Name: video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees
Uploaded: 2017-06-12T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 19 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees at JoVE.com

시각적 추적 소프트웨어 및 장비 사용에 대해 Thomas Kuhar 박사에게 감사드립니다. 기술 지원에 대해 James Wilson과 Scott O&#39;Neal에게 감사드립니다.

1. 설탕 - 아가로 오스 큐브 준비 <ol><li> 설탕 8 g을 달아 50 mL 삼각 플라스크에 넣으십시오. </li><li> 삼각 플라스크에 20 mL의 탈 이온수를 채 웁니다. 플라스크를 소용돌이 칠하여 설탕을 녹이십시오. </li><li> 170 mg의 아가로 오스를 달아 설탕 용액에 첨가합니다. </li><li> 25 초 동안 전자 레인지에 설탕 - 아가로 오스 용액을 가열하십시오. 아가로 오스를 설탕 용액에 녹이십시오. </li><li> 플라스크와 설탕 - 아가로 오스 용액을 식힌다. 참고 : 플라스크는 차갑게 만져야하지만 용액이 고형화되지 않도록하십시오. <ol><li> 대조군 처리를 위해 설탕 - 아가로 오스 큐브를 준비하려면 반 냉각 된 설탕 - 아가로 오스 용액을 무게 보트 몰드에 부으십시오. 참고 : 계량 보트 몰드는 1.5 x 1.5 x 0.3 cm 3 크기 입니다. </li><li> 방충 처리를 위해 당류 - 아가로 오스 - 화합물 큐브를 준비하려면 반 냉각 용액에 원하는 양의 화합물을 첨가하십시오 ( 예 : 1 % DEET in s우거 - 아가로 오스 용액 (v / v)). 화합물을 혼합하기 위해 플라스크를 돌린 다음 용액을 무게 보트 몰드에 부으십시오. 참고 :이 시점에서 8 개의 제어 몰드와 8 개의 테스트 몰드가 준비됩니다. 제어 몰드에는 방충제가 포함되어 있지 않습니다. </li></ol></li><li> 5-10 분 동안 냉장고의 몰드에서 설탕 - 아가로 오스 큐브를 냉각시킵니다. 무게가 나가는 뚜껑 몰드에서 고형 설탕 아가로 오스 큐브를 꺼내고 축축한 종이 타월로 플라스틱 용기에 넣으십시오. </li><li> 용기를 보관 용 냉장고에 넣으십시오. 설탕 - 아가로 오스 큐브는 준비 7 일 이내에 사용해야합니다. </li></ol> 2. 비디오 트래킹 소프트웨어 프로그래밍 및 실험 설정 <ol><li> 실험 탐색기 막대의 실험 설정 (화면의 왼쪽에있는 추적 소프트웨어에서 자료 표 참조)에서 올바른 카메라가 선택되고 비디오 녹화가 페트리 접시 경기장 중앙에 있는지 확인하십시오.<ol><li> 비디오 녹화를 중앙에 놓아야하는 경우 카메라 설정 및 AOI 제어 아래로 이동하여 가운데 X 및 중앙 Y 옵션을 선택하십시오. </li></ol></li><li> 실험 설정에서 경기장 수를 16 개로 변경합니다. 추적 된 기능에서 중심점 감지를 선택합니다. </li><li> 분석을 위해 원하는 경기장을 설정하려면 경기장 설정을 선택하십시오. <ol><li> 16 개의 페트리 접시를 카메라 아래에있는 라이트 박스 위에 4 x 4 패턴으로 놓습니다 ( 그림 1 ). 참고 :이 요리는 녹음 영역을 만드는 데 사용되며 비어 있습니다. </li></ol></li></ol><img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig1.jpg" /> 그림 1 : 라이트 박스에 페트리 접시 배치. 배양 접시는 라이트 박스 위에 4 x 4 블록으로 배열됩니다. 이 배치는 v에 대한 제어 및 방수 처리를 쉽게 식별 할 수있게합니다.실제 추적 프로토콜. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="4"><li> 투기장 설정에서 오른쪽 툴 패널에있는 배경 잡기 버튼을 사용하여 16 개의 페트리 접시를 찍습니다. 이것은 경기장을 설정하기위한 템플릿으로 사용됩니다. </li><li> 투기장 설정 화면의 상단에있는 툴바에서 &quot;타원 만들기&quot;를 선택하고 이미지에있는 페트리 접시 중 하나의 직경과 일치하는 원을 만듭니다. Arena 1 마커를 원에 놓습니다 ( 그림 2 ). </li></ol><img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig2.jpg" /> 그림 2 : Visual Tracking Software Arena 설정의 스크린 샷 원 안의 대각선 줄무늬를 관찰하면 원 안에 감지 영역이 있는지 확인할 수 있습니다. 에이<html> 구역 1 마커는 각 사각형에 대해 제공되며 각 페트리 접시의 대상 구역을 정의합니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="6"><li> 오른쪽 툴 패널의 Arena 1 아래에있는 &quot;Zone Group 1&quot;을 선택하십시오. 화면 상단의 도구 모음에서 &quot;사각형 만들기&quot;를 선택하십시오. 이것을 사용하여 30 x 30 픽셀 사각형을 만든 다음 이전 단계에서 만든 원의 가운데에 위치시킵니다. 상단 도구 모음에서 &quot;영역 추가&quot;를 선택한 다음 정사각형 가운데를 클릭하십시오. 구역 1 마커를 정사각형으로 이동하십시오. 참고 : 생성 된 사각형은 먹이 영역이며 먹이 영역은 당 - 아가로 오스 큐브보다 약간 큰 경우 나열된 크기와 정확하게 동일해야합니다. </li></ol>les / ftp_upload / 55603 / 55603fig3.jpg &quot;/&gt; 그림 3 : 완성 된 투기장 설정의 스크린 샷. 완성 된 경기장 설정은 다음 예제와 같아야합니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="7"><li> 오른쪽 툴 패널에서 &quot;Arena 1&quot;을 선택한 다음 duplicate complete arena를 클릭하십시오. 드롭 다운 메뉴에서 &quot;All Other Arenas&quot;를 선택하고 확인을 클릭하십시오. 잡은 이미지의 나머지 페트리 디쉬에 복제 된 경기장 셋업을 옮깁니다 (그림 3). <ol><li> &quot;Arena 1&quot;을 선택한 다음 상단 툴바에서 &quot;눈금 조정&quot;을 선택하십시오. 투기장 1 페트리 접시의 직경에 걸쳐 교정 라인을 그립니다. 직경 측정을 9cm로 변경하십시오 (사용중인 페트리 접시의 직경). 오른쪽 툴 패널에서 &quot;경기장 설정 확인&quot;을 선택하십시오. </li></ol></li><li> 고르다 &quot;왼쪽의 제어 막대에서 &quot;탐지 설정&quot;을 선택하십시오. </li><li> &quot;Detection Settings 1&quot;을 선택한 다음 오른쪽 도구 상자에있는 드롭 다운 메뉴에서 &quot;Gray Scaling&quot;을 선택하십시오. 탐지시 범위가 0에서 83이되도록 설정합니다 ( 그림 4A ). </li><li> &quot;Detection Settings&quot;을 마우스 오른쪽 단추로 클릭하고 &quot;Detection Settings 2&quot;라는 새 설정을 지정하십시오. &quot;회색 스케일링&quot;이 선택되어 있는지 확인하고 다른 매개 변수는 변경하지 마십시오. 참고 : 경기장 위의 비디오 창에는 큰 노란색 원이 표시됩니다. 