Yazarlar hiçbir katkıda bulunanlar var.

Bu deneyde kullanılan diş topluluğu bölgesel tıbbi etik Komitesi kılavuzlarınıza uygun olarak gerçekleştirildi.
1. numune toplama ve numune hazırlama
<ol><li>24 ses ayıklanan insan (pre) büyük azı dişleri diş uygulamaları toplamak ve düşük hızlı el probu temiz bir Ponza ile fırça (hiçbir enkaz, dişeti yok kalıntıları) ve su yüzüne ve sonunda 15 için durulama düzgün diş s altında çalışan musluk suyu.</li>
	<li>Cihazın silindir (12 x 15 x 27,5 mm) girinti içine uyacak şekilde örnekleri katıştır.<ol>
<li>Bir aspiratör (50 ° C) yaklaşık 10 dakika için üzerinde izlenim bileşik (113 g bir sopa) eritin ve erimiş madde Oklüzal yüzeyini örten, azı Oklüzal parçası daldırma. Azı baş aşağı bir mikroskop slaytta yer ve tüm Kupası ipuçları cam dokunup izlenim bileşik soğuduktan kadar ± 30 sn ve diş sabitleme seti, beklemek kadar bastırın.</li>
		<li>Bir şırınga ile bir silikon kalıp içine 10 mL Polimetilmetaakrilat (PMMA) karışımı dökün kullanmak boyutları 12 mm x 15 mm x 27,5 mm. Mix PMMA duman başlıklı içinde (oranı 13 g polimer: 10 mL monomer) kabaca 25 s bir spatula kullanarak. 15 için durmak için izin s böylece herhangi bir hava kabarcıkları kullanmadan önce kaçabilir.</li>
		<li>Mikroskop slayt ters çevirin ve molar PMMA ile dolu silikon kalıp içinde askıya alma. Kalıp dokunana kadar slayt aşağı tuşlarına basın. Dökme faz oda sıcaklığında yaklaşık 1,5 dk sürer.</li>
		<li>Oda sıcaklığında ve 20 dk 1000 hPa PMMA belirlenmesi sonra mikroskop slayt kaldırın ve gömülü diş silikon kalıp kaldırmak.</li>
		<li>Katıştırılmış azı toplam yüksekliğini ölçmek ve artımlı olarak tedavi PMMA altından 16 mm freze kesici ile donatılmış bir freze tezgahı ile kaldırarak tam olarak 27,3 mm yüksekliğe ayarlayın.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Demineralizasyon çözüm hazırlanması
<ol><li>0.1 M laktik asit (50 g), 1.5 mM CaCl2 (1.103 g), 0.9 mM KH2PO4 (0.612 g), 10 mL % 1 kloramin, 0.5 ppm F (1000 ppm Fluorid standart çözüm 2.5 mL) 4,900 mL deiyonize su karıştırma bir plaka üzerinde ekleyin.</li>
	<li>10 M KOH ile titre (± 50 mL) pH 4,8 kalibre edilmiş pH cam elektrot ile için.</li>
</ol>3. örnek montaj ve ovmak ayarlarını makine & Roll (şekil 1)
<ol><li>Silindir kapsayıcıdan kaldır ve girinti ovmak & Roll silindir içinde 24 örnekler yer.</li>
	<li>Yükleme kuvvet ayarlamak için örnek altında ara bir shim yerleştirerek numune üzerinden silindir çıkıntı ayarlayın. Yüksüz (0 N) 8 örneklerin kullanmak için hiçbir dolgu ve 30 N (8 örnekler) ve 50 N (8 örnekler), bir shim 1 mm ve 1.5 mm, sırasıyla kullanın.</li>
	<li>Silindir 2 bölümden dağ ve M6 civata ile güvenli ve silindir kapsayıcısına getirin.</li>
	<li>Konteyner 500 mL Demineralizasyon solüsyon ile doldurun.</li>
	<li>Yükleme çubuğu yer: 14 mm bir dış çap ve 9 mm çapında bir iç çapı 10 mm paslanmaz çelik 316 çubuk (sertlik 130-150 HB) bir ekleme ile bir PVC boru (sertlik 73 Shore A).</li>
	<li>Klinik çiğneme frekans, taklit etmek için 20 rpm dönme hızı set ve kesintisiz çalıştırmak aygıt.</li>
	<li>Deney sırasında Demineralizasyon çözüm ve PVC boru yerine ve pH kalibre edilmiş cam elektrot ile haftada iki kez kontrol edin.</li>
	<li>3 ay (yaklaşık 1.500.000 döngüleri için karşılık gelen) sonra silindir kapsayıcıdan kesmek ve silindir 2 bölümden sökülmesi tarafından numune çıkarın ve numune deiyonize suyla saklayın. Not: Önce ve sonra yükleme ovmak & Roll temassız profilometer kullanarak, tüm örnekler taranır.</li>
</ol>4. Profilometric tarama, analiz ve çıkarma
<ol><li>Bir profilometer kullanarak örnek bir topografik ölçüm oluşturmak.</li>
	<li>Ekipman geçiş: bilgisayar, güç kaynağı modülü ve sensörü denetleyicisi. Kelebek vida ile güvenli ve uygun sensör yerleştirin. Sonra dikkatli bir şekilde fiber optik sensörü denetleyicisi ekleyin.</li>
	<li>Doğru sensörü sensörü denetleyicisi seçin. Sensörü denetleyicisi 4 seçenekleri (F1 - F4) gösterir. Basın F4 iki kez ve confocal sensörü menüsü görüntülenir.<ol>
<li>F3 tuşuna basın (sensör seçimi) ve kaydırma 2-10,000 µm. için seçin (10 mm) ve F4 tuşuna basın. F1'e basın ve F4 (Evet) EEPROM için ayarları kaydetmek için seçin. LED yoğunluğunu seçin ve "± 9 o'clock" konumuna ve F4 - F2 - F4 tuşuna basarak açın sensörün "karanlık başvuru" alarak.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Belgili tanımlık bilgisayar yazılımı açın ve seçenek "bağlantı" için aygıt seçin. Ölçüm tablo otomatik olarak "ev pozisyon" aramaya gider unutmayın. Ana ekranda ekranda görüntülenir. Sensör seçime göre menü çubuğuna basın araçları ve sensör S29 seçin | 10 - 10.000 µm.<ol>
<li>Örnek hızı tarafından menü çubuğuna basın araçları ve 300 Hz. basın hız sensörü tarafından takip menü çubuğundaki Araçlar ve 0 - %100.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Tarama menü çubuğunu seçin. O zaman anahtar hareket sahne alanı seçin. Ölçüm tablo merkezine taşımak için ekranın ortasında sarı alan basın.</li>
	<li>Numune sensör menzili içinde doğru yükseklik ayarı takip ölçüm Tablo ortasına yerleştirin. Örnek ilgi sensör yerleştirin ve mesafe sensör taranacak tam bir örnek alan sensör odak aralığı içinde bulunur şekilde ayarlayın. Sensörü denetleyicisi yüksekliği bir yeşil alan canlı veri yükseklik gösterilen sensör menzili içinde olup olmadığını gösterir.</li>
	<li>Ayarlar'ı seçin. Ortalama her kaydedilen veri noktası 2 ölçümlerin ortalamasıdır sağlamak için 2 olarak ayarlayın. Bu tarama hızı aşağı yavaş ancak tarama kalitesini artırmak. Ayarları bitirdikten sonra ana tarama kurulumu için dönmek için Tamam'ı tıklatın.</li>
	<li>Algılayıcı ışını numune sol üst köşesinde konumlandırın. 15 mm x 12 mm x bir adım boyu ile toplam tarama alanını ayarla ve 40 µm (0.04 mm), Y yönünde adımlar x 375 ve Y = 300 =. Yine, daha küçük adımlar tarama çözünürlüğü, ama aynı zamanda scanning zaman artacaktır. Şimdi tarama tarama başlamak için tuşuna basın.</li>
	<li>Tarama yaklaşık 10 dakika sonra sona erdiğinde, menü çubuğunda Kaydet'i seçerek takip dosyası seçin. Taramaları ölçekler her zaman aynı düzeyde olduğunu böyle bir şekilde standardize edilmiştir.</li>
