık) küpleri ile bu işlemi tekrarlayın. </li><li> Tek bir bal arısını plastik kutusundan çıkarmak için forseps kullanın ve kontrol petri kaplarından birine yerleştirin. </li><li> Geriye kalan 15 Petri tabağı için 4.4 adımını tekrarlayın. </li><li> Tüm yemekleri ışık kutusunun üzerine yerleştirin ve arena algılama alanlarının (algılama ayarı 2 seçildiğinde bilgisayar ekranında gösterilen) her petri tablasına sığacak şekilde konumlandırın. Kırmızı spektruma ayarlanmış bir dizi LED ışığı altındaki ışık kutusunu alttan aydınlatın. Harici ışığı ortadan kaldırmak ve alanlardaki gölgeleri azaltmak için tüm kutuyu ve kamerayı siyah bir plastik tabaka ile çevreledi. </li><li> Petri tabakları ayarlandıktan sonra, &quot;Algılama Ayarları 1&quot;Seçili ayar. NOT: Bu noktada, görsel izleme yazılımı yalnızca petri kabı arenalarında bal arılarını toplamalıdır. </li><li> Deneme Gezgini&#39;nden &quot;Edinme&quot; yi seçin. Kaydı başlatmak için sağdaki Acquisition Control açılır kutusunda bulunan yeşil &quot;Start Trial&quot; düğmesine basın. </li><li> Testi 10 dakika boyunca çalıştırın ve kaydetmeyi durdurmak için Acquisition Control pop-up kutusunda kırmızı &quot;Stop Trial&quot; düğmesine tıklayın. </li><li> Petri kaplarından kişileri çıkarın ve iki kez test edilmemeleri için ayrı bir kapta bırakın. </li><li> Aynı bileşik üzerindeki ikinci deneme için 4.4-4.10 arasındaki adımları tekrarlayın. NOT: Bu yöntem kullanıcı başına ihtiyaç duyulan arı başına arıların arıtılması için değiştirilebilir. </li><li> Deneme Gezgini&#39;nde İstatistik&#39;i seçin ve ardından hesapla&#39;yı tıklayın. </li><li> Verileri bir veri yöneticisi yazılımına dışa aktarın ve daha sonra bir-w kullanarak bir veri kullanarak önem derecesini analiz edinBir Tukey&#39;nin post-testi ile varyans analizi ve tercih edilen istatistiksel yazılım programı kullanılarak bir eşleştirilmemiş t-testi. </li></ol>