이렇게하면 녹음하기 전에 배양 접시를 올바른 위치에 배치하는 데 도움이됩니다 ( 그림 4B ). </li></ol><img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig4.jpg" /> 그림 4 : 탐지 설정 1과 2의 스크린 샷 ( A ) a에 대해 수정 된 회색 스케일링으로 경기장이 어떻게 보이는지 보여줍니다.페 트리 접시에 달콤한 꿀벌 주제. ( B ) 시도 사이에 페트리 접시의 위치를 ​​정할 수 있도록 경기장 탐지 영역을 표시합니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="11"><li> Experimental Explorer에서 &quot;Trial List&quot;를 선택하고 상단 툴바에서 &quot;Add Variable&quot;을 클릭하십시오. 사용자 정의 변수의 이름을 &quot;치료&quot;로 지정하십시오. 사용자 정의 치료 칼럼의 &quot;Predefined Values&quot;드롭 다운 바를 선택하고 C (대조)와 T (치료)를 미리 정의 된 값으로 추가하십시오. 상단 툴바에있는 &quot;Add Trials&quot;버튼을 선택하십시오. 두 번의 시련을 추가 한 다음 각 경기장이 제어 경기장 (C)인지 치료 경기장 (T)인지 선택하십시오 ( 그림 5 ). </li></ol><img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig5.jpg" /> Fi그림 5 : 평가판 목록의 스크린 샷. 프로그램이 여기 정보를 사용하여 데이터를 분리하여 통계적으로 분석하기 때문에 경기장에 올바르게 레이블을 지정하는 것이 중요합니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig5large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="12"><li> Experiment Explorer 패널 아래의 &quot;Data Profile&quot;을 선택하십시오. 왼쪽 열에서 &quot;사용자 정의 독립 변수&quot;제목 아래에있는 &quot;치료&quot;를 선택하십시오. 그러면 플로우 차트가있는 영역에 &quot;필터&quot;상자가 추가됩니다. 팝업 상자에서 &quot;C&quot;를 선택한 다음 새로 만든 필터를 &quot;시작&quot;상자와 &quot;결과 1&quot;상자 사이에 놓습니다. 순서도 화살표는 시작 상자에서 필터까지 그리고 마지막으로 결과 1을 가리 키도록 조정해야합니다. <ol><li> 2.12 단계를 반복하십시오. 그러나 이번에는 필터에 &quot;T&quot;를 선택한 다음&quot;공통 요소&quot;섹션에서 &quot;결과&quot;. 새로 생성 된 상자를 순서도 영역으로 이동하고 화살표로 상자를 연결하십시오 ( 그림 6 ). </li></ol></li></ol><img alt="그림 6" src="/files/ftp_upload/55603/55603fig6.jpg" /> 그림 6 : 데이터 프로파일의 스크린 샷. 이것은 통계 분석에서 적절한 구분을 얻기 위해 순서도를 설정하는 방법을 보여줍니다. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55603/55603fig6large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> <ol start="13"><li> 파일을 저장하십시오. </li></ol> 3. 꿀벌 개인 수집 <ol><li> 보호 복을 착용하고 꿀벌 (주로 사육자)을 모으기 위해 하이브를 선택하십시오. </li><li> 하이브의 외부 및 내부 덮개를 제거합니다. 하이브 도구를 사용하여 꿀벌을 포함하지 않는 위쪽의 벌집 몸체에서 프레임을 선택하십시오.하이브 박스에서 조심스럽게 프레임을 들어 올리십시오. </li><li> 꿀벌 여왕을위한 구조를 검사하십시오. 그녀가 없다면 프레임에서 꿀벌 작업자를 수송 용 컨테이너로 청소하십시오. 충분한 수의 개체를 모아서 시험 할 각 화합물에 대해 2 회 완전한 시험을 시행 할 수 있습니다 (대조군과 함께 시험 당 16 개체 사용). 주 : 수집 된 개인은 주로 먹는 식물이어야한다; 그러나 컬렉션에 포함 된 간호사 꿀벌과 같은 다른 노인이있을 수 있습니다. </li><li> 꿀벌이 제거 된 시간을 적어 두십시오. 공기 구멍이있는 9 cm x 7 cm x 9 cm 플라스틱 상자에 그들을 옮기고 32 ° C 및 70 % 상대 습도의 배양기에 넣으십시오. </li><li> 15 시간 동안 꿀벌을 굶어 라. 참고 : 이것은 일반적으로 테스트하기 전에 저녁 꿀벌을 수집하는 경우에 가장 효과적입니다. </li></ol> 4. 시각 추적 분석 수행 <ol><li> 시각적 추적 프로그램을 시작하고 저장을 엽니 다.이 분석을 위해 만들어진 실험 파일. </li><li> &quot;Detection Settings 2&quot;를 선택하십시오. </li><li> 16 개의 페트리 접시 중 8 개의 센터에 대조구 설탕 - 아가로 오스 큐브를 놓으십시오. 나머지 8 가지 설탕 - 아가로 오스 - 화합물 (억지력) 큐브와 함께이 과정을 반복하십시오. </li><li> 포셉을 사용하여 플라스틱 상자에서 단일 꿀벌을 제거하고 그것을 컨트롤 페트리 접시 중 하나에 넣으십시오. </li><li> 나머지 15 페트리 접시에 대해 4.4 단계를 반복하십시오. </li><li> 모든 접시를 라이트 박스에 놓고 탐지 설정 영역 2 (탐지 설정 2가 선택되었을 때 컴퓨터 화면에 표시됨)가 각 페트리 접시 경기장에 맞도록 배치합니다. 적색 스펙트럼으로 설정된 일련의 LED 조명으로 아래에서 라이트 박스를 켜십시오. 전체 상자와 카메라를 검정색 플라스틱 시트로 둘러 싸서 외장을 없애고 경기장 내의 그림자를 줄입니다. </li><li> 페트리 접시가 설정된 후에는 &quot;Detection Settings 1&quot;이선택한 설정. 참고 :이 시점에서 시각 추적 소프트웨어는 페트리 접시 경기장 내의 꿀벌 만 집어 야합니다. </li><li> Experiment Explorer에서 &quot;Acquisition&quot;을 선택하십시오. 오른쪽에있는 Acquisition Control (수집 제어) 팝업 상자에있는 녹색 &quot;Start Trial (시작하기)&quot;버튼을 눌러 녹음을 시작하십시오. </li><li> 10 분 동안 분석을 실행 한 다음 Acquisition Control (수집 제어) 팝업 상자에서 빨간색 &quot;Stop Trial (중지)&quot;버튼을 클릭하여 기록을 중지하십시오. </li><li> 페트리 접시에서 개체를 제거하고 두 번 테스트되지 않도록 별도의 컨테이너에 그들을 놓으십시오. </li><li> 같은 화합물에 대한 두 번째 시험을 위해 4.4-4.10 단계를 반복하십시오. 참고 :이 방법은 사용자가 필요에 따라 치료 당 꿀벌의 수를 늘리도록 수정할 수 있습니다. </li><li> 실험 탐색기에서 통계를 선택한 다음 계산을 클릭하십시오. </li><li> 데이터를 데이터 관리자 소프트웨어로 내보내고 다음을 사용하여 중요성을 분석합니다. 1-wTukey의 사후 테스트로 분산 분석, 선호 통계 소프트웨어 프로그램을 사용하여 unpaired t-test를 수행했습니다. </li></ol>

