Hibrit mikrosürücü tasarımımız, deneycilerin sadece birden fazla beyin bölgesinden kayıt yapmamalarını değil, aynı zamanda verim ve stabiliteyi optimize etmek için farklı türde elektrotlar seçmelerine de olanak tanır. Dokuz tetrode, bir silikon lineer sonda ve serbestçe hareket eden farelerle in vivo deneyleri için mikrosürücü dizisinde ayarlanabilir ve yeniden kullanılabilir fiber optikleri birleştirdik. Bu teknik kolayca sıçan veya marmosets gibi diğer büyük hayvanlara adapte edilebilir.
Silikon sondalar son derece kırılgandır. Sondalarla uğraşırken dikkatli olmalıyız, örneğin, optik fiberi adapte ederken ve mekik tertibatını mikrosürücüye dönüştürürken. Mikrosürücü dizisi beş bölümden oluşur.
Silikon sonda için microdrive vida hazırlamak için ilk 3D mikrosürücü plastik bir desen baskı ve desen etrafında geçici bir duvar yapmak için desen etrafında bant yerleştirin. Desen içine sıvı silikon jel dökün ve nazik sallayarak hava kabarcıkları kaldırın. Silikon iyileştiğinde, silikon jel kalıbını deseninden dikkatlice çıkarın.
Sonraki 23 gauge paslanmaz çelik tel tüp 18 ve 9.5mm uzunlukları kesmek ve tüplerin üst 2 ila 3mm pürüzlü öğütücü kullanmak için bir döner öğütücü kullanın. Özel bir vida silikon yağı küçük bir hacim uygulayın ve tüpleri ayarlayın ve kalıp içine vida. Kalıp içine diş akrilik dökün ve tüpler ve vida etrafında herhangi bir hava kabarcıkları ortadan kaldırmak için bir şırınga kullanın.
Diş akrilik tamamen kalıp mikrosürücü vida kaldırmak ve 60 derecelik bir açıya 18mm tel ucu bir ucundan 6mm viraj için pliers kullanın. Bir tornalama aleti kullanarak, kaliteyi kontrol etmek için mikrosürücü vidasını döndürün ve mikrosürücü vidasını microdrive dizi gövdesine türün ve vidanın düzgün bir şekilde yukarı ve aşağı hareket edip edemeyeceğini kontrol etmek için çevirin. Silikon sonda için mekiği hazırlamak için iki 5mm peek uzunluğunda kesmek ve mesiğin her iki tarafındaki tüpleri hizalamak için keskin makas kullanın.
Tüpleri epoksi ile mekiğe yapıştırın ve kılavuz direklere küçük bir hacim silikon yağı uygulayın. Epoksi kuruduğunda, kaliteyi kontrol etmek için mekiği microdrive dizi gövdesinin kılavuz direklerinin üzerine yerleştirin. Mekik aşırı sürtünme olmadan sorunsuz hareket etmelidir.
Optorode hazırlamak için uzunluğu 21mm optik fiber bir parça cleave ve düz ve parlak olana kadar fiber ucu öğütmek için bir Rubi kesici kullanın. Uç hazır olduğunda, optik fiberi elektrot sitelerinin üst kısmından 200 ila 300 mikrometre yükseksilikon sondanın ön tarafına hafifçe yerleştirin ve şeffaf bantla fiberi geçici olarak sabitleyin sonra optik fiberi küçük bir epoksi hacmiyle silikon probun tabanına yapıştırın ve epoksinin beş saat boyunca tedavi etmesini bekleyin. Mekiği silikon sondaya takmak için silikon sonda tabanının arkasına küçük bir hacim epoksi uygulayın ve mekik ile silikon sonda tabanı arasında bir boşluk oluşmasını önlemek için mekiğin alt kısmını silikon prob tabanına karşı hafifçe 2-3 dakika tutun.
Epoksi tamamen iyileştiğinde ince cımbızile mekiğin oluğunu tutun ve servis tüplerini ana gövdenin kılavuz direklerine dikkatlice yerleştirmek için bir mikroskop kullanın. Mikrosürücü vidasını vida deliğine takmak için vidayı çevirin ve l şeklindeki tüpün ucunu, silikon probu ve mikrosürücü vidasını devreye sokmak için mekik kafasının oluğuna yerleştirin. Sonraki 3.5mm iplik uzunluğu na iki numara 0 vida kesti ve çapak kaldırmak için ipuçları eziyet.