<ol>
	<li>Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissi&#232;re, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+valuation+of+the+vulnerability+of+world+agriculture+confronted+with+pollinator+decline.">Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline.</a> Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).</li><li>van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+historical+review+of+managed+honey+bee+populations+in+Europe+and+the+United+States+and+the+factors+that+may+affect+them.">A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and the factors that may affect them.</a> J Invertebr Pathol. 103, S80-S95 (2010).</li><li>Aizen, M. A., Harder, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Global+Stock+of+Domesticated+Honey+Bees+Is+Growing+Slower+Than+Agricultural+Demand+for+Pollination.">The Global Stock of Domesticated Honey Bees Is Growing Slower Than Agricultural Demand for Pollination.</a> Current Biol. 19 (11), 915-918 (2009).</li><li>Smith, K. M., Loh, E. H., Rostal, M. K., Zambrana-torrelio, C. M., Mendiola, L., Daszak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogens,+Pests,+and+Economics+Drivers+of+Honey+Bee+Colony+Declines+and+Losses.">Pathogens, Pests, and Economics Drivers of Honey Bee Colony Declines and Losses.</a> Ecohealth. 10, 434-445 (2014).</li><li>Mullin, C. A., Frazier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Levels+of+Miticides+and+Agrochemicals+in+North+American+Apiaries:+Implications+for+Honey+Bee+Health.">High Levels of Miticides and Agrochemicals in North American Apiaries: Implications for Honey Bee Health.</a> PLoS ONE. 5 (3), (2010).</li><li>Li, Y., Kelley, R. A., Anderson, T. D., Lydy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+comparison+of+two+multi-residue+methods+for+the+analysis+of+select+pesticides+in+honey+bees,+pollen,+and+wax+by+gas+chromatography+-+quadrupole+mass+spectrometry.">Development and comparison of two multi-residue methods for the analysis of select pesticides in honey bees, pollen, and wax by gas chromatography - quadrupole mass spectrometry.</a> Talanta. 140, 81-87 (2015).</li><li>Kakumanu, M. L., Reeves, A. M., Anderson, T. D., Rodrigues, R. R., Williams, M. A., Williams, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey+Bee+Gut+Microbiome+Is+Altered+by+In-Hive+Pesticide+Exposures.">Honey Bee Gut Microbiome Is Altered by In-Hive Pesticide Exposures.</a> Front Microbiol. 7, 1-11 (2016).</li><li>Katz, T. M., Miller, J. H., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+Historical+perspectives+and+new+developments.">Insect repellents: Historical perspectives and new developments.</a> J Am Acad Dermatol. 58 (5), 865-871 (2008).</li><li>Dickens, J. C., Bohbot, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini+review:+Mode+of+action+of+mosquito+repellents.">Mini review: Mode of action of mosquito repellents.</a> Pestic Biochem Phys. 106 (3), 149-155 (2013).</li><li>Lawrence, K. L., Achee, N. L., Bernier, U. R., Mundal, K. D., Benante, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+Evaluations+of+Topical+Arthropod+Repellents+in+North,+Central,+and+South+America.">Field Evaluations of Topical Arthropod Repellents in North, Central, and South America.</a> J Med Entomol. 51 (5), 980-988 (2014).</li><li>Collins, A. M., Rubink, W. L., Cuadriello Aguilar, ., I, J., Hellmich Ii, ., L, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+insect+repellents+for+dispersing+defending+honey+bees+(Hymenoptera+Apidae).">Use of insect repellents for dispersing defending honey bees (Hymenoptera Apidae).</a> J Econ Entomol. 89 (3), 608-613 (1996).</li><li>Brown, M., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+An+overview.">Insect repellents: An overview.</a> J Am Acad Dermatol. 36 (2), 243-249 (1997).</li><li>Teeters, B. S., Johnson, R. M., Ellis, M. D., Siegfried, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+video-tracking+to+assess+sublethal+effects+of+pesticides+on+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Using video-tracking to assess sublethal effects of pesticides on honey bees (Apis mellifera L.).</a> Environ Toxicol Chem. 31 (6), 1349-1354 (2012).</li><li>Vallet, A., Cassier, P., Lensky, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+the+fine+structure+of+the+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+workers+and+the+pheromonal+activity+of+2-heptanone.">Ontogeny of the fine structure of the honeybee (Apis mellifera L.) workers and the pheromonal activity of 2-heptanone.</a> J Insect Physiol. 37 (11), 789-804 (1991).</li><li>Free, J. B., Ja Pickett, ., Ferguson, a. W., Simpkins, J. R., Smith, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repelling+foraging+honeybees+with+alarm+pheromones.">Repelling foraging honeybees with alarm pheromones.</a> J Agr Sci. 105 (2), 255 (1985).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu görsel izleme protokolü, bal arılarında kimyasal koruyucu önlemleri nispeten hızlı ve kolay bir şekilde basit bir yaklaşım sağlar. Bal arılarında kimyasal caydırıcı maddelerin laboratuar testleri için önerilen protokoller yoktur. Önceki yarı ve tam saha çalışmaları bal arısı kovucularını incelemişlerdir 14 , 15 ; Ancak tarif edilen protokoller zaman alıcı, emek gerektiren ve genel laboratuvarın dışında ek tesis kaynaklarına...