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	<li>Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissi&#232;re, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+valuation+of+the+vulnerability+of+world+agriculture+confronted+with+pollinator+decline.">Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline.</a> Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).</li><li>van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+historical+review+of+managed+honey+bee+populations+in+Europe+and+the+United+States+and+the+factors+that+may+affect+them.">A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and the factors that may affect them.</a> J Invertebr Pathol. 103, S80-S95 (2010).</li><li>Aizen, M. A., Harder, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Global+Stock+of+Domesticated+Honey+Bees+Is+Growing+Slower+Than+Agricultural+Demand+for+Pollination.">The Global Stock of Domesticated Honey Bees Is Growing Slower Than Agricultural Demand for Pollination.</a> Current Biol. 19 (11), 915-918 (2009).</li><li>Smith, K. M., Loh, E. H., Rostal, M. K., Zambrana-torrelio, C. M., Mendiola, L., Daszak, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogens,+Pests,+and+Economics+Drivers+of+Honey+Bee+Colony+Declines+and+Losses.">Pathogens, Pests, and Economics Drivers of Honey Bee Colony Declines and Losses.</a> Ecohealth. 10, 434-445 (2014).</li><li>Mullin, C. A., Frazier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Levels+of+Miticides+and+Agrochemicals+in+North+American+Apiaries:+Implications+for+Honey+Bee+Health.">High Levels of Miticides and Agrochemicals in North American Apiaries: Implications for Honey Bee Health.</a> PLoS ONE. 5 (3), (2010).</li><li>Li, Y., Kelley, R. A., Anderson, T. D., Lydy, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+comparison+of+two+multi-residue+methods+for+the+analysis+of+select+pesticides+in+honey+bees,+pollen,+and+wax+by+gas+chromatography+-+quadrupole+mass+spectrometry.">Development and comparison of two multi-residue methods for the analysis of select pesticides in honey bees, pollen, and wax by gas chromatography - quadrupole mass spectrometry.</a> Talanta. 140, 81-87 (2015).</li><li>Kakumanu, M. L., Reeves, A. M., Anderson, T. D., Rodrigues, R. R., Williams, M. A., Williams, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Honey+Bee+Gut+Microbiome+Is+Altered+by+In-Hive+Pesticide+Exposures.">Honey Bee Gut Microbiome Is Altered by In-Hive Pesticide Exposures.</a> Front Microbiol. 7, 1-11 (2016).</li><li>Katz, T. M., Miller, J. H., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+Historical+perspectives+and+new+developments.">Insect repellents: Historical perspectives and new developments.</a> J Am Acad Dermatol. 58 (5), 865-871 (2008).</li><li>Dickens, J. C., Bohbot, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mini+review:+Mode+of+action+of+mosquito+repellents.">Mini review: Mode of action of mosquito repellents.</a> Pestic Biochem Phys. 106 (3), 149-155 (2013).</li><li>Lawrence, K. L., Achee, N. L., Bernier, U. R., Mundal, K. D., Benante, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Field+Evaluations+of+Topical+Arthropod+Repellents+in+North,+Central,+and+South+America.">Field Evaluations of Topical Arthropod Repellents in North, Central, and South America.</a> J Med Entomol. 51 (5), 980-988 (2014).</li><li>Collins, A. M., Rubink, W. L., Cuadriello Aguilar, ., I, J., Hellmich Ii, ., L, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+insect+repellents+for+dispersing+defending+honey+bees+(Hymenoptera+Apidae).">Use of insect repellents for dispersing defending honey bees (Hymenoptera Apidae).</a> J Econ Entomol. 89 (3), 608-613 (1996).</li><li>Brown, M., Hebert, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insect+repellents:+An+overview.">Insect repellents: An overview.</a> J Am Acad Dermatol. 36 (2), 243-249 (1997).</li><li>Teeters, B. S., Johnson, R. M., Ellis, M. D., Siegfried, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+video-tracking+to+assess+sublethal+effects+of+pesticides+on+honey+bees+(Apis+mellifera+L.).">Using video-tracking to assess sublethal effects of pesticides on honey bees (Apis mellifera L.).</a> Environ Toxicol Chem. 31 (6), 1349-1354 (2012).</li><li>Vallet, A., Cassier, P., Lensky, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ontogeny+of+the+fine+structure+of+the+honeybee+(Apis+mellifera+L.)+workers+and+the+pheromonal+activity+of+2-heptanone.">Ontogeny of the fine structure of the honeybee (Apis mellifera L.) workers and the pheromonal activity of 2-heptanone.</a> J Insect Physiol. 37 (11), 789-804 (1991).</li><li>Free, J. B., Ja Pickett, ., Ferguson, a. W., Simpkins, J. R., Smith, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repelling+foraging+honeybees+with+alarm+pheromones.">Repelling foraging honeybees with alarm pheromones.</a> J Agr Sci. 105 (2), 255 (1985).</li></ol>