	<li>Açık dosya seçerek ardından Menü çubuğunda dosya seçin. Warpage menü çubuğunu seçin. Tarama tablo ve sensör gürültü ortadan kaldırmak için 1 warpage filtre uygulayın. Seçin en yüksek noktası menü çubuğunda ve en yüksek noktası üzerinde azı bulmak.</li>
	<li>Seçeneği ölçekli tarama konfigürasyonu için seçerek ardından Menü çubuğunda Araçlar'ı seçin. Tarama yapılandırması, uzaklık (4,10 içinde ölçülen - 3500) Z değeri en yüksek noktası tarafından hesaplanan mm olarak ayarlayın. 0-3.6 mm el kitabında aralığı ayarlayın ve Tamam'ı tıklatın.</li>
	<li>Yük alan ölçeği sıfırlamak için menü çubuğunu seçin. Menü çubuğunda Kaydet'i seçerek takip dosyası seçin.</li>
	<li>İnceden inceye gözden geçirmek zaman içinde iki farklı anlarda alınan çıkarma.<ol>
<li>Yazılım menü çubuğunda Aç'ý seçin. Orijinal tarama ve değiştirilmiş tarama dosyası dizininde bulmak, dosyaları seçin ve Tamam'ı tıklatın. Seçenekleri perde-ecek gözükmek, seviyelendirme seçenek belirleyin: seçenek; Tesviye Kılavuzu ve tazminat kaydırma seçenekleri sırasıyla, orijinal için geçerlidir ve uygulamak için değiştirilmiş.</li>
		<li>Seçeneği ile ardından Menü çubuğunda Seç penceresi görünümü ve nihayet seçeneği çapraz Bölüm görünümü oluşturun.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Değiştirilmiş yüzey seçin ve CTRL tuşunu basılı tutarak değiştirilmiş yüzey yatay, dikey ve Z yönde (yükseklik) orijinal yüzey üzerinde hareket ve yatay yöndeki sol ve sağ ok tuşuna basın; kontrol tuşu ve basın yukarı ve aşağı ok tuşu için düşey yönde tutan; Böyle bir şekilde subtracted hacmi ve yükseklik farkı görünümünde gösterilen mümkün olduğunca düşük Z yön için anahtar ÜSTKRKT tuşunu ve basın ok yukarı ve aşağı tutarak.</li>
	<li>Seçme eğe Save As çıkış seçerek ardından Menü çubuğunda ortalama hacim kaybı ve ortalama yükseklik kaybı okunur.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Anderson, K., Throckmorton, G. S., Buschang, P. H., Hayasaki, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+bolus+hardness+on+masticatory+kinematics.">The effects of bolus hardness on masticatory kinematics.</a> J Oral Rehabil. 29, 689-696 (2002).</li><li>Koolstra, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+the+human+masticatory+system.">Dynamics of the human masticatory system.</a> Crit Rev Oral Biol M. 13 (4), 366-376 (2002).</li><li>Lepley, C. R., Throckmorton, G. S., Ceen, R. F., Buschang, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+contributions+of+occlusion,+maximum+bite+force,+and+chewing+cycle+kinematics+to+masticatory+performance.">Relative contributions of occlusion, maximum bite force, and chewing cycle kinematics to masticatory performance.</a> Am J Orthod Dentofac. 13, 606-613 (2011).</li><li>Lee, A., He, H., Lyons, K., Swain, M. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tooth+wear+and+wear+investigations+in+dentistry.">Tooth wear and wear investigations in dentistry.</a> J Oral Rehabil. 39, 217-225 (2012).</li><li>Lussi, A., Megert, B., Shellis, R. P., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+the+erosive+effect+of+different+dietary+substances+and+medications.">Analysis of the erosive effect of different dietary substances and medications.</a> Br J Nutr. 107, 252-262 (2012).</li><li>Vieira, A., Overweg, E., Ruben, J. L., Huysmans, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toothbrush+abrasion,+simulated+tongue+friction+and+attrition+of+eroded+bovine+enamel+in+vitro.">Toothbrush abrasion, simulated tongue friction and attrition of eroded bovine enamel in vitro.</a> J Dent. 34 (5), 336-342 (2006).</li><li>Heintze, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+qualify+and+validate+wear+simulation+devices+and+methods.">How to qualify and validate wear simulation devices and methods.</a> Dent Mater. 22, 712-734 (2006).</li><li>Lambrechts, P., Dibbles, E., van Landuyt, K., Peumans, M., van Meerbeek, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+simulate+wear?+Overview+of+existing+methods.">How to simulate wear? Overview of existing methods.</a> Dent Mater. 22, 693-701 (2006).</li><li>Ruben, J. L., Roeters, F. J. M., Montagner, A. F., Huysmans, M. C. D. N. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+multifunctional+device+to+simulate+oral+ageing:+the+"Rub&amp;Roll".">A multifunctional device to simulate oral ageing: the "Rub&amp;Roll".</a> J Mech Behav Biomed Mater. 30, 75-82 (2014).</li><li>Xu, W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review+of+the+human+masticatory+system+and+masticatory+robotics.">Review of the human masticatory system and masticatory robotics.</a> Mech Mach Theory. 43, 1353-1375 (2008).</li><li>Abrahamsen, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+worn+dentition+pathognomonic+patterns+of+abrasion+and+erosion.">The worn dentition pathognomonic patterns of abrasion and erosion.</a> Int Dent J. 55, 268-276 (2005).</li><li>Khan, F., Young, W. G., Law, V., Priest, J., Daley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cupped+lesions+of+early+onset+dental+erosion+in+young+southeast+Queensland+adults.">Cupped lesions of early onset dental erosion in young southeast Queensland adults.</a> Aust Dent J. 46, 100-107 (2001).</li><li>Montagner, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bonding+Efficacy+and+Fracture+Pattern+of+Adhesives+Submitted+to+Mechanical+Aging+with+the+Rub&amp;Roll+Device.">Bonding Efficacy and Fracture Pattern of Adhesives Submitted to Mechanical Aging with the Rub&amp;Roll Device.</a> J Adhes Dent. 19, 59-68 (2017).</li><li>Martinez Choy, S. E., Lenz, J., Schweizerhof, K., Schmitter, M., Schindler, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Realistic+kinetic+loading+of+the+jaw+system+during+single+chewing+cycles:+a+finite+element+study.">Realistic kinetic loading of the jaw system during single chewing cycles: a finite element study.</a> J Oral Rehabil. 44, 375-384 (2017).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Burada sunulan uygulama ovmak & Roll klinik konu ile ilgili iyi bir izlenim verir. En yüksek yükleme düzeyi ile deneme oluşturulduğu Oklüzal Morfoloji aşındırıcı diş giyim (şekil 5)11,12klinik sunumunu çok benzer.
Belgili tanımlık kurmak çok yönlülük öncelikle kullanılan çözümleri ile yatıyor. En basit modeli, su kullanılabilir. Bir su orta örnekleri yükleme örnek yaşlanma, ?...