Avrupa bal arısı Apis melliferaL. , Küresel olarak 200 milyar doların üzerinde değerinde polen servisleri sağlayan ekonomik ve tarımsal açıdan önemli bir böcektir. Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde ve Avrupa&#39;da, bal arısı koloni sayıları azalmaktadır. Amerika Birleşik Devletleri ca kaybetti. 1947-2008 yılları arasında yönetilen bal arısı kolonilerinin% 60&#39;ı Avrupa&#39;yı kaybetti. 1961-2007 arası% 27 , 2 , 3 . Parazit enfestasyonları, patojen enfeksiyonları, arıcılık uygulamaları ve böcek ilacı kullanımı 2 - 4 de dahil olmak ancak bunlarla sınırlı kalmamak üzere koloni kayıplarının sayısının artmasından sorumlu olabilecek bir takım faktörler vardır. Bal arıları pestisitlere iki ana yolla maruz kalabilir. Kovan dışına pestisit maruziyeti, bireyleri yemleme,Zararlılardan korunmak için kimyasallarla püskürtülmüştür. Kovanda pestisit maruz kalma arıcılar, akarlar, bakteriler ve mikrosporidya gibi haşere zararlılarını ve patojeni kontrol etmek için kimyasallar kullandığında ortaya çıkabilir 4 . Pestisit kalıntıları, Amerika Birleşik Devletleri ve Kanada&#39;daki 24 apiaryardan balmumu, polen ve bal arısı örnekleri içerisinde tespit edilmiştir 5 , 6 . Pestisit ile bal arılarındaki etkiler akut toksisite yanı sıra paralizi, yönelim bozukluğu ve davranışsal ve sağlık değişiklikleri gibi ölümcül olmayan etkileri içerir 1 , 7 . Modern tarım, yüksek ürün verimi elde etmek için böcek ilacı kullanımını gerektirdiğinden, bu kimyasallar gelecekte kullanılmaya devam edecektir 2 . Bal arılarını pestisit maruziyetlerinden daha iyi korumak için yeni protokol ve düzenlemelerin geliştirilmesine ihtiyaç vardır 5 .Koruma için olası bir yaklaşım, bal arılarının pestisitlere maruz kalmasını azaltmak için kovucuların kullanılmasıdır. Böcek iticileri (IR) genellikle eklem bacaklı hastalık vektörlerine karşı kişisel ısırık koruma önlemleri olarak kullanılmıştır 8 . 60 yıldan daha önce geliştirilen en yaygın kullanılan ve başarılı IR, DEET 8 , 9&#39;dur . Böcek kovucu testlerin altın standartı olarak kabul edilir ve Dünya Sağlık Örgütü ve Çevre Koruma Ajansı tarafından yeni kovucuların taranması için olumlu bir kontrol olarak kullanılır 10 . Buna ek olarak, DEET&#39;in bal arılarını sömürgelerine yönelik bir tehditten dağıttığı tespit edilmiştir 11 . Kişisel IR&#39;lerle ilişkili güncel özellikler şunları içerir: (1) çok sayıda artropoda karşı sürekli etki; (2) cilde veya giysilere uygulandığında kullanıcıyı rahatsız etmeyen; (3) kokusuz veyaHoş koku; (4) kıyafet üzerinde herhangi bir etkisi yoktur; (5) cilde uygulandığında yağışsız görünme; kullanıcının terleme, yıkama ve silme işlemlerine dayanması; (6) yaygın olarak kullanılan plastikler üzerinde herhangi bir etkisi yoktur; Ve (7) kimyasal olarak istikrarlı ve yaygın kullanım için uygun fiyatlı 12 . Bal arılarında kullanılan bir kovucu, kalıcı etkiler, aplikatörler için tahriş edici olmayan, kokusuz veya hoş koku, kimyasal olarak kararlı ve yaygın kullanım için uygun ve bal arılarına toksik olmayan gibi bazı özelliklere ihtiyaç duyar. Bununla birlikte, bu nitelikleri derinlemesine araştırmadan önce, yüksek performanslı bir şekilde, iticilik / caydırıcılık için bileşikleri taramak için bir yöntem gereklidir. Burada, bal arılarının caydırılması için bileşikleri taramak için bir laboratuar tahlili için bir protokol açıklıyoruz, bu da iticiliğin belirlenmesinde önemli bir adımdır. Aşağıdaki protokol, pestisitlerin bal arılarında zehirli etkilerini değerlendirmek için görsel izleme yöntemini açıklayan önceki bir çalışmadan değiştirildi 13 . HoweVer, bu protokol, bal arılarını pestisit ile işleme tabi tutulan bitkilerden caydırabilecek aday iticilerin etkilerini ölçmek üzere tasarlandığından farklıdır. Bal arılarında kimyasal caydırıcıların laboratuar testleri için önerilen protokoller yoktur ve bu nedenle bu protokol bu tür bileşiklerin taranmasına basit bir yaklaşım sağlar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="573">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">50 mL Erlenmeyer flask</td>
			<td style="width:71px;">Kimax</td>
			<td style="width:119px;">26500-50</td>
			<td style="width:167px;">used for making the sugar/agarose cubes</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Sugar</td>
			<td style="width:71px;">Kroger</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any similar product will sufffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Deionized water</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>acquired in house</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Agarose</td>
			<td style="width:71px;">Apex</td>
			<td style="width:119px;">20-102</td>
			<td>used for making the sugar/agarose cubes</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Mold for agarose cubes (Weigh Boat)</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any mold that will provide the researcher with a 1.5 X 1.5 X 0.3 cm sugar/agarose cube will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">EthoVision XT</td>
			<td style="width:71px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>visual tracking software</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">633 nm LEDs</td>
			<td style="width:71px;">Cyron</td>
			<td>HTP904E</td>
			<td>These lights were placed into a constructed light box to illuminate the arenas from below.&#160; The box was a simple wooden structure with a frosted plastic/plexi glass cover that allowed the light to disperse upwards without any glare.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Laptop or PC</td>
			<td style="width:71px;">Dell</td>
			<td style="width:119px;">Inspiron One 2305</td>
			<td>necessary for video tracking software. Any pc device capable of runnin tbe visual tracking software will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Bee Keeping protective clothing</td>
			<td style="width:71px;">Dadant &#38; Sons Inc</td>
			<td style="width:119px;">V0126</td>
			<td>any protective hood and jacket will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Hive tool</td>
			<td style="width:71px;">Dadant &#38; Sons Inc</td>
			<td style="width:119px;">M00757</td>
			<td>used to open honey bee hive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Container for honey bees</td>
			<td style="width:71px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any container suitable for housing and storing honey bees will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Featherweight forceps narrow tip</td>
			<td style="width:71px;">Bioquip</td>
			<td align="right" style="width:119px;">4748</td>
			<td>used to select individual honey bees</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">9 cm (diameter) petri dish</td>
			<td style="width:71px;">Fisher Scientific&#160;</td>
			<td style="width:119px;">S01778</td>
			<td>arena used to contain individual honey bees during video tracking</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Recording Device (Camera)</td>
			<td style="width:71px;">Basler</td>
			<td style="width:119px;">acA-1300-60gm</td>
			<td>any device that can record the subject clearly and transfer the file to a computer will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">GraphPad Prism</td>
			<td style="width:71px;">Graphpad</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>any statistical software package will suffice</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees