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이 시각 추적 프로토콜은 상대적으로 빠르고 쉬운 방법으로 꿀벌의 화학적 억제력을 스크리닝하는 간단한 방법을 제공합니다. 꿀벌의 화학 억제제에 대한 실험실 테스트에 권장되는 프로토콜은 없습니다. 이전 세미 및 풀 필드 연구는 꿀벌 방수제 14 , 15 ; 설명 된 프로토콜은 시간이 많이 걸리고 노동 집약적이며 일반적인 실험실 외부에서 추가 시설 ?...

유럽 ​​달콤한 꿀벌, Apis melliferaL. 은 전 세계적으로 2 천억 달러가 넘는 수분 공급 서비스를 제공하는 경제적 및 농업 적으로 중요한 곤충이다. 미국과 유럽에서는 꿀벌의 식민지 수가 감소하고 있습니다. 미국은 캘리포니아 를 잃었다. 1947-2008 년에 관리 된 꿀벌 군체의 60 %가 유럽을 잃어 버렸습니다. 1961-2007 년의 27 % 2 , 3 . 기생충 감염, 병원체 감염, 양봉 관행, 살충제 사용 등이 포함 되나 이에 국한되지 않는 식민지 손실의 증가를 초래할 수있는 요인에는 여러 가지가 있습니다. 꿀벌은 두 가지 주요 경로를 통해 살충제에 노출 될 수 있습니다. 하이브 외부의 살충제 노출은 사료를 먹은 개인이 작물과 접촉 할 때 발생할 수 있습니다.해충으로부터 보호하기 위해 화학 약품을 뿌렸습니다. 하이브 내 살충제 노출은 양봉가가 진드기, 박테리아 및 미생물 오염과 같은 병원성 해충 및 병원균을 통제하기 위해 화학 물질을 사용하는 경우에 발생할 수 있습니다 4 . 살충제 잔류 물은 미국과 캐나다의 24 개 양봉장에서 추출한 왁스, 꽃가루, 꿀벌 시료에서 확인되었습니다 5,6. 살충제 접촉이 꿀벌에 미치는 영향에는 급성 독성뿐만 아니라 마비, 방향 감각 상실 및 행동 및 건강 변화와 같은 치명적이지 않은 영향이 포함됩니다. 현대 농업은 농작물 수확량을 유지하기 위해 살충제 사용을 요구하기 때문에 이러한 화학 물질은 앞으로도 계속 의존하게 될 것입니다 2 . 살충제 노출로부터 꿀벌을 더 잘 보호하기 위해 새로운 프로토콜 및 규정 5 의 개발이 필요합니다.보호를위한 한 가지 가능한 접근법은 음식을 먹이로 먹는 동안 꿀벌이 살충제에 노출되는 것을 줄이기 위해 방수제를 사용하는 것입니다. 방충제 (IR)는 전형적으로 절지 동물 질병 매개체에 대한 개인적 물기 보호 조치로 사용되어왔다. 60 년 이상 전에 개발 된 가장 널리 사용되고 성공적인 IR은 DEET 8 , 9 입니다. 곤충 퇴치 시험의 금본위 제로 간주되며 세계 보건기구 및 환경 보호국 (EPA)에 의해 새로운 방충제 선별 검사에 대한 긍정적 인 통제로 사용됩니다 10 . 또한 DEET는 꿀벌을 위협에서 식민지로 흩어지게하는 것으로 밝혀졌습니다. 개인 IR과 관련된 현재의 특성은 다음과 같습니다 : (1) 광범위한 절지 동물에 대한 지속적인 효과; (2) 피부 또는 의복에 바르면 사용자에게 비자 극적이다; (3) 무취 또는쾌적한 냄새; (4) 의복에 아무런 영향을 미치지 않는다. (5) 피부에 바르거나 사용자의 발한, 씻기 및 닦기에 지장이없는 유성 외관; (6) 일반적으로 사용되는 플라스틱에는 영향을 미치지 않습니다. (7) 화학적으로 안정하고 광범위하게 사용하기에 적당하다. 꿀벌에 사용되는 방충제는 화학적으로 안정하고 널리 사용하기에 알맞고 냄새가 없거나 쾌적한 냄새가 나지 않는 지속 효과, 꿀벌에 무독성과 같은 몇 가지 속성 만 필요합니다. 그러나, 이러한 특성을 깊이 탐구하기 전에, 높은 처리율로 발수 / 억제를 위해 화합물을 스크리닝하는 방법이 필요하다. 여기에서는 꿀벌의 억제를위한 화합물을 스크리닝하는 실험실 분석을위한 프로토콜을 설명합니다. 이는 혐오 성을 결정하는 중요한 단계입니다. 다음 프로토콜은 꿀벌 13 에 대한 살충제의 준 치사 효과를 평가하기위한 시각 추적 방법을 설명하는 이전 연구에서 수정되었습니다. 하우이 프로토콜은 살충제 처리 작물에서 꿀벌을 억제 할 수있는 방충제의 영향을 측정하도록 고안되었습니다. 꿀벌의 화학 억제제에 대한 실험실 테스트에 권장되는 프로토콜이 없으므로이 프로토콜은 이러한 화합물을 스크리닝하는 간단한 방법을 제공합니다.

