Araştırma, JAG'ye NHLBI Research Scientist Development Grant (1K01HL135461-01) tarafından desteklenmiştir. David Carmona-Berrio ve Isabel Adarve-Rengifo'ya teknik yardımları için teşekkür ederiz.

Fareler, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) kılavuzlarını ve ABD Sağlık ve İnsan Hizmetleri Bakanlığı, Laboratuvar Hayvanlarının Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'nu izleyerek Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi (VUMC) Hayvan Bakımı Bölümü'nde barındırıldı ve bakıldı. Tüm hayvan prosedürleri, deneylere başlamadan önce VUMC Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Hayvan hazırlama ve diseksiyon
<ol><li>Ameliyata başlamadan yaklaşık 30 dakika önce ısıtma yastığının çimlendiricisini ve su pompasını açın.</li>
	<li>0,5 mm uzunluğunda poliüretan boruları keskin bir neşterle kesin. Bir manşet yapmak için uzunlamasına bir kesim yaparak çevrenin 0,2 mm'sini çıkarın. NOT: Bu, renal arter darlığı prosedürünün aşırı hassasiyet, detaylara dikkat ve sabır gerektiren kritik bir parçasıdır. Bir seferde birkaç parça poliüretan boru kesmeye çalışın. Tüm bu prosedürü mikroskop altında gerçekleştirin.</li>
	<li>Daha fazla ilerlemeden önce, cerrahi steril eldivenler ve cerrahi maske takın.</li>
	<li>6-8 haftalık C57BL/6 vahşi tip (WT) fareler kullanın. Herhangi bir cinsiyet önyargısından kaçınmak için eşit sayıda erkek ve dişi fare kullanın.</li>
	<li>Ameliyat yapmadan önce farelerin ağırlığını kaydedin. Poliüretan tüp ile renal arter darlığı yapmak için ideal ağırlık 18-22 g'dır. Fareleri nazikçe tutun ve anesteziyi enjekte ederken ajitasyon yapmayın. Ameliyat öncesi analjezi uygulayın (Ketofgen, 5 mg/kg vücut genişliği). NOT: Fareleri barınma odalarından ameliyat odasına aktarırken, ajitasyonu önlemek için onları büyük bir nezaket ve özenle taşıyın. Fare kafeslerinin bir araba yerine ellerde taşınması şiddetle tavsiye edilir.</li>
	<li>Fareleri intraperitoneal (I.P.) enjeksiyonlar yoluyla ketamin (100 mg / kg BW) ve ksilazin (10 mg / kg BW) karışımı ile anestezi altına alın.</li>
	<li>Tamamen anestezi uygulanana kadar fareyi kafesin içine geri yerleştirin. Farenin tamamen bilinçsiz hale gelmesi yaklaşık 4-5 dakika sürer. Farenin tamamen bilinçsiz ve ameliyat için hazır olup olmadığını kontrol etmek için kuyruğu veya ayak parmağını forseps ile sıkıştırın.</li>
	<li>Fareyi sırt üstü bir kağıt havlunun üzerine koyun. Saç büyümesinin ters yönünü takip eden elektrikli bir saç kesme makinesi kullanarak lateral karın kıllarını çıkarın. Cerrahi bölgeyi tıraş ettikten sonra, bölgeyi iyot (veya klorheksidin) içeren cerrahi bir ovma ile temizleyin ve ardından% 70 etanol (veya steril salin) ile durulayın.  3 kez tekrarlayın. NOT: Epilasyon prosedürü, ameliyat prosedürü sırasında herhangi bir saç parazitini ve saç kontaminasyonunu önlemek için belirli bir mesafede veya tercihen cerrahi prosedür tezgahından farklı bir tezgahta yapılmalıdır.</li>
	<li>Isıtma yastığını steril bir tabaka ile örtün. Fareyi cerrahi tezgaha getirin ve farenin sağ yan tarafına mikroskopa doğru bakacak şekilde steril tabakaya yerleştirin. Dolaşımdaki su ile 37 °C'lik sabit bir ped sıcaklığını koruyun.</li>
	<li>Tüm cerrahi ekipmanı içeren sterilize edilmiş torbayı açın. Diseksiyon yapan bir mikroskop ve steril keskin makas kullanarak, küçük bir yan kesi (13. torasik kaburgaya yakın, faredeki son kaburga) ve omurlardan yaklaşık 0,5 cm uzakta yapın. Bel omurları boyunca ilerleyin ve 1 inçlik bir kesi yapın.</li>
	<li>Böbreği açığa çıkarmak için cildi ve kası geri çekin.</li>
	<li>Renal arteri izole etmek için steril pamuklu çubuklar kullanarak çevredeki yağları temizleyin ve çıkarın. Kavisli forseps kullanarak renal siniri renal arterden izole edin.</li>