Avrupa bal arısı Apis mellifera L. , yılda milyarlarca dolar üreten ekonomik ve tarımsal açıdan önemli bir tozlaştırıcıdır. Bal arısı koloni sayıları, 1947&#39;den beri Birleşik Devletler&#39;de ve birçok Avrupa ülkesinde azalmaktadır. Bal arılarının böcek ilacına kasıtsız olarak maruz kalması da dahil olmak üzere, bu düşüşte bir takım faktörler rol oynamaktadır. Yeni yöntem ve düzenlemelerin geliştirilmesi, bu tozlayıcılara uygulanan pestisitlerin azaltılması için garanti altına alınmıştır. Bir yaklaşım, kısa süre önce pestisit ile işleme tabi tutulan bir bitkiden bal arılarını caydıran kovucu kimyasal maddelerin kullanılmasıdır. Burada, seçici itici kimyaları maruz bırakan bal arılarının caydırıcılığını ayırt etmek için bir protokolü açıklıyoruz. Bal arısı toplayıcıları, testten 15 saat önce toplanır ve gece boyunca bir inkübatörde aç bırakılır. Bireysel bal arıları şeker agarozu küpü (kontrol muamelesi) veya şeker agarozu bileşik küpü (itici muamele) bulunan Petri kaplarına yerleştirilirÇanağın ortasına kadar. Petri kabı, video izleme yazılımı kullanarak bal arısı lokomotif etkinliklerini kaydetmek için bir ışık kutusuna bir kameranın altına yerleştirilen arena görevini görür. Toplam 8 kontrol ve 8 itici tedavi, 10 dakika süreyle analiz edildi ve her bir tedavi yeni bal arısı ile tekrarlandı. Burada bal arılarının şeker agaroz küplerinden birleşik bir muamele ile caydırıldığını, arı arılarının şeker agaroz küplerine eklenen bir bileşik olmadan çekildiğini gösteriyoruz.

