Name: Video: Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees
Uploaded: 2017-06-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 19 s

Görsel takip yazılımı ve ekipmanının kullanımı için Dr. Thomas Kuhar&#39;a teşekkür etmek isteriz. Teknik yardımları için James Wilson ve Scott O&#39;Neal&#39;a teşekkür ediyoruz.

1. Şeker agaroz küpleri hazırlayın <ol><li> 8 g şekeri tartın ve 50 mL&#39;lik bir Erlenmeyer şişeye yerleştirin. </li><li> Erlenmeyer şişesini 20 mL deiyonize su ile doldurun. Şişeyi döndürerek şekeri çözün. </li><li> 170 mg agaroz tartın ve şeker solüsyonuna ekleyin. </li><li> Şeker-agaroz çözeltisini bir mikrodalga fırında 25 saniye süreyle yüksek ısıtın. Agarozu şeker çözeltisine çözün. </li><li> Şişe ve şeker agaroz çözeltisinin soğumasına izin verin. NOT: Şişenin teması için serin olmalıdır, ancak çözeltinin katılaşmasına izin vermeyin. <ol><li> Kontrol işlemi için bir şeker agaroz küpü hazırlamak için, yarı soğutulmuş şeker-agaroz çözeltisini bir tartım teknesi kalıbına dökün. NOT: Ağırlık ölçüsü 1.5 x 1.5 x 0.3 cm 3 boyutundadır. </li><li> Kovucu tedavi için bir şeker agarozu-bileşik küpü hazırlamak için istenen miktarda bileşiği yarı soğutulmuş çözeltiye ekleyin ( örn. ,% 1 DEETUgar-agaroz çözeltisi (hac / hac)). Bileşimi karıştırmak için şişeyi döndürünüz ve daha sonra çözelti bir tartım teknesi kalıbına dökün. NOT: Bu noktada sekiz kontrol kalıbı ve sekiz test kalıbı hazırlanacaktır. Kontrol kalıpları itici içermez. </li></ol></li><li> 5-10 dakika boyunca bir buzdolabında kalıplarda şeker agaroz küpleri soğutun. Katılaşmış şeker agaroz küplerini tartım teknesi kalıplarından çıkarın ve nemli bir kağıt havlu içeren plastik bir kap içine yerleştirin. </li><li> Depolama için kapları bir buzdolabına yerleştirin. Şeker agaroz küpleri, hazırlandıktan sonraki 7 gün içinde kullanılmalıdır. </li></ol> 2. Video İzleme Yazılımının ve Deneysel Kurulumun Programlanması <ol><li> Ekranın sol tarafında bulunan Deneme Gezgini çubuğundaki (izleme yazılımında, Malzeme Tablosuna bakın) Deneme Ayarları altında, doğru kameranın seçili olduğundan ve video kaydının petri alanlarında ortalandığından emin olun.<ol><li> Video kaydı merkezileştirilmelidir, kameranın ayarlarına ve AOI kontrollerinin altına gidin ve merkez X ve orta Y seçeneklerini seçin. </li></ol></li><li> Deneme Ayarları&#39;nın altında, arenaların sayısını 16 olarak değiştirin. İzlenen Özellikler altında Orta nokta tespiti&#39;ni seçin. </li><li> Test için arena ayarlamak için Arena Ayarları&#39;nı seçin. <ol><li> 16 Petri kabını, kameranın altına yerleştirilmiş bir ışık kutusu üzerine 4 x 4 desen yerleştirin ( Şekil 1 ). NOT: Bu kaplar kayıt alanını oluşturmak için kullanılır ve boştur. </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig1.jpg" /> Şekil 1: Işık kutusundaki petri tabağı düzenlemesi. Petri kapları, ışık kutusunun üstünde 4 x 4 blok halinde düzenlenmiştir. Bu düzenleme, v için kontrol ve itici işlemlerin kolaylıkla tanımlanmasını sağlarIz izleme protokolü. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="4"><li> Arena Ayarları&#39;nda, 16 petri tabağının resmini çekmek için sağ taraftaki alet panelinde bulunan kapmak arka plan düğmesini kullanın. Bu, arena kurulması için şablon olarak kullanılacaktır. </li><li> Arena Ayarları ekranının üst kısmındaki araç çubuğundan &quot;Elips oluştur&quot; u seçin ve yakalanan resimdeki petri kaplarından birinin çapıyla eşleşen bir daire oluşturun. Arena 1 işaretleyiciyi daireye yerleştirin ( Şekil 2 ). </li></ol><img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig2.jpg" /> Şekil 2: Görsel İzleme Yazılımı Arena Ayarlarının Ekran Görüntüleri. Çember içinde diyagonal şeritlerin gözlemlenmesi, dairenin algılama alanının onaylanmasını sağlar. bir<html> Her kare için Bölge 1 işaretleyici sağlanır ve her Petri kabının hedef bölgesini tanımlar. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="6"><li> Sağ taraf araç panelinde Arena 1&#39;in altında yer alan &quot;Bölge Grubu 1&quot; i seçin. Ekranın üst kısmındaki araç çubuğundan &quot;Dikdörtgen Oluştur&quot; u seçin. Bunu kullanarak 30 x 30 piksellik bir kare oluşturun ve daha sonra önceki aşamada oluşturulan çemberin ortasına yerleştirin. Üst araç çubuğundan &quot;Bölge Ekle&quot; yi seçin ve ardından karenin ortasını tıklayın. Alan 1 işaretçisini kare içinde olacak şekilde taşıyın. NOT: Oluşturulan kare besleme bölgesidir ve besleme bölgesinin tam olarak şeker agaroz küpten biraz daha büyük olduğu sürece listelenen boyutla aynı olması şart değildir. </li></ol>Les / ftp_upload / 55603 / 55603fig3.jpg &quot;/&gt; Şekil 3: Tamamlanan Arena Ayarlarının Ekran Görüntüleri. Tamamlanmış saha ayarları bu örneğe benzetilmelidir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="7"><li> Sağ taraftaki araç panelinde &quot;Arena 1&quot; i seçin ve ardından tüm arena kopyasını tıklayın. Açılır menüden &quot;All Other Arenas&quot; ı seçin ve ardından ok tıklayın. Kopyalanan arena ayarlarını, yakalanan resimdeki kalan petri kaplarına taşıyın (Şekil 3). <ol><li> &quot;Arena 1&quot; i seçin ve ardından üst araç çubuğunda &quot;Ölçek Kalibrasyonu&quot; nu seçin. Kalibrasyon çizgisini Arena 1 Petri kabının çapı boyunca çizin. Çap ölçümünü 9 cm&#39;ye (kullanılan Petri kaplarının çapı) değiştirin. Sağ taraf araç panelinde &quot;Arena Ayarlarını Doğrula&quot; seçeneğini seçin. </li></ol></li><li> Seç &quot;Algılama Ayarları &quot;nı tıklayın. </li><li> &quot;Algılama Ayarları 1&quot; i seçin ve ardından sağdaki alet kutusunda bulunan açılır menüden &quot;Gri Ölçeklendirme&quot; seçeneğini seçin. Algılama altında, aralığı 0 ila 83 olacak şekilde ayarlayın ( Şekil 4A ). </li><li> &quot;Tespit Ayarları&quot; na sağ tıklayın ve &quot;Algılama Ayarları 2&quot; adlı yeni bir ayar yapın. &quot;Gri Ölçeklendirme&quot; hala seçili olduğundan emin olun, ancak diğer parametreleri değiştirmeyin. NOT: Alanlar üzerinde video penceresinde büyük sarı daireler olacaktır. Bu, kayıttan önce Petri kaplarının doğru pozisyonlara yerleştirilmesine