<table><tbody><tr><td>50 mL Erlenmeyer flask</td><td>Kimax</td><td>26500-50</td><td>used for making the sugar/agarose cubes</td></tr><tr><td>Sugar</td><td>Kroger</td><td></td><td>any similar product will sufffice</td></tr><tr><td>Deionized water</td><td></td><td></td><td>acquired in house</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Apex</td><td>20-102</td><td>used for making the sugar/agarose cubes</td></tr><tr><td>Mold for agarose cubes (Weigh Boat)</td><td></td><td></td><td>any mold that will provide the researcher with a 1.5 cm x 1.5 cm x 0.3 cm sugar/agarose cube will suffice</td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus</td><td></td><td>visual tracking software</td></tr><tr><td>633 nm LEDs</td><td>Cyron</td><td>HTP904E</td><td>These lights were placed into a constructed light box to illuminate the arenas from below.&amp;nbsp; The box was a simple wooden structure with a frosted plastic/plexi glass cover that allowed the light to disperse upwards without any glare.</td></tr><tr><td>Laptop or PC</td><td>Dell</td><td>Inspiron One 2305</td><td>necessary for video tracking software. Any pc device capable of runnin tbe visual tracking software will suffice</td></tr><tr><td>Bee Keeping protective clothing</td><td>Dadant &amp;amp; Sons Inc</td><td>V0126</td><td>any protective hood and jacket will suffice</td></tr><tr><td>Hive tool</td><td>Dadant &amp;amp; Sons Inc</td><td>M00757</td><td>used to open honey bee hive</td></tr><tr><td>Container for honey bees</td><td></td><td></td><td>any container suitable for housing and storing honey bees will suffice</td></tr><tr><td>Featherweight forceps narrow tip</td><td>Bioquip</td><td>4748</td><td>used to select individual honey bees</td></tr><tr><td>9 cm (diameter) Petri dish</td><td>Fisher Scientific&amp;nbsp;</td><td>S01778</td><td>arena used to contain individual honey bees during video tracking</td></tr><tr><td>Recording Device (Camera)</td><td>Basler</td><td>acA-1300-60gm</td><td>any device that can record the subject clearly and transfer the file to a computer will suffice</td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>Graphpad</td><td></td><td>any statistical software package will suffice</td></tr></tbody></table>

video tracking protocol to screen deterrent chemistries for honey bees

유럽 ​​달콤한 꿀벌, Apis mellifera L. 는 매년 수십억 달러를 번다 경제적으로 농업 적으로 중요한 수분 제입니다. 꿀벌의 식민지 수는 미국과 1947 년 이래 많은 유럽 국가에서 줄어들고 있습니다. 꿀벌을 살충제에 의도하지 않게 노출시키는 것을 포함하여 여러 가지 요인이이 감소에 영향을줍니다. 새로운 수법과 규정의 개발은 이러한 수분제에 대한 농약 노출을 줄이기 위해 보장된다. 한 가지 접근법은 최근의 살충제 처리 작물에서 꿀벌을 억제하는 혐오 화학 물질의 사용입니다. 여기에서는 혐오 화학 물질을 선택하기 위해 노출 된 꿀벌의 억지력을 식별하는 프로토콜에 대해 설명합니다. 꿀벌 사료를 수집하기 위해 시험 전 15 시간 동안 배양기에서 밤새도록 굶어 죽 읍니다. 개별 꿀벌은 설탕 - 아가 로즈 큐브 (제어 처리) 또는 설탕 - 아가로 오스 - 복합 큐브 (혐오 처리)가있는 페트리 접시에 배치됩니다접시의 중간에. 페트리 접시는 비디오 추적 소프트웨어를 사용하여 꿀벌의 운동 활동을 기록하는 라이트 박스에 카메라 아래에 배치되는 경기장 역할을합니다. 총 8 개의 대조구와 8 개의 혐오 치료제를 10 분 동안 분석하여 각각의 처리를 새로운 꿀벌과 중복시켰다. 여기에서 우리는 혼합 된 처리로 꿀벌이 설탕 - 아가로 오스 큐브에서 차단된다는 것을 보여줍니다. 꿀벌은 추가 화합물없이 당 - 아가로 오스 큐브에 끌립니다.

시각적 추적 프로토콜은 설탕 - 아가로 오스 (대조 치료) 또는 당 - 아가로 오스 복합 큐브 (억제 치료)로 대상 구역에서 꿀벌이 소비 한 시간을 기록하기 위해 개발되었습니다. 기록 된 시간은 통계 소프트웨어 프로그램을 사용하여 분석되었고 목표 영역에서 평균 ± 표준 오차가 막대 그래프로보고되었습니다. 해충 퇴치 / 억제 시험의 황금 표준 인 DEET가이 프로토콜에서 ?...

