Çin hibe 31522029, 31770929 ve 31371149 (için Haitao Wu) Ulusal Doğal Bilim Vakfı tarafından desteklenen, 973 (2014CB542203) devlet anahtar geliştirme programından (için Haitao Wu) Çin ve Grant Z161100000216154 temel araştırma programı Beijing Belediye bilim ve Teknoloji Komisyonu (için Haitao Wu). Yazarlar tüm Üyeler Haitao Wu laboratuvar onların teşvik ve tartışmalar için teşekkür ederiz. Yazarlar son derece Zhenwei Liu aparatı hata ayıklama ile yardım için sana şükrediyoruz.

Hayvan deneysel prosedürler Pekin temel tıbbi Bilimler Enstitüsü (Pekin, Çin) ve bakım ve kullanım Laboratuvar hayvanlarının Çin hükümet Yönetmeliği kurumsal yönergeleri takip etti. Fareler (yetişkin erkek, 26 ~ 30 g) yer alan ve sabit bir sıcaklık 23 ° c, su ve yiyecek ad libitumile küçük bir 12-h ışık/12-h karanlık döngü (7: 00'da ışıkları) devam etti. Tüm deneysel prosedürler ışık döngüsü sırasında yapıldı.
1. cerrahi hazırlık
Not: Özel bir elektrot Halpern'ın raporu23değiştirilme yöntemini kullanarak ev yapımı.
<ol><li>2 bakır mikro kablolar (ile bir dış çapı 200 µm) paralel iki kutuplu elektrot kullanır. Elektrotlar uyarılması için silindirik elektrotlar oluşturmak için birbirlerini etrafında sarın. Not: Burada, çekirdek anatomik derinliği göre elektrot uzunluğu PP veya DG içinde çeşitli.</li>
	<li>Etilen oksit dezenfeksiyon kabin kullanarak elektrotlar sterilize. İdare ve ev yapımı 2-kanal Mikro-tel elektrot herhangi bir kirlenme olmadan saklayın. Elektrotlar kesinlikle herhangi bir cerrahi implantasyon önce sterilize.</li>
	<li>Otoklav cerrahi aletler.</li>
	<li>Ameliyattan önce fare Fentobarbital (20-50 mg/kg) ile intraperitoneally, cerrahi uçağa anestezi elde etmek için enjekte et.</li>
	<li>Fareyi bir steril penisilin G prokain süspansiyon (75.000 U, sohbet) ve enfeksiyonlar ve ağrı, sırasıyla24tehlikesini azaltmak için bir analjezik Ajan (carprofen, 0,05 - 1 mg/kg, SC) ile enjekte.</li>
	<li>Sonra hayvan anestezi, göz kuruluğu önlemek için her iki gözde bir göz yağ uygulayın. Sedasyon indüksiyon ve anestezi derinliği hayvanın refleksleri pinching baştan aşağı ve yalnızca yanıt ortaya çıktığında işlemi sürdürmek için yanıt tarafından emin olun. Not: Veteriner merhem göz kuruluğu önlemek için başka bir seçenektir.</li>
	<li>Fare baş üstünde kürk çoğunu elektrik saç kesme makineleri veya bir ustura ile tıraş, traş bölgeyi % 70 alkol ve betadin çözüm üç alternatif scrubs ile sterilize ve betadin cilt üzerinde kuruduktan sonra işlemi sürdürmek.</li>
</ol>2. yüksek frekanslı stimülasyon cerrahi25,26
Not: Bu adımda, tek taraflı olarak dorsal DG veya medial PP alan, hipokampus epizodik öğrenme ve bellek kritik rol ile bir parçası içine yerleştirilmiş bir elektrot.
<ol><li>İmzalat fareyi stereotaksik çerçevenin üzerine getirin. Fare kafa hareketsiz tutmak için kulak çubuğu düzgün hizalamak ve hızlı bir şekilde kur. Böylece onlar ortalanmış destek ve fare biraz güvenli kulak çubuklarını hafifçe sıkın.</li>
	<li>37 ±, hayvanın vücut ısısını korumak için termostatik panelini kullanma 0.5 ° C.</li>
	<li>Forseps kulakları anterior cilt kavramak ve fare'nın kafatası üst Cilt 1 cm2 alanı hakkında kaldırmak için steril makasla kesmek için kullanın. Not: küçük bir miktar kanama kesilmiş deri kenarları boyunca gözlenen.</li>
	<li>Kas ve diğer ek kafatası kafatası yüzey ortaya çıkarmak için bir pamuk bez ile örten kaldırın. Bir pamuklu çubukla ve parçalanmış keski tüm kapaklarini, tendon ve bağ dokusu kafatası tamamen sagittal tanımlamak için yüzey ve lambda dikiş hatları temizlemek için kullanın.</li>
	<li>Bregma ve lambda noktası tanımlar. Koronal sütür ve sagittal dikiş üstün orta bölümünde bulunan calvaria bregma orada kalıyor. Sagittal dikiş tarafından lambdoid dikiş kesişimi burada lambda görünür olmasıdır. Bregma özgün noktası olarak diğer çekirdek konumunu ayarlamak için kullanın.</li>
	<li>Kafatası bregma ve lambda konumuna kimlik sonra bu iki nokta yatay düzeyde ayarlayın. Bu iki nokta yüksekliğini (herhangi bir hata < 0.05 mm olmalıdır) dorsal ventral yönde hemen hemen aynı olduğundan emin olun. Ayrıca, kafatası seviyesi aynı şekilde26medial-lateral yönde olduğundan emin olun.</li>
	<li>Tek taraflı bir ameliyat için ev yapımı 2-kanal bakır Mikro-tel elektrot stereotaktik cerrahi karede dönen elektrot yuvasına bağlayın.</li>
	<li>İlk başta elektrot bregma noktası yukarıda dikey olarak yerleştirin ve özgün site olarak ayarlayın. Görüntülenen kullan dijital ön-arka (AP), medial-lateral (ML), belirtmek için stereotaktik cerrahi çerçeve ve dorso-ventral (DV) konumlandırır. Not: elektrot bükülmüş engellemek için kafatası üzerine elektrot uç işlemi sırasında dokunmayın.</li>
	<li>Elektrot yavaşça doğru konuma taşımak (Şekil 1A, AP-2.1/ML ± 1,0 DG ve AP-3.8/ML ± 3,0 s için için sırasıyla)27 herhangi bir temas olmadan kafatası yukarıda. İstenen site elektrot sokmak için tespit edildi, dorsoventral stereotaksik ayarlamalar için daha yüksek Elektrot tutucu kullanın ve siyah bir marker ile konumunu işaretlemek. Not: Fare zorlanma, ağırlık ve seks ile referans olarak stereotaksik koordinatları tam konumu değişebilir. Aynı cinsiyetten yetişkin fareler herhangi bir varyasyonu konumda en aza indirmek için kullanılır. Mümkünse, tartışılması anatomik taramalar bir tek özne olarak27konumu tanımlamak için kullanılmalıdır.</li>
	<li>Bir el micromanipulator yardımıyla matkap kullanmak (burr boyutu = 0.5 mm) burr deliği işaretli konuma tam olarak yapmak. Burr % 70 etanol ile ucu delme önce sterilize. Mini matkap ile kafatası z ekseni 0.8 - 1.0 mm X-Y konumunu değiştirmeden boyunca yukarı çıkar. Herhangi bir işlem sırasında kanama durdurmak için steril bir pamuk kullanın. Not: Delme hızı 15.000-18 000 devir / dakika (RPM) olduğunu ve sık sık matkap her 8-10 s burr deliği çekilme Delme sırasında aşırı delme ve aşırı ısı önlemek için emin olun.</li>
	<li>Beyin zarı maruz kadar delmeye devam. Bükülmüş iğneyle Delme sırasında oluşturulur ve bir iğne deliği temel yumuşak beyin dokusuna zarar vermeden dura üzerinde herhangi bir kemik kırıntıları kaldırmak için kullanın. Not: beyin dokusuna zarar görmesini önlemek için bükülmüş künt iğne da iyi bir künt forseps ile değiştirilebilir.</li>
