Bu protokol, doğru, tekrarlanabilir, klinik öncesi radyasyon tedavisi deneyleri sağlamak için çeşitli radyo biyolojik ve radyasyon dozimetrek metodolojilerinin yeni bir kombinasyonudur. Bu yöntemler deneysel koşulları ulusal doz standartlarına bağlar ve radyasyon tedavisi dozlarıyla eşleşen dozların doğru ölçümlerine izin verir. Tekrarlanabilir radyoterapi deneylerinin tasarımına odaklanan bu protokol, araştırmacılara çevirisel önemi yüksek çalışmalar yapmak için gerekli araç ve yöntemleri sunmaktadır.
Dozimetrik kalibrasyon protokolleri, özellikle tıp fiziği geçmişi olmayanlar için acemiler için zor olabilir. Bu deneyleri ilk denerken bir radyasyon terapisi fizikçisi danışmanızı öneririz. Bu protokoldeki teknikler hem radyasyon fizikçileri hem de biyomedikal araştırmacılar için ortaktır.
Ancak, bunlardan bazıları genellikle birlikte kullanılmaz. Uygun doz çıkışını belirlemek için, ışınlayıcıyı radyasyoni 220 tepe kilovoltajda ve 13 miliamperde, kaynaktan 35 santimetreye yerleştirilmiş 17 ila 17 santimetre açık alanla ayarlayın. Kirişi geniş bir odakla 0,15 milimetre bakır filtre ile filtreleyin ve bir santimetre plakayı, iki santimetre plakayı, iki santimetrelik levhayı iyonlaşma odası ve bir santimetre plaka ile hizalayın.
Hayalet yığını ayarladıktan sonra, iyonlaşma odasını hayaletin içine yerleştirin ve yığınları, uygun şekilde düzleştirildiğinde kaynağın yüzey mesafesine 33 santimetre olacak şekilde ayarlayın. Daha sonra bu ölçümlerin izomerkezden 35 santimetre uzaklıktaki iyonlaşma odasına doğru şekilde yerleştirildiklerinden emin olun. Bir radyo kromik film kalibrasyon eğrisi oluşturmak için, aynı boyut ve yönde birkaç ek film parçası hazırlayın ve filmi katı su fantom yığınına iki santimetre derinliğe yerleştirin.
Işınlanmaya başlamak için, dört santimetrelik katı suyun üzerine bir parça film yerleştirin ve kalan iki santimetrelik katı suyu filmlerin üzerine yerleştirin. Pozlama sonrası film taramaları gerektirdikten sonra, görüntü dosyalarını tiff dosya biçiminde ImageJ'e içe aktarın ve Görüntü, Renk'i seçin ve Kanalları Böl'ü seçin. Yalnızca kırmızı görüntü kanalında, ilgi çekici bir bölge çizmek için dikdörtgen aracını kullanın ve ortalama değerlerin sonuçlar penceresinden yazılmasına izin vermek için Ctrl+M tuşlarına basın.
Pozlanmamış ve açığa çıkan filmler için tüm piksel değerleri elde edildikten sonra, belirtildiği gibi denklemi kullanarak net optik yoğunluğu hesaplayın, ardından net optik yoğunluğu filmin maruz kaldığı doza karşı çizin ve çizimi ikinci dereceden bir eğriyle sığdırın. Klonojenik bir test yoluyla belirli kanser hücre hatları için alfa / beta değerini belirlemek için, her plakanın hayatta kalma fraksiyonunun hesaplanmasına izin vermek için her tedavi grubundaki sonuç koloni sayısını sayın, ardından sağkalım fraksiyonunun doğal kütüpünü verilen ilgili doza karşı çizin ve eğriyi ikinci dereceden bir işlevle sığdırın. Değişken deneysel tasarımlar için belirli doz çıktısını belirlemek için, istenen alan boyutunu ve kaynaktan uzaklığı seçin ve gerektiğinde birikme ve geri atma sağlamak için katı su hayaletlerini kullanın, film parçasını deneysel tasarımı en iyi gösteren yönde konumlandırın.
Doz daha sonra doz için film kalibrasyon eğrisi kullanılarak filmin net optik yoğunluğundan belirlenebilir. Fare tedavisi taşıyan bir tümör için uygun ışın konumunu belirlemek için, pedal refleksine yanıt eksikliğini onayladıktan sonra, kolimasyon olmadan deneysel farenin bir radyogramını elde etmek için yerleşik bir portal kamera ve alüminyum filtre kullanın, ardından yerinde kolimasyon içeren bir radyogram elde edin ve ışın konumlandırmasını belirlemek için ImageJ'deki radyogramları kaplayın. Gösterildiği gibi kalibrasyon eğrisi kullanılarak, gerekli deneysel ışınlama sürelerini tahmin etmek için kullanılabilecek iki film örneği oluşturulabilir.
Bu görüntülerin yer paylaşımı, incelenmiş radyasyon ışınının tedavi edilen küçük hayvana göre tam konumunu ortaya çıkacaktır. Başarılı doz birikimi daha sonra sadece bu temsili analizde tedavi edilen yarımkürede gözlenen pozitif gama-H2AX lekeleme ile gösterildiği gibi doğrulanabilir. Işınlayıcı çıkışını belirlemeden film kalibrasyon eğrisi oluşturmaya geçerken ve ideal deneysel tasarımınız için doz belirlerken tutarlı kalmak kritik öneme sahiptir.
Bu protokolleri takip etmek, araştırmacıların klinik olarak uygulanabilir çok çeşitli radyobiyolojik soruları klinik öncesi bir ortamda incelemelerini sağlar. Bu sorular hasta sonuçlarının daha iyi anlaşılmasına neden olabilir. Bu protokol bağımsız yeni bir teknik değil.
Bununla birlikte, bu metodolojilerin birleştirilmesi doğrudan klinik alaka düzeyine yol açacak ve klinikte görülen dozların sonuçları hakkında fikir verecektir.
