Yazarlar Universidad Católica de Valencia San Vicente Mártir bu çalışma sayesinde 2017-231-001UCV için finansal destek için kabul etmek istiyorum ve 2018-231-001UCV verir.

1. numune hazırlama
<ol><li>Malzeme örnekleri 10 mm çaplı diskler 10 mm çapında silindirik yumruk kesilmiş. Not: Kırılgan malzeme uygun steril çözücüler, 1 h için yumuşadı ve sonra diskleri kesti. Örneğin, çinko aljinat gibi hidrofilik maddeler bu protokol sonrası test edildi ve autoclaved suda örnek kırma önlemek için kesmeden önce ıslatılmış. Ancak, poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi hidrofobik diğer malzemeler her türlü düzgün kesilmiş olduğu için önceki şişme gerek yoktur.</li>
	<li>Örnek malzeme diskleri bir vakum fırında 60 ° C'de kuru (< 10-2 Torr) 24 h için. Not: Bazı materyaller yüksek kurutma sıcaklığı gerekebilir. Ancak, Termal malzeme aşağılamak bir sıcaklık ulaşamadığı önemlidir.</li>
	<li>Dijital kumpas ile malzeme film kalınlıkları ölçmek. Not: Bu iletişim kuralı kullanımı sürekli ve benzer kalınlıkları ile malzeme filmlerin Antimikrobiyal aktivite farklı malzemelerin karşılaştırırken önerir.</li>
	<li>Her numune etanol %70 10 dk ve sonraki ultraviyole (UV) radyasyon her yan başına 1 h için daldırma tarafından sterilize. Not: UV radyasyon UV-C radyasyon bir 12,0 W lamba ile steril Petri kabına bir laminar akış başlık içinde her numune yerleştirerek gerçekleştirilir. Dikkat: çünkü mutajenik araştırmacılar kendilerini UV radyasyon için açığa değil.</li>
	<li>1.1, 1.2, 1.3 ve 1.4 adımları gerçekleştirin. Denetim malzeme disklerle. Not: Denetim diskleri difüzyon ve iletişim yöntemi olarak polietilen tereftalat (PET) veya alternatif sigara antimikrobiyal malzemeler kullanılabilir. Ayrıca, nanokompozitlerin veya işlem görmüş malzemeler karakterize, ana malzeme kontrol malzemesi olarak kullanılmalıdır.</li>
</ol>2. tavsiye edilen mikroorganizmalar
Not: Çok çeşitli mikroorganizmalar karşı test edilmiş malzeme antimikrobiyal kapasite çalışmaya 3 farklı mikroorganizmalar kullanımı önerilir.
<ol><li>3 mikroorganizmaları saf kültürler: gram-pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia colive Maya Candida albicans. Not: Diğer mikroorganizma türler de bu iletişim kuralıyla kuluçka koşulları gerekirse değiştirerek test edilebilir. Dikkat: Bu protokol için istihdam Mikroorganizma tipine göre gerekli Biyogüvenlik ölçümleri izlenmesi gerekir.</li>
	<li>Önceden steril veya autoclaved malzeme ile çalışabilir ve Bunsen burner mikrobiyal manipülasyon veya biyolojik güvenlik kabini bütün işlemi sırasında (gerekirse) aseptik koşullar sağlamak için; Not: Önerilen otoklav 121 ° C 15dk sırasında kültür ortamlar için ve 121 ° C çalışma malzeme ve biyolojik artıkları için 20 min sırasında koşullardır.</li>
</ol>3. agar Disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi)
Not: bir sıvı difüzyon antimikrobiyal bileşiklerin ileri düzey malzemeler ana antimikrobiyal mekanizması olabilir durumlarda difüzyon yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Agar plaka merkezinde bulunan malzeme diske mikroorganizmaların büyüme inhibisyonu sonra 24 h kültürünün oluştuğu bir şeffaf halka bölgesi (halo) oluşabilir (bkz. Şekil 1).
<ol><li>
Difüzyon testi prosedürü
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya agar (TSA) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>TSA steril Petri yemekler Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak aseptik koşullar altında içine dökün. Not: TSA plakaları 4-6 mm kalınlığında olmalıdır.</li>
		<li>TSA ile 18-24 h 37 ° C'de bir kuluçka-Petri yemeklerinde tükenmesiyle için test edilecek farklı mikroorganizmalar kültür</li>
		<li>Hazırlama ve otoklav tryptic soya suyu (TSB) üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Kimden adım 3.1.3 25 mL steril pamuklu çubukla ve girdap kullanarak bir steril santrifüj tüpü bulunan TSB birkaç koloniler resuspend onları karıştırma bir üniforma elde etmek 1 dakika.</li>
		<li>Absorbans ayarlamak (vasıl 540 nm) ile spektrofotometre birimleri (CFU) mL oluşturan colony uygun sayıda kültürünün: yaklaşık 1.5 x 108 CFU/mL 1 x 106 -5 x 106 CFU/mL için mantar ve bakteri için. Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Girdap mikroorganizma dağılım geliştirmek ve kısaca bu mikrobiyal süspansiyon steril pamuklu çubukla daldırın için 5 saniye için mikrobiyal suyu. Sıvı fazlalığı kültür içeren tüp duvara basarak çubukla kaldırın.</li>
		<li>Mikrobiyal suyu süspansiyon ile steril pamuklu çubukla tüm yüzeyini mikroorganizma ile kapak ve 5 min için aşı sonra kuruması için 3 uçak TSA levha yüzeyine eşit olarak çizgi. Not: herhangi bir nem kaldırmak için TSA plakaları 10-15 dk önce aşılama için 37 ° C'de ters bir pozisyonda açık yerleştirilmesi gerekir.</li>
		<li>Onları bir ölçek etanol ile % 96 çeker ve sonra onları yanan Bunsen brülör veya alkol yazıcı ile bir çift cımbız sterilize.</li>
		<li>Test edilecek ve disk steril Cımbız kullanarak TSA plakaları ortasındaki denetlemek için örnek diskleri yerleştirebilirsiniz.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA tabak 24 h 37 ° C'de ters bir pozisyonda kuluçkaya. Not: herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için bu ters bir pozisyonda TSA plakaları kuluçkaya için tavsiye edilir. Örnek disk TSA plakaları ayırır, ancak, bu adım ters bir pozisyonda gerçekleştirme. Bu durumda, bu tabakalar laminar akış başlıklı kuru için tavsiye edilir. Bu antimikrobiyal test tekrarlanabilirlik sağlamak için farklı günlerde en az quadriplicate içinde gerçekleştirilmelidir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal süspansiyon konsantrasyon ve saflık denetleme Not: Adım 3.1.7'Spektrofotometre ile belirlenen mikrobiyal konsantrasyon doğru olup olmadığını denetleyin ve mikrobiyal hiçbir çevresel bulaşma olduğunu emin olmak için aşağıdaki adımlar gereklidir. Mikrobiyal çevresel kirlenme mikrobiyal kolonileri çeşitli görünüm kültürünün 24 saat sonra tarafından kolayca tespit edilebilir. Ayrıca, Tekerlekli sandalye basketbolu orta yok mikrobiyal kirlenme ondalık seri dilutions onun manipülasyon sırasında bir negatif TSB kontrol plaka ile sağlanmış olur gerekir.<ol>
<li>(Adım 3.1.4 hazır) steril TSB aseptik şartlarda uygun autoclaved ipuçları ile bir micropipette kullanarak steril microcentrifuge tüpler içine dağıtmak. Bir tanesi bir negatif TSB kontrol kullanılacaktır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions adım 3.1.9 TSB içeren steril microcentrifuge tüpler'de kullanılan mikrobiyal suyu süspansiyon ile gerçekleştirin.</li>
		<li>Her seyreltme önceden sterilize Drigalski spatula ya da alternatif bir araç kullanarak TSA plakalar üzerinde 100 µL yayıldı. Ayrıca TSB orta 100 μL mikroorganizma (3.2.1. adımda hazırlanan) bir TSA plaka üzerinde olmadan bir negatif TSB kontrol plaka yayıldı.</li>
		<li>Tükenmesiyle TSA plakaları tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler CFU/mL 3.1.7. adımda belirlenen benzer kontrol etmek saymak.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal çevresel kirlenme ile tek tip kolonileri bir TSA tabaklarda olduğunu kontrol edin.</li>
		<li>Hiçbir mikrobiyal kirlenme yok kolonileri gösterilen TSB negatif kontrol plaka üzerinde olup olmadığını kontrol edin</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi) üzerinde antimikrobiyal aktivitesi ölçümü
 Not: Ana antimikrobiyal mekanizması gelişmiş bazı malzemelerin yüzey temas olabilir durumlarda iletişim yöntemi bu malzemelerin antimikrobiyal kapasitesi hakkında çok yararlı bilgiler sağlayabilir. Bu yöntemde, mikroorganizmaların doğrudan malzeme yüzeyine yerleştirilir ve onların büyüme inhibisyon belirli bir miktar sonra belirlenebilir.
<ol><li>
İlk yordam
	<ol>
<li>Hazırlama ve otoklav TSB üreticinin yönergeleri izleyin.</li>
		<li>Tekerlekli sandalye basketbolu aseptik şartlarda Bunsen brülör veya laminar akış kukuIeta kullanarak önceden sterilize edilmiş serolojik pipet ile 50 mL önceden sterilize santrifüj tüpü dökmek.</li>
		<li>Tükenmesiyle test edilecek farklı mikroorganizmalar tüp TSB bir orbital Shaker (140 devir/dakika) ile 37 ° C'de bir gecede kültür</li>
		<li>Gecede kültür TSB 20 ml 50 mL önceden sterilize santrifüj tüp için yaklaşık 10 bir konsantrasyon içinde seyreltik6 CFU/mL (540, Spektrofotometre ile belirlenen nm). Not: Kültür ve küvet birimleri absorbans ölçmek için kullanılan spektrofotometre, türüne göre seçilmelidir.</li>
		<li>Bu kültürün ondalık seri dilutions TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirin. 100 µL TSA plakaları kültürünün yayılı ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Koloniler yaklaşık 1 x 106 CFU/mL bir ilk hücre konsantrasyonu sağlamak için sayma</li>
		<li>Sonra 24 saat ve 24 saat steril 48-şey plaka kuyu ayıran sonra mikrobiyal sayım için test edilmiş malzemelerin her türdeki 4 örnek diskleri mikrobiyal sayım için denetim diskler yer 4.</li>
		<li>Her disk yüzeyine mikrobiyal süspansiyon 150 µL pipet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Mikrobiyal kontrol ve test malzemeleri (24 saat sonra) sayma
	<ol>
<li>4.1.6 adımdan sonra tükenmesiyle 24 h 37 ° C'de 48-şey tabak içinde kalan 4 örnek diskleri kuluçkaya. Not: Bu 24 h kuluçka süresi daha kısa veya daha uzun zaman Büyüme inhibisyon çalışma için değiştirilebilir.</li>
		<li>24 h, kuluçka sonra 4 örnek disk yüzeyine steril PBS 850 µL pipet ve mikrobiyal süspansiyon 150 µL ile karıştırın.</li>
		<li>PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk 48-şey plaka toplamak ve bir 10 mL önceden steril tüp aktarabilirsiniz.</li>
		<li>Girdap PBS/mikrobiyal süspansiyon karışımı ve her disk için 1 dk, solüsyon içeren temizleyicide bu 50 Hz'de 5 min ve girdap bu hiç uygun mikroorganizmalar kalmasını sağlamak 1 dk için tekrar malzeme yüzeye yapıştırılır.</li>
		<li>Ondalık seri dilutions her sonicated kültür TSB içeren steril microcentrifuge tüplerde gerçekleştirmek ve TSA plakaları kültürünün 100 µL yaymak ve tükenmesiyle 37 ° C'de 24 h için kuluçkaya.</li>