	<li>Burr deliği düzgün istenen konumda yapılmadığını doğrulamak için stereotaktik cerrahi çerçeve bir ayarlama tarafından elektrot yükseklik azaltmak ve elektrot sorunsuz çapak delikten herhangi bir engelleri dokunmadan eklenebilir olduğunu sağlamak. Eğer öyleyse, yavaş yavaş elektrotlar için DG (veya PP için 3,0 mm) 1.8 mm derinliğe DG (PP-DG) için medial PP bulunan kafatası yüzeyinden ekleyin. Not: herhangi bir beyin omurilik sıvısı veya kan çıkışları burr deliği steril pamuk ile gelen elektrot implantasyon işlemi sırasında yok etmek.</li>
	<li>Mikro-tel elektrot kafatası delik içine yerleştirdikten sonra küçük bir spatula kullanarak yeterli diş çimento ile yere tutun. Çimento kalınlaşır gibi eklenen elektrot ve güzel pürüzsüz cap oluşturmak için vidayı çevresinde kalıp. Yarayı ve yara kenarları dezenfekte.</li>
	<li>Elektrot elektrot sahibinden kapatın. Fare stereotaksik çerçevesinden kaldırın ve sıcak bir kafese geri. Not: ameliyattan sonra onlar tam olarak yeterli bilinci ile anesteziden iyileşti kadar hayvanlar onların kafes için dönen bekleyin.</li>
	<li>Fareyi serbestçe hareket ve 2 gün boyunca kafeste kurtarmak izin ver. Bağlanın, elektrot implante fare bir programlanabilir Stimülatörü yoluyla beyne yol açar. Belgili tanımlık bilgisayar yazılımı arayüzey Şekil 2' de sunulan olarak ayarlayın. 400 Hz değerinde 6 bakliyat 6 tren 6 dizi olarak HFS parametrelerini ayarlamak (Şekil 1B, trenler, 20 arasında 100 ms s seriler arasında)28. Stimülasyon yoğunluğu 200 μA için ayarlayın.</li>
	<li>Bir HFS belirlenen istenen süre için teslim etmek. Stimülasyon 2 x bir gün saat 8: 00'da ve 8: 00'da teslim</li>
	<li>Kontrol grubu için elektrotlar farelerde implant ve bir stimülasyon gerçekleştirmeyin.</li>
	<li>C-fos boyama için deneysel fareler akut teşvik (günde 2 x). BrdU etiketleme için deneysel fareler bir akut stimülasyon gruba bölmek (günde 2 x uygulanan) ve kronik stimulasyon grubu (5 gün içinde 10 x, 2 x günde uygulanır). Stimülasyon boyunca fareyi uyanık olduğundan emin olun. Müşteri adaylarını değil bükülmüş emin olmak hatırlıyorum. Not: geçen gün yordamı, akut stimülasyon grubu farelerde aynı anda uyarılmış.</li>
	<li>Dikkatle stimülasyon bitince, elektrot PIN Elektrot tutucu ve kayıt sistemi konektörünü çıkarın.</li>
</ol>3. ayirt boyama ve Bromodeoxyuridine29 etiketleme
<ol><li>C-fos ve Notch1 boyama için yaklaşık 3 saat sonra son HF-DBS stimülasyon, anestezi fareler cerrahi uçağa anestezi elde etmek için Fentobarbital (20-50 mg/kg, IP) enjekte edilerek.</li>
	<li>BrdU etiketleme için 12 h son HF-DBS stimülasyon sonra 6 BrdU, denetim ve uyarılmış fareler için (% 0,9 serum, IP içinde 50 mg/kg) 2-h aralıklarla iğne. 36 h son enjeksiyon sonra cerrahi uçağa elde etmek için Fentobarbital (20-50 mg/kg, IP) enjekte edilerek fareler anestezi.</li>
	<li>İnsizyon kalp ortaya çıkarmak ve bir 22'lik künt perfüzyon iğne sol ventrikül geçmek için neşterden göğüs kafesi üzerinden kullanarak olun. Küçük bir insizyon attım sağ atriyum içerisinde olun. Transcardially sıvı 50 mL 50 mL 1 x PBS (pH 7,4) soğuk %4 paraformaldehyde (PFA) ardından soğuk fosfat tamponlu tuz (PBS) ile. Not: PBS için PFA fare kan vivo değiştirilir ve sıvı temiz çalışır geçin. İyi bir perfüzyon karaciğer Temizleme tarafından değerlendirilecektir olabilir. Fiksasyon titreme30gözlenen bir kez perfüzyon kesilmelidir.</li>
	<li>Fare oftalmik makasla başını kesmek, ciltte bir kesi yapmak ve kafatası ortaya çıkarmak. Forseps kullanarak, burnundan düşmüş kafatası biraz ve dikkatle incelemek tüm fare beyin. Post-ﬁx bir ek 2 gün için % 4 paraformaldehyde beyinde ve 4 ° C'de % 30 sükroz çözüm gecede aktarın.</li>
	<li>Bir cryostat kullanarak, beyin 20 µm koronal bölümlere kesti. Aktarın ve bir fırça ile cam slayt bölümlerine bağlama ve onları-20 ° C'de depolayın Not: Elektrot misplacements veya aşırı mekanik hasar hayvanlarla daha sonraki analiz hariç tutulur.</li>
	<li>Slaytları normal PBS (0.1 M, pH 7,4) transfer yok sabitleştirici içeren. PBS dilimlerle için 3-4 x 5 min aşırı herhangi bir sabitleştirici kaldırmak için her için yıkayın. BrdU etiketli grubu için 2-N HCl 37 ° C'de 30 dk için bölümlerde kuluçkaya ve 0.1 M bor arabellekte yıka (pH 8.4; 10 dk). O zaman dilimleri 2 yıkama x 5 dakika içinde PBS için. Not: Immunostaining sonra gerçekleştirilir.</li>
	<li>Dilimleri (RT) Oda sıcaklığında 1 h için çözüm (%1 normal keçi serum, % 3 Sığır serum albümin < BSA >, % 0.5 Triton X-100 ve %0.02 sodyum azid 1 x PBS içinde) kapatmaktır kuluçka tarafından tedavi.</li>
	<li>Anti -c-fos poliklonal antikor (1:500; tavşan), anti-Notch1 antikor (1:50; keçi) veya anti-BrdU antikor (1:800; fare) 4 ° C'de engelleme çözümde dilimlerle gecede kuluçkaya.</li>
	<li>3 dilim yıkama PBS, x sonra kuluçkaya onları Alexa Fluor 568 Birleşik Anti-tavşan (1:500), Anti-keçi (1:1, 000), Alexa Fluor 488 Birleşik ya da anti-sıçan (1:500) Alexa Fluor 488 Birleşik ikincil antikor RT. 1 h için</li>
	<li>Örnekleri 3 yıkama x PBS (10 dk her zaman). DAPI içeren bir anti-fade reaktif montaj orta kullanarak IMMUNO etiketli beyin bölümleri kapsar. Kuruması ve stok onları ışık 4 ° C'de korunuyorsunuz dilimleri izin</li>
	<li>Yüksek çözünürlüklü bir çok kanallı (sıralı confocal mikroskobu tarama) ile beyin uyarılmış ve unstimulated tarafında hipokampal alanlarda görüntüleri elde etmek. Denetim ve deneysel grupları arasında tutarlı bir şekilde görüntüleme parametrelerini ayarlamak.</li>
	<li>Bitişik alanlar görüş motorlu sahne kullanarak sürekli 3D (XYZ) görüntülerini almak ve dikiş onları birlikte büyük kompozit yapmak için uygun yazılımı kullanmak için bir yüksek büyütme amaç (20 X hava amaç, NA 0.45) kullanarak bir mozaik görüntüleme gerçekleştirmek görüntüleri. Not: Gerçek dikiş ve seçenekler geliştirilmiş Dikişsiz görüntüler için Düzgünleştirme döşeme işlevler içerir. Bileşik görüntüler geniş bir alana bir görüntü oluşturmak için dikiş işlevini kullanarak hızlı ve kolay hazırlanır.</li>
	<li>C-fos ve Notch1 boyama için olumlu çekirdek kantitatif analiz dikişli görüntülerin immünfloresan yoğunluğu21 gerçekleştirin. Rastgele rostral, dorsal ve ventral hipokampal DG milletlere içinde 3 alanları seçin ve immünfloresan yoğunluğu Görüntü J yazılım (http://rsb.info.nih.gov/ij/)31kullanarak çift-kör bir şekilde ölçün.</li>
	<li>Etiketleme bir BrdU için dilimleri dorsal hippocampus (-1.7 mm den-2.7 mm bregma göre) aracılığıyla Delme noktasının çevresinde çift-kör bir şekilde analiz.</li>
