פרוטוקול זה הוא שילוב חדשני של מספר מתודולוגיות דוזימטריות רדיו ביולוגיות וקרינה כדי להבטיח ניסויים מדויקים, הניתנים לשחזור והקרנות פרה-קוליניות. שיטות אלה מקשרות תנאים ניסיוניים לתקני מינון לאומיים ומאפשרות מדידות מדויקות של מינונים התואמים מינונים לטיפול בקרינה. תוך התמקדות בתכנון ניסויי הקרנות הניתנים לשחזור, פרוטוקול זה מספק לחוקרים את הכלים והשיטות הדרושים לביצוע מחקרים בעלי רלוונטיות תרגום גבוהה.
פרוטוקולי כיול דוסימטרי יכולים להיות מאתגרים עבור טירונים, במיוחד עבור אלה ללא רקע בפיזיקה רפואית. אנו ממליצים להתייעץ עם פיזיקאי הקרנות כאשר מנסים לראשונה את הניסויים האלה. הטכניקות בפרוטוקול זה משותפות הן לפיזיקאי קרינה והן לחוקרים ביו-רפואיים.
עם זאת, חלק מהם אינם מנוצלים בדרך כלל בשילוב. כדי לקבוע את תפוקת המינון המתאימה, הגדר את הקרינה לספק קרינה ב 220 קילובולג' שיא ו 13 מיליאמפר עם שדה פתוח 17 על 17 ס"מ ממוקם 35 ס"מ מהמקור. לסנן את הקרן עם מסנן נחושת 0.15 מילימטר עם מיקוד רחב וליישר את לוח סנטימטר אחד, לוח שני סנטימטרים, לוח שני סנטימטרים עם תא יינון ולוח סנטימטר אחד.
לאחר הגדרת מחסנית הפנטום, הכנס את תא היוניזציה לתוך הפנטום והתאם את הערימות כך שהמקור למרחק פני השטח יהיה 33 ס"מ כאשר הוא מפולס כראוי. לאחר מכן אשר כי מדידות אלה ממוקמות כראוי בתוך תא היוניזציה ב 35 ס"מ מן האיזוצנטרי. כדי ליצור עקומת כיול סרט כרומי רדיו, להכין כמה חתיכות נוספות של סרט באותו גודל וכיוון ומניחים את הסרט בעומק של שני סנטימטרים בערימת פנטום מים מוצקים.
כדי להתחיל את ההקרנה, מניחים פיסת סרט אחת על גבי ארבעה סנטימטרים של מים מוצקים ומניחים את שני הסנטימטרים הנותרים של מים מוצקים מעל הסרטים. לאחר דרישת סריקות סרט צילום לאחר החשיפה, יבא את קובצי התמונה לתוך ImageJ בתבנית קובץ טיפ ובחר תמונה, צבע ובחר פיצול ערוצים. בערוץ התמונה האדום בלבד, השתמש בכלי המלבן כדי לצייר אזור מעניין והקש Ctrl+M כדי לאפשר תעתיק של ערכי הממוצע מחלון התוצאות.
לאחר שכל ערכי הפיקסלים הושגו עבור הסרטים שלא נחשפו וחשופים, חשב את הצפיפות האופטית נטו באמצעות המשוואה כפי שצוין, ולאחר מכן התווה את הצפיפות האופטית נטו כנגד המינון שבו הסרט נחשף והתאים לעלילה עם עקומה ריבועית. כדי לקבוע את ערך אלפא / בטא עבור קווי תאים סרטניים ספציפיים באמצעות מבחני קלונוגני, לספור את המספר וכתוצאה מכך של מושבות בכל קבוצת טיפול כדי לאפשר חישוב של שבר ההישרדות של כל צלחת, ואז להתוות את היומן הטבעי של שבר ההישרדות נגד המינון המתאים נמסר ולהתאים את העקומה עם פונקציה ריבועית. כדי לקבוע את תפוקת המינון הספציפית עבור עיצובים ניסיוניים משתנים, בחר גודל שדה ומרחק רצויים מהמקור והשתמש בפנטומי מים מוצקים כדי לספק הצטברות ומפלט לפי הצורך, תוך מיקום פיסת הסרט בכיוון המתאר בצורה הטובה ביותר את העיצוב הניסיוני.
לאחר מכן ניתן לקבוע את המינון מהצפיפות האופטית נטו של הסרט באמצעות עקומת כיול הסרט עבור המינון. כדי לקבוע את מיקום הקרן המתאים לטיפול בעכבר נושא הגידול, לאחר אישור חוסר תגובה לרפלקס הדוושה, השתמש במצלמת פורטל מובנית ובמסנן אלומיניום כדי להשיג רדיוגרמה של העכבר הניסיוני ללא קולימיזציה, ולאחר מכן השג רדיוגרמה עם קולימיזציה במקום וכיסוי הרדיוגרמות ב- ImageJ כדי לקבוע את מיקום הקרן. תוך שימוש בעקומת הכיול כפי שהוכח, ניתן ליצור שתי דגימות פילם שניתן להשתמש בהן כדי להעריך את זמני ההקרנה הניסיוניים הנדרשים.
כיסוי תמונות אלה יחשוף את המיקום המדויק של קרן הקרינה הקולינרית ביחס לחיה הקטנה המטופלת. לאחר מכן ניתן לאשר תצהיר מינון מוצלח כפי שמודגם על ידי כתמי גמא-H2AX חיוביים שנצפו בחצי הכדור המטופל רק בניתוח מייצג זה. שמירה על עקביות בעת מעבר מקביעת פלט הקרנה ליצירת עקומת כיול סרט וכאשר קביעת המינון עבור העיצוב הניסיוני האידיאלי שלך היא קריטית.
ביצוע פרוטוקולים אלה מאפשר לחוקרים לחקור מגוון רחב של שאלות רדיוביולוגיות רלוונטיות קלינית בסביבה פרה-קלינית. שאלות אלה עשויות להוביל להבנה טובה יותר של תוצאות המטופל. הפרוטוקול הזה הוא לא טכניקה עצמאית חדשה.
עם זאת, שילוב מתודולוגיות אלה יוביל לרלוונטיות קלינית ישירה ולתת תובנות על התוצאות עבור מינונים לראות במרפאה.
