Halletmemgereken Frede ve Susanne Schulz onların teknik destek için teşekkür ederiz. Bu çalışma hiçbir fon aldı.

Bu iletişim kuralı için hayvan deney LANUV Recklinghausen (#84-02.04.2016.A374) Etik Komitesi tarafından kabul edildi. Genel olarak, bu yordam yetişkin fareler üzerinde gerçekleştirilir > 10 hafta-in yaş. Ancak, genç hayvanlar üzerinde de bu ameliyatı gerçekleştirmek mümkündür. Cerrahi alet kullanmadan önce sterilize ve aseptik koşullar altında gerçekleştirilecek tüm adımlardır.
1. anestezi ve entübasyon indüksiyon
<ol><li>Buprenorfin 0,1 µg/g vücut ağırlığı intraperitoneally ağrı için enjekte. 0.1 mg/kg buprenorfin her 8 h mayi enjeksiyonlari önümüzdeki üç gün ameliyat sonrası için yineleyin.</li>
	<li>İndüksiyon için fareyi isoflurane 3.0 Vol % 1 L/min bir oksijen akışı ile ayarlayın Buharlaştırıcı bağlandığı bir anestezi indüksiyon kutuya yerleştirin.</li>
	<li>Derin narkoz bir dokunsal uyarana inducing tarafından emin olun. Not: Artış Vol % isoflurane ilâ %5, anestezi indüksiyon başarısız olur veya narkoz yeterince derin değil.</li>
	<li>Refleks devamsızlık emin olmak için fare kuyruk tutam. Refleksleri tam olmaması durumunda, fareyi en iyi havalandırma kurulum için tartmak (bkz. 1,12).</li>
	<li>37 ° c prosedürü boyunca vücut ısısını korumak için bir ısı kontrollü ameliyat masasına için fareyi hareket ettirin.</li>
	<li>Fare burun narkoz korumak için anestezi indüksiyon kutuya bağlı plastik bir koni yerleştirin.</li>
	<li>Fare üst kesici dişler naylon dikiş ile düzeltmek. Bir yapışkan bant ile ekstremitelerde bağlayacaktın.</li>
	<li>Yeterli bir narkoz yeniden sağlamak için pens ucu ile arka pençe üzerinde basınç uygulayın. Bir geri çekilme, yokluğunda refleks aşağıdaki adımlara devam edin. Not: anestezi indüksiyon başarısız olur veya narkoz yeterince derin değil isoflurane birim % artırmak ve para çekme refleks olmaması için bekleyin.</li>
	<li>Steril oftalmik yağ kuruma anestezi altında önlemek için kornealar yerleştirin.</li>
	<li>Rektal travması rektal sonda yağlayın. Çekirdek ısısı 37 ° c emin olmak için bir rektal sıcaklık probu takın</li>
	<li>Boğaz ve üreticinin yönergelerine göre depilatory krema ile üst göğüs depilate. Krem 1 dakika sonra silin. Gerekiyorsa, başarılı kadar bu adımı yineleyin. Not: kanama durumunda pamuk uçlu temizleme bezi kullanın.</li>
	<li>% 70 etanol ile depilated alanı temizleyin. O zaman povidone-iyot yerel cilt dezenfeksiyon 3 kez ve en az 3 dakika için geçerli.</li>
	<li>Fizyolojik parametreler vantilatör ayarlarını. Solunum hızı 150/dak ve deprem birimleri için 8-10 µL/g vücut ağırlığı (BW) için ayarlayın.</li>
	<li>Steril eldiven yenisini koymak. Cerrahi mikroskop altında fare yerleştirin ve steril bir delikli örtü fareyi getirin.</li>
	<li>Derinin orta hat 3 mm çene kemiğinde aşağı 2nd kaburga altında deşmek. Orta hat ve bağ dokusu submandibular bezinin tanımlar. O zaman açılı juatify forseps yavaşça bezi, orta hat açık açık iki Forseps ile bölmek ve trakeal kas incelemek için kullanın.</li>
	<li>Trakea yavaşça para trakeal kasları apart açık açık juatify Forseps ile çekerek hazırlayın.</li>
	<li>Boğaz daha kolay entübasyon koşulları için düzeltmek ve yavaşça nefes borusu içinde entübasyon kanülü (OD 1.2 mm) eklemek için Forseps ile dil üzerinde çek. Entübasyon tüpü trake içinde doğrudan görselleştirme ve uygun göğüs hareketi için denetleyerek doğrulayın.</li>
	<li>İsoflurane konsantrasyonu % 2 isoflurane 1.0 L/dak ve %100 O2bir akış ile entübasyon sonra ayarlayın. Not: solunum hareketleri durmayın veya fareler başlamak dokunaklı, ilk solunum hızı 180/dk'ya kadar artırın. Fare nefes kendiliğinden duruncaya kadar isoflurane konsantrasyon gerekirse, %3.5 ikincil olarak artırmak. Sızdırmazlık veya yetersiz dolgu Buharlaştırıcı en sık karşılaşılan sorunlar değerlendirin.</li>
	<li>Alternatif olarak, aşağıdaki alt adımlarda önerilen entübasyon gerçekleştirin.<ol>
<li>Bir tabloda bir 60 ° açıyla fareyi getirin.</li>
		<li>Fare yapışkan bant ile ekstremite bağlamak ve baş yaslanmak.</li>
		<li>Soğuk ışık kaynağı doğrudan deri gırtlak yukarıda yerleştirin.</li>
		<li>Dil Forseps ile ses telleri görselleştirmek için yavaşça çekin.</li>
		<li>Ses telleri bir IV-kanül (24 G) bir plastik tüp takın ve plastik tüp havalandırma ayarları takın.</li>
		<li>Solunum entübasyon synchrone göğüs hareketleri tarafından onaylamak için kanül bağlayın. Not: solunum hareketleri durmayın veya fareler başlamak dokunaklı, ilk solunum hızı 180 dk başına kadar artırın. İkincil olarak fare nefes kendiliğinden duruncaya kadar gerekirse, isoflurane konsantrasyonu % 3,5 artırın. Sızdırmazlık veya yetersiz dolgu Buharlaştırıcı en olası sorunlar değerlendirin.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. ameliyat öncesi Doppler ölçüm
<ol><li>Her iki Karotid arter Trakea yatıyordu hangi adjunct yavaşça bağ dokusu ayrı Forseps ile çekerek hazırlayın.</li>
	<li>Sağ ve sol Karotis arter 45 ° den küçük bir açı, 20 MHz Doppler sonda bazı steril ultrason jeli ile ucu yerleştirin.</li>
	<li>Yavaş yavaş taşımak için lateral ve medial Doppler sinyali bulmak ve sinyali en iyi duruma getirmek için prob prob döndürün.</li>
	<li>Doppler yazılım akım hızları sağ ve sol ortak Karotid arter bir bilgisayarda depolamak ve görüntülemek için kullanın.</li>
</ol>3. Torakotomi
<ol><li>Steril Eldivenler, tek tek her fare için birtakım cerrahi sitesi enfeksiyonları önlemek için kullanın.</li>
	<li>2nd interkostal alan bir makas ile aşağı cilt kesi genişletin.</li>
	<li>2nd interkostal alan görsel olarak kaburga sayarak tanımlamak ve sonra açık açık bu alanı juatify Forseps ile nüfuz. Not: 1st kaburga köprücük kemiği altında bulunur ve 2nd interkostal alan ilk görünür kaburga (Yani 2nd kaburga) ve 3rd kaburga arasında buldum, çünkü bu nedenle görünür değil.</li>
	<li>2nd interkostal boşluk forseps ipuçları yardımı ile açın ve traktör yerleştirin.</li>
	<li>Timus açık bir görüntülemek için ameliyat masasına bağlı bir lastik bant ekartör ayarlayın.</li>
	<li>Kanama durumunda pamuk ipucu kullanın ve yüzeysel damarları 2 min için tuşuna basın.</li>
</ol>4. bantlama transvers aort
<ol><li>Orta hat ve bağ dokusu tanımlamak için % 200 için büyütme oranını ayarlamak. O zaman açılı forseps yavaşça timus bölmek için kullanın. Aort açıkça görülebilir kadar yağ dokusunda kaldırın.</li>
	<li>Bir tünel ile bağlama forseps (bkz. şekil 1) brachiocephalic arter ile sol ortak Karotid arter arasındaki transvers aort altında açılı hazırlayın. 6.0 dikiş sonu iyi forseps yardımıyla tutun ve aort altında iş parçacığı geçmek.</li>
	<li>Arch diğer taraftan ikinci Forseps ile iplik al.</li>
	<li>İğne olarak kullanmak için bir 27 G 3 mm uzun parça uzunluğu kesilmiş bir TAC-ligasyonu için boşluk ekleyici 19-25 g vücut ağırlığı ve 26 G iğne fareler için ayırıcı olarak Tartım fareler için > 25 g BW.</li>