		<li>Her örnek ve kontrol disk yüzeyi uygun mikroorganizmalar vardır kolonileri saymak. (CFU/ml) hücrelerin bu sayıda hızlı.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür örnek ve denetim diskler için bir fotoğraf çekmek.</li>
	</ol>
</li>
</ol>5. antimikrobiyal sonuçları analiz
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig1.jpg"> Şekil 1: antimikrobiyal "halo" normalleştirilmiş genişliği ölçülerini. Bu panel inhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
<ol><li>
Difüzyon yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Disk çapı (d) ve (dız) inhibisyon bölgesinin çapı ölçmek (bkz. Şekil 1) bir dijital kumpas ile. Not: İnhibisyon bölge veya antimikrobiyal "halo" antimikrobiyal malzeme disk tarafından üretilen mikrobiyal Büyüme inhibisyon sonucu olarak oluşturulur (bkz. Şekil 1). Nerede mikroorganizmaların büyümüş düzgün bir şeffaf halka bölgeyi kapatmak için örnek plaka kalanı ile karşılaştırıldığında gözlemlemek mümkündür (opak bölge).</li>
		<li>Denklem (1) uygulayarak antimikrobiyal "halo" in her yuvarlak yüzey (Batıhalo) normalleştirilmiş genişliğini belirler. (1)<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq1.jpg">
</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek "belirlenen antimikrobiyal halo" 4 KBhalo değerleri normalleştirilmiş genişliği belirleyin.</li>
		<li>Son mikrobiyal kültür malzemesi disk ile bir fotoğraf çekmek. Not: İnhibisyon bölge (dız) çapı ve disk çapı (d) Ayrıca uygun bir görüntü işleme yazılımı kullanarak 5.1.4. adımda alınan fotoğraf üzerinden ölçülebilir.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
İletişim yöntemi sonuçları analiz
	<ol>
<li>Denklem (2) göre kurtarıldı canlı mikroorganizmaların sayısını belirleyin. (2)<img alt="Equation 2" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq2.jpg"> Not: Burada, N uygun mikroorganizmalar cm testi numune2 başına kurtarılan sayısıdır; C plaka sayısıdır; D seyreltme faktörü olduğunu; A örnek disk çapı ile belirlenen cm2 testi numune yüzey alanı olduğunu.</li>
		<li>Denklem (3) uygulayarak hücre büyüme inhibisyonu yansıtacak şekilde canlılık (LV) kaybı belirler. (3)<img alt="Equation 3" src="/files/ftp_upload/57710/57710eq3v3.jpg"> Not: C uygun mikroorganizmalar (N) ortalama sayısı CFU/mL•cm2kontrol örnekler 24 saat sonra kurtarılan, burada; S uygun mikroorganizmalar (N) CFU/mL•cm2testi numune 24 saat sonra kurtarılan, sayısıdır.</li>
		<li>Ortalama ve standart sapma her örnek 4 kararlı LV(%) değerleri ile canlılık kaybı belirler.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol>
	<li>Sydnor, E. R. M., Perl, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hospital+epidemiology+and+infection+control+in+acute-care+settings.">Hospital epidemiology and infection control in acute-care settings.</a> Clin Microbiol Rev. 24 (1), 141-173 (2011).</li><li>Chessa, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staphylococcus+aureus+and+Staphylococcus+epidermidis+Virulence+Strains+as+Causative+Agents+of+Persistent+Infections+in+Breast+Implants.">Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis Virulence Strains as Causative Agents of Persistent Infections in Breast Implants.</a> PLoS One. 11 (1), e0146668 (2016).</li><li>Pandey, H., Parashar, V., Parashar, R., Prakash, R., Ramteke, P. W., Pandey, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+drug+release+characteristics+and+enhanced+antibacterial+effect+of+graphene+nanosheets+containing+gentamicin+sulfate.">Controlled drug release characteristics and enhanced antibacterial effect of graphene nanosheets containing gentamicin sulfate.</a> Nanoscale. 3 (10), 4104 (2011).</li><li>Jia, Z., Shen, D., Xu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+and+antibacterial+activities+of+quaternary+ammonium+salt+of+chitosan.">Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan.</a> Carbohydr Res. 333 (1), 1-6 (2001).</li><li>Liu, Y., Wang, X., Yang, F., Yang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Excellent+antimicrobial+properties+of+mesoporous+anatase+TiO2+and+Ag/TiO2+composite+films.">Excellent antimicrobial properties of mesoporous anatase TiO2 and Ag/TiO2 composite films.</a> Microporous Mesoporous Mater. 114 (1-3), 431-439 (2008).</li><li>Wang, L., Chen, J., Shi, L., Shi, Z., Ren, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+promotion+of+antimicrobial+activity+on+silicon+substrates+using+a+&amp;#34;click&amp;#34;+immobilized+short+peptide.">The promotion of antimicrobial activity on silicon substrates using a &amp;#34;click&amp;#34; immobilized short peptide.</a> Chem Commun (Camb). 50 (8), 975-977 (2014).</li><li>K&#252;mmerer, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resistance+in+the+environment.">Resistance in the environment.</a> J Antimicrob Chemother. 54 (2), 311-320 (2004).</li><li>Ng, V. W. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+hydrogels:+A+new+weapon+in+the+arsenal+against+multidrug-resistant+infections.">Antimicrobial hydrogels: A new weapon in the arsenal against multidrug-resistant infections.</a> Adv Drug Deliv Rev. 78, 46-62 (2014).</li><li>Hegstad, K., Langsrud, S., Lunestad, B. T., Scheie, A. A., Sunde, M., Yazdankhah, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+the+Wide+Use+of+Quaternary+Ammonium+Compounds+Enhance+the+Selection+and+Spread+of+Antimicrobial+Resistance+and+Thus+Threaten+Our+Health?.">Does the Wide Use of Quaternary Ammonium Compounds Enhance the Selection and Spread of Antimicrobial Resistance and Thus Threaten Our Health?.</a> Microb Drug Resist. 16 (2), 91-104 (2010).</li><li>Rana, D., Matsuura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+modifications+for+antifouling+membranes.">Surface modifications for antifouling membranes.</a> Chem Rev. 110 (4), 2448-2471 (2010).</li><li>Lok, C. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proteomic+analysis+of+the+mode+of+antibacterial+action+of+silver+nanoparticles.">Proteomic analysis of the mode of antibacterial action of silver nanoparticles.</a> J Proteome Res. 5 (4), 916-924 (2006).</li><li>Chen, X., Schluesener, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanosilver:+A+nanoproduct+in+medical+application.">Nanosilver: A nanoproduct in medical application.</a> Toxicol Lett. 176 (1), 1-12 (2008).</li><li>Ahamed, M., AlSalhi, M. S., Siddiqui, M. K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Silver+nanoparticle+applications+and+human+health.">Silver nanoparticle applications and human health.</a> Clin Chim Acta. 411 (23-24), 1841-1848 (2010).</li><li>Yeaman, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+Antimicrobial+Peptide+Action+and+Resistance.">Mechanisms of Antimicrobial Peptide Action and Resistance.</a> Pharmacol Rev. 55 (1), 27-55 (2003).</li><li>McLean, D. T. F., Lundy, F. T., Timson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IQ-motif+peptides+as+novel+anti-microbial+agents.">IQ-motif peptides as novel anti-microbial agents.</a> Biochimie. 95 (4), 875-880 (2013).</li><li>Brogden, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+peptides:+Pore+formers+or+metabolic+inhibitors+in+bacteria?.">Antimicrobial peptides: Pore formers or metabolic inhibitors in bacteria?.</a> Nat Rev Microbiol. 3 (3), 238-250 (2005).</li><li>Ghosh, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Small+molecular+antibacterial+peptoid+mimics:+The+simpler+the+better!.">Small molecular antibacterial peptoid mimics: The simpler the better!.</a> J Med Chem. 57 (4), 1428-1436 (2014).</li><li>Chongsiriwatana, N. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peptoids+that+mimic+the+structure,+function,+and+mechanism+of+helical+antimicrobial+peptides.">Peptoids that mimic the structure, function, and mechanism of helical antimicrobial peptides.</a> Proc Natl Acad Sci. 105 (8), 2794-2799 (2008).</li><li>Chen, Y., Mant, C. T., Farmer, S. W., Hancock, R. E. W., Vasil, M. L., Hodges, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rational+design+of+alpha-helical+antimicrobial+peptides+with+enhanced+activities+and+specificity/therapeutic+index.">Rational design of alpha-helical antimicrobial peptides with enhanced activities and specificity/therapeutic index.</a> J Biol Chem. 280 (13), 12316-12329 (2005).</li><li>Porter, E. A., Wang, X., Lee, H. S., Weisblum, B., Gellman, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-haemolytic+beta-aminoacid+oligomers.">Non-haemolytic beta-aminoacid oligomers.</a> Nature. 404 (6778), 565 (2000).</li><li>Gao, Q., Li, P., Zhao, H., Chen, Y., Jiang, L., Ma, P. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Methacrylate-ended+Polypeptides+and+Polypeptoids+for+Antimicrobial+and+Antifouling+Coatings.">Methacrylate-ended Polypeptides and Polypeptoids for Antimicrobial and Antifouling Coatings.</a> Polym Chem. 8 (41), 6386-6397 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M., Vidaurre-Garayo, A., Suay-Ant&#243;n, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterisation+of+macroporous+poly(methyl+methacrylate)+coated+with+plasma-polymerised+poly(2-hydroxyethyl+acrylate).">Characterisation of macroporous poly(methyl methacrylate) coated with plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate).</a> Eur Polym J. 43 (10), 4552-4564 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma-induced+polymerisation+of+hydrophilic+coatings+onto+macroporous+hydrophobic+scaffolds.">Plasma-induced polymerisation of hydrophilic coatings onto macroporous hydrophobic scaffolds.</a> Polymer (Guildf). 48 (7), 2071-2078 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Rault, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thermal+analysis+of+water+in+reinforced+plasma-polymerised+poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Thermal analysis of water in reinforced plasma-polymerised poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Eur Polym J. 72, 523-534 (2015).</li><li>Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Gallego-Ferrer, G., SuayAnt&#243;n, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interaction+between+water+and+polymer+chains+in+poly(hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Interaction between water and polymer chains in poly(hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Colloid Polym Sci. 279 (4), 323-330 (2001).