	<li>Sahte ameliyatı gerçekleştirirken, cildi kapatmak için dikişler uygulayın ve kapalı yaraya antibiyotik uygulayın, ardından ameliyat sonrası bakıma devam edin. Değilse, arteri stenose etmek için aşağıdaki bölüme devam edin. NOT: Her deney, cerrahi prosedürün kontrolleri olarak sahte hayvanlara sahip olmalıdır. Şam hayvanları, üzerine bir manşet yerleştirmeden renal arteri açığa çıkarmanın cerrahi prosedüründen geçen farelerden oluşur.</li>
</ol>2. Sağ renal arter darlığı
<ol><li>Sağ renal arterin altına iki naylon sütür yerleştirin, gevşek düğümler yapın ve ardından manşeti ana renal arterin etrafına böbrek ve aort bifurkasyonu arasında yaklaşık olarak eşit mesafeye yerleştirin.</li>
	<li>Naylon dikişleri kullanarak manşeti kapatın. Ameliyattan sonra dikişleri kaybetme olasılığını önlemek için her dikiş için dört düğüm yapın.</li>
	<li>Basit bir sürekli dikiş uygulayarak kastaki kesiyi kapatın.</li>
	<li>Cildi kapatmak için basit kesilmiş dikişler yapın.</li>
	<li>IACUC onaylı analjezikleri uygulayın. NOT: Her kullanımdan önce otoklav cerrahi aletleri. Aynı anda birden fazla ameliyat yapılıyorsa, kullanılan tüm aletleri steril bir alkol göstergesi ile silin ve her ameliyattan sonra 15-30 sn boyunca sıcak çimlendiriciye yerleştirin. Her fare için steril eldivenleri de değiştirin.</li>
</ol>3. Ameliyat sonrası bakım
<ol><li>Fareleri kafeslerine geri döndürün ve kafesi yarı açık, yarı kapalı, 2-3 saat boyunca dolaşımdaki bir su ısıtma yastığı olarak bırakın. Kafesin içine jel diyet kurtarma yiyecekleri ekleyin.</li>
	<li>Ağrı kesici (ketoprofen) ertesi gün intraperitoneal olarak (doz: 5 mg / kg BW) uygulayın.</li>
	<li>Fareleri önümüzdeki iki gün boyunca tartın; Bazı fareler ağırlıklarının% 20'sinden fazlasını kaybederse veterinere danışın ve uygun IACUC yetkili prosedürünü takiben hayvanın ötenazi yapılması gerekip gerekmediğine karar verin.</li>
	<li>Kızarıklık, şişlik, ağrı veya enfeksiyon açısından değerlendirmek için fareleri günlük olarak izleyin.</li>
	<li>Kurumsal IACUC politikalarına uygun olarak postoperatif komplikasyonlar için veteriner konsültasyonu isteyin.</li>
</ol>4. Doku hasadı
<ol><li>Cerrahi işlemden 3 hafta sonra doku hasadı. Her farenin ağırlığını kaydedin.</li>
	<li>IACUC onaylı bir prosedürle fareyi ötenazileştirin.</li>
	<li>Fareyi steril bir platforma diseksiyon yapmak için sırtüstü pozisyonda yerleştirin.</li>
	<li>Hareketi sınırlamak için uzuvları sabitleyin ve uzatın.</li>
	<li>Farelere% 70 etanol ile iyice püskürtün.</li>
	<li>Keskin makas kullanarak karın ve göğüs bölgesini açmak için orta hat kesisi yapın.</li>
	<li>Cildi ve periton duvarını geri çekin.</li>
	<li>Kalbi dikkatlice ortaya çıkarın ve sağ ventrikülü delin ve fareyi exsanguinate edin.</li>
	<li>Forseps kullanarak her iki böbreği de çıkarın. Böbrekler farelerin arkasında bulunur. NOT: Her iki böbreği de karıştırmayın. Stelsezli, sahte ve kontralateral böbreklerin farkında olun.</li>
	<li>Böbrek kapsülünü çıkarın, herhangi bir yağdan temizleyin ve her böbreğin ağırlığını ayrı ayrı kaydedin.</li>
	<li>Her iki böbreğin uzunlamasına bir bölümünü kesin ve daha sonra parafin gömme için işlenmek, in situ hibridizasyon (ISH) ve immünohistokimya (IHC) gerçekleştirmek için 4 ° C'de bir gecede% 4 PFA'ya sabitlenir. ISH ve IHC protokollerini rapor edildiği gibi takip edin23,24.</li>
	<li>Kalan böbreğin korteksini izole edin ve batı lekesini gerçekleştirmek için sıvı azotta dondurun. Numuneleri analize kadar -80 °C'de saklayın.</li>
	<li>Renin ve N-GAL ifadelerini literatür23,24'te tanımlandığı gibi Batı lekesi ile sayısallaştırın.</li>
</ol>5. İstatistik
<ol><li>Üç veya daha fazla koşullu deneyler için tek yönlü veya iki yönlü ANOVA'yı kullanın, ardından bireysel gruplar arasındaki karşılaştırmalar için Bonferroni post-hoc testleri yapın. 0,05'e eşit veya daha küçük bir p değerinin önemli olduğunu düşünün. Tüm istatistiksel analizleri yapmak için yazılım kullanın (örneğin, GraphPad Prism 8.2).</li>
</ol>