	<li>Dikkatle spacer transvers aort paralel yer.</li>
	<li>Çıta üzerinde gevşek bir çift düğüm hazırlamak ve spacer paralel aortaya en iyi yerleşim sağlamak. İlk atış kravat ve hızlı bir şekilde ikinci bir aykırı atmak gerçekleştirmek. Rondela derhal kaldırın.</li>
	<li>Sham fare kontrolü için yapmak, aort ligasyonu atlama aynı iletişim kuralını uygulayın.</li>
	<li>2nd interkostal boşluk 6.0 polipropilen sütür ile kapatın. Ne zaman birleştirilmesi (ligasyon) hastalığının damarları özellikle dikkat.</li>
	<li>Deri 6.0 polipropilen sütür bir sürekli dikiş deseni kullanarak dikiş.</li>
</ol>5. onay transvers aort başarılı ligasyonu
<ol><li>Olarak bölümde 2 45 ° açıyla boynun her iki tarafında bir 20 MHz Doppler sondası yerleştirin.</li>
	<li>Her tarafta akım hızları belge. Not: Başarılı bir TAC Şekil 2' de gösterildiği gibi Doppler akım hızı tarafından doğrulanabilir. 4-10 sağ ve sol Karotis arter genellikle arasında bir akış hızı oranı yeterli TAC garanti eder (bkz. Şekil 2).</li>
</ol>6. kalp hasat
<ol><li>Narkoz adımları 1.2 göre neden. ve 1.3.</li>
	<li>Fareyi bir ötenazi odasında getirin ve birim/dakika % 10-30'u yerinden için karbon dioksit akış hızı ayarlayın.</li>
	<li>Fareyi bir ameliyat masasında bağlayacaktın. Daha fazla çözümleme için bir kanül ile inferior vena kava makas ve hasat kan ile karın açın.</li>
	<li>Diyafram ve sternal kemik güçlü makasla kesmek ve kalp kaldırın.</li>
	<li>Tüm arter ve bağ dokusu kalp ağırlığında önce çıkarın.</li>
	<li>Sağ ventrikül ve sol ventrikül septum ayırın ve her iki örnekleri tartın.</li>
	<li>Her iki doku örnekleri sıvı azot dondur.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Tarnavski, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+surgical+models+in+cardiovascular+research.">Mouse surgical models in cardiovascular research.</a> Methods Mol Biol Clifton NJ. 573, 115-137 (2009).</li><li>Tarnavski, O., McMullen, J. R., Schinke, M., Nie, Q., Kong, S., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+cardiac+surgery:+comprehensive+techniques+for+the+generation+of+mouse+models+of+human+diseases+and+their+application+for+genomic+studies.">Mouse cardiac surgery: comprehensive techniques for the generation of mouse models of human diseases and their application for genomic studies.</a> Physiol Genomics. 16 (3), 349-360 (2004).</li><li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy.">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li><li>deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice.">Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> J Vis Exp JoVE. (38), (2010).</li><li>Grossman, W., Jones, D., McLaurin, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wall+stress+and+patterns+of+hypertrophy+in+the+human+left+ventricle.">Wall stress and patterns of hypertrophy in the human left ventricle.</a> J Clin Invest. 56 (1), 56-64 (1975).</li><li>Hartley, C. J., Reddy, A. K., Madala, S., Michael, L. H., Entman, M. L., Taffet, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doppler+estimation+of+reduced+coronary+flow+reserve+in+mice+with+pressure+overload+cardiac+hypertrophy.">Doppler estimation of reduced coronary flow reserve in mice with pressure overload cardiac hypertrophy.</a> Ultrasound Med Biol. 34 (6), 892-901 (2008).</li><li>Reddy, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pulsed+Doppler+signal+processing+for+use+in+mice:+applications.">Pulsed Doppler signal processing for use in mice: applications.</a> IEEE Trans Biomed Eng. 52 (10), 1771-1783 (2005).</li><li>Shioura, K. M., Geenen, D. L., Goldspink, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+cardiac+function+with+the+pressure-volume+conductance+system+following+myocardial+infarction+in+mice.">Assessment of cardiac function with the pressure-volume conductance system following myocardial infarction in mice.</a> Am J Physiol - Heart Circ Physiol. 293 (5), H2870-H2877 (2007).</li><li>Zhang, B., Davis, J. P., Ziolo, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+Catheterization+in+Mice+to+Measure+the+Pressure+Volume+Relationship:+Investigating+the+Bowditch+Effect.">Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect.</a> JoVE J Vis Exp. (100), e52618 (2015).</li><li>Barrick, C. J., Rojas, M., Schoonhoven, R., Smyth, S. S., Threadgill, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiac+response+to+pressure+overload+in+129S1/SvImJ+and+C57BL/6J+mice:+temporal-+and+background-dependent+development+of+concentric+left+ventricular+hypertrophy.">Cardiac response to pressure overload in 129S1/SvImJ and C57BL/6J mice: temporal- and background-dependent development of concentric left ventricular hypertrophy.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 292 (5), H2119-H2130 (2007).</li><li>Patten, R. D., Hall-Porter, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+animal+models+of+heart+failure:+development+of+novel+therapies,+past+and+present.">Small animal models of heart failure: development of novel therapies, past and present.</a> Circ Heart Fail. 2 (2), 138-144 (2009).</li><li>Zaw, A. M., Williams, C. M., Law, H. K. W., Chow, B. K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice.">Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice.</a> J Vis Exp JoVE. (121), (2017).</li><li>Tavakoli, R., Nemska, S., Jamshidi, P., Gassmann, M., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technique+of+Minimally+Invasive+Transverse+Aortic+Constriction+in+Mice+for+Induction+of+Left+Ventricular+Hypertrophy.">Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy.</a> J Vis Exp. (127), (2017).</li><li>Kim, S. -. C., Boehm, O., Meyer, R., Hoeft, A., Kn&#252;fermann, P., Baumgarten, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Closed-chest+Model+of+Myocardial+Ischemia+and+Reperfusion.">A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion.</a> J Vis Exp JoVE. (65), (2012).</li><li>Veldhuizen, R. A., Slutsky, A. S., Joseph, M., McCaig, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+mechanical+ventilation+of+isolated+mouse+lungs+on+surfactant+and+inflammatory+cytokines.">Effects of mechanical ventilation of isolated mouse lungs on surfactant and inflammatory cytokines.</a> Eur Respir J. 17 (3), 488-494 (2001).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Hipertansiyon TAC nedeniyle hızla başlayan klinik hipertrofisi aortik stenoz veya Hipertansiyon neden farklıdır. Yine de, kalp yetmezliği ikna etmek için küçük hayvan modellerinin kullanımı pek çok avantajı vardır ve bu nedenle, birçok müfettişler11tarafından seçilir. Bu kapalı göğüs model cerrahi tekniği fareler4transvers aort daralma ikna etmek için zaten varolan modeller geliştirir.
Aort altında geçiş için en öne...