yardımcı olacaktır ( Şekil 4B ). </li></ol><img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig4.jpg" /> Şekil 4: Tespit Ayarları 1 ve 2&#39;nin Ekran Görüntüsü. ( A ) Grafik ölçeklendirme için düzeltilmiş arena&#39;nın nasıl olacağını gösterir.Bal arısı bir petri tablasına tabi tutulur. ( B ) Petri kaplarının konumlandırılması denemeler arasında yapılabilmesi için arena algılama alanını gösterir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig4large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="11"><li> Deneysel Gezgini&#39;nde &quot;Deneme Listesi&quot; ni seçin ve üst araç çubuğunda &quot;Değişken Ekle&quot; yi tıklayın. Kullanıcı tanımlı değişkeni &quot;Tedavi&quot; olarak adlandırın. Kullanıcı tanımlı Tedavi sütunundaki &quot;Önceden Tanımlı Değerler&quot; açılır çubuğunu seçin ve Önceden Tanımlı Değerler olarak C (kontrol) ve T (tedavi) değerlerini ekleyin. Üst araç çubuğunda bulunan &quot;Denemeleri Ekle&quot; düğmesini seçin. İki deneme yapın, sonra her arenada bir kontrol arenası (C) mi yoksa tedavi arenası mı (T) mi olduğunu seçin ( Şekil 5 ). </li></ol><img alt="Şekil 5" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig5.jpg" /> FiGure 5: Deneme Listesinin Ekran Görüntüsü. Arenaları doğru etiketlemek burada önemlidir, çünkü burada veriyi istatistiksel olarak analiz etmek için verileri ayıran bilgiler kullanılıyor. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig5large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="12"><li> Deneme Gezgini panelinin altındaki &quot;Veri Profili&quot; ni seçin. Sol sütunda &quot;Kullanıcı Tanımlı Bağımsız Değişkenler&quot; başlığı altında bulunan &quot;Tedavi&quot; yi seçin. Bu, akış şeması bulunan bölgeye bir &quot;Filtre&quot; kutusu ekleyecektir. Açılan pencerede &quot;C&quot; yi seçin ve ardından yeni oluşturulan filtreyi &quot;Başlat&quot; kutusuyla &quot;Sonuç 1&quot; kutusu arasına yerleştirin. Akış şeması okları, başlangıç ​​kutusundan filtreye ve sonunda sonuç olarak işaret edecek şekilde ayarlanmalıdır 1. <ol><li> Adım 2.12&#39;yi tekrarlayın, ancak bu sefer filtre için &quot;T&quot; seçin ve ardından&quot;Ortak Elemanlar&quot; bölümünün altındaki &quot;Sonuç&quot;. Yeni oluşturulan kutuları akış şeması alanına taşıyın ve kutuları oklarla bağlayın ( Şekil 6 ). </li></ol></li></ol><img alt="Şekil 6" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig6.jpg" /> Şekil 6: Veri Profilinin Ekran Görüntüleri. Bu, istatistiksel analizde uygun ayrımı elde etmek için akış şemasının nasıl kurulması gerektiğini gösterir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig6large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol start="13"><li> Dosyayı kaydedin. </li></ol> 3. Bal arısı bireyleri toplamak <ol><li> Koruyucu kıyafetler koyun ve arılar (çoğunlukla foragers) toplamak için bir kovan seçin. </li><li> Kovanın dış ve iç kapağını çıkarın. Kovan içermeyen üst kovan gövdesinden bir çerçeve seçmek için bir kovan aracı kullanın.Çerçeveyi hafifçe kaldırma kutusundan çıkarın. </li><li> Çerçeveyi bal arı kraliçesi için kontrol edin. Orada değilse, bal arısı işçilerini çerçeveden alıp nakliye için bir kapa yerleştirin. Test edilecek her bileşik için iki tam deneme yapabilmek için yeteri kadar kişi toplayın (kontrol grubu olan denek başına 16 kişi kullanılır). NOT: Toplanan bireyler öncelikli olarak hazırlayıcı olmalıdır; Bununla birlikte, koleksiyonda hemşire arıları gibi yaşlı kişiler de olabilir. </li><li> Bal arılarının çıkarıldığı zamanı not edin. Hava delikleri içeren 9 cm x 7 cm x 9 cm&#39;lik bir plastik kutuya aktarın ve 32 ° C&#39;de ve% 70 bağıl nemdeki bir inkübatöre yerleştirin. </li><li> Bal arılarını 15 saat boyunca aç bırakın. NOT: Bal arıları test edilmeden önce akşamlar toplanırsa genellikle iyi olur. </li></ol> 4. Görsel İzleme Testi Yapın <ol><li> Görsel izleme programını başlatın ve kaydetmeyi açın.Bu deney için yaratılan deney dosyası. </li><li> &quot;Tespit Ayarları 2&quot; ni seçin. </li><li> Kontrol şeker agaroz küpleri 16 Petri tabağının 8&#39;inin merkezlerine yerleştirin. Kalan 8 yemekte şeker agaroz bileşiği (caydırıcılık) küpleri ile bu işlemi tekrarlayın. </li><li> Tek bir bal arısını plastik kutusundan çıkarmak için forseps kullanın ve kontrol petri kaplarından birine yerleştirin. </li><li> Geriye kalan 15 Petri tabağı için 4.4 adımını tekrarlayın. </li><li> Tüm yemekleri ışık kutusunun üzerine yerleştirin ve arena algılama alanlarının (algılama ayarı 2 seçildiğinde bilgisayar ekranında gösterilen) her petri tablasına sığacak şekilde konumlandırın. Kırmızı spektruma ayarlanmış bir dizi LED ışığı altındaki ışık kutusunu alttan aydınlatın. Harici ışığı ortadan kaldırmak ve alanlardaki gölgeleri azaltmak için tüm kutuyu ve kamerayı siyah bir plastik tabaka ile çevreledi. </li><li> Petri tabakları ayarlandıktan sonra, &quot;Algılama Ayarları 1&quot;Seçili ayar. NOT: Bu noktada, görsel izleme yazılımı yalnızca petri kabı arenalarında bal arılarını toplamalıdır. </li><li> Deneme Gezgini&#39;nden &quot;Edinme&quot; yi seçin. Kaydı başlatmak için sağdaki Acquisition Control açılır kutusunda bulunan yeşil &quot;Start Trial&quot; düğmesine basın. </li><li> Testi 10 dakika boyunca çalıştırın ve kaydetmeyi durdurmak için Acquisition Control pop-up kutusunda kırmızı &quot;Stop Trial&quot; düğmesine tıklayın. </li><li> Petri kaplarından kişileri çıkarın ve iki kez test edilmemeleri için ayrı bir kapta bırakın. </li><li> Aynı bileşik üzerindeki ikinci deneme için 4.4-4.10 arasındaki adımları tekrarlayın. NOT: Bu yöntem kullanıcı başına ihtiyaç duyulan arı başına arıların arıtılması için değiştirilebilir. </li><li> Deneme Gezgini&#39;nde İstatistik&#39;i seçin ve ardından hesapla&#39;yı tıklayın. </li><li> Verileri bir veri yöneticisi yazılımına dışa aktarın ve daha sonra bir-w kullanarak bir veri kullanarak önem derecesini analiz edinBir Tukey&#39;nin post-testi ile varyans analizi ve tercih edilen istatistiksel yazılım programı kullanılarak bir eşleştirilmemiş t-testi. </li></ol>