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Video Tracking Protocol to Screen Deterrent Chemistries for Honey Bees

꿀벌 식민지의 손실은 작물 수분 서비스에 대한 도전입니다. 현재의 pollinator 보호 관행은 혐기성 화학 물질을 사용하여 유해한 농약에 대한 꿀벌의 접촉을 최소화하기위한 대체적인 접근법을 보증합니다. 여기서 우리는 벌에 대한 억지력을 스크린하기위한 시각적 추적 프로토콜에 대한 상세한 방법을 제공합니다.

꿀벌을위한 억제 성 화학 물질을 차단하는 비디오 추적 프로토콜

The European honey bee, Apis mellifera L., is an economically and agriculturally important pollinator that generates billions of dollars annually. Honey ...

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Research

JoVE Journal

Environment

6.6K 조회수.  Virginia Tech.  꿀벌 식민지의 손실은 작물 수분 서비스에 대한 도전입니다. 현재의 pollinator 보호 관행은 혐기성 화학 물질을 사용하여 유해한 농약에 대한 꿀벌의 접촉을 최소화하기위한 대체적인 접근법을 보증합니다. 여기서 우리는 벌에 대한 억지력을 스크린하기위한 시각적 추적 프로토콜에 대한 상세한 방법을 제공합니다. 

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A Push-pull Protocol to Reduce Colonization of Bird Nest Boxes by Honey Bees

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. These bees select cavities that are suitable nest sites for birds, resulting in competition. The difficulty of removing bees and their defensive behavior makes a prevention protocol necessary. Here, we describe a push-pull integrated pest management protocol to deter bees from inhabiting bird boxes by applying a bird safe insecticide, permethrin, to repel bees from nest boxes, while simultaneously attracting them to pheromone-baited swarm traps. Shown here is an example experiment using Barn Owl nest boxes. This protocol successfully reduced colonization of Barn Owl nest boxes by Africanized honey bees. This protocol is flexible, allowing adjustments to accommodate a wide range of bird species and habitats. This protocol could benefit conservation efforts where AHB are located.

Preventing colonization of bird nest boxes by invasive Africanized honey bees is important for conservation efforts of nest-site limited birds. We provide an integrated pest management approach to &#34;push&#34; bees away from nest boxes with a repellant insecticide, permethrin, and &#34;pull&#34; them toward pheromone baited swarm traps.

푸시 풀 프로토콜 꿀 꿀벌에 의해 식민 새의 둥지 상자를 감소시키는

Introduction of the invasive Africanized honey bee (AHB) into the Neotropics is a serious problem for many cavity nesting birds, specifically parrots. ...

연구

환경과학

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

식민지 수준에 개인에서 꿀 꿀벌 개발에 대한 환경 화학 물질의 효과를 평가

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker bees spend the first half of their life inside the dark hive, where they are nursing the larvae or building the regular hexagonal combs for food (e.g. pollen or nectar) and brood3. The antennae are extraordinary multisensory feelers and play a pivotal role in various tactile mediated tasks4, including hive building5 and pattern recognition6. Later in life, each single bee leaves the hive to forage for food. Then a bee has to learn to discriminate profitable food sources, memorize their location, and communicate it to its nest mates7. Bees use different floral signals like colors or odors7, 8, but also tactile cues from the petal surface9 to form multisensory memories of the food source. Under laboratory conditions, bees can be trained in an appetitive learning paradigm to discriminate tactile object features, such as edges or grooves with their antennae10, 11, 12, 13. This learning paradigm is closely related to the classical olfactory conditioning of the proboscis extension response (PER) in harnessed bees14. The advantage of the tactile learning paradigm in the laboratory is the possibility of combining behavioral experiments on learning with various physiological measurements, including the analysis of the antennal movement pattern.

Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees Apis mellifera L.

In this protocol we show how to condition harnessed honey bees to tactile stimuli and introduce a 2D motion capture technique for analyzing the kinematics of fine-scale antennal sampling pattern.

촉각 시설과 꿀벌에 Antennal 샘플링 전략의 움직임 분석 (<em&gt; API를 mellifera</em&gt; L.)

Honey bees (Apis mellifera L.) are eusocial insects and well known for their complex division of labor and associative learning capability1, 2. The worker ...

신경과학

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees (Apis mellifera)

This video demonstrates novel techniques of RNA interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees using double-stranded RNA (dsRNA) injections. It also presents a protocol of proboscis extension response (PER) assay for measuring gustatory perception.	
	RNAi-mediated gene knockdown is an effective technique downregulating target gene expression. This technique is usually used for single gene manipulation, but it has limitations to detect interactions and joint effects between genes. In the first part of this video, we present two strategies to simultaneously knock down two genes (called double gene knockdown). We show both strategies are able to effectively suppress two genes, vitellogenin (vg) and ultraspiracle (usp), which are in a regulatory feedback loop. This double gene knockdown approach can be used to dissect interrelationships between genes and can be readily applied in different insect species.	
	The second part of this video is a demonstration of proboscis extension response (PER) assay in honey bees after the treatment of double gene knockdown. The PER assay is a standard test for measuring gustatory perception in honey bees, which is a key predictor for how fast a honey bee's behavioral maturation is. Greater gustatory perception of nest bees indicates increased behavioral development which is often associated with an earlier age at onset of foraging and foraging specialization in pollen. In addition, PER assay can be applied to identify metabolic states of satiation or hunger in honey bees. Finally, PER assay combined with pairing different odor stimuli for conditioning the bees is also widely used for learning and memory studies in honey bees.

RNAi-mediated Double Gene Knockdown and Gustatory Perception Measurement in Honey Bees Apis mellifera

In this protocol, we describe two strategies that simultaneously suppress two genes (double gene knockdown) in honey bees. Then we present how to use the proboscis extension response (PER) assay to study the effect of double gene knockdown on honey bee gustatory perception.