Fare modelleri genellikle insan hastalıkları1taklit etmek için kullanılır. Transvers aort daralma (TAC) basınç aşırı ikna etmek için kullanılır ve sol ventrikül pituiter2. Açık göğüs TAC modeli farelerde Rockman vd tarafından doğrulandı 3 ve cerrahi işlem DeAlmeida vd tarafından ayrıntılı olarak anlatılan 4. kan dolaşımını daha büyük bir kısmını bu ikinci yordam2olumsuz etkilerini telafi edebilirsiniz çünkü Banding transvers aort abdominal aort daralma ile karşılaştırıldığında daha uygun.
Transvers aort bantlama artan aort ve brachiocephalic arter arter basıncının artması yol açar ama yeterli perfüzyon organlara distal damarlar (Yani sol ortak Karotid arter sol subklavyan bırakır arter ve azalan aort). Bu artan bir kardiyak afterload ve bir yükseltilmiş kalp duvar stres yol açar. Duvar stres daha sonra lif kalınlaşma5nedeniyle azalır. Maladaptation ve sol ventrikül dilatasyonu kardiyak hemodinami sonucu kronik değiştir. Bu şekilde TAC kalp hipertrofisi sonunda kalp yetmezliği için önde gelen bir tekrarlanabilir model oluşturur.
DeAlmeide ve ark. tarafından açıklandığı gibi TAC için Standart prosedür 4 aort diseksiyon ve kaburga veya göğüs kemiği plevral boşluğu yanı sıra mediasten işlenmesi ile kısmi üst Torakotomi ile yaklaşıyor. Bu aort ve yan dalları iyi görebilmek için sağlar. Ne yazık ki, disseke kaburga, hangi onları serbestçe yüzen ve böylece nefes dynamics değiştirmeden bırakır reattached değil.
Biz, bu nedenle, aort yanal bir cerrahi yaklaşım 2nd interkostal boşluk kullanarak bir minimal invazif kapalı-göğüs yaklaşım kurdu. Bu modelin en büyük avantajı kaburga ile bile kesme olmadan TAC gerçekleştirmek için yeteneğidir. Cerrahi travma cilt kesi ve interkostal kaslara diseksiyon ile sınırlıdır. Bu yordam travma kendisini en aza indirir ve yeterli göğüs çalışma düzenini sağlamak için yardımcı olur.
Burada ayrıntılı adım adım bir yordam veya tahmin edilen toplam üst Torakotomi yapılmadan farelerde TAC ameliyatı gerçekleştirmek için açıklar. Yüksek frekans Doppler TAC başarısı daha önce 6,7açıklandığı gibi emin olmak için kullanılmıştır.