<ol>
	<li>Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissi&#232;re, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+valuation+of+the+vulnerability+of+world+agriculture+confronted+with+pollinator+decline.">Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline.</a> Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).</li><li>van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+historical+review+of+managed+honey+bee+populations+in+Europe+and+the+United+States+and+the+factors+that+may+affect+them.">A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and the factors that may affect them.</a> J Invertebr Pathol. 103, S80-S95 (2010).</li><li>Aizen, M. A., Harder, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Global+Stock+of+Domesticated+Honey+Bees+Is+Growing+Slower+Than+Agricultural+Demand+for+Pollination.">The Global Stock of Domesticated Honey Bees Is Growing Slower Than Agricultural Demand for Pollination.</a> Current Biol. 19 (11), 915-918 (2009).</li><li>Smith, K. M., Loh, E. H., Rostal, M. K., Zambrana-torrelio, C. M., Mendiola, L., Daszak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogens,+Pests,+and+Economics+Drivers+of+Honey+Bee+Colony+Declines+and+Losses.">Pathogens, Pests, and Economics Drivers of Honey Bee Colony Declines and Losses.</a> Ecohealth. 10, 434-445 (2014).</li><li>Mullin, C. A., Frazier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Levels+of+Miticides+and+Agrochemicals+in+North+American+Apiaries:+Implications+for+Honey+Bee+Health.">High Levels of Miticides and Agrochemicals in North American Apiaries: Implications for Honey Bee Health.</a> PLoS ONE. 5 (3), (2010).</li><li>Li, Y., Kelley, R. A., Anderson, T. D., Lydy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+comparison+of+two+multi-residue+methods+for+the+analysis+of+select+pesticides+in+honey+bees,+pollen,+and+wax+by+gas+chromatography+-+quadrupole+mass+spectrometry.">Development and comparison of two multi-residue methods for the analysis of select pesticides in honey bees, pollen, and wax by gas chromatography - quadrupole mass spectrometry.</a> Talanta. 140, 81-87 (2015).</li><li>Kakumanu, M. L., Reeves, A. M., Anderson, T. D., Rodrigues, R. R., Williams, M. A., Williams, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey+Bee+Gut+Microbiome+Is+Altered+by+In-Hive+Pesticide+Exposures.">Honey Bee Gut Microbiome Is Altered by In-Hive Pesticide Exposures.</a> Front Microbiol. 7, 1-11 (2016).</li><li>Katz, T. M., Miller, J. H., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+Historical+perspectives+and+new+developments.">Insect repellents: Historical perspectives and new developments.</a> J Am Acad Dermatol. 58 (5), 865-871 (2008).</li><li>Dickens, J. C., Bohbot, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini+review:+Mode+of+action+of+mosquito+repellents.">Mini review: Mode of action of mosquito repellents.</a> Pestic Biochem Phys. 106 (3), 149-155 (2013).</li><li>Lawrence, K. L., Achee, N. L., Bernier, U. R., Mundal, K. D., Benante, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+Evaluations+of+Topical+Arthropod+Repellents+in+North,+Central,+and+South+America.">Field Evaluations of Topical Arthropod Repellents in North, Central, and South America.</a> J Med Entomol. 51 (5), 980-988 (2014).</li><li>Collins, A. M., Rubink, W. L., Cuadriello Aguilar, ., I, J., Hellmich Ii, ., L, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+insect+repellents+for+dispersing+defending+honey+bees+(Hymenoptera+Apidae).">Use of insect repellents for dispersing defending honey bees (Hymenoptera Apidae).</a> J Econ Entomol. 89 (3), 608-613 (1996).</li><li>Brown, M., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+An+overview.">Insect repellents: An overview.</a> J Am Acad Dermatol. 36 (2), 243-249 (1997).</li><li>Teeters, B. S., Johnson, R. M., Ellis, M. D., Siegfried, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+video-tracking+to+assess+sublethal+effects+of+pesticides+on+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Using video-tracking to assess sublethal effects of pesticides on honey bees (Apis mellifera L.).</a> Environ Toxicol Chem. 31 (6), 1349-1354 (2012).</li><li>Vallet, A., Cassier, P., Lensky, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+the+fine+structure+of+the+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+workers+and+the+pheromonal+activity+of+2-heptanone.">Ontogeny of the fine structure of the honeybee (Apis mellifera L.) workers and the pheromonal activity of 2-heptanone.</a> J Insect Physiol. 37 (11), 789-804 (1991).</li><li>Free, J. B., Ja Pickett, ., Ferguson, a. W., Simpkins, J. R., Smith, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repelling+foraging+honeybees+with+alarm+pheromones.">Repelling foraging honeybees with alarm pheromones.</a> J Agr Sci. 105 (2), 255 (1985).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Bu görsel izleme protokolü, bal arılarında kimyasal koruyucu önlemleri nispeten hızlı ve kolay bir şekilde basit bir yaklaşım sağlar. Bal arılarında kimyasal caydırıcı maddelerin laboratuar testleri için önerilen protokoller yoktur. Önceki yarı ve tam saha çalışmaları bal arısı kovucularını incelemişlerdir 14 , 15 ; Ancak tarif edilen protokoller zaman alıcı, emek gerektiren ve genel laboratuvarın dışında ek tesis kaynaklarına...