Prob konektör tutucuyu dizi gövdesine yerleştirin ve silikon probu elektrik konektörünü tutucuya takın. Probu konektör tutucuyu tutmak için 0 vida numarasını takın. Probu mikrosürücü dizi gövdesine yapıştırmamaya dikkat eden tutucudaki silikon prob konektörünü sabitlemek için epoksi kullanın.
Ferrule tutucuyu opto-silikon probuna ve mikrosürücü dizi gövdesine takmak için, iki adet 0 numaralı vidayı 6mm iplik uzunluğuna kesin ve uçları öğütün. 2,5 ila 3mm dış çapları ile küçük hex fındık yapmak ve tutucunun bileşen A içine 0 vida eklemek için iki numaralı 0 makine vida sıyrık dışında Grind. Vida başlarını epoksi ile yapıştırın.
Vücutla sürtünmeyi azaltmak için A ve B bileşenlerine küçük bir hacimsilikon gres uygulayın. A bileşenini geçici olarak vücuda takmak ve Bileşen B'yi a.Thread'in vidalarına yerleştirmek için ters cımbız kullanın ve ferrule tutucuyu vücuda sabitlemek için somunları sıkmak için pliers kullanın. Lif ferrule'nin tutucudan 4 ila 5mm dışarı yapışmasını gözeterek fiber ferrule'yi lif ferrule tutucunun oluğuna takın.
Ferrule ve tutucu oluk arasında az miktarda epoksi uygulayın. Epoksi tedavi edildiğinde, somunları gevşetin ve düzgün hareket için mekik ve ferrule tutucukontrol etmek için mikrosürücü vida açın sonra ferrule tutucu üst konumda ve mekik tüpleri hala kılavuz direkleri ile ilişkili olduğunda prob ucu tamamen vücuda geri çekilir onaylayın. Kalkan konisini takmak için, mikrosürücüyü yerinde tutmak için koninin dışından iki adet 3,5 mm'lik 0 numaralı vidayı sabitle.
Mikrosürücü dizisi, yapı tabloda belirtilen zaman çizelgesine göre tamamlanırsa beş gün içinde kurulabilir. Tetrode ayarı ndan sonra davranışsal performans doğrusal bir pistte ve açık bir alanda test edilebilir. Her iki deney türünde de farenin yaklaşık 30 dakika boyunca serbestçe keşfetmesine izin verilirken, elektrofizyolojik sinyaller kayıt oturumu boyunca şiddetli hareketle ilgili gürültü olmadan kaydedilir.
Işık stimülasyonu daha sonra medial entorinal kortekste medial entorinal korteks tabakası uyarmak için yapılabilir 3 nöronlar hipokampus CA1 alt alanına proje. Spontan spiking faaliyetleri ve yerel alan potansiyelleri daha sonra fare uyurken tetrodes ve silikon sonda kaydedilir. Bu temsili deneyde, tetrodlarda kaydedilen sol alan potansiyelleri, tüm tetrodların CA1 piramidal hücre tabakasının yakınında konumlandırıldığını düşündüren büyük dalgalanma etkinlikleri göstermiştir.
Bu tözde ışık kaynaklı duyarlı aktiviteler ilk olarak medial entorinal kortekste gözlendi ve ardından CA1'de 13 ila 18 milisaniye gecikmeli etkinlik izlendi. Opto-silikon probu elektrostatik serbest bir ortamda mikrosürücü gövdesine yerleştirmeye özen. Kalkan Konisi kağıt ve bant gibi malzemelerle değiştirilebilir.
Bu mikrosürücünün oranını %20'ye kadar düşürecek Mikrosürücü tasarımımız, birden fazla beyin bölgesini ölçmek ve işlemek ve farklı beyin yapılarının dinamiklerini ve etkileşimlerini araştırmak için kayıt elektrotlarının etkin kombinasyonu için esnek seçenekler sunar.
