Generalitat Valenciana, PROMETEOII / 2014/063; Sağlık Bakanlığı, sosyal hizmetler ve eşitlik. Uyuşturucu, uyuşturucu bağımlılığı, 2014I007 araştırma projeleri Ulusal Plan için hükümet temsilcisi; Ekonomi Bakanlığı ve rekabet (MINECO), Sağlık Enstitüsü Carlos III, ağ bağımlılık bozuklukları (RTA) RD12 / 0028/0005 ve RD16 / 0017/0007 ve Avrupa Birliği, FEDER fonlar "una manera de hacer Europa" ve PSI2014-51847-R.

Ulusal, bölgesel ve yerel yasa ve yönetmeliklere, tarih için kullanılan hayvanların korunması yönergesi 2010/63/AB sayılı Avrupa Parlamentosu ve Konsey, 22 Eylül 2010 uygun olan tüm yordamları fareler ve bakımı ile ilgili uyulması Bilimsel amaçlı. Hayvan kullanımı ve bakımı Komitesi Valencia Üniversitesi mevcut protokolü onayladı.
1. malzeme ve klimalı yer tercihi için Kurulum:
<ol><li>Fareler 1-2 dk her test önce 3 gün idare. Kuyruk temelini kavramış. Vücut mümkünse desteklenmelidir. Bu ağrı ve acı bir hayvan işlerken en aza indirmek için ve stres gibi müdahale değişkenleri önlemek için yapılır. Not: 1 erkek fareler mevcut deneylerde 60 35-40 g ağırlığında gün eski (Genç Yetişkin) istihdam edildi. Uyuşturucu kaynaklı iade her iki cinsiyette farelerde gerçekleştirilebilir. Ancak, stres kaynaklı iade ile ilgili sosyal yenilgi paradigma tasarlanmıştır sadece erkek kemirgen, kadın yapmak Hayır ikamet farelerde agresif bir yanıt ikna etmek.</li>
	<li>İçin yer Klima, daha küçük bir merkezi gri alanı tarafından (13,8 uzun × 31,5 cm geniş × 34.5 yüksek) ayrılmış iki özdeş bölümler (30,7 cm uzun × 31,5 cm geniş × 34,5 cm yüksekliğinde) ile yapılan aynı kutuları kullanın. Not: Farklı kat doku ve duvar renkleri (siyah yerde düz bir zemin ve beyaz olan kaba bir yerde) bölmeleri var. Her bölmesi CPP kutusunun dört kızılötesi ışık ışınları ve altı merkezi yerde içerir. Bu bölmeler ve hayvan konumunu arasındaki geçişleri kayıt sağlar.</li>
	<li>Set up (kapalı ya da indirdi) Oda ışıkları her gün. Hayvanlar algılıyorsun değil ve deneyci (yaklaşık 40 kat seviyesinden 1 m ölçülen lux) için zayıflatılmış kırmızı ışıklar (önerilen) kullanın.</li>
	<li>15 dakika öncesi ve sonrası Klima için kaydetmek üzere program ayarlama (yazılım için Malzemeler tablo görmek) test (Şekil 2)</li>
	<li>Bütün deneyin için gerekli kokain çözüm hazırlamak. Kokain hidroklorid % 0,9 içinde erimesi NaCl (serum) 0.1 mL/10 g vücut ağırlığının birimindeki. Girdap karışımı ve günün sonunda 4 ° C'de mağazasında. Not: Kokain konsantrasyonları çalışmanın amacı bağlı olarak değişebilir. Amaç subthreshold dozda kokain kullanımının değerlendirecekse, 1 mg/kg konsantrasyon, önceki çalışmalar24,35içinde görüldüğü gibi denetim hayvanlarda etkisiz olduğu kullanılabilir. Etkili bir doz amacı ise, 6 mg/kg konsantrasyon etkilidir ama iade24teşvik değil, seçilmiş veya etkilidir ve iade tercih19indükler bir 25 mg/kg konsantrasyon olabilir.</li>
	<li>Hayvanlar kendi karanlık evre sırasında test etmek ve aynı kutusunu her hayvan için gün boyunca kullanın.</li>
	<li>Hayvan test oda içinde ev onların kafes her gün getirmek ve onları rahatsız 15dk için habituation dönemi olarak test ile ilgili tüm sesler için bekletin.</li>
</ol>2. test
<ol><li>Satın alma Not: Yer Klima, ilk spontan tercih açısından tarafsız yordamı üç aşamadan oluşmaktadır: ön Klima, Klima ve sonrası Klima (Şekil 1).<ol>
<li>
Öncesi Klima (Pre-C) (3 gün) (Şekil 2, Şekil 3, Şekil 4) Not: Burada, CPP kutusunda bölmeleri tarafsız değeri değerlendirilir. Her bölümünde harcanan zamanı ölçmek ve daha sonra aynı yerde sonrası Klima test harcanan ile karşılaştırın.<ol>
<li>Hayvanlar test odasına getir ve onları 15 dakikadır habituated bırakın.</li>
			<li>Giyotinler kafes kaldırılır kontrol edin.</li>
			<li>Bilgisayar ve program ayarlayın. Hayvan kimlikleri girip "Deneme" ve "Start" komutunu (Şekil 2) tuşuna basın.</li>
			<li>Fareyi yavaşça orta odası (gri bölme) yerleştirin ve minimum gürültü ile test odadan.</li>
			<li>Bütün hayvanlar ev onların kafes getir ve deneme sona erdiğinde verileri kaydetmek.</li>
			<li>Fareler her iki bölmeleri cihazları 15dk için erişmek izin (900 s) günde 3 gün üst üste.</li>
			<li>Günde 3, her bölümünde bir 900 s süre içinde harcanan zaman yazın ve sonraki safhaya (Şekil 3) bölmeleri tayini için kaydedin.</li>
			<li>Her grup bir bölümü (Örneğin, siyah) ve diğer yarısını da diğer bölme (Örneğin, beyaz) (Şekil 4) uyuşturucu veya araç almak için yarım hayvanlarda atayın. Not: Son dağıtım hayvan hayvanlar yarısı başlangıçta tercih edilen bölme ve tercih edilmeyen yuvası diğer yarısı için atanır emin olmalısınız. Buna ek olarak, hayvanların yarısı bir bölümü (örneğin, siyah bir) ve diğer yarısını da (Bu durumda, beyaz olanı) diğer ilaç aldı.</li>