Bal arılarının bir hedef bölgede harcanan zaman miktarını ya şeker agarozu (kontrol muamelesi) ya da şeker agarozu bileşik küpü (caydırıcılık tedavisi) ile kaydetmek için görsel izleme protokolü geliştirildi. Kaydedilen zaman, istatistiksel bir yazılım programı kullanılarak analiz edildi ve hedef bölgede harcanan ortalama ± standart hata çubuk grafik olarak rapor edildi. Bu protokole böcek kovucu / caydırıcılık testi için altın standart olan DEET, pozitif...

Watch this Scientific Journal Video about Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees at JoVE.com

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

Bal arısı kolonilerinin kaybı ekin tozlama hizmetleri için bir meydan okuma sunar. Günümüzdeki polinatör koruma uygulamaları, bal arılarının kovucu kimyaları kullanarak zararlı böcek ilacıyla temasını en aza indirmek için alternatif bir yaklaşım garanti etmektedir. Burada, arılar için caydırıcı maddeleri taramak için görsel izleme protokolü için ayrıntılı yöntemler sunuyoruz.

Bal Arıları İçin Ekran Koruma Kimyagerleri için Video İzleme Protokolü

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

video-tracking-protocol-to-screen-deterrent-chemistries-for-honey-bees

Research

JoVE Journal

Environment

6.6K Görüntüleme.  Virginia Tech.  Bal arısı kolonilerinin kaybı ekin tozlama hizmetleri için bir meydan okuma sunar. Günümüzdeki polinatör koruma uygulamaları, bal arılarının kovucu kimyaları kullanarak zararlı böcek ilacıyla temasını en aza indirmek için alternatif bir yaklaşım garanti etmektedir. Burada, arılar için caydırıcı maddeleri taramak için görsel izleme protokolü için ayrıntılı yöntemler sunuyoruz. 

Video: Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect (Cryptococcus fagisuga Lind.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The disease is initiated by feeding activities of the invasive beech scale insect, Cryptococcus fagisuga, which creates entry points for infection by one of the Neonectria species of fungus.&#160;Without scale infestation, there is little opportunity for fungal infection. Using scale eggs to artificially infest healthy trees in heavily BBD impacted stands demonstrated that these trees were resistant to the scale insect portion of the disease complex1.&#160;Here we present a protocol that we have developed, based on the artificial infestation technique by Houston2, which can be used to screen for scale-resistant trees in the field and in smaller potted seedlings and grafts.&#160;The identification of scale-resistant trees is an important component of management of BBD through tree improvement programs and silvicultural manipulation.

A Technique to Screen American Beech for Resistance to the Beech Scale Insect Cryptococcus fagisuga Lind.

Beech bark disease is initiated by feeding activities of the beech scale insect that create fungal entry points in the bark.&#160;Trees that are resistant to the scale insect are also disease resistant.&#160;Here we present the protocol we have developed to screen individual beech trees for beech scale resistance.

Kayın Ölçek Böcek Direnç Amerikan kayını (Screen A Tekniği<em&gt; Cryptococcus fagisuga</em&gt; Lind.)

Beech bark disease (BBD) results in high levels of initial mortality, leaving behind survivor trees that are greatly weakened and deformed.&#160;The ...