꿀벌의 RNAi를 매개로 두 유전자 넉다운과 미각 지각 측정 (<em&gt; 아피스 mellifera</em&gt;)

This video demonstrates novel techniques of RNA  interference (RNAi) which downregulate two genes simultaneously in honey bees  using double-stranded RNA ...

A Proboscis Extension Response Protocol for Investigating Behavioral Plasticity in Insects: Application to Basic, Biomedical, and Agricultural Research

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). There are several behavioral mechanisms through which an insect learns salient associations and relates them to these events. It is important to understand this behavioral plasticity for programs aimed toward assisting insects that are beneficial for agriculture. This understanding can also be used for discovering solutions to biomedical and agricultural problems created by insects that act as disease vectors and pests. The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol was developed for honey bees (Apis mellifera) over 50 years ago to study how they perceive and learn about floral odors, which signal the nectar and pollen resources a colony needs for survival. The PER procedure provides a robust and easy-to-employ framework for studying several different ecologically relevant mechanisms of behavioral plasticity. It is easily adaptable for use with several other insect species and other behavioral reflexes. These protocols can be readily employed in conjunction with various means for monitoring neural activity in the CNS via electrophysiology or bioimaging, or for manipulating targeted neuromodulatory pathways. It is a robust assay for rapidly detecting sub-lethal effects on behavior caused by environmental stressors, toxins or pesticides.
We show how the PER protocol is straightforward to implement using two procedures. One is suitable as a laboratory exercise for students or for quick assays of the effect of an experimental treatment. The other provides more thorough control of variables, which is important for studies of behavioral conditioning. We show how several measures for the behavioral response ranging from binary yes/no to more continuous variable like latency and duration of proboscis extension can be used to test hypotheses. And, we discuss some pitfalls that researchers commonly encounter when they use the procedure for the first time.

The Proboscis Extension Response (PER) conditioning protocol, developed for the honey bee (Apis mellifera), provides an ecologically-relevant and easily quantifiable means for studying several different mechanisms of learning in many insect species.

코 확장 응답 곤충의 행동 소성을 조사하기위한 프로토콜 : 기본, 바이오 메디컬에 응용 프로그램, 및 농업 연구

Insects modify their responses to stimuli through experience of associating those stimuli with events important for survival (e.g., food, mates, threats). ...

Radio Frequency Identification and Motion-sensitive Video Efficiently Automate Recording of Unrewarded Choice Behavior by Bumblebees

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification (RFID) readers built into artificial flowers that display various visual cues, and RFID tags (i.e., passive transponders) glued to the thorax of bumblebee workers. The novelty in our implementation is that RFID readers are built directly into artificial flowers that are capable of displaying several distinct visual properties such as color, pattern type, spatial frequency (i.e., &#8220;busyness&#8221; of the pattern), and symmetry (spatial frequency and symmetry were not manipulated in this experiment). Additionally, these visual displays in conjunction with the automated systems are capable of recording unrewarded and untrained choice behavior. The second method consists of recording choice behavior at artificial flowers using motion-sensitive high-definition camcorders. Bumblebees have number tags glued to their thoraces for unique identification. The advantage in this implementation over RFID is that in addition to observing landing behavior, alternate measures of preference such as hovering and antennation may also be observed. Both automation methods increase experimental control, and internal validity by allowing larger scale studies that take into account individual differences. External validity is also improved because bees can freely enter and exit the testing environment without constraints such as the availability of a research assistant on-site. Compared to human observation in real time, the automated methods are more cost-effective and possibly less error-prone.

This video describes Radio-Frequency Identification (RFID) and motion-sensitive video recording methods to monitor choice behavior by bumblebees.

무선 주파수 식별하고 효율적으로 모션에 민감한 비디오 땅벌에 의해 무보수 선택 행동의 기록을 자동화

We present two methods for observing bumblebee choice behavior in an enclosed testing space. The first method consists of Radio Frequency Identification ...

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees (Bombus terrestris)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from flowering plants. Only a few studies have described the gustatory responses of bees toward toxins in food, and these experiments have mainly used the proboscis extension response on restrained honey bees. Here, a new behavioral assay is presented for measuring the feeding responses of freely-moving, individual worker bumble bees to nutrients and toxins. This assay measures the amount of solution ingested by each bumble bee and identifies how tastants in food influence the microstructure of the feeding behavior.
The solutions are presented in a microcapillary tube to individual bumble bees that have been previously starved for 2-4 hr. The behavior is captured on digital video. The fine structure of the feeding behavior is analyzed by continuously scoring the position of the proboscis (mouthparts) from video recordings using event logging software. The position of the proboscis is defined by three different behavioral categories: (1) proboscis is extended and in contact with the solution, (2) proboscis is extended but not in contact with the solution and (3) proboscis is stowed under the head. Furthermore the speed of the proboscis retracting away from the solution is also estimated.
In the present assay the volume of solution consumed, the number of feeding bouts, the duration of the feeding bouts and the speed of the proboscis retraction after the first contact is used to evaluate the phagostimulatory or the deterrent activity of the compounds tested.
This new taste assay will allow researchers to measure how compounds found in nectar influence the feeding behavior of bees and will also be useful to pollination biologists, toxicologists and neuroethologists studying the bumble bee&#39;s taste system.

A Novel Behavioral Assay to Investigate Gustatory Responses of Individual, Freely-moving Bumble Bees Bombus terrestris

A novel behavioral assay is described for investigating the short term gustatory responses of the mouthparts of freely-moving bumble bees (Bombus terrestris) toward nutrients and toxins in solution.

소설 행동 분석은 (엉망으로 꿀벌을 자유롭게 이동 개인의 미각 응답을 조사하기<em&gt; 뒤의 terrestris</em&gt;)

Generalist pollinators like the buff-tailed bumble bee, Bombus terrestris, encounter both nutrients and toxins in the floral nectar they collect from ...

