Bu yöntem, lazer uyandırma potansiyellerinin nöronal katkıları hakkında anahtar soruları yanıtlamak için hem ECoG'dan hem de tellerin derinliklerinden kaydedilen elektrokortikal sinyallerin doğrudan ilişkisini kurmaya yardımcı olur. Bu tekniğin en büyük avantajı elektrot implantasyonunun polilaktik kabuk la korunabildiği, böylece kaydın serbest hareket eden farelerimize uygulanabildiğidir. Bu yöntem, farklı duyumların uyaranları veya psikiyatrik hastalıkların kısa özellikleri nin uyardığı beyin tepkilerinin kaydedilmesinde uygulanabilir ve bu da kendi nöromanyetimanyetizmalarının araştırılmasını teşvik eder.
Bu yordamı metin protokolünde ayrıntılı olarak belirtildiği gibi farenin anestezisi ile başlayın. Sonra, anestezik maske içine yerleştirilen burun ile sıçan başını düzeltmek için bir stereotaksik aparat kullanın. Cerrahi tolerans sonra sıçan parmak sıkışma yanıt başarısız olur elde edilir.
Korneanın kurumasını önlemek için gözlere oftalmik merhem uygulayın. Standart bir tıraş kullanarak farenin kafa derisinin üst kısmını tıraş edin. Daha sonra, iyot kaldırmak için tıbbi iyodophor dezenfektan çözeltisi ve% 75 alkol kullanarak kafa derisi sterilize.
Yerel analjezi için kafa derisi içine% 2 lidokain enjekte. Sonra, solunum hipersekreasyon inhibe etmek için atropin uygulayın. Bir neşter kullanarak kafa derisi üzerinde yaklaşık 2-3 santimetre bir orta hat kesi olun.
Kesip orta hat boyunca kafa derisinin bir kısmını çıkarın ve kafatasını ortaya çıkarın. ECoG elektrotlarının konumlarını önceden tanımlanmış stereotaksik koordinatlara göre işaretleyin. Ayrıca, orta hatta referans ve yer elektrotlarının konumlarını işaretleyin.
Dura yok etmeden işaretli görüşlerde kafatası üzerinde elektrikli kranial matkap kullanarak ECoG vidalar için delik. Yaklaşık bir milimetre derinlik için deliğe yalıtım kaplı bakır tel bağlanan paslanmaz bir vida, sürücü. Altta yatan durayı delmekten kaçının.
Kafatasıüzerine koruyucu bir kabuk tabanı yerleştirin. Diş akrilik kullanarak kafatası üzerinde bitişik vidalar ile baz düzeltin. Önceden tanımlanmış stereotaksik koordinatlara göre derinlik teli elektrotlarının konumlarını işaretleyin.
Şimdi, tel implantasyonu için işaret manzaraları etrafında kafatası üzerinde küçük delikler matkap ve dikkatlice dura ortaya çıkarmak için kemik kapağı çıkarın. Kraniyotomiyi sıksık normal tuzlu ile yıkayın. Bir iğne kullanarak, kaldırmak ve pia mater zarar vermeden dura kesti, kaplar ve neokorteks yüzeyine.
Derin tel elektrotları neokorteks yüzeyine indirin. Sonra, yavaşça hedef derinliğine beyin nüfuz. Derin tel elektrotların sonraki deneysel manipülasyonlar için taşınabilmesini sağlamak için kraniyotomiyi balmumu ve parafin yağı karışımıyla kapatın.
Kafatası üzerinde diş akrilik kullanarak elektrot cihazı düzeltmek. ECoG vidasına bağlanan her bakır teli konektör modülündeki ilgili kanala kaynaklayın. Koruyucu kabuk duvarını tabanına monte edin ve referans ve zemin elektrotlarını ilgili kanallara kaynaklayın.
Kontaminasyonu önlemek için kapağı bantları kullanarak koruyucu kabuğun üzerine sabitleyin. Penisilin ile sıçan enjekte ettikten sonra, tek ev bir sıcaklık ve nem kontrollü kafes içinde metin protokolünde ayrıntılı olarak ameliyattan sonra sıçan. Farenin kayıt ortamına uyum sağladığından emin olmak için fareyi deneyden önce en az bir saat davranış odasına yerleştirin.
Fareyi korkutmayı ve elektrot modülüne zarar vermemek için kayıt kafasını elektrot modülüne yavaşça bağlayın. Lazer jeneratörü kur. Optik fiberbağlayın ve ekipman operatörleri kılavuzuna göre lazer nokta boyutunu ayarlayın.
Şimdi, tetik jeneratöründeki dijital çıkışı kayıt kartının dijital giriş portuna bağlayın. Bu pençe nosiceptive lazer stimülasyon aldığında sürekli sıçan nosiceptive davranışlarını kaydetmek için deneysel odanın köşesinde ki video kamera ayarlayın. Odanın üst kısmında ki hoparlöraracılığıyla devam eden beyaz gürültüyü sunun.
Ekipman operatörleri kılavuzuna göre kayıt sistemini kullanarak hem ECoG'dan hem de derinlik telelektrotlarından elektrofizyolojik verileri toplayın. Şimdi, lazer sinyallerini ilk önce lazer jeneratörü yerleştirerek odanın altındaki boşluklardan farenin ön pençesinin plantarına iletin. Daha sonra, lazer stimülasyon sağlamak için anahtarı basın.
Burada gösterilen çift primer motor korteksler, bilateral primer somatosensoriyel korteksler ve ECoG ham elektrofizyolojik verilerdir. Net bir lazer uyarılmış potansiyel, veya LEP yanıtı, lazer uyarıcı nın başlangıcından sonra tespit edilebilir. Burada gösterilen beş sıçan altı elektrotlar grup düzeyinde ortalama LEP dalga formları.
LEP yanıtları N1 Wave adı verilen baskın negatif sapmadan oluşur. İki taraflı primer somatosensoriyel kortekslerin N1 Dalgası, bilateral primer motor kortekslere göre daha kısa bir gecikme süresi ve daha yüksek genlik gösterir. Bu şekil, ecog'dan alınan LED'ler ile ikili S1 ve M1'deki derinlik telleri arasındaki dalga dalgalılığın tutarlılığını, farenin sağ ön patininin plantarında teslim edilen lazerle gösterir.
Sol S1 ve M1'in gama frekans bandında sağ S1 ve M1'den daha yüksek bir tutarlılık gösterdiğini unutmayın. Bu teknik geliştirildikten sonra araştırmacıların lazer uyarılmış potansiyellerin nöral katkılarını ortaya çıkarmak için serbest hareket eden sıçanlarda hem ECoG'u hem de kortikal yerel dolgu potansiyellerini aynı anda hatırlamalarının önünü açacaktır.
