Bu çalışma NSFC 81570244, FoKo 23/2013 ve SFB 1116 / B01 tarafından ve Kardiyovasküler Araştırma Enstitüsü Düsseldorf (CARID) tarafından finanse edildi.

Tüm deneyler yerel düzenleyici kurum (Nordrhein-Westfalen, Almanya&#39;nın LANUV) tarafından onaylandı ve hayvan kullanımı yönergelerine göre gerçekleştirildi. Hayvanlar standart dondurma diyeti ile beslendi ve ad libitum musluk suyu aldı. Deneyin her adımında gerekli olan tüm ekipman ve kimyasallar Malzeme Tablosu&#39;nda mevcuttur. 1. Lateks Kapağı ve İntraventriküler Balonun Hazırlanması <ol><li> Sıçan kalbinin ortalama boyuyla (vücut ağırlığı 300-350 g) eşleşen bir freze makinesini kullanarak alüminyum kalıp yapın. Süper ince (10/0) ​​zımpara kağıdıyla kalıpları silin. NOT: Kalıbın ayrıntılı ölçümleri Şekil 1A&#39;da gösterilmiştir. </li><li> Lateks kapağını hazırlamak için alüminyum kalıbın boynunu freze makinesine dikey olarak sabitleyin. NOT: Freze makinesi, kalıbın yavaş yavaş döndürülmesine neden olur. Alternatif olarak, bir elektrik motoru kullanılabilir. </<html> li&gt; <li> 20 mL sıvı lateks (ticari olarak satın alın, Malzeme Tablosu&#39;na bakın) 50 mL cam beher içine dökün. </li><li> Kalıbın tüm gövdesi lateks solüsyona dalıncaya kadar kalıp indirin. </li><li> Döndürürken kalıbı yavaşça kaldırın (5 cm / dak.). </li><li> Kalıp yüzeyindeki lateks katılaşıncaya kadar, kalıbı 15 dakika daha karıştırmaya devam edin. </li><li> Ayırırken hasar görmesini önlemek için kalıbın yüzeyine (zaten ince bir lateks film ile kaplı) yaklaşık 1 g talk pudrası ekleyin. </li><li> Kalıp yüzeyinden önceden kurutulmuş lateks kapağı parmaklarla hafifçe ayırın; Lateks kapağı şimdi kullanıma hazırdır ( Şekil 1B ). </li><li> Lateks kapağının çıkışını daha sonra CT&#39;nin toplanması için kullanılan 15 cm silikon tüpüne (KIM. = 0.2 mm) bağlayın. </li><li> Ventriküler lateks balonu su ile doldurun ve 1 mL&#39;lik, su dolu bir şırıngaya bağlı bir L şeklinde metal kanül üzerine sıkıca sabitleyin (&gt; Şekil 1C). NOT: Bu, kalbin dik konumda olmasını sağlamak için kullanılacaktır (aşağıya bakınız). </li><li> Ekli 1 mL şırınga ile birkaç deflasyon / şişirme testi gerçekleştirerek balonun hava geçirmez olduğundan emin olun. </li><li> İlerletilmiş intraventriküler basınç gelişimini ölçmek için kanülü üç yönlü bir durdurucu vasıtasıyla bir basınç transdüktörüne bağlayın ( Şekil 1C ). </li></ol> 2. Krebs-Henseleit Tampon (KHB) ve Langendorff Perfüzyon Sisteminin Hazırlanması <ol><li> Sabit akış (bir silindir pompa tarafından tahrik edilen) veya sabit basınç (bir cam kolondaki statik basınç ile üretilen) modunu kullanarak bir Langendorff perfüzyon sistemi oluşturun. NOT: Langendorff kalp preparatının ayrıntıları daha önce 12 açıklanmıştır. </li><li> Modifiye edilmiş bir KHB&#39;nin 2 L&#39;si hazırlayın (mM: 116.02 NaCl, 4.63 KC1, 1.10 MgS04.7H20, 1.21 K2 HPO4 </suB&gt;, 2.52 CaCl2 · 2H20, 24.88 NaHC03, 8.30 D-glikoz ve 2.0 sodyum piruvat). <ol><li> Tüm kimyasalları ancak CaCl 2 tartın ve 2 L&#39;lik bir şişede 1.8 L&#39;lik iki damıtık suda çözündürün. </li><li> Ortamı karboksilik (% 95 O 2 /% 5 CO 2 ) ile manyetik karıştırma altında dengelemede (pH: 7.4) en az 5 dakika kabarcık haline getirin. </li><li> 0.74 g CaCI2.2H20 ilave edin ve toplam hacmi, iki kez damıtılmış su ile 2 L&#39;ye getirin. </li><li> Karbondioksit ile ortamı 5 dakika daha karıştırıp köpürtmeye devam edin. </li><li> Kalbin mikrosirkülasyonunu engelleyebilecek küçük parçacıkları ortadan kaldırmak için KHB&#39;yi 0.2 um filtreyle filtreleyin. </li></ol></li><li> Langendorff perfüzyon sisteminin hazırlanması. <ol><li> Filtrelenen KHB&#39;yi önceden ısıtılmış su banyosuna (38 ° C) yerleştirin; 100 cmH2O basınç içerecek şekilde karbogen ile kabarcık tutunE KHB rezervuarını. </li><li> KHB ile Langendorff perfüzyonu için 100 cmH2O hidrostatik basıncı oluşturmak için rezervuarı cam kolona bağlayın; Karbon ile kolonun içindeki KHB&#39;yi kabarcıklandırmaya devam edin. </li><li> Aortik kanül çıkışındaki sıcaklık 37 ° C olacak şekilde ısıtma sisteminin sıcaklığını ayarlayın. </li><li> Boru sisteminin kabarcıksız olduğundan emin olun. </li><li> KHB&#39;deki PO2 500-600 mmHg&#39;ye (bir kan gazı analizörü ile ölçülene kadar) ulaşana kadar, KHB&#39;yi karbojen ile oksijenle ilave 5 dakika oksijenleyin. </li></ol></li><li> Perfüzyon sistemini, 100 cmH2O sabit bir basınçta veya manuel anahtarlama kullanarak yaklaşık 10-20 mL / dakika sabit bir akış halinde çalıştırmak üzere ayarlayın. Alternatif