Bu protokol, farelerde tıklama ve ton patlaması uyarılmış işitsel beyin sapı yanıtlarının nasıl planlanacağı, gerçekleştirildirilecek ve analiz edilecek leri hakkında ayrıntılı bilgi sağlar. Bu tekniğin en büyük avantajı farmakolojik ve mutant fare modellerinin karmaşık ve hızlı işitsel profilleme sağlar olmasıdır. Alt-er-ed erken APP ve fare ve sıçanlarda işitsel işleme ilişkili değişiklik içine yeni anlayışlar insanlara tercüme edilebilir.
Bu nedenle bu yöntem işitsel, nörolojik ve hastalıkların karakterizasyonu ve fenotiplenmesinde merkezi öneme sahiptir. Bu yöntem en önemli disacusis, hipoacusis ve anacusis in belirlenmesinde önemlidir. Örneğin, yaşa bağlı, gürültüye bağlı metabolik, konjenital ve aspi-met-acury işitme kaybı nın yanı sıra deformiteler veya malformasyonlar, yaralanmalar ve neoplazmlara bağlı işitme açıkları.
Teknikte yeni olan kullanıcılar, sistemin uygun elektro-yerleştirme ve deneysel öncesi kalibrasyonuna özel önem vermelidir. Anestezi, ABR kaydı, ABR filtreleme süreçleri ve otomatik ABR neur-o-lass-es'i göstermek için yöntemin görsel gösterimi çok önemlidir. Sistemin dengede olmasını sağlamak için, kalibrasyondan en az beş dakika önce mikrofona bağlı ön amplifikatörü açarak başlayın.
Osiloskopu aç. Daha sonra mikrofonu, deneysel murin kulağını taklit etmek için sesin kabini zayıflatan içine bir ön amplifikatöre bağlı olarak yerleştirin. Ardından, ticari olarak kullanılabilen işleme ve satın alma yazılımlarını açın ve tıklamalar ve ton patlamaları için uyarıcı protokolleri programlayın.
Tıklama eşiklerini analiz etmek ve belirlemek için tıklama uyarıcı varlığıyla başlayın. Ardından sol ve sağ kulağın ABR simetrisi. Ve ABR genlikleri ve gecikmeler daha sonra.
Daha sonra, Sig-Gen RZ uyarıcı tasarım yazılımı kullanarak sesi patlama stimülasyon protokolü doğrulamak için aynı yazılımı kullanın. Bio-Sig RZ satın alma yazılımı altında uyarıcı ayarları kontrol eder. Bilimsel soruya bağlı olarak test edilecek uygun frekans aralığını programlayın ve uygulanacak frekans aralıklarının hoparlörün teknik özelliklerini karşılamasını sağlayın.
Ortalama için, örneğin tıklama veya ton patlamaları olan sıralı akustik uyaranlarının sayısını saniyede 20'lik bir hız ile 300 kez ayarlayın; ortalama 25 milisaniyelik bir süre ve ön amplifikatörün amplifikasyon faktörü 20 kat. Ardından, ABR veri toplama için uygun örnekleme oranını doğrulayın ve ardından altı anketli tereyağı değerinde bir filtre kullanarak filtreyi geçirin. Gerekirse çentik filtresini etkinleştirin.
Kalibrasyon yapılandırma modunu etkinleştirmek için, yazılım içinde kalibrasyon:CAL200K dosyasını seçerek ton patlaması kalibrasyonunu başlatın. Ve deneysel koşullara göre çevre seçin. Kalibrasyon yordamını çalıştırmak için işlemci sistemini kullanın.
Mikrofonun ve hoparlörün teknik özelliklerinin, ses basıncı seviyesi veya SPL sınırları, frekans aralığı ve dağıtım açısından uyumlu hale getirilmesinden emin olun. Ardından, önceden tanımlanmış tıklama uyarım protokolünü seçin ve başlatın. Ses uyaranlarının spektrumunun osiloskopun çevrimiçi hızlı dört aylık dönüşümü yle analiz edildiğini doğrulamak için tek bir tıklama SPL çalıştırın, gereksinimleri eşleşir.
Önceden tanımlanmış ton patlaması stimülasyon protokolünü 1 ila 42 kilohertz aralığında seçin ve başlatın. Bir osiloskop ve çevrimiçi FFT kullanarak, kaydedilen akustik test uyaranlarının frekans spektrumu doğrulayın. Son olarak, oluşturulan kalibrasyon dosyasını ton patlaması uyarıcı protokolüne yükleyerek ton patlaması kalibrasyonünü tamamlayın.
Anestezili fareyi akustik köpükle kaplı ses zayıflatan bir bölmenin içine yerleştirerek başlayın. Monaural beyin sapı uyarılmış işitsel potansiyellerin kaydı için, tepe noktasında alt dermal paslanmaz çelik elektrotlar takın, pin-göz ekseni ve sağ veya sol pinna sağ veya sol pinna sağ veya sol pinna iltican ölçülecek bağlı olarak. Diğer tarafta, binaural kayıtlar için, negatif elektrotları hem sağ hem de sol pinna yerleştirin.
Yer elektrotunu hayvanın kalçaya yerleştirin. Yerleştirmeden önce, paslanmaz çelik elektrotun ucunda bir kanca şekli oluşturmak elektrotların alt dermal fiksasyonu garanti edilir. Ve bir kez takıldıktan sonra, düzgün hoparlör karşısında fare 10 santimetre rostrum yerleştirin.
Tüm elektrotları baş sahneye bağlayın ve empedanslarını kontrol edin. Daha sonra, uygun elektrot konumlandırma ve iletkenlik doğrulamak için, her kayıt öncesinde, tüm elektrotların empedans ölçümlerini gerçekleştirin. Tek bir hoparlör kullanarak serbest alan koşullarında A'leri kaydedin.
Son olarak, pozitif zirveleri ve negatif dalgaları belirlemek için otomatik eşik algılama ve dalga gecikmesi analizi ile ABR analizi yapın. Genel işitme performansını analiz etmede ilk adım olarak, sıfır ile 90 arasında değişen farklı SPL'ler için tıkuyarılmış ABR'ler otomatik ABR eşik algılama sistemi kullanılarak incelenmiştir. Farklı ton patlama frekansları tarafından uyarılan ABR eşik düzeylerindeki olası değişiklikler analiz edildi.
Örnek fare hatları, Cav3.2 artı, eksi ve Cav3.2 eksi, eksi artan tıklama ve ton patlama sıcak kontrolleri ile karşılaştırıldığında ilgili işitme eşikleri sergiledi. Son olarak, tıklanık uyarılmış ABR genlik büyüme fonksiyonu ve ABR dalga formu gecikme analizi dalgacık tabanlı yaklaşım ile gerçekleştirilmiştir. İkincisi iç kulak ve beyin sapı içinde işitsel bilgi işleme ilgi geninin olası spacio-temporal etkisi içine içgörü sağlar.
Pinna'nın ölçümü ve sistem kalibrasyonunda uygun ABR elektrot yerleşimi bu tekniğin gerçekleştirilmesi için gereklidir. Burada sunulan işitsel yaklaşım, karmaşık, orta gecikme ve geç işitsel uyarılmış potansiyelleri analiz etmek için bir telemetri sistemi ile birlikte kullanılabilir. Bu karakterizasyonu ve işitsel, nörolojik ve nöro hastalıkların fenotipleme yardımcı olur.