Oral kavite duyuları yıpratıcı çevre düşünülebilir: nem, sıcaklık değişiklikleri nedeniyle sıcak ve soğuk gıda alımı ve bazı insan vücudunda en güçlü kasları ile mekanik yükleme. Dişler, ancak, bu zorluklar dayanmak için fazlasıyla donatılmıştır. Mine çok zordur ve kırılma gelen nispeten kırılgan emaye altında dentin engeller. Mineral, her iki malzeme, hidroksiapatit çok düşük çözünürlük ve denge aşırıdoygun tükürük ile bileşenidir. Çiğneme, içme ve ara sıra diş bileme fizyolojik diş giyim bir ömür boyu1,2,3sırasında neden olur. Bruksizm veya mutat yabancı nesneler üzerinde çiğneme gibi aşırı sorunlar için aşırı aşınmaya neden olabilir. Son zamanlarda, mekanik diş giyim hızlanan erozyon rolü kabul edilmiştir. Diş erozyonu vitrokapsamlı bir şekilde okudu, oldu ancak kullanılan modelleri genellikle basit olabilirdi ve mekanik faktörler büyük ölçüde görmezden gelmiş. Klinik etkileşimi kimyasal ve mekanik aşınma süreçler arasında bu nedenle tam olarak anlaşılır4değil.
Birçok vitro erozyon ve aşındırıcı aşınma çalışmalar düz cilalı emaye basit asit daldırma kullanmış veya sertlik kaybı veya profilometrisi ölçüm kullanarak dentin örnekleri5yaklaşım. Aşındırıcı bir bileşenin giriş genellikle diş Aksiyon, fırça yer vardır veya bazen dil veya Cusp'ın sürgülü kişiler6Mine. Bu tür çalışmalar o Mine kolayca çizikler bir yumuşatılmış yüzey tabakası içinde erozyon sonuçlar göstermiştir. Düz yüzeyler genellikle mekanik yükleme aygıt düz olmayan yüzeylerde idare edemiyorlar ve düzensiz yüzeyler için ölçüm teknikleri de daha karmaşık çünkü ihtiyaç vardır. Ancak, en aşındırıcı diş giyim Ergenlerde Oklüzal cusps görülür ve gıda çiğnemek tarafından aşınma Oklüzal aşındırıcı giyim en uygun mekanik faktör olacağı tahmin edilmektedir. Tüm ayrıntıları sözlü ortamda taklit eden ideal sözlü giyim makine yok ve çoğu vitro modelleri ya da maruz kalan veya ölçülen7,8olmak diş doğal Oklüzal yüzeylerinin için izin vermez.
Bizim laboratuvar yakın olan birçok Heintze'nın7 özellikleri ve sözlü giyim simülasyon modelleri toleransları için uygundur ve aşınma ve yükleme çalışmalar ayrı ayrı veya aynı anda gerçekleştirmek kullanıcı sağlayan bir roman cihaz tanıttı bir aşındırıcı ve/veya aşındırıcı ortam. Yeni aygıt (Rub & Roll) bir karıştırma makine ve bir kapsayıcı oluşur (Şekil 1a). Konteyner, bir silindir numune ile monte edilebilir. Silindir ve kapsayıcı bir daha çubuklar iç duvar arasında (Şekil 1b) yerleştirilir. Heyecan verici motor başlamak üzere, çubuk silindir (şekil 1 c) numuneler üzerinde döner. Dolgu verileri kullanarak, farklı güçleri numuneler üzerinde uygulanabilir. Tasarım kapsamlı açıklaması için inşaat, işlem mekanizması ve cihazın özellikler kağıt tanıtımı ve aygıt9tartışırken bakın. Cihazın teknik olarak talep, sağlamdır ve yükler için 32 numuneler aynı anda uygulanabilir. Antagonist kuvvet normal çiğneme10için karşılaştırılabilir düzgün, sürekli iletişim koruyarak numune yüzey üzerinde hareket ediyor. Burada doğal diş Oklüzal yüzeylerinin modeli aşındırıcı giyim için bir uygulama mevcut ve biz klinik önemi ve yöntem çok yönlülük göstermek.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Low speed handpiece</td>
			<td>KAVO, Leutkirch imm Allgau, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Dental equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Brush for handpiece</td>
			<td>KAVO, Leutkirch imm Allgau, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Dental equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pumish</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Dental equipment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Human third molars</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Impression compound green</td>
			<td>Kerr, Bioggio, Switzerland</td>
			<td>Art.nr. 00444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microscope slide</td>
			<td>Menzel, Braunschweig, Germany</td>
			<td></td>
			<td>76 x 26 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Autoplast Cold curing denture base material</td>
			<td>Candulor, Wangen, Switzerland</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone mold with inside dimensions of 12 x 15 x 27.5</td>
			<td>3M Espe Neuss, Germany</td>
			<td>Express STD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure vessel</td>
			<td>Al Dente, Meckenbeuren, Germany</td>
			<td>581-009-024/25</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milling cutter &#248;16mm</td>
			<td>Format, Germany</td>
			<td>HSSCo8 nr. 21691600</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Milling machine</td>
			<td>Weiss Machine Tools</td>
			<td>WMD 20 LV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rub&#38;Roll</td>
			<td>UMCN , Nijmegen The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Technical workshop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rub&#38;Roll container</td>
			<td>UMCN , Nijmegen The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Technical workshop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rub&#38;Roll cylinder sample holder</td>
			<td>UMCN , Nijmegen The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Technical workshop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rub&#38;Roll motor</td>
			<td>UMCN , Nijmegen The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Technical workshop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shim: Silicone plate massive 1 mm/ 1,5mm, 60 &#177; 5&#176; Shore A, red</td>
			<td>Peter van den Berg afdichtingstechniek, Barendrecht</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactid acid extra pure 88%</td>
			<td>Boom, The Netherlands</td>
			<td>CAS nummer: 79-33-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride dihydrate CaCL2 .2H2O</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>CAS nummer: 10043-52-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pottassium dihydrogen Phosphate KH2PO4</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>CAS nummer: 7778-77-0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramine T (sodium salt) trihydrate for synthesis CH3C6H4SO2NClNa&#183;3H2O</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>CAS nummer: 7080-50-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Natriumfluoride standard solution 1000mg/L F Certipur</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>CAS nummer: 7681-49-4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Deionized water</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kaliumhydroxide, pellets EMSURE analytical reagent KOH</td>
			<td>Merck, Darmstadt, Germany</td>
			<td>CAS nummer: 1310-58-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVC tube(Hardness73 Shore A)outer diameter 14mm inner diameter 10mm</td>
			<td>DEUTSCH &#38; NEUMANN, Germany</td>
			<td>Art.nr. 3501014</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insert of a stainless steel 316 (Hardness 130&#8211;150 HB) diameter 9mm</td>
			<td>UMCN , Nijmegen The Netherlands</td>
			<td></td>
			<td>Technical workshop</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pH glass electrode</td>
			<td>WTW, Weilheim, Germany</td>
			<td>Sentix 61 103640</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non contact Profilometer Proscan 2100</td>
			<td>Scantron Industrial Products Ltd, Taunton, UK</td>
			<td></td>
			<td>http://www.scantronltd.co.uk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software version Proscan 2100 2.1.1.15A+ Sensor S29 / 10-10000 microns</td>
			<td>Scantron Industrial Products Ltd, Taunton, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Software version Proform</td>
			<td>Scantron Industrial Products Ltd, Taunton, UK</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereomicroscope Leica</td>
			<td>www.leica-microsystems.com</td>
			<td>M50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Photocamera Canon</td>
			<td>Canon Japan</td>
			<td>EOS 50D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe</td>
			<td>BD Plastipak, Spain</td>
			<td>20 ml.</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hotplate</td>
			<td>Schott instruments Mainz</td>
			<td>SLK1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silone impression material (Vinyl Polysiloxane Expres)</td>
			<td>3M Espe , USA</td>
			<td>Regular</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stirring Plate</td>
			<td>IKA Werke, Germany</td>
			<td>KMO2 Basic</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mimicking and measuring occlusal erosive tooth wear with the "rub&amp;roll" and non-contact profilometry