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+crosslinking+on+porous+poly(methyl+methacrylate)+produced+by+phase+separation.">Effect of crosslinking on porous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation.</a> Colloid Polym Sci. 286 (2), 209-216 (2008).</li><li>Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Gallego Ferrer, G., Suay Ant&#243;n, J., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+poly+(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels.">Porous poly (2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels.</a> Polymer (Guildf). 42 (10), 4667-4674 (2001).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Monle&#243;n-Pradas, M., G&#243;mez-Ribelles, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macroporous+poly(methyl+methacrylate)+produced+by+phase+separation+during+polymerisation+in+solution.">Macroporous poly(methyl methacrylate) produced by phase separation during polymerisation in solution.</a> Colloid Polym Sci. 285 (7), 753-760 (2007).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Llorens-G&#225;mez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+mechanical+analysis+and+water+vapour+sorption+of+highly+porous+poly(methyl+methacrylate).">Dynamic mechanical analysis and water vapour sorption of highly porous poly(methyl methacrylate).</a> Polymer (Guildf). 125, 58-65 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Campillo-Fern&#225;ndez, A. J., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M., Gallego-Ferrer, G., Pissis, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Porous+poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels+prepared+by+radical+polymerisation+with+methanol+as+diluent.">Porous poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels prepared by radical polymerisation with methanol as diluent.</a> Polymer (Guildf). 45 (26), 8949-8955 (2004).</li><li>Rodr&#237;guez-Hern&#225;ndez, J. C., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., G&#243;mez-Ribelles, J. L., Monle&#243;n-Pradas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+nanocomposite+scaffolds+with+ordered+cylindrical+orthogonal+pores.">Three-dimensional nanocomposite scaffolds with ordered cylindrical orthogonal pores.</a> J Biomed Mater Res - Part B: Appl Biomater. 84 (2), 541-549 (2008).</li><li>Br&#237;gido-Diego, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acrylic+scaffolds+with+interconnected+spherical+pores+and+controlled+hydrophilicity+for+tissue+engineering.">Acrylic scaffolds with interconnected spherical pores and controlled hydrophilicity for tissue engineering.</a> J Mater Sci Mater Med. 40 (18), 4881-4887 (2005).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Ruiz-Pividal, J. F., Llorens-G&#225;mez, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancement+of+water+diffusion+and+compression+performance+of+crosslinked+alginate+with+a+minuscule+amount+of+graphene+oxide.">Enhancement of water diffusion and compression performance of crosslinked alginate with a minuscule amount of graphene oxide.</a> Sci Rep. 7, 11684 (2017).</li><li>Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;., Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+irregular+graphene+oxide+tubes+using+green+chemistry+and+their+potential+use+as+reinforcement+materials+for+biomedical+applications.">Synthesis of irregular graphene oxide tubes using green chemistry and their potential use as reinforcement materials for biomedical applications.</a> PLoS One. 12 (9), e0185235 (2017).</li><li>S&#225;nchez-Correa, F., Vidaurre-Agut, C., Serrano-Aroca, A., Campillo-Fern&#225;ndez, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Poly(2-hydroxyethyl+acrylate)+hydrogels+reinforced+with+graphene+oxide:+Remarkable+improvement+of+water+diffusion+and+mechanical+properties.">Poly(2-hydroxyethyl acrylate) hydrogels reinforced with graphene oxide: Remarkable improvement of water diffusion and mechanical properties.</a> J Appl Polym Sci. , (2018).</li><li>Serrano-Aroc, &. #. 1. 9. 3. ;., Iskandar, L., Deb, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Green+synthetic+routes+to+alginate-graphene+oxide+composite+hydrogels+with+enhanced+physical+properties+for+bioengineering+applications.">Green synthetic routes to alginate-graphene oxide composite hydrogels with enhanced physical properties for bioengineering applications.</a> Eur Polym J. 103, 198-206 (2018).</li><li>Llorens-G&#225;mez, M., Serrano-Aroca, &. #. 1. 9. 3. ;. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-Cost+Advanced+Hydrogels+of+Calcium+Alginate/Carbon+Nanofibers+with+Enhanced+Water+Diffusion+and+Compression+Properties.">Low-Cost Advanced Hydrogels of Calcium Alginate/Carbon Nanofibers with Enhanced Water Diffusion and Compression Properties.</a> Polymers (Basel). 10 (4), 405 (2018).</li><li>Bauer, A. W., Kirby, W. M. M., Sherris, J. C., Turck, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antibiotic+susceptibility+testing+by+a+standardized+single+disk+method.">Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk method.</a> A J Clin Pathol. 45, 493-496 (1966).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ISO Specification 22196: measurement of antibacterial activity on plastics surfaces. , 584 (2007).</li><li>Taubes, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+bacteria+fight+back.">The bacteria fight back.</a> Science. 321 (5887), 356-361 (2008).</li><li>Boucher, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=10+x+'20+progress--development+of+new+drugs+active+against+Gram-negative+bacilli:+an+update+from+the+infectious+diseases+society+of+America.">10 x '20 progress--development of new drugs active against Gram-negative bacilli: an update from the infectious diseases society of America.</a> Clinical Infectious Diseases. 56 (12), 1685-1694 (2013).</li></ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Yeni ileri düzey malzemeler Antimikrobiyal aktivite üzerinde 2 mevcut yöntemleri temel 2 tamamlayıcı yordamlar oluşan bu takip etmek kolay iletişim kuralı tarafından çözümlenebilir: agar disk difüzyon testi38 ve Antimikrobiyal aktivite üzerinde ölçülen ISO 22196:2007 norm39göre malzeme yüzeyler.
Bu araştırma alanında birçok literatürde bildirilen antimikrobiyal test son derece tahlil bağımlıdır. Bu nedenle, çok ayrıntılı olması önemli ve tutarlı protokolleri laboratuvarlar arasında bir yerde. Bu makalede, bu yönde bir adımdır. Ayrıca, bu alanda daha az deneyimli ve ayrıntılı, adım adım yordamları takip etmek için doğru sonuçlar gerektiren pek çok araştırmacı için çok yararlı olabilir.
Bu iletişim kuralı malzemeler 10 mm çapında yuvarlak yüzey şekillerine kesme birçok türü ile kullanılabilir. Kırılgan malzeme kesim işlemi daha kolay işlemek 1 h için uygun bir çözücü içinde şişmiş. Böylece, Aljinatlar gibi hidrofilik maddeler autoclaved distile suda sulu. Etanol, keton ve diklorometan, gibi diğer solventler hidrofobik malzemeler 1 h için onları kesmeden önce şişmeye istihdam edilebilir. Ancak, bazı malzemeler poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) gibi şişmiş gerekmez ve doğrudan kesilebilir. Bundan sonra bu örnek malzeme diskleri bir vakum fırında kuru ve herhangi bir kirlenme riski ortadan kaldırmak için her numune etanol ve 1 h için UV radyasyon ile sterilize etmek çok önemlidir.
Bu iletişim kuralı TSA ve tekerlekli sandalye basketbolu Kültür Medya ve çok çeşitli mikroorganizmalar ulaşmak için 3 mikroorganizmaları saf kültürler kullanımı önerir: gram pozitif bakteri Staphylococcus aureus, gram-negatif bakteri Escherichia coli, ve Maya Candida albicans. Ancak, alternatif kültür medya ve diğer mikroorganizmalar ihtiyacı farklı kuluçka koşulları da bu iletişim kuralı ile kullanılabilir. Bazen, sadece 1 mikroorganizma yeni bir malzeme antimikrobiyal aktivitesinin ilk bir fikrim var test edilmiştir.
Önerilen 3 karşı güçlü antimikrobiyal aktivite farklı türleri mikroorganizmaların Ayrıca test edilebilir gibi metisiline dirençli Staphylococcus epidermidis (MRSE), antibiyotik dirençli patojenlere karşı gösterilen malzemeleri hangi başarıyla bu iletişim kuralıyla kullanılmıştır. Gram-pozitif metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) ve Vankomisin dirençli enterokoklar (VRE) ve gram-negatif çok endişe neden diğer önemli ilaca dirençli mikroorganizmaların çoğu Pseudomonas aeruginosa40,41.
Biyofilm inhibisyonu ve Antimikrobiyal aktivite karşı diğer tip-in virüs ve parazitler gibi mikroorganizmaların malzemelerin bu iletişim kuralı ile sınanamıyor. Ancak, bu iletişim kuralı çok yararlı bir başlangıç noktası yeni bir antimikrobiyal bir incelenmesi için malzeme gelişmiş sağlar.
Antimikrobiyal agar disk difüzyon testinde önemli bir adım oluşur örnek disk agar medya ile temas alır almaz bazı malzemeleri kat çünkü plaka ortasına yerleştirilen gerekir. Bu durumda, bu örnek dikkatle açılmak için cımbız steril bir çift kullanmak için tavsiye edilir. Öte yandan, iletişim yöntemi, denetimin yıkamak için önemlidir ve örnek diskler çok iyi onları ardından dört kez bir dinç vortexing ve sonication hiçbir uygun mikroorganizmalar sağlamak amacıyla pipetting tarafından PBS ile malzeme yapıştırılır kalır yüzey.
Bu video iletişim kuralı-ebilmek var olmak kullanmak Biyoproses mühendislik, doku mühendisliği, kontrollü ilaç dağıtım, ambalaj malzemeleri, atıksu arıtma ve biyomalzeme ile kullanmak tarım gibi birçok Biyomühendislik uygulamada bir çok arzu antimikrobiyal kapasitesi.
Bu iletişim kuralı ile elde edilen sonuçları nitel (görüntüler) ve nicel (normalleştirilmiş genişliğini antibakteriyel "halo" ve canlılığı kaybı), tekrarlanabilirlik (ortalama ± standart sapma) iyi bir analiz ile. Farklı malzeme karşılaştırırken, difüzyon ve iletişim yöntemi sonuçları analiz ile elde edilen bu ortalama değerler, istatistiksel olarak önemli ölçüde Eğer onlar are çalışma için Türkiye nin analiz, özel mesaj takip tek yönlü ANOVA tarafından çözümlenmesi farklı (p < 0,01).

İmplantın başarısızlık kez antimikrobiyal profilaksi ve aseptik çalışma koşulları rağmen oluşan mikrobiyal enfeksiyonlar bir sonucudur. Bu sorun çok yüksek sağlık maliyetleri neden ve hasta1arasında üzücü olduğunu. Önemli bakteri Staphylococcus aureus gibi şu anda çok tehlikeli patojenler Nozokomiyal Enfeksiyonlar II kateterler ve diğer tıbbi implant ile ilişkili olduğu kabul edilir ve tıp aletleri2ana kirletici vardır. Bu nedenle, roman antimikrobiyal strateji geliştirme acilen günlük ve tıbbi kullanımlar için gereklidir.
Antimikrobiyal ajanlar antibiyotik3, kuaterner amonyum bileşikleri4, metal iyonları/oksitler5ve antimikrobiyal peptidler (amper)6içerir. Antibiyotik yavaş yavaş nedeniyle bakteri direnci7artış nedeniyle antibiyotik aşırı8olduğunu, daha az verimli hale gelmektedir. Kuaterner amonyum bileşikleri sadece nedeniyle9microbial direnci kısa süreli kullanım için çok etkilidir. Metal iyonları/oksitler uzun çok etkili antimikrobiyal ajanlar kullanılmaktadır ve bandaj, su filtreleri, boyalar, vb10,11,12de dahil olmak üzere birçok ortak ticari ürünlerde kullanılır. Ancak, bu tür bileşikleri-ebilmek var olmak zehirli memeli hücreleri13bazı türleri için kanıtlanmıştır.
Mükemmel antimikrobiyal ve immunomodulatory özellikleri14,15amper göstermek ve bakteri çok onlara karşı bir direnç geliştirmeye16zor görünmektedir. Ancak, saf amper üretmek için pahalı bir işlemdir; Bu nedenle, bir büyük ölçekli üretim uygun değildir. Böylece, stratejileri amper üreten sorunları olmuştur sayaç için (Örneğin, küçük moleküler antibakteriyel peptoid taklit eder17, peptoids18, α-peptidler19 ve β-peptidler20) geliştirdi. Metakrilat sona erdi polipeptitler ve polypeptoids antimikrobiyal ve zehirli boya21için sentez.
Geliştirme gibi ileri düzey malzemeler içinde saf yeni antimikrobiyal ajanların veya melez formu, önlemek ve kökenlerinin dirençli enfeksiyonların tedavisinde giderek gereklidir. Doku ve Biyoproses mühendislik gibi birçok Biyomühendislik alanlar için yeni ileri düzey malzemeler çok çeşitli geliştirilmiştir geliştirilmiş kimyasal ve fiziksel özellikleri ile son on yıl içinde çeşitli yöntemlerle: plazma polimerizasyonu üzerine aşılama bir hidrofobik yüzey22,23,24, crosslinking yoğunluk25,26terzilik, polimerizasyon çözüm27,28,29 , 30, porogen çözünme31,32ve tarafından Nanomalzemeler grafen oksit (GO)33,34,35,36 gibi birleşme ve karbon nanofibers (CNFs)37.
Bu yeni malzemelerin antimikrobiyal kapasite, çalışma onların potansiyel Biyomühendislik uygulanabilirliği katlanarak artış olabilir ve bu nedenle, temel haline gelmiştir. Biz bu yeni gelişmiş materyalleri antimikrobiyal aktivitesini ölçmek için bir takip etmek kolay iletişim kuralı mevcut. Burada, numune hazırlama sonra iki tamamlayıcı yöntem takip edilmektedir: ilk agar disk difüzyon testi38 (difüzyon yöntemi) dayanır ve ikinci üzerinde antimikrobiyal etkinliğini ölçmek için ISO 22196:2007 norm39 temel alır malzeme yüzeyleri (iletişim yöntemi).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr >
			<td >Cylindrical punch&#160;</td>
			<td ></td>
			<td ></td>
			<td >10 mm diameter</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Petri dishes</td>
			<td >soria genlab</td>
			<td >P101</td>
			<td>90 mm diameter, sterile</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tryptic soy agar (TSA)</td>
			<td >Liofilchem</td>
			<td >610052</td>
			<td>Dehydrated medium 500 g (powder)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Tryptic soy broth (TSB)</td>
			<td >Liofilchem</td>
			<td >610053</td>
			<td>Dehydrated medium 500 g (powder)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sterile cotton swab</td>
			<td >EUTOTUBO</td>
			<td >300200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Centrifuge tubes</td>
			<td >VIDRA FOC, SA</td>
			<td >429900</td>
			<td>50 mL, sterile</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Ethanol</td>
			<td >VWR</td>
			<td >83813360</td>
			<td>Absolute ethanol</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sterile 48-wells plate</td>
			<td >COSTAR</td>
			<td >3548</td>
			<td>Flat bottom with lid, tissue culture treated, non-pyrogenic, polystyrene</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >A pair of tweezers</td>
			<td >BRAUN</td>
			<td >24612036</td>
			<td>Toothless</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sterile phosphate buffered saline (PBS).</td>
			<td >VWR</td>
			<td >E404-100TAPBS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vaccum oven with a connected vacuum pump</td>
			<td >JP Selecta, SA</td>
			<td >5900620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laminar flow hood</td>
			<td >TELSTAR Technologies, SL</td>
			<td >TELSTAR AH-100</td>
			<td>12.0 W lamp of UV-C radiation</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Class II Biological safety cabinet</td>
			<td >LABOGENE</td>
			<td >MARS 1200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Incubator</td>
			<td >ASTEC CO, LTD</td>
			<td >SCA-165DR</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Vortex mixer</td>
			<td >Biosan</td>
			<td >V-1 Plus</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Spectrophotometer</td>
			<td >Macherey-Nagel, Germany</td>
			<td >Nanocolor UV/VIS II</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Bunsen burner</td>
			<td >JP Selecta, SA</td>
			<td >7001539</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Alcohol burner</td>
			<td >VIDRA FOC, SA</td>
			<td >1658/20</td>
			<td>In case sterilisation is necessary to be performed inside class II biological safety cabinet</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Orbital shaker</td>
			<td >sartorius stedim</td>
			<td >8864845</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sonicator</td>
			<td >SELECTA</td>
			<td >3000617</td>
			<td>50/60 Hz</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Digital calliper</td>
			<td >ACHA</td>
			<td >17-260</td>
			<td>0-150 mm</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Serological pipette</td>
			<td >Fisherbrand</td>
			<td >13-678-11</td>
			<td>25 mL, sterile</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Serological pipette</td>
			<td >VWR</td>
			<td >612-4950</td>
			<td>5 mL, sterile</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Serological pipette</td>
			<td >VWR</td>
			<td >612-5541</td>
			<td>10 mL, sterile</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette</td>
			<td >GILSON</td>
			<td >FA10005P</td>
			<td>Pipetman L P200L, plastic 20-200 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette</td>
			<td >GILSON</td>
			<td >F123602</td>
			<td>Pipetman P1000, 200-1000 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette&#160;</td>
			<td >GILSON</td>
			<td >FA10016</td>
			<td>Pipetman L P12X300L, 20-300 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >TIBP-200-960</td>
			<td>2-200 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Micropipette tips</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >TIBP-1K0-480</td>
			<td>100-1000 &#181;L</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Pre-sterilized tube&#160;</td>
			<td >INSULAB</td>
			<td >301402</td>
			<td>10 mL&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Photo camera</td>
			<td >Canon EOS 5D</td>
			<td ></td>
			<td>Any camera with high resolution can also be utilized</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus</td>
			<td ></td>
			<td >&#160;strain V329</td>
			<td>Cucarella et al. J Bacteriol 183 (9),&#160; 2888&#8211;2896 (2001)</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Gram-negative bacteria Escherichia coli</td>
			<td >Colecci&#243;n Espa&#241;ola de Cultivos Tipo CECT</td>
			<td >CECT 101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Yeast Candida albicans</td>
			<td >Colecci&#243;n Espa&#241;ola de Cultivos Tipo CECT</td>
			<td >CECT 1394</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microcentrifuge tubes&#160;</td>
			<td >DASLAB</td>
			<td >175508</td>
			<td>1,5 mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Autoclave</td>
			<td >JP Selecta, SA</td>
			<td >4002136</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Spectrophotometer-cuvettes</td>
			<td >UVAT Bio CB</td>
			<td >F-0902-02</td>
			<td>4,5 mL</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Drigalski spatula</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >SPRP-L05-1K0</td>
			<td>Sterile, disposable&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >glass balls (2 mm diameter)</td>
			<td >Hecht Karl</td>
			<td >1401/2</td>
			<td>Autoclavable, alternative device to the Drigalski spatula</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Autoclave bags</td>
			<td >DELTALAB</td>
			<td >200318</td>
			<td>To sterilize microbiological residues or contaminated material</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Electronic pipette filling device</td>
			<td >JetPip</td>
			<td >JET BIOFIL</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >SBG3-100-010</td>
			<td>100 mL, for autoclaving culture media</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >SBG3-250-010</td>
			<td>250 mL, for autoclaving culture media</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >SBG3-500-010</td>
			<td>500 mL, for autoclaving culture media</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Laboratory bottle with ISO thread, graduated, borosilicate 3.3</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >SBG3-1K0-010</td>
			<td>1000 mL, for autoclaving culture media</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Latex gloves</td>
			<td >DENIA</td>
			<td >2278000000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Indicator tape for sterilization</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >STAP-A55-001</td>
			<td>Self-adhesive tape with impregnated paper turning to colour when exposed to sterilization process.</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Universal test tube rack</td>
			<td >LABBOX</td>
			<td >MTSP-001-001</td>
			<td>To hold centrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Microcentrifuge tube rack</td>
			<td >VWR</td>
			<td >211-0210</td>
			<td>To hold microcentrifuge tubes</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Sterile loop</td>
			<td >ACEFE S.A.</td>
			<td >100140055</td>
			<td >10 &#181;L of capacity for microbial culture&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Material M1</td>
			<td >Universidad Cat&#243;lica de Valencia San Vicente M&#225;rtir (UCV)</td>
			<td ></td>
			<td >Material type 1&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Material M2</td>
			<td >Universidad Cat&#243;lica de Valencia San Vicente M&#225;rtir (UCV)</td>
			<td ></td>
			<td >Material type 2&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Material M3</td>
			<td >Universidad Cat&#243;lica de Valencia San Vicente M&#225;rtir (UCV)</td>
			<td ></td>
			<td >Material type3</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Material M4</td>
			<td >Universidad Cat&#243;lica de Valencia San Vicente M&#225;rtir (UCV)</td>
			<td ></td>
			<td >Material type 4&#160;</td>
		</tr>
		<tr >
			<td >Material C</td>
			<td >Universidad Cat&#243;lica de Valencia San Vicente M&#225;rtir (UCV)</td>
			<td ></td>
			<td >Control material</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