<table><tbody><tr><td>Pressure-volume catheter</td><td>Millar Instruments, USA</td><td>SPR-839</td><td></td></tr><tr><td>Mouse ventilator</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Minivent - TYPE 845</td><td></td></tr><tr><td>Mouse ventilator</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Y-connection with intubation cannula OD 1.2mm 73-2844</td><td></td></tr><tr><td>Vaporizer</td><td>Dr&amp;auml;ger Medical AG&amp;amp;CO.KG, Germany</td><td>19.3 Isofluran-Vaporizer (a newer version is available under catalog number&amp;nbsp; D-877-2010)</td><td></td></tr><tr><td>Microscope&amp;nbsp;</td><td>Leica Microsystems, Germany</td><td>MZ 7.5</td><td></td></tr><tr><td>Light source&amp;nbsp;</td><td>Schott AG, Germany</td><td>KL 1500 LCD</td><td></td></tr><tr><td>6-0 Prolene</td><td>Ethicon, USA</td><td>Polypropylene suture BV-1 9.3 mm 3/8c</td><td>suture for surgery</td></tr><tr><td>Seraflex</td><td>Serag Wiessner, Germany</td><td>USP 5/0 schwarz;&amp;nbsp; IC108000&amp;nbsp;</td><td>suture for constriction</td></tr><tr><td>Homoeothermic Controlled Operating Tables</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>Typ 872/3 HT with tripod stand and homoeothermic controller Type 874; 73-4233</td><td></td></tr><tr><td>Flexible Rectal Probe</td><td>Harvard Apparatus GmbH, Germany</td><td>1.6 mm OD; 55-7021</td><td></td></tr><tr><td>Doppler Signal Visualisation Instrument</td><td>Indus Instruments, USA</td><td>Doppler Signal Processing Workstation (DSWP) with 20MHz Pulsed Doppler Module</td><td></td></tr><tr><td>Arruga Intracapsular Forceps</td><td>Altomed, UK</td><td>A5400</td><td></td></tr><tr><td>Doppler Probe</td><td>Indus Instruments, USA</td><td>20MHz Tubing-mounted Probe</td><td></td></tr><tr><td>Jaffe Lid Retractor</td><td>Altomed, UK</td><td>A3513</td><td></td></tr></tbody></table>