	<li>DG sadece nöronlarda BrdU pozitif say. 2-hücre çapları granül hücre sayısında içinde yalan hücreleri ekleyin. Not: Burada, sayma 40 X hava amacı istimal gerçekleştirildi. Rasgele, hayvan başına 3-5 bölümleri sayıldı ve sayar ortalama ve araç başına DG19olarak dile getirdi.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Perlmutter, J. S., Mink, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation.">Deep brain stimulation.</a> Annual Review of Neuroscience. 29, 229-257 (2006).</li><li>Lozano, A. M., Lipsman, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Probing+and+regulating+dysfunctional+circuits+using+deep+brain+stimulation.">Probing and regulating dysfunctional circuits using deep brain stimulation.</a> Neuron. 77 (3), 406-424 (2013).</li><li>Kohl, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+for+treatment-refractory+obsessive+compulsive+disorder:+a+systematic+review.">Deep brain stimulation for treatment-refractory obsessive compulsive disorder: a systematic review.</a> BMC Psychiatry. 14, 214 (2014).</li><li>Schlaepfer, T. E., Bewernick, B. H., Kayser, S., Madler, B., Coenen, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+effects+of+deep+brain+stimulation+for+treatment-resistant+major+depression.">Rapid effects of deep brain stimulation for treatment-resistant major depression.</a> Biological Psychiatry. 73 (12), 1204-1212 (2013).</li><li>Fisher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+stimulation+of+the+anterior+nucleus+of+thalamus+for+treatment+of+refractory+epilepsy.">Electrical stimulation of the anterior nucleus of thalamus for treatment of refractory epilepsy.</a> Epilepsia. 51 (5), 899-908 (2010).</li><li>Greenberg, B. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+of+the+ventral+internal+capsule/ventral+striatum+for+obsessive-compulsive+disorder:+worldwide+experience.">Deep brain stimulation of the ventral internal capsule/ventral striatum for obsessive-compulsive disorder: worldwide experience.</a> Molecular Psychiatry. 15 (1), 64-79 (2010).</li><li>Kalia, S. K., Sankar, T., Lozano, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+for+Parkinson's+disease+and+other+movement+disorders.">Deep brain stimulation for Parkinson's disease and other movement disorders.</a> Current Opinion in Neurology. 26 (4), 374-380 (2013).</li><li>Garcia, L., D'Alessandro, G., Bioulac, B., Hammond, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-frequency+stimulation+in+Parkinson's+disease:+more+or+less.">High-frequency stimulation in Parkinson's disease: more or less.</a> Trends in Neurosciences. 28 (4), 209-216 (2005).</li><li>Guercio, L. A., Schmidt, H. D., Pierce, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+of+the+nucleus+accumbens+shell+attenuates+cue-induced+reinstatement+of+both+cocaine+and+sucrose+seeking+in+rats.">Deep brain stimulation of the nucleus accumbens shell attenuates cue-induced reinstatement of both cocaine and sucrose seeking in rats.</a> Behavioural Brain Research. 281, 125-130 (2015).</li><li>Bossert, J. M., Marchant, N. J., Calu, D. J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+reinstatement+model+of+drug+relapse:+recent+neurobiological+findings,+emerging+research+topics,+and+translational+research.">The reinstatement model of drug relapse: recent neurobiological findings, emerging research topics, and translational research.</a> Psychopharmacology (Berlin). 229 (3), 453-476 (2013).</li><li>Grubert, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuropsychological+safety+of+nucleus+accumbens+deep+brain+stimulation+for+major+depression:+effects+of+12-month+stimulation.">Neuropsychological safety of nucleus accumbens deep brain stimulation for major depression: effects of 12-month stimulation.</a> The World Journal of Biological Psychiatry. 12 (7), 516-527 (2011).</li><li>Lyons, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation:+current+and+future+clinical+applications.">Deep brain stimulation: current and future clinical applications.</a> Mayo Clinic Proceedings. 86 (7), 662-672 (2011).</li><li>McIntyre, C. C., Hahn, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Network+perspectives+on+the+mechanisms+of+deep+brain+stimulation.">Network perspectives on the mechanisms of deep brain stimulation.</a> Neurobiology of Disease. 38 (3), 329-337 (2010).</li><li>Kringelbach, M. L., Green, A. L., Owen, S. L., Schweder, P. M., Aziz, T. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sing+the+mind+electric+-+principles+of+deep+brain+stimulation.">Sing the mind electric - principles of deep brain stimulation.</a> European Journal of Neuroscience. 32 (7), 1070-1079 (2010).</li><li>Toda, H., Hamani, C., Fawcett, A. P., Hutchison, W. D., Lozano, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+regulation+of+adult+rodent+hippocampal+neurogenesis+by+deep+brain+stimulation.">The regulation of adult rodent hippocampal neurogenesis by deep brain stimulation.</a> Journal of Neurosurgery. 108 (1), 132-138 (2008).</li><li>Selvakumar, T., Alavian, K. N., Tierney, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+gene+expression+changes+in+the+rat+hippocampus+after+deep+brain+stimulation+of+the+anterior+thalamic+nucleus.">Analysis of gene expression changes in the rat hippocampus after deep brain stimulation of the anterior thalamic nucleus.</a> Journal of Visualized Experiments. (97), e52457 (2015).</li><li>Hattiangady, B., Shetty, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implications+of+decreased+hippocampal+neurogenesis+in+chronic+temporal+lobe+epilepsy.">Implications of decreased hippocampal neurogenesis in chronic temporal lobe epilepsy.</a> Epilepsia. 49, 26-41 (2008).</li><li>Hattiangady, B., Rao, M. S., Shetty, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+temporal+lobe+epilepsy+is+associated+with+severely+declined+dentate+neurogenesis+in+the+adult+hippocampus.">Chronic temporal lobe epilepsy is associated with severely declined dentate neurogenesis in the adult hippocampus.</a> Neurobiology of Disease. 17 (3), 473-490 (2004).</li><li>Madsen, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+neurogenesis+in+a+model+of+electroconvulsive+therapy.">Increased neurogenesis in a model of electroconvulsive therapy.</a> Biological Psychiatry. 47 (12), 1043-1049 (2000).