Çiğneme, içme ve ara sıra diş bileme fizyolojik diş giyim bir ömür boyu sırasında neden olur. Bruksizm veya mutat yabancı nesneler üzerinde çiğneme gibi aşırı sorunlar için aşırı aşınmaya neden olabilir. Son zamanlarda, mekanik diş giyim hızlanan erozyon rolü kabul edilmiştir ama kimyasal ve mekanik aşınma süreçler arasındaki etkileşimi değil kapsamlı bir şekilde okudu. Bizim laboratuvar son ovmak & Roll, aşınma ve çalışmalar ayrı ayrı veya aynı anda yükleme bir aşındırıcı ve/veya aşındırıcı ortamında gerçekleştirmek için kullanıcı sağlayan bir roman sözlü aşınma benzetim aygıtı tanıttı. Bu el yazması bir uygulama cihazın açıklar: kombine mekanik ve aşındırıcı yükleme ayıklanan insan (pre) azı simüle çiğneme hareketi, güç, hız, sıvı, ve zaman kontrollü bir uygulama ve uygulanması ile görselleştirme ve elde edilen giyim deseni ölçme temassız profilometrisi. En yüksek yükleme düzeyi ile deneme oluşturulduğu Oklüzal Morfoloji aşındırıcı aşınma klinik sunumunu çok benzer.