<ol>
	<li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blockade+of+CCR2+reduces+macrophage+influx+and+development+of+chronic+renal+damage+in+murine+renovascular+hypertension.">Blockade of CCR2 reduces macrophage influx and development of chronic renal damage in murine renovascular hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 310 (5), 372-384 (2016).</li><li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+inflammatory+biomarkers+after+renal+revascularization+in+atherosclerotic+renal+artery+stenosis.">Changes in inflammatory biomarkers after renal revascularization in atherosclerotic renal artery stenosis.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 31 (9), 1437-1443 (2016).</li><li>Yerram, P., Karuparthi, P. R., Chaudhary, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogenesis+and+management+of+renovascular+hypertension+and+ischemic+nephropathy.">Pathogenesis and management of renovascular hypertension and ischemic nephropathy.</a> Minerva Urologica e Nefrologica. 64 (1), 63-72 (2012).</li><li>Covic, A., Gusbeth-Tatomir, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+renal+artery+stenosis,+renovascular+hypertension,+and+ischemic+nephropathy:+diagnostic+implications.">The role of the renin-angiotensin-aldosterone system in renal artery stenosis, renovascular hypertension, and ischemic nephropathy: diagnostic implications.</a> Progress in Cardiovascular Diseases. 52 (3), 204-208 (2009).</li><li>Barreras, A., Gurk-Turner, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+receptor+blockers.">Angiotensin II receptor blockers.</a> Proceedings. 16 (1), 123-126 (2003).</li><li>Sica, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin-converting+enzyme+inhibitors+side+effects--physiologic+and+non-physiologic+considerations.">Angiotensin-converting enzyme inhibitors side effects--physiologic and non-physiologic considerations.</a> Journal of Clinical Hypertension. 6 (7), 410-416 (2004).</li><li>Hill, R. D., Vaidya, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+II+Receptor+Blockers+(ARB,+ARb).">Angiotensin II Receptor Blockers (ARB, ARb).</a> StatPearls. , (2019).</li><li>Durante, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+renin-angiotensin-aldosterone+system+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">Role of the renin-angiotensin-aldosterone system in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Current Pharmaceutical Design. 18 (7), 981-1004 (2012).</li><li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+reactive+carbonyl+species:+Potential+risk+factor+for+hypertension.">Plasma reactive carbonyl species: Potential risk factor for hypertension.</a> Free Radical Research. 45 (5), 568-574 (2011).</li><li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin+receptor+blockade+has+protective+effects+on+the+poststenotic+porcine+kidney.">Angiotensin receptor blockade has protective effects on the poststenotic porcine kidney.</a> Kidney International. 84 (4), 767-775 (2013).</li><li>Zou, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+scattered+tubular-like+cells+confer+protective+effects+in+the+stenotic+murine+kidney+mediated+by+release+of+extracellular+vesicles.">Renal scattered tubular-like cells confer protective effects in the stenotic murine kidney mediated by release of extracellular vesicles.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1263 (2018).</li><li>Kinra, M., Mudgal, J., Arora, D., Nampoothiri, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+insight+into+the+role+of+cyclooxygenase+and+lipooxygenase+pathway+in+renal+ischemia.">An insight into the role of cyclooxygenase and lipooxygenase pathway in renal ischemia.</a> European Review for Medical and Pharmacological Sciences. 21 (21), 5017-5020 (2017).</li><li>Cavalcanti, C. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+PDE5+Restores+Depressed+Baroreflex+Sensitivity+in+Renovascular+Hypertensive+Rats.">Inhibition of PDE5 Restores Depressed Baroreflex Sensitivity in Renovascular Hypertensive Rats.</a> Frontiers in Physiology. 7, 15 (2016).</li><li>Dias, A. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sildenafil+ameliorates+oxidative+stress+and+DNA+damage+in+the+stenotic+kidneys+in+mice+with+renovascular+hypertension.">Sildenafil ameliorates oxidative stress and DNA damage in the stenotic kidneys in mice with renovascular hypertension.</a> Journal of Translational Medicine. 12, 35 (2014).</li><li>Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+hypertension:+an+overview.">Animal models of hypertension: an overview.</a> Journal of Laboratory and Clinical Medicine. 146 (3), 160-173 (2005).</li><li>Reckelhoff, J. F., Romero, D. G., Yanes Cardozo, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex,+Oxidative+Stress,+and+Hypertension:+Insights+From+Animal+Models.">Sex, Oxidative Stress, and Hypertension: Insights From Animal Models.</a> Physiology (Bethesda). 34 (3), 178-188 (2019).</li><li>Goldblatt, H., Lynch, J., Hanzal, R. F., Summerville, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Experimental+Hypertension+:+I.+The+Production+of+Persistent+Elevation+of+Systolic+Blood+Pressure+by+Means+of+Renal+Ischemia.">Studies on Experimental Hypertension : I. The Production of Persistent Elevation of Systolic Blood Pressure by Means of Renal Ischemia.</a> Journal of Experimental Medicine. 59 (3), 347-379 (1934).</li><li>Gollan, F., Richardson, E., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypertension+in+the+systemic+blood+of+animals+with+experimental+renal+hypertension.">Hypertension in the systemic blood of animals with experimental renal hypertension.</a> Journal of Experimental Medicine. 88 (4), 389-400 (1948).</li><li>Lewis, H. A., Goldblatt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+on+Experimental+Hypertension:+XVIII.+Experimental+Observations+on+the+Humoral+Mechanism+of+Hypertension.">Studies on Experimental Hypertension: XVIII. Experimental Observations on the Humoral Mechanism of Hypertension.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 18 (7), 459-487 (1942).