olarak, perfüzyon moduna anında geçiş yapmak için değiştirilebilir bir STH pompa kontrol cihazı kullanın. </li></ol> 3. Kalp Yalıtımı ve Kanülasyon NOT: Vücut ağırlığı 30 olan erkek Wistar sıçanları0-350 g kalp boyutları ön dökme lateks kapağı ile eşleşecek şekilde kullanılmıştır. Sıçanlar sol atardamardan 50 dakika boyunca inen (LAD) bağlandıktan sonra reperfüzyon uygulandı veya sahte ameliyat edildi. Miyokard infarktüsünün (MI) indüksiyonu için metodolojinin ayrıntıları başka yerlerde bildirilmiştir 13 . Enfarktüslü hayvanlarda yapılan ters kalp deneyleri ameliyattan 5 gün sonra gerçekleştirildi. <ol><li> Bir hayvan tutma odasına (20 L) bağlı bir izofluran buharlaştırıcı (% 2 V / V) kullanarak sıçanlara anestezi uygulayın. </li><li> Derin anesteziye ulaşıldıktan sonra sıçanları bir çalışma masasına (sıcaklık kontrollü değil) aktarın. </li><li> Forseps kullanarak göğüs kemiğinin hemen altındaki cildi ve kasları kaldırın ve ağır makaslarla kaburgaların alt kenarlarında kesin. </li><li> İnce makas kullanarak, kaburga kenarında diyaframın içine küçük bir kesit yapın. Tüm ventral göğüs duvarının bir flebi yapmak için kaburgaları kaudally kesin. </li><li> Kalbi başparmak ile hafifçe kapın aIndeks ve orta parmakları kaldırın ve yavaşça kaldırın böylece kalp damarları hafif gerilir. </li><li> Aort tamamen açığa çıkıncaya kadar kalbi tüketin. </li><li> Kalbi, 50 mL buz soğukluğundaki KHB (4 ° C) içeren 100 mL&#39;lik bir behergreye yerleştirin ve perfüzyon aparatına taşıyın. </li><li> Hemen kalpten aort yoluyla damlayan bir kanül üzerine monte edin ve dikişle sıkıca tutun (4-0). Kalbe giren hava kabarcığından kaçının. </li><li> Sabit perfüzyon basıncı uygulayın (100 cmH 2 O). Alternatif olarak, tam akış hızı (20 mL / dakika ile başlanarak) uygulanabilir. Not: Toraksın açılmasından yüreğin perfüzyon kanülüne bağlanmasına kadar olan süre deneyimli bir operatörün elinde yaklaşık 3 dakika sürmelidir. </li></ol> 4. Reversed-heart Model <ol><li> Kalbin arka duvarı yüzü görünene dek aortik kanülü yavaşça döndürün. </li><li> Bağ dokusunu makasla çıkartınSol atriyumun açılmasını açığa çıkararak intraventriküler kanülasyona hazır hale getirir. </li><li> Sol atriyum yoluyla katı bir katetere tutturulmuş havalandırılmış lateks balonu sol ventriküle yerleştirin. </li><li> Balonu, tüm ventriküler boşluğu doldurana kadar şişirin (şişirme hacmi şırıngada önceden işaretlenmiştir). </li><li> Kalbi ters çevene kadar ters çevirin, bunu intraventriküler balon kateteri ile destekleyin. </li><li> Şekil 1C&#39;de gösterildiği gibi, sert bir metal kateteri ile intraventriküler balon kullanılarak ters çevrilmiş kalbi dik konumda mekanik olarak stabilize eder. </li><li> Aort kökünün aşırı bükülmesini önlemek için kalbin pozisyonunu ayarlayın. </li><li> Diyastolik basıncı 3-5 mmHg&#39;ye ayarlayın (intra-ventriküler balon ile ölçülür; bkz. Şekil 1C ). </li><li> Kalbin epikardiyal yüzeyini gözleyin ve küçük damlacıkların oluşmasını sağlayın. </li><li> Lateks kapağı o yerleştirinParmaklarını kullanarak tüm kalbi hafifçe bastırarak kalbe yüzeye sürükleyin. </li><li> Lateks kapağın ventriküler yüzeyin çoğunu kapladığından emin olun. </li><li> Varsa, kapak ve tüp içindeki hava kabarcıklarını 1 mL&#39;lik şırıngayla hafifçe emerek çıkarın. </li><li> CT-letting hortumunun distal açıklığını kalbin yatay seviyesinin 10 cm altına ayarlayın. NOT: Bu prosedür, negatif hidrostatik basınca karşı hafif emmeyi sağlar. </li><li> NaCl ile 1: 1 oranında karıştırılmış buz içine yerleştirilmiş 1.5 mL&#39;lik bir toplama tüpünde damlalar toplayın. Yaklaşık 0.15-1.5 mL BT toplayın. NOT: Buz / NaCl karışımı, toplama borusundaki sıcaklığı sıfırdan (yaklaşık -4 ° C) sabitleştirir. NOT: Örnekleme süresi, deneysel amaca bağlıdır. BT&#39;nin akış hızı, sahte işletilen hayvanlarda (n = 3) yaklaşık 27 ± 20 μL / dk ve koroner lige olan hayvanlar için (n = 11) 100 ± 47 μL / dk&#39;dır. </li><li> BT örneklerini tartın ve snap-freeze edinSıvı azot içinde eritin ve sonraki ölçümler için onları -80 ° C&#39;de saklayın. </li></ol> 5. CT&#39;nin analizi <ol><li> Bilimsel soruna bağlı olarak, metabolitlerin analizi için CT sıvısını kullanın. NOT: Şekil 2 ve Şekil 3&#39;te gösterilen veriler sabit basınçlı bir perfüzyon (100 cmH20) &#39;dan toplanmış ve yaklaşık 0.15-1.5 mL CT sıvısı 10 dakika içinde toplanmıştır. Bu zaman ve hacim, çeşitli purinlerin proteomik (minimum 50 μL; Şekil 2 ) 14 ve HPLC (minimum: 20 μL; Şekil 3 ) için yeterliydi. </li></ol>