Avrupa bal arısı Apis melliferaL. , Küresel olarak 200 milyar doların üzerinde değerinde polen servisleri sağlayan ekonomik ve tarımsal açıdan önemli bir böcektir. Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde ve Avrupa&#39;da, bal arısı koloni sayıları azalmaktadır. Amerika Birleşik Devletleri ca kaybetti. 1947-2008 yılları arasında yönetilen bal arısı kolonilerinin% 60&#39;ı Avrupa&#39;yı kaybetti. 1961-2007 arası% 27 , 2 , 3 . Parazit enfestasyonları, patojen enfeksiyonları, arıcılık uygulamaları ve böcek ilacı kullanımı 2 - 4 de dahil olmak ancak bunlarla sınırlı kalmamak üzere koloni kayıplarının sayısının artmasından sorumlu olabilecek bir takım faktörler vardır. Bal arıları pestisitlere iki ana yolla maruz kalabilir. Kovan dışına pestisit maruziyeti, bireyleri yemleme,Zararlılardan korunmak için kimyasallarla püskürtülmüştür. Kovanda pestisit maruz kalma arıcılar, akarlar, bakteriler ve mikrosporidya gibi haşere zararlılarını ve patojeni kontrol etmek için kimyasallar kullandığında ortaya çıkabilir 4 . Pestisit kalıntıları, Amerika Birleşik Devletleri ve Kanada&#39;daki 24 apiaryardan balmumu, polen ve bal arısı örnekleri içerisinde tespit edilmiştir 5 , 6 . Pestisit ile bal arılarındaki etkiler akut toksisite yanı sıra paralizi, yönelim bozukluğu ve davranışsal ve sağlık değişiklikleri gibi ölümcül olmayan etkileri içerir 1 , 7 . Modern tarım, yüksek ürün verimi elde etmek için böcek ilacı kullanımını gerektirdiğinden, bu kimyasallar gelecekte kullanılmaya devam edecektir 2 . Bal arılarını pestisit maruziyetlerinden daha iyi korumak için yeni protokol ve düzenlemelerin geliştirilmesine ihtiyaç vardır 5 .Koruma için olası bir yaklaşım, bal arılarının pestisitlere maruz kalmasını azaltmak için kovucuların kullanılmasıdır. Böcek iticileri (IR) genellikle eklem bacaklı hastalık vektörlerine karşı kişisel ısırık koruma önlemleri olarak kullanılmıştır 8 . 60 yıldan daha önce geliştirilen en yaygın kullanılan ve başarılı IR, DEET 8 , 9&#39;dur . Böcek kovucu testlerin altın standartı olarak kabul edilir ve Dünya Sağlık Örgütü ve Çevre Koruma Ajansı tarafından yeni kovucuların taranması için olumlu bir kontrol olarak kullanılır 10 . Buna ek olarak, DEET&#39;in bal arılarını sömürgelerine yönelik bir tehditten dağıttığı tespit edilmiştir 11 . Kişisel IR&#39;lerle ilişkili güncel özellikler şunları içerir: (1) çok sayıda artropoda karşı sürekli etki; (2) cilde veya giysilere uygulandığında kullanıcıyı rahatsız etmeyen; (3) kokusuz veyaHoş koku; (4) kıyafet üzerinde herhangi bir etkisi yoktur; (5) cilde uygulandığında yağışsız görünme; kullanıcının terleme, yıkama ve silme işlemlerine dayanması; (6) yaygın olarak kullanılan plastikler üzerinde herhangi bir etkisi yoktur; Ve (7) kimyasal olarak istikrarlı ve yaygın kullanım için uygun fiyatlı 12 . Bal arılarında kullanılan bir kovucu, kalıcı etkiler, aplikatörler için tahriş edici olmayan, kokusuz veya hoş koku, kimyasal olarak kararlı ve yaygın kullanım için uygun ve bal arılarına toksik olmayan gibi bazı özelliklere ihtiyaç duyar. Bununla birlikte, bu nitelikleri derinlemesine araştırmadan önce, yüksek performanslı bir şekilde, iticilik / caydırıcılık için bileşikleri taramak için bir yöntem gereklidir. Burada, bal arılarının caydırılması için bileşikleri taramak için bir laboratuar tahlili için bir protokol açıklıyoruz, bu da iticiliğin belirlenmesinde önemli bir adımdır. Aşağıdaki protokol, pestisitlerin bal arılarında zehirli etkilerini değerlendirmek için görsel izleme yöntemini açıklayan önceki bir çalışmadan değiştirildi 13 . HoweVer, bu protokol, bal arılarını pestisit ile işleme tabi tutulan bitkilerden caydırabilecek aday iticilerin etkilerini ölçmek üzere tasarlandığından farklıdır. Bal arılarında kimyasal caydırıcıların laboratuar testleri için önerilen protokoller yoktur ve bu nedenle bu protokol bu tür bileşiklerin taranmasına basit bir yaklaşım sağlar.