Biz insan azı dişleri maruz (n = 8 grup başına) asidik sulu bir çözüm pH 4,8 ovmak & Roll, 3 ay için. Bu yaklaşık 6 yıl klinik işleyen zamanı ile karşılık gelir. Uygulanan mekanik yük oldu: herhangi bir yük (0 N), 30 N veya 50 N.
Üç grup için Oklüzal yüzey yükseklik kaybı olduğu anlamına: 76 ± 20 µm 0 N; 161 ± 40 µm 30 N; ve 266 ± 101 µm 50 N (Şekil 2). Aşındırı...

Watch this Scientific Journal Video about Mimicking and Measuring Occlusal Erosive Tooth Wear with the "Rub&Roll" and Non-contact Profilometry at JoVE.com

Mimicking and Measuring Occlusal Erosive Tooth Wear with the "Rub&Roll" and Non-contact Profilometry

Rub & Roll çiğneme döngüsü, kuvvet çiğneme, mesafe sürme, hız çiğneme varyasyon izin taklit edebilen, sayı döngüleri ve frekans ve aşındırıcı ve aşındırıcı kombinasyonları ile sözlü yaşlanma karmaşık bir simülasyonda neden olabilir.

Taklit ve Oklüzal aşındırıcı diş ölçme "Rub &amp; Roll ile" aşınma ve profilometrisi-iletişim

Chewing, drinking, and occasional tooth grinding will result in physiological tooth wear during a lifetime. Extreme challenges, such as bruxism or ...

mimicking-measuring-occlusal-erosive-tooth-wear-with-rub-roll-non

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Mimicking and Measuring Occlusal Erosive Tooth Wear with the "Rub&amp;Roll" and Non-contact Profilometry

12.1K Görüntüleme.  Radboud University Medical Center. Rub & Roll çiğneme döngüsü, kuvvet çiğneme, mesafe sürme, hız çiğneme varyasyon izin taklit edebilen, sayı döngüleri ve frekans ve aşındırıcı ve aşındırıcı kombinasyonları ile sözlü yaşlanma karmaşık bir simülasyonda neden olabilir.

Video: Mimicking and Measuring Occlusal Erosive Tooth Wear with the "Rub&Roll" and Non-contact Profilometry

Gold Nanostar Synthesis with a Silver Seed Mediated Growth Method

The physical, chemical and optical properties of nano-scale colloids depend on their material composition, size and shape 1-5. There is a great interest in using nano-colloids for photo-thermal ablation, drug delivery and many other biomedical applications 6. Gold is particularly used because of its low toxicity 7-9. A property of metal nano-colloids is that they can have a strong surface plasmon resonance 10. The peak of the surface plasmon resonance mode depends on the structure and composition of the metal nano-colloids. Since the surface plasmon resonance mode is stimulated with light there is a need to have the peak absorbance in the near infrared where biological tissue transmissivity is maximal 11, 12.
We present a method to synthesize star shaped colloidal gold, also known as star shaped nanoparticles 13-15 or nanostars 16. This method is based on a solution containing silver seeds that are used as the nucleating agent for anisotropic growth of gold colloids 17-22. Scanning electron microscopy (SEM) analysis of the resulting gold colloid showed that 70 % of the nanostructures were nanostars. The other 30 % of the particles were amorphous clusters of decahedra and rhomboids. The absorbance peak of the nanostars was detected to be in the near infrared (840 nm). Thus, our method produces gold nanostars suitable for biomedical applications, particularly for photo-thermal ablation.

We synthesized star shaped gold nanostars using a silver seed mediated growth method. The diameter of the nanostars ranges from 200 to 300 nm and the number of tips vary from 7 to 10. The nanoparticles have a broad surface plasmon resonance mode centered in the near infrared.

Gümüş Tohum aracılığı Büyüme Yöntemi ile Altın Nanostar Sentezi

The physical, chemical and optical properties of nano-scale colloids depend on their material composition, size and shape 1-5. There is a great interest ...

