Bu yöntemin amacı, küçük bir hayvan kriyoinfarmemi modelinde tasarlanmış kalp dokusu implantasyonunun fonksiyonel sonuçlarını değerlendirmektir. Bu yöntemin avantajı, stabil enfarktüs boyutları ile nispeten tekrarlanabilir miyokard enfarktüslerinin indüksiyonuna olanak sağlamasıdır. Parmak kıskacına yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, anestezili kobayı 40 ila 42 derece lik bir ısıtılmış ısıtMa platformuna supine pozisyonunda yerleştirin.
Göz merhemi uygulayın ve tıraş ve toraks depilate. Maruz kalan cilde 25 derece santigrat ultrason transdüser jel uygulayın ve sol ventrikül apeks eşzamanlı bir görselleştirme ile aort kapak düzleminde sol boyun aort düzlemine doğru B modunda iki boyutlu parasternal uzun eksen görünümleri elde etmek için bir ekokardiyografi sisteminden toraks üzerine transdüser yerleştirin preoperatif sol ventriküler fonksiyonu araştırmak için. Sonra transdüser 90 derece orta papiller düzeyde kısa bir eksen B modu görünümü elde etmek için açın.
Son görüntü elde edildikten sonra, kobayı cerrahi masaya aktarın ve uzuvları yayılan kartal pozisyonunda bantlayın. Maruz kalan cildi iki sıralı iyot bazlı ve %80 etanol scrubs ile dezenfekte edin ve trakeal bölgede 1,5 santimetrelik dikey kesi yapın. Nefes borusunu kaplayan kasları açıkça inceleyin.
Trakea gözlemlenebildiği zaman, hava tüpünü 18 gauge IV kanülle delin ve kanülün esnek kısmını trakeal tüp olarak tolunuzun esnek bir kısmını trakeal tüp olarak takın. İşlem sırasında sürekli havalandırma için bir hayvan solunum cihazı trakeal tüp bağlayın ve beşinci interkostal alanı bulmak için ilk interkostal alanda başlayan kaburga boşlukları saymak. KobaySol tarafında beşinci interkostal alanda iki santimetre yatay kesi yapmak ve interkostal kaslar ulaşılır kadar bir elektrokoter ile kasları diseksiyon önce deri altı dokuları kaldırmak.
Plevral alana ulaşılAna ve sol akciğer görselleştirilene kadar cımbız ve küçük makasla interkostal kasları hafifçe inceleyin. Kaburgalar arasına bir retraktör yerleştirin ve kalbin iyi bir görünümü elde edilene kadar retraktörü dikkatlice açın. Ön sol ventrikül duvarının bölgesinde perikardın yaklaşık bir santimetresini açın ve sol ventrikülin kriyomyaralanmasına neden olurken akciğeri hasardan korumak için sol akciğere kompres yerleştirin.
Daha sonra, 30 saniye boyunca kalbin sol ön duvarına prob basmadan önce sıvı nitrojen 0,5 santimetre kesit çapı ile aşınmış bir metal pulucu serin. Sonra damgayı ısıtmak için pulun içine 200 derece lik elektrikli lehim demiri yerleştirin, böylece metal dokudan çıkarılabilir. Üçüncü damga uygulamasından sonra, interkostal boşluktan retraktör kaldırmak ve akciğer atelektazi önlemek için maksimum basınç ile akciğerleri şişirmek için iki saniye boyunca ventilatör çıkış tüpü kelepçe.
Sonra iki 4-0 dikiş ile kaburga kapatın, 5-0 çalışan sütür ile kaburga üzerinde kaslar ve 5-0 dikiş tek dikiş ile cilt. Trakeal tüpü çıkardıktan sonra, tek bir 8-0 kullanın trakeadaki delinme bölgesini kapatmak ve yarayı üç tek dikiş 5-0 dikişle kapatmak için dikiş. Kriyoyaralanmadan yedi gün sonra, sütürleri çıkarın ve sol lateral tarafın skar bölgesinde iki santimetrelik yatay deri kesisi yapın ve ekstra plevral yapışıklıkları hafifçe incelemek için elektrokoter kullanın.
Dikkatle makas ile plevral alanı açın ve kalp ortaya çıkarmak için bir kaburga dağıtıcı takın. Enfarktüs bölgesini, çevredeki sağlıklı miyokardyuma göre soluk rengiyle görsel olarak belirleyin ve enfarktüs bölgesinin üzerine tasarlanmış bir kalp dokusu yama yerleştirin. İki 8-0 ile yama güvenli kalbin infarktsız bölgesinde her iki tarafta dikişler ve akciğerlerin atelektazi önlemek için basınç ile akciğerleri şişirmek.
Daha sonra retraktörü interkostal uzaydan çıkarın ve gösterildiği gibi hayvanı kapatın. Mühendislik kalp dokusu implantasyonundan dört hafta sonra, sol ventrikül fonksiyonundaki değişiklikleri fazla mesaide değerlendirmek için gösterildiği gibi transtorasik ekokardiyografi yapın. Kriyomdan dört hafta sonra mason trikrom boyama, sol ventrikül miyokardinin ortalama %25'inin üzerinde büyük transmural skarlar ortaya çıkarır.
Distrofin boyama, insan Ku80'in yara izine ve boyanmaya kısmen yeniden kaslı hale gelen ve yeni oluşan miyokardinin insan kökenini doğrulayan büyük miyokardiyal greftleri göstermektedir. İmplante edilmiş mühendislik kalp dokusunun transtorasik ekokardiyografi takibi sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonunda iyileşme, fraksiyonel alan kısalması ve sol ventrikül ve diyastolik çapta azalma olduğunu ortaya koymaktadır. Torasik duvar ve sol ventrikül arasındaki yapışıklıklar mevcut olabilir ve sol ventrikül miyokardiyum zarar için belirli bir risk var gibi tekrar yapmak bu tür operasyonda plevral boşluğu dikkatle açmak için gereklidir.
İnsan mühendislik kalp dokusuimplantasyonu sonra, sol ventrikül ejeksiyon fraksiyonu değişiklikleri izlemek için çeşitli yöntemler kullanılabilir. Ekokardiyografinin yanı sıra, bu değişiklikleri izlemek için basınç hacmi döngülerinin invaziv bir ölçümü de kullanılabilir. Bu yöntem, insan tarafından tasarlanmış doku implantasyonunun tüm yönlerini araştırmanızı sağlar.
Fonksiyonel sonuçları yanı sıra aritmiler gibi potansiyel riskler bu küçük hayvan modelinde değerlendirilebilir.