<ol>
	<li>Henkel, D. M., Redfield, M. M., Weston, S. A., Gerber, Y., Roger, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Death+in+heart+failure:+a+community+perspective.">Death in heart failure: a community perspective.</a> Circ Heart Fail. 1 (2), 91-97 (2008).</li><li>Limana, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+induces+embryonic+reprogramming+of+epicardial+c-kit(+)+cells:+role+of+the+pericardial+fluid.">Myocardial infarction induces embryonic reprogramming of epicardial c-kit(+) cells: role of the pericardial fluid.</a> J Mol Cell Cardiol. 48 (4), 609-618 (2010).</li><li>Brunner, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+tissue+endothelin-1+levels+under+basal,+stimulated,+and+ischemic+conditions.">Cardiac tissue endothelin-1 levels under basal, stimulated, and ischemic conditions.</a> J Cardiovasc Pharmacol. 26, S44-S46 (1995).</li><li>de Lannoy, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renin-angiotensin+system+components+in+the+interstitial+fluid+of+the+isolated+perfused+rat+heart.+Local+production+of+angiotensin+I.">Renin-angiotensin system components in the interstitial fluid of the isolated perfused rat heart. Local production of angiotensin I.</a> Hypertension. 29 (6), 1240-1251 (1997).</li><li>Strupp, M., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+Lactate+And+Glucose-Concentrations+Of+the+Isolated-Perfused+Rat-Heart+before,+during+And+after+Anoxia.">Interstitial Lactate And Glucose-Concentrations Of the Isolated-Perfused Rat-Heart before, during And after Anoxia.</a> Pflugers Arch. 423 (3-4), 232-237 (1993).</li><li>Wienen, W., Jungling, E., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enzyme-Release+into+the+Interstitial+Space+of+the+Isolated+Rat-Heart+Induced+by+Changes+in+Contractile+Performance.">Enzyme-Release into the Interstitial Space of the Isolated Rat-Heart Induced by Changes in Contractile Performance.</a> Cardiovasc Res. 28 (8), 1292-1298 (1994).</li><li>De Deckere, E. A., Ten Hoor, ., P, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modified+Langendorff+technique+for+metabolic+investigations.">A modified Langendorff technique for metabolic investigations.</a> Pflugers Arch. 370 (1), 103-105 (1977).</li><li>Tschubar, F., Rose, H., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+transfer+across+the+myocardial+capillary+wall.">Fatty acid transfer across the myocardial capillary wall.</a> J Mol Cell Cardiol. 25 (4), 355-366 (1993).</li><li>Wienen, W., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-+and+extracellular+markers+in+interstitial+transudate+of+perfused+rat+hearts.">Intra- and extracellular markers in interstitial transudate of perfused rat hearts.</a> Am J Physiol. 254 (4 Pt 2), H785-H794 (1988).</li><li>Sasse, A., Ding, Z. P., Wallich, M., Godecke, A., Schrader, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+transfer+of+adenovirus+is+augmented+by+nitric+oxide+in+the+rat+heart.">Vascular transfer of adenovirus is augmented by nitric oxide in the rat heart.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 287 (3), H1362-H1368 (2004).</li><li>Gnecchi, M., Zhang, Z., Ni, A., Dzau, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paracrine+mechanisms+in+adult+stem+cell+signaling+and+therapy.">Paracrine mechanisms in adult stem cell signaling and therapy.</a> Circ Res. 103 (11), 1204-1219 (2008).</li><li>Herr, D. J., Aune, S. E., Menick, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+and+Assessment+of+Ischemia-reperfusion+Injury+in+Langendorff-perfused+Rat+Hearts.">Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts.</a> J Vis Exp. (101), e52908 (2015).</li><li>Ding, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epicardium-Derived+Cells+Formed+After+Myocardial+Injury+Display+Phagocytic+Activity+Permitting+In+Vivo+Labeling+and+Tracking.">Epicardium-Derived Cells Formed After Myocardial Injury Display Phagocytic Activity Permitting In Vivo Labeling and Tracking.</a> Stem Cells Transl Med. 5 (5), 639-650 (2016).</li><li>Hartwig, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Secretome+profiling+of+primary+human+skeletal+muscle+cells.">Secretome profiling of primary human skeletal muscle cells.</a> Biochim Biophys Acta. 1844 (5), 1011-1017 (2014).</li><li>Smolenski, R. T., Lachno, D. R., Ledingham, S. J. M., Yacoub, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+sixteen+nucleotides,+nucleosides+and+bases+using+high-performance+liquid+chromatography+and+its+application+to+the+study+of+purine+metabolism+in+hearts+for+transplantation.">Determination of sixteen nucleotides, nucleosides and bases using high-performance liquid chromatography and its application to the study of purine metabolism in hearts for transplantation.</a> J Chromatogr. 527 (2), 414-420 (1990).</li><li>Decking, U. K., Juengling, E., Kammermeier, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interstitial+transudate+concentration+of+adenosine+and+inosine+in+rat+and+guinea+pig+hearts.">Interstitial transudate concentration of adenosine and inosine in rat and guinea pig hearts.</a> Am J Physiol. 254 (6 Pt 2), H1125-H1132 (1988).</li><li>Heller, L. J., Mohrman, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estimates+of+interstitial+adenosine+from+surface+exudates+of+isolated+rat+hearts.">Estimates of interstitial adenosine from surface exudates of isolated rat hearts.</a> J Mol Cell Cardiol. 20 (6), 509-523 (1988).</li></ol>

Yazarlar rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ettiler.