Biyomühendislik

Non-contact, Label-free Monitoring of Cells and Extracellular Matrix using Raman Spectroscopy

Non-destructive, non-contact and label-free technologies to monitor cell and tissue cultures are needed in the field of biomedical research.1-5 However, currently available routine methods require processing steps and alter sample integrity. Raman spectroscopy is a fast method that enables the measurement of biological samples without the need for further processing steps. This laser-based technology detects the inelastic scattering of monochromatic light.6 As every chemical vibration is assigned to a specific Raman band (wavenumber in cm-1), each biological sample features a typical spectral pattern due to their inherent biochemical composition.7-9 Within Raman spectra, the peak intensities correlate with the amount of the present molecular bonds.1 Similarities and differences of the spectral data sets can be detected by employing a multivariate analysis (e.g. principal component analysis (PCA)).10
Here, we perform Raman spectroscopy of living cells and native tissues. Cells are either seeded on glass bottom dishes or kept in suspension under normal cell culture conditions (37 &deg;C, 5% CO2) before measurement. Native tissues are dissected and stored in phosphate buffered saline (PBS) at 4 &deg;C prior measurements. Depending on our experimental set up, we then either focused on the cell nucleus or extracellular matrix (ECM) proteins such as elastin and collagen. For all studies, a minimum of 30 cells or 30 random points of interest within the ECM are measured. Data processing steps included background subtraction and normalization.

Raman spectroscopy is a suitable technique for the non-contact, label-free analysis of living cells, tissue-engineered constructs and native tissues. Source-specific spectral fingerprints can be generated and analyzed using multivariate analysis.

Raman Spektroskopisi kullanarak Hücreler ve Ekstrasellüler Matriks Temassız, Etiket ücretsiz izleme

Non-destructive, non-contact and label-free technologies to monitor cell and tissue cultures are needed in the field of biomedical research.1-5 However, ...

Bridging the Bio-Electronic Interface with Biofabrication

Advancements in lab-on-a-chip technology promise to revolutionize both research and medicine through lower costs, better sensitivity, portability, and higher throughput. The incorporation of biological components onto biological microelectromechanical systems (bioMEMS) has shown great potential for achieving these goals. Microfabricated electronic chips allow for micrometer-scale features as well as an electrical connection for sensing and actuation. Functional biological components give the system the capacity for specific detection of analytes, enzymatic functions, and whole-cell capabilities. Standard microfabrication processes and bio-analytical techniques have been successfully utilized for decades in the computer and biological industries, respectively. Their combination and interfacing in a lab-on-a-chip environment, however, brings forth new challenges. There is a call for techniques that can build an interface between the electrode and biological component that is mild and is easy to fabricate and pattern.
Biofabrication, described here, is one such approach that has shown great promise for its easy-to-assemble incorporation of biological components with versatility in the on-chip functions that are enabled. Biofabrication uses biological materials and biological mechanisms (self-assembly, enzymatic assembly) for bottom-up hierarchical assembly. While our labs have demonstrated these concepts in many formats 1,2,3, here we demonstrate the assembly process based on electrodeposition followed by multiple applications of signal-based interactions. The assembly process consists of the electrodeposition of biocompatible stimuli-responsive polymer films on electrodes and their subsequent functionalization with biological components such as DNA, enzymes, or live cells 4,5. Electrodeposition takes advantage of the pH gradient created at the surface of a biased electrode from the electrolysis of water 6,7,. Chitosan and alginate are stimuli-responsive biological polymers that can be triggered to self-assemble into hydrogel films in response to imposed electrical signals 8. The thickness of these hydrogels is determined by the extent to which the pH gradient extends from the electrode. This can be modified using varying current densities and deposition times 6,7. This protocol will describe how chitosan films are deposited and functionalized by covalently attaching biological components to the abundant primary amine groups present on the film through either enzymatic or electrochemical methods 9,10. Alginate films and their entrapment of live cells will also be addressed 11. Finally, the utility of biofabrication is demonstrated through examples of signal-based interaction, including chemical-to-electrical, cell-to-cell, and also enzyme-to-cell signal transmission. 
Both the electrodeposition and functionalization can be performed under near-physiological conditions without the need for reagents and thus spare labile biological components from harsh conditions. Additionally, both chitosan and alginate have long been used for biologically-relevant purposes 12,13. Overall, biofabrication, a rapid technique that can be simply performed on a benchtop, can be used for creating micron scale patterns of functional biological components on electrodes and can be used for a variety of lab-on-a-chip applications.

This article describes a biofabrication approach: deposition of stimuli-responsive polysaccharides in the presence of biased electrodes to create biocompatible films which can be functionalized with cells or proteins. We demonstrate a bench-top strategy for the generation of the films as well as their basic uses for creating interactive biofunctionalized surfaces for lab-on-a-chip applications.

Biofabrication ile Bio-Elektronik Arayüz Bridging

Advancements in lab-on-a-chip technology promise to revolutionize both research and medicine through lower costs, better sensitivity, portability, and ...

Creating Adhesive and Soluble Gradients for Imaging Cell Migration with Fluorescence Microscopy

Cells can sense and migrate towards higher concentrations of adhesive cues such as the glycoproteins of the extracellular matrix and soluble cues such as growth factors. Here, we outline a method to create opposing gradients of adhesive and soluble cues in a microfluidic chamber, which is compatible with live cell imaging. A copolymer of poly-L-lysine and polyethylene glycol (PLL-PEG) is employed to passivate glass coverslips and prevent non-specific adsorption of biomolecules and cells. Next, microcontact printing or dip pen lithography are used to create tracks of streptavidin on the passivated surfaces to serve as anchoring points for the biotinylated peptide arginine-glycine-aspartic acid (RGD) as the adhesive cue. A microfluidic device is placed onto the modified surface and used to create the gradient of adhesive cues (100% RGD to 0% RGD) on the streptavidin tracks. Finally, the same microfluidic device is used to create a gradient of a chemoattractant such as fetal bovine serum (FBS), as the soluble cue in the opposite direction of the gradient of adhesive cues.

A method for the assembly of adhesive and soluble gradients in a microscopy chamber for live cell migration studies is described. The engineered environment combines antifouling surfaces and adhesive tracks with solution gradients and therefore allows one to determine the relative importance of guidance cues.