Çevre

Experimental Protocol for Manipulating Plant-induced Soil Heterogeneity

Coexistence theory has often treated environmental heterogeneity as being independent of the community composition; however biotic feedbacks such as plant-soil feedbacks (PSF) have large effects on plant performance, and create environmental heterogeneity that depends on the community composition. Understanding the importance of PSF for plant community assembly necessitates understanding of the role of heterogeneity in PSF, in addition to mean PSF effects. Here, we describe a protocol for manipulating plant-induced soil heterogeneity. Two example experiments are presented: (1) a field experiment with a 6-patch grid of soils to measure plant population responses and (2) a greenhouse experiment with 2-patch soils to measure individual plant responses. Soils can be collected from the zone of root influence (soils from the rhizosphere and directly adjacent to the rhizosphere) of plants in the field from conspecific and heterospecific plant species. Replicate collections are used to avoid pseudoreplicating soil samples. These soils are then placed into separate patches for heterogeneous treatments or mixed for a homogenized treatment. Care should be taken to ensure that heterogeneous and homogenized treatments experience the same degree of soil disturbance. Plants can then be placed in these soil treatments to determine the effect of plant-induced soil heterogeneity on plant performance. We demonstrate that plant-induced heterogeneity results in different outcomes than predicted by traditional coexistence models, perhaps because of the dynamic nature of these feedbacks. Theory that incorporates environmental heterogeneity influenced by the assembling community and additional empirical work is needed to determine when heterogeneity intrinsic to the assembling community will result in different assembly outcomes compared with heterogeneity extrinsic to the community composition.

Understanding the role of environmental heterogeneity in species coexistence has typically focused on types of heterogeneity that are extrinsic to the community&#8217;s species composition. We provide novel detailed methods for creating soil heterogeneity treatments using soils subject to plant-soil feedback conditioning, or heterogeneity intrinsic to the community composition.

Kurgulama Bitki kaynaklı Toprak Heterojen Deneysel Protokol

Coexistence theory has often treated environmental heterogeneity as being independent of the community composition; however biotic feedbacks such as ...

A Protocol for Conducting Rainfall Simulation to Study Soil Runoff

Rainfall is a driving force for the transport of environmental contaminants from agricultural soils to surficial water bodies via surface runoff. The objective of this study was to characterize the effects of antecedent soil moisture content on the fate and transport of surface applied commercial urea, a common form of nitrogen (N) fertilizer, following a rainfall event that occurs within 24&#160;hr&#160;after fertilizer application. Although urea is assumed to be readily hydrolyzed to ammonium and therefore not often available for transport, recent studies suggest that urea can be transported from agricultural soils to coastal waters where it is implicated in harmful algal blooms. A rainfall simulator was used to apply a consistent rate of uniform rainfall across packed soil boxes that had been prewetted to different soil moisture contents. By controlling rainfall and soil physical characteristics, the effects of antecedent soil moisture on urea loss were isolated. Wetter soils exhibited shorter time from rainfall initiation to runoff initiation, greater total volume of runoff, higher urea concentrations in runoff, and greater mass loadings of urea in runoff. These results also demonstrate the importance of controlling for antecedent soil moisture content in studies designed to isolate other variables, such as soil physical or chemical characteristics, slope, soil cover, management, or rainfall characteristics. Because rainfall simulators are designed to deliver raindrops of similar size and velocity as natural rainfall, studies conducted under a standardized protocol can yield valuable data that, in turn, can be used to develop models for predicting the fate and transport of pollutants in runoff.

A rainfall simulator was used to apply a consistent rate of uniform rainfall to packed soil boxes in a study of the fate and transport of urea, a nonpoint source environmental contaminant. Under uniform soil and rainfall conditions, antecedent soil moisture content exerted strong control over urea loss in surface runoff.

Toprak Debinin Eğitim için Yağmur Simülasyon yürütülmesi için protokol

Rainfall is a driving force for the transport of environmental contaminants from agricultural soils to surficial water bodies via surface runoff. The ...

A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

Preventing colonization of bird nest boxes by invasive Africanized honey bees is important for conservation efforts of nest-site limited birds. We provide an integrated pest management approach to &#34;push&#34; bees away from nest boxes with a repellant insecticide, permethrin, and &#34;pull&#34; them toward pheromone baited swarm traps.