</li><li>Warner, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+deficiency+of+Smad3+protects+the+kidneys+from+atrophy+and+interstitial+fibrosis+in+2K1C+hypertension.">Genetic deficiency of Smad3 protects the kidneys from atrophy and interstitial fibrosis in 2K1C hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 302 (11), 1455-1464 (2012).</li><li>Lorenz, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renovascular+hypertension+using+a+modified+two-kidney,+one-clip+approach+in+mice+is+not+dependent+on+the+alpha1+or+alpha2+Na-K-ATPase+ouabain-binding+site.">Renovascular hypertension using a modified two-kidney, one-clip approach in mice is not dependent on the alpha1 or alpha2 Na-K-ATPase ouabain-binding site.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 301 (3), 615-621 (2011).</li><li>Ebina, K., Iwabuchi, T., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Histological+change+in+permanently+clipped+or+ligated+cerebral+arterial+wall.+Part+II:+Autopsy+cases+of+aneurysmal+neck+clipping.">Histological change in permanently clipped or ligated cerebral arterial wall. Part II: Autopsy cases of aneurysmal neck clipping.</a> Acta Neurochirurgica. 66 (1-2), 23-42 (1982).</li><li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox6:+A+new+modulator+of+renin+expression+during+physiological+conditions.">Sox6: A new modulator of renin expression during physiological conditions.</a> bioRxiv. , (2019).</li><li>Saleem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sox6+as+a+new+modulator+of+renin+expression+in+the+kidney.">Sox6 as a new modulator of renin expression in the kidney.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. , (2019).</li><li>Chade, A. R., Williams, M. L., Engel, J., Guise, E., Harvey, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+translational+model+of+chronic+kidney+disease+in+swine.">A translational model of chronic kidney disease in swine.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 315 (2), 364-373 (2018).</li><li>Xue, Y., Xu, Z., Chen, H., Gan, W., Chong, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-energy+shock+wave+preconditioning+reduces+renal+ischemic+reperfusion+injury+caused+by+renal+artery+occlusion.">Low-energy shock wave preconditioning reduces renal ischemic reperfusion injury caused by renal artery occlusion.</a> Acta Cir&#250;rgica Brasileira. 32 (7), 550-558 (2017).</li><li>Lalanne, A., Beaudeux, J. L., Bernard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NGAL:+a+biomarker+of+acute+and+chronic+renal+dysfunction.">NGAL: a biomarker of acute and chronic renal dysfunction.</a> Annales de Biologie Clinique. 69 (6), 629-636 (2011).</li><li>Bolignano, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutrophil+gelatinase-associated+lipocalin+(NGAL)+as+a+marker+of+kidney+damage.">Neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL) as a marker of kidney damage.</a> American Journal of Kidney Diseases. 52 (3), 595-605 (2008).</li><li>Kashyap, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+renal+atrophy+in+murine+2+kidney+1+clip+hypertension+is+strain+independent.">Development of renal atrophy in murine 2 kidney 1 clip hypertension is strain independent.</a> Research in Veterinary Science. 107, 171-177 (2016).</li><li>Anderson, W. P., Woods, R. L., Kline, R. L., Korner, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+haemodynamic+responses+to+unilateral+renal+artery+stenosis+in+conscious+dogs.">Acute haemodynamic responses to unilateral renal artery stenosis in conscious dogs.</a> Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology. 12 (3), 305-309 (1985).</li><li>Imanishi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+degree+of+renal+arterial+stenosis+that+causes+hypertension+in+dogs.">Critical degree of renal arterial stenosis that causes hypertension in dogs.</a> Angiology. 43 (10), 833-842 (1992).</li><li>Ziecina, R., Abramczyk, P., Lisiecka, A., Papierski, K., Przybylski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenal-renal+portal+circulation+contributes+to+decrease+in+renal+blood+flow+after+renal+artery+stenosis+in+rats.">Adrenal-renal portal circulation contributes to decrease in renal blood flow after renal artery stenosis in rats.</a> Journal of Physiology and Pharmacology. 49 (4), 553-560 (1998).</li><li>Johnson, J. A., Ichikawa, S., Kurz, K. D., Fowler, W. L., Payne, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pressor+responses+to+vasopressin+in+rabbits+with+3-day+renal+artery+stenosis.">Pressor responses to vasopressin in rabbits with 3-day renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology. 240 (6), 862-867 (1981).</li><li>Eirin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+glomerular+filtration+rate+after+renal+revascularization+correlate+with+microvascular+hemodynamics+and+inflammation+in+Swine+renal+artery+stenosis.">Changes in glomerular filtration rate after renal revascularization correlate with microvascular hemodynamics and inflammation in Swine renal artery stenosis.</a> Circulation: Cardiovascular Interventions. 5 (5), 720-728 (2012).</li><li>Ma, Z., Jin, X., He, L., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXCL16+regulates+renal+injury+and+fibrosis+in+experimental+renal+artery+stenosis.">CXCL16 regulates renal injury and fibrosis in experimental renal artery stenosis.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory. 311 (3), 815-821 (2016).</li><li>Cheng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+analysis+of+signaling+pathways+activated+in+a+murine+model+of+two-kidney,+one-clip+hypertension.">Temporal analysis of signaling pathways activated in a murine model of two-kidney, one-clip hypertension.</a> American Journal of Physiology-Renal Physiology. 297 (4), 1055-1068 (2009).</li><li>Wiesel, P., Mazzolai, L., Nussberger, J., Pedrazzini, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-kidney,+one+clip+and+one-kidney,+one+clip+hypertension+in+mice.">Two-kidney, one clip and one-kidney, one clip hypertension in mice.</a> Hypertension. 29 (4), 1025-1030 (1997).</li><li>Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+experimental+hypertension+in+mice.">Models of experimental hypertension in mice.</a> Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).</li></ol>