<table><tbody><tr><td>50 mL Erlenmeyer flask</td><td>Kimax</td><td>26500-50</td><td>used for making the sugar/agarose cubes</td></tr><tr><td>Sugar</td><td>Kroger</td><td></td><td>any similar product will sufffice</td></tr><tr><td>Deionized water</td><td></td><td></td><td>acquired in house</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Apex</td><td>20-102</td><td>used for making the sugar/agarose cubes</td></tr><tr><td>Mold for agarose cubes (Weigh Boat)</td><td></td><td></td><td>any mold that will provide the researcher with a 1.5 cm x 1.5 cm x 0.3 cm sugar/agarose cube will suffice</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus</td><td></td><td>visual tracking software</td></tr><tr><td>633 nm LEDs</td><td>Cyron</td><td>HTP904E</td><td>These lights were placed into a constructed light box to illuminate the arenas from below.&amp;nbsp; The box was a simple wooden structure with a frosted plastic/plexi glass cover that allowed the light to disperse upwards without any glare.</td></tr><tr><td>Laptop or PC</td><td>Dell</td><td>Inspiron One 2305</td><td>necessary for video tracking software. Any pc device capable of runnin tbe visual tracking software will suffice</td></tr><tr><td>Bee Keeping protective clothing</td><td>Dadant &amp;amp; Sons Inc</td><td>V0126</td><td>any protective hood and jacket will suffice</td></tr><tr><td>Hive tool</td><td>Dadant &amp;amp; Sons Inc</td><td>M00757</td><td>used to open honey bee hive</td></tr><tr><td>Container for honey bees</td><td></td><td></td><td>any container suitable for housing and storing honey bees will suffice</td></tr><tr><td>Featherweight forceps narrow tip</td><td>Bioquip</td><td>4748</td><td>used to select individual honey bees</td></tr><tr><td>9 cm (diameter) Petri dish</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>S01778</td><td>arena used to contain individual honey bees during video tracking</td></tr><tr><td>Recording Device (Camera)</td><td>Basler</td><td>acA-1300-60gm</td><td>any device that can record the subject clearly and transfer the file to a computer will suffice</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>Graphpad</td><td></td><td>any statistical software package will suffice</td></tr></tbody></table>