</li><li>Feldman, L. A., Shapiro, M. L., Nalbantoglu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel,+rapidly+acquired+and+persistent+spatial+memory+task+that+induces+immediate+early+gene+expression.">A novel, rapidly acquired and persistent spatial memory task that induces immediate early gene expression.</a> Behavioral and Brain Functions. 6, 35 (2010).</li><li>Feng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch1+deficiency+in+postnatal+neural+progenitor+cells+in+the+dentate+gyrus+leads+to+emotional+and+cognitive+impairment.">Notch1 deficiency in postnatal neural progenitor cells in the dentate gyrus leads to emotional and cognitive impairment.</a> The FASEB Journal. 31 (10), 4347-4358 (2017).</li><li>Alberi, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-induced+Notch+signaling+in+neurons+requires+Arc/Arg3.1+and+is+essential+for+synaptic+plasticity+in+hippocampal+networks.">Activity-induced Notch signaling in neurons requires Arc/Arg3.1 and is essential for synaptic plasticity in hippocampal networks.</a> Neuron. 69 (3), 437-444 (2011).</li><li>Halpern, C. H., Attiah, M. A., Tekriwal, A., Baltuch, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+step-wise+approach+to+deep+brain+stimulation+in+mice.">A step-wise approach to deep brain stimulation in mice.</a> Acta Neurochirurgica.(Wien). 156 (8), 1515-1521 (2014).</li><li>Batra, V., Guerin, G. F., Goeders, N. E., Wilden, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+General+method+for+evaluating+deep+brain+stimulation+effects+on+intravenous+methamphetamine+self-administration.">A General method for evaluating deep brain stimulation effects on intravenous methamphetamine self-administration.</a> Journal of Visualized Experiments. (107), e53266 (2016).</li><li>Fluri, F., Bieber, M., Volkmann, J., Kleinschnitz, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microelectrode+guided+implantation+of+electrodes+into+the+subthalamic+nucleus+of+rats+for+long-term+deep+brain+stimulation.">Microelectrode guided implantation of electrodes into the subthalamic nucleus of rats for long-term deep brain stimulation.</a> Journal of Visualized Experiments. (104), e53066 (2015).</li><li>Resendez, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visualization+of+cortical,+subcortical+and+deep+brain+neural+circuit+dynamics+during+naturalistic+mammalian+behavior+with+head-mounted+microscopes+and+chronically+implanted+lenses.">Visualization of cortical, subcortical and deep brain neural circuit dynamics during naturalistic mammalian behavior with head-mounted microscopes and chronically implanted lenses.</a> Nature Protocols. 11 (3), 566-597 (2016).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mouse+brain+in+stereotaxic+coordinates.">The mouse brain in stereotaxic coordinates.</a> The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates, 3rd edition. 28 (03), 6 (2007).</li><li>McHugh, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dentate+gyrus+NMDA+receptors+mediate+rapid+pattern+separation+in+the+hippocampal+network.">Dentate gyrus NMDA receptors mediate rapid pattern separation in the hippocampal network.</a> Science. 317 (5834), 94-99 (2007).</li><li>Gonzalez, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medial+prefrontal+cortex+is+a+crucial+node+of+a+rapid+learning+system+that+retrieves+recent+and+remote+memories.">Medial prefrontal cortex is a crucial node of a rapid learning system that retrieves recent and remote memories.</a> Neurobiology of Learning and Memory. 103, 19-25 (2013).</li><li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents.">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564 (2012).</li><li>Tse, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuromuscular+junction:+measuring+synapse+size,+fragmentation+and+changes+in+synaptic+protein+density+using+confocal+fluorescence+microscopy.">The neuromuscular junction: measuring synapse size, fragmentation and changes in synaptic protein density using confocal fluorescence microscopy.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52220 (2014).</li><li>Pizzolato, G., Mandat, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+for+movement+disorders.">Deep brain stimulation for movement disorders.</a> Frontiers in Integrative Neuroscience. 6, 2 (2012).</li><li>Tierney, T. S., Sankar, T., Lozano, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Some+recent+trends+and+further+promising+directions+in+functional+neurosurgery.">Some recent trends and further promising directions in functional neurosurgery.</a> Acta Neurochirurgica Supplement. 117 (117), 87-92 (2013).</li><li>Laxton, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+phase+I+trial+of+deep+brain+stimulation+of+memory+circuits+in+Alzheimer's+disease.">A phase I trial of deep brain stimulation of memory circuits in Alzheimer's disease.</a> Annals of Neurology. 68 (4), 521-534 (2010).</li><li>Min, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deep+brain+stimulation+induces+BOLD+activation+in+motor+and+non-motor+networks:+an+fMRI+comparison+study+of+STN+and+EN/GPi+DBS+in+large+animals.">Deep brain stimulation induces BOLD activation in motor and non-motor networks: an fMRI comparison study of STN and EN/GPi DBS in large animals.</a> NeuroImage. 63 (3), 1408-1420 (2012).</li><li>Kukurba, K. R., Montgomery, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> RNA sequencing and analysis. 2015 (11), 951-969 (2015).</li><li>Kawashima, T., Okuno, H., Bito, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+era+for+functional+labeling+of+neurons:+activity-dependent+promoters+have+come+of+age.">A new era for functional labeling of neurons: activity-dependent promoters have come of age.</a> Frontiers in Neural Circuits. 8, 37 (2014).</li><li>Liu, J., Solway, K., Messing, R. O., Sharp, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+neurogenesis+in+the+dentate+gyrus+after+transient+global+ischemia+in+gerbils.">Increased neurogenesis in the dentate gyrus after transient global ischemia in gerbils.</a> Journal of Neuroscience. 18 (19), 7768-7778 (1998).</li><li>Kuhn, H. G., Dickinson-Anson, H., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenesis+in+the+dentate+gyrus+of+the+adult+rat:+age-related+decrease+of+neuronal+progenitor+proliferation.">Neurogenesis in the dentate gyrus of the adult rat: age-related decrease of neuronal progenitor proliferation.</a> Journal of Neuroscience. 16 (6), 2027-2033 (1996).</li></ol>