Yazarlar tarafından finansal veya başka türlü hiçbir çıkar çatışması beyan edilmez.

Renal arter darlığı, sekonder veya dirençli hipertansiyonun ve böbrek hasarının 1,29'unun önemli bir nedenidir. İki böbrek bir klip (2K1C) Goldblatt modeli, RAStenozise bağlı renovasküler hipertansiyonu1,17,18,19 incelemek için kullanılmıştır. Çeşitli hayvan modellerini kullanan bir dizi önceki çalışma, renal art...

Renal arter darlığı (RAStenosis), 65 yaş üstü kişilerin yaklaşık% 6'sını ve koroner veya periferik vasküler hastalığı olan kişilerin% 40'ına kadarını etkileyen inatçı bir sorundur 1,2. Hastalık için mevcut tedaviler sınırlıdır; Bu nedenle, renovasküler hipertansiyonu veya RAStenosis'in neden olduğu dirençli hipertansiyonu tedavi etmek için yeni tedavilerin geliştirilmesine kritik bir ihtiyaç vardır. Renin anjiyotensin aldosteron sistemi (RAAS), RAStenozise bağlı hipertansiyon veya renovasküler hipertansiyonun patogenezinde rol oynayan anahtar yoldur 3,4. ACE inhibitörleri veya anjiyotensin reseptör blokerleri gibi RAAS'ı hedef alan bilinen tedaviler hipertansiyonu hafifletir, ancak böbrek yetmezliği ve hiperkalemiiçin yakından incelenmelidir 5,6,7. Renin, RAAS'taki hız sınırlama adımını katalize eder; anjiyotensinojeni anjiyotensin I'e dönüştürür. Aterosklerozda plak oluşumu, renin sekresyonunu yönlendiren renal arterin daralmasına neden olarak renovasküler hipertansiyon ve böbrek hasarı ile sonuçlanır8. Bir dizi çalışma, insanlarda renovasküler hipertansiyon sırasında oksidatif stres düzeylerinin arttığını bildirmiştir; bunlar, iki böbrek bir klip (2K1C) fare modelinin yanı sıra diğer hipertansif hayvan modelleri 2,9,10,11,12,13,14,15,16 ile doğrulanmıştır. . RAStenozise bağlı renovasküler hipertansiyon sırasında renin ekspresyon kontrolünün moleküler mekanizması iyi anlaşılmamıştır ve daha fazla araştırma gerektirmektedir.
RAStenosis'i güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde özetleyen deneysel hayvan modelleri, yeni tedavilerin geliştirilmesi için renin ekspresyon kontrolünün hücresel ve moleküler mekanizmalarının aydınlatılmasında önemlidir. 2K1C fare modeli, renovasküler hipertansiyonun patogenezini incelemek için iyi kurulmuş bir deneysel modeldir17,18,19,20. Bu model, 17,20,21 numaralı bir klips kullanılarak renal arterin daralmasıyla üretilir, bu nedenle renin ekspresyonunda ve hipertansiyonda 17,19,20,21'de bir artışa neden olan renal arter tıkanıklığı üretir. Bununla birlikte, hayvan modellerinde renal arter darlığı oluşturmak için adım adım bir prosedürü tanımlayan teknik raporlar mevcut değildir.
Geleneksel U-şekilli gümüş klipsler, poliüretan tüpler ve diğer klipsler, renal arter darlığını indüklemek için renal arteri daraltmak için kullanılmıştır. Bazı çalışmalar, klibin tasarımının ve malzemesinin, 2K1C hayvan modeli ile güvenilir ve tekrarlanabilir veriler elde etmek için kritik öneme sahip olduğunu göstermiştir. Lorenz ve ark.'ya göre, geleneksel U-tasarımlı gümüş klipslerin kullanımı, düşük bir hipertansiyon başarı oranına neden olur (%40-60)21. Klips tasarımı nedeniyle, renal arter lateral olarak bastırılır, birkaç daralmayı tetikler ve renal arterden çıkma olasılığı daha yüksektir. Gümüş dövülebilirliği ve sünekliği, klips genişliklerinde değişikliklere izin verebilir; bu nedenle, fareler arasında farklı hipertansiyon seviyelerine neden olur. Klips üzerindeki gümüş dioksitler perivasküler inflamasyona, intimal proliferasyona ve doku granülasyonuna neden olarak renal arter çapı22'yi değiştirebilir. Geleneksel U-design gümüş klips ile elde edilen hipertansiyon seviyelerindeki değişkenlik nedeniyle, Warner ve ark. ve Lorenz ve ark., farelerde renal arter darlığını başlatmak için yuvarlak tasarımlı bir poliüretan tüpü başarıyla kullanmış ve iki böbrek bir klips hayvan modeli 20,21'in daha güvenilir ve tutarlı bir indüksiyonunu sağlamıştır.
Bu yazıda, renal arteri daraltmak için poliüretan tüpü kullanarak, farelerde deneysel RAStenoz oluşturmak için cerrahi bir protokol tanımlanmıştır. Poliüretan yuvarlak tasarımlı manşet, farede darlık oluşturmak için daha tekrarlanabilir, güvenilir ve düşük maliyetli bir klipstir. Bu deneysel modelin amacı, renal arter darlığı sırasında renin ekspresyon kontrolünün moleküler ve hücresel mekanizmasını incelemek ve tanımlamaktır. RAStenosis fareleri modelinin başarısını, renin ekspresyonu ve böbrek hasarı belirteci nötrofil jelatinaz ile ilişkili lipokalini (N-GAL) ölçerek doğruladık.

<table><tbody><tr><td>Diet Gel</td><td>Clear H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O</td><td>Diet-Gel 76A</td><td>Surgery recovery diet</td></tr><tr><td>EMC Heated Hard pad</td><td>Hallowell</td><td>000A2788B</td><td>Heating pads were used to keep mice warm</td></tr><tr><td>Ethilon Nylon Suture</td><td>Ethicon</td><td>662G</td><td>4-0 (1.5 metric), This suture was used to close the peritoneum, and skin</td></tr><tr><td>Ethilon Nylon Suture</td><td>Ethicon</td><td>2815 G</td><td>8-0 (0.4 metric), This suture was used to close cuff to tie and constrict the artery</td></tr><tr><td>Germinator 500</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>GER 5287</td><td>Sterilize surgical tools between surgeries</td></tr><tr><td>Ketoprofen</td><td>Zoetis</td><td>Ketofen</td><td>Painkiller</td></tr><tr><td>Polyurethane</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-025</td><td>This tube was used to initiate stenosis</td></tr><tr><td>Povidone-iodine antiseptic swabsticks</td><td>Medline</td><td>MDS093901</td><td>It was applied after hair removal and surgery on the skin</td></tr><tr><td>Reflex 7 Clip Applier</td><td>Roboz Surgical Instrument Co</td><td>204-1000</td><td>This clip applier was used to apply clip in case one or more sutures went off</td></tr><tr><td>Sterile towel drapes</td><td>Dynarex</td><td>4410</td><td>It was used as a bedsheet for mice during surgery</td></tr><tr><td>Triple antibiotic ointment</td><td>Medi-First</td><td>22312</td><td></td></tr><tr><td>Water pump</td><td>Stryker</td><td>T/pump Professionals</td><td>Used to warm and circulate water in the heating hard pad to keep mice warm during and post-surgery</td></tr></tbody></table>

a modified two kidney one clip mouse model of renin regulation in renal artery stenosis

Renal arter darlığı, renin anjiyotensin aldosteron sisteminin (RAAS) aşırı aktive olduğu koroner veya periferik vasküler hastalığı olan hastalarda sık görülen bir durumdur. Bu bağlamda, RAAS'ta hız sınırlayıcı proteaz olan renin ekspresyonunda ve salınımında bir artışı uyaran renal arterlerde daralma vardır. Renin ekspresyonunda ortaya çıkan artış, sıklıkla böbrek hasarı ve son organ hasarı ile ilişkili olan renovasküler hipertansiyonun bilinen bir sürücüsüdür. Bu nedenle, bu durum için yeni tedaviler geliştirmeye büyük ilgi vardır. Renal arter darlığında renin kontrolünün moleküler ve hücresel mekanizması tam olarak anlaşılamamıştır ve daha fazla araştırmayı gerektirmektedir. Farelerde renal arter darlığını indüklemek için, modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klip (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirilmiştir. Sağ böbrek vahşi tip farelerde stenozlandı ve sahte ameliyat edilen fareler kontrol olarak kullanıldı. Renal arter darlığı sonrası renin ekspresyonu ve böbrek hasarı saptandı. Böbrekler toplandı ve reninin protein ve mRNA ekspresyonunu belirlemek için taze korteksler kullanıldı. Bu hayvan modeli tekrarlanabilir ve renovasküler hipertansiyon ve böbrek hasarında rol oynayan patofizyolojik yanıtları, moleküler ve hücresel yolları incelemek için kullanılabilir.