Ters kalp modeli, iyi kurulmuş Langendorff kalp perfüzyon tekniğine 12 dayalıdır ve kalbi ters çeviren bir pozisyona çevirerek ve bu pozisyonu katı bir intra-ventriküler balon kateteri kullanarak tutarak gerçekleştirilir. Böyle bir şekilde, kalp interstisyel transüdat, kalbin tabanından yerçekimi damlamasıyla, koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayrılabilir. BT tüm kalbin yüzeyine yerleştirilen ince ve esnek bir lateks kap yardımıyla sürekli toplanabilir. </p...

Kalp yetmezliği (HF) dünya çapındaki insanlarda önde gelen ölüm nedenidir 1 . HF genellikle miyokardit, iskemik miyokard hasarları ve sol ventriküler yeniden modelleme nedeniyle ortaya çıkar ve kardiyak kontraktil fonksiyonun ve hastaların yaşam kalitesinin ilerleyici bozulmasına neden olur. Kardiyoloji ve kardiyak cerrahideki gelişmeler HF mortalitesinde belirgin bir düşüşe sahip olmakla birlikte, önemli bir morbiditeye sahip olan kaçınılmaz ilerleyici bir hastalık sürecinin geçici &quot;geciktiricileri&quot; olarak görev yapmaktadır. Bu nedenle, mevcut etkin tedavi eksikliği, HF&#39;yi önleyebilecek veya hatta tersine çevirebilecek yeni moleküler hedefleri tanımlama gereksinimini ortaya koymaktadır. Bu, hücre dışı matriksteki değişiklikler, kontrol edilemeyen kardiyak immün yanıt ve kardiyak ve non-kardiyak hücreler arasındaki etkileşimleri içerir 2 . Kardiyak hücrelerin direkt olarak maruz kaldıkları mikro çevreyi tanımak önemlidirYaralı kalbin bağışıklık ve rejeneratif tepkisini şekillendirir. İzole edilmiş salinle perfüze edilen kalpte, CT, fizyolojik ve patofizyolojik koşullar altında 3 , 4 , 5 olmak üzere, interstisyel sıvı boşluğundan ( yani, mikro çevre) türemiş küçük damlacıklar şeklinde kalp yüzeyinde üretilir. Bu nedenle, BT&#39;nin ( yani, interstisyel sıvı) analizi, kalp metabolizmasını ve kontraktil fonksiyonunu düzenleyen faktörlerin belirlenmesine veya hasar gören kalbe göç ettikten sonra immün hücre fonksiyonlarını etkilemesine yardımcı olabilir. Potansiyel olarak, bu, KY tedavisi için yeni terapötik stratejilerin geliştirilmesine yol açabilir. Kemirgen kalplerdeki BT koleksiyonu teknik açıdan zorlayıcıdır. Düzenli Langendorff perfüze edilen kalpte, BT&#39;nin özel koleksiyonu zordur çünkü BT&#39;nin koronar ile karışımıY venöz atık perfüzat, interstisyel boşluktan salınan herhangi bir metabolit / enzim konsantrasyonunu beklenmedik şekilde inceltir. Bu kısıtlılığın üstesinden gelmek için olası bir strateji, pulmoner kanülle venöz atığın dışlanması ve aynı anda pulmoner ven 7&#39;nin bağlanmasıdır . Bununla birlikte, bu yöntem pulmoner arter ve venin bağlanması ve bağlanması ile ilgili zorluklarla karşı karşıya olup, venöz atığın kardiyak transüda sızmasına neden olabilir. Bir ters kalp modeli kullanma kavramı, ilk önce izole edilmiş, perfüze edilmiş kalbi ters çeviren Kammermeier grubu tarafından ortaya atıldı ve venöz atıkların kontaminasyonu olmaksızın BT&#39;yi sürekli örneklemek için epikardiyal yüzeye ince bir lateks kap yerleştirdi. 8 , 9 . Bu prosedürü kullanarak BT&#39;nin kalpten 9 salınan metabolitlerin çok hassas bir ölçümü sağladığı gösterildi,Yağlı asitlerin 8 kılcal aktarımı ve viral parçacıklar 10 . Daha yakın zamanlarda, lokal immün yanıtı düzenleyen ve kalp anjiyogenezisini 11 arttıran parakrin faktörler, kök hücre temelli kalp hastalığı tedavisinin yararlı etkileri ile ilişkilendirilmiştir. Ters çevrilmiş kalpteki CT&#39;nin analizi, bu bireysel parakrin faktörleri kimyasal olarak tanımlamaya yardımcı olabilir. Buna ek olarak, BT, kalpteki bağışıklık hücrelerinin in vivo aktivasyonuyla ilgili faktörleri tanımlamaya yardımcı olabilir. Burada verilen kalp yüzeyinden CT koleksiyonunun ayrıntılı açıklaması, genel kardiyak fonksiyonla ilişkili bağışıklık hücreleri, fibroblastlar, endotel hücreleri ve kardiyomiyositlerin etkileşimini inceleyen araştırmacılar için deneysel açıdan yararlıdır. Yukarıda belirtildiği gibi, interstisyel sıvı, hücreden hücreye iletişim için bilgiyi kalp içinde taşır;BT uygun bir şekilde toplanarak değerlendirilebilir. Ters çevrilmiş kalpten BT nasıl toplanacağına dair bir video protokolü de dahil olmak üzere ayrıntılı teknik açıklama, bu benzersiz tekniğin gelecekteki uygulamasını kolaylaştırmalıdır.