Floresan Mikroskobu ile Görüntüleme Hücre Göç Yapıştırıcı ve Çözünür Degradeler oluşturma

Cells can sense and migrate towards higher concentrations of adhesive cues such as the glycoproteins of the extracellular matrix and soluble cues such as ...

In situ Compressive Loading and Correlative Noninvasive Imaging of the Bone-periodontal Ligament-tooth Fibrous Joint

This study demonstrates a novel biomechanics testing protocol. The advantage of this protocol includes the use of an in situ loading device coupled to a high resolution X-ray microscope, thus enabling visualization of internal structural elements under simulated physiological loads and wet conditions. Experimental specimens will include intact bone-periodontal ligament (PDL)-tooth fibrous joints. Results will illustrate three important features of the protocol as they can be applied to organ level biomechanics: 1) reactionary force vs. displacement: tooth displacement within the alveolar socket and its reactionary response to loading, 2) three-dimensional (3D) spatial configuration and morphometrics: geometric relationship of the tooth with the alveolar socket, and 3) changes in readouts 1 and 2 due to a change in loading axis, i.e. from concentric to eccentric loads. Efficacy of the proposed protocol will be evaluated by coupling mechanical testing readouts to 3D morphometrics and overall biomechanics of the joint. In addition, this technique will emphasize on the need to equilibrate experimental conditions, specifically reactionary loads prior to acquiring tomograms of fibrous joints. It should be noted that the proposed protocol is limited to testing specimens under ex vivo conditions, and that use of contrast agents to visualize soft tissue mechanical response could lead to erroneous conclusions about tissue and organ-level biomechanics.

In situ Compressive Loading and Correlative Noninvasive Imaging of the Bone-periodontal Ligament-tooth Fibrous Joint

In this study, the use of an in situ loading device coupled with micro-X-ray computed tomography for fibrous joint biomechanics will be discussed. Experimental readouts identifiable with an overall change in joint biomechanics will include: 1) reactionary force vs. displacement, i.e. tooth displacement within the alveolar socket and its reactionary response to loading, 2) three-dimensional (3D) spatial configuration and morphometrics, i.e.&#160;geometric relationship of the tooth with the alveolar socket, and 3) changes in readouts 1 and 2 due to a change in loading axis, i.e. concentric or eccentric loads.

Yerinde Basınç Yükleme ve Kemik-periodontal ligament-diş Lifli Joint Korelatif noninvaziv Görüntüleme

This study demonstrates a novel biomechanics testing protocol. The advantage of this protocol includes the use of an in situ loading device coupled to a ...

Microfluidic Platform for Measuring Neutrophil Chemotaxis from Unprocessed Whole Blood

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher neutrophil counts in the blood are usually an indicator of ongoing infections, while low neutrophil counts are a warning sign for higher risks for infections. To accomplish their functions, neutrophils also have to be able to move effectively from the blood where they spend most of their life, into tissues, where infections occur. Consequently, any defects in the ability of neutrophils to migrate can increase the risks for infections, even when neutrophils are present in appropriate numbers in the blood. However, measuring neutrophil migration ability in the clinic is a challenging task, which is time consuming, requires large volume of blood, and expert knowledge. To address these limitations, we designed a robust microfluidic assays for neutrophil migration, which requires a single droplet of unprocessed blood, circumvents the need for neutrophil separation, and is easy to quantify on a simple microscope. In this assay, neutrophils migrate directly from the blood droplet, through small channels, towards the source of chemoattractant. To prevent the granular flow of red blood cells through the same channels, we implemented mechanical filters with right angle turns that selectively block the advance of red blood cells. We validated the assay by comparing neutrophil migration from blood droplets collected from finger prick and venous blood. We also compared these whole blood (WB) sources with neutrophil migration from samples of purified neutrophils and found consistent speed and directionality between the three sources. This microfluidic platform will enable the study of human neutrophil migration in the clinic and the research setting to help advance our understanding of neutrophil functions in health and disease.

This protocol details an assay designed to measure human neutrophil chemotaxis from one droplet of whole blood with robust reproducibility. This approach circumvents the need for neutrophil separation and requires only a few minutes of assay preparation time. The microfluidic chip enables the repeated measure of neutrophil chemotaxis over time in infants or small mammals, where sample volume is limited.

İşlenmemiş kandan Nötrofil Kemotaksis Ölçüm mikroakışkan Platformu

Neutrophils play an essential role in protection against infections and their numbers in the blood are frequently measured in the clinic. Higher ...

Measuring and Modeling Contractile Drying in Human Stratum Corneum

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both cleansing agents and daily variations in ambient moisture; both of which can alter the water content of the tissue. Reductions in water content from severe barrier dysfunction or low humidity environments can alter SC stiffness and cause a build-up of drying stresses. In extreme conditions, these factors can cause mechanical rupture of the tissue. We have established a high throughput method of quantifying dynamic changes in the mechanical properties of SC upon drying. This technique can be employed to quantify changes in the drying behavior and mechanical properties of SC with cosmetic cleanser and moisturizer treatments. This is achieved by measuring dynamic variations in spatially resolved in-plane drying displacements of circular tissue samples adhered to an elastomer substrate. In-plane radial displacements acquired during drying are azimuthally averaged and fitted with a profile based on a linear elastic contractility model. Dynamic changes in drying stress and SC elastic modulus can then be extracted from the fitted model profiles.

This article describes a method of quantifying the dynamic drying behavior and mechanical properties of stratum corneum by measuring spatially resolved in-plane drying displacements of circular tissue samples adhered to an elastomer substrate. This technique can be used to measure how different chemical treatments alter drying and tissue mechanical properties.