a closed-chest model to induce transverse aortic constriction in mice

Araştırma kalp hipertrofisi ve kalp yetmezliği sık TAC tarafından indüklenen basınç aşırı fare modelleri dayanır. Transvers aort görselleştirmek için kısmi Torakotomi gerçekleştirmek için standart bir yöntemdir. Ancak, kaburga disseke ve göğüs kapatma sonra ekli olmayan sol Torakotomi açık-göğüs modelleri nedeniyle cerrahi travma solunum fizyolojisi değiştirir. Bunu önlemek için minimal invaziv, kapalı göğüs yaklaşım lateral Torakotomi ile kurduk. Burada aort 2nd interkostal boşluk göğüs boşluklar, girmeden fareyi kurtarmak için daha az travmatik bir yaralanma ile terk yaklaşırız. Açık göğüs TAC yordamlar ile eşit sağkalım oranları için standart laboratuvar ayarları kullanarak bu işlemi gerçekleştirin. Fizyolojik nefes desenleri kapalı göğüs yaklaşımı nedeniyle Bakımı dışında fareler hızlı bir iyileşme süreci kolaylaştırmak için ve travmadan sonra bağışıklık tepkisini azaltmak için daha az invaziv tekniği göründüğü gibi hızlı iyileşme göstererek yarar gibi görünüyor.

Başarılı bir TAC basınç aşırı yük ve sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon güvence altına alır. Basınç yükünün bir geçici doğrulama Doppler akım hızı ölçüm Şekil 2' de gösterildiği gibi kullanarak elde edilebilir. Ameliyat öncesi kan akım hızı her iki Karotid arterler eşit olsa da, TAC bir artar kan hızı şu Karotid arter sol ventrikül ve aort yüksek basıncı nedeniyle sonrası stenotic zayıflatılmış kan akım hız?...

Watch this Scientific Journal Video about A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice at JoVE.com

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Transvers aort daralma farelerde ikna etmek için kapalı-göğüs manken

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

a-closed-chest-model-to-induce-transverse-aortic-constriction-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

18.8K Görüntüleme.  University Hospital Bonn. Burada, transvers aort daralma (TAC) lateral Torakotomi ile bir protokol mevcut. Bu teknik basınç aşırı yük ve kalp yetmezliği standart TAC laboratuvar ayarları kullanan farelerde benzetimini yapmak için amaçlayan bir minimal invaziv, kapalı göğüs cerrahi işlemdir.

Video: A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

The CYP2D6 Animal Model: How to Induce Autoimmune Hepatitis in Mice

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to generate an animal model that reflects the characteristics of the human disease 3-5. However, in various models the induction of disease was rather complex and often hepatitis was only transient3-5. Therefore, we have developed a straightforward mouse model that uses the major human autoantigen in type 2 autoimmune hepatitis (AIH-2), namely hCYP2D6, as a trigger6. Type 1 liver-kidney microsomal antibodies (LKM-1) antibodies recognizing hCYP2D6 are the hallmark of AIH-27,8. Delivery of hCYP2D6 into wildtype FVB or C57BL/6 mice was by an Adenovirus construct (Ad-2D6) that ensures a direct delivery of the triggering antigen to the liver. Thus, the ensuing local inflammation generates a fertile field9 for the subsequent development of autoimmunity. A combination of intravenous and intraperitoneal injection of Ad-2D6 is the most effective route to induce a long-lasting autoimmune damage to the liver (section 1). Here we provide a detailed protocol on how autoimmune liver disease is induced in the CYP2D6 model and how the different aspects of liver damage can be assessed. First, the serum levels of markers indicating hepatocyte destruction, such as aminotransferases, as well as the titers of hCYP2D6 antibodies are determined by sampling blood retroorbitaly (section 2). Second, the hCYP2D6-specific T cell response is characterized by collecting lymphocytes from the spleen and the liver. In order to obtain pure liver lymphocytes, the livers are perfused by PBS via the portal vein (section 3), digested in collagen and purified over a Percoll gradient (section 4). The frequency of hCYP2D6-specific T cells is analyzed by stimulation with hCYP2D6 peptides and identification of IFN&gamma;-producing cells by flow cytometry (section 5). Third, cellular infiltration and fibrosis is determined by immunohistochemistry of liver sections (section 6). Such analysis regimen has to be conducted at several times after initiation of the disease in order to prove the chronic nature of the model. The magnitude of the immune response characterized by the frequency and activity of hCYP2D6-specific T and/or B cells and the degree of the liver damage and fibrosis have to be assessed for a subsequent evaluation of possible treatments to prevent, delay or abrogate the autodestructive process of the liver.

Infection of mice with an Adenovirus expressing the major human autoantigen cytochrome P450 2D6 (hCYP2D6) recognized by sera of patients suffering from type 2 autoimmune hepatitis results in a persistent form of autoimmune-mediated liver disease characterized by extensive hepatitis, fibrosis and generation of a CYP2D6-specific immune response.

CYP2D6 Hayvan Modeli:, Fare Otoimmün Hepatit indükleyin nasıl

Autoimmune hepatitis is a rare but life threatening autoimmune disease of the liver of unknown etiology1,2. In the past many attempts have been made to ...

Tıp

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ischemia and reperfusion. Immune response includes cytokine expression and release or secretion of endogenous ligands of innate immune receptors. Activation of innate immunity can potentially modulate infarct size. We have modified an existing murine closed-chest model using hanging weights which could be useful for studying myocardial pre- and postconditioning and the role of innate immunity in myocardial ischemia and reperfusion. This model allows animals to recover from surgical trauma before onset of myocardial ischemia.
Volatile anesthetics have been intensely studied and their preconditioning effect for the ischemic heart is well known. However, this protective effect precludes its use in open chest models of coronary artery ligation. Thus, another advantage could be the use of the well controllable volatile anesthetics for instrumentation in a chronic closed-chest model, since their preconditioning effect lasts up to 72 hours. Chronic heart diseases with intermittent ischemia and multiple hit models are other possible applications of this model.
For the chronic closed-chest model, intubated and ventilated mice undergo a lateral blunt thoracotomy via the 4th intercostal space. Following identification of the left anterior descending a ligature is passed underneath the vessel and both suture ends are threaded through an occluder. Then, both suture ends are passed through the chest wall, knotted to form a loop and left in the subcutaneous tissue. After chest closure and recovery for 5 days, mice are anesthetized again, chest skin is reopened and hanging weights are hooked up to the loop under ECG control.
At the end of the ischemia/reperfusion protocol, hearts can be stained with TTC for infarct size assessment or undergo perfusion fixation to allow morphometric studies in addition to histology and immunohistochemistry.

Surgical trauma induces an inflammatory response. Cytokines and endogenous ligands are known to modulate myocardial infarct size following ischemia and reperfusion. We present a modified closed-chest model of murine ischemia and reperfusion using hanging weights to minimize effects of thoracotomy.

Miyokard İskemi ve Reperfüzyon bir Mürin Kapalı göğüs Modeli

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Transverse Aortic Constriction in Mice

Transverse aortic constriction (TAC) in the mouse is a commonly used experimental model for pressure overload-induced cardiac hypertrophy and heart failure.1 TAC initially leads to compensated hypertrophy of the heart, which often is associated with a temporary enhancement of cardiac contractility. Over time, however, the response to the chronic hemodynamic overload becomes maladaptive, resulting in cardiac dilatation and heart failure.2 The murine TAC model was first validated by Rockman et al.1, and has since been extensively used as a valuable tool to mimic human cardiovascular diseases and elucidate fundamental signaling processes involved in the cardiac hypertrophic response and heart failure development. When compared to other experimental models of heart failure, such as complete occlusion of the left anterior descending (LAD) coronary artery, TAC provides a more reproducible model of cardiac hypertrophy and a more gradual time course in the development of heart failure. Here, we describe a step-by-step procedure to perform surgical TAC in mice. To determine the level of pressure overload produced by the aortic ligation, a high frequency Doppler probe is used to measure the ratio between blood flow velocities in the right and left carotid arteries.3, 4 With surgical survival rates of 80-90%, transverse aortic banding is an effective technique of inducing left ventricular hypertrophy and heart failure in mice.

Transverse aortic constriction (TAC) in the mouse is a commonly used experimental model to study mechanisms underlying cardiac hypertrophy and heart failure development. Here, we describe procedures to constrict the aorta to create a reproducible degree of cardiac hypertrophy in mice.

Farelerde Enine Aort Konstrüksiyon

Transverse aortic constriction (TAC) in the mouse is a commonly used experimental model for pressure overload-induced cardiac hypertrophy and heart ...