<table><tbody><tr><td>Latex Solution</td><td>ProChemie</td><td>Z-Latex LA-TZ</td><td>http://kautschukgesellschaft.de/%E2%80%A8z-latex-la-tz</td></tr><tr><td>Aluminum Mold</td><td>Home made</td><td>-</td><td>Reverse heart model</td></tr><tr><td>Universal Ovens</td><td>Memmert</td><td>UNB 400</td><td>Reverse heart model</td></tr><tr><td>Latex Balloon</td><td>Hugo Sachs</td><td>Size 4</td><td>Reverse heart model</td></tr><tr><td>Milling Machine</td><td>Proxxon</td><td>MF70</td><td>Reverse heart model</td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>Sigma</td><td>SZBD0810V</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Sodium Hydrogen Carbonate</td><td>Roth</td><td>68852</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Potassium Chloride</td><td>Merck</td><td>49361</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Magnesium Sulphate Heptahydrate</td><td>Merck</td><td>58861</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Potassium Dihydrogen Phosphate</td><td>Merck</td><td>48731</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>D(+)-Glucose Anhydrous</td><td>Merck</td><td>83371</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Calcium Chloride Dihydrate</td><td>Fluka</td><td>21097</td><td>Chemicals</td></tr><tr><td>Balance</td><td>VWR</td><td>SE 1202</td><td>Weighing chemicals</td></tr><tr><td>Double Distilled Water</td><td>Millpore</td><td>-</td><td>Disolving chemicals</td></tr><tr><td>Medical Pressure Transducer</td><td>Gold</td><td>-</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Medical Flow Probe</td><td>Transonic</td><td>3PXN</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Heating Circulating Bath</td><td>Haake&amp;nbsp;</td><td>B3 ; DC1</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Laboratory and Vaccum Tubing</td><td>Tygon</td><td>R-3603</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Animal Research Flowmeters</td><td>Transonic</td><td>T206</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>PowerLab Data Acquisition Device</td><td>AD Instruments</td><td>Chart 7.1</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>LabChart Data Acquisition Software</td><td>AD Instruments</td><td>Chart 7.1</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Peristaltic Pump</td><td>Glison</td><td>MINIPULS 3</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Glass Water Column</td><td>home made</td><td>-</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Water Bath Protective Agent</td><td>VWR</td><td>462-7000</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Sterile Disposable Filters (0.2 &amp;micro;m)</td><td>Thermo Scientific</td><td>595-4520</td><td>Langendorff apparatus</td></tr><tr><td>Blood gas analyzers</td><td>Radiometer</td><td>ABL90 FLEX PLUS</td><td>Gas analyzer</td></tr><tr><td>70% ethanol</td><td>VWR</td><td>UN1170</td><td>Cleaning&amp;nbsp; tubings</td></tr><tr><td>100% ethanol</td><td>Merck</td><td>64-17-5</td><td>Cleaning tubings</td></tr><tr><td>Wistar Rats</td><td>Janvier</td><td>-</td><td>Animals</td></tr><tr><td>Stainless Scissors</td><td>AESCULAP</td><td>BC702R</td><td>Surgical Instruments</td></tr><tr><td>Stainless Scissors</td><td>AESCULAP</td><td>BC257R</td><td>Surgical Instruments</td></tr><tr><td>Big Forceps</td><td>AESCULAP</td><td>-</td><td>Surgical Instruments</td></tr><tr><td>8m/m Stainless Forceps</td><td>F.S.T</td><td>11052-10</td><td>Surgical Instruments</td></tr><tr><td>superfine (10/0) emery paper</td><td>3M</td><td>051111-11694</td><td>Reverse heart model</td></tr></tbody></table>

the inverted heart model for interstitial transudate collection from the isolated rat heart

Mevcut protokol, izole edilen salinle perfüze edilen fare kalpten kardiyak transüda (BT) toplanmasına olanak tanıyan eşsiz bir yaklaşımı açıklamaktadır. Kalbin Langendorff tekniğine göre izole edilmesi ve retrograd perfüzyonundan sonra, kalp ters çevrilir ve sol ventriküle yerleştirilen bir balon kateteri ile mekanik olarak stabilize edilir. Daha sonra, daha önce sıçan kalbinin ortalama ebadına uyacak şekilde dökülen ince bir lateks kapak epikardiyal yüzeye yerleştirilir. Lateks kapağın çıkışı, silikon boruya bağlanır ve distal açıklık kalbin taban seviyesinin 10 cm altına düşer ve hafif emiş oluşturur. Epikardiyal yüzey üzerinde sürekli üretilen BT, daha ileri analiz için buzla soğutulmuş şişelerde toplanır. Koroner venöz atık perfüzatın% 0.1-1&#39;sini oluşturan kontrollü ve enfarktüslü kalpte CT oluşum hızı 17 ila 147 μL / dk (n = 14) arasında değişmektedir. Proteomik analiz ve yüksek performansRmance sıvı kromatografisi (HPLC), toplanan BT&#39;nin geniş bir protein spektrumu ve purinergik metabolitleri içerdiğini ortaya koydu.

<html> Ters kalp modeli, izole edilmiş, retro-perfüze edilmiş sıçan kalbinde kardiyak interstisyel transüdaatın toplanmasını sağlar ( Şekil 1A- C ). 100 cmH2O sabit bir basınçta perfüze edildiğinde, interstisyel sıvı oluşumu hızı, izole edilen kalpteki koroner venöz atığın% 0.1-1&#39;i kadar, 17 ila 147 uL / ​​dakika arasında değişmektedir. Bilinçoni...

Watch this Scientific Journal Video about The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart at JoVE.com

The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

Bu protokol, izole edilmiş perfüze edilmiş fare kalpten kardiyak interstisyel sıvıyı toplamak için bir yöntemi açıklamaktadır. İnterstisyel transüdaatı koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayırmak için, Langendorff perfüze edilen kalp ters çevrilir ve kalp yüzeyinde oluşan transüda (interstisyel sıvı) yumuşak bir lateks kapak kullanılarak toplanır.