Renal arter daralması, stenozlu böbrekte renin ekspresyonunu arttırırken, kontralateral böbrekte ekspresyonu baskılar. İki böbrek bir klip (2K1C) veya Goldblatt stenoz modeli, artmış renin ekspresyonuna ve böbrek hasarına neden olur. Bu, insanlarda tek taraflı renal arter darlığının en iyi temsili modeli olarak kabul edilmektedir.
Renin ve prorenin ekspresyonu (renin öncüsü) immünoblotlama kullanılarak ölçüldü. Veriler, renin ve prorenin ekspresyonunun stenozlu böbr...

Watch this Scientific Journal Video about A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis at JoVE.com

A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

Renal arter darlığını başlatmak için poliüretan tüp kullanılarak modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klips (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirildi ve renin ekspresyonunda ve böbrek hasarında artışa neden oldu. Burada, tekrarlanabilir ve tutarlı bir 2K1C fare modeli oluşturmak için manşetin renal arter üzerine hazırlanması ve yerleştirilmesi için ayrıntılı bir prosedür açıklıyoruz.

Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli

Renal artery stenosis is a common condition in patients with coronary or peripheral vascular disease where the renin angiotensin aldosterone system (RAAS) ...

a-modified-two-kidney-one-clip-mouse-model-renin-regulation-renal

Research

JoVE Journal

Medicine

4.6K Görüntüleme.  Vanderbilt University Medical Center. Renal arter darlığını başlatmak için poliüretan tüp kullanılarak modifiye edilmiş 2 böbrek 1 klips (2K1C) Goldblatt fare modeli geliştirildi ve renin ekspresyonunda ve böbrek hasarında artışa neden oldu. Burada, tekrarlanabilir ve tutarlı bir 2K1C fare modeli oluşturmak için manşetin renal arter üzerine hazırlanması ve yerleştirilmesi için ayrıntılı bir prosedür açıklıyoruz.

Video: A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

Use of a Hanging-weight System for Isolated Renal Artery Occlusion

In hospitalized patients, over 50% of cases of acute kidney injury (AKI) are caused by renal ischemia 1-3. A recent study of hospitalized patients revealed that only a mild increase in serum creatinine levels (0.3 to 0.4 mg/dl) is associated with a 70% greater risk of death than in persons without any increase 1. Along these lines, surgical procedures requiring cross-clamping of the aorta and renal vessels are associated with a renal failure rates of up to 30% 4. Similarly, AKI after cardiac surgery occurs in over 10% of patients under normal circumstances and is associated with dramatic increases in mortality. AKI are also common complications after liver transplantation. At least 8-17% of patients end up requiring renal replacement therapy 5. Moreover, delayed graft function due to tubule cell injury during kidney transplantation is frequently related to ischemia-associated AKI 6. Moreover, AKI occurs in approximately 20% of patients suffering from sepsis 6.The occurrence of AKI is associated with dramatic increases of morbidity and mortality 1. Therapeutic approaches are very limited and the majority of interventional trials in AKI have failed in humans. Therefore, additional therapeutic modalities to prevent renal injury from ischemia are urgently needed 3, 7-9. 
To elucidate mechanisms of renal injury due to ischemia and possible therapeutic strategies murine models are intensively required 7-13. Mouse models provide the possibility of utilizing different genetic models including gene-targeted mice and tissue specific gene-targeted mice (cre-flox system). However, murine renal ischemia is technically challenging and experimental details significantly influence results. We performed a systematic evaluation of a novel model for isolated renal artery occlusion in mice, which specifically avoids the use of clamping or suturing the renal pedicle 14. This model requires a nephrectomy of the right kidney since ischemia can be only performed in one kidney due to the experimental setting. In fact, by using a hanging-weight system, the renal artery is only instrumented once throughout the surgical procedure. In addition, no venous or urethral obstruction occurs with this technique. We could demonstrate time-dose-dependent and highly reproducible renal injury with ischemia by measuring serum creatinine. Moreover, when comparing this new model with conventional clamping of the whole pedicle, renal protection by ischemic preconditioning is more profound and more reliable. Therefore his new technique might be useful for other researchers who are working in the field of acute kidney injury.

A precise murine model for acute kidney injury (AKI) due to ischemia is an important tool to investigate acute kidney injury and possibly find therapeutic tools to treat renal injury. The hanging weight system offers a tool for immediate and reliable renal artery occlusion and reperfusion without causing renal congestion.

İzole Renal Arter Tıkanıklığı Asılı ağırlık Sistemi

In hospitalized patients, over 50% of cases of acute kidney injury (AKI) are caused by renal ischemia 1-3. A recent study of hospitalized patients ...

Tıp

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable during renal transplantation. Experimental models that accurately and reproducibly recapitulate renal IRI are crucial in dissecting the pathophysiology of AKI and the development of novel therapeutic agents. Presented here is a mouse model of renal IRI that results in reproducible AKI. This is achieved by a midline laparotomy approach for the surgery with one incision allowing both a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia of the left kidney. By careful monitoring of the clamp position and body temperature during the period of ischaemia this model achieves reproducible functional and structural injury. Mice sacrificed 24 hr&#160;following surgery demonstrate loss of renal function with elevation of the serum or plasma creatinine level as well as structural kidney damage with acute tubular necrosis evident. Renal function improves and the acute tissue injury resolves during the course of 7 days following renal IRI such that this model may be used to study renal regeneration. This model of renal IRI has been utilized to study the molecular and cellular pathophysiology of AKI as well as analysis of the subsequent renal regeneration.

