Bu video, metabolik karaciğer çalışmalarını yeterli titizlik ve tekrarlanabilirlikle gerçekleştirmek için geliştirilen ve vivo perfüzyon çalışmaları için hepatik rezeksiyon yapmak için bir rehber görevi görebilecek aerodinamik bir prosedürü göstermektedir. Bu teknik, hastalık modellerinde ciro metabolitlerinde işlevi tespit etmek için gerçek zamanlı metabolizmaya en iyi şekilde uygulanır. Perfüzyon, karaciğer için mevcut olan besin maddelerinin ve hormonların hassas kontrolünü sağlar.
Teknik tedaviye yönelik olmamasına rağmen, karaciğer perfüzyonları diyabet, NAFLD ve NASH gibi hastalıkların etiyolojisini ve hepatik metabolizma üzerindeki etkisini anlamada etkili olabilir. Yeni farmasötikler geliştikçe, hepatik merkezi enerji metabolizmasını değerlendirmek için yöntemler gerekli hale gelir. Bu yöntem, kanserler de dahil olmak üzere çeşitli hastalıkların modelleriyle ve hastalığın ilerlemesinin birkaç farklı aşamasında kullanılabilir.
Başlangıç olarak, anestezi indüksiyonundan sonra farenin burnunu bir burun konisine yerleştirin ve pençelerini bantlayın. Lidokaini, anterior iliak krest bölgesinde bilateral olarak deri altı enjeksiyonu yoluyla uygulayın. Tüm ağrı reflekslerinin yokluğunu doğrulamak için bir ayak parmağı sıkışma testi yapın.
Üç santimetre genişliğinde bir kesi yaparak iç organları açığa çıkarmak için çöliyotomi yapın. Ksifoid işlemi sıkıştırarak çekişi çeken bir hemostat kullanarak insizyonu genişletin. Portal damarı kaplayan ince ve kalın bağırsakları temizlemek için pamuk uçlu bir aplikatör kullanın.
Portal venin kemerinin altına karaciğere proksimal bir ipek dikiş yerleştirin. İkinci ipek sütürü, inferior mezenterik ven distalinin proksimal veya distalini 2-0 sütür kullanarak karaciğerden yerleştirin. Dikişler yerine oturduğunda, portal damarı 22 gauge kateter ile kanüle edin ve eğimi yukarı doğru tutun.
Portal damarına en fazla 15 derecelik bir açıyla girin. Kateter tapperinden geçen ilk dikişi bağlayın. Portal ven kanüle edildikten sonra, kateteri portal venin dalından iki ila üç milimetre distal olarak ipek dikişle sabitleyin.
Kateterin alt kısmını ikinci dikişle sabitleyin. Kateteri portal venin distal kısmına ve çevresindeki dokuya sabitlemek için dikişle bir düğüm bağlayın. Kateter sabitlendikten sonra, kan ve hava kabarcıklarını temizlemek için kateterin içine 38.1 milimetre uzunluğunda 27 gauge iğneli bir mililitrelik bir şırınga yerleştirin.
Perfüzyon kolonunu katetere bağlamak için sabit bir durdurma horozuna sahip bir milimetre iç çap ve beş milimetre dış çaplı silikon tüp kullanın, böylece tamponun karaciğere akmasına izin vererek perfüzyonun başlangıcını işaretleyin. Bir zamanlayıcıyı başlattıktan sonra, inferior vena kavaya makas kullanarak kesi yaparak artan vasküler basıncı hafifletin. Karaciğer rengindeki homojen değişimi pembe veya kırmızıdan soluk sarıya doğru gözlemleyerek karaciğerden perfüzyon akışını onaylayın.
Akış onaylandıktan sonra, mideyi, ince bağırsağı, kalın bağırsağı ve sağ böbreği çevreleyen dokudan çıkarın. Cerrahi asistanın yardımıyla, cerrah karaciğeri rezeke etmek için parietal periton ve torasik dokuyu keserken karaciğeri karın ve göğüs boşluğu etrafında manevra yapın. Karaciğeri yukarı doğru kaldırın ve karaciğeri makasla yerinde tutan kalan bağ dokularını kesin.
Görüş kolaylığı için karaciğeri yavaşça manipüle edin. Akış hızı ve oksijen tüketimi ölçümleri, karaciğerin sağlığını ve işlevini izlemek için hayati öneme sahiptir. Beslenen ve oruç tutan karaciğerler arasındaki oksijen tüketiminde genellikle hafif bir fark vardır, bu da aç karaciğerde glukogenez tarafından dayatılan artan enerji taleplerine bağlanabilir.
En önemli adımlar arasında kateterin 15 derecelik bir açıyla yerleştirilmesi, kateter ucunun görselleştirilmesi, dikişin bağlanırken bilek ve omuzların yuvarlanması ve portal vende burulmanın önlenmesi sayılabilir. Eksize edilen doku, perfüzyondan sonra herhangi bir sayıda biyokimyasal veya analitik yaklaşımla incelenebilir. Gerçek zamanlı MRG ve spektroskopi ile birlikte Ex vivo perfüzyonlar, metabolik akıların gerçek zamanlı olarak ölçülmesini sağlar.
Doğal olarak, bu, hastalıklara yanıt olarak bir kontrol durumundan akının bozulmasına kadar uzanır.
