이 프로토콜은 정확하고 재현 가능한 전임상 방사선 요법 실험을 보장하기 위해 여러 방사성 생물학적 및 방사선 방법론의 새로운 조합입니다. 이러한 방법은 실험 조건을 국가 투여 량 표준에 연결하고 방사선 처리 량과 일치하는 용량의 정확한 측정을 허용합니다. 재현 가능한 방사선 요법 실험의 설계에 초점을 맞춘 이 프로토콜은 연구자들이 높은 번역 관련성을 가진 연구를 수행하는 데 필요한 도구와 방법을 제공합니다.
Dosimetric 교정 프로토콜은 초보자, 특히 의학 물리학에 대한 배경이없는 사람들에게 어려울 수 있습니다. 우리는 이 실험을 처음 시도할 때 방사선 치료 물리학자를 상담하는 것이 좋습니다. 이 프로토콜에 있는 기술은 방사선 물리학자 및 생물 의학 연구원 모두에게 일반적입니다.
그러나, 이들 중 일부는 일반적으로 조합에서 활용 되지 않습니다. 적절한 용량 출력을 결정하기 위해, 조사기를 설정하여 220 피크 킬로전압및 13 밀리암페어에서 17 x 17센티미터 의 오픈 필드위치 소스에서 35cm를 배치합니다. 0.15 밀리미터 구리 필터로 빔을 넓은 초점으로 필터링하고 1센티미터 슬래브, 2센티미터 슬래브, 2센티미터 슬래브를 이온화 챔버와 1센티미터 슬래브를 정렬합니다.
팬텀 스택을 설정한 후, 이온화 챔버를 팬텀에 삽입하고 소스가 표면 거리로 적절하게 수평을 잡을 때 33cm가 되는 스택을 조정한다. 그런 다음 이러한 측정값이 동위 원소에서 35cm의 이온화 챔버 내에 올바르게 배치되어 있는지 확인합니다. 라디오 크로믹 필름 보정 곡선을 만들려면 동일한 크기와 방향의 필름 을 몇 개 추가로 준비하고 필름을 고체 물 팬텀 스택의 2센티미터 깊이에 놓습니다.
조사를 시작하려면, 고체 물의 4 센티미터 의 상단에 필름의 조각을 배치하고 영화 위에 고체 물의 나머지 2 센티미터를 배치합니다. 노출 후 필름 스캔을 요구한 후 이미지 파일을 tiff 파일 형식으로 ImageJ로 가져오고 이미지, 색상 및 분할 채널을 선택합니다. 빨간색 이미지 채널에서만 사각형 도구를 사용하여 관심 영역을 그리고 Ctrl+M을 눌러 평균 값을 결과 창에서 전사할 수 있도록 합니다.
모든 픽셀 값이 노출되지 않은 필름에 대해 얻어지면, 표시된 방정식을 사용하여 순 광학 밀도를 계산한 다음 필름이 노출된 용량에 대해 순 광학 밀도를 플롯하고 이차 곡선으로 플롯에 맞춥니다. clonogenic 분석기를 통해 특정 암 세포주에 대한 알파/베타 값을 결정하기 위해 각 처리 군에서 결과된 콜로니 수를 계산하여 각 플레이트의 생존 분획을 계산한 다음, 전달된 해당 용량에 대한 생존 분수의 자연 로그를 플롯하고 이차 함수로 곡선에 맞춥시게 한다. 가변 실험 설계에 대한 특정 용량 출력을 결정하기 위해, 원에서 원하는 필드 크기와 거리를 선택하고 필요에 따라 축적 및 백스캐터를 제공하기 위해 고체 물 팬텀을 사용하여 실험 설계를 가장 잘 묘사하는 방향으로 필름 조각을 배치합니다.
투여량은 그 때 투여량에 대한 필름 교정 곡선을 사용하여 필름의 순 광학 밀도로부터 결정될 수 있다. 종양 베어링 마우스 치료에 적합한 빔 위치를 결정하기 위해 페달 반사에 대한 반응의 부족을 확인한 후, 온보드 포털 카메라와 알루미늄 필터를 사용하여 충돌 없이 실험 마우스의 방사선 사진을 얻은 다음, 이미지J에서 충돌과 함께 방사선 사진을 획득한 다음 빔 포지셔닝을 결정한다. 입증된 바와 같이 교정 곡선을 활용하여 필요한 실험 조사 시간을 추정하는 데 사용할 수 있는 두 개의 필름 샘플을 생성할 수 있습니다.
이러한 이미지를 오버레이하면 처리되는 작은 동물을 기준으로 충돌된 방사선 빔의 정확한 위치를 알 수 있습니다. 성공적인 투여량 증착은 이 대표적인 분석에서만 처리된 반구 내에서 관찰된 양양성 감마-H2AX 염색에 의해 예시된 바와 같이 확인할 수 있다. 조사기 출력을 결정할 때 필름 교정 곡선을 생성하는 것으로 이동할 때 일관된 유지를 유지하고 이상적인 실험 설계에 대한 용량을 결정할 때 매우 중요합니다.
이 프로토콜에 따라 연구원은 전임상 환경에서 임상적으로 적용 가능한 방사선 학적 질문의 다양한 연구 할 수 있습니다. 이 질문은 참을성 있는 결과의 더 나은 이해로 이끌어 낼 수 있습니다. 이 프로토콜은 독립 실행형 새 기술이 아닙니다.
그러나, 이러한 방법론을 결합 하는 직접 임상 관련성으로 이어질 것입니다 및 클리닉에서 본 복용량에 대 한 결과에 대 한 통찰력을 제공.