Yazarlar bildirmek için bir şey yok.

HF-DBS tekniği çok güçlü bir araç 1990'lardan beri birçok nörolojik bozuklukları tedavisinde kullanılmıştır. Şimdiye kadar Simgesel Yapı HF-DBS Parkinson hastalığı ve çok dikkat ve ilgi klinik ve bilimsel topluluk hem de çekti esansiyel tremor tedavisi için işi. Devam eden HF-DBS çalışmalar bazı nörolojik ve psikiyatrik bozukluklar32,33HF-DBS'ın tedavi uygulaması için birçok grup tarafından çeşitli türleri vardır. Bu çalışma...

HF-DBS 1870'lerde1beri geliştirilen beyin elektriksel stimülasyon Nöroşirürji bir teknolojidir. 1980'lerin, HFS ilk Parkinson hastalığı için bir potansiyel terapötik müdahale kullanıldı ve2diğer hareket bozuklukları. Son birkaç on yıl içinde HF-DBS daha yaygın şu anda tedavi edilemez beyin bozuklukları tedavisinde geleneksel tedavi stratejisi tarafından kullanılmıştır. Özellikle, HFS elektrot, son derece etkili sonuçlar ve en az yan etkileri doğruluk artışı nedeniyle beyin bozuklukları HF-DBS tarafından tedavi sayısı önemli ölçüde son artmıştır on yıl3,4, 5. Örneğin, HF-DBS ABD Gıda ve İlaç Dairesi (FDA) tarafından Parkinson hastalığı (PD), Alzheimer tipi demans, esansiyel tremor ve diğer türleri hareket bozuklukları2,6, tedavisi için onaylanmıştır 7. PD hastalarında dopaminerjik ilaç azalır HF-DBS8sırasında % 50'e kadar. Hareket bozuklukları başarılı tedavisi yanı sıra, HF-DBS da güçlü etkileri klinik ve iyi2,9, olarak bilişsel büyütme operasyonu için psikiyatrik hastalıkların tedavisinde göstermiştir 10 , 11. bu HFS araştırma diğer psikiyatrik bozuklukların tedavisinde çok söz hastalar12sunan çeşitli aşamalarında olduğunu belirtmek gerekir.
Her ne kadar birçok çalışma odak HFS beyin13boyunca hem yerel hem de uzak etkileri vardır göstermiştir, nörolojik ve moleküler mekanizmaları etkileri zor2,14kalır. Klinikte tedavi HF-DBS genellikle Parkinson hastalığı ve kronik ağrı, vb hangi bir olasılık arasında bir HF-DBS tedavi tarafından oluşturulan geliştirme açıklamak için pek çok görüş ortaya çıkar tedavisi için uzun vadeli bir şekilde uygulanır HFS geçerli nöronal ağ etkinliğini muhtemelen implante HFS elektrot civarında aksonlar tekrarlayan bir depolarizasyon tarafından modüle olduğunu. Veya HF-DBS çıkış neurons ve öngörülen hedefler deşarj oranı değişir. Ayrıca, HF-DBS neden olabilir uzun vadeli kullanılmasının muhtemelen (LTP) ve uzun süreli depresyon (LTD), dahil olmak üzere uzun vadeli sinaptik değişiklikleri için hangi bir semptomatik iyileşme için katkıda bulunmak. Şimdiye kadar ister HFS inﬂuences hücresel düzenleyen önemli moleküler olaylar böyle işler hala net değildir yetişkin neurogenesis içinde vivoolarak. Çalışmaları birkaç satırlık HFS Rodents klinik olarak uygulanan DBS15,16benzer nöral yanıt taklit göstermiştir. HF-DBS, temel hücresel mekanizmaları bu çalışmada anlamak için biz önce bir vivo içinde HFS metodoloji farelerde bir akut (bir gün) veya kronik (beş gün) şekilde ayarlayın. İkinci olarak, bir aktivasyon analiz yöntemi kadar nöronal aktivite ve neurogenesis değişiklik bir HF-DBS teslim sonra belirlemek için ayarla.
Verilen bu sinir kök hücreleri nöronal üretiminden embriyonik gelişim sırasında bol olduğu ancak yetişkin hayatı boyunca devam eder, hipokampal subgranular bölge neurogenesis oluştuğu önemli alanlarından biridir. Neurogenesis sürecinin birçok fizyolojik ve patolojik etken etkilenir. Epileptik belirli durumlarda, hipokampal neurogenesis önemli ölçüde azalmıştır17,18' dir. Buna ek olarak, bir tek Elektrokonvulsif terapi dentat gyrus19nöronal üretiminde önemli ölçüde arttırabilir. Bu gözlemler elektrofizyolojik etkinliği yetişkin neurogenesis ve hipokampal nöronlar, sinaptik plastisite tür ile kritik bir rol oynamaktadır öneririz. Bu nedenle, daha fazla nöronal aktivite ve neurogenesis HF-DBS etkileri göstermek için önce hangi kaynaklanan kısa vadeli nöronal aktivite iyi bilinen bir belirtecidir hemen erken gen (IEG) c-fos immunostaining testin yapmaktayız 20deneyim. Notch1 sinyal da HFS teslimat21,22sonra sinyal harekete geçirmek izlemek için algılandı. Ayrıca, biz BrdU boyama da gliogenesis için bir işaretleyici olabilir ama Ayrıca analiz çeşitli davranış, HF-DBS indüksiyon sonra etiketleme BrdU nöronal üretiminde tespit.
Bu da çalışmanın, iki HFS metodolojileri hipokampal DG aktivasyonu doğrudan ve dolaylı olarak hedeflemek için adapte olmuşlardır. Elektrot implante DG doğrudan veya DG nöronların harekete geçirmek projeksiyonlar gönderen medial perforant yolu (s) implante. HF-DBS indüksiyon için programlanabilir bir uyarıcı fare baş üzerine sabit elektrot bir sürekli uyarılması yoluyla için sunulmaktadır. Nöronal harekete geçirmek ve neurogenesis HFS etkileri belirlemek için biz c-fos ve Notch1 ifadesi immünfloresan boyama ve hipokampal DG bölgesinde olumlu neurons BrdU dahil sayısını saptamak sonra sırasıyla, HFS tedavi. Özellikle, DG neurogenesis HF-DBS etkilerini veya doğrudan ve dolaylı stimülasyon şekilde bir akut ve kronik stimulasyon şekilde arasında sırasıyla karşılaştırılır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:975px;" width="975">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:255px;">Brain stereotaxic instrument</td>
			<td style="width:215px;">Stoelting</td>
			<td style="width:199px;">51730D</td>
			<td style="width:307px;">Stereotactic intracranial implantation for mouse</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:255px;">Stimulator</td>
			<td style="width:215px;">A-M systems</td>
			<td style="width:199px;">Model 3800</td>
			<td>MultiStim 8-Channel programmable stimulator</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:255px;">Dental driller</td>
			<td style="width:215px;">Saeshin Precision Co., Ltd</td>
			<td style="width:199px;">STRONG 90</td>
			<td>For drilling and crainiotomy&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:255px;">Burr</td>
			<td style="width:215px;">Meisinger</td>
			<td style="width:199px;">HM1 005#</td>
			<td>For drilling and crainiotomy&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="24">
			<td height="24" style="height:24px;width:255px;">Digidata 1550 Digitizer</td>
			<td style="width:215px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:199px;">AXON 1550</td>
			<td>High-resolution data acquisition</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:255px;">Cryotome</td>
			<td style="width:215px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:199px;">Thermo Cryotome FSE</td>
			<td>Cutting frozen sections of specimens</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Confocal microscope</td>
			<td style="width:215px;">Olympus</td>
			<td style="width:199px;">FV-1200</td>
			<td>Japan, with 20x Objective (NA 0.45)</td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;width:255px;">Mouse surgery tools</td>
			<td style="width:215px;">F.S.T.</td>
			<td style="width:199px;">14084-08,11254-20,16109-14</td>
			<td style="width:307px;">Scissors, forceps, bone cutter, holders etc.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Pentobarbital sodium</td>
			<td style="width:215px;">R&#38;D systems</td>
			<td style="width:199px;">4579</td>
			<td>20-50mg/kg for i.p. injection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Penicillin G&#160;</td>
			<td style="width:215px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">P3032</td>
			<td>75,000 U for i.m. injection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Carprofen</td>
			<td style="width:215px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:199px;">SML1713</td>
			<td>5-10mg/kg, for s.c. injection</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">4% Paraformaldehyde (PFA)</td>
			<td style="width:215px;">Beijing Solarbio Sci-Tech Co.&#160;</td>
			<td style="width:199px;">P1110</td>
			<td>stocking solution for tissue fixation</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Phosphate buffer (PBS)</td>
			<td style="width:215px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:199px;">10010023</td>
			<td>pH7.4, 500ml in stocking</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">Tissue-Tek O.C.T. compound</td>
			<td style="width:215px;">Sakura</td>
			<td style="width:199px;">4583</td>
			<td>Formulation of water-soluble glycols and resins</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">anti-BrdU antibody</td>
			<td style="width:215px;">Abcam</td>
			<td style="width:199px;">ab6326</td>
			<td>Dilutions:1/800</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">anti-c-fos antibody</td>
			<td style="width:215px;">Abcam</td>
			<td style="width:199px;">ab209794</td>
			<td>Dilutions:1/500</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:255px;">Goat Anti-Rabbit IgG (Alexa Fluor 568)</td>
			<td style="width:215px;">Thermo Fisher Scientific</td>
			<td style="width:199px;">A11036</td>
			<td>Dilutions:1/500</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:255px;">Donkey Anti-Rat IgG (Alexa Fluor 488)</td>
			<td style="width:215px;">Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:199px;">712-546-150</td>
			<td>Dilutions:1/500</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:255px;">Antifade mounting medium with DAPI</td>
			<td style="width:215px;">Vector Laboratories</td>
			<td style="width:199px;">H-1200</td>
			<td>Counterstaining with DAPI</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:255px;">anti-Notch1 antibody (C-20)</td>
			<td style="width:215px;">Santa Cruz Biotech</td>
			<td style="width:199px;">sc-6014</td>
			<td>Dilutions:1/50</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:255px;">Donkey Anti-Goat IgG (Alexa Fluor 488)</td>
			<td style="width:215px;">Abcam</td>
			<td style="width:199px;">ab150073</td>
			<td>Dilutions:1/1000</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an invasive method for the activation of the mouse dentate gyrus by high-frequency stimulation