Ölçme ve Modelleme Kontraktil Kurutma İnsan stratum korneumdaki

Stratum corneum (SC) is the most superficial skin layer. Its contact with the external environment means that this tissue layer is subjected to both ...

Preparation and Characterization of Novel HDL-mimicking Nanoparticles for Nerve Growth Factor Encapsulation

The objective of this article is to introduce preparation and characterization methods for nerve growth factor (NGF)-loaded, high-density, lipoprotein (HDL)-mimicking nanoparticles (NPs). HDLs are endogenous NPs and have been explored as vehicles for the delivery of therapeutic agents. Various methods have been developed to prepare HDL-mimicking NPs. However, they are generally complicated, time consuming, and difficult for industrial scale-up. In this study, one-step homogenization was used to mix the excipients and form the prototype NPs. NGF is a water-soluble protein of 26 kDa. To facilitate the encapsulation of NGF into the lipid environment of HDL-mimicking NPs, protamine USP was used to form an ion-pair complex with NGF to neutralize the charges on the NGF surface. The NGF/protamine complex was then introduced into the prototype NPs. Apolipoprotein A-I was finally coated on the surface of the NPs. NGF HDL-mimicking NPs showed preferable properties in terms of particle size, size distribution, entrapment efficiency, in vitro release, bioactivity, and biodistribution. With the careful design and exploration of homogenization in HDL-mimicking NPs, the procedure was greatly simplified, and the NPs were made scalable. Moreover, various challenges, such as separating unloaded NGF from the NPs, conducting reliable in vitro release studies, and measuring the bioactivity of the NPs, were overcome.

Simple homogenization was used to prepare novel, high-density, lipoprotein-mimicking nanoparticles to encapsulate nerve growth factor. Challenges, detailed protocols for nanoparticle preparation, in vitro characterization, and in vivo studies are described in this article.

Sinir Büyümesi Faktörü Kapsüllemesi için Yeni HDL&#39;yi taklit eden Nanopartiküllerin Hazırlanması ve Karakterizasyonu

The objective of this article is to introduce preparation and characterization methods for nerve growth factor (NGF)-loaded, high-density, lipoprotein ...

Agarose-based Tissue Mimicking Optical Phantoms for Diffuse Reflectance Spectroscopy

This protocol describes how to make agarose-based tissue-mimicking phantoms and demonstrates how to determine their optical properties using a conventional optical system with an integrating sphere. Measuring systems for the acquisition of the diffuse reflectance and total transmittance spectra are constructed with a broadband white light source, a light guide, an achromatic lens, an integrating sphere, a sample holder, an optical fiber probe, and a multi-channel spectrometer. An acrylic mold consisting of two rectangular acrylic pieces and a U-shaped acrylic piece is constructed to create an epidermal phantom and a dermal phantom with whole blood. The application of a sodium dithionite (Na2S2O4) solution to the dermal phantom enables the researcher to deoxygenate hemoglobin in red blood cells distributed in the dermal phantom. The inverse Monte Carlo simulation with the diffuse reflectance and total transmittance spectra measured by a spectrometer with an integrating sphere is performed to determine the absorption coefficient spectrum &#181;a(&#955;) and the reduced scattering coefficient spectrum &#181;s&#39;(&#955;) of each layer phantom. A two-layered phantom mimicking the diffuse reflectance of human skin tissue is also demonstrated by piling up the epidermal phantom on the dermal phantom.

Here, we demonstrate how agarose-based tissue-mimicking optical phantoms are made and how their optical properties are determined using a conventional optical system with an integrating sphere.

Özel tabanlı doku optik hayaletler diffüz yansıma spektroskopisi için taklit

This protocol describes how to make agarose-based tissue-mimicking phantoms and demonstrates how to determine their optical properties using a ...

Measuring Global Cellular Matrix Metalloproteinase and Metabolic Activity in 3D Hydrogels

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) culture systems. However, measurement of cell function in 3D culture is often more challenging. Many biological assays require retrieval of cellular material which can be difficult in 3D cultures. One way to address this challenge is to develop new materials that enable measurement of cell function within the material. Here, a method is presented for measurement of cellular matrix metalloproteinase (MMP) activity in 3D hydrogels in a 96-well format. In this system, a poly(ethylene glycol) (PEG) hydrogel is functionalized with a fluorogenic MMP cleavable sensor. Cellular MMP activity is proportional to fluorescence intensity and can be measured with a standard microplate reader. Miniaturization of this assay to a 96-well format reduced the time required for experimental set up by 50% and reagent usage by 80% per condition as compared to the previous 24-well version of the assay. This assay is also compatible with other measurements of cellular function. For example, a metabolic activity assay is demonstrated here, which can be conducted simultaneously with MMP activity measurements within the same hydrogel. The assay is demonstrated with human melanoma cells encapsulated across a range of cell seeding densities to determine the appropriate encapsulation density for the working range of the assay. After 24 h of cell encapsulation, MMP and metabolic activity readouts were proportional to cell seeding density. While the assay is demonstrated here with one fluorogenic degradable substrate, the assay and methodology could be adapted for a wide variety of hydrogel systems and other fluorescent sensors. Such an assay provides a practical, efficient and easily accessible 3D culturing platform for a wide variety of applications.

Here, a protocol is presented for encapsulating and culturing cells in poly(ethylene glycol) (PEG) hydrogels functionalized with a fluorogenic matrix metalloproteinase (MMP)-degradable peptide. Cellular MMP and metabolic activity are measured directly from the hydrogel cultures using a standard microplate reader.

Küresel hücresel matriks metalloproteinaz ve 3D Hydrogels metabolik etkinliğini ölçme

Three-dimensional (3D) cell culture systems often more closely recapitulate in vivo cellular responses and functions than traditional two-dimensional (2D) ...

Taklit ve Oklüzal aşındırıcı diş ölçme "Rub & Roll ile" aşınma ve profilometrisi-iletişim

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler