Pozitif uç-ekpiratuar basınçlı ventilasyonu dahil ettiğimiz açık göğüs yaklaşımımız, in vivo kardiyak fonksiyonu ve beta-adrenerjik stimülasyondaki artışı değerlendirmek ve analiz etmek için önemlidir. Prosedür, yükten bağımsız kardiyak fonksiyonun hem temel parametrelerini hem de genetiği değiştirilmiş farelerde veya müdahaleler üzerine beta-adrenerjik rezervi ele almak için kullanılabilir. Pedal refleksine yanıt eksikliğini doğruladıktan sonra, uyuşturulmuş farenin sol arka uzuvlarını% 70 etanol ile dezenfekte edin ve sol femoral damarı ortaya çıkarmak için bir kesi yapın.
Epigastrik arteri ve damarı bir koterle patlatın. Femoral damarı daha iyi görmek için, görüş alanı karın içinden bir dikiş ile yayılmıştır. Daha sonra, femoral damarı lige etmek için kateter erişimine distal bir dikiş yerleştirilir.
Femoral damarın altına bir dikiş geçirin ve delinme bölgesine bir düğüm kranial hazırlayın. 1 mililitrelik bir şırıngaya bağlı hazırlanmış bir mikro tüple uyluk damarını delin ve damar içindeki tüpü düğümlü dikişle sabitleyin. Herhangi bir sıvı kaybını önlemek için, %12,5 albümin ile desteklenmiş% 0,9 sodyum klorür, 15 mikroliter infüzyon oranında demlendirmek ve maruz kalan dokuyu önceden ısıtılmış% 0,9 sodyum klorür ile nemlendirmek için otomatik bir şırınga pompası kullanın.
Toraksa erişmek için toraksı %70 etanol ile durulayın ve xiphoid işleminin hemen altındaki deriyi inkübe edin. Pektoral kasları göğüs duvarından açıkça ayırın ve diyafram tamamen görünene kadar göğüs duvarının kesilmesini sağlamak için xiphoid işlemini kaldırmak için önseçim kullanın. Kardiyak apeksi ortaya çıkarmak için diyaframı aşağıdan inşize edin ve perikardları dikkatlice çıkarmak için önlük kullanın.
Sol tarafta sınırlı bir costotomi gerçekleştirin ve aşağı akış ön yük azaltmasına izin vermek için alt kaval damarının altına bir dikiş geçirin. 25 kalibrelik bir kavun kullanarak, kalp apeksini hafifçe delin ve tüm elektrotlar ventrikül içinde olana kadar canülleri basınç hacimli bir kateterle değiştirin. Daha sonra, dikdörtgen şekilli döngüler elde edilene kadar kateterin konumunu hafifçe ayarlayın.
Basınç hacmi döngüsü ölçümleri elde etmek için, ilgi çekici kardiyak fonksiyon parametrelerinin çevrimiçi bir analizini yapın ve sabit bir durum kardiyak fonksiyon elde edilene kadar bekleyin. Solunum cihazını son ekspirasyon pozisyonunda durdurun ve temel parametreleri kaydedin. 3 ila 5 saniye sonra, ön yük bağımsız parametreleri elde etmek için alt kaval damarının altındaki dikişi kaldırmak için ön ayak kullanın ve ventilatörü açın.
Hemodinamik parametreler stabilize olana kadar ikinci tıkanıklık için en az 30 saniye bekleyin. Ölçümü bazal koşullarda elde ettikten sonra, şırınna pompasına izoproterenol yüklü bir şırınna monte edin. Yeni bir sabit durum kardiyak fonksiyonu gözlemlenene kadar en az iki dakika bekleyin.
Solunum cihazını son ekspirasyon pozisyonunda durdurmadan ve temel parametreleri kaydetmeden önce. 3 ila 5 saniye sonra, önceden yük bağımsız parametreler elde etmek için alt kaval damarın altındaki dikişi kaldırın ve ikinci tıkanıklık için en az 30 saniye bekleyin. Ardından bir sonraki izoproterenol konsantrasyonu içeren şırınnayı monte edin ve taban çizgisini tekrarlayın ve bağımsız parametre kayıtlarını önceden yükleyin.