İmplante elektrotlar çeşitli beyin bölgeleri, hedefleme kullanarak elektrik yüksek frekanslı stimülasyon (HFS), çeşitli nörolojik ve psikiyatrik bozukluklar için etkili bir tedavi olarak kanıtlanmıştır. Derin beyin stimülasyonu (DBS), adı da beynin derin bölgesinde HFS klinik çalışmalarda giderek önem kazanmaktadır. Yüksek frekans (HF-DBS) DBS cerrahi alanında son ilerleme için major depresyon bozukluğu (MDD), obsesif-kompulsif bozukluk (OKB), tedavi gibi diğer durumlar için invaziv bu tekniği kullanan olasılığı yayılmaya başladı ve bu yüzden üzerinde.
Genişleyen bu göstergeler rağmen HF-DBS yararlı etkileri temel mekanizmaları gizemli kalır. Bu soru adresi için bir yaklaşım seyrek nöronlar HFS tarafından dağıtılmış altgrupları etkinleştirmek implante elektrotlar kullanmaktır. Talamus ön çekirdeği HFS klinikte dirençli epilepsi tedavisi için kullanılabilir olduğu bildirilmiştir. Temel mekanizmaları için artan neurogenesis ilgili olabilir ve nöronal aktivite değişmiş. Bu nedenle, biz fizyolojik değişiklikler fare dentat gyrus (DG) neurogenesis yanı sıra nöronal aktivite tespiti tarafından HFS işlemden önce ve sonra keşfetmek ilgilenen.
Bu makale, farelerde, DG aktivasyonu doğrudan veya dolaylı olarak ve akut veya kronik bir şekilde hedeflemek HFS için yöntemleri açıklanmaktadır. Ayrıca, c-fos ve Notch1 nöronal etkinliğini izlemek için boyama ve harekete geçirmek sinyal immünfloresan ve bromodeoxyuridine (BrdU) belirlemek için etiketleme için Beyin dilimleri hazırlanması için detaylı bir protokol açıklamaktadır HF-DBS indüksiyon sonra neurogenesis. Nöronal aktivite ve neurogenesis aktivasyonu HF-DBS tedaviden sonra doğrudan nörobiyolojik kanıt ve potansiyel terapötik yararları sağlar. Özellikle, bu yöntemi değiştirilebilir ve bazal gangliyon gibi diğer baktılar beyin bölgeleri ve belirli beyin hastalıkları kliniğinde için subthalamic bölgeleri hedeflemek için uygulanan.

Hipokampal DG bölgeye doğrudan veya dolaylı olarak DG etkinleştirmek için s vergiyi HF-DBS stimülasyon sonrasında stereotaksik ayarlar kullanarak eklenen üzerinden elektrotlar kemirgenler Fentobarbital ile anestezi ve 3 h örnek c-fos ve Notch1 immunostaining için son HF-DBS stimülasyon sonra. BrdU, 36 h son BrdU enjeksiyon HF-DBS stimülasyon, 5 gün veya 1 gün sonra sonra boyama için kemirgenler beyin bölümleri hazırlanması için Fentobarbital ile anest...

Watch this Scientific Journal Video about An Invasive Method for the Activation of the Mouse Dentate Gyrus by High-frequency Stimulation at JoVE.com

An Invasive Method for the Activation of the Mouse Dentate Gyrus by High-frequency Stimulation

Bu iletişim kuralı, farelerde güvenilir bir HFS yöntemi ayarlamak gösterilmiştir. Hipokampal dentat gyrus boyunca nöronların elektriksel olarak HFS doğrudan ve dolaylı olarak içinde vivotarafından uyarılır. Nöronal aktivite ve moleküler sinyal c-fos ve Notch1 immünfloresan boyama, sırasıyla incelenir; neurogenesis tarafından bromodeoxyuridine tahlil etiketleme sayılabilir.

Yüksek frekanslı stimülasyon tarafından fare dentat Gyrus aktivasyonu için invaziv bir yöntem

Electrical high-frequency stimulation (HFS), using implanted electrodes targeting various brain regions, has been proven as an effective treatment for ...

an-invasive-method-for-activation-mouse-dentate-gyrus-high-frequency

Research

JoVE Journal

Neuroscience

7.6K Görüntüleme.  Beijing Institute of Basic Medical Sciences. Bu iletişim kuralı, farelerde güvenilir bir HFS yöntemi ayarlamak gösterilmiştir. Hipokampal dentat gyrus boyunca nöronların elektriksel olarak HFS doğrudan ve dolaylı olarak içinde vivotarafından uyarılır. Nöronal aktivite ve moleküler sinyal c-fos ve Notch1 immünfloresan boyama, sırasıyla incelenir; neurogenesis tarafından bromodeoxyuridine tahlil etiketleme sayılabilir.

Video: An Invasive Method for the Activation of the Mouse Dentate Gyrus by High-frequency Stimulation

TMS: Using the Theta-Burst Protocol to Explore Mechanism of Plasticity in Individuals with Fragile X Syndrome and Autism

Fragile X Syndrome (FXS), also known as Martin-Bell Syndrome, is a genetic abnormality found on the X chromosome.1,2 Individuals suffering from FXS display abnormalities in the expression of FMR1 - a protein required for typical, healthy neural development.3 Recent data has suggested that the loss of this protein can cause the cortex to be hyperexcitable thereby affecting overall patterns of neural plasticity.4,5
In addition, Fragile X shows a strong comorbidity with autism: in fact, 30% of children with FXS are diagnosed with autism, and 2 - 5% of autistic children suffer from FXS.6
Transcranial Magnetic Stimulation (a non-invasive neurostimulatory and neuromodulatory technique that can transiently or lastingly modulate cortical excitability via the application of localized magnetic field pulses 7,8) represents a unique method of exploring plasticity and the manifestations of FXS within affected individuals. More specifically, Theta-Burst Stimulation (TBS), a specific stimulatory protocol shown to modulate cortical plasticity for a duration up to 30 minutes after stimulation cessation in healthy populations, has already proven an efficacious tool in the exploration of abnormal plasticity.9,10 
Recent studies have shown the effects of TBS last considerably longer in individuals on the autistic spectrum - up to 90 minutes.11 This extended effect-duration suggests an underlying abnormality in the brain's natural plasticity state in autistic individuals - similar to the hyperexcitability induced by Fragile X Syndrome.
In this experiment, utilizing single-pulse motor-evoked potentials (MEPs) as our benchmark, we will explore the effects of both intermittent and continuous TBS on cortical plasticity in individuals suffering from FXS and individuals on the Autistic Spectrum.