antimicrobial characterization of advanced materials for bioengineering applications

Gelişmiş özellikleri ile yeni ileri düzey malzemeler geliştirilmesi Biyomühendislik uygulamaları geniş bir daha fazla önem kazanmaktadır. Böylece, birçok roman Biyomalzeme doku mühendisliği ve kontrollü ilaç dağıtım gibi biyomedikal uygulamalar için gerekli belirli ortamlarda taklit edecek şekilde dizayn edilmektedir. Hücreleri veya enzim immobilizasyon için gelişmiş özelliklere sahip malzemeler de geçerli araştırma konusunun Biyoproses Mühendisliği gelişmedir. Ancak, bu uygulamalar bir malzemenin en çekici özelliklerinden biri istenmeyen bulaşmaları önlemek için antibiyotik kapasitesidir. Bunun için biz takip etmek kolay iletişim kuralları (i) agar disk difüzyon testi (difüzyon yöntemi) ve (ii) ISO 22196:2007 norm malzeme yüzeylerde (temas Antimikrobiyal aktivite ölçmek için temel malzemeleri antimikrobiyal karakterizasyonu için mevcut yöntemi). Bu iletişim kuralı mikroorganizmaların geniş bir kapsayacak şekilde gram pozitif ve gram-negatif bakteri ve Maya kullanılarak gerçekleştirilmelidir. Örnek olarak, Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicanskarşı bu protokol sonrası 4 malzeme farklı kimyasal doğa ile test edilir. Bu testlerin sonuçlarını ilk malzeme ve 3 diğer malzemeler için gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı antibakteriyel etkinliği artan için sigara Antimikrobiyal aktivite sergilemek. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Candida albicansbüyümesini inhibe edebiliyoruz.