video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees

Avrupa bal arısı Apis mellifera L. , yılda milyarlarca dolar üreten ekonomik ve tarımsal açıdan önemli bir tozlaştırıcıdır. Bal arısı koloni sayıları, 1947&#39;den beri Birleşik Devletler&#39;de ve birçok Avrupa ülkesinde azalmaktadır. Bal arılarının böcek ilacına kasıtsız olarak maruz kalması da dahil olmak üzere, bu düşüşte bir takım faktörler rol oynamaktadır. Yeni yöntem ve düzenlemelerin geliştirilmesi, bu tozlayıcılara uygulanan pestisitlerin azaltılması için garanti altına alınmıştır. Bir yaklaşım, kısa süre önce pestisit ile işleme tabi tutulan bir bitkiden bal arılarını caydıran kovucu kimyasal maddelerin kullanılmasıdır. Burada, seçici itici kimyaları maruz bırakan bal arılarının caydırıcılığını ayırt etmek için bir protokolü açıklıyoruz. Bal arısı toplayıcıları, testten 15 saat önce toplanır ve gece boyunca bir inkübatörde aç bırakılır. Bireysel bal arıları şeker agarozu küpü (kontrol muamelesi) veya şeker agarozu bileşik küpü (itici muamele) bulunan Petri kaplarına yerleştirilirÇanağın ortasına kadar. Petri kabı, video izleme yazılımı kullanarak bal arısı lokomotif etkinliklerini kaydetmek için bir ışık kutusuna bir kameranın altına yerleştirilen arena görevini görür. Toplam 8 kontrol ve 8 itici tedavi, 10 dakika süreyle analiz edildi ve her bir tedavi yeni bal arısı ile tekrarlandı. Burada bal arılarının şeker agaroz küplerinden birleşik bir muamele ile caydırıldığını, arı arılarının şeker agaroz küplerine eklenen bir bileşik olmadan çekildiğini gösteriyoruz.

Bal arılarının bir hedef bölgede harcanan zaman miktarını ya şeker agarozu (kontrol muamelesi) ya da şeker agarozu bileşik küpü (caydırıcılık tedavisi) ile kaydetmek için görsel izleme protokolü geliştirildi. Kaydedilen zaman, istatistiksel bir yazılım programı kullanılarak analiz edildi ve hedef bölgede harcanan ortalama ± standart hata çubuk grafik olarak rapor edildi. Bu protokole böcek kovucu / caydırıcılık testi için altın standart olan DEET, pozitif...

Watch this Scientific Journal Video about Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees at JoVE.com

Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

Bal arısı kolonilerinin kaybı ekin tozlama hizmetleri için bir meydan okuma sunar. Günümüzdeki polinatör koruma uygulamaları, bal arılarının kovucu kimyaları kullanarak zararlı böcek ilacıyla temasını en aza indirmek için alternatif bir yaklaşım garanti etmektedir. Burada, arılar için caydırıcı maddeleri taramak için görsel izleme protokolü için ayrıntılı yöntemler sunuyoruz.