Biyoloji

Assessment of Cardiac Morphological and Functional Changes in Mouse Model of Transverse Aortic Constriction by Echocardiographic Imaging

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable noninvasive method is essential to assess real-time cardiac morphological and functional changes in animal models of heart disease. Transthoracic echocardiography represents an important tool for noninvasive assessment of cardiac structure and function2. Here we used a high-resolution ultrasound imaging system to monitor myocardial remodeling and heart failure progression over time in a mouse model of TAC. B-mode, M-mode, and Doppler imaging were used to precisely assess cardiac hypertrophy, ventricular dilatation, and functional deterioration in mice following TAC. Color and pulse wave (PW) Doppler imaging was used to noninvasively measure pressure gradient across the aortic constriction created by TAC and to assess transmitral blood flow in mice. Thus transthoracic echocardiographic imaging provides comprehensive noninvasive measurements of cardiac dimensions and function in mouse models of heart disease.

The goal of this protocol is to noninvasively assess cardiac structural and functional changes in a mouse model of heart disease created by transverse aortic constriction, using B- and M-mode echocardiography and color/pulse wave Doppler imaging.

Ekokardiyografik Imaging tarafından Enine Aort Konstrüksiyon Mouse Modeli Kardiyak Morfolojik Değerlendirilmesi ve Fonksiyonel Değişiklikler

Transverse aortic constriction (TAC) in mice has been used as a valuable model to study mechanisms of cardiac hypertrophy and heart failure1. A reliable ...

Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard open-chest transverse aortic constriction (TAC). Although transverse aortic constriction is a highly functional method for the induction of high pressure in the left ventricle, it is a more difficult and lengthy procedure due to its use of artificial ventilation with tracheal intubation. TAC is oftentimes also less survivable, as the newer method, MTAC, neither requires the cutting of the ribs and intercostal muscles nor tracheal intubation with a ventilation setup. In MTAC, as opposed to a thoracotomy to access to the chest cavity, the aortic arch is reached through a midline incision in the anterior neck. The thyroid is pulled back to reveal the sternal notch. The sternum is subsequently cut down to the second rib level, and the aortic arch is reached simply by separating the connective tissues and thymus. From there, a suture can be wrapped around the arch and tied with a spacer, and then the sternal cut and skin can be closed. MTAC is a much faster and less invasive way to induce left ventricular hypertension and enables the possibility for high-throughput studies. The success of the constriction can be verified using high-frequency trans-thoracic echocardiography, particularly color Doppler and pulsed-wave Doppler, to determine the flow velocities of the aortic arch and left and right carotid arteries, the dimension of the blood vessels, and the left ventricular function and morphology. A successful constriction will also trigger significant histopathological changes, such as cardiac muscle cell hypertrophy with interstitial and perivascular fibrosis. Here, the procedure of MTAC is described, demonstrating how the resulting flow changes in the carotid arteries can be examined with echocardiography, gross morphology, and histopathological changes in the heart.

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) conserves the essentials of regular transverse aortic constriction (TAC) while eliminating the use of a ventilator with tracheal intubation. It proves to be a highly desirable method for high-throughput studies on left ventricular overload, particularly in translational studies.

Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Minimally invasive transverse aortic constriction (MTAC) is a more desirable method for the constriction of the transverse aorta in mice than standard ...

Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure overload-induced left ventricular hypertrophy (LVH) and its progression to heart failure. In the majority of the reported investigations, this procedure is performed with intubation and ventilation of the animal which renders it demanding and time-consuming and adds to the surgical burden to the animal. The aim of this protocol is to describe a simplified technique of minimally invasive TAC without intubation and ventilation of mice. Critical steps of the technique are emphasized in order to achieve low mortality and high efficiency in inducing LVH.
Male C57BL/6 mice (10-week-old, 25-30 g, n=60) were anesthetized with a single intraperitoneal injection of a mixture of ketamine and xylazine. In a spontaneously breathing animal following a 3-4 mm upper partial sternotomy, a segment of 6/0 silk suture threaded through the eye of a ligation aid was passed under the aortic arch and tied over a blunted 27-gauge needle. Sham-operated animals underwent the same surgical preparation but without aortic constriction. The efficacy of the procedure in inducing LVH is attested by a significant increase in the heart/body weight ratio. This ratio is obtained at days 3, 7, 14 and 28 after surgery (n = 6 - 10 in each group and each time point). Using our technique, LVH is observed in TAC compared to sham animals from day 7 through day 28. Operative and late (over 28 days) mortalities are both very low at 1.7%.
In conclusion, our cost-effective technique of minimally invasive TAC in mice carries very low operative and post-operative mortalities and is highly efficient in inducing LVH. It simplifies the operative procedure and reduces the strain put on the animal. It can be easily performed by following the critical steps described in this protocol.