Bu iletişim kuralı, bir örnek olarak kullanıldı, mikroorganizmaların antimikrobiyal kapasitesi 3 karşı farklı kimyasal doğa'nın 4 malzemelerin test etmek için önerilen: Staphylococcus aureus, Escherichia colive Candida albicans . Kontrol disk (C, resim gösterilmez) oluştu olarak agar disk difüzyon testler (difüzyon yöntemi) Sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen ve gram-pozitif ve gram-negatif karşı antibakteriyel etkinliği artan bakteriler diğer 3 malzemeler için M2, M3 ve M4 (bkz. Şekil 2).
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig2.jpg"> Şekil 2: antimikrobiyal difüzyon yöntemi sonuçları. Bu panel kuluçka 24 h sonra 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disklerin (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı antimikrobiyal difüzyon yöntemi gösterir. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Şekil 3 antimikrobiyal "(1) denklemi ile hesaplanan halo" (Kuzeyhalo) farklı örnek malzemeler için M1, M2, M3 ve M4 gram pozitif ve gram-negatif bakteri karşı farklı normalleştirilmiş genişlikleri gösterir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya Candida albicans (resimler gösterilmez) büyümesini inhibe başardık.
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2.jpg"> Şekil 3: antimikrobiyal difüzyon "halo" sonuçları. Bu panel normalleştirilmiş "halo" (Kuzeyhalo) sonra 24 h, kuluçka her malzeme (M1, M2, M3 ve M4) disk için (10 mm çap x 1 mm kalınlık) S. aureus ve E. coli karşı gösterir. Farklılıklar istatistiksel olarak anlamlı (p < 0,01). Ancak, örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig3v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Kontrol disk (C) ve Grampositive ve diğer 3 malzemeler (bkz: için gram-negatif bakteri karşı artan antibakteriyel etkinliği oluştu olarak iletişim yöntemi sonuçları da sigara Antimikrobiyal aktivite ilk malzeme (M1) için sergilenen Şekil 4).
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3.jpg"> Şekil 4: antimikrobiyal iletişim yöntemi sonuçları. Bu panel 4 malzeme (M1, M2, M3 ve M4) yüzey Antimikrobiyal aktivite assay ISO 22196:2007 göre ilgili 90 mm plakaları, kuluçka S. aureus ve E. coli (10-4seyreltme faktörü) için 24 saat sonra gösterir. C denetim diskten kuluçka 24 saat sonra kurtarıldı canlı bakteri var. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig4v3large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Canlılık (%) kaybı Denklem (2) ve (3) tarafından bu protokol için belirtildiği şekilde belirlendi (bkz Şekil 5).
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2.jpg"> Şekil 5: canlılık iletişim yöntemi tarafından kaybı. Bu panel malzeme yüzeylerde M1, M2, M3 ve M4 S. aureus ve E. coli karşı canlılık (%) kaybı gösterir. Örnek M1 Antimikrobiyal aktivite sergiledi. <a href="/files/ftp_upload/57710/57710fig5v2large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>
Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri (ya da resimler gösterilmez) iletişim yöntemi tarafından Maya Candida albicans büyümesini inhibe başardık. Bu nedenle, bu 4 ileri düzey malzemeler 3 gram pozitif ve gram negatif bakterilere karşı olumlu antimikrobiyal sonuçlar gösterdi ve böylece yüksek antibakteriyel etkinliği gereksinimleri olan birçok Biyomühendislik uygulamalar için çok yararlı olabilir. Ancak, 4 malzemelerin hiçbiri Maya büyümesini inhibe başardık.

Watch this Scientific Journal Video about Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications at JoVE.com

Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Antimikrobiyal Biyomühendislik uygulamalar için gelişmiş malzeme karakterizasyonu

The development of new advanced materials with enhanced properties is becoming more and more important in a wide range of bioengineering applications. ...

antimicrobial-characterization-advanced-materials-for-bioengineering

Research

JoVE Journal

Bioengineering

21.9K Görüntüleme.  Universidad Católica de Valencia San Vicente Mártir. İleri düzey malzemeler antimikrobiyal karakterizasyonu için bir protokol tanıtacağız. Burada, malzeme yüzeylerde Antimikrobiyal aktivite birbirini tamamlayan iki yöntemine göre ölçülür: bir agar disk difüzyon testi üzerinde dayanır, ve diğeri de ISO 22196:2007 norm dayalı standart bir prosedür.

Video: Antimicrobial Characterization of Advanced Materials for Bioengineering Applications

Designing a Bio-responsive Robot from DNA Origami

Nucleic acids are astonishingly versatile. In addition to their natural role as storage medium for biological information1, they can be utilized in parallel computing2,3 , recognize and bind molecular or cellular targets4,5 , catalyze chemical reactions6,7 , and generate calculated responses in a biological system8,9. Importantly, nucleic acids can be programmed to self-assemble into 2D and 3D structures10-12, enabling the integration of all these remarkable features in a single robot linking the sensing of biological cues to a preset response in order to exert a desired effect.
Creating shapes from nucleic acids was first proposed by Seeman13, and several variations on this theme have since been realized using various techniques11,12,14,15 . However, the most significant is perhaps the one proposed by Rothemund, termed scaffolded DNA origami16. In this technique, the folding of a long (&gt;7,000 bases) single-stranded DNA 'scaffold' is directed to a desired shape by hundreds of short complementary strands termed 'staples'. Folding is carried out by temperature annealing ramp. This technique was successfully demonstrated in the creation of a diverse array of 2D shapes with remarkable precision and robustness. DNA origami was later extended to 3D as well17,18 .
 
The current paper will focus on the caDNAno 2.0 software19 developed by Douglas and colleagues. caDNAno is a robust, user-friendly CAD tool enabling the design of 2D and 3D DNA origami shapes with versatile features. The design process relies on a systematic and accurate abstraction scheme for DNA structures, making it relatively straightforward and efficient.
In this paper we demonstrate the design of a DNA origami nanorobot that has been recently described20. This robot is 'robotic' in the sense that it links sensing to actuation, in order to perform a task. We explain how various sensing schemes can be integrated into the structure, and how this can be relayed to a desired effect. Finally we use Cando21 to simulate the mechanical properties of the designed shape. The concept we discuss can be adapted to multiple tasks and settings.