Paralel iletkenlik kalibrasyonu yapmak için, son izoproterenol doz-yanıt ölçümünden sonra, %15 sodyum klorür çözeltisi ile yüklü bir şırıngayı femoral kanüle bağlayın ve basınç hacmi döngüsü hafifçe sağa kayana kadar hipertonik çözeltinin 5 mikrolitresini dikkatlice demleyin. Solunum cihazını son kullanma tarihinde durdurmadan ve hemen% 15 sodyum klorürden oluşan 10 mikroliter bolus enjekte etmeden önce döngülerin sabit duruma dönmesini bekleyin. Ardından, basınç hacmi döngüsünün büyük ölçüde genişlemiş ve sağa kaydırılıp kaydırılmış olup olmadığını kontrol edin.
İletkenlik-hacim oranı gerçekleştirmek için, kateteri çıkarmadan önce hipertonik salin bolus tamamen seyreltilene kadar 5 dakika bekleyin ve atan kalbin sol ventrikülünden en az 600 mikrolitre kan almak için 21 kalibre kanül ile donatılmış 1 mililitrelik bir şırınga kullanarak. Daha sonra kanı, bilinen hacimli silindirlerle 37 santigrat derecelik bir su banyosunda önceden ısıtılmış bir kalibrasyon cuvette içine aktarın ve iletkenliğin kaydedilebilmesi için basınç hacmi kateterini merkezi olarak her silindire yerleştirin. Bu açık göğüs basıncı-hacim-döngü ölçüm yöntemi kullanılarak, kateter ventrikül içine doğru yerleştirilirse, tam bir kardiyak döngü dikdörtgen şeklinde bir basınç hacmi döngüsü ile temsil edilecektir.
Gösterildiği gibi, systole, her iki kalp kapakçığının da kapalı olduğu bir izovofimetrik kasılma aşaması ile başlar. Ventrikül basıncı aort basıncını aştığında, aort kapağı açılır ve fırlatma aşamasında aort içine kan pompalanır. Daha sonra, aort basıncı ventrikül basıncını aştığında, aort kapağı kapanır ve diyastole başlar.
İsovolumetrik gevşeme sırasında, atriyal basınç ventrikül basıncını aşana ve mitral kapak açılana kadar ventrikül basıncı düşer. Pasif diyastolik dolgu, son diyastolik basınç hacmi ilişkisi ile karakterize edilir, daha sonra bir sonraki kardiyak döngü başlayana kadar gerçekleşir. Pre yüklerden bağımsız olarak kardiyak fonksiyonu belirleyebildiğinden, basınç hacmi analizi kardiyak kontrtiabilitede kardiyak fonksiyon hakkında ayrıntılı bilgi sağlayabilir.
Örneğin, bu analizde izoproterenol ölçülen her kardiyak fonksiyon ve kardiyak kontrtinaklık parametresi üzerinde önemli bir etkiye neden oldu. Buna karşılık, izoproterenol konsantrasyonlarını artırarak diyastolik parametrelerde bir azalma gözlendi. Sol ventrikül içinde hassas kateter yerleşimi, eserler olmadan tekrarlanabilir döngüler elde etmek için çok önemlidir.
Kateter yerleşimini optimize etmek için açık göğüs yaklaşımını tercih ediyoruz. PV döngü ölçümlerini takiben, tedavilerin ve genetik değişikliklerin neden olduğu moleküler ve histopatolojik değişiklikleri tanımlamak için allometrik endisis belirlenebilir ve doku izole edilebilir. Bu teknik, fare modellerinde beta-adrenerjik rezervi normal ve patolojik koşullar altında analiz etmenin yolunu açmakta ve diğer uyaranları test etmek için bir şablon olarak kullanılabilir.