			<li>Grup içinde her iki bölmeleri yanı sıra gruplar (bir varyans analizi (ANOVA) ile test grup farklılıklar) arasında denge skorları. Yaklaşık rehberlik gibi değerler etrafında olması gerekir 360-370 s Pre-C testi (Şekil 4). Not: hiçbir önemli farklılıklar arasında uyuşturucu eşleştirilmiş ve araç eşleştirilmiş bölmeleri Pre-C test sırasında harcanan süre tespit edilmelidir.</li>
			<li>Bir güçlü isteksizlik veya herhangi bir bölümü için tercih sergi hayvanlar hariç. İsteksizlik yerde % 33 daha az zaman harcama olarak düşünün ve hayvan o yerde fazla % 67 toplam zaman harcanan zaman tercih düşünün.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
(4 gün) Merkezi Klima (Şekil 5)
		<ol>
<li>Hayvanlar tartmak ve bu ağırlık sırasında klima kokain doz için kullanın.</li>
			<li>Kokain ya da vücut ağırlık dayalı salin ile şırıngalar hazırlayın.</li>
			<li>Bir fare intraperitoneally bir kerede enjekte (IP) ve hemen yavaşça atanan siyah ya da beyaz yuvası onların kutusu içine yerleştirin.</li>
			<li>Hemen fareyi 30 dk (Şekil 5) uyuşturucu eşleştirilmiş yuvasının sınırlı önce 4 h bir zaman aralığından sonra uyuşturucu doz enjekte et.</li>
			<li>Bu yordamı her gün, gün 2 ve 4 gün 1 ve 3 ve serum fizyolojik kokain ile başlayan diğer.</li>
			<li>Doğumdan her iki durumda da iki bölmeleri ayıran Giyotin kapıyı kapatarak merkez alan ulaşılmaz yapım gerçekleştirilen onay. Not: Bu aşamada, PC programı ayarlamak için gerek yoktur.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Sonrası Klima (Post-C) (1 gün)
		<ol>
<li>Hayvanlar test odasına getir ve onları 15 dakikadır habituated bırakın.</li>
			<li>İki bölmeleri ayıran Giyotin kapı kaldırın.</li>
			<li>Bilgisayar ve program ayarlayın. Hayvan kimlik girin ve "start" komutunu tuşuna basın.</li>
			<li>Her yerde tedavi edilmezse fareler tarafından 900 s gözlem süresince harcanan süreyi kaydetmek.</li>
			<li>Deneme tamamlandığında tüm hayvanları geri ev onların kafes getir ve verileri kaydetmek.</li>
			<li>Uyuşturucu eşleştirilmiş bölümünde Post-C sırasında harcanan zamanı önemli ölçüde Pre-C testinde daha büyük ise ilaç yer tercih indüklenen düşünün. Tersi durumda, uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için bir isteksizlik göz önünde bulundurun.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>Geçersiz kalma
	<ol>
<li>Uyuşturucu eşleştirilmiş yuvası için bir tercih geliştirilen tüm grupları/hayvanlar bir haftalık tükenme oturumda gerçekleştirin.</li>
		<li>15 dakika (öncesi ve sonrası-C testleri aynı) hayvan Aparatı (olmadan giyotinler) içinde yer (Şekil 1). Not: doz istihdam CPP yüksektir (25 mg/kg), haftada 1 nesli oturumu gerçekleştirin. Subthreshold bir doz kullanılan (1 mg/kg) ise, o zaman 2 yok olma oturum haftada (Örneğin Pazartesi ve Perşembe) gerçekleştirin.</li>
		<li>Ne zaman veri yok olma testinden Pre-C testi ile ilgili olarak farklılıklar görünmüyor ama Post-C testi ile ilgili olarak farklılıklar gösteriyorlar mı sönmüş tercih düşünün.</li>
		<li>Test 24 saat sonra yok onaylamak için yineleyin.</li>
	</ol></li>
	<li>CPP iade
	<ol>
<li>
Astar kaynaklı iade
		<ol>
<li>Geçersiz kalma onaylamıştır sonra kokain 24 h bir astar doz etkilerini değerlendirmek. Not: Astar dozlarda hayvan sırasında klima aldı yarım önceki dozu vardır. İade testi aynı protokolü Pre-C ve Post-C testleri geçer, 15 dk önce test hayvanları olmayan bir ekip içinde kokain doz almak dışında yerleştirin. 23, tekrarlanan yok olma/iade oluştuktan sonra doz sırasını sonuçlarda bir rol oynamaya36elde değil gibi görünüyor, ancak iade inducing içinde uyuşturucu astar etkinliğini gelişmiş olabilir.</li>
			<li>Hayvan getirmek için başka bir odaya test odasından (sigara contingent yer) (Şekil 6).</li>
			<li>Onları kokain yarım önceki doz ile enjekte (hayvanlar ile 25 mg/kg kokain, astar doz şartına EğerÖrneğin, 12.5 mg/kg olurdu).</li>
			<li>Onları kendi vivaryum 15dk için geri getirmek.</li>
			<li>Onları test odasına alıp aparatı hayvanlarda (bölmeleri ayıran hemen Giyotin kapı) 15 dakikadır (aynı öncesi ve sonrası-C testleri) yerleştirin.</li>
			<li>Saniye uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda iade tarafından uyuşturucu indüklenen tercihi derecesine bir ölçüsü olarak son nesli oturum ve iade testi sırasında harcanan zaman arasındaki farkı göz önünde bulundurun.</li>