İzole edilen fare kalpten interstisyel transüdao toplanması için ters kalp modeli

The present protocol describes a unique approach that enables the collection of cardiac transudate (CT) from the isolated, saline-perfused rat heart. ...

the-inverted-heart-model-for-interstitial-transudate-collection-from

Research

JoVE Journal

Medicine

8.3K Görüntüleme.  Second Military Medical University.  Bu protokol, izole edilmiş perfüze edilmiş fare kalpten kardiyak interstisyel sıvıyı toplamak için bir yöntemi açıklamaktadır. İnterstisyel transüdaatı koroner venöz atık perfüzattan fiziksel olarak ayırmak için, Langendorff perfüze edilen kalp ters çevrilir ve kalp yüzeyinde oluşan transüda (interstisyel sıvı) yumuşak bir lateks kapak kullanılarak toplanır. 

Video: The Inverted Heart Model for Interstitial Transudate Collection from the Isolated Rat Heart

An Isolated Working Heart System for Large Animal Models

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart model, have been invaluable tools for studying cardiovascular function and disease1-15. Although the Langendorff heart preparation can be used for any mammalian heart, most studies involving this apparatus use small animal models (e.g., mouse, rat, and rabbit) due to the increased complexity of systems for larger mammals1,3,11. One major difficulty is ensuring a constant coronary perfusion pressure over a range of different heart sizes &#8211; a key component of any experiment utilizing this device1,11. By replacing the classic hydrostatic afterload column with a centrifugal pump, the Langendorff working heart apparatus described below allows for easy adjustment and tight regulation of perfusion pressures, meaning the same set-up can be used for various species or heart sizes. Furthermore, this configuration can also seamlessly switch between constant pressure or constant flow during reperfusion, depending on the user&#8217;s preferences. The open nature of this setup, despite making temperature regulation more difficult than other designs, allows for easy collection of effluent and ventricular pressure-volume data.

Most studies involving the Langendorff apparatus use small animal models due to the increased complexity of systems for larger mammals. We describe a Langendorff system for large animal models that allows for use across a range of species, including humans, and relatively easy data acquisition.

Büyük Hayvan Modelleri için bir İzole Çalışma Kalp Sistemi

Since its introduction in the late 19th century, the Langendorff isolated heart perfusion apparatus, and the subsequent development of the working heart ...

Tıp

Isolation of Endocardial and Coronary Endothelial Cells from the Ventricular Free Wall of the Rat Heart

It has been shown that endocardial endothelial cells (EECs) and coronary endothelial cells (CECs) differ in origin, development, markers, and functions. Consequently, these two cell populations play unique roles in cardiac diseases. Current studies involving isolated endothelial cells investigate cell populations consisting of both EECs and CECs. This protocol outlines a method to independently isolate these two cell populations for cell-specific characterization. Following the collection of the left and right ventricular free wall, endothelial cells from the outer surface and inner surface are separately liberated using a digestion buffer solution. The sequential digestion of the outer surface and the inner endocardial layer retained separation of the two endothelial cell populations. The separate isolation of EECs and CECs is further verified through the identification of markers specific to each population. Based on previously published single cell RNA profiling in the mouse heart, the Npr3, Hapln1, and Cdh11 gene expression is unique to EECs; while Fabp4, Mgll, and Cd36 gene expression is unique to CECs. qPCR data revealed enriched expression of these characteristic markers in their respective samples, indicating successful EEC and CEC isolation, as well as maintenance of cell phenotype, enabling further cell-specific functional analysis.

We present a protocol for the isolation of endocardial and coronary endothelial cells from rat hearts through sequential tissue digestion in a digestion buffer, cell collection from recurrent centrifuge cycles, and cell purification using anti-rat CD31 microbeads.

Endokardiyal ve Koroner Endotel Hücrelerinin Sıçan Kalbinin Ventriküler Serbest Duvarından İzolasyon

It has been shown that endocardial endothelial cells (EECs) and coronary endothelial cells (CECs) differ in origin, development, markers, and functions. ...

Gelişim Biyolojisi

An Immunological Model for Heterotopic Heart and Cardiac Muscle Cell Transplantation in Rats

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications have been reported since the first description in 1964. After 30 years of performing heterotopic heart transplantation in rats, we have developed a simplified surgical approach, which can be easily taught and performed without further surgical training or background.
After dissection of the ascending aorta and the pulmonary artery and ligation of superior and inferior caval and pulmonary veins, the donor heart is harvested and subsequently perfused with ice-cold saline solution supplemented with heparin. After clamping and incising the recipient abdominal vessels, the donor ascending aorta and pulmonary artery are anastomosed to the recipient abdominal aorta and inferior vena cava, respectively, using continuous running sutures.
Depending on different donor-recipient combinations, this model allows analyses of either acute or chronic rejection of allografts. The immunological significance of this model is further enhanced by a novel approach of in-ear injection of vital cardiac muscle cells and subsequent analysis of draining cervical lymphatic tissue.

We describe a model of heterotopic abdominal heart transplantation in rats, implying modifications of current strategies, which lead to a simplified surgical approach. Additionally, we describe a novel rejection model by in-ear injection of vital cardiac muscle cells, allowing further transplant immunological analyses in rats.