The mouse model of renal ischaemia reperfusion injury described here comprises of a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia that results in acute kidney injury. This model uses a midline laparotomy approach with all steps performed via one incision.

Renal İskemi Reperfüzyon Hasarı: Yaralanma Fare Modeli ve Rejenerasyon

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

Transcutaneous Assessment of Renal Function in Conscious Rodents

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and time-consuming. In addition, serial blood or urine samples are required, with the associated stress for the experimental animals. A recent technique significantly reduces the investment in time and resources, minimizing the invasiveness and the animal stress, but being equally valid as the traditional approaches. The method measures transcutaneously renal function. Using an optical device and the exogenous renal marker fluorescein isothiocyanate (FITC)-sinistrin, this technique is capable of measuring the elimination kinetics of the marker through the skin. With neither blood nor urine samples nor the associated laboratory assays needed, the results of the transcutaneous measurement are almost instantaneously available. The method has been already validated in different species and successfully applied in several models of renal pathology. Moreover, due to its minimally invasive characteristics, it is suitable for sequential measurements within the same animal. Here is provided a detailed protocol to carry out the transcutaneous assessment of renal function in rodents.

Determination of glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional procedures to measure this parameter are cumbersome and require a large investment of time. Here we describe a faster and minimally invasive method to determinate GFR transcutaneously.

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Glomerular filtration rate (GFR) is the gold standard to assess overall kidney function. However, traditional methods to evaluate GFR are cumbersome and ...

An Effective Mouse Model of Unilateral Renal Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models are the only available resources that mimic the complexities of the IRI-associated damage encountered in vivo. This paper describes an effective mouse model of unilateral renal IRI that delivers highly reproducible data. Ischemia is induced by occluding the right renal pedicle for 30 min followed by reperfusion. In addition to the surgical procedure, a sequential overview of the expected physiological and histopathological changes following renal IRI will be provided by comparing data from seven different reperfusion times (4 h, 8 h, 16 h, 1 day, 2 days, 4 days, and 7 days). Critical data for planning experiments ahead, such as mean surgical time, average anesthetic consumption, and body weight changes over time, will be shared. This work will help researchers implement a reliable renal IRI model and select the appropriate reperfusion time that aligns with their intended investigative goals.

Renal ischemia-reperfusion injury is associated with high morbidity and mortality in hospitalized patients. Here, we present a simple and effective mouse model of unilateral renal ischemia-reperfusion injury and provide a sequential overview of representative pathological changes observed in the kidney.

Tek Taraflı İskemi-Reperfüzyon Hasarının Etkili Bir Fare Modeli

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models ...

Improved Renal Denervation Mitigated Hypertension Induced by Angiotensin II Infusion

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the regulatory mechanism of RDN on hypertension remains elusive. Thus, it&#39;s essential to establish a simpler RDN model in mice. In this study, osmotic mini pumps filled with Angiotensin II were implanted in 14-week-old C57BL/6 mice. One week after the implantation of the mini-osmotic pump, a modified RDN procedure was performed on bilateral renal arteries of the mice using phenol. Age-sex-matched mice were given saline and served as sham group. Blood pressure was measured at baseline and every week subsequently for 21 days. Then, renal artery, abdominal aorta and heart were collected for histological examination using H&#38;E and Masson staining. In this study, we present a simple, practical, repeatable, and standardized RDN model, which can control hypertension and alleviate cardiac hypertrophy. The technique can denervate peripheral renal sympathetic nerves without renal artery damage. Compared to previous models, the modified RDN facilitates the study of the pathobiology and pathophysiology of hypertension.

Here, we present a protocol for renal sympathetic denervation (RDN) in mice with hypertension induced by Angiotensin II infusion. The procedure is repeatable, convenient and allows to study the regulatory mechanisms of RDN on hypertension and cardiac hypertrophy.

Anjiyotensin II İnfüzyonu ile İndüklenen Geliştirilmiş Renal Denervasyon Azaltılmış Hipertansiyon

The benefits of renal sympathetic denervation (RDN) on blood pressure have been proved in a large number of clinical trials in recent years. However, the ...

A Murine Model of Hemodialysis Access-Related Hand Dysfunction

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement therapies such as hemodialysis continues to increase. Autogenous arteriovenous fistula (AVF) placement remains a primary vascular access option for ESRD patients. Unfortunately, approximately half of the hemodialysis patients experience dialysis access-related hand dysfunction (ARHD), ranging from subtle paresthesia to digital gangrene. Notably, the underlying biologic drivers responsible for ARHD are poorly understood, and no adequate animal model exists to elucidate the mechanisms and/or develop novel therapeutics for the prevention/treatment of ARHD. Herein, we describe a new mouse model in which an AVF is created between the left common iliac artery and vein, thereby facilitating the assessment of limb pathophysiology. The microsurgery includes vessel isolation, longitudinal venotomy, creation of arteriovenous anastomosis, and venous reconstruction. Sham surgeries include all the critical steps except for AVF creation. Iliac AVF placement results in clinically relevant alterations in central hemodynamics, peripheral ischemia, and impairments in hindlimb neuromotor performance. This novel preclinical AVF model provides a useful platform that recapitulates common neuromotor perturbations reported by hemodialysis patients, allowing researchers to investigate the mechanisms of ARHD pathophysiology and test potential therapeutics.

This protocol details the surgical steps of murine common iliac arteriovenous fistula creation. We developed this model to study hemodialysis access-related limb pathophysiology.

Hemodiyaliz Erişimi ile İlişkili El Disfonksiyonunun Bir Murine Modeli

Chronic kidney disease is a major public health problem, and the prevalence of end-stage renal disease (ESRD) requiring chronic renal replacement ...