The aim of this protocol is to describe step-by-step the technique of minimally invasive transverse aortic constriction (TAC) in mice. By elimination of intubation and ventilation which are mandatory for the commonly used standard procedure, minimally invasive TAC simplifies the operative procedure and reduces the strain put on the animal.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

Studying Left Ventricular Reverse Remodeling by Aortic Debanding in Rodents

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, mice undergo RR upon removal of the aortic constriction. In this paper, we describe a step-by-step procedure to perform a minimally invasive surgical aortic debanding in mice. Echocardiography was subsequently used to assess the degree of cardiac hypertrophy and dysfunction during LV remodeling and RR and to determine the best timing for aortic debanding. At the end of the protocol, terminal hemodynamic evaluation of the cardiac function was conducted, and samples were collected for histological studies. We showed that debanding is associated with surgical survival rates of 70-80%. Moreover, two weeks after debanding, the significant reduction of ventricular afterload triggers the regression of ventricular hypertrophy (~20%) and fibrosis (~26%), recovery of diastolic dysfunction as assessed by the normalization of left ventricular filling and end-diastolic pressures (E/e&#39;&#160;and LVEDP). Aortic debanding is a useful experimental model to study LV RR in rodents. The extent of myocardial recovery is variable between subjects, therefore, mimicking the diversity of RR that occurs in the clinical context, such as aortic valve replacement. We conclude that the aortic banding/debanding model represents a valuable tool to unravel novel insights into the mechanisms of RR, namely the regression of cardiac hypertrophy and the recovery of diastolic dysfunction.

Here we describe a step-by-step protocol of surgical aorta debanding in the well-established mice model of aortic-constriction. This procedure not only allows studying the mechanisms underlying the left ventricular reverse remodeling and regression of hypertrophy but also to test novel therapeutic options that might accelerate myocardial recovery.

Kemirgenlerde Aort Debanding tarafından Sol Ventrikül Ters Tadilatı Eğitimi

To better understand the left ventricular (LV) reverse remodeling (RR), we describe a rodent model wherein, after aortic banding-induced LV remodeling, ...

Operating Transverse Aortic Constriction with Absorbable Suture to Obtain Transient Myocardial Hypertrophy

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate cardiomyocyte hypertrophy and slow down progression to heart failure. For novices, however, the MHP model is usually quite difficult to establish because of the technical obstacles in ventilator operation, opening the chest repeatedly, and bleeding caused by debanding. To facilitate this model, to increase the surgical success rate and to reduce the incidence of bleeding, we switched to absorbable sutures for the first TAC combing with a ventilator-free technique. Using a 2-week absorbable suture, we demonstrated that this procedure could cause significant myocardial hypertrophy in 2 weeks; and 4 weeks after surgery, myocardial hypertrophy was almost completely regressed to the baseline. Using this protocol, the operators could master the MHP model easily with a lower operation mortality.

This protocol presents an improved method to obtain transient myocardial hypertrophy with absorbable suture, simulating left ventricular hypertrophy decrease after removing pressure overload. It could be valuable for the studies on myocardial hypertrophic preconditioning.

Geçici Miyokard Hipertrofisi Elde Etmek için Emilebilir Dikiş ile Enine Aort Daralmasını Çalıştırma

Based on twice transverse aortic constrictions (TACs) in mice, it is proved that myocardial hypertrophic preconditioning (MHP) could attenuate ...

A Modified Technique for Transverse Aortic Constriction in Mice

Transverse aortic constriction (TAC) is a frequently used surgery in research regarding heart failure and cardiac hypertrophy based on the formation of pressure overload in mouse models. The main challenge of this procedure is to clearly visualize the transverse aortic arch and precisely band the target vessel. Classical approaches perform a partial thoracotomy to expose the transverse aortic arch. However, it is an open-chest model that causes a rather large surgical trauma and requires a ventilator during the surgery. To prevent unnecessary trauma and simplify the operating procedure, the aortic arch is approached via the proximal proportion of the sternum, reaching and binding the target vessel using a small self-made retractor that contains a snare. This procedure can be conducted without entering the pleura cavity and does not need a ventilator or microsurgical operation, which leaves the mice with physiological breathing patterns, simplifies the procedure, and significantly reduces operation time. Due to the less invasive approach and less operation time, mice can undergo fewer stress reactions and recover rapidly.

The present protocol describes a modified and simplified technique with a minimally invasive transverse aortic constriction (TAC) procedure using a self-made retractor. This procedure can be conducted without a ventilator or microscope and introduces pressure overload, eventually leading to cardiac hypertrophy or heart failure.

Farelerde Transvers Aort Daralması için Modifiye Bir Teknik

Transverse aortic constriction (TAC) is a frequently used surgery in research regarding heart failure and cardiac hypertrophy based on the formation of ...

Transverse Aortic Arch Banding in Mouse Model: A Minimally Invasive Technique in Mice for Induction of High Pressure in the Left Ventricle

Source: Zaw, A. M. et al. <a href="https://www.jove.com/video/55293" target="_blank">Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice</a>. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate an experimental protocol for minimally invasive transverse aortic constriction in mice to examine pressure overload-induced heart failure.

Fare Modelinde Transvers Aort Ark Bantlaması: Sol Ventrikülde Yüksek Basıncın İndüksiyonu için Farelerde Minimal İnvaziv Bir Teknik

Source: Zaw, A. M. et al. Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate an experimental ...