			<li>Her zaman bu kadar doz azaltılarak etkisiz teyit yok olma-iade yordamı yineleyin. Not: Bir serum fizyolojik enjeksiyon denetim kapasitesine kokain astar (ve enjeksiyon kendisi, değil) kontrol etmek için kullanılabilir iade ikna etmek için.</li>
		</ol>
</li>
		<li>
Stres kaynaklı iade
		<ol>
<li>Geçersiz kalma onaylamıştır sonra stres kaynaklı geri alalım 24 h etkilerini değerlendirmek Not: İade testleri (15 dakika ücretsiz ambulation), Post-C agonistik bir sosyal yenilgisinden karşılaşmadan sonra (Şekil 6) hayvanlar 15dk test edilir dışında yürütülen aynıdır</li>
			<li>Hayvanlar CPP odadan başka bir odaya götür.</li>
			<li>Eşit yaş ve vücut ağırlığı plastik kafes (Şekil 6) eşleşen bir agresif rakip seks ile deneysel fareyi getirin. Not: Agonistik karşılaşma deneysel fareyi bir 10 min sınava bir nötr şeffaf plastik kafes (23x13.5x13cm) bir yenilgi sonuç ile oluşur. Agresif rakip hazırlamak için ilk yaş ve vücut ağırlığının deneysel fareler için 3 hafta maç farklı hayvan izole et. Tren onları mücadele deneyimi elde etmek ve agresif karaya ait davranış yüksek düzeyde sahip olmak için onları test etmek için. Agresif conspecifics elde etmek için fare gerekir en az 3 hafta boyunca izole ve sonra olarak saldırgan eğitimli ve saldırı davranışlar. Hayvanlar tarafsız bir ortamda, onları çiftler halinde bakacak şekilde eğitilmiştir. Onları rakibin 2 veya 3 kez ısır ve onları kafesten bir iki fare sunulması, gösterir önce Böylece saldırgan davranışlar karşılaşma deneyimi pekiştiriyor her zaman eğitim biten bırakacağız. Saldırganlık (tehdit ve saldırılara agresif conspecific) acı sonra deneysel fareler kaçınma/kaçmak ve savunması/uysal davranış mevcut olmalıdır. Ölçüt yenilgi, itaatkâr dik tarafından karakterize belirli bir duruş benimsemeye olduğunu, forepaws, upwardly açılı kafa, limp ve kulak (Şekil 6) geri çekildi. Burke ve ark.göre 2016, biz davetsiz misafir için itaatkâr sırtüstü duruşu görüntülerse sosyal karşılaşma daha önce sonlandırıldı düşünün > 8 s veya 13 saldırı ısırıkları meydana eğer. Başka bir seçenek önemli yaralanma riski olmadan ekran hayvanlar için hayvan içinde a kafes çevirme değil kadar her iki hayvan geçmek büyük bir delik ile hızı olabilir.  Saldırganlık hayvanlar tabi saldırgan davranışlar yönlendirmek için tespit edilemedi.  Bir hayvan bir yaralanma bir yara 1 cm çap ve/veya kas doğrudan maruz kalma ile ayakta tutan çalışma söz konusu değildir ve ötenazi.</li>
			<li>10 min agonistik karşılaşma sonra farelerin test odasına götür ve CPP aparatı hayvanlarda (bölmeleri ayıran hemen Giyotin kapı) 15 dakikadır (aynı öncesi ve sonrası-C testleri) yerleştirin.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>3. istatistiksel analiz
Not: Ideal örnek boyutu 15 hayvan grubu başına en az olmalıdır.
<ol><li>Bir değişken, tedavi, arasında karışık bir ANOVA aracılığıyla Grup ilaç eşleştirilmiş kompartımanda geçirdim bu süre analiz (kontrol grubu, deney grubu, iki grup örneği Şekil 7 c) iki düzeyleri ve bir değişken-gün içinde 2 düzeyleri ile (Pre-C ve Post-C). Not: Kontrol grubunda hayvanlar ilaç almak ama hiçbir çevre manipülasyonlar yok. Öte yandan, deney grubu hayvanlar farklı çevresel koşullara maruz kalır. Uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda duyarlılık herhangi bir önemli farklar ilaç varsa görmek için test öncesi-C saygı ile Post-C günü harcanan süre karşılaştırın.</li>
	<li>Buna ek olarak, ya önemli puanlarının kontrol etmek için Bonferroni post-hoc çözümlemesi.</li>
	<li>Student´s t-testleri aracılığıyla gelişmiş tercih deneme ama son anda, ders sırasında yok olma-iade prosedürü ile devam etmek için bunları analiz grupları yok olma ve iade değerleri ile ilgili verileri analiz bir ANOVA ile ile bir değişken içinde (gün) ile bağlı olarak her grup düzeyi sayısı. Not: ne zaman karşılaştırma sayısı arttı, şans eseri de bu önemli olacak sayısı arttı. Bu nedenle, yanlış-mutlak (tip 1 hataları) almamak için biz 'böylece test daha muhafazakar birden çok t-test için Bonferroni düzeltmesi olan yapım p-değeri doğru'. Ancak, iade sınava iade test ve son nesli test arasında karşılaştırma yapılmalıdır. Bu nedenle, düzeltme için gerek yoktur.</li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Uyuşturucu bağımlılığı araştırma kilit noktası özlem azaltmak ve sonuç olarak, relapse için güvenlik açığı azaltmak tedaviler gelişmedir. CPP paradigma iade modeli sayesinde bir önceliktir gelecekteki araştırma nüks modüle farklı yordam ve çevresel faktörlerin etkisini incelemek mümkündür. CPP paradigma için çevresel faktörler son derece hassas bir test olarak dikkate alınacak bazı önemli noktalar vardır.
Değişiklikler ve sorun giderme: ?...