The Mouse Isolated Perfused Kidney Technique

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a prerequisite for studying the physiology of the isolated organ and for many innovative applications that may be possible in the future, including perfusion decellularization for kidney bioengineering or the administration of anti-rejection or genome-editing drugs in high doses to prime the kidney for transplantation. During the time of the perfusion, the kidney can be manipulated, renal function can be assessed, and various pharmaceuticals administered. After the procedure, the kidney can be transplanted or processed for molecular biology, biochemical analysis, or microscopy.
This paper describes the perfusate and the surgical technique needed for the ex vivo perfusion of mouse kidneys. Details of the perfusion apparatus are given and data are presented showing the viability of the kidney&#39;s preparation: renal blood flow, vascular resistance, and urine data as functional, transmission electron micrographs of different nephron segments as morphological readouts, and western blots of transport proteins of different nephron segments as molecular readout.

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. The buffers and surgical technique are described in detail.

Fare İzole perfüze Böbrek Tekniği

The mouse isolated perfused kidney (MIPK) is a technique for keeping a mouse kidney under ex vivo conditions perfused and functional for 1 hr. This is a ...

Biyoloji

A Mouse 5/6th Nephrectomy Model That Induces Experimental Uremic Cardiomyopathy

Chronic kidney disease (CKD) is a great risk factor for cardiovascular disease events and mortality, and progressively develops to the clinical phenotype called "uremic cardiomyopathy". We describe here an experimental CKD mouse model, named 5/6th partial nephrectomy (PNx) with pole ligation, which developed uremic cardiomyopathy at four weeks post-surgery. This PNx model was performed by a two-step surgery. In step-one surgery, both poles of the left kidney were ligated. In step-two surgery, which was performed 7 days after the step-one surgery, the right kidney was removed. For the sham surgery, the same surgery procedures were performed but without pole ligation of the left kidney or removal of the right kidney. The surgical procedures are easier and less time-consuming, compared to other methods. However, the remnant functional renal mass is not as easily controlled as the renal artery ligation. Four weeks after surgery, in comparison with the sham-operated mice, the PNx mice developed impaired renal function, anemia, cardiac hypertrophy, cardiac fibrosis, and decreased heart systolic and diastolic function.

A Mouse 5/6th Nephrectomy Model That Induces Experimental Uremic Cardiomyopathy

This manuscript provides a detailed two-step surgical procedure to perform mouse 5/6th partial nephrectomy (PNx) with pole ligation. Four weeks after surgery, in comparison with sham-operated mice, the PNx mice developed impaired renal function, anemia, cardiac hypertrophy, cardiac fibrosis, and decreased heart systolic and diastolic function.

Deneysel üremik kardiyomiyopati indükler bir fare 5/6inci nefrektomi modeli

Chronic kidney disease (CKD) is a great risk factor for cardiovascular disease events and mortality, and progressively develops to the clinical phenotype ...

<meta charset="utf8"></head><body>Böbrek Yetmezliği ve Malperfüzyon için Sıçanlarda Standardize 5/6 Nefrektomi

5/6 Nephrectomy Using Sharp Bipolectomy Via Midline Laparotomy in Rats

Chronic kidney disease (CKD) affects over 10% of the global population, amounting to more than 800 million individuals worldwide. The advances in the treatment of CKD have had a significant impact on patient outcomes. While in the past, CKD was often considered a death sentence, with many patients succumbing to the complications of end-stage renal disease, it is now increasingly being managed as a chronic condition with the availability of dialysis and kidney transplantation, as well as new pharmaceutical developments such as SGLT2 inhibitors or nonsteroidal mineralocorticoid receptor antagonists. 
Yet, there continues to be a growing demand for further exploration into the pathophysiological processes and potential therapeutic interventions. Reliable biological models play a crucial role in facilitating this research. Given the multifaceted nature of renal disease, which encompasses not only cell biology but also vascular microanatomy and endocrine signaling, an appropriate model must possess a level of biological complexity that only an animal model can offer, rendering rodents an obvious choice.
This manuscript, therefore, provides an intricate, systematic protocol for surgically reducing renal parenchyma through midline laparotomy and combined total and partial nephrectomy in rats for survival as well as non-survival applications. It emphasizes the critical role of precise surgical techniques in ensuring consistent and reliable outcomes. Prime examples of potential applications for this model include biomolecular and pharmaceutical studies as well as the development of innovative intraoperative imaging modalities, such as hyperspectral imaging, to objectively visualize and differentiate renal malperfusion.

<meta charset="utf8"></head><body>Sıçanlarda Orta Hat Laparotomi ile Keskin Bipolektomi Kullanılarak 5/6 Nefrektomi

This manuscript introduces a standardized protocol for a 5/6 nephrectomy by sharp bipolectomy via midline laparotomy in a rat model, aiming to induce a state of renal insufficiency via renal parenchyma reduction with a great degree of methodical precision and low risk of technical error.

Sıçanlarda Orta Hat Laparotomi ile Keskin Bipolektomi Kullanılarak 5/6 Nefrektomi

Chronic kidney disease (CKD) affects over 10% of the global population, amounting to more than 800 million individuals worldwide. The advances in the ...

Renal Arter Darlığında Renin Regülasyonunun Modifiye İki Böbrek Bir Klipsli Fare Modeli

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

İzole Renal Arter Tıkanıklığı Asılı ağırlık Sistemi

Renal İskemi Reperfüzyon Hasarı: Yaralanma Fare Modeli ve Rejenerasyon

Bilinçli Kemirgenler Böbrek Fonksiyon Transkutanöz Değerlendirmesi

Tek Taraflı İskemi-Reperfüzyon Hasarının Etkili Bir Fare Modeli

Anjiyotensin II İnfüzyonu ile İndüklenen Geliştirilmiş Renal Denervasyon Azaltılmış Hipertansiyon

Hemodiyaliz Erişimi ile İlişkili El Disfonksiyonunun Bir Murine Modeli

Fare İzole perfüze Böbrek Tekniği

Deneysel üremik kardiyomiyopati indükler bir fare 5/6^inci nefrektomi modeli

Sıçanlarda Orta Hat Laparotomi ile Keskin Bipolektomi Kullanılarak 5/6 Nefrektomi

Sıçanlarda Orta Hat Laparotomi ile Keskin Bipolektomi Kullanılarak 5/6 Nefrektomi