Bal Arıları İçin Ekran Koruma Kimyagerleri için Video İzleme Protokolü

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

video-tracking-protocol-to-screen-deterrent-chemistries-for-honey-bees

Research

JoVE Journal

Environment

6.6K Görüntüleme.  Virginia Tech.  Bal arısı kolonilerinin kaybı ekin tozlama hizmetleri için bir meydan okuma sunar. Günümüzdeki polinatör koruma uygulamaları, bal arılarının kovucu kimyaları kullanarak zararlı böcek ilacıyla temasını en aza indirmek için alternatif bir yaklaşım garanti etmektedir. Burada, arılar için caydırıcı maddeleri taramak için görsel izleme protokolü için ayrıntılı yöntemler sunuyoruz. 

Video: Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

Preventing colonization of bird nest boxes by invasive Africanized honey bees is important for conservation efforts of nest-site limited birds. We provide an integrated pest management approach to &#34;push&#34; bees away from nest boxes with a repellant insecticide, permethrin, and &#34;pull&#34; them toward pheromone baited swarm traps.

Bir Push-pull Protokolü Bal Arısı ile kolonizasyon Bird Nest Kutular azaltmak için

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

Çevre

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

Dokunsal İklimlendirme Ve Bal Arısı yılında antennal Örnekleme Stratejileri Hareket Analizi (<em&gt; Apis mellifera</em&gt; L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

Nörobilim

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

This video demonstrates novel techniques of RNA interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees using double-stranded RNA (dsRNA) injections. It also presents a protocol of proboscis extension response (PER) assay for measuring gustatory perception.	
	RNAi-mediated gene knockdown is an effective technique downregulating target gene expression. This technique is usually used for single gene manipulation, but it has limitations to detect interactions and joint effects between genes. In the first part of this video, we present two strategies to simultaneously knock down two genes (called double gene knockdown). We show both strategies are able to effectively suppress two genes, vitellogenin (vg) and ultraspiracle (usp), which are in a regulatory feedback loop. This double gene knockdown approach can be used to dissect interrelationships between genes and can be readily applied in different insect species.	
	The second part of this video is a demonstration of proboscis extension response (PER) assay in honey bees after the treatment of double gene knockdown. The PER assay is a standard test for measuring gustatory perception in honey bees, which is a key predictor for how fast a honey bee's behavioral maturation is. Greater gustatory perception of nest bees indicates increased behavioral development which is often associated with an earlier age at onset of foraging and foraging specialization in pollen. In addition, PER assay can be applied to identify metabolic states of satiation or hunger in honey bees. Finally, PER assay combined with pairing different odor stimuli for conditioning the bees is also widely used for learning and memory studies in honey bees.

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

In this protocol, we describe two strategies that simultaneously suppress two genes (double gene knockdown) in honey bees. Then we present how to use the proboscis extension response (PER) assay to study the effect of double gene knockdown on honey bee gustatory perception.

Bal Arısı RNAi-aracılı Çift Gen demonte ve tat Algı Ölçüm (<em&gt; Apis mellifera</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

Bir burnumun Extension Tepki Böcekler Davranış Plastisitesi incelenmesi için protokol: Basic, Biyomedikal Uygulama ve Tarımsal Araştırma

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification (RFID) readers built into artificial flowers that display various visual cues, and RFID tags (i.e., passive transponders) glued to the thorax of bumblebee workers. The novelty in our implementation is that RFID readers are built directly into artificial flowers that are capable of displaying several distinct visual properties such as color, pattern type, spatial frequency (i.e., &#8220;busyness&#8221; of the pattern), and symmetry (spatial frequency and symmetry were not manipulated in this experiment). Additionally, these visual displays in conjunction with the automated systems are capable of recording unrewarded and untrained choice behavior. The second method consists of recording choice behavior at artificial flowers using motion-sensitive high-definition camcorders. Bumblebees have number tags glued to their thoraces for unique identification. The advantage in this implementation over RFID is that in addition to observing landing behavior, alternate measures of preference such as hovering and antennation may also be observed. Both automation methods increase experimental control, and internal validity by allowing larger scale studies that take into account individual differences. External validity is also improved because bees can freely enter and exit the testing environment without constraints such as the availability of a research assistant on-site. Compared to human observation in real time, the automated methods are more cost-effective and possibly less error-prone.

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

Radyo Frekansı ile Tanımlama ve Verimli Hareket duyarlı video Bumblebees tarafından karşılıksız seçim davranışının Kayıt otomatikleştirin

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

A Novel Davranış Testi (Bumble Bees Serbestçe hareket eden Bireyin Tat Cevapları, Araştırma<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...

Preparation of Single-cohort Colonies and Hormone Treatment of Worker Honeybees to Analyze Physiology Associated with Role and/or Endocrine System