Klimalı yer tercih (CPP) paradigma çeşitli uyaranlara1,2tarafından indüklenen şartına ödül değerlendirme basit bir yol sunar ve genel olarak bağımlılık uyuşturucu3 şartına tatmin edici etkilerini incelemek için kullanılan . Bu Pavlovian Klima, bağımlılık davranışı4korumak için uyuşturucu ilişkili çevresel ipuçları motivasyon değerini değerlendirmek dayanır. Bu modelde, ikincil appetitive özellikleri (şartına tatmin edici etkileri) çevre ipuçları elde bir birincil reinforcer3ile eşleştirildiğinde. Örneğin, başlangıçta tarafsız bir yer (örneğin bir kompartımanda CPP kafes rengini) bir ilaç kötüye belirli etkileri ile bazı sırasında eşleştirilmiş iken başka bir bölme bir araç enjeksiyon ile ilişkili oturumları5, Klima. Eğer hayvan daha fazla zaman daha önce uyuşturucu ile ilişkili yerde Klima, takip, CPP3geliştirmiştir varsayılır. Hayvan birincil reinforcer olan uyuşturucuya bağlı çevre ipuçları için pozitif bir değer verdiğinde tercih kurulması sağlanır. Sonuç olarak, hayvan davranış ilaç arama yanıt-e doğru yanıt bu bağlamsal ipuçları6olarak gerçekleştirir. CPP modeli gösterilen belirli bir koşulu (sosyal yenilgiden daha önce acıÖrneğin,) hayvanlarda daha hassas ve duyarlı olan doz ilaç, subthreshold doz ödüllendirici özelliklerinin değerlendirilmesi izin verir. naif hayvanlar7etkili değil.
CPP modeli da yok olma/iade mevcut Protokolü amacı olan nüks3, çalışmaya bir hayvan modeli olarak değerlendirmek için kullanılmıştır. Üç farklı aşama vardır: satın alma, yok olma ve iade (Şekil 1). CPP iade modelde, hayvanlar, öncelikle bir uyuşturucu eşleştirilmiş bölme için CPP edinmeniz ve sonra birkaç nesli oturumları gerçekleştirin. Hayvan yaklaşım olmuştur şartına bir ödüllendirici uyarana davranış onun yanıt azaltır an (Örneğin, uyuşturucu) kaldırılmış olarak tükenme tanımlamak8. Böylece yavaş yavaş zayıflatılmış9edinsel tercihtir tükenme oturumları sırasında hayvanlar yokluğunda bölmeleri uyuşturucunun keşfedin. Extinction (uyuşturucu eşleştirilmiş kompartımanda harcanan süre progresif azalma) sırasında hayvan sergileyen davranış değişikliği nedeniyle önceki öğrenilen Yanıt ile rekabet yeni öğrenme süreçleri olabilir düşünmeye önemli bir konu olduğunu, veya konu3iç motivasyon durumuyla bir düşüş nedeniyle. Son olarak, bağlam ya da ilaç ipuçları aracılığıyla yer tercih ta modelimiz iade1olur.
İlişkili uyuşturucu bir astar enjeksiyon yönetme bağlamsal ipuçlarını yaklaşım ta kabul tercih getirebileceği. Uyuşturucu astar iade özlem indüklenen ve hayvanlar için ödül ile ilgili çevresel ipuçları aramaya motive uyuşturucu zevkli etkileri kalıcı bellek nedeniyle oluşur.
Yordamı (cerrahi gerektiren kendi kendine Yönetim aksine,) non-invaziv CPP iade modeli bazı avantajları nelerdir, ucuz ve basit. Buna ek olarak, bu model iyi ölçüt geçerliliği, iyi insanlar10,11relapse, re-uyuşturucu12,13 maruz gibi neden bir çekim gücü ile iade inducing, ne olacağı taklit vardır veya 14stres.
Extinction-iade model intravenöz kendi kendine idare gibi diğer teknikleri vardır. Burada, hayvan hayvan, compulsivity ve motivasyon14,15,16operant yanıt değerlendirilmesi izni uyuşturucu yapabilirsiniz bir kolu tuşuna basın. CPP büyük avantajı üzerinde kendi kendine yönetim yordamları CPP iade yaklaşımının yeniden ortaya çıkma oluşan uyuşturucu ile eşleştirilmiş bağlam uyaranlar teşvik motivasyonel değerini reaktivasyonu yansıtmak için kabul edilir olduğunu davranış bağlam17. Ayrıca, stres gibi uyuşturucu olmayan uyarıcılara da iade18,19tetikleyebilir. Örneğin, bir ayak şok veya kısıtlama stres sonra20bir kendi kendine Yönetim çalışma iade sıçanlarda eroin alımının üzerinde hiçbir etkisi nitelendirdi. Yazarlar bu gerilim farklı bir bağlamda kendi kendine Yönetim odası dışında test edildi çünkü başarısız oldu tartışıldı. Buna ek olarak, iade CPP modeli kullanırken vardı aynı stresler kullandıktan sonra bir açık yeniden kurulması morfin kaynaklı CPP ve CPP ve farklı zamanlarda farklı bir bağlamda uygulanır (0 ve 15 dakika sonra stres maruz kalma)18 .
Çeşitli çalışmalar literatürde farklı yollarını uyuşturucu ve stres kaynaklı iade göstermiştir. Bir yandan, iade uyuşturucu kaynaklı sıçanlar ve fareler morfin5,21,22,23, kokain24,25, amfetamin26kullanarak rapor edildi, 27, etanol28,29ve 3,4-Methylenedioxymethamphetamine (MDMA)30. Öte yandan, strese maruz kalma ilaç kötüye açığına belirleyici bir faktör olabilir. Stres uyuşturucu7,31,32 tatmin edici etkilerini artırmak için bilinmektedir ve iyi kurulmuş33,34nüks onların rolüdür. Örneğin, bir conspecific sosyal etkileşimleri yenilgi morfin ve kokain CPP18,19edilmekteyse. Buna ek olarak, sosyal yenilgi tekrarlanan maruz hayvanlar subthreshold dozda kokain ödüllendirici şartına etkileri daha savunmasız ve tercih çok düşük dozda kokain7ile yeniden.
Uygulama CPP iade modelinin hayvanlarda relapse için güvenlik açığı değerlendirmek için yararlı ve hassas bir şekilde ve insan relapse, gibi tehdit ana Tetikleyiciler farklı ince çevre manipülasyonlar değerlendirilmesi izin verir uyuşturucu veya stres indüklenen geri alalım.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>MONPRE 2Z software</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Identical Plexiglas boxes with two equal sized compartments separated by a grey central area.</td>
			<td>CIBERTEC S.A., Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>The compartments have different colored walls (black vs white) and distinct floor textures (fine grid in the black compartment and wide grid in the white one). All boxes are equipped with four infrared light beams in each compartment of the box and six in the central area which allow the recording of the position of the animal and its crossings from one compartment to the other.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cocaine hydrochloride</td>
			<td>Laboratorios Alcaliber S.A., Madrid, Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Animals: mice of the OF1 outbred strain</td>
			<td>Charles River, Barcelona Spain</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Male mice who arrive to the laboratory on PND 42 and on PND 60 perform the CPP test. These animals are specially indicated for social defeat and aggression models.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Diet- Teklad Global Diet 2014</td>
			<td>Supplied by Harlan Laboratories Models, S. L. (Barcelona, Spain)</td>
			<td></td>
			<td>13 kcal % fat, 67 kcal % carbohydrates and 20% kcal protein; 2.9 kcal/g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High fat diet TD.06415</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>45 kcal % fat, 36 kcal % carbohydrates and 19% kcal protein; 4.6 kcal/g</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