Sıçanlarda Heterotopik Kalp ve Kardiyak Kas Hücre Nakli için İmmünolojik Model

Heterotopic heart transplantation in rats has been a commonly used model for diverse immunological studies for more than 50 years. Several modifications ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

Isolation of Atrial Cardiomyocytes from a Rat Model of Metabolic Syndrome-related Heart Failure with Preserved Ejection Fraction

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of metabolic syndrome (MetS)-related heart failure with preserved ejection fraction (HFpEF). The prevalence of MetS-related HFpEF is rising, and atrial cardiomyopathies associated with atrial remodeling and atrial fibrillation are clinically highly relevant as atrial remodeling is an independent predictor of mortality. Studies with isolated single-cell cardiomyocytes are frequently used to corroborate and complement in vivo findings. Circulatory vessel rarefication and interstitial tissue fibrosis pose a potentially limiting factor for the successful single-cell isolation of ACMs from animal models of this disease.
We have addressed this issue by employing a device capable of manually regulating the intraluminal pressure of cardiac cavities during the isolation procedure, substantially increasing the yield of morphologically and functionally intact ACMs. The acquired cells can be used in a variety of different experiments, such as cell culture and functional Calcium imaging (i.e., excitation-contraction-coupling).
We provide the researcher with a step-by-step protocol, a list of optimized solutions, thorough instructions to prepare the necessary equipment, and a comprehensive troubleshooting guide. While the initial implementation of the procedure might be rather difficult, a successful adaptation will allow the reader to perform state-of-the-art ACM isolations in a rat model of MetS-related HFpEF for a broad spectrum of experiments.

Here, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes from a rat model of metabolic syndrome-related heart failure with preserved ejection fraction. A manual regulation of intraluminal pressure of cardiac cavities is implemented to yield functionally intact myocytes suitable for excitation-contraction-coupling studies.

Bir fare modeli Metabolik sendromu ile ilgili kalp yetmezliği ile korunmuş ejeksiyon fraksiyonu atriyal Cardiomyocytes izolasyonu

In this article, we describe an optimized, Langendorff-based procedure for the isolation of single-cell atrial cardiomyocytes (ACMs) from a rat model of ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of transplant with the potential to deliver durable heart valves capable of somatic growth with no requirement for anticoagulation. However, the immunobiology of heart valve transplants remains unexplored, highlighting the need for animal models to study this new type of transplant. Previous rat models for heterotopic aortic valve transplantation into the abdominal aorta have been described, though they are technically challenging and costly. For addressing this challenge, a renal subcapsular transplant model was developed in rodents as a practical and more straightforward method for studying heart valve transplant immunobiology. In this model, a single aortic valve leaflet is harvested and inserted into the renal subcapsular space. The kidney is easily accessible, and the transplanted tissue is securely contained in a subcapsular space that is well vascularized and can accommodate a variety of tissue sizes. Furthermore, because a single rat can provide three donor aortic leaflets and a single kidney can provide multiple sites for transplanted tissue, fewer rats are required for a given study. Here, the transplantation technique is described, providing a significant step forward in studying the transplant immunology of heart valve transplantation.

This protocol describes a simple and efficient method for the transplantation of aortic valve leaflets under the renal capsule to allow for the study of alloreactivity of heart valves.

Kemirgenlerde Heterotopik Kalp Kapağı Transplantasyonu için Basitleştirilmiş Bir Model

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of ...

Rodent Working Heart Model for the Study of Myocardial Performance and Oxygen Consumption

Isolated working heart models have been used to understand the effects of loading conditions, heart rate and medications on myocardial performance in ways that cannot be accomplished in vivo. For example, inotropic medications commonly also affect preload and afterload, precluding load-independent assessments of their myocardial effects in vivo. Additionally, this model allows for sampling of coronary sinus effluent without contamination from systemic venous return, permitting assessment of myocardial oxygen consumption. Further, the advent of miniaturized pressure-volume catheters has allowed for the precise quantification of markers of both systolic and diastolic performance. We describe a model in which the left ventricle can be studied while performing both volume and pressure work under controlled conditions. 
In this technique, the heart and lungs of a Sprague-Dawley rat (weight 300-500 g) are removed en bloc under general anesthesia. The aorta is dissected free and cannulated for retrograde perfusion with oxygenated Krebs buffer. The pulmonary arteries and veins are ligated and the lungs removed from the preparation. The left atrium is then incised and cannulated using a separate venous cannula, attached to a preload block. Once this is determined to be leak-free, the left heart is loaded and retrograde perfusion stopped, creating the working heart model. The pulmonary artery is incised and cannulated for collection of coronary effluent and determination of myocardial oxygen consumption. A pressure-volume catheter is placed into the left ventricle either retrograde or through apical puncture. If desired, atrial pacing wires can be placed for more precise control of heart rate. This model allows for precise control of preload (using a left atrial pressure block), afterload (using an afterload block), heart rate (using pacing wires) and oxygen tension (using oxygen mixtures within the perfusate).

Isolated working heart models can be used to measure the effect of loading conditions, heart rate, and medications on myocardial performance and oxygen consumption. We describe methods for preparation of a rodent left heart working model that permits study of systolic and diastolic performance and oxygen consumption under various conditions.

Miyokard Performans ve Oksijen Tüketimi İnceleme Kemirgen Çalışma Kalp Modeli

Isolated working heart models have been used to understand the effects of loading conditions, heart rate and medications on myocardial performance in ways ...

Biyoloji

A Heterotopic Rat Heart Transplantation Model using Circulatory Death Donor Hearts

The objective of this protocol is to set up a rat heterotopic heart transplantation model with donation after circulatory death (DCD) donor hearts. There are two setups for this protocol: heart donor setup and recipient setup. In the heart donor setup, Sprague Dawley rats are anesthetized, endotracheally intubated, and ventilated. The right carotid artery is cannulated to deliver heparin and the paralytic agent vecuronium-bromide. The DCD process is initiated by terminating the ventilation. After 20 min, the heart is exposed and the aorta distal to the brachiocephalic branch is clamped. At 25 min from terminating the ventilator, ice-cold University of Wisconsin (UW) solution is perfused through the carotid catheter to flush the heart. The heart is procured by dividing the aorta, pulmonary artery, venae cavae, and pulmonary veins and stored in UW solution for implantation. In the recipient setup, the Lewis rat is anesthetized with isoflurane. Slow-release buprenorphine is administered subcutaneously to facilitate a smooth postoperative recovery. Through a midline abdominal incision, the infra-renal aorta and the inferior vena cava are isolated and clamped with an atraumatic vascular clamp. The donor heart aorta and pulmonary artery are sutured to the recipient abdominal aorta and vena cava, respectively, with a running 8-0 Prolene. The vascular clamp is removed to reperfuse the heart. The abdominal wall is closed and the rat is recovered. After a set interval (24 h to 2 weeks), the recipient rat is anesthetized, the transplanted heart is exposed, and a balloon-tip-catheter is inserted into the left ventricle via the apex to record developed pressure and dP/dt using a data acquisition system. The heart tissue is collected for histology, immunology, or molecular analysis. A successful DCD donor rat heart transplantation model will allow further studies on the cardioprotective approaches to improve heart transplantation outcomes from DCD donors.