Preparation of Single-cohort Colonies and Hormone Treatment of Worker Honeybees to Analyze Physiology Associated with Role and/or Endocrine System

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related division of labor). Young workers are engaged in nursing the brood (nurse bees), while older workers are engaged in foraging for nectar and pollen (foragers). The physiology of the workers changes in association with this role shift. For example, the main function of the hypopharyngeal glands (HPGs) changes from the secretion of major royal jelly proteins (MRJPs) to the secretion of carbohydrate-metabolizing enzymes. Because worker tasks change as the workers age in typical colonies, it is difficult to discriminate the physiological changes that occur with aging from those that occur with the role shift. To study the physiological changes in worker tissues, including the HPGs, in association with the role shift, it would be useful to manipulate the honeybee colony population by preparing single-cohort colonies in which workers of almost the same age perform different tasks. Here we describe a detailed protocol for preparing single-cohort colonies for this analysis. Six to eight days after single-cohort colony preparation, precocious foragers that perform foraging tasks earlier than usual appear in the colony. Representative results indicated role-associated changes in HPG gene expression, suggesting role-associated HPG function. In addition to manipulating the colony population, analysis of the endocrine system is important for investigating role-associated physiology. Here, we also describe a detailed protocol for treating workers with 20-hydroxyecdysone (20E), an active form of ecdysone, and methoprene, a juvenile hormone analogue. The survival rate of treated bees was sufficient to examine gene expression in the HPGs. Gene expression changes were observed in response to 20E- and/or methoprene-treatment, suggesting that hormone treatments induce physiological changes of the HPGs. The protocol for hormone treatment described here is appropriate for examining hormonal effects on worker physiology.

Here we describe our detailed protocol for the preparation of single-cohort honeybee colonies&#160;&#8211; a useful tool for analyzing the role-associated worker physiology. We also describe detailed protocols for treating workers with juvenile hormone and ecdysone to evaluate the involvement of these hormones in the regulation of worker behavior and/or physiology.

단일 코호트 식민지와 노동자 꿀벌의 호르몬 치료의 준비 역할 및 / 또는 내분비 시스템과 생리학 관련 분석하기

Honeybee workers are engaged in various tasks related to maintaining colony activity. The tasks of the workers change according to their age (age-related ...

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize and to study. Therefore, bees have long been a favored model amongst neurobiologists and neuroethologists for studying the neural basis of social and natural behavior. It is important, however, that the experimental techniques used to study bees do not interfere with the behaviors being studied. Because of this, it has been necessary to develop a range of techniques for pharmacological manipulation of honey bees. In this paper we demonstrate methods for treating restrained or free-flying honey bees with a wide range of pharmacological agents. These include both noninvasive methods such as oral and topical treatments, as well as more invasive methods that allow for precise drug delivery in either systemic or localized fashion. Finally, we discuss the advantages and disadvantages of each method and&#160;describe common hurdles and how to best overcome them. We conclude with a discussion on the importance of adapting the experimental method to the biological questions rather than the other way around.

Neuropharmacological Manipulation of Restrained and Free-flying Honey Bees, Apis mellifera

This manuscript describes several protocols for administering pharmacological agents to honey bees, including simple noninvasive methods for free-flying bees, as well as more invasive variants that allow precise localized treatment of restrained bees.

절제된 자유 비행 꿀 꿀벌의 Neuropharmacological 조작,<em&gt; API를 mellifera이</em

Honey bees demonstrate astonishing learning abilities and advanced social behavior and communication. In addition, their brain is small, easy to visualize ...

SwarmSight: Real-time Tracking of Insect Antenna Movements and Proboscis Extension Reflex Using a Common Preparation and Conventional Hardware

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis during feeding. The ability to rapidly obtain high-resolution measurements of natural antenna and proboscis movements and assess how they change in response to chemical, developmental, and genetic manipulations can aid the understanding of insect behavior. By extending our previous work on assessing aggregate insect swarm or animal group movements from natural and laboratory videos using the video analysis software SwarmSight, we developed a novel, free, and open-source software module, SwarmSight Appendage Tracking (SwarmSight.org) for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The software processes frames about 120 times faster than humans, performs at better than human accuracy, and, using 30 frames per second (fps) videos, can capture antennal dynamics up to 15 Hz. The software was used to track the antennal response of honey bees to two odors and found significant mean antennal retractions away from the odor source about 1 s after odor presentation. We observed antenna position density heat map cluster formation and cluster and mean angle dependence on odor concentration.

This protocol describes steps for using the novel software, SwarmSight, for frame-by-frame tracking of insect antenna and proboscis positions from conventional web camera videos using conventional computers. The free, open-source software processes frames about 120 times faster than humans and performs at better than human accuracy.

SwarmSight: 곤충 안테나와 일반적인 준비와 기존 하드웨어를 사용 하 여 코 확장 반사의 실시간 추적

Many scientifically and agriculturally important insects use antennae to detect the presence of volatile chemical compounds and extend their proboscis ...

꿀벌을위한 억제 성 화학 물질을 차단하는 비디오 추적 프로토콜

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푸시 풀 프로토콜 꿀 꿀벌에 의해 식민 새의 둥지 상자를 감소시키는

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코 확장 응답 곤충의 행동 소성을 조사하기위한 프로토콜 : 기본, 바이오 메디컬에 응용 프로그램, 및 농업 연구

무선 주파수 식별하고 효율적으로 모션에 민감한 비디오 땅벌에 의해 무보수 선택 행동의 기록을 자동화

소설 행동 분석은 (엉망으로 꿀벌을 자유롭게 이동 개인의 미각 응답을 조사하기

단일 코호트 식민지와 노동자 꿀벌의 호르몬 치료의 준비 역할 및 / 또는 내분비 시스템과 생리학 관련 분석하기

절제된 자유 비행 꿀 꿀벌의 Neuropharmacological 조작,

SwarmSight: 곤충 안테나와 일반적인 준비와 기존 하드웨어를 사용 하 여 코 확장 반사의 실시간 추적