reinstatement of drug-seeking in mice using the conditioned place preference paradigm

Mevcut Protokolü şartına yer tercih (CPP) nüks içinde uyuşturucu bağımlılığı bir model olarak açıklar. Bu modelde, hayvanlar ilk şartına yer tercih bir uyuşturucu eşleştirilmiş bölme olarak elde etmek için eğitilmiştir ve sonrası Klima test sonra kurulan tercih söndürmek için birkaç seans gerçekleştirirler. CPP uyuşturucu çevre ile ilgili ipuçlarını şartına tatmin edici etkileri değerlendirilmesi izin verir. Sonra extinguished CPP sağlam bir astar doz ilaç sigara ekip yönetimi tarafından ve stresli uyarıcılara maruz iade. Her iki yöntem burada açıklanmaktadır. Hayvan davranış yanıt reinitiates zaman şartına ödül iade yer almış kabul edilir.
Non-invaziv, ucuz ve basit iyi geçerlilik ölçütleri ile bu iletişim kuralı başlıca avantajları şunlardır. Ayrıca, stres veya nüks ilaç davranışları arayan modüle diyet gibi farklı çevresel manipülasyonlar çalışma sağlar. Hayvanların operant yanıt dahil gibi bir sınırlama motivasyon ve ilacın birincil güçlendirici etkileri keşfetmek için araştırmacı hedefliyor verirseniz, o kendi kendine yönetim yordamları ile tamamlanmaktadır ise.