Bir Push-pull Protokolü Bal Arısı ile kolonizasyon Bird Nest Kutular azaltmak için

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

A Protocol for Collecting and Constructing Soil Core Lysimeters

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the landscape has complex and varied soil morphology, an accompanying disparity in flow paths for leachate through the soil macropore and matrix structure is present. The rate of flow through these paths is further affected by antecedent soil moisture. Lysimeters are used to quantify flow rate, volume of water and concentration of nutrients leaching downward through soils. While many lysimeter designs exist, accurately determining the volume of water and mass balance of nutrients is best accomplished with bounded lysimeters that leave the natural soil structure intact. 
Here we present a detailed method for the extraction and construction of soil core lysimeters equipped with soil moisture sensors at 5 cm and 25 cm depths. Lysimeters from four different Coastal Plain soils (Bojac, Evesboro, Quindocqua and Sassafras) were collected on the Delmarva Peninsula and moved to an indoor climate controlled facility. Soils were irrigated once weekly with the equivalent of 2 cm of rainfall to draw down soil nitrate-N concentrations. At the end of the draw down period, poultry litter was applied (162 kg TN ha-1) and leaching was resumed for an additional five weeks. Total recovery of applied irrigation water varied from 71% to 85%. Nitrate-N concentration varied over the course of the study from an average of 27.1 mg L-1 before litter application to 40.3 mg L-1 following litter application. While greatest flux of nutrients was measured in soils dominated by coarse sand (Sassafras) the greatest immediate flux occurred from the finest textured soil with pronounced macropore development (Quindocqua).

A detailed method for extraction and assembly of intact soil core lysimeters and their use for study of leachate and associated loss of nutrients from surface applied poultry litter is demonstrated.

Toprak Çekirdek lizimetereleri Toplama ve oluşturulması için bir protokol

Leaching of nutrients from land applied fertilizers and manure used in agriculture can lead to accelerated eutrophication of surface water. Because the ...

Protocol for Microplastics Sampling on the Sea Surface and Sample Analysis

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of scientific publications address microplastic pollution of the sea surface. The protocol below describes the methodology for sampling, sample preparation, separation and chemical identification of microplastic particles. A manta net fixed on an &#187;A frame&#171; attached to the side of the vessel was used for sampling. Microplastic particles caught in the cod end of the net were separated from samples by visual identification and use of stereomicroscopes. Particles were analyzed for their size using an image analysis program and for their chemical structure using ATR-FTIR and micro FTIR spectroscopy. The described protocol is in line with recommendations for microplastics monitoring published by the Marine Strategy Framework Directive (MSFD) Technical Subgroup on Marine Litter. This written protocol with video guide will support the work of researchers that deal with microplastics monitoring all over the world.

The protocol below describes the methodology for: microplastics sampling on the sea surface, separation of microplastic and chemical identification of particles. This protocol is in line with the recommendations for microplastics monitoring published by the MSFD Technical Subgroup on Marine Litter.

Deniz Yüzey ve Numune Analizi Microplastics Örnekleme Protokolü

Microplastic pollution in the marine environment is a scientific topic that has received increasing attention over the last decade. The majority of ...

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Development of New Methods for Quantifying Fish Density Using Underwater Stereo-video Tools

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and estimating fish abundance. We developed and implemented a rotating stereo-video camera tool that covers a full 360 degrees of sampling, which maximizes sampling effort compared to stationary camera tools. A variety of studies have detailed the ability of static, stereo-camera systems to obtain highly accurate and precise measurements of fish; the focus here was on the development of methodological approaches to quantify fish density using rotating camera systems. The first approach was to develop a modification of the metric MaxN, which typically is a conservative count of the minimum number of fish observed on a given camera survey. We redefine MaxN to be the maximum number of fish observed in any given rotation of the camera system. When precautions are taken to avoid double counting, this method for MaxN may more accurately reflect true abundance than that obtained from a fixed camera. Secondly, because stereo-video allows fish to be mapped in three-dimensional space, precise estimates of the distance-from-camera can be obtained for each fish. By using the 95% percentile of the observed distance from camera to establish species-specific areas surveyed, we account for differences in detectability among species while avoiding diluting density estimates by using the maximum distance a species was observed. Accounting for this range of detectability is critical to accurately estimate fish abundances. This methodology will facilitate the integration of rotating stereo-video tools in both applied science and management contexts.

