نهجنا مفتوح الصدر، الذي نقوم بتضمين التهوية مع ضغط نهاية الزفير الإيجابي، مهم لتقييم وتحليل وظيفة القلب في الجسم الحي، وزيادة التحفيز بيتا الأدرينالين. يمكن استخدام الإجراء لمعالجة كل من المعلمات الأساسية لوظيفة القلب المستقلة عن الحمل ، واحتياطيات بيتا الأدرينالين في الفئران المعدلة وراثيا أو عند التدخلات. بعد التأكد من عدم الاستجابة لرد الفعل دواسة، وتطهير الطرف الخلفي الأيسر من الماوس تخدير مع الإيثانول 70٪، وجعل شق لفضح الوريد الفخذ الأيسر.
انفجار الشريان الوريدي الوريدي والكواية. لرؤية الوريد الفخذي بشكل أفضل ، يمتد مجال الرؤية عن طريق خياطة عبر البطن. ثم، يتم وضع خياطة القاصي إلى وصول القسطرة، لligate الوريد الفخذي.
تمرير خياطة تحت الوريد الفخذي، وإعداد عقدة الجمجمة إلى موقع ثقب. ثقب الوريد الفخذي مع أنبوب صغير معدة تعلق على حقنة 1 ملليلتر وتأمين الأنبوب داخل السفينة مع خياطة معقود. لمواجهة أي فقدان السوائل، استخدم مضخة حقنة أوتوماتيكية لبث كلوريد الصوديوم 0.9٪، تكملها 12.5٪الألبومين، بمعدل ضخ 15 ميكرولتر، وهيدرات الأنسجة المكشوفة مع كلوريد الصوديوم قبل الحارة 0.9٪.
للوصول إلى الصدر، شطف الصدر مع 70٪ الإيثانول، وincise الجلد فقط تحت عملية xiphoid. فصل العضلات الصدرية بصراحة من جدار الصدر، واستخدام ملقط لرفع عملية xiphoid للسماح للجدار الصدر لقطع، حتى الحجاب الحاجز مرئيا تماما. انسي الحجاب الحاجز من الأسفل لفضح قمة القلب ، واستخدام ملقط لإزالة التامور بعناية.
إجراء استئصال تكلفة محدود على الجانب الأيسر، وتمرير خياطة تحت الوريد التجويف السفلي للسماح بالحد من التحميل المسبق المصب. باستخدام قنية قياس 25، ثقب بلطف قمة القلب، واستبدال القنية مع قسطرة حجم الضغط، حتى جميع الأقطاب الكهربائية داخل البطين. ثم، ضبط بلطف موقف القسطرة حتى يتم الحصول على حلقات مستطيلة الشكل.
للحصول على قياسات حلقة حجم الضغط، قم بإجراء تحليل عبر الإنترنت لمعلمات وظيفة القلب ذات الاهتمام، وانتظر حتى يتم الحصول على وظيفة القلب الثابتة. أوقف الجهاز التنفسي عند موضع انتهاء الصلاحية، وسجل معلمات خط الأساس. بعد 3 إلى 5 ثوان، استخدم ملقط لرفع الغرزة تحت الوريد السفلي للحصول على معلمات مستقلة قبل التحميل، ثم قم بتشغيل جهاز التنفس الصناعي.
انتظر 30 ثانية على الأقل للانسداد الثاني حتى تستقر معلمات الديناميكا الدموية. بعد الحصول على القياس في ظل ظروف القاعدية، جبل حقنة محملة isoproterenol على مضخة حقنة. انتظر دقيقتين على الأقل، حتى يتم ملاحظة وظيفة قلبية جديدة ثابتة الحالة.
قبل إيقاف الجهاز التنفسي في وضع انتهاء الصلاحية، وتسجيل معلمات خط الأساس. بعد 3 إلى 5 ثوان، ارفع الغرزة أسفل الوريد السفلي للحصول على معلمات مستقلة محملة مسبقا، وانتظر 30 ثانية على الأقل للانسداد الثاني. ثم قم بتركيب المحاقن التي تحتوي على تركيز الإسوبروتيرينول التالي، وكرر خط الأساس، وقبل تحميل تسجيلات المعلمات المستقلة.