İlk olarak, astar ve stres indüklenen iade temsilcisi sonuçlarını yetişkin OF1 erkek fare kullanarak Şekil 7 ' de gösterilen.
Şekil 7a-b saatini temsil eden veri ön içinde uyuşturucu eşleştirilmiş compartment(s) geçirdi ve Post-C testi tekrarlanan ölçüler ANOVA ile konular içinde değişken yaşam (Pre-C ve Post-C karşılaştırma) ...

Watch this Scientific Journal Video about Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm at JoVE.com

Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

Bu iletişim kuralı şartına yer tercih (CPP) nüks bir model olarak açıklar. Bu yordam nüks ölçümü çevre ipuçları uyuşturucu ilişkili etkisi özlem olarak göz önünde bulundurarak laboratuvar hayvanlarda izin verir ve çekimser bağımlıları nüks Şu anda uyuşturucu bağımlılığı tedavi programları odak noktasıdır.

Uyuşturucu arayan farelerde şartına yer tercih paradigması kullanarak iade

The present protocol describes the Conditioned Place Preference (CPP) as a model of relapse in drug addiction. In this model, animals are first trained to ...

reinstatement-drug-seeking-mice-using-conditioned-place-preference

Research

Education

JoVE Core

JoVE Journal

Pharmacology

Behavior

Unit 1

Pharmacotherapy of Depression and Anxiety Disorders

SCIENTISTS IN ACTION

11.3K Görüntüleme.  Universitat de València. Bu iletişim kuralı şartına yer tercih (CPP) nüks bir model olarak açıklar. Bu yordam nüks ölçümü çevre ipuçları uyuşturucu ilişkili etkisi özlem olarak göz önünde bulundurarak laboratuvar hayvanlarda izin verir ve çekimser bağımlıları nüks Şu anda uyuşturucu bağımlılığı tedavi programları odak noktasıdır.

Video: Reinstatement of Drug-seeking in Mice Using the Conditioned Place Preference Paradigm

The Crossmodal Congruency Task as a Means to Obtain an Objective Behavioral Measure in the Rubber Hand Illusion Paradigm

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden hand is touched. If the viewed and felt touches are given at the same time then this is sufficient to induce the compelling experience that the rubber hand is one's own hand. The RHI can be used to investigate exactly how the brain constructs distinct body representations for one's own body. Such representations are crucial for successful interactions with the external world. To obtain a subjective measure of the RHI, researchers typically ask participants to rate statements such as "I felt as if the rubber hand were my hand". Here we demonstrate how the crossmodal congruency task can be used to obtain an objective behavioral measure within this paradigm.
The variant of the crossmodal congruency task we employ involves the presentation of tactile targets and visual distractors. Targets and distractors are spatially congruent (i.e. same finger) on some trials and incongruent (i.e. different finger) on others. The difference in performance between incongruent and congruent trials - the crossmodal congruency effect (CCE) - indexes multisensory interactions. Importantly, the CCE is modulated both by viewing a hand as well as the synchrony of viewed and felt touch which are both crucial factors for the RHI.
The use of the crossmodal congruency task within the RHI paradigm has several advantages. It is a simple behavioral measure which can be repeated many times and which can be obtained during the illusion while participants view the artificial hand. Furthermore, this measure is not susceptible to observer and experimenter biases. The combination of the RHI paradigm with the crossmodal congruency task allows in particular for the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the RHI.

We demonstrate how an objective measure can be employed in the widely employed rubber hand illusion paradigm. This measure is obtained by modifying the well-established crossmodal congruency task. This task allows the investigation of multisensory processes which are critical for modulations of body representations as in the rubber hand illusion.

Kauçuk El Illusion Paradigma bir Amaç Davranış Tedbir Alınması Aracı Olarak Crossmodal Congruency Görev

The rubber hand illusion (RHI) is a popular experimental paradigm. Participants view touch on an artificial rubber hand while the participants' own hidden ...

Davranış

Stereotaxic Microinjection of Viral Vectors Expressing Cre Recombinase to Study the Role of Target Genes in Cocaine Conditioned Place Preference

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes of interest allows for enhanced temporally- and regionally-specific control of gene deletion, compared to existing methods. While conditional deletion can also be achieved by mating mice that express Cre recombinase under the control of specific gene promoters with mice carrying a floxed gene, stereotaxic microinjection allows for targeting of discrete brain areas at experimenter-determined time points of interest. In the context of cocaine conditioned place preference, and other cocaine behavioral paradigms such as self-administration or psychomotor sensitization that can involve withdrawal, extinction and/or reinstatement phases, this technique is particularly useful in exploring the unique contribution of target genes to these distinct phases of behavioral models of cocaine-induced plasticity. Specifically, this technique allows for selective ablation of target genes during discrete phases of a behavior to test their contribution to the behavior across time. Ultimately, this understanding allows for more targeted therapeutics that are best able to address the most potent risk factors that present themselves during each phase of addictive behavior.

This article describes how to microinject viral vectors into mouse brain and then test in a conditioned place preference paradigm that includes an acquisition, extinction and reinstatement phase.

Cre Recombinase Kokain Klima yeri tercihi Hedef Genlerin Rolü Eğitim için ifade Viral Vektörler stereotaksik Mikroenjeksiyon

Microinjecting recombinant adenoassociated viral (rAAV) vectors expressing Cre recombinase into distinct mouse brain regions to selectively knockout genes ...