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related division of labor). Young workers are engaged in nursing the brood (nurse bees), while older workers are engaged in foraging for nectar and pollen (foragers). The physiology of the workers changes in association with this role shift. For example, the main function of the hypopharyngeal glands (HPGs) changes from the secretion of major royal jelly proteins (MRJPs) to the secretion of carbohydrate-metabolizing enzymes. Because worker tasks change as the workers age in typical colonies, it is difficult to discriminate the physiological changes that occur with aging from those that occur with the role shift. To study the physiological changes in worker tissues, including the HPGs, in association with the role shift, it would be useful to manipulate the honeybee colony population by preparing single-cohort colonies in which workers of almost the same age perform different tasks. Here we describe a detailed protocol for preparing single-cohort colonies for this analysis. Six to eight days after single-cohort colony preparation, precocious foragers that perform foraging tasks earlier than usual appear in the colony. Representative results indicated role-associated changes in HPG gene expression, suggesting role-associated HPG function. In addition to manipulating the colony population, analysis of the endocrine system is important for investigating role-associated physiology. Here, we also describe a detailed protocol for treating workers with 20-hydroxyecdysone (20E), an active form of ecdysone, and methoprene, a juvenile hormone analogue. The survival rate of treated bees was sufficient to examine gene expression in the HPGs. Gene expression changes were observed in response to 20E- and/or methoprene-treatment, suggesting that hormone treatments induce physiological changes of the HPGs. The protocol for hormone treatment described here is appropriate for examining hormonal effects on worker physiology.

Here we describe our detailed protocol for the preparation of single-cohort honeybee colonies&#160;&#8211; a useful tool for analyzing the role-associated worker physiology. We also describe detailed protocols for treating workers with juvenile hormone and ecdysone to evaluate the involvement of these hormones in the regulation of worker behavior and/or physiology.

Tek kohort Kolonileri ve İşçi arıların Hormon Tedavisi hazırlanması Rolü ve / veya Endokrin Sistemi Fizyolojisi İlişkili Analiz

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related ...

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize and to study. Therefore, bees have long been a favored model amongst neurobiologists and neuroethologists for studying the neural basis of social and natural behavior. It is important, however, that the experimental techniques used to study bees do not interfere with the behaviors being studied. Because of this, it has been necessary to develop a range of techniques for pharmacological manipulation of honey bees. In this paper we demonstrate methods for treating restrained or free-flying honey bees with a wide range of pharmacological agents. These include both noninvasive methods such as oral and topical treatments, as well as more invasive methods that allow for precise drug delivery in either systemic or localized fashion. Finally, we discuss the advantages and disadvantages of each method and&#160;describe common hurdles and how to best overcome them. We conclude with a discussion on the importance of adapting the experimental method to the biological questions rather than the other way around.

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

This manuscript describes several protocols for administering pharmacological agents to honey bees, including simple noninvasive methods for free-flying bees, as well as more invasive variants that allow precise localized treatment of restrained bees.

Ölçülü ve Serbest uçan Bal Arısı Nörofarmakolojik Manipülasyon,<em&gt; Apis mellifera</em

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize ...

SwarmSight: Real-time Tracking of Insect Antenna Movements and Proboscis Extension Reflex Using a Common Preparation and Conventional Hardware

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis during feeding. The ability to rapidly obtain high-resolution measurements of natural antenna and proboscis movements and assess how they change in response to chemical, developmental, and genetic manipulations can aid the understanding of insect behavior. By extending our previous work on assessing aggregate insect swarm or animal group movements from natural and laboratory videos using the video analysis software SwarmSight, we developed a novel, free, and open-source software module, SwarmSight Appendage Tracking (SwarmSight.org) for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The software processes frames about 120 times faster than humans, performs at better than human accuracy, and, using 30 frames per second (fps) videos, can capture antennal dynamics up to 15 Hz. The software was used to track the antennal response of honey bees to two odors and found significant mean antennal retractions away from the odor source about 1 s after odor presentation. We observed antenna position density heat map cluster formation and cluster and mean angle dependence on odor concentration.

This protocol describes steps for using the novel software, SwarmSight, for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The free, open-source software processes frames about 120 times faster than humans and performs at better than human accuracy.

SwarmSight: Gerçek zamanlı izleme böcek anten hareketleri ve hortum uzantısı refleks bir ortak hazırlık ve geleneksel donanım kullanarak

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis ...

Bal Arıları İçin Ekran Koruma Kimyagerleri için Video İzleme Protokolü

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Bir Push-pull Protokolü Bal Arısı ile kolonizasyon Bird Nest Kutular azaltmak için

Koloni Düzeyde Bireysel olan Bal Arısı Kalkınma Çevre Kimyasalların Etkisinin Değerlendirilmesi

Dokunsal İklimlendirme Ve Bal Arısı yılında antennal Örnekleme Stratejileri Hareket Analizi (

Bal Arısı RNAi-aracılı Çift Gen demonte ve tat Algı Ölçüm (

Bir burnumun Extension Tepki Böcekler Davranış Plastisitesi incelenmesi için protokol: Basic, Biyomedikal Uygulama ve Tarımsal Araştırma

Radyo Frekansı ile Tanımlama ve Verimli Hareket duyarlı video Bumblebees tarafından karşılıksız seçim davranışının Kayıt otomatikleştirin

A Novel Davranış Testi (Bumble Bees Serbestçe hareket eden Bireyin Tat Cevapları, Araştırma

Tek kohort Kolonileri ve İşçi arıların Hormon Tedavisi hazırlanması Rolü ve / veya Endokrin Sistemi Fizyolojisi İlişkili Analiz

Ölçülü ve Serbest uçan Bal Arısı Nörofarmakolojik Manipülasyon,

SwarmSight: Gerçek zamanlı izleme böcek anten hareketleri ve hortum uzantısı refleks bir ortak hazırlık ve geleneksel donanım kullanarak