لإجراء معايرة التوصيل المتوازي، بعد قياس الاستجابة للجرعة من إيسوبروترينول الأخير، قم بتوصيل حقنة محملة بمحلول كلوريد الصوديوم بنسبة 15٪ بعتلة الفخذ، وغرس بعناية 5 ميكرولترات من المحلول الهايبرتوني حتى تتحول حلقة حجم الضغط قليلا إلى اليمين. انتظر حتى تعود الحلقات إلى الحالة الثابتة ، قبل إيقاف الجهاز التنفسي عند انتهاء الصلاحية ، وحقن 10 ميكرولتر بولوس على الفور من كلوريد الصوديوم بنسبة 15٪. ثم تحقق ما إذا كانت حلقة حجم الضغط قد توسعت إلى حد كبير ، وتحولت إلى اليمين.
لإجراء نسبة التوصيل إلى الحجم، انتظر 5 دقائق حتى يتم تخفيف البولوس المالح عالي الطنين تماما قبل إزالة القسطرة، واستخدام حقنة 1 ملليلتر، مجهزة بقنية قياس 21 لإزالة ما لا يقل عن 600 ميكرولتر من الدم من البطين الأيسر للقلب النابض. ثم نقل الدم إلى cuvette المعايرة قبل الدفء في حمام الماء 37 درجة مئوية، مع اسطوانات من حجم معروف، ووضع القسطرة حجم الضغط مركزيا في كل اسطوانة للسماح بتسجيل التوصيل. باستخدام طريقة قياس ضغط الصدر المفتوحة هذه ، إذا تم وضع القسطرة بشكل صحيح داخل البطين ، سيتم تمثيل دورة قلبية كاملة من خلال حلقة ضغط بحجم مستطيل الشكل.
كما هو موضح، يبدأ السستول بمرحلة من الانكماش متساوي التماثل، يتم خلالها إغلاق كل من صمامات القلب. عندما يتجاوز ضغط البطين الضغط الأبهري، يفتح الصمام الأبهري، ويتم ضخ الدم في الشريان الأورطي أثناء مرحلة القذف. في وقت لاحق ، عندما يتجاوز الضغط الأبهري الضغط البطيني ، يغلق الصمام الأبهري ، ويبدأ الدياستول.
أثناء الاسترخاء التماثلي ، ينخفض ضغط البطين ، حتى يتجاوز الضغط الأذيني الضغط البطيني ، ويفتح الصمام التاجي. التعبئة الانبساطي السلبية ، التي تتميز بعلاقة حجم الضغط الانبساطي النهائي ، تحدث بعد ذلك حتى تبدأ الدورة القلبية التالية. نظرا لأنها قادرة على تحديد وظيفة القلب بغض النظر عن التحميل المسبق ، يمكن أن يوفر تحليل حجم الضغط نظرة مفصلة على وظيفة القلب ، في انقباض القلب.
على سبيل المثال، في هذا التحليل تسبب الايسوبروترينول تأثير كبير على كل وظيفة القلب المقاسة، والمعلمة انكماش القلب. وعلى النقيض من ذلك، لوحظ انخفاض في المعلمات الانبساطية استجابة لزيادة تركيزات الايسوبروتيرينول. وضع القسطرة الدقيق داخل البطين الأيسر، أمر بالغ الأهمية للحصول على حلقات قابلة للاستنساخ دون القطع الأثرية.
لتحسين وضع القسطرة، نفضل نهج الصدر المفتوح. بعد قياسات الحلقة الكهروضوئية ، يمكن تحديد التحلل التماثلي ، ويمكن عزل الأنسجة ، لتحديد التغيرات الجزيئية والهسولوجية ، الناجمة عن العلاجات ، أو التعديلات الوراثية. تمهد هذه التقنية الطريق لتحليل احتياطي بيتا الأدرينالين في نماذج الماوس في ظل الظروف العادية والمرضية ويمكن استخدامها كنموذج لاختبار المحفزات الأخرى.