Assessment of Cocaine-induced Behavioral Sensitization and Conditioned Place Preference in Mice

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to drugs of abuse make lasting alterations in the brain function of vulnerable individuals, and these persistent alterations likely serve to maintain the maladaptive drug seeking and taking behaviors characteristic of addiction/dependence2. In rodents, reward experience and contextual associations are frequently measured using the conditioned place preference assay, or CPP, wherein preference for a previously drug-paired context is measured. Behavioral sensitization, on the other hand, is an increase in a drug-induced behavior that develops progressively over repeated exposures. Since sensitized behaviors can often be measured after several months of drug abstinence, depending on the dose and length of initial exposure, they are considered observable correlates of lasting drug-induced plasticity. Researchers have found these assays useful in determining the neurobiological substrates mediating aspects of addiction as well as assessing the potential of different interventions in disrupting these behaviors. This manuscript describes basic, effective protocols for mouse CPP and locomotor behavioral sensitization to cocaine.

This protocol is intended to enable researchers to conduct experiments designed to test these aspects of addiction using the conditioned place preference and locomotor behavioral sensitization assays.

Kokain kaynaklı Davranış HASSASİYET ve Fare koşullu yer tercihi Değerlendirilmesi

It is thought that rewarding experiences with drugs create strong contextual associations and encourage repeated intake. In turn, repeated exposures to ...

Place and Response Learning in the Open-field Tower Maze

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for examining how rats learn to use a place- or response-learning to successfully navigate in an open-field arena. Additionally, this protocol describes how the OFTM differs from other behavioral maze paradigms that are commonly used to study spatial learning in rodents. The OFTM described in this article was adapted from the one previously described by Cole, Clipperton, and Walt (2007). Specifically, the OFTM was created to test spatial learning in rodents without the experimenter having to consider how &#8220;stress&#8221; might play a role as a confounding variable. Experiments have shown that stress-alone can significantly affect cognitive function1. The representative results section contains data from an experiment that used the OFTM to examine the effects of estradiol treatment on place- and response-learning in adult female Sprague Dawley rats2. Future studies will be designed to examine the role of the hippocampus and striatum in place- and response-learning in the OFTM.

The Open-field Tower Maze (OFTM) is a maze created to study the behavioral and neural mechanisms of spatial learning (e.g., place- or response-learning) in rats. This maze is especially useful for experimenters who want to use a non-stressful maze paradigm to investigate spatial learning in their research.

Açık alanda Kulesi Maze yerleştirmek ve Yanıt Öğrenme

This protocol describes how the Open-field Tower Maze (OFTM) paradigm is used to study spatial learning in rodents. This maze is especially useful for ...

Examining Recall Memory in Infancy and Early Childhood Using the Elicited Imitation Paradigm

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is commonly assessed using verbal report paradigms in adults, studying the development of this ability in preverbal infants and children proved challenging. Over the past 30 years, researchers have developed a non-verbal means of assessing recall memory known as the elicited or deferred imitation paradigm. In one variant of the procedure, participants are presented with novel three-dimensional stimuli for a brief baseline period before a researcher demonstrates a series of actions that culminate in an end- or goal-state. The participant is allowed to imitate the demonstrated actions immediately, after a delay, or both. Recall performance is then compared to baseline or to performance on novel control sequences presented at the same session; memory can be assessed for the individual target actions and the order in which they were completed. This procedure is an accepted analogue to the verbal report techniques used with adults, and it has served to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood. In addition, the elicited or deferred imitation procedure has been modified and adapted to answer questions relevant to other aspects of cognitive functioning. The broad utility and application of imitation paradigms is discussed, along with limitations of the approach and directions for future research.

The elicited imitation procedure was established to examine the development of recall memory in infancy and early childhood. This procedure has been widely used to establish a solid foundation of the nature of recall memory in infancy and early childhood.

Ortaya çıkarılan İmitasyon Paradigm&#39;i kullanma Bebeklik ve Erken Çocuklukta hatırlayın Belleği incelenmesi

The ability to recall the past allows us to report on details of previous experiences, from the everyday to the significant. Because recall memory is ...

Using Eye Movements Recorded in the Visual World Paradigm to Explore the Online Processing of Spoken Language

In a typical eye tracking study using the visual world paradigm, participants' eye movements to objects or pictures in the visual workspace are recorded via an eye tracker as the participant produces or comprehends a spoken language describing the concurrent visual world. This paradigm has high versatility, as it can be used in a wide range of populations, including those who cannot read and/or who cannot overtly give their behavioral responses, such as preliterate children, elderly adults, and patients. More importantly, the paradigm is extremely sensitive to fine grained manipulations of the speech signal, and it can be used to study the online processing of most topics in language comprehension at multiple levels, such as the fine grained acoustic phonetic features, the properties of words, and the linguistic structures. The protocol described in this article illustrates how a typical visual world eye tracking study is conducted, with an example showing how the online processing of some semantically complex statements can be explored with the visual world paradigm.

The visual world paradigm monitors participants' eye movements in the visual workspace as they are listening to or speaking a spoken language. This paradigm can be used to investigate the online processing of a wide range of psycholinguistic questions, including semantically complex statements, such as disjunctive statements.

Konuşulan dil çevrimiçi işlenmesi keşfetmek için görsel dünya paradigmada kaydedilen göz hareketleri kullanarak

In a typical eye tracking study using the visual world paradigm, participants' eye movements to objects or pictures in the visual workspace are recorded ...