DNA origami is a powerful method for fabricating precise nanoscale objects by programming the self-assembly of DNA molecules. Here, we describe how DNA origami can be utilized to design a robotic robot capable of sensing biological cues and responding by shape shifting, subsequently relayed to a desired effect.

DNA Origami bir Bio-duyarlı Robot Tasarımı

Nucleic acids are astonishingly versatile. In addition to their natural role as storage medium for biological information1, they can be utilized in ...

Biyomühendislik

Designing Silk-silk Protein Alloy Materials for Biomedical Applications

Fibrous proteins display different sequences and structures that have been used for various applications in biomedical fields such as biosensors, nanomedicine, tissue regeneration, and drug delivery. Designing materials based on the molecular-scale interactions between these proteins will help generate new multifunctional protein alloy biomaterials with tunable properties. Such alloy material systems also provide advantages in comparison to traditional synthetic polymers due to the materials biodegradability, biocompatibility, and tenability in the body. This article used the protein blends of wild tussah silk (Antheraea pernyi) and domestic mulberry silk (Bombyx mori) as an example to provide useful protocols regarding these topics, including how to predict protein-protein interactions by computational methods, how to produce protein alloy solutions, how to verify alloy systems by thermal analysis, and how to fabricate variable alloy materials including optical materials with diffraction gratings, electric materials with circuits coatings, and pharmaceutical materials for drug release and delivery. These methods can provide important information for designing the next generation multifunctional biomaterials based on different protein alloys.

Blending is an efficient approach to generate biomaterials with a broad range of properties and combined features. By predicting the molecular interactions between different natural silk proteins, new silk-silk protein alloy platforms with tunable mechanical resiliency, electrical response, optical transparency, chemical processability, biodegradability, or thermal stability can be designed.

Biyomedikal Uygulamalar için İpek-ipek Protein Alaşım Materyalleri Tasarlama

Fibrous proteins display different sequences and structures that have been used for various applications in biomedical fields such as biosensors, ...

Fabricating Superhydrophobic Polymeric Materials for Biomedical Applications

Superhydrophobic materials, with surfaces possessing permanent or metastable non-wetted states, are of interest for a number of biomedical and industrial applications. Here we describe how electrospinning or electrospraying a polymer mixture containing a biodegradable, biocompatible aliphatic polyester (e.g., polycaprolactone and poly(lactide-co-glycolide)), as the major component, doped with a hydrophobic copolymer composed of the polyester and a stearate-modified poly(glycerol carbonate) affords a superhydrophobic biomaterial. The fabrication techniques of electrospinning or electrospraying provide the enhanced surface roughness and porosity on and within the fibers or the particles, respectively. The use of a low surface energy copolymer dopant that blends with the polyester and can be stably electrospun or electrosprayed affords these superhydrophobic materials. Important parameters such as fiber size, copolymer dopant composition and/or concentration, and their effects on wettability are discussed. This combination of polymer chemistry and process engineering affords a versatile approach to develop application-specific materials using scalable techniques, which are likely generalizable to a wider class of polymers for a variety of applications.

Two- and three-dimensional superhydrophobic polymeric materials are prepared by electrospinning or electrospraying biodegradable polymers blended with a lower surface energy polymer of similar composition.

Biyomedikal Uygulamalar için Süperhidrofobik Polimer Malzemeler imalatı

Superhydrophobic materials, with surfaces possessing permanent or metastable non-wetted states, are of interest for a number of biomedical and industrial ...

Fabrication of Mechanically Tunable and Bioactive Metal Scaffolds for Biomedical Applications

Biometal systems have been widely used for biomedical applications, in particular, as load-bearing materials. However, major challenges are high stiffness and low bioactivity of metals. In this study, we have developed a new method towards fabricating a new type of bioactive and mechanically reliable porous metal scaffolds-densified porous Ti scaffolds. The method consists of two fabrication processes, 1) the fabrication of porous Ti scaffolds by dynamic freeze casting, and 2) coating and densification of the porous scaffolds. The dynamic freeze casting method to fabricate porous Ti scaffolds allowed the densification of porous scaffolds by minimizing the chemical contamination and structural defects. The densification process is distinctive for three reasons. First, the densification process is simple, because it requires a control of only one parameter (degree of densification). Second, it is effective, as it achieves mechanical enhancement and sustainable release of biomolecules from porous scaffolds. Third, it has broad applications, as it is also applicable to the fabrication of functionally graded porous scaffolds by spatially varied strain during densification.

Bioactive and mechanically reliable metal scaffolds have been fabricated through a method which consists of two processes, dynamic freeze casting for the fabrication of porous Ti, and coating and densification of the Ti scaffolds. The densification process is simple, effective and applicable to the fabrication of functionally graded scaffolds.

Biyomedikal Uygulamalar için Mekanik ayarlanabilir ve Biyoaktif Metal iskelelerinin Fabrikasyon

Biometal systems have been widely used for biomedical applications, in particular, as load-bearing materials. However, major challenges are high stiffness ...

The Synthesis of RGD-functionalized Hydrogels as a Tool for Therapeutic Applications

The use of polymers as biomaterials has provided significant advantages in therapeutic applications. In particular, the possibility to modify and functionalize polymer chains with compounds that are able to improve biocompatibility, mechanical properties, or cell viability allows the design of novel materials to meet new challenges in the biomedical field. With the polymer functionalization strategies, click chemistry is a powerful tool to improve cell-compatibility and drug delivery properties of polymeric devices. Similarly, the fundamental need of biomedicine to use sterile tools to avoid potential adverse-side effects, such as toxicity or contamination of the biological environment, gives rise to increasing interest in the microwave-assisted strategy.
The combination of click chemistry and the microwave-assisted method is suitable to produce biocompatible hydrogels with desired functionalities and improved performances in biomedical applications. This work aims to synthesize RGD-functionalized hydrogels. RGD (arginylglycylaspartic acid) is a tripeptide that can mimic cell adhesion proteins and bind to cell-surface receptors, creating a hospitable microenvironment for cells within the 3D polymeric network of the hydrogels. RGD functionalization occurs through Huisgen 1,3-dipolar cycloaddition. Some PAA carboxyl groups are modified with an alkyne moiety, whereas RGD is functionalized with azido acid as the terminal residue of the peptide sequence. Finally, both products are used in a copper catalyzed click reaction to permanently link the peptide to PAA. This modified polymer is used with carbomer, agarose and polyethylene glycol (PEG) to synthesize a hydrogel matrix. The 3D structure is formed due to an esterification reaction involving carboxyl groups from PAA and carbomer and hydroxyl groups from agarose and PEG through microwave-assisted polycondensation. The efficiency of the gelation mechanism ensures a high degree of RGD functionalization. In addition, the procedure to load therapeutic compounds or biological tools within this functionalized network is very simple and reproducible.

We present a protocol for the synthesis of RGD-functionalized hydrogels as devices for cell and drug delivery. The procedure involves copper catalyzed alkyne-azide cycloaddition (CuAAC) between alkyne-modified polyacrylic acid (PAA) and a RGD-azide derivative. The hydrogels are formed using microwave-assisted polycondensation and their physicochemical properties are investigated.

Tedavi Uygulamaları için bir alet olarak RGD-fonksiyonelleştirilmiş Hidrojeller Sentezi

The use of polymers as biomaterials has provided significant advantages in therapeutic applications. In particular, the possibility to modify and ...

Light-mediated Formation and Patterning of Hydrogels for Cell Culture Applications

Click chemistries have been investigated for use in numerous biomaterials applications, including drug delivery, tissue engineering, and cell culture. In particular, light-mediated click reactions, such as photoinitiated thiol&#8722;ene and thiol&#8722;yne reactions, afford spatiotemporal control over material properties and allow the design of systems with a high degree of user-directed property control. Fabrication and modification of hydrogel-based biomaterials using the precision afforded by light and the versatility offered by these thiol&#8722;X photoclick chemistries are of growing interest, particularly for the culture of cells within well-defined, biomimetic microenvironments. Here, we describe methods for the photoencapsulation of cells and subsequent photopatterning of biochemical cues within hydrogel matrices using versatile and modular building blocks polymerized by a thiol&#8722;ene photoclick reaction. Specifically, an approach is presented for constructing hydrogels from allyloxycarbonyl (Alloc)-functionalized peptide crosslinks and pendant peptide moieties and thiol-functionalized poly(ethylene glycol) (PEG) that rapidly polymerize in the presence of lithium acylphosphinate photoinitiator and cytocompatible doses of long wavelength ultraviolet (UV) light. Facile techniques to visualize photopatterning and quantify the concentration of peptides added are described. Additionally, methods are established for encapsulating cells, specifically human mesenchymal stem cells, and determining their viability and activity. While the formation and initial patterning of thiol-alloc hydrogels are shown here, these techniques broadly may be applied to a number of other light and radical-initiated material systems (e.g., thiol-norbornene, thiol-acrylate) to generate patterned substrates.