We describe a new method for counting fishes, and estimating relative abundance (MaxN) and fish density using rotating stereo-video camera systems. We also demonstrate how to use distance from camera (Z distance) to estimate species-specific detectability.

Sualtı Stereo video araçları kullanarak balık yoğunluğu miktarının için yeni yöntemler geliştirilmesi

The use of video camera systems in ecological studies of fish continues to gain traction as a viable, non-extractive method of measuring fish lengths and ...

Experimental Protocol for Detecting Mitochondrial Function in Hepatocytes Exposed to Organochlorine Pesticides

This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function for a better understanding the cause of metabolic disorders caused by environmental organochlorine pesticides (OCPs) in hepatocytes. HepG2 cells were exposed to &#946;-hexachlorocyclohexane (&#946;-HCH) for 24 h at an equivalent dose of internal exposure in general population. Ultrastructure in hepatocytes was examined by transmission electron microscopy (TEM) to show the damage of mitochondria. Mitochondrial function was further evaluated by mitochondrial fluorescence intensity, adenosine 5'-triphosphate (ATP) levels, oxygen consumption rate (OCR) and mitochondrial membrane potential (MMP) in HepG2 cells incubated with &#946;-HCH. The mitochondria fluorescence intensity after stained by mitochondrial green fluorescent probe was observed with a fluorescence microscopy. The luciferin-luciferase reaction was used to determine ATP levels. The MMP was detected by the cationic dye JC-1 and analyzed under flow cytometry. OCR was measured with an extracellular flux analyzer. In summary, these protocols were used in detecting mitochondrial function in hepatocytes with to investigate mitochondria damages.

Understanding the influence of environmental organochlorine pesticides (OCPs) on mitochondrial function in hepatocytes is important in exploring the mechanism of OCPs causing metabolic disorders. This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function.

Organoklor Intarımlarına Maruz Kalan Hepatositlerde Mitokondriyal Fonksiyonun Saptanması Için Deneysel Protokol

This paper presents detailed methods on detecting hepatic mitochondrial function for a better understanding the cause of metabolic disorders caused by ...

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide regulation studies. The risk of exposure to fungicide residues is likely to be especially high if the spray occurs on, or near host plants while the bees are collecting pollen to provision their nests. For species of Osmia that consume pollen from a select group of plants (oligolecty), the inability to use pollen from non-host plants can increase their risk factor for fungicide-related toxicity. This manuscript describes protocols used to successfully rear oligolectic mason bees, Osmia ribifloris sensu lato, from egg to prepupal stage within cell culture plates under standardized laboratory conditions. The in vitro-reared bees are subsequently used to investigate the effects of fungicide exposure and pollen source on bee fitness. Based on a 2 &#215; 2 fully crossed factorial design, the experiment examines the main and interactive effects of fungicide exposure and pollen source on larval fitness, quantified by prepupal biomass, larval developmental time, and survivorship. A major advantage of this technique is that using in vitro-reared bees reduces natural background variability and allows the simultaneous manipulation of multiple experimental parameters. The described protocol presents a versatile tool for hypotheses testing involving the suite of factors affecting bee health. For conservation efforts to be met with significant, lasting success, such insights into the complex interplay of physiological and environmental factors driving bee declines will prove to be critical.

In Vitro Rearing of Solitary Bees: A Tool for Assessing Larval Risk Factors

Fungicide sprays on flowering plants may expose solitary bees to high concentrations of pollen-borne fungicide residues. Using laboratory-based experiments involving in vitro-reared bee larvae, this study investigates the interactive effects of consuming fungicide-treated pollen derived from host and non-host plants.

Vitro Yalnız arı yetiştirme: larva Risk faktörleri değerlendirmek için bir araç

Although solitary bees provide crucial pollination services for wild and managed crops, this species-rich group has been largely overlooked in pesticide ...