In this article, we examine the effects of Theta-Burst TMS stimulation on cortical plasticity in individuals suffering from Fragile X syndrome and individuals on the autistic spectrum.

TMS: Fragile X Sendromu ve Otizm Bireylerde Plastisite, Mechasnism keşfedin Theta-Burst Protokolü kullanma

Fragile X Syndrome (FXS), also known as Martin-Bell Syndrome, is a genetic abnormality found on the X chromosome.1,2 Individuals suffering from FXS ...

Nörobilim

The NeuroStar TMS Device: Conducting the FDA Approved Protocol for Treatment of Depression

The Neuronetics NeuroStar Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) System is a class II medical device that produces brief duration, pulsed magnetic fields. These rapidly alternating fields induce electrical currents within localized, targeted regions of the cortex which are associated with various physiological and functional brain changes.1,2,3
In 2007, O'Reardon et al., utilizing the NeuroStar device, published the results of an industry-sponsored, multisite, randomized, sham-stimulation controlled clinical trial in which 301 patients with major depression, who had previously failed to respond to at least one adequate antidepressant treatment trial, underwent either active or sham TMS over the left dorsolateral prefrontal cortex (DLPFC). The patients, who were medication-free at the time of the study, received TMS five times per week over 4-6 weeks.4
The results demonstrated that a sub-population of patients (those who were relatively less resistant to medication, having failed not more than two good pharmacologic trials) showed a statistically significant improvement on the Montgomery-Asberg Depression Scale (MADRS), the Hamilton Depression Rating Scale (HAMD), and various other outcome measures. In October 2008, supported by these and other similar results5,6,7, Neuronetics obtained the first and only Food and Drug Administration (FDA) approval for the clinical treatment of a specific form of medication-refractory depression using a TMS Therapy device (FDA approval K061053).
In this paper, we will explore the specified FDA approved NeuroStar depression treatment protocol (to be administered only under prescription and by a licensed medical profession in either an in- or outpatient setting).

In this article, we examine the methodology and considerations relevant to the FDA approved depression treatment protocol using the Neuronetics NeuroStar TMS device.

NeuroStar TMS Aygıt: FDA yürütülmesi Depresyon Tedavisinde Protokolü Onaylandı

The Neuronetics NeuroStar Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) System is a class II medical device that produces brief duration, pulsed magnetic ...

Optogenetic Stimulation of the Auditory Nerve

Direct electrical stimulation of spiral ganglion neurons (SGNs) by cochlear implants (CIs) enables open speech comprehension in the majority of implanted deaf subjects1-6. Nonetheless, sound coding with current CIs has poor frequency and intensity resolution due to broad current spread from each electrode contact activating a large number of SGNs along the tonotopic axis of the cochlea7-9. Optical stimulation is proposed as an alternative to electrical stimulation that promises spatially more confined activation of SGNs and, hence, higher frequency resolution of coding. In recent years, direct infrared illumination of&#160;the cochlea has been used to evoke responses in the auditory nerve10. Nevertheless it requires higher energies than electrical stimulation10,11 and uncertainty remains as to the underlying mechanism12. Here we describe a method based on optogenetics to stimulate SGNs with low intensity blue light, using transgenic mice with neuronal expression of channelrhodopsin 2 (ChR2)13 or virus-mediated expression of the ChR2-variant CatCh14. We used micro-light emitting diodes (&#181;LEDs) and fiber-coupled lasers to stimulate ChR2-expressing SGNs through a small artificial opening (cochleostomy) or the round window. We assayed the responses by scalp recordings of light-evoked potentials (optogenetic auditory brainstem response: oABR) or by microelectrode recordings from the auditory pathway and compared them with acoustic and electrical stimulation.

Cochlear implants (CIs) enable hearing by direct electrical stimulation of the auditory nerve. However, poor frequency and intensity resolution limits the quality of hearing with CIs. Here we describe optogenetic stimulation of the auditory nerve in mice as an alternative strategy for auditory research and developing future CIs.

İşitsel Sinir optogenetic uyarılması

Direct electrical stimulation of spiral ganglion neurons (SGNs) by cochlear implants (CIs) enables open speech comprehension in the majority of implanted ...

Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central nervous system of small animals. However, transdermal and transcranial neuroimaging is frequently affected by low sensitivity, image aberrations and loss of space resolution, requiring scalp or even skull removal before imaging. To overcome this challenge, a new protocol is presented to gain significant insights in brain hemodynamics by photoacoustic and high-frequency ultrasounds imaging with the animal skin and skull intact. The procedure relies on the passage of ultrasound (US) waves and laser directly through the fissures that are naturally present on the animal cranium. By juxtaposing the imaging transducer device exactly in correspondence to these selected areas where the skull has a reduced thickness or is totally absent, one can acquire high quality deep images and explore internal brain regions that are usually difficult to anatomically or functionally describe without an invasive approach. By applying this experimental procedure, significant data can be collected in both sonic and optoacoustic modalities, enabling to image the parenchymal and the vascular anatomy far below the head surface. Deep brain features such as parenchymal convolutions and fissures separating the lobes were clearly visible. Moreover, the configuration of large and small blood vessels was imaged at several millimeters of depth, and precise information were collected about blood fluxes, vascular stream velocities and the hemoglobin chemical state. This repertoire of data could be crucial in several research contests, ranging from brain vascular disease studies to experimental techniques involving the systemic administration of exogenous chemicals or other objects endowed with imaging contrast enhancement properties. In conclusion, thanks to the presented protocol, the US and PA techniques become an attractive noninvasive performance-competitive means for cortical and internal brain imaging, retaining a significant potential in many neurologic fields.

The present work describes a new protocol to perform non-invasive high-frequency ultrasound and photoacoustic based imaging on rat brain, to efficiently visualize deep subcortical regions and their vascular patterns by directing signals on skull foramina naturally present on animal cranium.

Non-invaziv parankim, Vasküler ve Metabolik Yüksek frekanslı ultrason ve foto akustik Sıçan Derin Beyin Görüntüleme

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central ...

Assessment of Dendritic Arborization in the Dentate Gyrus of the Hippocampal Region in Mice

Dendritic arborization has been shown to be a reliable marker for examination of structural and functional integrity of neurons. Indeed, the complexity and extent of dendritic arborization correlates well with the synaptic plasticity in these cells. A reliable method for assessment of dendritic arborization is needed to characterize the deleterious effects of neurological disorders on these structures and to determine the effects of therapeutic interventions. However, quantification of these structures has proven to be a formidable task given their complex and dynamic nature. Fortunately, sophisticated imaging techniques can be paired with conventional staining methods to assess the state of dendritic arborization, providing a more reliable and expeditious means of assessment. Below is an example of how these imaging techniques were paired with staining methods to characterize the dendritic arborization in wild type mice. These complementary imaging methods can be used to qualitatively and quantitatively assess dendritic arborization that span a rather wide area within the hippocampal region.

We describe two methods for visualization and quantification of dendritic arborization in the hippocampus of mouse models: real-time and extended depth of field imaging. While the former method allows sophisticated topographical tracing and quantification of the extent of branching, the latter allows speedy visualization of the dendritic tree.

Farelerde Hipokampal Bölgesi Dentate Gyrus dendritik arborization Değerlendirilmesi

Dendritic arborization has been shown to be a reliable marker for examination of structural and functional integrity of neurons. Indeed, the complexity ...