A Conditioned Place Preference Protocol for Measuring Incubation of Craving in Rats

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed incubation of drug craving. Here, we describe a morphine conditioned place preference (CPP) protocol for measuring the incubation of craving in rats. In this protocol, a CPP paradigm mainly employing somatosensory cues is used to establish a long-term reward memory of morphine. A three-chamber CPP box that differs in the texture of the chamber floor is constructed. First, the animals are tested for their baseline preference to the two side chambers for three consecutive days. Then, they are injected intraperitoneally with morphine/saline and put into their non-preferred/preferred chamber for 45 min. After 6 days of conditioning, their preference to the side chambers is tested for 15 min at different time points after the last conditioning session. With this paradigm, the reward memory of morphine could last for at least 18 days. To test whether the above-mentioned protocol can model increased craving, the number of entrances into the two side chambers are counted during the abstinence period. The results show that the entrances increased, suggesting that the CPP paradigm could mimic the incubation of craving. Future studies can employ this model to study neural mechanisms underlying long-term memory and incubation of craving.

Here, a morphine conditioned place preference (CPP) protocol is described to measure incubation of craving in rats.

Kuluçka özlem sıçanlarda ölçmek için bir şartına yer tercih Protokolü

A major cause of repeated relapses is a craving for the drug. Drug craving increases progressively during the abstinence period, a phenomenon termed ...

Using the Visual World Paradigm to Study Sentence Comprehension in Mandarin-Speaking Children with Autism

Sentence comprehension relies on the ability to rapidly integrate different types of linguistic and non-linguistic information. However, there is currently a paucity of research exploring how preschool children with autism understand sentences using different types of cues. The mechanisms underlying sentence comprehension remains largely unclear. The present study presents a protocol to examine the sentence comprehension abilities of preschool children with autism. More specifically, a visual world paradigm of eye-tracking is used to explore the moment-to-moment sentence comprehension in the children. The paradigm has multiple advantages. First, it is sensitive to the time course of sentence comprehension and thus can provide rich information about how sentence comprehension unfolds over time. Second, it requires minimal task and communication demands, so it is ideal for testing children with autism. To further minimize the computational burden of children, the present study measures eye movements that arise as automatic responses to linguistic input rather than measuring eye movements that accompany conscious responses to spoken instructions.

We present a protocol to examine the use of morphological cues during real-time sentence comprehension by children with autism.

Cümle anlama Mandarin konuşan çocuklarda otizm eğitim için görsel dünya paradigması kullanarak

Sentence comprehension relies on the ability to rapidly integrate different types of linguistic and non-linguistic information. However, there is ...

Exploring Infant Sensitivity to Visual Language using Eye Tracking and the Preferential Looking Paradigm

We discuss the use of the preferential looking paradigm in eye tracking studies in order to study how infants develop, understand, and attend to the world around them. Eye tracking is a safe and non-invasive way to collect gaze data from infants, and the preferential looking paradigm is simple to design and only requires the infant to be attending to the screen. By simultaneously showing two visual stimuli that differ in one dimension, we can assess whether infants show different looking behavior for either stimulus, thus demonstrating sensitivity to that difference. The challenges in such experimental approaches are that experiments must be kept brief (no more than 10 min) and be carefully controlled such that the two stimuli differ in only one way. The interpretation of null results must also be carefully considered. In this paper, we illustrate a successful example of an infant eye tracking study with a preferential looking paradigm to discover that 6-month-olds are sensitive to linguistic cues in a signed language despite having no prior exposure to signed language, suggesting that infants possess intrinsic or innate sensitivities to these cues.

Eye tracking studies using a preferential looking paradigm can be used to study infants&#39;&#160;emerging understanding of, and attention to, their external visual world.

Göz Izleme ve Tercihli görünümlü paradigma kullanarak görsel dile bebek hassasiyetini keşfetme

We discuss the use of the preferential looking paradigm in eye tracking studies in order to study how infants develop, understand, and attend to the world ...

A System for Tracking the Dynamics of Social Preference Behavior in Small Rodents

Exploring the neurobiological mechanisms of social behavior requires behavioral tests that can be applied to animal models in an unbiased and observer-independent manner. Since the beginning of the millennium, the three-chamber test has been widely used as a standard paradigm to evaluate sociability (social preference) and social novelty preference in small rodents. However, this test suffers from multiple limitations, including its dependence on spatial navigation and negligence of behavioral dynamics. Presented and validated here is a novel experimental system that offers an alternative to the three-chamber test, while also solving some of its caveats. The system requires a simple and affordable experimental apparatus and publicly available open-source analysis system, which automatically measures and analyzes multiple behavioral parameters at individual and population levels. It allows detailed analysis of the behavioral dynamics of small rodents during any social discrimination test. We demonstrate the efficiency of the system in analyzing the dynamics of social behavior during the social preference and social novelty preference tests as performed by adult male mice and rats. Moreover, we validate the ability of the system to reveal modified dynamics of social behavior in rodents following manipulations such as whisker trimming. Thus, the system allows for rigorous investigation of social behavior and dynamics in small rodent models and supports more accurate comparisons between strains, conditions, and treatments.

Described here is a novel automated experimental system that offers an alternative to the three-chamber test and also solves several caveats. This system supplies multiple behavioral parameters that enable rigorous analysis of small rodent behavioral dynamics during the social preference and social novelty preference tests.