We describe a sequential process for light-mediated formation and subsequent biochemical patterning of synthetic hydrogel matrices for three-dimensional cell culture applications. The construction and modification of hydrogels with cytocompatible photoclick chemistry is demonstrated. Additionally, facile techniques to quantify and observe patterns and determine cell viability within these hydrogels are presented.

Hücre Kültürü Uygulamaları için Hidrojeller Işık aracılı Oluşumu ve Desenlendirme

Click chemistries have been investigated for use in numerous biomaterials applications, including drug delivery, tissue engineering, and cell culture. In ...

Extraction of Plant-based Capsules for Microencapsulation Applications

Microcapsules derived from plant-based spores or pollen provide a robust platform for a diverse range of microencapsulation applications. Sporopollenin exine capsules (SECs) are obtained when spores or pollen are processed so as to remove the internal sporoplasmic contents. The resulting hollow microcapsules exhibit a high degree of micromeritic uniformity and retain intricate microstructural features related to the particular plant species. Herein, we demonstrate a streamlined process for the production of SECs from Lycopodium clavatum spores and for the loading of hydrophilic compounds into these SECs. The current SEC isolation procedure has been recently optimized to significantly reduce the processing requirements which are conventionally used in SEC isolation, and to ensure the production of intact microcapsules. Natural L. clavatum spores are defatted with acetone, treated with phosphoric acid, and extensively washed to remove sporoplasmic contents. After acetone defatting, a single processing step using 85% phosphoric acid has been shown to remove all sporoplasmic contents. By limiting the acid processing time to 30 hr, it is possible to isolate clean SECs and avoid SEC fracturing, which has been shown to occur with prolonged processing time. Extensive washing with water, dilute acids, dilute bases, and solvents ensures that all sporoplasmic material and chemical residues are adequately removed. The vacuum loading technique is utilized to load a model protein (Bovine Serum Albumin) as a representative hydrophilic compound. Vacuum loading provides a simple technique to load various compounds without the need for harsh solvents or undesirable chemicals which are often required in other microencapsulation protocols. Based on these isolation and loading protocols, SECs provide a promising material for use in a diverse range of microencapsulation applications, such as, therapeutics, foods, cosmetics, and personal care products.

This protocol/manuscript describes a streamlined process for the production of sporopollenin exine capsules (SECs) from Lycopodium clavatum spores and for the loading of hydrophilic compounds into these SECs.

Mikroenkapsülasyon Uygulamaları için Ekstraksiyon Tesisi tabanlı Kapsüller

Microcapsules derived from plant-based spores or pollen provide a robust platform for a diverse range of microencapsulation applications. Sporopollenin ...

Melt Electrospinning Writing of Three-dimensional Poly(&#949;-caprolactone) Scaffolds with Controllable Morphologies for Tissue Engineering Applications

This tutorial reflects on the fundamental principles and guidelines for electrospinning writing with polymer melts, an additive manufacturing technology with great potential for biomedical applications. The technique facilitates the direct deposition of biocompatible polymer fibers to fabricate well-ordered scaffolds in the sub-micron to micro scale range. The establishment of a stable, viscoelastic, polymer jet between a spinneret and a collector is achieved using an applied voltage and can be direct-written. A significant benefit of a typical porous scaffold is a high surface-to-volume ratio which provides increased effective adhesion sites for cell attachment and growth. Controlling the printing process by fine-tuning the system parameters enables high reproducibility in the quality of the printed scaffolds. It also provides a flexible manufacturing platform for users to tailor the morphological structures of the scaffolds to their specific requirements. For this purpose, we present a protocol to obtain different fiber diameters using melt electrospinning writing (MEW) with a guided amendment of the parameters, including flow rate, voltage and collection speed. Furthermore, we demonstrate how to optimize the jet, discuss often experienced technical challenges, explain troubleshooting techniques and showcase a wide range of printable scaffold architectures.

This protocol serves as a comprehensive guideline to fabricate scaffolds via electrospinning with polymer melts in a direct writing mode. We systematically outline the process and define the appropriate parameter settings for achieving targeted scaffold architectures.

Üç boyutlu Poly(ε-caprolactone) İskele kontrol edilebilir türleri morfoloji ile Electrospinning yazma doku mühendisliği uygulamaları için erime

This tutorial reflects on the fundamental principles and guidelines for electrospinning writing with polymer melts, an additive manufacturing technology ...

Three-dimensional Printing of Thermoplastic Materials to Create Automated Syringe Pumps with Feedback Control for Microfluidic Applications

Microfluidics has become a critical tool in research across the biological, chemical, and physical sciences. One important component of microfluidic experimentation is a stable fluid handling system capable of accurately providing an inlet flow rate or inlet pressure. Here, we have developed a syringe pump system capable of controlling and regulating the inlet fluid pressure delivered to a microfluidic device. This system was designed using low-cost materials and additive manufacturing principles, leveraging three-dimensional (3D) printing of thermoplastic materials and off-the-shelf components whenever possible. This system is composed of three main components: a syringe pump, a pressure transducer, and a programmable microcontroller. Within this paper, we detail a set of protocols for fabricating, assembling, and programming this syringe pump system. Furthermore, we have included representative results that demonstrate high-fidelity, feedback control of inlet pressure using this system. We expect this protocol will allow researchers to fabricate low-cost syringe pump systems, lowering the entry barrier for the use of microfluidics in biomedical, chemical, and materials research.

Here we present a protocol to construct a pressure-controlled syringe pump to be used in microfluidic applications. This syringe pump is made from an&#160;additively manufactured body, off-the-shelf hardware, and open-source electronics. The resulting system is low-cost, straightforward to build, and delivers well-regulated fluid flow to enable rapid microfluidic research.

Üç boyutlu termoplastik malzemelerin oluşturmak için yazdırma şırınga pompalar geribildirim denetimiyle mikrosıvısal uygulamalar için otomatik

Microfluidics has become a critical tool in research across the biological, chemical, and physical sciences. One important component of microfluidic ...

Magnetic-, Acoustic-, and Optical-Triple-Responsive Microbubbles for Magnetic Hyperthermia and Pothotothermal Combination Cancer Therapy

The precision delivery of anti-cancer agents which aim for targeted and deep-penetrated delivery as well as a controlled release at the tumor site has been challenged. Here, we fabricate iron oxide nanoparticle shelled microbubbles (NSMs) through self-assembly, synergizing magnetic, acoustic, and optical responsiveness in one nanotherapeutic platform. Iron oxide nanoparticles serve as both magnetic and photothermal agents. Once intravenously injected, NSMs can be magnetically guided to the tumor site. Ultrasound triggers the release of iron oxide nanoparticles, facilitating the penetration of nanoparticles deep into the tumor due to the cavitation effect of microbubbles. Thereafter, magnetic hyperthermia and photothermal therapy can be performed on the tumor for combinational cancer therapy, a solution for cancer resistance due to the tumor heterogeneity. In this protocol, the synthesis and characterization of NSMs including structural, chemical, magnetic and acoustic properties were performed. In addition, the anti-cancer efficacy by thermal therapy was investigated using in vitro cell cultures. The proposed delivery strategy and combination therapy holds great promise in cancer treatment to improve both delivery and anticancer efficacies.

Presented here is a protocol for the fabrication of iron oxide nanoparticle-shelled microbubbles (NSMs) through self-assembly, synergizing magnetic, acoustic, and optical responsiveness in one nanotherapeutic platform for magnetic hyperthermia and photothermal combination cancer therapy.

Manyetik Hipertermi ve Pothototermal Kombinasyon Kanser Tedavisi için Manyetik, Akustik ve Optik-Üçlü Duyarlı Mikrobubbles

The precision delivery of anti-cancer agents which aim for targeted and deep-penetrated delivery as well as a controlled release at the tumor site has ...