Generation of Local CA1 &#947; Oscillations by Tetanic Stimulation

Neuronal network oscillations are important features of brain activity in health and disease and can be modulated by a range of clinically used drugs. A protocol is provided to generate a model for studying CA1 &#947; oscillations (20 - 80 Hz). These &#947; oscillations are stable for at least 30 min&#160;and depend upon excitatory and inhibitory synaptic activity in addition to activation of pacemaker currents. Tetanically stimulated oscillations have a number of reproducible and easily quantifiable characteristics including spike count, oscillation duration, latency and frequency that report upon the network state. The advantages of the electrically stimulated oscillations include stability, reproducibility and episodic acquisition enabling robust characterization of network function. This model of CA1 &#947; oscillations can be used to study cellular mechanisms and to systematically investigate how neuronal network activity is altered in disease and by drugs. Disease state pharmacology can be readily incorporated by the use of brain slices from genetically modified or interventional animal models to enable selection of drugs that specifically target disease mechanisms.

Oscillations are fundamental network properties and are modulated by disease and drugs. Studying brain-slice oscillations allows characterization of isolated networks under controlled conditions. Protocols are provided for the preparation of acute brain slices for evoking CA1 &#947; oscillations.

Tetanik Uyarım tarafından Yerel CA1 γ Titreşim Üretimi

Neuronal network oscillations are important features of brain activity in health and disease and can be modulated by a range of clinically used drugs. A ...

Electrophysiological Method for Recording Intracellular Voltage Responses of Drosophila Photoreceptors and Interneurons to Light Stimuli In Vivo

Voltage responses of insect photoreceptors and visual interneurons can be accurately recorded with conventional sharp microelectrodes. The method described here enables the investigator to measure long-lasting (from minutes to hours) high-quality intracellular responses from single Drosophila R1-R6 photoreceptors and Large Monopolar Cells (LMCs) to light stimuli. Because the recording system has low noise, it can be used to study variability among individual cells in the fly eye, and how their outputs reflect the physical properties of the visual environment. We outline all key steps in performing this technique. The basic steps in constructing an appropriate electrophysiology set-up for recording, such as design and selection of the experimental equipment are described. We also explain how to prepare for recording by making appropriate (sharp) recording and (blunt) reference electrodes. Details are given on how to fix an intact fly in a bespoke fly-holder, prepare a small window in its eye and insert a recording electrode through this hole with minimal damage. We explain how to localize the center of a cell's receptive field, dark- or light-adapt the studied cell, and to record its voltage responses to dynamic light stimuli. Finally, we describe the criteria for stable normal recordings, show characteristic high-quality voltage responses of individual cells to different light stimuli, and briefly define how to quantify their signaling performance. Many aspects of the method are technically challenging and require practice and patience to master. But once learned and optimized for the investigator's experimental objectives, it grants outstanding in vivo neurophysiological data.

Electrophysiological Method for Recording Intracellular Voltage Responses of Drosophila Photoreceptors and Interneurons to Light Stimuli In Vivo

Sharp microelectrodes enable accurate electrophysiological characterization of photoreceptor and visual interneuron output in living Drosophila. Here we show how to use this method to record high-quality voltage responses of individual cells to controlled light stimulation. This method is ideal for studying neural information processing in insect compound eyes.

Recording Hücre içi Gerilim Yanıtları için Elektrofizyolojik Yöntem<em&gt; Drosophila</em&gt; Işık Uyaranların için Fotoreseptörler ve internöronlar<em&gt; İn Vivo</em

Voltage responses of insect photoreceptors and visual interneurons can be accurately recorded with conventional sharp microelectrodes. The method ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific frequency and in turn modulate ongoing cortical oscillatory activity. This neurotool allows the establishment of a causal link between endogenous oscillatory activity and behavior. Most of the tACS studies have shown online effects of tACS. However, little is known about the underlying action mechanisms of this technique because of the AC-induced artifacts on Electroencephalography (EEG) signals. Here we show a unique approach to investigate online physiological frequency-specific effects of tACS of the primary motor cortex (M1) by using single pulse Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) to probe cortical excitability changes. In our setup, the TMS coil is placed over the tACS electrode while Motor Evoked Potentials (MEPs) are collected to test the effects of the ongoing M1-tACS. So far, this approach has mainly been used to study the visual and motor systems. However, the current tACS-TMS setup can pave the way for future investigations of cognitive functions. Therefore, we provide a step-by-step manual and video guidelines for the procedure.

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) allows the modulation of cortical excitability in a frequency-specific fashion. Here we show a unique approach which combines online tACS with single pulse Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) in order to "probe" cortical excitability by means of Motor Evoked Potentials.

Transkraniyal manyetik stimülasyon ile transkranyal alternatif akım stimülasyon Online kombine yaklaşım tarafından birincil Motor korteks üzerinde etkileri

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Real-time In Vitro Monitoring of Odorant Receptor Activation by an Odorant in the Vapor Phase

Olfactory perception begins with the interaction of odorants with odorant receptors (OR) expressed by olfactory sensory neurons (OSN). Odor recognition follows a combinatorial coding scheme, where one OR can be activated by a set of odorants and one odorant can activate a combination of ORs. Through such combinatorial coding, organisms can detect and discriminate between a myriad of volatile odor molecules. Thus, an odor at a given concentration can be described by an activation pattern of ORs, which is specific to each odor. In that sense, cracking the mechanisms that the brain uses to perceive odor requires the understanding odorant-OR interactions. This is why the olfaction community is committed to &#34;de-orphanize&#34;&#160;these receptors. Conventional in vitro systems used to identify odorant-OR interactions have utilized incubating cell media with odorant, which is distinct from the natural detection of odors via vapor odorants dissolution into nasal mucosa before interacting with ORs. Here, we describe a new method that allows for real-time monitoring of OR activation via vapor-phase odorants. Our method relies on measuring cAMP release by luminescence using the Glosensor assay. It bridges current gaps between in vivo and in vitro approaches and provides a basis for a biomimetic volatile chemical sensor.

Physiologically, odorant receptors are activated by odorant molecules inhaled in the vapor phase. However, most in vitro systems utilize liquid phase odorant stimulation. Here, we present a method that allows real-time in vitro monitoring of odorant receptor activation upon odorant stimulation in vapor phase.

Gerçek zamanlı olarak buharı aşamasında propil reseptör etkinleştirme bir propil tarafından in Vitro izlenmesi

Olfactory perception begins with the interaction of odorants with odorant receptors (OR) expressed by olfactory sensory neurons (OSN). Odor recognition ...

Establishment of Acute Pontine Infarction in Rats by Electrical Stimulation

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided here is a protocol for successfully establishing a rat model of acute pontine infarction. Rats weighing about 250 g are used, and a probe with an insulated sheath is injected into the pons using a stereotaxic apparatus. A lesion is produced by the electrical stimulation with a single pulse. The Longa score, Berderson score, and beam balance test are used to assess neurological deficits. Additionally, the adhesive-removal somatosensory test is used to determine sensorimotor function, and the limb placement test is used to evaluate proprioception. MRI scans are then used to assess the infarction in vivo, and TTC staining is used to confirm the infarction in vitro. Here, a successful infarction is identified that is located in the anterolateral basis of the rostral pons. In conclusion, a new method is described to establish an acute pontine infarction rat model.

Presented here is a protocol for establishing acute pontine infarction in a rat model via electrical stimulation with a single pulse.

Elektrikstimülasyon ile Sıçanlarda Akut Pontin Enfarktüsü Kurulması

Pontine infarction is the most common stroke subtype in the posterior circulation, while there lacks a rodent model mimicking pontine infarction. Provided ...