Here, we describe the preparation and technical details of murine heterotopic heart transplantation utilizing a circulatory death donor heart.

The objective of this protocol is to set up a rat heterotopic heart transplantation model with donation after circulatory death (DCD) donor hearts. There ...

A Model of Long-Term Ventricular Fibrillation in Isolated Rat Hearts

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of intraoperative arrest in the field of cardiac surgery. With recent advances in cardiac surgery, the demand for prolonged VF studies under perfusion has increased. However, the field lacks simple, reliable, and reproducible animal models of chronic ventricular fibrillation. This protocol induces long-term VF through alternating current (AC) electrical stimulation of the epicardium. Different conditions were used to induce VF, including continuous stimulation with a low or high voltage to induce long-term VF and stimulation for 5 min with a low or high voltage to induce spontaneous long-term VF. The success rates of the different conditions, as well as the rates of myocardial injury and recovery of cardiac function, were compared. The results showed that continuous low-voltage stimulation induced long-term VF and that 5 min of low-voltage stimulation induced spontaneous long-term VF with mild myocardial injury and a high rate of recovery of cardiac function. However, the low-voltage, continuously stimulated long-term VF model had a higher success rate. High-voltage stimulation provided a higher rate of VF induction but showed a low defibrillation success rate, poor recovery of cardiac function, and severe myocardial injury. On the basis of these results, continuous low-voltage epicardial AC stimulation is recommended for its high success rate, stability, reliability, reproducibility, low impact on cardiac function, and mild myocardial injury.

This protocol presents a model of long-term ventricular fibrillation in rat hearts induced by continuous stimulation with low-voltage alternating current. This model has a high success rate, is stable, reliable, and reproducible, has a low impact on cardiac function, and causes only mild myocardial injury.

İzole Sıçan Kalplerinde Uzun Süreli Ventriküler Fibrilasyon Modeli

Ventricular fibrillation (VF) is a fatal arrhythmia with a high incidence in cardiac patients, but VF arrest under perfusion is a neglected method of ...

Rat Model of Normothermic Ex-Situ Perfused Heterotopic Heart Transplantation

Heart transplantation is the most effective therapy for end-stage heart failure. Despite the improvements in therapeutic approaches and interventions, the number of heart failure patients waiting for transplantation is still increasing. The normothermic ex situ preservation technique has been established as a comparable method to the conventional static cold storage technique. The main advantage of this technique is that donor hearts can be preserved for up to 12 h in a physiologic condition. Moreover, this technique allows resuscitation of the donor hearts after circulatory death and applies required pharmacologic interventions to improve donor function after implantation. Numerous animal models have been established to improve normothermic ex situ preservation techniques and eliminate preservation-related complications. Although large animal models are easy to handle compared to small animal models, it is costly and challenging. We present a rat model of normothermic ex situ donor heart preservation followed by heterotopic abdominal transplantation. This model is relatively cheap and can be accomplished by a single experimenter.

Here, we present an assessment protocol of a heterotopically implanted heart after normothermic ex situ preservation in the rat model.

Normotermik Ex-Situ Perfüze Heterotopik Kalp Transplantasyonunun Sıçan Modeli

Heart transplantation is the most effective therapy for end-stage heart failure. Despite the improvements in therapeutic approaches and interventions, the ...

Modified Heterotopic Abdominal Heart Transplantation and a Novel Aortic Regurgitation Model in Rats

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical technique. Modifying the transplantation procedure to strengthen the myocardial protection could prolong the ischemia time while preserving the donor&#39;s cardiac function. This technique&#39;s key points are as follows: transecting the donor&#39;s abdominal aorta before harvesting to unload the donor&#39;s heart; perfusing the donor&#39;s coronary arteries with a cold cardioplegic solution; and topical cooling of the donor&#39;s heart during the anastomosis procedure. Consequently, since this procedure prolongs the acceptable ischemia time, beginners can easily perform it and achieve a high success rate.
Moreover, a new aortic regurgitation (AR) model was established in this work using a technique different from the existing one,&#160;which is created by inserting a catheter from the right carotid artery and puncturing the native aortic valve under continuous echocardiographic guidance. A heterotopic abdominal heart transplantation was performed using the novel AR model. In the protocol, after the donor&#39;s heart is harvested, a stiff guidewire is inserted into the donor&#39;s brachiocephalic artery and advanced toward the aortic root. The aortic valve is punctured by pushing the guidewire further even after the resistance is felt, thus inducing AR. It is easier to damage the aortic valve using this method than with the procedure described in the conventional AR model. Additionally, this novel AR model does not contribute to the recipient&#39;s circulation; therefore, this method is expected to produce a more severe AR model than the conventional procedure.

This study demonstrates a reproducible heterotopic abdominal heart transplantation technique in rats that beginners can learn and perform. Additionally, a novel aortic regurgitation model in rats is generated by performing heterotopic abdominal heart transplantation and damaging the donor's aortic valve using a guidewire after harvesting.

Modifiye Heterotopik Abdominal Kalp Transplantasyonu ve Sıçanlarda Yeni Bir Aort Yetersizliği Modeli

Over the past 50 years, many researchers have reported heterotopic abdominal heart transplantation in mice and rats, with some variations in the surgical ...